浙江福立FL2200液相色谱仪操作规程和注意事项 (含原理图)
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FL2200高效液相色谱操作流程1.开机:打开泵、检测器和电脑的电源,这个时候仪器自动进入自检,电脑进入启动程序。
2.泵在自检完毕后直接进入工作界面。
3.旋松放空阀,点击清洗,然后确定(流量为3ml/min),运行泵5min。
然后停泵,然后设置流量即可,如按向上键,选中流量对话框,输入1.0ml/min,启动泵开始走流动相。
4.检测器则进入四个选项的对话框,在已知波长的分析方法下,单击检测器键盘上[1]键,进入单波长模式,这个时候则进入单波长工作界面,然后设定检测波长,如在检测器键盘上点击[2]键,然后设置波长为254nm。
若出现报警,则按[1]键,凋零即可。
5.然后打开电脑界面的N2000工作站(双击),然后单击通道1。
6.在走流动相时,发现管路出现气泡。
停泵,再旋松放空阀,然后点击[清洗],确定,等气泡完全赶走以后,再停泵,然后再关上放空阀。
7.建立样品分析目录。
单击[实验信息],填写实验标题,实验人姓名,实验单位,实验简介。
8.点击[方法]。
采样控制:设置采样时间,如设置时间为20min。
文件保存方式:选自动方式-前缀+计数。
文件前缀:3%啶虫脒的测定。
标样保存途径:C:\浙大智达\N2000\标样。
样品保存途径:C:\浙大智达\N2000\样品。
积分:积分参量:面积。
积分方法:外标法。
组分表:谱图显示:时间显示范围根据具体分析时间来设置,电压显示范围类似,点击[采用]。
报告编辑:填写分析结果单位等。
仪器条件:填写相应信息。
9.点击[数据采集]。
点击查看基线,调节合适的电压范围和时间范围。
10.待基线走平后,进样分析。
11.打开N2000离线工作站。
12.点击[打开],双击[液相色谱],然后双击[样品],点击谱图,然后点击确定。
这样图谱就被打开了。
13.手动积分的使用。
点击手动,如果要想删除某个杂质峰,就点击“删除峰”,然后在这个杂志峰上单击,就删除了一个杂志峰。
其他手动积分功能类似。
14.点击[组分表],点击[全选],输入相应的组分名称,然后点击[采用]。
液相色谱仪操作规程1、开机1.1开机前先检查仪器电路是否连接正确,仪器使用流动相正常(流动相使用前必须经过率、超声脱气),保证过滤投在流动相液面下),废液瓶可否继续接液。
检查流路中是否有气泡,如有气泡,须在测定前将其赶出。
1.2按下泵开关power键,仪器进行自检,自检过后,屏幕显示流量设定值、泵压、泵压极限值、泵压最小值。
如果不改变仪器参数,即可按下pump键,泵启动。
1.3待泵压稳定后,按下检测器power键,仪器进行自检,自检过后,屏幕显示检测波长,基线,检测器灵敏度等。
如果不改变仪器参数,就可以打开工作站进行基线查看。
基线稳定后,按zero键进行基线调零,然后即可进行检测。
2.应用2.1、泵流量的设定按func键,光标停留在流量出,改变数值,按enter键,然后按CE键,返回菜单。
2.2、气泡的消除如流路中有气泡,必须将其赶出,具体操作为:先将泵关掉,将DRALN旋钮逆时针旋转180度,然后按PURGE键,PURGE、PUMP中指示灯亮。
进行放空,观察气泡是否排净。
待气泡全部全部排除后,按PURGE键,然后顺时针将DRALN旋钮旋转180度,按PUMP键,泵开始运行。
2.3、检测波长的设定按FUNC键,光标停在波长处,改变数值,按ENTER键,然后按CE键,返回主菜单,检测开始。
2.4、检测进样前先将进样器旋钮旋转30度,取好样品轻轻推入进样空,再将旋钮顺时针旋转30度,工作站自动采样。
3.仪器的保养及维护检测完样品后,要及时对色谱柱进行冲洗,根据柱子的不同选用相应的冲洗液,最后再用纯的有机溶剂冲洗液进行冲洗,同时清洗进样阀、进样器。
4.关机样品检测完成后,首先关闭检测器电源,然后冲洗色谱柱30至50分钟,最后关闭溶剂输送泵电源,再关闭仪器电源。
5.填写仪器使用记录。
液相色谱仪操作规程液相色谱仪操作规程1. 开机准备:1.1启动计算机:打开计算机电源,登陆windows 操作系统1.2启动液相:打开Agilent 1200 各模块电源。
