细胞膜渗透率的测定(精)

细胞渗透性实验实验材料：1.Caco-2细胞；2.培养基DMEM(高糖，含Gln，无丙酮酸，Gibco/Invitrogen, cat. no. 41965-039)；a)完全培养基DMEM+10% FCS + 1% NEAA (Gibco/Invitrogen, cat. no. 11140-035)；b)DMEM-双抗培养基DMEM+10% FCS+1% NEAA+1%双抗〔Gibco/Invitrogen, cat. no. 15140-122〕；3.0.25%胰酶+EDTA；4.HBSS〔Hank’s balanced salt solution〕(cat. no. H1387)配制1L，加入HEPES〔终浓度25mM〕和NaHCO3〔终浓度0.35g/L〕,调整PH=7.4并过滤除菌〔如果要模拟小肠酸环境或研究质子依赖的转运机制，则以PH=6.5的甲磺酸代替HEPES，终浓度10mM，调整PH=6.5〕；5.DMSO〔在药物不溶于HBSS时使用，99.5%纯度，作为共溶剂，使用时DMSO终浓度不能超过1%〕；6.[14C]mannitol〔supplied by NEN Life Science Products，具有放射性〕或用fluorescentcompound lucifer yellow〔需要的药物浓度高于[14C]mannitol〕7.分析药物含量的溶剂，如HPLC溶剂；8.BSA，如检测脂溶性化合物则需要BSA；9.配制药物，用上述HBSS溶液按需要的浓度溶解药物，使用前检查配制后的溶液PH值，如PH改变，则调整相应的至7.4或6.5。

要点：1.有些药物可能会破坏Caco-2细胞层的完整性，造成通透性升高，一般以[14C]mannitol作为marker，通常完整的Caco-2细胞层通透性为1.2 ± 0.5×10-7 cm s-1，如果通透系数大于5×10-7 cm s-1，则认为单细胞层受到了药物的影响，若通透系数大于1×10-6 cm s-1，则认为单细胞层遭到破坏；2.对于主动转运，首先使用低浓度药物如10μM或更低的浓度进行实验以避免转运蛋白的饱和转运；对于被动运输mM数量级的浓度进行实验，这样，主动运输饱和，此时的运输主要是被动运输。

苹果出库后生理指标比较测定—果蔬采后生理设计性实验摘要：此设计性实验测定了经乙烯利处理和低温贮藏的红富士苹果的呼吸强度、有机酸含量、细胞膜渗透率，以及多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶(POD)活性的测定和丙二醛(MDA)含量的测定。

关键词：苹果出库生理指标比较测定前言：红富士是从普通富士的芽（枝）变中选育出的着色系富的统称。

富士苹果是日本农林水产省果树试验场盛冈分场于1939年以国光为母本，元帅为父本进行杂交，历经20余年,选育出的苹果优良品种，具有晚熟、质优、味美、耐贮等优点,于1962年正式命名，是世界上最著名的晚熟苹果品种。

富士果实虽有风味好、晚熟、耐贮等优点，但也存在着果实着色差的缺点。

为此，日本各地又从富士当中选出了许多着色好的富士芽变，统称为红富士。

红富士苹果在渭北平原，陕北黄土高原一些地区以及秦岭以北麓地区均能正常生长，并能早实丰产稳产，色艳质优。

红富士的经济栽培北界在白于山、横山以南，西起吴旗的油城子，经过志丹县的桑园沟，冬至清涧。

在北纬37°以北，榆林县以南地区，选用适宜的地形和小气候条件，也可少量栽培，但需注意防冻防霜。

乙烯利也叫一催磷，乙烯磷。

具有抑制新梢生长，促进成花结果，果实着色成熟等作用。

苹果成熟前3 至 4周，用纯量的320至800毫克/千克浓度溶液喷布全树，可使果实提早10至15天成熟。

苹果花前10天，全树喷100至200毫克/千克浓度溶液，可提高果实品质。

此设计性实验测定了经乙烯利处理和低温贮藏的苹果的呼吸强度、有机酸含量、细胞膜渗透率，以及多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶(POD)活性的测定和丙二醛(MDA)含量的测定。

