磷脂的提取与分析检测技术_王道营

多７８摘要第一部分：参考植物油和蛋黄中磷脂的提取方法，以总脂提取液中磷脂含量为指标，考虑到提取剂中氯仿和甲醇的比例、提取剂的用量、抽提时间等因素，利用正交实验优化提取磷脂的条件。

结果显示最佳因素位级组合：提取剂体积（ｍ１）：样品重量（ｇ）＝１４，提取剂氯仿（ｍ１）：甲醇（ｍ１）＝２，抽提时间４ｈ，洗涤用１％ＮａＣｌ体积（ｍ１）：样品提取液体积（ｍ１）＝Ｏ．５０，其中前三个因素对实验结果有显著影响。

＋，第二部爿：分析测定了在收获旺季马面纯卵巢、贻贝、葛氏长臂虾三种样品总脂和磷脂的含量、总脂和磷脂的脂肪酸组成，并利用薄层层析对磷脂的组分进行了定性、定量分析。

结果显示：三种海产品都含有较丰富的以ＰＣ、ＰＥ为主的磷脂，与大豆、蛋黄磷脂以及同种海产品总脂的脂肪酸组成相比，海产磷脂含有更丰富的多不饱和脂肪酸，尤其是ＥＰＡ和ＤＨＡ的含量比较高。

第三部分：三种海产品在２０。

ｃ（或３０。

Ｃ）、４。

Ｃ、一ｉｏｏＣ一２０。

Ｃ温度下贮藏，测定贮藏期间磷脂含量及其组分的变化情况。

结果表明：在较高温度下贮藏时，磷脂含量快速下降，总磷脂中ＰＣ的比例下降明显，而ＬＰＣ的比例有不同程度的增加。

海产品收获后若不能立即处理，最好在－２００Ｃ下暂贮数日，以保存磷脂。

实验结果能为充分利用低值海产品中的磷脂提供理论依据。

／关键词：海产磷脂；正交实验ｊ提取；脂肪酸；贮藏专黪５１、青岛海洋大学硕士学位论文二酋ｉ－已ＡＢＳＴＲＡＣＴＴｈｅｆｉｒｓｔｓｅｃｔｉｏｎ：ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＰＬｆｒｏｍｐｌａｎｔｏｉｌＳａｎｄｙｏｌｋ，ｃｏｎｓｉｄｅｒｉｎｇｆｏｕｒｆａｃｔｏｒｓ：１）ｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍａｎｄｍｅｔｈａｎｏｌ，２）ｔｈｅｖｏｌｕｍｅｏｆｅｘｔｒａｃｔａｎｔ，３）ｔｈｅｔｉｍｅｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，４）ｔｈｅｖｏｌｕｍｅｏｆ１％ＮａＣｌ，ｔｈｅＰＬ‘ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍＮａｖｏｄｏｎｓｅｐｔｅｎｔｒｉｏｎａｌｏｓ（Ｇｏｎｔｈｅｒ）ｏｖａｒｙｗａｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｒｉａｌＳ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｅｓｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｉＳ：ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ：ｓａｍｐｌｅ＝１４：１（ｖ／ｗ），ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ：ｍｅｔｈａｎｏｌ：２：ｌ（ｖ／ｖ），ｆｏｕｒｈｏｕｒｓ’ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，１％ＮａＣｌ：ｅｘｔｒａｔｕｍ＝１：２（ｖ／ｖ）．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＰＬｉＳａｆｆｅｃｔｅｄａｐｐａｒｅｎｔｌｙｂｙｔｈｅｆａｃｔｏｒｓｅｘｃｅｐｔｔｈｅＶ０１ｕｍｅｏｆＩ％ＮａＣｌ．Ｔｈｅｓｅｃｏｎｄｓｅｃｔｉｏｎ：ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔａｎｄＦＡｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎＴＬａｎｄＰＬａｍｏｎｇＮａｖｏｄｏｎｓｅｐｔｅｎｔｒｉｏｎａｌｏｓ（ＧＤｎｔｈｅｒ）ｏｖａｒｙ，尼ｌ厶曲叩ｇｒａｖＪｅｒｉ（Ｙｕ）ａｎｄＭｒｔｉｌｕｓｅｄｕｌｉｓ（１ｉｎｎａｅｕｓ）ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ。