待Agilent 1200 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色),双击“仪器 1 联机”图标,或者“开始->所有程序->Agilent Chemstation->仪器 1 联机”1.3开启工作站:工作站打开,点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图:选择“视图->系统视图”,即可显示仪器控制视图,选择“视图->样品视图”,即可显示样品信息视图1.4 配置流动相:将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数,在溶剂瓶图形上单击鼠标左键,出现图形,点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积1.5冲洗流动相管路:旋开溶液排空阀。
左键单击泵图标,点击“设置泵”,设置“流速”为5ml/min,分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%(点击中灰色按钮,即可开启“%”设置框,输入需要设置的数值百分比后,单击右侧的空白框,A 相即可自动配置为100%-(%B+%C+%D)的百分比),冲洗;对于G1312A/B(二元泵),冲洗A、B 两个通道;对于G1310A(单元泵),冲洗一个通道即可1.6 开启模块:单击每个模块右下角的按钮,可以单独启动模块,或者单击检测器按钮灯未点亮,检测器图形为黄色或者单击“启动”按钮,启动全部模块,检测器灯也将点亮1.7 监视基线:点击按钮或者“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
点击“改变”按钮,选择“可选信号”中需要监视的信号,“添加”到“选定信号中”。
调整“窗口”中“X 范围”,如需要画“0”点基线,请选择“画零线”。
调整Y 轴“Y 轴范围”与“偏移量”或者选择“Y 轴自动调整”来选择合适的监视图形1.8平衡色谱柱、进样分析:关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min),监视压力基线等待平稳后,可以进样采集分析2.样品分析1.1新建完整方法:选择“方法->新建方法”后,点击“方法->编辑完整方法”编辑新方法分别设置自动进样器参数,泵参数,检测器参数,柱温箱参数保存方法:选择“方法->保存方法/方法另存为”保存即时改变的方法:通过在线改变数据采集或者在线/离线改变数据分析参数而变更方法,可以通过选择“方法->保存方法/方法另存为”或者保存新的参数到现在的方法中或者另存为新方法调用方法:通过选择“方法->调用方法”或者调用已有的方法。
FL2200Ⅱ液相操作步骤
⒈流动相使用的甲醇,乙腈、水等使用前需要先使用0.45um或更细的滤膜过滤,再超声
20-30分钟以去除杂质和气泡,使用时将液相滤头放入所用流动相中。
⒉打开液相色谱电源,由上到下,输液泵→柱箱→检测器,输液泵自检需要5s左右。
⒊打开电脑,双击打开FL2200液相操作软件。
⒋首先旋松放空阀,点击系统清洗,采用默认设置清洗,高速排废,以置换管路中原有的
液体及气泡。
系统清洗停止后,旋紧放空阀。
⒌点击软件界面中“新建”,创建仪器分析条件。
⒍启动输液泵,以所用的流动相冲洗色谱柱,此时泵压力会缓慢上升,直到基线走平稳。
⒎采用液体进样针吸取40-50uL待测样品(样品需先过0.2um膜处理),在LOAD状态打进进
样阀20ul样品环中,实现满环进样,将进样器迅速旋至inject状态,系统自动开始测样记录。
⒏测样完成后,冲洗色谱柱,观察基线平稳或者压力显示正常,此时可以先将检测器、柱
箱关闭。
⒐当基线平稳后,停止输液泵,关闭软件。
注意:(1) 如果用无机盐做流动相,最后冲洗时要先用5%-10%的甲醇流动相冲洗,然后用纯甲醇冲洗;
(2)柱塞杆一个月左右定期清洗;
(3)使用前要仔细阅读色谱柱说明,尤其注意色谱柱pH使用范围及不可测定含重金属离子的样品。
液相色谱仪操作规程液相色谱仪操作规程一、安全操作要求1. 液相色谱仪为高压设备,请严格按照操作规程进行操作,避免发生安全事故;2. 操作过程中,严禁将手指或其他物体放入色谱仪中,以免发生伤害;3. 操作人员需穿戴实验服装,并戴上防护眼镜和手套,以确保实验安全;4. 在操作设备之前,必须先了解设备的构造和使用方法,熟悉仪器的功能和原理,避免误操作。
二、仪器准备1. 检查色谱仪是否适宜工作,各部件是否接好;2. 检查色谱柱是否完好,废止已过期的色谱柱;3. 检查试剂、溶剂是否充足,必要时补充;4. 检查移液器、压力表、紫外可见光谱检测器等是否正常运行;5. 检查液氮容器是否充足,如不足应及时补充。
