ELISA试验结果抗溶血干扰的临床应用研究
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ELISA检测的干扰因素与方法ELISA应用最广,但这种固相测定技术非完美无缺,把握实验过程中每一个可能出现差错的关键性问题,采取相应的举措,才有可能使实验性误(漏)诊减少到最低限度。
1. 表面效应首先必须明确指出的是,:“固相”ELISA与传统的“液相”血清学试验的最大.最本质的区别是有一个预先固相抗原或抗体到载体表面的步骤,以及抗原与抗体结合反应由液态环境移到了固相载体表面进行。
蛋白质分子在吸附过程中,为了克服与固相载体之间的排斥力,需要重新分布其表面的功能性基因,使疏水性基因充分暴露,然后,局部接触区域的偶极分子脱氢,再通过范德瓦尔斯力吸引而固相到载体表面。
表面效应可直接影响抗原,抗体的构象和功能。
此外,表面效应亦影响抗原和抗体结合反应的动力学过程。
(1)固相导致抗原的变化为了测定抗体水平,需预先将抗原固相(包被)到极性和水性的聚苯乙烯(PS)或聚氯乙烯(PVC)酶标板上。
用直接物理吸附方法固相蛋白抗原及DNA等,导致的变化是多方面的,可引起分子构象和抗原性发生改变。
酶活性测定时可消失。
牛血清白蛋白固相之后,其抗原价可由5价降为1价。
此外,发现被动吸附方法固相铁蛋白,呈团串状,不均一的随机分布,这种影响质控的情况具有普遍性。
最后,大多数小分子半抗原不易直接吸附到载体表面。
解决这一难题的方法,一般是采用在小分子抗原上,先偶联上葡聚糖,明胶等手臂后再进行固相包被。
对于有多重表达抗原决定簇的大分子抗原,用抗体桥式包被法可避免表面效应的影响。
将蛋白抗原吸附于胶体AI(OH)3后再固相也可以避免蛋白变性。
用Y射线辐照(400GY)PS板,不但可增加蛋白抗原吸附能力,而且还有降低抗体测定本底的作用。
(2)固相对抗体的影响直接吸附固相抗体(Igs)分子,除了呈团串状,不均分布和易解吸等一般不利因素之外,Igs分子摊开在载体表面,不但构象发生改变,而且影响抗体的活性,如IgG的结合价减少,可由2价变为1价,甚至完全失活。
标本溶血对ELISA检验HBsAg结果的影响及防范措施【摘要】目的:研究标本溶血对elisa检验hbsag结果的影响及防范措施.方法:通过临床对标本溶血的研究,了解溶血产生的原因、溶血对hbsag检测的影响、溶血影响elisa检测hbsag的机理以及溶血标本的防范措施。
结果:标本溶血对我们检验工作确实存在一定的影响。
【关键词】溶血elisa;hbsag【中图分类号】r796【文献标识码】d【文章编号】1005-0515(2010)010-0028-01hbsag是各级医院的常规检查项目和健康体检项目,是诊断乙肝的主要指标.随着医疗技术的不断发展更新,elisa因其方法简便、灵敏度高、特异性强、无污染等,而被各医疗机构广泛采用.溶血是临床检验中最常见的干扰影响因素,因为溶血标本中存在各种非特异性物质,使结果出现偏差,所以血液标本一般都要求空腹采集且不能溶血.如今临床疾病的诊断与治疗越来越依赖于检验数据的真实与准确性,因此有必要就标本溶血对elisa检测hbsag作进一步探讨。
1 临床研究与防范措施1.1 标本溶血的原因。
溶血的原因主要有体外溶血和体内溶血.体外溶血可由物理因素(如机械性破坏、冰冻)、化学因素(如血样接触表面活性剂)和代谢性因素(如遗传病引起的血细胞脆性增加)引起.体内溶血则可由物理因素(人工心脏瓣膜或大血管手术后)、生物因素(如恶性疟疾)和药物毒性反应等因素引起[1]。
在临床上常见的引起标本溶血的原因主要有[2]:由于病人严重脱水、低血容量休克等原因导致穿刺困难造成的溶血;由于抽血器具质量不合格如真空管负压不够或塑料试管质量较差导致的溶血;用干燥管采血为了尽快分离血清用竹签搅拌不当引起的溶血等。
1.2 溶血对hbsag检测的影响。
尽管各地医疗机构积极启动质控措施以减少标本检测前后造成的误差,但血液标本溶血还是不容忽视.据金建娟[3]等报道该院1年内共送检急诊生化标本532份,其中不合格标本81份,占15.2%;溶血标本21份,占不合格标本的25.93%。