磷脂 ir鉴定方法磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于细胞膜中，参与细胞组成、信息传递和能量代谢等生物过程。

为了研究磷脂的结构和功能，需要进行磷脂的鉴定和分析。

本文将介绍常见的磷脂鉴定方法，包括色谱、质谱和核磁共振等技术。

一、色谱技术色谱技术是一种分离和分析化合物的常用方法，包括薄层色谱、高效液相色谱、气相色谱等。

这些方法可以用于磷脂的分离和纯化，并且可以得到磷脂的相对含量。

1.1 薄层色谱薄层色谱是一种相对简单、快速的色谱技术，通常用于磷脂样品的初步分离和纯化。

其原理是利用不同化合物在吸附剂上的亲和力不同，从而使它们在薄层上运动的速度和方向不同，从而达到分离的目的。

在磷脂的鉴定中，可以用磷酸化的酯酶切割磷酸基，使磷脂分解成甘油3-磷酸酯和脂肪酸，用正相或反相薄层色谱分离。

1.2 高效液相色谱高效液相色谱是一种分离并纯化化合物的方法，它利用液相固定相互作用对样品进行分离，可以有效地分离一些极性化合物和不同结构的磷脂。

常见的固定相为C8、C18等碳链，分离柱为正相分离柱、反相分离柱等。

气相色谱是一种将挥发性有机物分离和定量的技术。

它主要用于分析和定量非极性化合物和低极性化合物。

在磷脂的鉴定中，气相色谱可以用于脂肪酸的分离和定量。

质谱技术是一种鉴定物质分子量、化学结构的方法，通过高分辨率、高灵敏度的检测系统，可以快速、准确地确定化合物的化学式和结构。

在磷脂的鉴定中，质谱技术主要包括质谱、飞行时间质谱和磁共振质谱等。

质谱是一种将分子分解成离子的技术，并将它们按质量和数量进行分离和检测的方法。

在磷脂的鉴定中，可以使用飞行时间质谱或质量分析仪对磷脂进行分析。

通常，磷脂会转化为负离子化物，然后进行质谱分析。

根据离子的质量比和相对强度，可以确定磷脂的组成。

2.2 飞行时间质谱飞行时间质谱是一种将离子加速到高能状态，然后通过电子荧光屏幕进行检测的技术。

在磷脂的鉴定中，飞行时间质谱可以用于测定磷脂的质量和相对含量。

磷脂的提取与分析检测技术王道营　徐幸莲　徐为民(南京农业大学食品科技学院)　【摘　要】磷脂的提取方法主要是萃取法;总含量的测定方法有称重法、比色法、紫外分光光度法等;磷脂不同组分的分离和测定方法有T LC、HPLC和31P-NM R等;利用RP-HPLC和GC可以对磷脂的脂肪酸的组成分析测定;使用HPLC、GC等和M S的联合使用可以对磷脂分子量及分子结构进行分析。

本文分别对上述5个方面进行综述,并对不同方法的特点进行了初步探讨。

　【关键词】磷脂;组分;脂肪酸组成;分子结构;分析检测中图分类号:TS224.4 文献标识码:A 文章编号:1009-1807(2005)07-0051-04 磷脂是一类存在于生物界的含磷脂肪物质。

在植物的种子、动物血液和脏器、蛋黄及细菌中与油脂并存,是构成细胞基本结构的必需物质,对维持细胞的通透性和细胞内氧的传递起重要作用。

磷脂可分为3大类:糖基甘油二酯、神经鞘磷脂(SM)和磷酸甘油酯(PL)。

磷酸甘油酯又可分为酯磷脂和醚磷脂,醚磷脂包括胆碱缩醛磷脂和乙醇胺缩醛磷脂,通常所说的磷脂就是指酯磷脂。

酯磷脂主要包括磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酸(PA)、二磷脂酰甘油(DPG)以及N-乙酰基-磷脂酰乙醇胺(NAPE)等。

一种磷脂就是多种磷脂分子组成的混合物,这造成了磷脂分离和定量上的困难。

本文就磷脂的提取和分析检测技术作一综述。

1　磷脂提取常用的提取方法可归纳为两大类:一是物理萃取法,即用超临界流体技术(SFE-CO2),这是一种新型的分离技术,其操作简单,萃取纯度较高;二是化学萃取法,即用氯仿、甲醇、丙酮、乙醚、乙醇等有机溶剂反复萃取,其操作步骤较复杂。

