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Rh阴性血型鉴定及其临床意义【摘要】目的常规检测rh阴性血型及其抗体，预防输血溶血反应的发生。
方法对在我院进行输血的15000例患者通过抗d（igm）血型定型试剂进行rh（d）血型抗原检测，检测rh阴性血中的抗体。
结果 15000例子患者通过检测发现，rh（d）阴性为60例，rh（d）阴性率为0.4%，其中检出rh血型免疫性抗体12例。
结论在对患者进行输血时，常规进行rh阴性血型鉴定及其抗体的筛查，能够预防溶血性反应的发生。
【关键词】 rh阴性；输血；临床意义doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.06.722 文章编号：1004-7484（2013）-06-3455-01rh阴性血型是rh血型系统中的一种，在分类上可将其分为rh阴性a型、rh阴性b型、rh阴性o型、rh阴性ab型[1]。
rh阴性血型在临床安全输血以及预防新生儿溶血病中具有重要的临床意义。
大多数rh血型不合的输血反应及新生儿溶血病都是由于抗d抗体引起的。
因此为确保临床输血安全，有效防止急、慢性溶血性输血反应的发生，在输血前检查受血者的rh血型就显得非常重要[2]。
2009年5月以来，在我院进行输血的患者共15000例，均进行了rh阴性血型鉴定，现就结果论述如下。
1 资料与方法1.1 一般资料 2009年5月以来，在我院进行输血的患者共15000例，其中男性8000例，女性7000例，年龄15-65岁，平均年龄40岁，所有患者均来自同一地区。
1.2 方法 rh血型的检测方法：配制红细胞悬液，配制的浓度在2%-5%之间，将rh抗-d单克隆抗体滴入标有rh的试管内，然后滴入1滴2%-5%红细胞盐水悬液，将上述液体混合均匀，用离心机将其分离，离心机的速度控制在3500r/min，时间大约15分钟，取出后，将试管轻轻摇匀，肉眼观察是否有凝集反应，凝集反应发生则为阳性，无反应则为阴性，对阴性者再用3种不同批号的试剂做酶法和间接抗人球蛋白法试验确证；rh阴性抗体的检测：在筛查出的rh阴性血样中用筛选红细胞（i、ⅱ、ⅲ）和采用自身细胞通过盐水法、聚凝胺法和间接抗人球蛋白试验筛查其抗体，对所有rh阴性标本的标本进行不规则抗体的检测。
Rh血型系变异型检测及临床意义目的了解德州地区献血人群Rh血型分布及表现型，能及时的为临床用血提供参考依据。
方法实验室血型检测不仅是筛选出健康、安全的血源的一项重要指标，而且实际上也是输血前检验，所谓血型相容性试验的一部分，采供血机构准确测定献血者的ABO、RhD及相关抗体，同样是临床输血安全的前提。
对一个地区献血者血型分布调查可以让采供血机构对本区各型血源的现状心中有数。
结果保障了ABO、RhD阴性血型临床用血的及时、安全、有效。
结论建立了一支相对稳定的RhD阴性献血者队伍，科学、合理地使用这一宝贵的资源，可有效指导安全输血工作。
Abstract：Objective To understand the Rh blood type distribution and phenotype in blood donation population of Dezhou Region.Methods Blood group test in laboratory is not only a important index to offer healthy and safe blood for clinic，but also a test before blood transfusion，as a part of the blood compatibility test，blood transfusion servicesaccurately determine the ABO and RhD andrelative antibodies is also the safety precondition of clinical blood transfusion. A survy of blood donation population’s blood type distribution in a region make blood transfusion services know fairly well tovarious types of blood in this region. Results This could ensure the ABO and theRhD negative blood that can timely，safe and effective offer for clinic. Conclusion In order to set up a relatively stable team of RhD negative blood donors，using this precious resource scientifically and rationally can guide the safety blood transfusion effectively .Key words：RhD blood group；blood type；Typeblood group；national rare blood bank；Transfusion blood；AutotransfusionRhD血型系统是仅次于ABO血型系统的最具有临床价值的血型抗原，由45种的血型系统组成，当人的红细胞表面存在一种D抗原时，称为Rh阳性。
RhD(-)血型中Del的检测及意义
施顺秋;庄爱周
【期刊名称】《实验与检验医学》
【年(卷),期】2006(024)002
【摘要】目的了解吸收放散法是否可用于RhD(-)血型中的吸收放散弱D型(Delution,Del)Delution的检测及Del在临床输血中的意义.方法使用吸收热放散法对43例初筛RhD(-)的血样进行了Del的检测.结果43例RhD(-)血中检出了6例Del.结论常规血清学RhD(-)个体中存在着Del,输入Del血后机体可能被免疫,故每个RhD(-)个体都应用吸收放散试验来进行确认.
