血液凝固和影响血液凝固的因素
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【实验报告】血液凝固及其影响因素血液凝固的奇妙旅程嘿,朋友们!今天咱们聊聊那个让人既好奇又有点小紧张的话题——血液凝固。
这可是个超级有趣的科学现象哦!想象一下,当一个不小心被划破皮肤的小伤口出现时,会发生什么呢?别急,让我来给你们娓娓道来。
首先得说说“血液凝固”是怎么回事儿。
简单来说,就是当血管受伤的时候,身体会启动一套精密的机制,让血块在伤口处形成,防止更多的血液流失。
这个过程可不简单,得经过好一番“战斗”。
说起“战斗”,咱们得提提血小板。
这些小小的战士可是血液凝固的主力。
它们一看到伤口,就立刻聚集起来,形成一个个“士兵”,准备保卫我们的血管。
而那些“士兵”呢,它们就像超级英雄一样,把破损的血管缝合起来,防止血液继续流失。
接下来是凝血因子大显身手的时候了。
这些因子就像是指挥官,指挥着血小板和纤维蛋白一起行动。
它们把破损的血管口封住,不让血液再流出去。
这个过程可真是不容易,得靠各种“武器”才能完成。
不过,这可不是件容易的事。
你知道吗?在血液凝固的过程中,温度也是个关键因素。
如果环境太冷或者太热,都不利于血液凝固。
所以啊,我们平时要注意保暖,千万别让体温太高或太低影响血液循环。
除了温度,还有别的小东西会影响血液凝固。
比如说,有些药物可能会让血液凝固变慢,比如阿司匹林。
而有些食物,比如大蒜、生姜,吃了之后血液凝固的速度可能会变快一些。
不过别担心,这些都是正常的生理反应,不会影响我们健康。
当然了,血液凝固的过程也不是一帆风顺的。
有时候,它也会闹点小脾气,比如在伤口比较大或者有感染的情况下,血液凝固可能就会出问题。
这时候,医生们就得想办法帮忙了,比如用抗生素来治疗感染,或者用止血药来控制出血。
好了,关于血液凝固这个话题就聊到这里吧。
血液凝固可是个神奇的过程,它让我们的身体能够应对各种紧急情况。
虽然有时候它会出错,但只要我们注意保持健康的生活方式,就能减少这种“错误”发生的概率。
下次遇到小伤口时,记得及时处理哦!我想说,血液凝固虽然是个复杂的过程,但它也是我们身体自我保护的重要手段。
血液凝固和影响血液凝固的因素中医药大学 14级临床医学本部三班伊娜【摘要】目的:通过测定某些条件下的血液凝固时间,探究各种因素对血液凝固的影响及机制。
方法:取家兔新鲜血液分别置于室温、低温、涂石蜡于试管壁的试管,加棉花、NaCl、肝素、草酸钾、肺组织浸液,用竹签搅拌处理,观察记录其凝血时间并与不做任何处理的血液凝固时间进行对比,分析凝血时间的变化。
结果:经棉花、肺组织浸液处理的血凝时间较室温短,经NaCl、涂石蜡于试管壁处理的血凝时间较室温长,经肝素、草酸钾、低温处理的血液不凝,经竹签搅拌的血液不凝且竹签上缠有乳白色丝状物。
结论:增加粗糙面、组织因子促进血液凝固;稀释血液、涂石蜡于试管壁可延长凝血时间;肝素、草酸钾、低温抑制血液凝固。
纤维蛋白是血液凝固所必需的。
【关键词】血液凝固;凝血因子;肝素;纤维蛋白1实验材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物家兔。
1.1.2实验材料和器械棉花,石蜡油,碎冰块,氯化钠,肝素,草酸钾,肺组织浸液,氨基甲酸乙酯;试管(8支),小烧杯(2支),竹签,兔手术台,手术器械,注射器,动脉夹,动脉插管,恒温水浴槽,秒表(本实验用手机秒表功能)。
1.2实验方法1.2.1家兔称重后,按5mL/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射200g/L 的氨基甲酸乙酯使之麻醉,将兔仰卧并固定于兔手术台上。
1.2.2切开颈部皮肤、肌肉后,使两侧颈总动脉暴露,用玻璃分针分离一侧颈总动脉,头端用线结扎,向心端夹上动脉夹。
用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口,向心方向插入动脉插管,用线结扎固定。
以备取血之用。
1.2.3取8支试管,并编号。