原料不同,所采用的提取方法也不同。

对于一些粗磷脂产品可以直接取样进行分析;对于大豆油、菜籽油等植物油类样品可采用丙酮沉淀法获取磷脂;对于大豆、动物组织等固体类样品,要先提取样品中的粗脂肪,然后对其进行分离获取磷脂。

医药磷脂提取实验报告医药磷脂（Phospholipids）是一类重要的生物大分子化合物，它们广泛存在于细胞膜中，在生物体内具有重要的生理功能。

为了研究和开发医药磷脂，了解其提取方法是非常重要的。

本实验旨在提取医药磷脂，并对提取物进行分析。

实验中我们选用了磷脂提取试剂盒进行提取，具体步骤如下：1. 准备样品：将磷脂样品（比如卵磷脂，磷脂酰胆碱等）加入离心管中。

2. 加入提取试剂：将适量的提取试剂加入样品中，在适当的温度下进行搅拌。

3. 离心：将样品离心，使得磷脂与其他组分分离。

4. 收集上清液：将上清液转移到另外的离心管中。

5. 加入酶解酶：将适量的酶解酶加入上清液中，进行酶解反应。

6. 加入抗氧化剂：加入适量的抗氧化剂，防止磷脂氧化。

7. 离心：将样品离心，去除残余物质。

8. 收集上清液：将上清液转移到另外的离心管中。

9. 测定磷脂含量：用酶法、化学法或其他方法测定提取物中磷脂的含量。

通过上述步骤，我们成功地提取了医药磷脂，并进行了相关的分析。

在实验过程中，我们需要注意以下几点：1. 样品的选择：根据实验需要选择适合的磷脂样品，同时保证样品的纯度和质量。

2. 提取试剂的选择：选择合适的提取试剂，能够高效提取磷脂，并保证提取物的稳定性。

3. 实验条件的控制：控制实验条件，比如温度、pH值等，以保证提取过程的顺利进行。

4. 仪器设备的使用：合理使用离心机、显微镜、分光光度计等仪器设备，确保实验结果的准确性。

在实验中，我们成功提取了医药磷脂，并获得了提取物。

通过测定磷脂含量，我们可以评估提取物的纯度和质量。

通过对提取物的进一步分析，比如结构分析、功能研究等，可以深入探究医药磷脂的生理功能和应用价值。

总之，本实验通过采用磷脂提取试剂盒进行磷脂的提取，并对提取物进行分析，为研究和开发医药磷脂提供了重要的实验基础。

同时，本实验还为后续的医药磷脂研究提供了参考和借鉴。

磷脂含量测定方法
磷脂是一类非常重要的生物分子，在细胞结构和功能中起着关键作用。

那怎么来测定磷脂含量呢？这可是个有趣的问题呀！
常见的方法之一就是比色法，就好像我们通过观察颜色的变化来判断一件事情一样。

通过特定的试剂与磷脂反应，产生有颜色的物质，然后测量这个颜色的深浅，就能推算出磷脂的含量啦！这是不是很神奇呢？就如同我们根据天上云朵的颜色和形状来推测天气情况一样。

