有机氯农药残留量的检测102页PPT

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3 添加回收率
空白样品中加入一定浓度农药（C1）后， 通过方法处理，样品中农药测定值 （C2 ）与
加入值的百分比（F）。 F=C2/C1*100%
添加回收率旨在衡量测定值与真值之间 的误差是制定农残分析方法准确度和可行性的
指标。
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一般以最大残留限量值水平高一个数量级、 低一个数量级和同一个数量级三个浓度水平进行 添加，或者在1、5和10倍方法检出限水平添加， 测定添加回收率；添加回收率至少重复三次。
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2 固相萃取法(SPE)
分析目的物在键合硅吸附剂与溶剂中 进行分配，而与干扰物分离。
适用范围广，各种不同结构类型的 SPE商品柱适用于各种结构类型的农药分析。
已成为农残分析主要前处理手段，代 替LLE。发达国家广泛应用，我国正在推广
（如NY/T761-2008）。
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液液萃取法 （LLE）
固相萃取法(SPE)
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（2）方法检出限 有样品基质存在，在与样品测定完全相同的 方法和仪器下，某种方法能够检出分析目标物的
最小量或最低浓度。
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2 最大残留限量 在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓 度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中 农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。
在农残检测中，以最大残留限量值判断是否超 标（GB/T2763-2012）。
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● GB/T5009.20 有机磷农药 50g样，加50ml水和100ml丙酮，匀浆1-
2min 。抽滤。 ● GB/T5009.103 甲胺磷，乙酰甲胺磷
10g样加无水硫酸钠研磨（脱水），加活 性炭0.2-0.4g（脱色），用80ml丙酮振荡30min。
抽滤。 ● GB/T5009.145 氨基甲酸酯农药 5g样，加水（样品含水量），加10ml丙酮，

• 三、结果计算 结果以酶被抑制的程度（抑制率）表
示。 抑制率（%）=[ （DA0-DAt）/ DA0]×100 1 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50% 时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲 酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性 结果的样品需要重复检验2次以上。 2 对阳性结果的样品，可用其它方法进 一步确定具体农药品种和含量。
土，剪成 1cm左右见方碎片，取 5g 放入 带盖瓶中，加入 10mL 纯净水，震摇 50 次，静置 2min 以上。 • 2.取一片农药残留检测卡，用白色药片沾 取提取液，放置 10min 以上进行预反应， 预反应后的药片表面必须保持湿润。 • 3.将农药残留检测卡对折，用手捏 3min， 使红色药片与白色药片叠合发生反应。 • 4.每批农药残留检测应设一个纯净水的空 白对照卡。
农药残留的速测技术
• 农药残留是指农药使用后残存于环境、生 物体和食品中的农药母体衍生物、代谢物、 降解物和杂质的总称。造成蔬菜农药残留 量超标的主要是一些国家禁止在蔬菜生产 中使用的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药， 如甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、对硫磷、 甲基对硫磷等。食用含有大量高毒、剧毒 农药残留引起的食物会导致人、畜急性中 毒事故。长期食用农药残留超标的农副产 品，虽然不会导致急性中毒，但可能引起 人和动物的慢性中毒，导致疾病的发生， 诱发癌症，甚至影响到下一代。
• 农残检测必要性
• 随着农业产业化的发展，农产品的生产越 来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物 质。我国农药在粮食、蔬菜、水果、茶叶 上的用量居高不下，而这些物质的不合理 使用必将导致农产品中的农药残留超标， 影响消费者食用安全，严重时会造成消费 者致病、发育不正常，甚至直接导致中毒 死亡。农药残留超标也会影响农产品的贸 易。