标本溶血对ELISA法检测HBsAg结果的影响分析发布时间:2021-03-22T09:16:04.497Z 来源:《中国医学人文》2021年5期作者:黄鹤,第二作者:李方静,[导读] 探讨标本溶血对ELISA法检测HBsAg结果的影响黄鹤,第二作者:李方静,许昌市中心血站河南许昌 61000摘要:目的探讨标本溶血对ELISA法检测HBsAg结果的影响。
方法选择使用HBsAg呈现阳性与HBsAg呈现阴性的标本各60例作为研究对象,通过冰冻的方式令120例标本发生溶血。
对于溶血标本通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg,使用酶标仪对结果加以判定。
结果通过实验观察,HBsAg呈现阴性溶血标本检测HBsAg的假阳性率是30%,HBsAg呈现阳性溶血标本检测HBsAg的假阴性率是8.33%。
结论针对ELISA法对溶血标本进行HBsAg检测的过程中,比较容易出现假阴性或是假阳性。
关键词:标本溶血;ELISA;HBsAg此次研究选取HBsAg呈现阳性与HBsAg呈现阴性的标本各60例作为研究对象,探讨标本溶血对ELISA法检测HBsAg结果的影响,现作出如下报告。
1 资料和方法1.1 标本本次研究对象为2019年3月—2020年3月在我站进行无偿献血的献血者。
吸取HBsAg呈现阳性60例患者标本的3毫升全血,吸取HBsAg呈现阴性60例患者标本的3毫升全血,年龄在18-55岁范围内,平均年龄为(35.69±7.81)岁,其中包括58例男性,62例女性。
采用冰冻的方式令120例标本发生溶血。
1.2 方法1.2.1 溶血血清的制备把需要进行检测的血清放置在-40°的冰箱中,时间为20分钟,将其取出在室温下融化,采用3000转/分的转速进行离心处理,分离出1.5毫升血清留作备用。
1.2.2 ELISA法检测HBsAg严加遵照第四版《全国临床检验操作规程》、2019版《血站技术操作规程》实施相应检测。
标本溶血对临床检验结果的影响溶血影响的机制对临床检验的干扰和影响:①血细胞高浓度组分逸出,使血浆分析物浓度增加;②溶血能引起可见光谱的短波长段(300~500nm)的吸光度明显增高,不同类型的分析方法受Hb 吸光度的影响程度不同,以动力学法受Hb吸光度的影响最小,而经典的终点比色法则最易受Hb影响,导致样品分析物测定浓度高于实际浓度;③利用偶氮反应的原理测定血清总胆红素,Hb可竞争性地抑制胆红素与重氮试剂的偶氮反应,使测定结果低于实际值。
对部分项目的影响对肝功能分析的影响:⑴血清酶活性的测定:①ALT、AST等由于红细胞内外的浓度差异显著,轻微溶血就可以导致结果偏高;②红细胞膜上有ALP,明显溶血后会导致测定值升高;③由于红细胞内GGT含量很低,轻微溶血对其测定结果影响不大,但重度溶血则有影响;④溶血血清脂肪酶活性也轻微下降,但淀粉酶、谷氨酸脱氢酶等酶活性测定不受溶血影响;⑤LDH受溶血的影响最大,因红细胞和血小板中含有丰富的LDH,红细胞LDH含量是血浆的180倍;⑥红细胞中ACP是血浆的66倍,溶血时ACP明显升高;⑵血清蛋白的测定:总蛋白的测定通常选用双缩脲法,主波长540nm,而血红蛋白在555nm有吸收峰,故总蛋白测定结果偏高;⑶血清胆红素测定:目前以采用改良J-G法多见,而血红蛋白可破坏其反应产物偶氮胆红素,从而导致结果偏低。
对肾功能各指标测定的影响:①血、尿肌酐的测定:通常采用苦味酸法,此方法特异性较差,蛋白质、葡萄糖、维生素C等所谓假肌酐物质亦可与苦味酸发生反应,且这些物质大多存在于红细胞中,故溶血标本若用终点法测定,结果必然偏高;②血清尿素氮测定:无论是二乙酰-圬法还是脲酶法,溶血均可导致光谱蓝色部分吸光度值升高,对结果都有干扰,导致结果偏高;③尿酸测定采用磷钨酸还原法,因谷胱甘肽具有还原性,可与磷钨酸发生氧化还原反应导致结果偏高;采用尿酸氧化酶-过氧化物酶偶联法,谷胱甘肽可竞争过氧化氢而导致结果偏低。