按下表实验条件准备完毕(其中4号试管1~4组加0.5mLNaCl,而5~8组加2mL NaCl)图示:促凝与抗凝试验1.2.4放开动脉夹,先放一管血后再1~8号管每管加入血液1mL(约试管的1/8),立即用秒表(手机秒表功能)计时,每隔30s将试管倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状时,记下所历时间。
实验五:血液凝固及其影响因素实验人:同组人:【实验目的】1.学习血液凝固的基本过程2.了解加速或延缓血液凝固的一些因素【实验原理】血液凝固是一个酶的有限水解激活过程,在此过程中有多种凝血因子参与。
根据凝血过程起动时激活因子来源不同,可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。
内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中,外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后,与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
【实验材料和用具】家兔清洁小试管7个、小烧杯2个、竹签、秒表、试管架、哺乳动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、线、棉花、水浴槽、冰盒液状石蜡、肝素、草酸钾1~2mg、脑匀浆液0.1ml、生理盐水【实验过程】1、动物麻醉及颈部手术(此部由助教老师操作)取一只动物,称重。
按1g/kg体重的剂量将乌拉坦(氨基甲酸乙酯)由耳缘静脉缓慢注入,观察动物肌张力、呼吸与角膜反射的变化。
动物麻醉后背位固定于兔手术台上。
剪去颈部手术野的毛,沿颈正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一5~7cm的皮肤切口。
分离皮下组织及肌肉。
2、颈总动脉插管(此部由助教老师操作)在气管两侧辨别并分离颈总动脉,颈总动脉下方穿两条线备用。
在左侧颈总动脉的近心端夹一动脉夹,在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。
用小剪刀在结扎线的近侧(结扎线与动脉夹之间)沿向心方向剪一小斜口(约占管径的一半),向心脏方向插入动脉插管,由备用的线结扎固定。
取血时将动脉夹松开即可。
3、血液凝固的加速和延缓观察1.打开兔颈总动脉夹,血液从动脉插管流出,弃去第一份1mL动脉血后,向每个试管中注入1mL兔动脉血,并摇匀。
2.自血液流出动脉插管开始计时。
除第1管外,其他各管每隔15秒钟将试管倾斜一次,观察液面是否倾斜即血液是否流动,直到试管内血液不再流动为止,记录凝血时间。
3.当第2管已经凝固时,再倾斜第1管看血液是否凝固,若尚未凝固则按上述方法每隔15秒钟倾斜一次,直到血液凝固为止,记录凝血时间,即为该兔血的凝固时间。
实验3.1 血液凝固及其影响因素一、实验目的1. 了解血液凝固的基本过程。
2. 测定加速及延缓血液凝固的各种物理和化学因素。
二、实验原理血液流出血管后会很快凝固,血液凝固是指血液由流动的液体变为不能流动的凝胶状台地过程,其实质是血液中的可溶性纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白的过程;纤维蛋白交织成网,把血细胞及血液的其他成分网罗在内,从而形成血凝块。
血液凝固的过程可分为三个阶段:第一阶段是凝血酶原激活物的形成,第二阶段是凝血酶的形成,第三阶段是纤维蛋白的生成。
三个阶段的实质是由凝血因子按一定的顺序相继激活而生成的凝血酶最终使可溶性纤维蛋白原变成不溶性的纤维蛋白。
凝血系统包括内源性和外源性两套凝血系统。
内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液,通常因血液与带负电荷的衣物表面接触而被启动。
外源性凝血途径是由来自血液之外的组织因子与血液接触而启动的凝血过程。
内源性与外源性凝血系统的区别是:外源性凝血系统所需的凝血因子的种类及凝血步骤较少,因此血液凝固的时间短,而内源性凝血系统的血液凝固时间长。