• ADI值越高，说明该化学物质的毒性越低。
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系本人改正。
×：为不得检出
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×：为不得检出
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二、农药的分类
– 在世界贸易一体化的今天，农药最高残留限量 也成为各贸易国之间重要的技术壁垒。
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– 最大残留限量是按各地居民膳食习惯，每日食用
食品的种类和数量计算的，其量不超过该农药的日 许量。
• 计算公式：MRL=[ADI×平均体重(kg)÷(人的每 日食物总量(kg) ×食物系数(%)]
– 每日允许摄入量(acceptable daily intake,ADI)是
指人或动物每日摄入某种化学物质（食品添加剂、 农药等），对健康无任何已知不良效应的剂量。
• 以相当人或动物公斤体重的毫克数表示,单位一般是 mg/Kg,或个g/Kg。
• 例如某化学物质对人体的ADI值为5mg/Kg，按体重 50Kg计算，则每日摄入该化学物质在250mg以内是安 全的。
– 常见有机氯类农药：666、DDT、狄氏剂、艾 氏剂、毒杀芬、氯丹、七氯、五氯酚钠等
• 具有高度的物理、化学、生物学稳定性，在 自然界不易分解，高残留。脂溶性强。
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– 常见有机磷农药：对硫磷（1605.）、内吸磷 （1509）、甲拌磷（3911）、马拉硫磷 （4049）、乐果、敌百虫、敌敌畏 （DDVP）、杀螟松
• 除少数品种如呋喃丹等毒性较高外，大多数属中、低毒 性。

总结词
快速、简便
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ详细描述
酶联免疫法利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶催化底物显色反应对待测组 分进行定量分析。该方法具有快速、简便、低成本的特点。
生物测定法
总结词：高选择性
详细描述：生物测定法利用生物体或生物体的某些组成部分 对待测组分的反应进行测定，具有高选择性的特点。该方法 适用于测定低浓度农药残留，但需要较长的实验时间。
《农药残留测定方法》PPT 课件
contents
目录
• 农药残留概述 • 农药残留测定方法 • 农药残留测定标准 • 农药残留测定技术的发展趋势 • 实际应用案例
01 农药残留概述
农药残留定义
农药残留
指农药使用后残存于生物体、农 副产品和环境中的微量农药原体 、有毒代谢物、降解物和杂质的
总称。
03 农药残留测定标 准
国际标准
世界卫生组织（WHO）农药残留限量标准
该标准由WHO制定，旨在确保食品中农药残留量不会对人类健康造成危害。该标准对 各种农药在不同食品中的限量进行了规定。
联合国粮食及农业组织（FAO）农药残留限量标准
该标准由FAO制定，旨在确保食品中农药残留量不会对人类健康造成危害。该标准对各 种农药在不同食品中的限量进行了规定。
问题，保障公众健康。
多残留检测技术
要点一
总结词
多残留检测技术是农药残留测定的另一重要发展方向，能 够同时检测多种农药残留物。
要点二
详细描述
由于农业生产中使用的农药种类繁多，传统的单残留检测 方法已经无法满足需求。多残留检测技术能够同时检测多 种农药残留物，大大提高了检测效率，并且能够更全面地 了解农产品中农药残留的情况。这种技术的发展对于保障 食品安全和公众健康具有重要意义。

3、临时可接受日摄入量（TADI）
指可以获得足够的以致额外的生化、毒性 以及其它所需数据，而确定的有限时期内可接 受的日摄入量。
TADI ＞ ADI
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4、最大残留限制(MRL)
指由食品营养标准委员会推荐的，食品或 动物饲料中允许的农药残留物的最大浓度（毫 克/公斤）。是根据在毒理学上认为可以接受 的食品农药残留量制定的。
本环保、高效、经济 ② 新技术（样品处理技术） ③ 检测上采用多残留分析方法 ④ 酶联免疫技术 ⑤ 分析方法的标准化 ⑥ 质量和健康意识
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复习思考题
1、什么是农药残留和残留毒性？农药残留有哪 些来源？
2、农药残留分析的任务和目的是什么？ 3、选择农药残留方法时要特别考虑哪些问题？ 4、农药残留分析的复杂性体现在哪些方面？
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一、农药残留和残留毒性
2、农药残留的定义 农药→生物体 、农产品、环境→
农药亲体→毒理学意义→杂质、代谢转 化产物、反应物→衍生物的总称。
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一、农药残留和残留毒性
3、农药残留的来源
水
空气
土壤
环境因子
人为
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一、农药残留和残留毒性
4、农药残留毒性 因摄入或长时间重复暴露农药残留 而对人、畜以及有益生物产生急性或 慢性中毒。
一、农药残留和残 留毒性
1、农药残留的定义 2、农药残留的来源 3、农药残留毒性
二、农药残留分析
1、分析特点 2、分析方法和程序 3、分析方法的选择
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一、农药残留和残留毒性
1、农药定义
广义：农业上使用的化学品 狭义：用于防治农、林有害生物的化学 药剂，以及为改善其理化性状而用的辅助剂。