还有薄层层析法呢，它就像是给磷脂们来一场“选美比赛”。

把磷脂样品在薄层板上展开，不同的磷脂会在特定的位置上显现出来，然后通过与标准品比较，就能知道有多少磷脂啦！这多有意思呀，仿佛是在给磷脂们划分各自的“地盘”。

高效液相色谱法也是很厉害的哦！它就像是一个超级精确的“分拣员”，可以把不同的磷脂非常准确地分离出来，然后再进行定量分析。

这可真是高科技呀，能把那么复杂的磷脂混合物分得清清楚楚。

另外，核磁共振法也不能小瞧呀！它能从分子层面上告诉我们磷脂的信息，就好像是直接钻进磷脂的“内心世界”去探索一样。

每种方法都有自己的特点和适用范围呢，我们得根据具体情况来选择合适的方法。

就像我们选择工具一样，不同的任务需要不同的工具，不是吗？我们不能随便拿起一个方法就用，得像个聪明的工匠一样，精心挑选最适合的工具来完成我们的工作。

总之，磷脂含量测定方法多种多样，各有千秋。

我们要善于利用这些方法，去揭开磷脂世界的神秘面纱，去探索那些隐藏在细胞中的奥秘。

这难道不是一件令人兴奋的事情吗？让我们带着好奇和热情，去深入了解磷脂含量测定的奇妙世界吧！。

磷脂酶的分离纯化技术研究进展王道营;张牧晗;张露娟;刘芳;诸永志;徐幸莲;徐为民;曹建民【期刊名称】《江西农业学报》【年(卷),期】2012(024)009【摘要】为了充分认识磷脂酶的酶学性质及应用技术,笔者对磷脂酶A1/A2、C、D的分离纯化方法及其发展前景进行了综合论述.【总页数】4页(P142-145)【作者】王道营;张牧晗;张露娟;刘芳;诸永志;徐幸莲;徐为民;曹建民【作者单位】江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室、农业部农畜产品加工与质量控制重点开放实验室,江苏南京210095;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室、农业部农畜产品加工与质量控制重点开放实验室,江苏南京210095;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014【正文语种】中文【中图分类】Q545【相关文献】1.磷脂酶A2及脂蛋白相关磷脂酶A2与动脉粥样硬化相关疾病的研究进展 [J], 何建新;徐丹苹2.高速逆流色谱分离纯化技术研究进展 [J], 王海燕;李睿;王介平;谷山林;王小燕;曾秀3.蛋白质分离纯化技术的相关研究进展 [J], 范东海;刘磊;唐瑞4.α-亚麻酸分离纯化技术研究进展 [J], 唐佳芮;魏冰;石珊珊5.亚麻胶、亚麻木酚素的提取及分离纯化技术研究进展 [J], 邱立明;唐佳芮;袁榕;魏冰;孟橘因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

磷脂化学与提取一、磷脂的组成与结构磷脂可分为两类：鞘磷脂（神经磷脂）和甘油醇磷脂鞘磷脂也称神经磷脂，它是神经酰胺与磷酸直接相连，然后再与胆碱或胆胺相连而成的脂。

甘油醇磷脂是由甘油与磷酸反应生成的脂。

磷脂典型的化学结构式为：甘油磷脂甘油醇磷脂主要有以下几种：卵磷脂（磷脂酰胆碱，phosphatidylcholines ，PC ）脑磷脂（磷脂酰乙醇胺，phosphatidylethanolamines ，PE ） 肌醇磷脂(磷脂酰肌醇,phosphatidylinostols ，PI) 丝氨酸磷脂(磷脂酰丝氨酸，phosphatidylserines,PS)此外还有磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油、缩醛磷脂和溶血磷脂等。

1、卵磷脂卵磷脂结构式为：卵磷脂的分子结构特点是一个脂酰基被磷酸胆碱基所取代，而磷酸胆碱所连接的碳位臵不同又产生α、β两种异构体，其磷酸胆碱基连接在甘油基的第3碳位上称α-型，连接在第2碳位上则为β-型。

自然界存在的卵磷脂为L-α-卵磷脂，即R2-CO基处在甘油碳链的左边为L-型。

卵磷脂分子中不同碳位上所连接的脂肪酸也不同，α碳位上连接的几乎都是饱和脂肪酸，而β碳位上连接的通常为亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸等不饱和脂肪酸。

卵磷脂广泛存在于动植物体内，在动物的脑、精液、肾上腺及细胞中含量尤多。

禽类卵黄中含量最为丰富，达干物质总量的8%～10%。

2、脑磷脂脑磷脂又称氨基乙醇磷脂，其分子结构与卵磷脂相似，只是以氨基乙醇代替了胆碱，有α、β两种异构体，与磷相连的羟基为甘油的伯醇基称α型，为甘油的仲醇基则称β型。

脑磷脂水解后可得到甘油、脂肪酸、磷酸和乙醇胺。

脑磷脂通常与卵磷脂共同存在于动物脑组织和神经组织中，心、肝及其它组织也有分布。

脑磷脂在动物脑组织中含量最多，约占脑干物质总量的4%～6%。

3、肌醇磷脂肌醇磷脂结构式为：肌醇磷脂是磷脂酸与肌醇构成的磷脂，磷脂的极性基团部分有一个六碳环状糖醇（肌醇），除一磷酸肌醇磷脂外，还有1，4-二磷酸肌醇磷脂和1，4，5-三磷酸肌醇磷脂。