本试验在暴露血管的条件下直接从动物动脉取血,观察记录不同实验条件下血液凝固的时间,通过加入外源性的组织因子来观察外源性凝血系统的作用,比较内源性与外源性凝血系统血液凝固过程的不同,并进一步比较影响血液凝固的各种物理及化学作用。
三、实验用品家兔,哺乳动物手术器械一套,小试管11支,带橡皮条的玻璃棒,小烧杯两只,试管架,秒表13个,0.1%的肝素,2%草酸钾,7%枸缘酸钠,8%的Cacl2溶液,细玻璃粉,石蜡油,冰块。
四、实验方法和步骤1、备好11支干洁试管和2只小烧杯。
2、麻醉家兔,进行动脉插管。
取一只家兔,从一侧耳缘静脉缓慢注入25%氨基甲酸乙酯(4ml/kg体重),待其麻醉后,背位固定于手术台上,距喉头1~2cm起,之胸骨上端1~2cm止,做一5~7厘米长的正中皮肤切口,钝性分离皮下组织和肌肉,实施气管插管。
实验五:血液凝固及其影响因素实验人:同组人:【实验目的】1.学习血液凝固的基本过程2.了解加速或延缓血液凝固的一些因素【实验原理】血液凝固是一个酶的有限水解激活过程,在此过程中有多种凝血因子参与。
根据凝血过程起动时激活因子来源不同,可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。
内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中,外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后,与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
【实验材料和用具】家兔清洁小试管7个、小烧杯2个、竹签、秒表、试管架、哺乳动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、线、棉花、水浴槽、冰盒液状石蜡、肝素、草酸钾1~2mg、脑匀浆液0.1ml、生理盐水【实验过程】1、动物麻醉及颈部手术(此部由助教老师操作)取一只动物,称重。
按1g/kg体重的剂量将乌拉坦(氨基甲酸乙酯)由耳缘静脉缓慢注入,观察动物肌张力、呼吸与角膜反射的变化。
动物麻醉后背位固定于兔手术台上。
剪去颈部手术野的毛,沿颈正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一5~7cm的皮肤切口。
分离皮下组织及肌肉。
2、颈总动脉插管(此部由助教老师操作)在气管两侧辨别并分离颈总动脉,颈总动脉下方穿两条线备用。
在左侧颈总动脉的近心端夹一动脉夹,在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。
用小剪刀在结扎线的近侧(结扎线与动脉夹之间)沿向心方向剪一小斜口(约占管径的一半),向心脏方向插入动脉插管,由备用的线结扎固定。
取血时将动脉夹松开即可。
3、血液凝固的加速和延缓观察1.打开兔颈总动脉夹,血液从动脉插管流出,弃去第一份1mL动脉血后,向每个试管中注入1mL兔动脉血,并摇匀。
2.自血液流出动脉插管开始计时。
除第1管外,其他各管每隔15秒钟将试管倾斜一次,观察液面是否倾斜即血液是否流动,直到试管内血液不再流动为止,记录凝血时间。
3.当第2管已经凝固时,再倾斜第1管看血液是否凝固,若尚未凝固则按上述方法每隔15秒钟倾斜一次,直到血液凝固为止,记录凝血时间,即为该兔血的凝固时间。
实验7 血液凝固和影响血液凝固的因素第二临床医学院临床专业【摘要】目的 通过测定某些条件下的血液凝固时间,加深理解影响血液凝固的因素 方法 往加了生理盐水、肺组织浸液、棉花、石蜡、肝素、草酸钾和放在室温、冰块里的8支试管里加等量的家兔血液,分别记录凝血时间。
结果 血液凝固的顺序分别为加了棉花的试管,肺组织浸液的试管,生理盐水的试管,室温的试管,涂了了石蜡的试管,放在冰块里,加了肝素和草酸钾的血液在一个小时内未见凝血现象。
结论 棉花、肺组织浸液、生理盐水有促进血液凝固的作用,石蜡有微弱的抗凝作用,肝素、草酸钾、低温有很强的抗凝作用。
并且外源性凝血时间比内源性凝血时间短。
【实验对象】家兔体重适宜,雌雄不限,【材料】石蜡油,冰块,肝素,草酸钾,氨基甲酸乙脂;试管,动脉夹,动脉插管,秒表。
