碱性磷酸酶(AKP)

碱性磷酸酶高【导读】碱性磷酸酶（ALP或AKP）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。

临床上测定碱性磷酸酶，用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。

碱性磷酸酶高可能是生理性原因，也可能是病理性原因。

想了解更多关于碱性磷酸酶高的原因及危害吗？妈网百科为你解答您。

碱性磷酸酶高一般是指碱性磷酸酶检查中碱性磷酸酶的值高于正常参考值范围。

碱性磷酸酶高的正常参考值为：女性的正常参考值是50～135U/L，男性的是45～125U/L。

碱性磷酸酶广泛存在于人体各器官组织中，以肝脏细胞中最多，许多人对碱性磷酸酶陌生。

平时到医院临床进行肝功能检查时，结果中会包含碱性磷酸酶（ALP或AKP）这项，部分人会出现碱性磷酸酶偏高的现象。

如果检查发现碱性磷酸酶高，不要着急，而是要了解清楚为什么会偏高，再对症下药。

尤其是对于发育期的儿童、孕妇、以及处于骨折愈合期这三类人群，碱性磷酸酶高是较常见的，因此也要格外注意，可以定时到医院进行检查，使其不至于偏高很多，控制在一定范围内。

碱性磷酸酶高的原因根据科学研究证明，碱性磷酸酶高的主要原因主要有以下几点：1、某些药物导致。

临床患者采用抗生素（红霉素、庆大霉素、氯霉素、卡那霉素、氨苄青霉素等）进行治疗时，会导致碱性磷酸酶偏高，同时，用巴比妥类药物治疗时也会出现碱性磷酸酶偏高。

像这种药物导致的碱性磷酸酶偏高，一般是不需要进行特殊的治疗，停药后即恢复正常。

2、骨骼疾病。

由于骨组织中碱性磷酸酶也很活跃，因此如果有骨骼疾病的患者会出现碱性磷酸酶偏高。

如：佝偻病、软骨病、骨折愈合期、骨质疏松、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等骨骼疾病的患者一般会出现碱性磷酸酶偏高。

3、肝胆疾病。

由于肝脏细胞中碱性磷酸酶最多，因此如果肝胆出现问题，碱性磷酸酶偏高是必然的。

临床如：阻塞性黄疸、病毒性肝炎、肝癌（原发性、继发性）、肝硬化、胆汁淤积性肝炎等都可引起碱性磷酸酶偏高。

碱性磷酸酶的提取碱性磷酸酶的提取、分离纯化方案及采用的技术的原因，在分离纯化过程中怎样检测纯度一、碱性磷酸酶1、碱性磷酸酶的提取碱性磷酸酶（AKP或ALP）是一种底物特异性较低，在碱性条件下能水解多重磷酸单脂化合物的酶，需要镁和锰离子为激活剂。

