手卫生采样操作流程

医院感染相关监测方法一、手卫生效果监测方法（一）采样时间：采取手卫生后，在接触患者或进行诊疗活动前采样。

（二）监测方法：被检者五指并拢，将浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支，在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各2次，（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动棉拭子；剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。

二、空气采样监测方法（一）采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。

（二）监测方法：1.Ⅰ类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照GB50333《医院洁净手术部建筑技术规范》（2013）要求进行监测，放置时间为30分钟。

2.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境采用平板暴露法：（1）布点方法：室内面积≤30cm2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30cm2，设4角及中央5点，4角的布点位置应距墙壁1m处，将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点。

（2）采样高度：为距地面0.8m～1.5m。

（3）采样方法：将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后（Ⅱ类环境暴露15分钟，Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5分钟），盖上平皿盖，及时送检。

三、物体表面采样监测方法（一）采样时间：在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。

（二）采样面积：被采面积＜100cm2，取全部表面；被采面积≥100cm2，取100cm2。

（三）采样方法：用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L 磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。

门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹。

四、诊疗器械采样监测方法：（一）采样时间：在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。

医务人员手卫生监测操作流程及注意事项
操作流程：
1、着装整洁，戴口罩、帽子；
2、查看棉拭子及洗脱液试管的灭菌日期；
3、洗手，卫生手消毒或戴无菌手套；
4、常规采样时，被检人员在洗手或卫生手消毒或外科手消毒后，五指并拢，指尖朝上，掌心朝外，双手放于胸前，自然晾干；
5、取带有相应标记洗脱液试管，打开；
6、取一支棉拭子浸取无菌洗脱液，在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30 cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；
7、将棉拭子放入无菌洗脱液试管中，剪去或折断手接触部分，立即加盖；
8、填写检测单，检测单填写内容应与洗脱液试管上的信息一致，送检培养。

注意事项：
1、当怀疑与医院感染暴发有关时，不做任何处理，原状态即时采样。

2、采样后必须尽快送检，送检时间不得超过4h，若样品保存于0℃-4℃时，送检时间不得超过24h。

医务人员手采样标准操作程序
1.目的
规范医务人员手采样标准操作程序。

2.适用范围
手卫生监测。

3.职责
医院感染管理专职人员和微生物组的人员应遵守本程序。

4.程序
被检人洗手消毒后，五指并拢。

将棉拭子浸泡在含相应中和剂的无菌洗脱液中。

用棉拭子从双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样棉拭子。

剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

将采样管在混匀器上震荡20s或用力振打80次。

用无菌吸管吸取1ml待检样品接种于灭菌平皿。

每一样接种在2个平皿，再加入已溶化的46~48℃的营养琼脂15~18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固。

将平皿置于36±1℃温箱培养48小时，计数菌落数。

计算方法：细菌总数(CFU/cm2)=[平板上菌落数*稀释倍数]/[采样面积(cm2)]
5.结果判断
卫生手消毒≤10(CFU/cm2) 外科手消毒≤5(CFU/cm2)
6.注意事项
被检人洗手消毒后切勿擦干。

7.参考文献
7.1中华人民共和国卫生部，消毒技术规范(2002年版)．2002
7.2钱培芬，倪语星．医院感染监测与管理．北京：军事医学科学出版社．2008。

医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。

一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。

2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。

3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。

4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。

浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。

监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。

房间面积＞10 m2者，每增加10 m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。

将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。

一、适用范围1．评价医务人员洗手、卫生手消毒、外科手消毒的效果。

2．怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时.二、监测时机在接触患者前或进行诊疗活动前采样.三、采集方法i．被检人洗手或手消毒后，在接触患者前或进行诊疗活动前采样。

2．被检人将双手伸出,五指并拢。

3。

检查者取2支无菌棉拭子，并浸于含相应中和剂的无菌洗脱液中。

4．取_支棉拭子在一只手手指曲面，从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动采样棉拭予；按同样方法用另一支棉拭予涂擦另一只手。

5．剪去操作者手接触部位，将2支棉拭子投入10ral含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

四、标本检测（一）带菌量检测(平皿倾注法)1．将采样管在混匀器上震荡20s或用力振打80次左右。

2．将无菌吸管分别吸取lmJ待检样品接种于2个直径为90mm无菌平皿中。

3．再加入已熔化的45—48℃的营养琼脂15．18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固。

4．将平皿置于(36±1)℃温箱培养48h，计数菌落数。

5．计算公式：细菌总数(cfu／cm2）=平板上菌落数×稀释倍数／60(cm2)（二）细菌种类鉴定1．将无菌增菌肉汤培养液试管置于（36±1)℃温箱培养24—48h。

2．若无菌增菌肉汤培养液试管浑浊,应根据实际情况选择血平板、中国蓝平板、双S平板、麦康凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。

3．接种后将平板置于(36±1）℃温箱培养24—48h,挑取可疑菌落进行微生物学鉴定,必要时做药敏。

六、注意事项1．结果判定：卫生手消毒后细菌总数应≤10cfu／cm2；外科手消毒细菌总数应≤5cfu／cm2。

2．应根据所用方法,选择含相应中和剂的无菌洗脱液.3．倾注时温度必须控制在45—48℃，温度过高可致细菌死亡，过低则影响倾注效果。

4，当怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时,监测目的在于考察实际工作中医务人员手卫生状况，虽然同样在接触患者前或进行诊疗活动前采样,但医务人员不一定进行了手卫生。