【方法】1.用200g/L 氨基甲酸乙脂按5ml/kg 体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉,将兔固定于兔手术台上。
2.切开颈部皮肤后,分离颈外动脉,采血10ml,制备血浆和血清。
3.分离一侧颈总动脉,头端用线结扎,向心端夹上动脉夹。
用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一“V ”行小口,向心方向插入动脉插管,用线结扎固定。
以备取血之用。
4.取8支试管,编号。
5.取8支试管,编号, 分别按下表1.中的要求准备试管、准备手表记血液凝固的时间。
血液刚进入各试管时同时计时间,每管2ml ,每隔15s ,将试管倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状时,记下所历时间。
5~8管加入血液试管 编号 实验条件 每管加血2ml 1 对照管(无添加) 2 棉花少许 3 石蜡油涂管内壁 4 冰块 5 草酸钾0.1ml 6 生理盐水3ml 7 肺组织0.1ml 8 肝素1ml 小烧杯放血20ml 放血时用竹签不断搅动,3~5分钟后用水冲洗竹签后观察之 小烧杯放血20ml 对照后,用指腹盖住试管口将试管颠倒两次,使之混匀。
6.实验观察记录各管的凝血时间【结果】表1 凝血时间编号实验条件凝血时间1 对照管(无添加)10mis2 棉花少许 1.5min3 石蜡油涂管内壁47min20s4 冰块不凝5 草酸钾0.1ml 不凝6 生理盐水3ml 22min7 肺组织浸液0.1ml 40s8 肝素1ml 不凝【分析】1.1号试管及其他试管内血液凝固,是因为血液与试管壁接触,启动了内源性凝血过程。
【实验报告】血液凝固及其影响因素一、实验目的本次实验旨在探究血液凝固的过程以及了解影响血液凝固的各种因素,从而加深对血液生理特性的理解。
二、实验原理血液凝固是一个复杂的生理过程,它是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程。
血液凝固可分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。
内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液,外源性凝血途径是指始动凝血的组织因子来自组织。
影响血液凝固的因素众多,包括血液接触面的光滑程度、温度、钙离子浓度等。
光滑的接触面不利于凝血因子的激活和血小板的黏附聚集,从而延缓血液凝固;温度降低时,酶的活性下降,凝血过程减慢;钙离子在凝血过程中起着重要的作用,缺乏钙离子会导致凝血障碍。
三、实验材料与方法(一)实验材料家兔、注射器、酒精棉球、草酸钾溶液、生理盐水、肺组织浸液、石蜡油、冰块、氯化钙溶液等。
(二)实验方法1、用注射器在家兔耳缘静脉抽取一定量的血液,分别注入两支清洁的小试管中。
2、一支试管静置,作为对照管;另一支试管用竹签搅拌,观察血液是否凝固以及凝固所需的时间。
3、在两支新的小试管中分别加入等量的草酸钾溶液和生理盐水,再用注射器抽取家兔血液注入两管,摇匀后静置,观察两管血液的凝固情况。
4、取三支小试管,分别加入等量的血液,一支置于 37℃水浴中,一支置于室温下,一支置于冰水中,观察血液凝固的时间。
5、在两支小试管中分别滴入一滴肺组织浸液和石蜡油,然后加入等量的血液,观察血液凝固的时间。
6、在一支加入血液的试管中加入适量的氯化钙溶液,观察血液凝固的情况。
四、实验结果(一)搅拌对血液凝固的影响对照管中的血液很快凝固,而搅拌管中的血液不凝固或凝固时间明显延长。
(二)草酸钾溶液对血液凝固的影响加入草酸钾溶液的试管血液不凝固,而加入生理盐水的试管血液正常凝固。
(三)温度对血液凝固的影响37℃水浴中的血液凝固时间最短,室温下的血液凝固时间次之,冰水中的血液凝固时间最长。
【实验报告】血液凝固及其影响因素血液凝固,这个听起来有点高大上的概念,实际上就是我们身体里的小伙伴们在遇到危险时,会自己把自己给绑住,防止伤口再次出血。
那么,血液凝固到底是怎么一回事呢?它又受到哪些因素的影响呢?今天,我们就来一起揭开这个神秘的面纱。
我们来说说血液凝固的基本原理。