了解果蔬采后生理变化和生产上减少果蔬采后损失的操作技术。

1.试验材料与方法1.1 试验材料与处理1.1.1 试验材料红富士苹果：2010年5月26日购于新北园春水果批发市场，产地陕西。

1.1.2材料处理：1、冰箱（4℃）贮藏；2、室温（20℃）贮藏（乙烯利0.2%处理3天）1.2 试剂与仪器1.2.1 试剂： 0.4mol/L的氢氧化钠溶液、0.1 mol/L的氢氧化钠溶液、Bacl2溶液、酚酞、0.1mol•L-1的草酸溶液、蒸馏水、0.2 mol·L-1 pH=6.2 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液、0.1 mol·L-1邻苯二酚、5.0%三氯乙酸、0.5%硫代巴比妥酸、H2O20.1mol•L-1愈创木酚1.2.2 仪器：电子天平、培养皿、干燥器、50ml或100ml碱式滴定管、酸式滴定管、试管、研钵、烧杯、锥形瓶、漏斗、电炉、移液管（1ml、5ml，10ml，20ml）、离心机、脱脂棉、电导仪、恒温水浴锅、分光光度计。

金针菇保鲜实用技术一、低温贮藏法(1) 常温保鲜采收后的新鲜金针菇经整理后，立即放入筐、篮中。

其上覆盖多层湿纱布或塑料薄膜，置于冷凉处（自然气温20℃以下），一般可保鲜1-2天。

(2) 简易包装后低温保藏新采收的金针菇经整理后，用低密度聚乙烯薄膜袋（DPE）袋膜厚20毫米，分装，抽真空封口，将包装袋竖立放入专用筐或纸箱内，1-3℃低温冷藏。

可保鲜13天左右。

2.化学保鲜法采用对人畜安全，无毒的化学物质用于浸泡或喷洒在金针菇表面，以达到延长金针菇新鲜的目的。

可用于金针菇保鲜的化学物质有：焦亚硫酸钠、氯化纳、稀盐酸、高浓度的二氧化碳、保鲜剂、抗坏血酸及比久等。

(1) 焦亚硫酸钠喷洒保鲜用0.02%焦亚硫酸钠溶液漂洗金针菇以除去泥沙碎屑，再用0.05%焦亚硫酸钠溶液浸泡10分钟护色，捞出沥干后分装塑料袋中可保鲜数天。

(2) 氯化钠（即食盐）、氯化钙液保鲜用0.2%食盐液加0.1% 氯化钙制成混合浸泡液，将刚采收整理好的金针菇浸泡上述混合液中，要求菇体浸入液面以下30分钟，捞出沥干分装塑料袋中，可保鲜数天二、化学指标1.呼吸强度的测定（1）实验原理：呼吸强度的测定通常是采用定量碱液吸收样品在一定时间内呼吸所释放出来的CO2，再用酸滴定剩余的碱，即可计算出呼吸所释放出来的CO2量，求出其呼吸强度。

单位通常用每公斤每小时释放CO2毫克数（mgCO2/kg·h）表示。

反应如下：2NaOH+CO2→Na2CO3+H2ONa2CO3+BaCl2→BaCO3+2NaCl2NaOH+H2C2O4→Na2C2O4+2H2O测定可分为气流法和静置法两种。

气流法设备较复杂，结果准确。

静置法简便，但准确性较差。

静置法比较简便，不需特殊设备。

测定时将样品置于干燥器中，干燥器底部放入定量碱液，果蔬呼吸释放出的CO2自然下沉而被碱液吸收，静置一定时间后取出碱液，用酸滴定，求出样品的呼吸强度。

（2）实验材料、用具与试剂a.材料：金针菇b.用具滴定管夹，铁架台，酸式滴定管，250mL三角瓶，250mL烧杯，移液管，吸耳球，100mL容量瓶，电子天平等。

苹果出库后生理指标比较测定——果蔬采后生理设计性实验摘要：将红富士苹果进行0.2%的乙烯利喷施处理并放在4℃冰箱内冷藏一星期后，并以4℃冷藏但未经乙烯利处理的相同的苹果进行对照。

