骨形态计量学Bone histomorphometry

2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋（1）包埋前单体（甲基丙烯酸甲酯）的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗（2L）中。

②加入5% NaOH溶液500ml，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。

③重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱阻滞剂）。

④加入500ml蒸馏水，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。

⑤重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱NaOH）。

⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2（1000 ml：500g）脱水2次。

⑦滤纸过滤，收集滤液。

⑧-20℃保存备用，第二天取出看有无冰晶漂浮：无，表明无水可备用；有，则需重新脱水。

（2）胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开，暴露骨髓腔，解剖部位如下：②脱水分别通过70%乙醇2天，95%乙醇2天，100%乙醇1天，100%乙醇1天，四个脱水过程，二甲苯透明1天。

③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。

三种浸液的配制方法如下：浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，磁力搅拌器上搅拌3小时。

浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化笨甲酰1.0g，磁力搅拌器上搅拌4小时。

浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化苯甲酰2.5g，磁力搅拌器上搅拌6小时。

（3）包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ（当日配置）倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中，倒入的包埋剂约，盖好瓶盖，并在瓶盖上插一注射器针头，室温过夜。

第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时，直至包埋块形成。

若为胫骨中段骨，则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬，变硬后为1.5cm高为宜。

包埋时将胫骨中段至于瓶中央，在倒入2cm高的包埋剂。

若为胫骨上段，仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋，倒入约3.5cm高的包埋剂即可。

表5男女闻体重相同的10对配对骨矿量比较男女显著性检验n均值标准差rt 均值标准差(t值) BMD下肢101．1791．104 101．196O．0780．369(P>O．5) (g／甜)全身101．150O．05410】．191O．085j．205(p)0．1) BMC下肢10987141109411640．125(P>O．05)(g)全身1027512971026493960．084(P>0．05)体重(1‘g)1072．413．98 1072．4 13．98无差异结论骨矿量可以代表60—80％骨强度，骨密度仪测量骨矿量有BMD和BMC两个指标可用，骨强度主要由体重决定，所以研究体重与BMD、BMC之间的关系作为选择应用指标的依据，经117例(男54，女 63)分析，发现BMC与体重之间呈密切正相关(r=0．611一O．846之间)，而BMD与体重之间仅有较弱相关。

经用体重标准化(BMC÷体重)及男女之间相同体重配对消除体重对BMC的影响后，发现男女之间的BMC基本上没有差异，所以BMC较BMD更能代表骨强度，如用BMC指标诊断骨质疏松比用BMD更有利，有关BMC在骨质疏松诊断实践中应用的其它问题有待进～步研究。

A13．骨组织形态计量与微损伤分析中南大学湘雅医学院附属二院代谢内分泌研究所(41001I)廖二元一、骨组织形态计量作为骨质疏松(OP)诊断和疗效评价金标准的BMD，在临床上已应用多年。

新一代的DEXA测量仪具有灵敏度高．可测量任意骨骼部位等优点，但．BMD所固有的缺陷必须克服，并急待将代谢性骨病的诊断和药物评价手段深入到更深层次。

BMD的固有缺点主要表现为：①测量结果受骨盐含量的影响，而骨盐含量并不反映骨病的病因和病理．而且受韧带钙化、骨质增生、动脉硬化等的影响；②BMD不能直接反映骨的力学性能，而骨折与否在很大程度上取决于骨的生物质量而非骨盐含量；③BMD表达的是整块骨骼的骨盐，无法了解更微小部位的病变特征。

2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋（1）包埋前单体（甲基丙烯酸甲酯）的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗（2L）中。

②加入5% NaOH溶液500ml，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。

③重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱阻滞剂）。

④加入500ml蒸馏水，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。

⑤重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱NaOH）。

⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2（1000 ml：500g）脱水2次。

⑦滤纸过滤，收集滤液。

⑧-20℃保存备用，第二天取出看有无冰晶漂浮：无，表明无水可备用；有，则需重新脱水。

（2）胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开，暴露骨髓腔，解剖部位如下：②脱水分别通过70%乙醇2天，95%乙醇2天，100%乙醇1天，100%乙醇1天，四个脱水过程，二甲苯透明1天。

③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。

三种浸液的配制方法如下：浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，磁力搅拌器上搅拌3小时。

浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化笨甲酰1.0g，磁力搅拌器上搅拌4小时。

浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化苯甲酰2.5g，磁力搅拌器上搅拌6小时。

（3）包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ（当日配置）倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中，倒入的包埋剂约，盖好瓶盖，并在瓶盖上插一注射器针头，室温过夜。