血液是由红细胞、白细胞、血小板和血浆组成的。
当身体受到伤害时,血管内的血小板会迅速聚集到伤口处,形成一个血小板血栓。
血液中的凝血因子也会被激活,开始发挥作用。
这些凝血因子会相互作用,形成纤维蛋白网,将血小板血栓和周围的组织粘合在一起,形成一个坚固的血块。
这样一来,伤口就被封住了,不再出血。
这个过程是受到很多因素影响的,接下来我们就来看看这些影响因素吧。
1. 1.1 血液成分血液凝固的基础就是血液中的各类成分。
红细胞负责携带氧气和二氧化碳,白细胞是我们身体的免疫战士,负责抵抗病毒和细菌。
血小板则是血液凝固的关键因素之一。
所以,要想让血液凝固得好,这些小伙伴们可不能少哦。
1.1.2 凝血因子凝血因子是血液凝固的核心。
它们就像是一支无形的军队,按照特定的顺序和力度行动,最终将伤口封住。
凝血因子的活性受到很多因素的影响,比如年龄、健康状况等。
如果某个凝血因子缺失或活性降低,那么血液凝固的能力就会下降。
2. 2.1 外部因素除了血液本身的因素外,外部环境也会影响血液凝固。
比如,低温会使血小板活性降低,从而影响血液凝固;高温则会使血液黏稠度增加,不利于血小板聚集。
一些药物如阿司匹林、华法林等也会对血液凝固产生影响。
2.2 内部因素内部因素主要是指我们身体内部的健康状况。
比如,贫血会导致红细胞数量减少,从而影响血液凝固;糖尿病则会影响血管的弹性和通透性,进而影响血小板聚集和血液凝固。
一些疾病如肝病、肾病等也会对血液凝固产生影响。
3. 3.1 生活习惯我们的生活习惯也会影响血液凝固。
比如,长期吸烟会导致血管收缩,从而影响血小板聚集和血液凝固;酗酒则会使肝脏功能受损,影响凝血因子的合成和活性。
血液凝固和影响血液凝固的因素xxx(xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx)【摘要】目的通过测定某些条件下的血液凝固时间,加深理解影响血液凝固的因素。
方法将家兔的颈动脉血分别加入到装有生理盐水、肺组织浸液、肝素、草酸钾等物质的十支试管中,分别记录凝血时间。
结果除了加有生理盐水、肺组织浸液、棉花的试管中血液凝固了外,其他试管中的血液在实验时间内,均未发生凝固。
结论棉花、肺组织浸液、生理盐水可以促进血液凝固,石蜡、肝素、草酸钾、低温有抗凝作用。
【关键字】内源性凝血、外源性凝血、肝素、组织因子、抗凝作用【Abstract】Objective,by measuring blood clotting time under certain conditions, deepen our understanding of the factors that affect blood coagulation.Methods,the rabbit carotid blood were added into ten test tubes with physiological saline, lung tissue extracts, heparin, potassium oxalate and other substances, respectively record the coagulation time.Result,except the blood in the test tubes with physiological saline, lung tissue extracts, cotton, others didn’t clot in the experiment period.Conclusion,cotton, lung tissue extracts, physiological saline can promote blood coagulation, and paraffin, heparin, potassium oxalate, low temperature has anticoagulant effect.【Key words】intrinsic pathway of blood coagulation, extrinsic pathway of blood coagulation, heparin, tissue factor, anticoagulant effect【引言】血液凝固过程是由许多凝血因子参加的酶促反应。