，对于叶菜（如韭菜、韭黄、大葱等）样品，将 叶片部分切成2cm左右长的小段；对于辣椒、生 姜等样品，将可食部分切成1cm左右见方碎片， 对于大蒜，将蒜扒皮后整瓣提取。
三、方法介绍
（2）样品提取
用电子台秤称取2.0g样品于提取瓶中，用移液器加 入10.0ml农残试剂一，用搅拌棒将样品压入页面下。然 后将提取瓶放入超声提取仪中提取3min（在超声提取仪 中预先加入500ml蒸馏水）。用移液器移取1.00ml样品 提取液于比色瓶中，至于多功能固定架上备用。
技术成熟，灵敏度高，FAO推荐方法，美国 USAD、EPA、AOAC制定了评定标准，但经 认证的有限，经EPA认证的免疫试剂盒约有4 个厂家的26种试剂盒；EPA方法4010、EPA 方法 4015 EPA方法3030等
处于研究阶段
电导型生物传感器、光寻址电位型传感器、 安培型传感器，处于研究和应用阶段，并未 广泛推广使用
一、国内农残快速检测的现状及意义
（二）快速检测实施的必要性
农残超标的主要原因： 一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行
生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。 二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药
超量所致。 由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基
对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂 产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有 机磷农药引起的。
匀，放入第一通道中，计时3分钟（手动）按向上键。
★ 加入试剂（四）50µl， 倒计时3分钟（自动） ， 仪器显示△A值，空白测量完毕。
★ 要求△A大于0.100。若小于则增加（二）用量或者增加显 色时间。
三、方法介绍
3、样品处理 ★ 样品提取瓶+2.0克待测样品+10.0ml（一）。 ★ 超声提取3分钟，取出。

3min后记录空白样的△AC值。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
样品样的操作步骤及要求：
取样步骤及要求： ①称取菜样1g〔要求一种菜样要从不同植株取样，从叶片
部位取（果实蔬菜用刀顺皮削下），剪成1cm左右见方碎 片，混匀后用镊子称取1g（记录），放入烧杯或提取瓶中 （编号）〕。 ②取5ml缓冲溶液加入编好号的样品瓶中（记录）。 ③用手或借助仪器振荡1-2min（计时）。 ④振荡完成后静置3-5min（计时）。
上海博纳CL-BIII八通道残留农药测定仪 等 特点： 精确度高、稳定性强 易于操作
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
三、农残速测仪介绍
（一）原理
农药对胆碱酯酶（检测试剂）的活性有抑制作用，这样 就抑制了胆碱酯酶催化显色剂水解发生显色反应，通过 对显色反应的测定来实现农药残留量的测量。由此可判 定果品蔬菜样品中的残留农药的含量。 正常情况：
放入仪器中，按样品检测键，3min后记录实验结果。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
3、结果的判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，样品为阳
2、实验操作
空白样操作步骤及要求： ①取2.5ml缓冲溶液加入试管中（记录）。 ②分别加入0.1ml酶液（记录），0.1ml显色剂（记录）

⑨六六六、滴滴涕标准使用液:将上述标准储备液以己烷稀释至 适宜浓度，一般为0.01ulg/mL。
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3)操作步骤
(1)提取 ①称取具有代表性的样品(适用于生的及烹调加工过的 蔬菜、水果或谷类、豆类、肉类、蛋类)约2009，加适 量水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀浆2.00~5.00g， 于50mL具塞三角瓶中，加10~I5mL丙酮，在振荡器上 振荡30min，过滤于100mL分液漏斗中，残渣用丙酮洗 涤4次，每次4mL，用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并 滤液30~40mL，加石油醚20mL，摇动数次，放气。振 摇lmin，加20mL硫酸钠溶液 (20g/L)，振摇lmin，静 置分层，弃去下层水溶液。用滤纸擦千分液漏斗颈内外 的水，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约10g无水硫 酸钠的漏斗，滤入50mL三角瓶中。再以少量石油醚分 3次洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并人滤液中， 将石油醚浓缩，移人l0mL具塞试管中，定容至5.0mL 或l0.0mL。
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7·1·2 定量检验
１、气相色谱法 (GB/T5009·19一1996) 1)原理 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相 色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器 对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用 这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。 不同异构体和代谢物可同时分别测定。 出峰顺序:α--666、β666、μ--666、δ-666、 p.p'-DDE、α.p'-DDT、ρ.p'-DDD、ρ.ρ΄-DDT。
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②称取具有代表性的乳样品2.00g，于l0mL具塞试管中， 加4mL丙酮，振摇lmin，加4mL石油醚,振摇lmin。静 置分层。将上层石油醚溶液移人另一25mL具塞试管中， 再加lmL石油醚于原试管中，不摇。取出上层石油醚合 并于25mL试管中，重复2次。再加与石油醚等体积的 硫酸钠溶液 (20g/L)，摇混，分层。将上层石油醚溶液 取出经无水硫酸钠滤人l0mL具塞试管中，再加lmL石油 醚于原25mL试管中，不摇。取出上层液合并于l0mL试 管中，重复两次。提取液定容至4.0mL。