三、操作步骤1. 打开色谱仪电源,等待仪器启动,加载系统软件;2. 在样品管中加入待测样品,以确保测定结果准确;3. 打开移液器,吸取样品,然后将样品注入色谱柱;4. 打开液氮气源,调节液氮气流速,保持液氮温度稳定;5. 打开溶剂泵,调节流速,使溶剂流经色谱柱;6. 打开紫外可见光谱检测器,选择适当的检测波长;7. 调节检测器灵敏度,并记录基线数值;8. 记录样品在色谱图上的峰值时间和峰面积,并进行结果分析;9. 关闭液氮气源,停止溶剂泵;10. 关闭仪器电源,彻底停止运行。
四、仪器维护1. 每次使用后,清洗液相色谱仪的各部件,确保清洁;2. 经常检查仪器的运行状态,及时发现并排除故障;3. 定期更换色谱柱,以确保分析结果的准确性;4. 保持液相色谱仪所在环境的整洁和干燥,避免灰尘和异物对仪器造成损害;5. 仪器长期不使用时,须进行维护保养,包括清洗仪器、润滑部件等。
五、事故处理1. 如发生仪器故障或液氮泄漏等紧急情况,应立即停止操作,关闭电源,并及时报告相关人员;2. 如出现样品泄漏,应立即进行封堵,将有关人员撤离,采取相应的紧急处置措施。
六、操作记录和数据处理1. 所有操作过程和结果应记录在操作日志中,包括样品名称、浓度、样品编号、色谱柱使用情况等;2. 将数据导出并进行统计和分析,得出相应的结论和建议。
福立FL2200-2高效液相色谱操作流程1.样品前处理。
请严格配制流动相、标样和样品溶液,具体注意事项看仪器使用说明书2.打开电脑电源,打开FL2200反控色谱工作站3.打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源开关,仪器自动自检4.仪器自检完毕后直接进入工作界面,此时工作站上相应图标变得可操作5.设定泵A的流量为1mL/min,点击A【泵启动】,如果使用梯度泵,则先填写梯度程序。
此时泵图标由白色变成蓝色,表示泵工作6.设置柱温箱温度,点击【柱箱开】,柱箱自动升到设定温度7.设置检测器波长为实际分析样品所需波长8.设置自动进样器参数,自动进样器的位置参数在出厂时已经设置好,在此只需要设置与样品相关的参数即可9. 待基线稳定,进行进样操作,点击自动进样器启动,自动进样器根据我们实际设定值进行自动进样10. 做样结束,进行清洗A、仪器系统的清洗,如有必要,再执行以下清洗仪器做样完毕后,关闭检测器→停泵→把吸滤头放于甲醇:水=10:90的溶液中→打开“放空阀”→点击“清洗”→清洗2~5分钟→停泵→关闭“放空阀”→调节流量为1.00ml/min→启动泵→清洗系统30min(具体视柱子在冲洗时压力是否正常,如一般10%甲醇水清洗稳定的压力在10~11之间,要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um],如果大于该值,说明冲洗不完全,请继续清洗)→压力正常→把吸滤头放于纯甲醇中→冲洗30min(具体视柱子在冲洗时压力是否正常,如一般甲醇清洗稳定的压力在5~7之间,要求色谱柱为[C184.6*250mm 5um],如果大于该值,说明冲洗不完全,请继续清洗)→清洗完毕→关闭泵电源。
B、清洗进样针、进样器做样完毕后,请及时清洗自动进样器进样针、进样器。
C、清洗柱塞杆做样结束后,定时间清柱塞杆,清洗柱塞杆一般用10%甲醇水溶液清洗30ml 11. 清洗完毕,关掉仪器和电脑的电源开关。
1.目的: 建立一个FL2200型液相色谱仪的标准操作规程, 以规范其操作。
2.范围: 本规程合用于本公司的FL2200型液相色谱仪标准操作。
3.职责:仪器操作者:负责该仪器的操作、清洁, 并及时向上级、计量管理员报告仪器的异常情况;仪器维护保养人: 负责仪器定期清洁、保养工作;计量管理员:负责维护该仪器的正常运营, 指导并协助培训仪器的操作、保养, 及时解决设备的异常情况。
4.操作程序:4.1: 基本规定4.1.1安装仪器的房间应通风良好,否则会引起中毒或不良刺激,也也许引起火灾,由于液相色谱仪所使用的溶剂大多是易燃且有毒的.4.1.2严禁在仪器附近吸烟,使用明火或其他火源,或安装其他任何发射或也许发射火花的设备,房间内应配备灭火装置或设备,以备紧急时防止火灾的发生.4.1.3房间内应配备自来水龙头或其他冲洗设备.假如溶剂进入眼睛或有毒溶剂溅到皮肤上,应立即用清洁的水冲洗.4.1.4避免在有腐蚀性气体或大量粉尘的地方安装本仪器,否则会影响仪器正常运转,并缩短仪器使用寿命.4.1.5实验室温度需控制在20℃左右,建议安装空调.4.1.6电源电压为交流220V,功率为200W;房间内有良好的接地线.4.2开机4.2.1开机前准备配制流动相,配好后用有机膜过滤并超声15分钟4.2.1.1配制乙腈:水=1:9;4.2.1.2配制乙腈:缓冲盐(称取2.18g辛烷磺酸钠和1.92柠檬酸溶解在1000ml娃哈哈水中)=1: 94.2.2打开泵、检测器和电脑, 启动工作站;设立检测样品所需的各种条件;点击新建,创建项目, 设立项目名称、样品名称、实验人等, 点下一步, 设定分析方法, 下一步, 设定仪器条件, 下一步, 设定检测器, 下一步, 设定仪器条件, 下一步, 项目创建结束, 完毕。