在一定条件下的呼吸强度、可滴定酸含量、细胞膜渗透率（电导率）、多酚氧化酶(PPO)活性、丙二醛(MDA)含量、过氧化物酶(POD)活性等生理指标进行了测定。

其结果为呼吸强度有所降低、可滴定酸含量降低、电导率增强、多酚氧化酶(PPO)活性增强、丙二醛(MDA)含量增加、过氧化物酶(POD)活性减弱。

果实成熟度大大提高。

关键词：苹果，乙烯利，指标测定，呼吸强度，酶活性前言：苹果，属于蔷薇科大宗水果，不仅是我国最主要的果品，也是世界上种植最广、产量最多的果品。

其味道酸甜适口，营养丰富，具有降低胆固醇含量的功效，还具有通便和止泻的双重功效，以及降低血压的作用等。

据测定，每百克苹果含果糖6.5～11.2克，葡萄糖2.5～3.5克，蔗糖1.0～5.2克；还含有微量元素锌、钙、磷、铁、钾及维生素Ｂ1、维生素Ｂ2、维生素Ｃ和胡萝卜素等，故有“智慧果”、“记忆果”、“大夫第一药”的美称。

苹果的营养和药用价值由此可窥见一斑。

又因苹果所含的营养既全面又易被人体消化吸收，所以，非常适合婴幼儿、老人和病人食用。

1.试验材料与方法1.1 试验材料与处理1.1.1 试验材料于处理采收后运回实验室，并挑选大小均匀、无病虫害和机械损伤的果实，喷洒0.2%的乙烯利以及未喷洒的置于4℃温度储藏的苹果，定期取样测定相关生理和品质指标1.2 试剂与仪器1.2.1 试剂：0.2%的乙烯利、0.4mol•L-1的NaOH溶液、Bacl2溶液、酚酞、0.1mol•L草酸溶液、蒸馏水、0.2 mol·L-1 pH=6.2 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液、0.1 mol·L-1邻苯二酚、5%三氯乙酸（TCA）、0.5%硫代巴比妥酸、2.0% H2O2、0.1 mol·L-1愈创木酚。

薄膜渗透率的测定摘要根据问题的要求，我们对题目进行恰当的分析，通过合理的假设，们建立微积分数学模型和数据拟合数学模型，求出不同关系量之间的关系。

对于问题，我们运用高等数学和高中物理和生物学的相关知识，同时也用MATLAB进行求解，得出A=0.00006985525148 B=-0.00002994067803 K=0.10117070586401关键词：数据拟合，渗透率，质量守恒一、问题的重述某种医用薄膜有允许一种物质的分子穿透它，从高浓度的溶液向低浓度的溶液扩散的功能，在试制时，需要测定薄膜被这种分子穿透的能力。

测定方法如下：用面积S的薄膜将容器分成体积分别为V A，V B的两部分，在两部分中分别注满该物质的两种不同浓度的溶液。

此时该物质分子就会从高浓度溶液穿过薄膜向低浓度溶液中扩散。

通过单位面积膜分子扩散的速度与膜两侧溶液的浓度差成正比，比例系数K表示薄膜被该物质分子穿透的能力，称为渗透率。

V A=V B=1000cm3,S=10cm2,求容器的B部分溶液浓度 V A的测试结果如下表（其中C j的单位为毫克/cm3）SV B1、2、物质从膜的任何一侧向另一侧渗透的性能是相同的。

三、符号说明：t: 时间CA（t）：t时刻A侧溶液的浓度。

CB（t）：t时刻B侧溶液的浓度。

aA：A侧初始时刻的浓度aB:：B侧初始时刻的浓度Cj:：B侧在j时刻测得的浓度V：体积SK：物质质量的增加四、问题的分析渗透率和浓度差是本文所要求的关系量，我们先用质量守恒建立溶质间的渗透关系，用微分方程，建立微分数学模型来求t时刻薄膜两侧的浓度，体积差。