色谱柱程序升温： 130 ℃（1 min） 8 ℃/min 220 ℃（1 min〕
5 ℃/min 260 ℃（6 min）
标准曲线的绘制
准确称取α-硫丹，β-硫丹标准品配制成1000 μg/mL 正己烷贮备液，分别吸取一定量的贮备液按1:1混合， 用正己烷稀释定容至0.5，1，5，10，20，50，80 μg/L标准系列，以上述色谱条件进样测定，制得标 准曲线。
160℃；再以5℃/min 升至270℃，保持 20min。 不分流进样：1μL。
计算残留量
❖ 样品采用外标法定量,以所得样品的峰高换算 出对应于标准曲线的物质的质量。然后代入 下式计算残留量:
❖ 样品残留量(mg/kg) = 样品峰高对应的物质 的质量(ng)×样品定容体积(mg)
样品加标回收实验
❖ 在气相色谱分析确定待测样品中的硫丹农残 含量均低于1.0 μg/kg 后，样品要做加标回收 实验。在以上空白样品中添加几个不同浓度 的硫丹标样，室温静置过夜。按照上述方法 处理，测定，计算回收率。
❖ 注：弗罗里硅土和中性氧化铝在使用前需在600 ℃下高 温活化4 h。
气相色谱测定
➢岛津GC－2019气相色谱仪，日本岛津公司 ➢DB-5弹性石英毛细管柱，美国安捷伦公司 ➢（30m×0.25mm×0.25um） ➢电子捕获检测器
测定条件
进样口温度：280 ℃，检测器温度：300 ℃， 载气：99.999%氮气，柱流速：1.6 mL/min。 分流进样，分流比1:10，进样量1.0 μL。
(3) 净化
❖ 固相萃取法：将C18反相萃取柱安装在固相萃取真 空抽滤装置上。用3 mL甲醇预淋洗，取1 mL样液 用水稀释至10 mL上样，淋洗液为4 mL的40%甲醇， 最后用4 mL正己烷洗脱，收集洗脱液，蒸干后用正 己烷定容至1 mL。

培训与交流
加强培训和交流，提高分 析人员的技能和素质，确 保分析结果的准确性和可 靠性。
质量控制
加强质量控制，建立有效 的质控体系，确保分析数 据的准确性和可靠性。
谢谢
THANKS
高效液相色谱法
适用于检测除草剂、杀菌剂等 农药残留。
免疫分析法
利用抗体与抗原之间的特异性 结合反应来检测农药残留。
生物传感器法
利用生物传感器对农药残留进 行快速检测。
农药残留标准与限量
国际食品法典委员会（CAC）
欧盟
制定全球统一的食品中农药残留限量标准 。
对食品中农药残留实施严格限量标准。
美国
中国
数据整理
对实验数据进行整理，包 括计算农药残留量、绘制 图表等。
结果分析
根据实验数据，分析农药 残留量是否符合标准要求 ，评估农药对环境和人体 的影响。
结论总结
总结实验结果，提出相应 的建议和措施，为农药残 留控制提供科学依据。
04 农药残留标准与法规
CHAPTER
国际农药残留标准
国际食品法典委员会（CAC）
我国农药残留标准
《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB …
我国政府制定的一项强制性标准，规定了365种农药在350种食品中的最大残留限量。
《农药登记管理条例》
规定了在我国境内生产、经营、使用的农药必须经过登记管理，未经登记管理的农药不 得生产、经营、使用。
《农药合理使用准则》
规定了农药在农作物上的使用方法、使用量和使用次数，确保农药的安全使用。
挑战
随着农药使用量的增加和农药种 类多样化，如何实现快速、准确 、高通量的农药残留分析仍是一 个挑战。
机遇

2.