第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时，直至包埋块形成。

若为胫骨中段骨，则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬，变硬后为1.5cm高为宜。

包埋时将胫骨中段至于瓶中央，在倒入2cm高的包埋剂。

若为胫骨上段，仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋，倒入约3.5cm高的包埋剂即可。

2021年 02月第18卷第1期生物骨科材料与临床研究O rthobabdic B iomechanics M aterials A nd C linical S tudy.9.doi: 10.3969/j.issn. 1672-5972.2021.01.003文章编号:swgk2020-l 1-00300一种简便的骨动态参数计量方法**基金项目:深圳市科创委项目（JCYJ20180305164659637, JCYJ20190806160407178, JCYJ2018030516454428& JSGG20180504170427135, SGLH20180625141602256,JCYE017041362104773）作者单位:深圳市人民医院（暨南大学第二临床医学院，南方科技大学第一附 属医院）脊柱外科，广东深圳,518020彭松林 王尚 王振民 龙灿玲 唐苑泽 贺小琴 陈高扬*［摘要］目的探索操作方法简便、耗时少且对切片仪器要求不高的大鼠股骨硬组织切片方法。

方法选取12只两 月龄SD 雌性大鼠，随机分组为假手术组和双侧卵巢切除组（每组各6只），构建骨质疏松模型。

在取材前第9天和第2天腹腔注射钙黄绿素（25 mg^g ）o 取材后釆用4%中性多聚甲醛固定并进行microCT 扫描和硬组织冰冻切片观察骨量情况。

结果卵巢切除组大鼠骨量明显少于假手术组，且股骨经蔗糖梯度脱水后冰冻切片完整，荧光显微镜下能明显观察到2条荧光带且卵巢切除组条带宽度明显小于假手术组。

结论利用常规冰冻切片机借 助透明胶带的黏附作用可对大鼠股骨进行冰冻切片，能有效提高骨组织切片完整度，此办法操作简单快捷，对 仪器要求不高，便于常规实验室的普及应用。

［关键词］冰冻切片；硬组织切片；骨质疏松；骨动态学参数［中图分类号］R318［文献标识码］AA simple method for measuring bone dynamic parametersPeng Songlin, WangShang, WangZhenmin, Long Canting, Tang Wanze, HeXiaoqin, Chen Gaoyang. Department of S pine Surgery, Shenzhen People's Hospital (The Second Clinical Medical College, Jinan University; The FirstAffiliated Hospital, Southern University of S cience and Technology), Shenzhen Guangdong, 518020, China[Abstract] Objective To explore a method for slicing mouse femoral hard tissues that is simple in operation, shorter in time and less stringent on slicing equipment. Methods Twelve two-month-old SD female rats were selected and randomly divided into a sham operation group and a bilateral ovariectomized group (6 in each group). After two months of r earing,the osteoporosis model was caused on the 9th day and the day before the collection. On the second day, calcein wasinjected intraperitoneally. After the material was taken, the attached muscles on the femur were removed and fixed with 4% neutral paraformaldehyde, and then microCT scan and frozen section were performed to observe the bone mass.Results The bone mass of t he rats in the ovariectomized group was significantly less than that in the sham operation group,and the femurs were dehydrated by a sucrose gradient and then frozen sectioned intact. Two fluorescent bands were clearly observed under a fluorescence microscope and the band width in the ovariectomized group was significantly smaller thanthat in the sham operation group. Conclusion The use of conventional cryostats with the aid of the adhesive effect ofscotch tape can be used to freeze section of r at femurs, which can effectively improve the integrity of b one tissue slices. This method is simple and quick to operate and does not require high equipment for popularization in conventional lab ­oratories.[Key words] Frozen section; Hard tissue section; Osteoporosis; Bone dynamics parameters骨形态计量学是骨科研究中常用的研究骨代谢的手段,但骨组织结构致密且富含钙盐和无机盐导致其脆性增加，普 通切片很难切除完整骨组织叫目前常用的骨组织切片需进 行脱钙处理，而普通脱钙液普遍需要3〜4周，甚至几个月的脱钙时间，耗时长且对组织形态有着不可逆转的损伤悶。