不同程度溶血对ELISA双抗夹心法检测HBsAg实验结果影响的探讨发表时间:2013-08-28T14:48:00.530Z 来源:《医药前沿》2013年第22期供稿作者:谢开燕[导读] 总之ELISA法要求检验工作者严格执行操作规程,避免假阳性的结果出现。
谢开燕(成都市新都区妇幼保健院检验科 610500)【摘要】目的探讨标本溶血对酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗夹心法检测乙肝表面抗原(HBsAg)的影响。
方法使用ELISA双抗夹心法对10例阴性标本及系列阴性溶血标本进行HBsAg的检测。
结果阴性溶血标本的S/CO值普遍高于正常血浆标本,随着溶血程度的增加,S/CO值也随之增大,甚至出现假阳性的结果,溶血对正常阴性标本的检测结果有一定影响。
结论当标本溶血达到一定程度时,才能导致ELISA检测HBsAg的假阳性。
故临床检测中为了保证检测质量,应尽量避免溶血标本。
【关键词】溶血 ELISA HBsAg【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)22-0170-02 乙肝表面抗原(HBsAg)是乙型肝炎的血清学标志。
目前应用HBsAg的酶免疫测定(ELISA),因其方法简便,灵敏度高,特异性强,实验条件要求不高,被各级医疗机构广泛采用。
但是ELISA法影响因素众多,如(溶血,脂血,洗板检测等)。
各种原因的溶血,造成非特异性物质对实验影响,致使检验结果出现假阳性,故本试验进一步阐述不同程度的溶血对ELISA影响如何,现探讨如下: 1 材料和方法1.1 血浆标本:HBsAg,抗HCV,抗HIV,TP均为阴性的标本10份。
1.2 溶血标本的制备:分离上述10份标本的部分血浆于另一试管中,作好标记。
将剩余标本置—20度冰箱中冻溶,于37度水浴箱中融化,离心。
用全自动生化分析仪分别测定上清夜中游离血红蛋白(FHb)的含量.根据血红蛋白浓度的不同,并用其血清配制成Hb浓度为160g/l、80g/l、40g/l、20g/l、10g/l的一系列溶血标本备用。
溶血对临床检验结果的干扰王路长成都市第二人民医院四川成都610000临床检验项目作为现在医生诊疗的辅助指标,一个准确的检验结果对于临床来说非常重要。
但是影响检验结果的因素太多,所以我们必须要清楚各因素的具体影响,在这其中标本状态就是其中之一,标本状态包括:溶血、黄疸、脂血。
溶血是临床常见不合格标本,一般情况下建议重新采血,不过有时因门诊病人不在或病人不同意重新采血、不好采血时,只能进行“让步检测”。
了解溶血会对检验结果产生什么样的影响非常必要,为此,本文就溶血对生化检验结果的影响做一归纳总结,希望能为大家提供一些参考一、溶血会影响的项目有哪些(一)生化项目1、结果偏高的项目溶血对乳酸脱氢酶(LDH)的影响最大,可使测定值升高达100-180;其次是肌酸激酶,高达约69倍;再次,是血清磷和钾,前者为50倍,后者为20-30倍。
还有谷草转氨酶,10-30倍;肌酸激酶同工酶15倍;谷丙转氨酶,7倍。
其他项目如:总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、胆碱酯酶(CHE)、β羟丁酸(HBDH)及总胆红素(TBIL)有不同程度的升高。
2、结果偏低的项目溶血导致某些项目的测定结果偏高外,还可导致有的项目值偏低。
如γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、葡萄糖(GLU)和直接胆红素(DBIL)。
3、影响不大的项目据多篇文献报道显示,高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(B)白蛋白(Alb)和高密度脂蛋白(HDL)受溶血的影响不大。
(二)凝血项目溶血标本检测的凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT)要比不溶血的标本测定值分别升高约7.22%和26.26%;血浆纤维蛋白原(Fg)则降低约9.88%。
对于活化部分凝血活酶时间(APTT)来说,由于红细胞膜含有磷脂,溶血标本具有和血小板Ⅲ因子(磷脂)相似的凝血活性,能缩短溶血血浆标本的APTT值。