最后通过数据拟合，得出K的值。

四、模型的建立与求解令时刻t，膜两侧溶液的浓度分别为CA（t）和CB(t), 初始时刻两侧的浓度分别为aA和aB,单位为 mg/cm3. 又设B侧在tj时刻测得的浓度为cj(j=1,2,3……n).在A侧经△t 物质质量增加为：VACA(t+△t)-VACA(t)从B侧渗透到A侧的物质质量为：SK(CB-CA)△t.由质量守恒：V(CA(t+△t)-CA(t))=SK(CB-CA)△t两边同除VA△t 得：dCA/dt=SK(CB-CA)/VA (1)在B侧，经△t 物质增加为：VBCB(t+△t)-VBCB(t)从A侧渗透到B侧的物质质量为：SK(CA-CB)△t由质量守恒定律得：VB(CB(t+△t)-CB(t))=SK(CA-CB)△tdCB/dt=SK(CA-CB)/VB (2)得到薄膜两侧溶液满足微分方程组的初值问题：dCA/dt=SK(CB-CA)/VA (1)dCB/dt=SK(CA-CB)/VB (2)CA（0）=Aa， CB(0)=aB又能有整个容器的溶液中含有该物质的质量不变，即成立VACA(t)+VBCB(t)=常数=VAaA+VbaB (3)即：CA(t)=Aa+VB*Ab/VA-VB*CB(t)/VA (4)将（4）式代入（2 ）式；根据积分中值定理：dCB/dt=SK(Aa+VB*Ab/VA-VB*CB(t)/VA -CB)/VB (5)dCB/dt=a-bCBCB(0)=aB其中a= SK(Aa/VB+Ab/VA)b=SK(1/VA+1/VB);解得：CB(t)=(aAVA+aBVB)/(VA+VB)+(VA(aB-aA)/(VA+VB))*e.^(-sk(1/VA+1/VB)*t 令A=(aAVA+aBVB)/(VA+VB)=0.2B=VA(aB-aA)/(VA+VB)=0.05CB(t)=A+B*E.^(-SK(1/VA+1/VB)*t将已知数据代入,通过数据拟合求参数k ：s=10,VA==VB=1000A=0.00006985525148 B=-0.00002994067803 K=0.10117070586401附录：运用MATLAB：函数一：function f=curvefun1(x,tdata)f=x(1)+x(2)*exp(-0.02*x(3)*tdata) %其中x(1)=a;x(2)=b;x(3)=k;调用函数一：tdata=100:100:1000;cdata=1e-05*[4.54,4.99,5.35,5.65,5.90,6.10,6.26,6.39,6.50,6.59];x0=[0.2,0.05,0.05];x=curvefit('curvefun1',x0,tdata,cdata);f=curvefun1(x,tdata);x,fx =0.00006985525148 -0.00002994067803 0.10117070586401f =1.0e-004 *0.45399226319512 0.49879178593386 0.53538475333677 0.565274474956340.58968887810267 0.60963095346149 0.62591995988254 0.639225081110450.65009291714129 0.65896993960280（注：本资料素材和资料部分来自网络，仅供参考。

杨凯：冷害指数、腐烂率、好果率、失重率、硬度、组织含水量冷害指数的测定：采用5段法。

1－无；2－轻：果面有少量凹陷褐变斑点，直径小于0.5 cm；3－中：果面凹陷、褐变呈烫伤状，斑块增大，直径大于１cm；4－严重：果面褐变面积达1/3以上，果肉、种子褐变，以无商品价值；5－极严重：褐变斑块连成片，果肉、种子褐变。