骨组织形态计量学方法
首先，骨骼成分分析是通过测量骨骼中不同成分的含量来评估骨骼的
组成。

常用的方法有骨质量测量仪、骨钙测量仪、X射线能谱仪等。

这些
方法能够测量骨骼中的矿物质、有机质、水分等成分的含量，并且可以对
不同骨组织中的成分进行定量分析。

例如，在评估骨质量的过程中，可以
测量骨密度和骨矿物含量，从而评估骨质量的健康状况。

最后，骨形态分析是通过测量骨骼的形态特征来评估骨骼的结构和功能。

常用的方法有计算机辅助三维重建技术、X射线成像以及磁共振成像等。

这些方法能够提供骨骼的三维形态数据，并且可以对骨骼的大小、形状、密度、连续性等进行定量分析。

骨形态分析在评估骨骼发育、人类进
化以及骨折风险等方面具有重要的研究意义。

例如，通过比较不同种族或
不同性别的骨骼形态特征，可以了解人类的进化历程和骨骼的适应性变化。

总结起来，骨组织形态计量学方法是研究骨骼形态特征的科学方法，
主要包括骨骼成分分析、骨密度测量和骨形态分析。

这些方法能够评估骨
骼的组成、稠密程度以及结构和功能特征，对于评估骨骼的健康状况、诊
断疾病、研究人类进化以及进行人工骨骼材料的设计和优化具有重要的意义。

骨头称重法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述骨头称重法（Bone Weighting Method）是一种通过在骨骼上施加力量来测量骨骼密度和健康状况的技术。