但是,促凝血检测结果受溶血因素影响,却不随溶血程度的增加而成简单的线性改变。
标本溶血对ELISA检测乙肝表面抗原的影响摘要】目的分析溶血标本采用ELISA法检测HBsAg时对结果的影响。
方法选取HbsAg阳性和HbsAg阴性标本各50例,采用冰冻法使这100例标本溶血。
溶血标本采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg,酶标仪判读结果。
结果 HbsAg阴性溶血标本检测HbsAg的假阳性率为30%,而HbsAg阳性溶血标本检测HbsAg的假阴性率为8%。
结论溶血标本采用ELISA法检测HbsAg时容易产生假阴性或假阳性。
【关键词】溶血 ELISA法 HBsAg临床检测中常遇到溶血标本,溶血是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素。
标本溶血对酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测乙肝表面抗原(HbsAg)的影响较大,各文献报道均有差异,本文就溶血对HbsAg检测的影响进行简要分析。
1 材料与方法1.1 试剂与仪器乙肝五项定性试剂为山东潍坊三维生物工程集团有限公司生产的诊断试剂盒,试剂按要求储存并在有效期内使用。
方法和结果的判读按试剂盒说明书操作,仪器为Biocell-ht2酶标仪和Biocell-Awl洗板机(澳地利生产),振荡器。
严格按操做规程使用仪器。
1.2 标本选取2011年10月来我院检测乙肝病毒血清标志物患者作为检测对象。
分别吸取HBsAg阳性(50例)和HBsAg阴性(50例)标本3ml全血,年龄为17~72岁,平均年龄(37±15)岁,男性48例,女性52例。
采用冰冻法使这100例标本溶血。
1.3 方法1.3.1 溶血血清的制备将待测全血标本放置冰箱(-40摄氏度)20分钟后,取出室温融化,再以3000r/min离心,分离血清1.5ml备用。
1.3.2 ELISA法检测HBsAg 严格按照第三版《全国临床检验操作规程》[1] 检测。
2 结果表1 100例溶血标本检测HBsAg结果3 讨论溶血可分为体外溶血和体内溶血,体外溶血多为物理因素(抽血时负压过大、水浴温度过高、冰冻、振荡等机械性破坏)、化学因素(血样接触表面活性剂)和代谢因素(如遗传病引起红细胞脆性增加)引起。
溶血对ELISA法检测HIV抗体的影响目的:探讨溶血对ELISA法检测HIV抗体的影响。
方法:采用回顾性分析的方法,收集健康体检人员非溶血标本200例,通过ELISA法检测其HIV抗体;将200例非溶血标本以物理方式使其全部溶血,测定其HIV抗体水平,比较标本溶血前后的检测结果及假阳性率。
结果:溶血标本OD值明显高于非溶血标本,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:熟练掌握HIV筛查实验室中的基本操作技能,除了每个环节都进行严格仔细的核查外,对操作环节有效的把握,尤其是操作过程中人为因素引起标本溶血的控制,尽量避免假阳性标本的出现,从而保证检测结果的真实可靠性,为临床HIV诊断及防控提供可靠的理论依据。
标签:溶血;ELISA;HIV抗体HIV抗体检测时发现HIV感染的重要检测方法,当疑似艾滋病HIV感染进行检测时,除了注意自身的防护外,还应注意标本的保存和处理。
日常ELISA测定HIV抗体试验试验中经常会遇到溶血标本,标本溶血后会释放出血红蛋白,血红蛋白中的亚铁血红素具有过氧化物酶样作用,可能造成试验的假阳性,从而影响HIV 抗体检测的结果[1],本研究探讨溶血对ELISA法检测HIV抗体的影响,现报告如下:1 资料与方法1.1 一般资料收集我院2006年1月-2009年1月健康体检人员非溶血标本200例,其中男性130例,女70例。
所有检测血标本均无脂血且乙肝、丙肝阴性,排除了其他影响ELISA试验结果假阳性的因素。