4.2.3上流动相停泵状态下→把不锈钢吸滤头放于10%乙腈水里→打开放空阀→点击“系统清洗”→5分钟后泵停止→关闭放空阀→按“泵启动”→10%乙腈水过渡20分钟→按“泵停止”→把不锈钢吸滤头放于流动相中→打开放空阀→点击系统清洗→5分钟后泵停止→关闭放空阀→点击“泵启动”→稳定30分钟→查看基线(点击工作站界面的开始, 然后立即点击取消)→等基线在此状态下成一稳定的直线, 说明已经走平→可直接进样。
P200Ⅱ高效液相色谱仪操作规程1、开机前的注意事项:1)查看仪器使用记录,了解仪器状况。
2)所有存放流动相和样品的容器必须经常清洗保持洁净,所有流动相、样品必须经过过滤;流动相必须充分的超声脱气。
3)未使用完的流动相如需继续使用必须重新过滤、脱气。
2、仪器准备操作规程1)打开P200Ⅱ高压恒流泵后部的电源开关,设定仪器操作参数。
启动高压恒流泵运行,待系统压力稳定后可准备更换流动相。
2)打开UV220Ⅱ紫外-可见检测器后部的电源开关,根据需要设定仪器操作参数。
待氘灯点亮后按下检测器前面板的自动回零键。
3)打开计算机和EC2000色谱数据工作站前面板的电源开关,并启动EC2000色谱数据工作站软件。
4)用5 : 95的甲醇:水置换系统中的甲醇:首先按下高压恒流泵前面板的停机键停止泵运行,然后将流动相的吸液过滤头从甲醇溶剂中取出放入5 : 95的甲醇:水溶剂瓶中;打开排空阀旋钮并按下运行键不放,快速排出液体约20毫升左右后再松开运行键并关闭排空阀。
待系统压力稳定、基线平稳后置换过程完毕。
5)用准备好的流动相置换系统中的5 : 95的甲醇:水,操作方法同上。
6)根据分析样品需要设定检测器的检测波长,等待系统压力和基线稳定后按下检测器前面板的自动回零按键。
即可准备进行样品分析。
3、样品分析操作规程1)将EC2000色谱数据工作站软件设定为等待采集状态。
2)将六通进样阀搬到取样位置,用进样器抽取适量过滤好的样品;将进样针插入进样阀底部。
缓慢将样品推入定量环;然后快速将进样阀搬至进样位置。
3)待样品各组分峰出完后可停止数据采集并保存色谱数据。
4、仪器维护操作规程1)样品分析工作完成后或是分析过程中更换分析样品种类时,将进样阀搬至进样位置;用仪器所配的进样口冲洗头用纯水自进样针孔冲洗进样阀,2)分析工作完成后重复仪器准备阶段第4)步操作:用5 : 95的甲醇:水冲洗仪器和柱子(如果分析试验使用的流动相中含有缓冲盐这一步操作是绝对不可省略的)。
FL2200Ⅱ高效液相色谱仪操作规程和注意事项操作规程:1.样品前处理。
请严格按要求配制流动相、标样和样品溶液,具体注意事项看仪器使用说明书;2.打开电脑电源,打开FL2200反控色谱工作站;3.打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源开关,仪器自动自检;4.仪器自检完毕后直接进入工作界面,此时工作站上相应图标变得可操作;5.设定泵A的流量为1mL/min,点击A【泵启动】,如果使用梯度泵,则先填写梯度程序。
此时泵图标由白色变成蓝色,表示泵工作;6.设置柱温箱温度,点击【柱箱开】,柱箱自动升到设定温度;7.设置检测器波长为实际分析样品所需波长;8.设置自动进样器参数,自动进样器的位置参数在出厂时已经设置好,在此只需要设置与样品相关的参数即可;9. 待基线稳定,进行进样操作,点击自动进样器启动,自动进样器根据我们实际设定值进行自动进样;10. 做样结束,进行清洗;A、仪器系统的清洗,如有必要,再执行以下清洗仪器做样完毕后,关闭检测器→停泵→把吸滤头放于甲醇:水=10:90的溶液中→打开“放空阀”→点击“清洗”→清洗2~5分钟→停泵→关闭“放空阀”→调节流量为1.00ml/min→启动泵→清洗系统30min(具体视柱子在冲洗时压力是否正常,如一般10%甲醇水清洗稳定的压力在10~11之间,要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um],如果大于该值,说明冲洗不完全,请继续清洗)→压力正常→把吸滤头放于纯甲醇中→冲洗30min(具体视柱子在冲洗时压力是否正常,如一般甲醇清洗稳定的压力在5~7之间,要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um],如果大于该值,说明冲洗不完全,请继续清洗)→清洗完毕→关闭泵电源。