这种方法已经被广泛运用在医学领域以及考古学研究中。

本文将深入探讨骨头称重法的历史背景、原理和应用，以及在医学和考古领域中的重要性和意义。

通过对这一技术的深入了解，我们可以更好地认识到骨骼健康的重要性，并为未来的发展提供新的思路和方向。

1.2文章结构文章结构部分旨在介绍本文的整体架构和逻辑安排。

本文共分为三个主要部分，即引言、正文和结论。

在引言部分，将对骨头称重法进行简要概述，介绍本文的目的以及整体的文章结构。

在正文部分，将从骨头称重法的历史背景入手，介绍其原理和应用，并探讨其在医学和考古领域的意义。

最后在结论部分，将总结骨头称重法的重要性，展望其未来发展，并得出总结性结论。

整体架构紧扣主题，条理清晰，旨在为读者提供全面的了解和认识骨头称重法的内容和意义。

1.3 目的：本文旨在深入探讨骨头称重法这一古老而神奇的技术，在医学和考古领域中的应用和意义。

通过对骨头称重法的历史渊源、原理和实际操作进行剖析，揭示其在解决医学诊断和疾病治疗、以及考古学研究中的重要作用和意义。

我们希望通过本文的介绍，让读者更加深入地了解骨头称重法的工作原理和实际操作过程，以及它在不同领域中的应用和意义。

同时，探讨骨头称重法在未来可能的发展方向和潜在的应用领域，为相关领域的研究和实践提供新的思路和启示。

通过本文的阐述，我们希望能够向读者展示骨头称重法的重要性和潜力，促进其在医学和考古领域中的广泛应用和深入研究。

2.正文2.1 骨头称重法的历史背景骨头称重法作为一种古老的方法，起源可以追溯到古代。

在人类早期社会中，人们开始利用动物的骨头来估算重量和量度。

随着社会的发展和科学技术的进步，骨头称重法逐渐被运用到医学和考古领域。

在古代埃及文明中，考古学家们发现了使用动物骨头进行称重的痕迹，这种方法被用于测量食物和货物的重量。

骨组织形态计量学在临床骨病应用中的研究与进展李建赤;黄必留;徐自强【摘要】BACKGROUND: Bone histomorphometry is a quantitative histological examination of an undecalcified bone biopsy performed toobtain quantitative information on bone remodeling and structure. It has been widely used in the development of mechanisms inmetabolic bone disease, anti -osteoporosis drugs and other research in recentyears.OBJECTIVE: To review bone histomorphometry from it was aware of clinical research to clinical applications and prospects, toclarify its application and research status in clinical bone diseases.METHODS: A computer of CNKI database (2000-2010) and PubMed database (1965-2010) was performed by the first authorusing “bone histomorphometry, metabolic bone diseases, bone biopsy, bone remodeling, hum ans” in Chinese and English as thekey words, to retrieve relevant literatures about the research of bone histomorphometry in clinical bone disease, Finally, 30literatures were included for analysis.RESULTS AND CONCLUSION: The results show that the bone histomorphometry is of indispensable value and significance inclinical use and effective assessment. Bone histomorphometry has an important role in bone structure, bone metabolism, bonebiology pathology, bone and bone-reactive protein and other drugs in several directions, multidisciplinary research.%背景:骨组织形态计量学是一种定量的不脱钙骨组织学切片检查,能取得骨重建和结构的定量信息.近年来已广泛应用于代谢性骨病发生发展机制、抗骨质疏松症药物等研究.目的:从骨组织形态计量学被认识到临床研究、临床应用以及展望进行综述.方法:由第一作者分别以"骨组织形态计量学,骨活检,代谢性骨病,骨重建,骨结构,人"和"Bone histomorphometry,metabolic bone diseases,bone biopsy,bone remodeling,humans"为关键词进行检索,CNKI 数据库的检索时限为2000/2010,PubMed 数据库的检索时限为1965/2010.筛选骨组织形态计量学方面的文献,最终纳入30 篇文献进行分析.结果与结论:骨计量学可得到三维的骨结构和重建的参数,在评估、提供骨代谢信息方面是一个功能强大的工具,其他任何研究方法不可代替.对于各种各样的骨代谢疾病,可从骨计量学方面更深层了解骨病的发生发展机制,为治疗提供更可靠的依据.此外,在临床新的药物安全干预、研究试验中,它提供了宝贵的骨结构和重建的参数资料.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2011(015)035【总页数】4页(P6607-6610)【关键词】骨组织形态计量学;骨活检;代谢性骨病;人;骨重建;骨结构【作者】李建赤;黄必留;徐自强【作者单位】佛山市顺德区桂洲医院骨外科,广东省佛山市528305;佛山市顺德区桂洲医院骨外科,广东省佛山市528305;佛山市顺德区桂洲医院骨外科,广东省佛山市528305【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言以往骨组织形态计量学(简称骨计量学) 是属于生物医学组织形态计量学中的一个分支——骨组织活检，是依据骨组织学和生理学，从切片上得到二维的骨结构和骨重建的参数。