3
土壤污染
农药被土壤吸收后，随农作物从土中吸收养分而被农作物吸收运转。农药 对土壤的污染与农药的施用历史密切相关。有机氯农药自1983年禁用后，土 壤中六六六、DDT残留量在大部分地区有所下降，一般下降了一个数量级。福 建省土壤中六六六残留量最高为0．896mg／kg，DDT为1.040mg／kg，北京土 壤六六六最高为l.007mg／kg，河南最高为1. 498mg／kg。据湖南省植物保护 研究所1997年检测，湘北的常德、临漕，湘中的湘潭、湘乡，湘西的怀化和 湘南的郴州等稻区土样六六六检出率为100％，残留量最高的为采自临澧县新 安镇的土样，其最高0．07053mg／kg，最低值为O 734×10-3mg／kg。 有机氯农药被取代以后．从全国的施用情况看，来造成大面积的土壤污 染。但在部分地区，因农药施用量大，也出现了土壤严重受农药污染的情况。 1989年江苏武进县的土壤监测结果，除草醚最高为5.98×10-6；绿麦隆最高为 0.47×10-6；甲胺磷检出率为100％，最高达0．64×10-6。湖南4大稻区的湖南 4大稻区的土样检测结果表明L8J，甲胺磷的检出率为75％，最高为郴州土样 的O086×10-6，最低为临澧县新安镇土样的0．019×10-6。
农药残留的检测
【摘要】首先介绍农残的现状和检测标准, 谈 了各种检测方法，最后介绍检测过程中应注意
的内容。
【关键词】现况；检测内容；方法；注意事项
一
ห้องสมุดไป่ตู้
农药残留的现况
近十多年来，我国平均每年约lO万人发生 农药中毒事故，1993年的统计表明，我国每年因农 药造成的食物中毒率居化学性食物中毒之首。我国 出口的食品、农副产品中曾出现因农药残留超标而 导致进口方退货、索赔、自动扣留甚至销毁的现象， 如1987年出口德国的蜂蜜，德方从中检出杀虫脒， 要求巨额赔偿；广东、深圳等地供港蔬菜发生中毒 事件，造成极坏影响等等。农药残留污染问题是关 系人民生命安全、健康的切身问题，并影响到我国 对外农业贸易的发展，因此它越来越受到社会的关 注和科学工作者的高度重视。这里结合作者的研究 结果，对我国加WTO(世界贸易组织)后农产品农药。

中药制剂的杂质检查技术
——有机氯类农药残留量测定 -色谱法
1 基础知识 2 必备知识 3 拓展知识
目录
基础知识
农药来源：中药材栽培过程喷洒的农药（杀虫剂、杀螨剂、杀 鼠剂及除草剂等），生长环境（土壤、水源、空气等）的污染；采 收、加工、保存和运输过程中受污染。
农药对人体危害极大，对中药材及其制剂中的农药残留进行控 制是有必要的。
至5ml,小心加入硫酸1ml ,振摇1分钟，离心（3000转/分钟）10
必备知识
测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对 照品溶液各1μl,注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中9 种有机氯农药残留量。
二、22种有机氯类农药残留量测定法
必备知识
色谱条件与系统适用性试验
分析柱：以50%苯基50%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英 毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm),验证柱：以100%二甲基聚硅氧 烷为固定液的弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm)，63NiECD电子捕获检测器。进样口温度240℃,检测器温度300℃,不分流 进样，流速为恒压模式（初始流速为1.3ml/min )。程序升温：初 始70℃，保持1分钟，每分钟10℃升至180℃,保持5分钟，再以每分 钟5℃升至220℃,最后以每分钟100℃升至280℃,保持8分钟。理论 板数按α-BHC计算应不低于1×106,两个相邻色谱峰的分离度应大 于1.5。
25mm,内装BIO-Beads S-X3填料；以环己烷-乙酸乙酯（1:1)混合溶液 为流动相；流速为每分钟5.0ml)净化，收集18~30分钟的洗脱液，于
必备知识
测定法 分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1μl， 注入气相色谱仪，按外标标准曲线法计算供试品中22种有机 氯农药残留量。