1.2 试剂与仪器酶联试剂(北京万泰生物药业有限公司,生产批号:I20030808);酶标仪340RT(上海科华);洗板机aW1型(美国)。
1.3 方法首先严格按照试剂盒使用说明书进行操作,试验设阳性对照2孔,阴性对照3孔,外部质量控制2孔,每份非溶血标本均做平行样;将同组每一个非溶血标本以物理震荡和反复冻融,使红细胞彻底破坏,从而造成不同程度的溶血,然后分离血清和血细胞以保证溶血程度的稳定防止进一步溶血,然后按照相同操作测定溶血标本的HIV抗体,比较标本溶血前后测定的OD值并确定溶血标本的假阳性率。
血球与溶血因素对ELISA检测的干扰与洗板的消除作用摘要】目的探讨血清样品混杂血球或溶血对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的干扰影响及消除措施。
方法使用两种试剂盒设置不同的洗板程序,以HBsAg 阴性血清作稀释模拟制备的含不同浓度血球的溶血与不溶血标本做实验。
结果上海某试剂盒在RBC含量0.36×1012/L~7.22×1012/L(无溶血)系列检样中洗板6次(试盒设置)者所测8个检样全部出现假阳性,吸光值A在0.214~3.288间;增加洗板至12次则假阳性全部消除。
北京某试剂盒洗板5次(试盒设置)在RBC含量0.37×1012/L~7.34×1012/L(无溶血)、HGB含量19g/L~232g/L(溶血)两系列检样中未出现阳性;当洗板10次时,含血球无溶血标本洗10次A值明显低于洗5次者(p<0.01)。
结论血球或溶血标本对ELISA检测HBsAg有干扰并可能导致假阳性,适当增加洗板次数可消除干扰影响。
【关键词】 ELISA一步法 HBsAg检测血球因素溶血因素 ELISA干扰与消除ELISA一步法检测乙肝病毒(HBV)标志物检测具灵敏度高,特异性强等优点而被广泛应用。
但在质量监督中、尤其在一些基层实验室发现,由于血球或溶血因素对检测的干扰影响导致出现假阳性并不少见。
对其影响及消除我们作了实验研究并予实践,报告如下。
1 材料与方法1.1 实验研究标本来源与质监检查本单位健康体检(静脉血)检测后剩余标本,实验室日常检测工作中质量监督检查。
1.2 实验标本制备试验前取已知HBsAg阴性标本15份小心收集其血清于一试管混合摇匀为原倍血清;收集血球(无菌剔除纤维蛋白原,无凝集)轻摇匀,经普通离心1500转6 min,吸弃上清液剩下为原倍血球。
采取逐级稀释法,以原倍血清配制原倍血球成血球含量为80%、60%、50%、40%、20%、10%、5% 7管不同浓度的血清血球混合物,并与原倍血球管于日本光电MEK-6318K血球仪测红血球(RBC)、血红蛋白(HGB)含量。
标本溶血对ELISA法检测25—OH维生素D3的影响目的分析标本溶血对ELISA法检测25-OH维生素D3的影响,以评估溶血标本血浆25-OH维生素D3结果的准确性。
方法将正常标本分为两份,利用物理震荡法制备一份溶血标本,用ELISA竞争法分别检测溶血标本和正常标本血浆25-OH维生素D3水平,比较两组结果的差异;并检测溶血标本游离血红蛋白,分析游离血红蛋白与25-OH维生素D3偏倚的相关性。
结果溶血标本血浆25-OH 维生素D3结果显著降低,其血浆游离血红蛋白与25-OH维生素D3偏倚呈正相关。
结论标本溶血影响25-OH维生素D3的检测,检测结果差异与溶血程度呈正相关,临床工作中碰到溶血标本应通知重抽标本检测。
标签:溶血;ELISA;25羟维生素D维生素D(Vitamin D,VD)是胆固醇在紫外线作用下转换生成的一种人体必需的脂溶性维生素,在调节机体钙、磷代谢方面发挥着非常重要的作用。
近年来,维生素D又被发现与细胞增殖与分化以及免疫功能有着密切的联系。
25羟维生素D3(25-OH Vitamin D3,25-OHD3)是维生素D在人体内的主要循环活性形式。
临床上常常检测血液中25-OHD3水平,用于评估维生素D的营养状况、诊断儿童VD缺乏以及调整口服维生素D的用量等。
目前检测25-OHD3主要方法有色谱法、化学发光法和酶联免疫吸附试验(ELISA),其中ELISA检测25-OHD3由于操作简单、标本用量少、成本低廉以及实用范围广而成为临床上检测25-OHD3最常用的方法。