解剖学-运动系统（骨学）第1章骨学运动系统( locomotor system)由骨、骨连结和骨骼肌组成，占成人体重的60% ~70%。

全身各骨借骨连结构成骨骼，构成人体的支架，支持体重，保护内脏，赋予人体基本形态。

骨骼肌附着于骨，在神经系统支配下产生收缩，牵拉骨骼产生运动。

在运动中，骨起杠杆作用，关节是运动的枢纽，骨骼肌则提供动力。

骨和关节是运动系统的被动部分，骨骼肌是运动系统的主动部分。

第1节骨学总论骨(bone)为一类器官，坚硬而有韧性，成年人有206块，约占体重的20%。

除6块听小骨分布于感觉器官外，按其所在部位可分为躯干骨51块、颅骨23块、上肢骨 64块、下肢骨62 块。

每块骨都为个器官，具有一定的形态，在体内占有一定的位置，分布有丰富的血管、神经和淋巴管。

一、骨的分类骨的形态不一，根据外形可分为长骨、短骨、扁骨和不规则骨四类。

1、长骨（long bone）：呈长管状，分一体两端。

长骨中部细长称为体或骨干, 体内的腔称骨髓腔，容纳骨髓。

骨的两端膨大称为骺，骺表面有光滑的关节面。

长骨多见于四肢，如股骨和肱骨。

2、短骨（short bone）：呈立方形，位于连接牢固并有一定灵活性的部位，如手的腕骨和足的跗骨。

3、扁骨（flat bone）：呈板状，主要构成容纳重要器官的腔壁，起保护作用，如颅盖骨、胸骨、肋骨等。

4、不规则骨（irregular bone）：形状不规则，功能各异，如椎骨和某些颅骨。

在一些不规则骨内，具有含气的腔，称含气骨，如上颌骨和额骨等。

二、骨的构造骨是由骨膜、骨质和骨髓构成，并有血管和神经分布。

1、骨膜（periosteum）：是被覆于骨内、外面由纤维结缔组织构成的膜。

分布于除关节面以外整个骨外面。

衬于骨髓腔内面和骨松质腔隙内的称骨内膜。

骨膜含有丰富的血管、神经和淋巴管，对骨的营养、生长或再生具有重要作用。

2、骨质（bone substans）：分骨密质compact bone和骨松质spongy bone。

Table2:Derived indice in Bone histomorphometry 中文名称 英文名称英文缩写 单位公式骨小梁相对体积 Percent trabecular area BV/TV % Tb.Ar/T.AR*100骨小梁厚度 Trabecular thickness Tb.Th μm (2000/1.199)( Tb.Ar/Tb.Pm ) 骨小梁数量 Trabecular number Tb.N #/mm (1.199/2)( Tb.Pm/T.Ar)骨小梁分离度 Trabecular separation Tb.Sp μm (2000/1.199)(T.Ar-Tb.Ar)/Tb.Pm 荧光周长百分率 Percent labeled perimeter %L.Pm % (dL.Pm+ sL.Pm/2 )/Tb.Pm*100 矿化沉积率 Mineral appositeion rate MAR μm /d IL.WI / Intervel骨形成率 Bone formation rate BFR/BS BFR/BV μm /d*100 %/year (dL.Pm+ sL.Pm/2)*MAR / Tb.Pm*100(dL.Pm+ sL.Pm/2)*(MAR/100*365)/Tb.Ar*100 单位骨小梁OC 数Osteoclast numberOC.N#/mm 2N.Oc/Tb.Ar计算所得参数可分为静态和动态参数. 1)静态参数：用来评价药物防治效果，描述骨量的多少和骨小梁的结构。

骨小梁相对体积（BV/TV ）：指骨小梁体积占骨组织体积的百分比，反映骨量的多少。

它等于骨小梁厚度与数量的乘积的1/10，也就是说骨量多少由厚度和数量共同决定。

骨小梁厚度(Tb.Th)：用于骨小梁结构形态，解释骨量变化。

其变化可影响骨量，在骨小梁一定的情况下，厚度越大，骨量越大越多。

骨小梁数量(Tb.N)：用于描述骨小梁结构形态，解释骨量变化。

骨组织形态学测量参数-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分：骨组织形态学测量参数是指通过测量骨骼的形态学特征来获取相关数据的一种方法。

这些参数可以帮助解释骨骼的生理特征、形成和发展过程，对于研究骨骼相关疾病、骨折愈合、骨质疏松等具有重要的意义。

通过对骨组织形态学测量参数的分析和研究，可以帮助医生进行更准确的诊断和治疗，也可以帮助科研人员深入了解骨骼的生物力学特性。

本文将对骨组织形态学测量参数的重要性、常用的测量参数以及其应用领域进行系统的介绍和分析，旨在为相关领域的研究者和医生提供一定的参考和指导。

1.2 文章结构文章结构部分的内容如下：在本文中，我们将首先介绍骨组织形态学测量参数的重要性，包括其在医学研究和临床诊断中的作用。

然后，我们将详细讨论一些常用的骨组织形态学测量参数，包括骨密度、骨质量和骨结构等方面的参数。

接着，我们将探讨这些测量参数在不同的应用领域中的具体应用，如骨折风险评估、骨质疏松症诊断和骨科手术规划等方面。

最后，我们将对整篇文章进行总结，展望未来骨组织形态学测量参数研究的发展方向，并提出我们自己的结论。

通过对这些内容的详细论述，我们希望读者能够全面了解骨组织形态学测量参数的重要性以及其在医学领域中的应用价值。

1.3 目的:本文旨在探讨骨组织形态学测量参数的重要性和应用领域，以及介绍常用的测量参数。

通过对骨组织形态学测量参数的深入了解，可以帮助医学领域的专业人士更好地评估骨骼健康状况和相关疾病的发展情况。

同时，本文也旨在为相关领域的研究人员提供参考和指导，以促进骨科学和医学影像学研究的发展和进步。

通过本文的阐述，希望读者能够对骨组织形态学测量参数有更全面的认识，进而推动相关研究和临床实践的发展。

2.正文2.1 骨组织形态学测量参数的重要性骨组织形态学测量参数的重要性在于其对骨骼健康和相关疾病的诊断、治疗和预防具有重要的指导意义。

通过对骨组织形态学测量参数的研究和分析，可以更准确地评估骨质疏松症、骨折风险、骨骼生长发育情况等相关问题。

2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋（1）包埋前单体（甲基丙烯酸甲酯）的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗（2L）中。