冷害指数（CI）=∑(n i×i)/n其中，n为果实总数，n i为发生冷害的果实个数，i为冷害级别（1,2,3,4,5）。

好果率的测定：冷害指数≤3级，即为好果。

好果率（%）=好果数*100%/总数失重率的测定：采用称重法。

果实失重率/%=[（贮前果实重量－不同贮藏期的果实重量）/贮前果实重量]×100硬度的测定：用硬度计测定。

组织含水量：迅速取5 g果肉，放入已知质量的称量皿中（事先将称量皿烘干至恒重），称取鲜重。

提前将烘箱温度升至100～105℃。

将称过鲜重的称量皿放入烘箱内，于100～105℃杀青10 min，然后将烘箱温度降到70～80℃，烘至恒重。

取出称量皿放入干燥器中冷却至室温，称重。

重复3次。

刘玲：冷害指数、可溶性固形物(TTS)、可滴定酸（TA）、维生素C、可溶性糖、还原糖冷害指数的测定：采用5段法。

1－无；2－轻：果面有少量凹陷褐变斑点，直径小于0.5 cm；3－中：果面凹陷、褐变呈烫伤状，斑块增大，直径大于１cm；4－严重：果面褐变面积达1/3以上，果肉、种子褐变，以无商品价值；5－极严重：褐变斑块连成片，果肉、种子褐变。

冷害指数（CI）=∑(n i×i)/n其中，n为果实总数，n i为发生冷害的果实个数，i为冷害级别（1,2,3,4,5）。

可溶性固形物（TSS）的测定打开折光仪进行检查，由目镜观察，转动棱镜旋钮，使视野分成明暗两部分。

旋动补偿旋钮，使视野终除黑白两色外，无其它颜色。

转动棱镜旋钮，使明暗分界线在十字线交叉点上。

压挤果肉汁液在检查镜上，通过放大镜在刻度尺上进行读数。

渗透率及其测定渗透率：英文：intrinicpermeability释文：压力梯度为1时,动力黏滞系数为l的液体在介质中的渗透速度。

量纲为[[L2]。

是表征土或岩石本身传导液体能力的参数。

其大小与孔隙度、液体渗透方向上空隙的几何形状、颗粒大小以及排列方向等因素有关,而与在介质中运动的液体性质无关。

渗透率（k）用来表示渗透性的大小。

在一定压差下,岩石允许流体通过的性质称为渗透性；在一定压差下，岩石允许流体通过的能力叫渗透率。

分类：油藏空气渗透率/(mD)气藏空气渗透率/(mD)特高≥1000≥500高≥500～＜1000≥100～＜500中≥50～＜500≥10～＜100低≥5～＜50≥1.0～＜10特低＜5＜1.0绝对渗透率用空气测定的介质渗透率叫绝对渗透率，也叫空气渗透率。

它反映介质的物理性质。

有效渗透率（相渗透率）英文：Effectivepermeability释文：在非饱和水流运动条件下的多孔介质的渗透率。

多相流体在多孔介质中渗流时，其中某一项流体的渗透率叫该项流体的有效渗透率，又叫相渗透率。

相对渗透率多相流体在多孔介质中渗流时，其中某一项流体的相渗透率与该介质的绝对渗透率的比值叫相对渗透率，用百分数表示。

孔隙渗透率是单根孔隙的渗透率,地层渗透率是孔隙渗透率折算到整个地层截面积之上的渗透率。

孔隙渗透率通常很大,但地层渗透率却不大。

地层渗透率是岩石孔隙特性的综合反映。

孔隙半径、孔隙密度和孔喉比对地层渗透率均产生影响。

孔喉比对渗透率的影响很大,喉道大小是制约渗透率的重要因素。

压汞仪是测定岩心孔径分布及计算渗透率等参数最便捷有效的工具。

从压汞仪软件上可以直接得到以下数据：累积孔体积－压力或孔直径曲线累积比表面积－压力或孔直径曲线微分的孔体积－压力或孔直径曲线孔分数－压力或孔直径：孔径分布图颗粒大小分布（MS和SS理论）孔曲率渗透率孔喉比分形维数（表面粗糙度的指标）还可以计算得出以下孔隙结构特征参数：为了对不同类型的岩心的孔隙结构进行定量分析，根据恒速压汞实验结果，结合国内外近十年来恒速压汞的应用成果，我们对相关孔隙结构特征参数的定义如下。