实验2 血液凝固和影响血液凝固的因素【摘要】目的:通过测定某些条件下的血液凝固时间,加深理解影响血液凝固的因素。
方法:采用颈动脉取血放血,并且用不同的物理或化学因素处理试管,以此来探究影响血液凝固的因素。
结果:1号(生理盐水)765s,2号(少许棉花)45s,3号(液体石蜡油)>2000,4号(冰水)>2000,5号(肝素)>2000,6号(草酸钾)>2000,7号(肺组织浸液)30s,8号(对照组)1545s。
结论:少量生理盐水、少许棉花和肺组织浸液能促进凝血过程,减短凝血时间,液体石蜡油、冰水、肝素、草酸钾能够减缓凝血过程,延长凝血时间。
【关键词】血液;血液凝固因子血液凝固参与生理止血的过程,是机体重要的保护机制之一。
血液凝固时一系列复杂的酶促反应过程,需要多种凝血因子参与。
本次实验将观察各种因素对血液凝固的影响。
1.材料和方法1.1实验动物家兔1.2实验仪器秒表,试管,动脉夹,动脉插管,恒温水浴槽1.3实验药品和试剂生理盐水(NS),少量棉花,石蜡油,冰块,肝素,2%草酸钾,肺组织浸液1.4采血1.4.1麻醉固定用200g/L氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉,将兔仰卧位固定于兔手术台上。
1.4.2手术操作兔颈部正中切开,分理处颈外动脉,结扎颈动脉远心端,用止血钳夹住颈动脉近心端,插管1.5试管处理1号试管滴加NS 0.1mL,2号试管加棉花少许,3号试管均匀涂液体石蜡油,4号试管置于冰水中,5号滴加肝素0.1mL,6号试管滴加2%草酸钾0.1mL,7号试管滴加肺组织浸液0.1mL。
1.6实验观察实验观察:1~7试管每管加入血液2mL,立即用秒表计时,每隔15秒将试管倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状是,记下所历时间。
2结果本次实验结果共包括8组,实验结果统计如下:表1 各组血液凝固时间组别时间(s)1号(生理盐水)7652号(少许棉花)453号(液体石蜡油)>20004号(冰水)>20005号(肝素)>20006号(草酸钾)>20007号(肺组织浸液)308号(对照组)3讨论3.1血液凝固时间1号试管(NS)<8号,研究证明少量生理盐水结论血液稀释后凝血功能与血液稀释程度相关,生理盐水占20%加快了血液凝固的进程,30%、40%稀释的凝血功能未受影响,50%稀释的血液凝固能力开始减弱,60%稀释的血液凝固能力受到严重影响[1],0.1mL 的NS占总比重的5%,故加快血液的凝固过程,凝血加速。
血液凝固和影响血液凝固的因素血液凝固和影响血液凝固的因素浙江中医药大学 14级临床医学本部三班张伊娜【摘要】目的:通过测定某些条件下的血液凝固时间,探究各种因素对血液凝固的影响及机制。
方法:取家兔新鲜血液分别置于室温、低温、涂石蜡于试管壁的试管,加棉花、NaCl、肝素、草酸钾、肺组织浸液,用竹签搅拌处理,观察记录其凝血时间并与不做任何处理的血液凝固时间进行对比,分析凝血时间的变化。
结果:经棉花、肺组织浸液处理的血凝时间较室温短,经NaCl、涂石蜡于试管壁处理的血凝时间较室温长,经肝素、草酸钾、低温处理的血液不凝,经竹签搅拌的血液不凝且竹签上缠有乳白色丝状物。
结论:增加粗糙面、组织因子促进血液凝固;稀释血液、涂石蜡于试管壁可延长凝血时间;肝素、草酸钾、低温抑制血液凝固。
纤维蛋白是血液凝固所必需的。
【关键词】血液凝固;凝血因子;肝素;纤维蛋白1实验材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物家兔。
1.1.2实验材料和器械棉花,石蜡油,碎冰块,氯化钠,肝素,草酸钾,肺组织浸液,氨基甲酸乙酯;试管(8支),小烧杯(2支),竹签,兔手术台,手术器械,注射器,动脉夹,动脉插管,恒温水浴槽,秒表(本实验用手机秒表功能)。
1.2实验方法1.2.1家兔称重后,按5mL/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射200g/L 的氨基甲酸乙酯使之麻醉,将兔仰卧并固定于兔手术台上。