B、清洗进样针、进样器做样完毕后,请及时清洗自动进样器进样针、进样器。
C、清洗柱塞杆做样结束后,定时间清柱塞杆,清洗柱塞杆一般用10%甲醇水溶液清洗30ml11. 清洗完毕,关掉仪器和电脑的电源开关仪器原理介绍1、色谱分析原理:使用外力使含有样品的流动相(气体、液体或超临界流体)通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
FL2200Ⅱ高效液相色谱仪操作规程和注意事项操作规程:
1.样品前处理。
请严格按要求配制流动相、标样和样品溶液,具体注意事项看仪器使用说明书;
2.打开电脑电源,打开FL2200反控色谱工作站;
3.打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源开关,仪器自动自检;
4.仪器自检完毕后直接进入工作界面,此时工作站上相应图标变得可操作;
5.设定泵A的流量为1mL/min,点击A【泵启动】,如果使用梯度泵,则先填写梯度程序。
此时泵图
标由白色变成蓝色,表示泵工作;
6.设置柱温箱温度,点击【柱箱开】,柱箱自动升到设定温度;
7.设置检测器波长为实际分析样品所需波长;
8.设置自动进样器参数,自动进样器的位置参数在出厂时已经设置好,在此只需要设置与样品相关
的参数即可;
9. 待基线稳定,进行进样操作,点击自动进样器启动,自动进样器根据我们实际设定值进行自动进
样;
10. 做样结束,进行清洗;
A、仪器系统的清洗,如有必要,再执行以下清洗
仪器做样完毕后,关闭检测器→停泵→把吸滤头放于甲醇:水=10:90的溶液中→打开“放空阀”
→点击“清洗”→清洗2~5分钟→停泵→关闭“放空阀”→调节流量为1.00ml/min→启动泵→清洗系统30min(具体视柱子在冲洗时压力是否正常,如一般10%甲醇水清洗稳定的压力在10~11之间,要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um],如果大于该值,说明冲洗不完全,请继续清洗)→压力正常→把吸滤头放于纯甲醇中→冲洗30min(具体视柱子在冲洗时压力是否正常,如一般甲醇清洗稳定的压力在5~7之间,要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um],如果大于该值,说明冲洗不完全,请继续清洗)→清洗完毕→关闭泵电源。
B、清洗进样针、进样器
做样完毕后,请及时清洗自动进样器进样针、进样器。
C、清洗柱塞杆
做样结束后,定时间清柱塞杆,清洗柱塞杆一般用10%甲醇水溶液清洗30ml
11. 清洗完毕,关掉仪器和电脑的电源开关
仪器原理介绍
1、色谱分析原理:使用外力使含有样品的流动相
平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
利用
样品中各组份在两相(固定相、流动相)中具有
不同程度的作用(吸附作用、分配作用)。
与固定
相作用强的组份随流动相流出的速度慢,反之,
与固定相作用弱的组份随流动相流出的速度快。
由于流出的速度的差异,使得混合组份最终形成
各个单组份的“带(band)”或“区(zone)”,对
依次流出的各个单组份物质可分别进行定性、定
量分析。
1906年,Tsweet发现色谱分离现象
2、高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压
输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米
塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。
3、高效液相色谱(HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液
体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但
是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。
HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系
统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压高效液相色
谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。
HPLC应用非常广泛,几乎遍及定量定
性分析的各个领域。