医务人员手卫生监测操作流程及注意事项
操作流程:
1、着装整洁，戴口罩、帽子；
2、查看棉拭子及洗脱液试管的灭菌日期;
3、洗手，卫生手消毒或戴无菌手套；
4、常规采样时，被检人员在洗手或卫生手消毒或外科手消毒后，五指并拢，指尖朝上，掌心朝外，双手放于胸前，自然晾干；
5、取带有相应标记洗脱液试管,打开；
6、取一支棉拭子浸取无菌洗脱液，在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次,一只手涂擦面积约30 cm2,涂擦过程中同时转动棉拭子；
7、将棉拭子放入无菌洗脱液试管中,剪去或折断手接触部分,立即加盖；
8、填写检测单,检测单填写内容应与洗脱液试管上的信息一致,送检培养。

注意事项：
1、当怀疑与医院感染暴发有关时，不做任何处理，原状态即时采样。

2、采样后必须尽快送检，送检时间不得超过4h,若样品保存于0℃-4℃时，送检时间不得超过24h。

手细菌培养采样方法手细菌培养采样方法涉及到无菌操作和正确选择培养基的重要步骤。

手细菌培养采样是为了检测手部表面微生物的存在与分布情况，以便有效预防与控制手部感染和疾病的发生。

下面将详细介绍手细菌培养采样的步骤和注意事项。

步骤一：准备工作1. 首先要准备好必要的实验器材，如培养皿、无菌试管、移液器、平板架等。

2. 需要准备无菌培养基，常用的有血琼脂（BSA）培养基、营养琼脂（NA）培养基、MacConkey琼脂培养基等。

3. 在进行培养采样前要彻底洗手，并戴上实验室原则要求的防护用品。

步骤二：采样1. 首先，使用无菌棉签沾取几个手指间的皮肤污秽物。

2. 将棉签等采样物转移到无菌试管中，加入滴对无菌盐水悬浮液。

3. 摇动试管使样品均匀悬浮于无菌盐水中。

步骤三：涂布技术1. 将无菌琼脂培养基倒入准备好的培养皿中，使培养基均匀分布于培养皿底。

2. 将经过悬浮的菌种样品取1ml，利用无菌吸管滴入有盖培养皿中。

每个培养皿平均滴液不超过3滴，避免菌种过多。

3. 使用无菌细胞刮刀均匀涂布于培养皿恒温箱上。

刮涂时要保持均匀刮涂并避免伤及琼脂表面。

步骤四：培养条件1. 使用无菌钝性气体灭菌关闭培养皿，避免菌落污染。

2. 将培养皿倒置后，放置于恒温箱中，温度通常为37，培养时间为24-48小时。

3. 培养时间过长要防止菌落过度生长而发生耗尽现象。

4. 培养皿上的菌落不宜过多，以确保菌落形态和不同菌种的鉴别。

步骤五：菌落的观察和分析1. 培养时间结束后，观察培养皿上的菌落形态、颜色、大小和密度等。

2. 将可疑的菌落转移到其它不同的培养基上进行进一步的鉴定和确认。

3. 结合菌落特征和进一步进行的生理生化实验，可以确定手部菌落的微生物种类和数量。

注意事项：1. 手细菌培养采样要确保实验环境干净，并且工作台面、试管、吸管等器材都经过高温高压灭菌处理。

2. 要注意无菌操作，进行培养采样时要戴手套，并避免手与培养皿接触，以免造成交叉感染。

医务人员手卫生标准流程洗手是防止医院感染最有效、最简单、最经济的方法。

为加强我院各级医务人员手卫生工作，预防和控制医院感染，提高医疗质量，保障医疗安全和医务人员的职业安全，特制定本规范。

一、手卫生基本要求在不同环境下工作的医务人员，手卫生应达到如下要求：1.Ⅰ类和Ⅱ类区域医务人员的手卫生要求应≤5cfu/cm2。

Ⅰ类和Ⅱ类区域包括层流洁净手术室、层流洁净病房、普通手术室、产房、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房等。

2.Ⅲ类区域医务人员的手卫生要求应≤10cfu/cm2。

Ⅲ类区域包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室及各类普通病房和房间等。

3.Ⅳ类区域医务人员的手卫生要求应≤15cfu/cm2。

Ⅳ类区域包括感染性疾病科、传染病科及病房。

4.各区域工作的医务人员的手，均不得检出致病微生物。

二、手卫生设施1.病房及各诊疗科室应设有流动水洗手设施，开关采用脚踏式、肘式或感应式。

2.用于洗手的皂液置于洁净容器内，定期检查是否过期。

3.可选用纸巾、风干机等擦/烘干双手。

不方便于洗手时，应配备快速手消毒剂。

手术室、ICU、导管室、治疗车、检验科等必须按要求配备。

三、洗手的指征1.无菌操作前后；2.接触不同病人前后；3.同一病人接触不同部位之间；4.接触血液、体液、分泌物、排泄物、有破损的皮肤；5.接触污染的物品和环境后；6.脱去手套后；7.离开病房、医院或诊室前；四、洗手流程：具体步骤见下图—七步洗手法采用流动水洗手，使双手充分淋湿取适量肥皂或者皂液，均匀涂抹至整个手掌、手背、手指和指缝认真揉搓双手至少15秒钟，应注意清洗双手所有皮肤，清洗指背、指尖和指缝掌心相对，手指并拢，相互揉搓手心对手背沿指缝相互揉搓，交换进行掌心相对，双手交叉指缝相互揉搓右手握住左手大拇指旋转揉搓，交换进行弯曲手指使关节在另一手掌心旋转揉搓，交换进行将五个手指尖并拢放在另一手掌心旋转揉搓，交换进行必要时增加对手腕的清洗在流动水下彻底冲净双手，擦干（可取适量护手液护肤）①掌心对掌心搓揉。