1.2.2切开颈部皮肤、肌肉后,使两侧颈总动脉暴露,用玻璃分针分离一侧颈总动脉,头端用线结扎,向心端夹上动脉夹。
用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口,向心方向插入动脉插管,用线结扎固定。
以备取血之用。
1.2.3取8支试管,并编号。
按下表实验条件准备完毕(其中4号试管1~4组加0.5mLNaCl,而5~8组加2mL NaCl)编号实验条件1 空白对照2 棉花少许3 石蜡油润滑整个试管表面4 浸在盛有碎冰块的烧杯中5 2mL NaCl6 1mL 肝素7 0.1mL 草酸钾8 0.1mL 肺组织浸液图示:促凝与抗凝试验1.2.4放开动脉夹,先放一管血后再1~8号管每管加入血液1mL(约试管的1/8),立即用秒表(手机秒表功能)计时,每隔30s将试管倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状时,记下所历时间。
其中5~8号管需摇晃试管使血液和液体混匀。
1.2.5由颈总动脉插管放血,分别注入两个小烧杯内各10mL,一杯静置;另一杯用竹签不断地进行搅拌5min,观察血液的凝固现象。
取出竹签,用水洗净,观察缠绕在竹签上的物质。
1.2.5记录各管的凝血时间[1]。
2实验结果2.1与空白对照组凝血时间(1号试管)相比:(1)2、8号试管凝血时间缩短,且8号试管凝血最快,2号其次。
(2)3、5号试管凝血时间延长,但3号试管中血凝较5号快。
(3)4号试管未凝(理论上浸在0℃冰水混合物中血液不会凝固,但实验条件下冰块逐渐溶解导致其温度上升,可能会出现使4号管血液凝固的现象)。
(4)待结束实验,6、7号管血液始终不凝。
详见下表:编号实验条件凝血时间(min)与空白组实验结果对照平均数X标准差SX+S1 空白对照37.81 11.32 37.81+11.322 棉花少许11.75 5.37 11.75+5.37 缩短3 石蜡油润滑整个试管表面42.89 2.65 42.89+2.65 延长4 浸在盛有碎冰块的烧杯中未凝延长5 2.0mL NaCl 51.25 1.73 51.25+1.73 延长6 1.0mL 肝素不凝延长(始终不凝)7 0.1mL 草酸不凝延长(始终钾不凝)8.15 2.83 8.15+2.83 缩短8 0.1mL 肺组织浸液图示:促凝与抗凝试验2.2与对照组相比,经竹签搅拌过的血液不凝固,竹签洗净后上面缠绕着乳白色丝状物质。
3实验讨论3.1血液凝固机制血液由流动的液体状态转为不流动的凝胶状态称为血液凝固.血液凝固是生理性止血功能的重要组成部分。
3.1.1凝血因子特性包括12个经典的凝血因子,即FⅠ~ⅩⅢ(其中因子ⅤⅠ已被废除)以及激肽系统的2个因子,即激肽释放酶原和高分子量激肽原。
除FⅣ为金属离子外,其他均为蛋白质;除组织因子外,其他均存在于血浆中[2]。
3.1.2凝血途径血液凝固过程是由许多凝血因子参加的酶促反应。
根据血液凝固过程中凝血酶原激活途径不同,可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。
(1)内源性凝血途径:内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液,通常因血液与带负电荷的异物表面(如玻璃、白陶土、硫酸酯、胶原等)接触而启动。
当血液与带负电荷的异物表面接触时,首先是FⅫ结合到异物表面,并被激活为FⅫa。
FⅫa 的主要功能是激活FⅪ成为FⅪa,从而启动内源性凝血途径。
(2)外源性凝血途径:由来自于血液之外的组织因子暴露于血液而启动的凝血过程,成为外源性凝血途径,又称组织因子途径。
组织因子是一种跨膜糖蛋白,存在于大多数组织细胞。
在生理情况下,直接与循环血液接触的血细胞和内皮细胞不表达组织因子,但约有0.5%的FⅦ处于活化状态(FⅦa)。
当血管损伤时,暴露出组织因子,后者与FⅦa结合而形成FⅦa—组织因子复合物,后者在磷脂和Ca2+存在的情况下迅速激活FⅩ生成FⅩa。
由内源性和外源性凝血途径所生成的FⅩa,在Ca2+存在的情况下可与FVa在磷脂膜表面形成FXa—FVa—Ca2+—磷脂复合物,即凝血酶原复合物,进而激活凝血酶原。