AKP 具有磷酸基团转移活性，能将底物中的磷酸基团转移到另一个含有羟基的接受体上，如磷酸基团的接受体是水，则其作用就是水解。

·KP最适ＰＨ范围为８.６－１０，动物中AKP主要存在于小肠粘膜、肾、骨骼、肝脏和胎盘等组织的细胞膜上。

血清AKP主要来自肝，小部分来自骨骼。

AKP可从组织中分离纯化，也可以采用基因工程表达的方式获得：将碱性磷酸酶基因克隆到重组载体，转入宿主菌中进行重组表达，并从表达菌提取，并进行酶动力学分析。

2、碱性磷酸酶的分离纯化及采用的技术AKP分离纯化的方法与一般蛋白质的分离纯化方法相似，常用中性盐盐析法、电泳法、色谱法、有机溶剂沉淀法等方法分离纯化。

有时需要多种方法配合使用，才能得到高纯度的酶蛋白。

其中，用盐分级沉淀是一种应用非常广泛的方法。

由于硫酸铵在水中溶解度很大（20℃，每升可溶760克），并且对许多酶没有很大的影响，因此它是最常用的盐。

3、碱性磷酸酶的纯度检测酶的纯浓度越高酶的比活性也就越高。

根据国际酶学委员会规定，酶的比活性用每毫克蛋白质具有的酶活性来表示，单位（U/mg?pr）来表示。

因此，测定样品的比活性必须测定：a每毫升样品中的蛋白质毫克数；b每毫升样品中的酶活性单位数。

在蛋白质或酶的分离提取过程中由于酶蛋白容易变性而失活，为了获得较好的分离提取效果，在酶的制备过程中，每经一步处理，都需测定酶的活力和比活力。

唯有比活力提高较大，提纯步骤才有效。

二、设计实验本实验采用有机溶剂沉淀法从肝匀桨中分离纯化碱性磷酸酶(简称AKP)。

先用低浓度醋酸钠(低渗破模作用)制备肝匀浆。

醋酸镁则有保护和稳定AKP 的作用。

匀浆中加入正丁醇可使部分杂蛋白变性，释出膜中酶，过滤后，以去除杂蛋白。

碱性磷酸酶是什么指标
生命的意义在于健康，其中含有无限的奥秘。

通过查看碱性磷酸酶的指标可以反映人的健康情况，一旦在健康上发现了异常的情况，需要及时进行的治疗，能够帮助更好地恢复健康。

那么，碱性磷酸酶是什么指标？
碱性磷酸酶（ALP 或AKP ）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。

因此，对碱性磷酸酶进行检测，能够更好地知道肝脏、骨骼、肠等器官的健康情况，如果器官有问题，碱性磷酸酶的指标就会发生变化的情况。

碱性磷酸酶的指标正常范围是1-12岁小于500U/L；大于15岁，40-150U/L；一般来说，低值要比高值少见。

碱性磷酸酶偏低有着实际临床意义，在临床上一般碱性磷酸酶偏高说明有肝胆系统疾病。

碱性磷酸酶指标低也可以见于慢性肾炎，贫血，甲状腺机能不全等。

经过临床试验研究表明，碱性磷酸酶是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。

主要用于阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查。

通过检查，能够准确地查明病因，帮助鉴别。

时刻关注身体上的变化情况，定期进行身体检查，早发现早治疗，不耽误病情。

通过碱性磷酸酶的指标后发现器官有异常，要积极配合医生的治疗，服用相应的药物，培养积极乐观的心态面对，当身体的碱性磷酸酶发生异常时，以平静镇定的态度面对，这样生活才能越来朝着自己想要的轨迹发展。

实验名称：碱性磷酸酶的分离纯化实验实验日期：2023年11月15日实验地点：生化实验室实验目的：1. 掌握碱性磷酸酶（AKP）的分离纯化技术。

2. 了解不同纯化方法对AKP纯度的影响。

3. 学习AKP的比活性测定与动力学分析。

实验原理：碱性磷酸酶（AKP）是一种在碱性条件下能水解多种磷酸单脂化合物的酶，需要镁和锰离子为激活剂。

AKP具有磷酸基团转移活性，能将底物中的磷酸基团转移到另一个含有羟基的接受体上，如磷酸基团的接受体是水，则其作用就是水解。

AKP最适范围为pH 9.5-10.5，动物中AKP主要存在于小肠粘膜、肾、骨骼、肝脏和胎盘等组织的细胞膜上。

血清AKP主要来自肝，小部分来自骨骼。

AKP的分离纯化方法与一般蛋白质的分离纯化方法相似，常用中性盐盐析法、电泳法、色谱法、有机溶剂沉淀法等方法。

本实验采用有机溶剂沉淀法从兔肝匀浆液中提取分离AKP。

实验材料：1. 兔肝匀浆液2. 正丁醇3. 丙酮4. 氯化钠5. 磷酸盐缓冲液6. 酶活性测定试剂盒7. 其他实验试剂及仪器实验步骤：1. 样品制备：将兔肝匀浆液用磷酸盐缓冲液稀释至一定浓度。

2. 有机溶剂沉淀：向稀释后的匀浆液中加入正丁醇，充分混匀，静置一段时间，过滤除去杂蛋白，收集滤液。

3. 丙酮沉淀：向滤液中加入丙酮，充分混匀，静置一段时间，过滤收集沉淀。

4. 复溶于磷酸盐缓冲液：将沉淀用磷酸盐缓冲液复溶于一定体积。

5. AKP活性测定：按酶活性测定试剂盒说明书进行AKP活性测定。

6. 比活性测定：计算AKP的比活性。

7. 动力学分析：进行AKP的动力学分析，确定米氏常数（Km）和最大反应速率（Vmax）。

实验结果：1. 有机溶剂沉淀法：通过有机溶剂沉淀法，从兔肝匀浆液中成功提取了AKP。

2. 比活性测定：AKP的比活性为0.6 U/mg。

3. 动力学分析：AKP的米氏常数为0.5 mM，最大反应速率为1.2 U/min。

讨论：本实验采用有机溶剂沉淀法成功从兔肝匀浆液中提取了AKP，并通过比活性测定和动力学分析，对AKP的纯度和特性进行了研究。