②加入5% NaOH溶液500ml，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。

③重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱阻滞剂）。

④加入500ml蒸馏水，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。

⑤重复操作“2”三次，三次的总量与单体量相当（洗脱NaOH）。

⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2（1000 ml：500g）脱水2次。

⑦滤纸过滤，收集滤液。

⑧-20℃保存备用，第二天取出看有无冰晶漂浮：无，表明无水可备用；有，则需重新脱水。

（2）胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开，暴露骨髓腔，解剖部位如下：②脱水分别通过70%乙醇2天，95%乙醇2天，100%乙醇1天，100%乙醇1天，四个脱水过程，二甲苯透明1天。

③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。

三种浸液的配制方法如下：浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，磁力搅拌器上搅拌3小时。

浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化笨甲酰1.0g，磁力搅拌器上搅拌4小时。

浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化苯甲酰2.5g，磁力搅拌器上搅拌6小时。

（3）包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ（当日配置）倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中，倒入的包埋剂约，盖好瓶盖，并在瓶盖上插一注射器针头，室温过夜。

第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时，直至包埋块形成。

若为胫骨中段骨，则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬，变硬后为1.5cm高为宜。

包埋时将胫骨中段至于瓶中央，在倒入2cm高的包埋剂。

若为胫骨上段，仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋，倒入约3.5cm高的包埋剂即可。

⾻形态计量学在⾻质疏松研究领域的研究进展主⾿量⾥堕坠垄查！螋！⾄！旦箜！！鲞箜！塑⽣些！！Ｑｅ！！塑！！！塑！！！№：！⾻形态计量学在⾻质疏松研究领域的研究进展刘康史晓林⾻质疏松症，是以⾻量减少及⾻组织显微结构退变为特征的⼀种全⾝性⾻骼疾病，伴有⾻脆性增加，易于发⽣⾻折。

⾻质疏松症可分为原发性、继发性和特发性３⼤类。

其中，原发性⾻质疏松症约占⾻质疏松症的９０％，它⼜可分为两型：其⼀，为绝经后⾻质疏松症，其⼆，为⽼年性⾻质疏松症ｏ“。

⽬前，随着⼈⼝⽼龄化Ｅｔ趋明显，⾻质疏松症的发病率已位居全球常见病的第７位，由⾻质疏松所致的⾻痛和⾻折直接影响中⽼年⼈的⽣存质量⼼ｏ。

以往对⾻质疏松症的研究主要集中于⾻量，⽽对⾻质量问题的研究是⼀个新近提出的热门⽅向。

⾻组织形态计量学⽅法对⾻质疏松症的防治研究有着不可或缺的价值与意义。

１⾻形态计量学在⾻质疏松研究领域的研究价值⾻组织形态计量学（ｂｏｎｅｈｉｓｔｏｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｙ，简称⾻计量学）属于体视学、⽣物医学组织形态计量学中的⼀个特殊分⽀，是依据⾻组织学和⽣理学，基于体视学原理，从⼆维切⽚上推导三维结构的⼀种⽅法¨引。

该⽅法除能将形态学观察到的⾻组织结构改变，⽤定性、定量的计量⽅法求得⾻体积密度、⾻⼩梁表⾯积、⽪质⾻厚、⾻⼩梁间距、⾻⼩梁厚的平均值等，还能对类⾻质进⾏分析，求得平均类⾻质体积、平均类⾻质表⾯、平均类⾻质宽、成⾻细胞活跃表⾯、破⾻细胞活跃表⾯和平均⾻壁厚等指标，并且还能通过活体四环素双标记的⽅法，利⽤四环素能与⾻特异结合并沉积在⾻矿化前沿的特性，把时间因素标记在⾻的重建过程中，可以测定多组⾻动⼒学组织参数¨１。

在荧光显微镜下，观测⾻组织内两次标记的四环素荧光线间距离，单、双标四环素荧光⾻矿化前沿的标记率等动态变化，从⽽求得诸如⾻矿化沉积率、单标四环素表⾯、双标四环素表⾯及基⾦项⽬：浙江省科技厅重点攻关项⽬（２００６Ｃ２３０１１）作者单位：３１００５３杭州，浙江中医药⼤学附属第⼆医院通讯作者：刘康，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｋａｎ９１９８２＠１６３．ＣＯ／ＩＩ?综述?单、双标四环素表⾯⽐、矿化延迟时间、⾻再建单位时间和纠正矿化沉积率等多项⾻动⼒学指标，从⽽可获取⾻细胞、组织以及器官⽔平上的信息。