凝血酶原的激活和纤维蛋白的生成凝血酶原在凝血酶原复合物的作用下激活成为凝血酶[3]。
本实验采用动物颈动脉放血取血,血液几乎未与组织因子接触。
因此,凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。
肺组织浸液中含丰富的组织因子,加入试管观察外源性凝血系统的作用。
3.2对实验结果本质探究3.2.1棉花对血液凝固的影响实验中加入棉花后血液凝固时间较室温缩短。
棉花给血液凝固提供了一个粗糙的表面,容易使血小板发生黏着、聚集,然后释放许多凝血因子和血小板因子;另外棉花含许多带负电荷的植物纤维,也能激活凝血因子XⅡ,启动内源性凝血途径。
3.2.2涂石蜡油于试管壁对血液凝固的影响实验中涂石蜡油于试管壁血液凝固时间较室温延长。
由于石蜡油表面光滑,不易引起血小板黏着,即不易使血小板发挥促进凝血的作用。
另外石蜡油为绝缘体,其把试管表面所带的负电荷覆盖,不利于凝血因子XⅡ的激活,因而延长凝血时间。
3.2.3低温对血液凝固的影响实验中置于低温后血液凝固时间较室温延长。
凝血酶发挥作用需要适宜的温度,当温度降低时,酶的活性就减弱甚至丧失,因此放置于冰水中的试管血液不凝固。
3.2.4NaCl对血液凝固的影响我们小组的实验中加入2mLNaCl血液凝固时间较室温延长。
原因是加入的生理盐水稀释了血液,使凝血酶的浓度降低,延长了血液凝固的时间。
而1~4组加入0.5mLNaCl血液凝固时间较室温缩短,可能不同浓度的NaCl产生效果不同,亦有可能是凝血酶发挥作用有一个最适浓度,越接近最适浓度,凝血时间越短。
3.2.5肝素对血液凝固的影响实验中加入肝素后血液不会凝固。
肝素是机体内外重要的抗凝物质。
抗凝血酶与凝血酶等多种凝血因子的活性中心——丝氨酸残基结合,使这些凝血因子的活性受到抑制或失活,从而达到抗凝的作用。
肝素则主要通过与血浆中的的一些抗凝蛋白,如抗凝血酶Ⅲ结合,加强后者的抗凝作用。
此外肝素还能使血管内壁细胞释放凝血抑制物和纤溶酶原激活物,增强纤溶作用。
因此在试管内放入肝素时血液不会发生凝固。
3.2.6草酸钾对血液凝固的影响实验中加入草酸钾后血液不会凝固。
凝血过程中Ca2﹢是重要的凝血因子,其参与了血液凝固的许多环节,当血液中没有Ca2﹢时血液就不会发生凝固。
在试管中加入草酸钾,由于草酸钾与Ca2﹢发生反应,生成草酸钙沉淀,使血液中没有Ca2﹢,故血液不会发生凝固。
3.2.7肺组织浸出液对血液凝固的影响实验中加入肺组织浸出液后血液不会凝固。
肺组织浸出液中含有丰富的组织因子(凝血因子Ⅲ),易通过外源性途径迅速发生凝血反应,因此加肺组织浸出液的试管血液凝固发生最快。
3.2.8竹签搅拌实验对血液凝固的影响实验中经竹签搅拌实验后血液不再凝固。
在竹签上可见乳白色丝状物,该物质为不溶性的纤维蛋白。
血液凝固的实质就是血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白的过程。
纤维蛋白交织成网,把血细胞和血液的其他成分网罗在内,从而形成血凝块。
用竹签搅动后不溶性的纤维蛋白被粘附在竹签上,血液中可溶性纤维蛋白原被完全消耗,不再产生不溶性的纤维蛋白,血液自然无法凝固。
4实验结论经棉花、肺组织浸液处理的血凝时间较室温短,而涂石蜡于试管壁处理的血凝时间较室温长,表明与粗糙面、负离子接触能够启动内源性凝血途径使凝血加快,组织因子易通过外源性途径迅速发生凝血反应;经2mLNaCl处理的血凝时间较室温长,原因是加入的生理盐水稀释了血液,使凝血酶的浓度降低,延长了血液凝固的时间。
但经0.5mLNaCl处理的血液凝固时间较室温短,其机制尚不清;经肝素、草酸钾、低温处理的血液不凝,肝素、草酸钾是较强的抗凝剂,温度会影响凝血酶活性;经竹签搅拌的血液不凝且竹签上缠有纤维蛋白,纤维蛋白是血液凝固所必需的。
5参考文献[1]陆源, 孙霞, 饶芳. 机能学实验教程[M]. 第3版. 北京: 科学出版社, 2016:140-141.[2]王鸿利. 止血与凝血机制研究进展[J]. 继续医学教育, 2006, 20(26):13-19.[3]朱大年. 生理学[M]. 第八版. 北京: 人民卫生出版社, 2009:63-69.。