本文主要探讨标本溶血对ELISA法检测25-OHD3水平的影响,以评价溶血标本25-OHD3结果的可靠性。
1资料与方法1.1一般资料本院2015年7月~10月儿童保健科、儿科门诊及住院检测25-OHD3的儿童42例,年龄为2岁~6岁,男童15例,女童27例,剔除脂血和黄疸标本。
1.2试剂与仪器25-OHD3检测ELISA试剂盒为广州菲康生物技术有限公司生产,批号为:B15307;游离血红蛋白检测试剂盒购自北京瑞尔达生物科技有限公司;洗板机和酶标仪均由雷杜公司提供;真空采血管和抗凝剂有湖北金杏科技发展有限公司提供。
标本溶血对ELISA法检测HBsAg结果的影响分析
陈宝辉
【期刊名称】《求医问药:下半月刊》
【年(卷),期】2012(010)007
【摘要】目的:分析溶血标本对ELISA法检测HBsAg结果的影响。
方法:用ELISA法检测80例HBsAg阳性和80例HBsAg阴性溶血标本的乙肝表面抗原(HBsAg)。
结果:80例阳性溶血标本有18例假阴性,80例阴性溶血标本有23例假阳性。
结论:溶血标本对HBsAg的检测结果影响很大,对于有溶血的标本要进行复检。
【总页数】1页(P404-404)
【作者】陈宝辉
【作者单位】江苏省宿迁市钟吾医院检验科,江苏宿迁223800
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.ACONHBsAg胶体金法与ELISA法检测血清样本中HBsAg的评价 [J], 万静忠;马进;胡文杰
2.ELISA一步法和二步法检测HBsAg及NAT检测HBV-DNA结果分析 [J], 王旭菲;熊丽红;黄丽红
3.标本溶血对ELISA法检测HBsAg结果的影响分析 [J], 陈宝辉
4.ELISA法检测HBsAg与快速免疫试纸条检测HBsAg结果分析 [J], 张萱;关秀茹;
马学华;韩丽;杜柏岩
5.血清HBsAg的胶体金免疫层析法(试纸法)与ELISA法检测结果比较 [J], 方晔因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
不同程度的溶血对ELISA检测HBsAb的影响摘要】目的探讨不同程度的溶血标本对ELISA检测HBsAb结果的影响。
方法分别用已知HBsAb阴性的血标本,人为造成不同程度的溶血,同时用酶联免疫吸附试验进行HBsAb的检测;测定其OD值,通过对检验结果的观察,分析溶血标本对酶联免疫吸附试验检测的干扰程度。
结果以标本的OD值≧1为阳性进行结果判读。
结果当样本中游离血红蛋白≧8g/L时,对酶联免疫吸附试验检测有明显的影响,可造成结果假阳性。
结论用酶联免疫吸附试验进行HBsAb检测时,如样本游离血红蛋白≧8g/L时,要重新取样进行复查。
【关键词】 ELISA 溶血标本酶联免疫吸附试验(ELISA)自1971年问世以来,以敏感性高、特异性强、操作简便、安全等特点已被临床广泛使用,是最常用的乙肝病毒标志物的检测技术。
BBsAb阳性时机体获得乙肝病毒免疫力的标志[1],是观察是否接种上乙肝疫苗的首要指标。
ELISA法检测要求样本不使用高血红蛋白的样本,不能溶血,但在实际工作中由于穿刺、离心或病人血难抽等因素,常产生不同程度的溶血标本,这对检测结果会产生一定的影响。
本实验通过人为造成标本不同程度的溶血,观察对ELISA法检测HBsAb结果的影响,现报告如下。
1 材料与方法1.1 对象标本来自本院健康体检者182例,均为HBsAb阴性者,其中男性102人,女性80人。
1.2 试剂中生生物有限公司生产,批号为:20101002,质控血清是中生生物有限公司生产,批号为:20101002。
1.3 仪器与设备酶标仪为迈瑞MR-96,CD-1700血球计数仪。
1.4 方法早晨空腹抽取静脉血4毫升,用震荡方式造成不同程度的溶血,溶血程度以血浆游离血红蛋白(FHb)为计。
游离血红蛋白用CD-1700血球计数仪测定,HBsAb用ELISA进行检测,按要求进行严格质控。
2 结果已知HBsAb阴性标本在不同程度溶血对结果影响见表1。