【总页数】2页(P140,150)
【作者】施顺秋;庄爱周
【作者单位】325027,浙江省温州医学院附属第二医院输血科;325027,浙江省温州医学院附属第二医院输血科
【正文语种】中文
【中图分类】R4
【相关文献】
1.Rh阴性血型者Del表型和RhD基因的检测 [J], 何吉;傅启华;金蕾;洪小珍;许先国;严力行
2.RhD阴性Du和Del检测及临床意义 [J], 翟菊萍;王雪明;邵惠江;奚为乎
3.无锡市60名RhD(-)供血者Del的检测及意义 [J], 郭永芳;华敏玉;陆慧娟;姜健
4.河北地区汉族人群RhD阴性血型中Del基因型分布 [J], 乔芳;石翠英;何路军;王
振雷;赵志弘;刘敬闪;张虹;田亚娟
5.RhD抗原初检阴性供血者及患者Del检测的临床意义 [J], 宋倩;郝一文
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RhD红细胞阴性确认与临床输血的关联目的研究分析RhD红细胞阴性确认实验结果，探讨RhD抗原在临床输血工作中的重要意义。
方法血站检测实验室217例无偿献血者初筛为阴性的标本用盐水介质法进行复初筛，对复初筛为阴性的标本采用间接抗球蛋白试验检测出弱D和部分D表型。
结果217例初筛阴性的标本检出212例为RhD（-）（97.70%），5例确定为弱D或部分D型（2.30%）。
结论RhD抗原呈复杂变异性，RhD红细胞阴性确认与防范输血风险，避免由RhD抗原引起的溶血性输血反应息息相关。
Abstract：Objective Research and analysis the results of confirming RhD negative red blood cells，toexplore the significance of RhD antigent in clinical transfusion. Methods By using saline medium method to experiment 217 RhD negative samples from blood donors in blood testing Laboratory again，then by indirect antiglobulin test to detect weak and part D. Results 212 of 217 samples were RhD negative（97.70%），and 5 samples were identified as weak D or part D（2.30%）. Conclusion RhD antigens is complicated and also with a variation of characteristics，the confirm of RhD negative red blood cells and to pvevent the risk of blood transfusion are associated with the hemolytic transfusion reaction which caused by RhD antigen.Key words：RhD negative red blood cells；Experimental results confirm analysis；Clinical transfusionRh血型系統是最复杂和多态的红细胞血型系统，临床输血重要性仅次于ABO血型系统，D抗原是Rh血型系统中50个不同血型抗原[1-2]中免疫原性最强的一个血型抗原，常能引起溶血性输血反应和新生儿溶血症（HDN）而备受关注。
RhD红细胞阴性确认及临床应用问题的探讨通过对全市351名初筛阴性的RhD血型供应者进行血型血清学RhD确认,并对确认后的RhD血型供应者进行联络、建档且对其血液进行长期保存。
从初筛到确认对每一名供血者进行筛查,使本站建立了一支比较强大的稀有血型队伍,这支队伍的建设为临床在稀有血型供应方面提供了保障。
该方法经过近10年的临床实践应用,保证了临床RhD血液的供应并得到临床医护人员的首肯及RhD献血者的好评。
标签：RhD血型;红细胞确认;临床输血应用Rh血型是所有红细胞血型系中最复杂的血型系统,重要性仅次于ABO系统。
目前已知的Rh血型系主要有5种抗原,分别是D、C、c、E、e[1]。
其中D抗原性最强,与临床输血联系比较密切[2]。
RhD抗原在实验室中有些表现为D变异型,不是真正意义的RhD阴性。
假如这些D变异型血液输给RhD阴性受血者,就有可能造成输血不良反应的发生[3]。
目前本站对每一位初筛为RhD阴性供血者都要做RhD阴性确认。
2001~2009年本血站共检出RhD阴性供血者351名,其中有3名为D变异型,有2名血清中已产生了抗-D抗体。
近10年来本站在稀有血型临床供应中都是有求必应,很好地满足了临床需求,受到了临床及社会的一致好评。
现将经验介绍如下:1 一般资料1.1 标本来源2001～2009年本血站全部无偿献血者。
1.2 仪器与试剂日本久保田血型血清学专用离心机,37℃恒温水浴箱,IgM抗-D试剂为IgG 抗-D(Canada)3份不同批号或不同厂家抗血清、抗人球蛋白试剂(上海血液生物医药有限责任公司);0.9%NaCl溶液(山东威高集团医用高分子制品股份有限公司);深低温冰箱(日本三洋);复方甘油溶液(北京博德桑特输采血器材材料公司) 。
2 方法与结果本站化验室对每位无偿献血者都进行RhD初筛[1],初筛为D阴性的送交本站血型室进行确认(表1)。
对确认为RhD阴性的献血者如暂时没有需求,经过加工进行深低温储存,同时还建立了详细的RhD阴性献血者档案,并且成立了RhD阴性者之家,血站牵头每年定期组织至少1次的联谊活动,一旦紧急需要随时与他们联系采血。
Rh弱D、Del的检测及意义【摘要】目的:探讨初筛为Rh(D)阴性样本中弱D、Del的检测及临床意义。
方法: 采用常规血清学方法初筛Rh（D）血型，用微柱凝胶抗人球蛋白试验检测弱D，用吸收放散试验检测Del，用PCR-SSP 法检测样本RhD基因8个外显子结构。
结果: 常规血清学初筛Rh(D)阴性60例中经微柱凝胶抗人球蛋白试验确认为弱D4例，占6.67%；56例Rh（D）阴性标本经吸收放散试验后确认13例为Del，占21.67%；对其中2例弱D和5例Del标本的D基因8个外显子检测都完整存在，排除了弱D、Del的10例Rh（D）阴性标本其基因检测有完全缺失和部分缺失两种可能。
结论: 为了临床输血安全，常规血清学检测Rh（D）阴性者，应当再用抗人球蛋白试验或吸收放散试验检测是否为弱D或Del。
【关键词】 Rh血型吸收放散试验 D抗原弱D DelRh血型在临床输血中具有重要意义，也是人类红细胞血型系统中最为复杂、最具多态性的系统。
D抗原抗体与输血的关系仅次于ABO 血型，50%～75% Rh（D）阴性人接受Rh（D）阳性的血可能产生抗-D，导致免疫性输血反应。
为了减少输血反应，正确检定Rh（D）阴性个体显得非常重要，现将我们的检测结果报告如下。
1 资料和方法1.1 对象 2006年1月-2007年4月在本院用单克隆抗-D检测为Rh(D)阴性的60例样本。
1.2 试剂和仪器1.2.1 RhD试剂：A、B2种人源抗-D血清，由本科提供，抗-D 效价为1：256和1：128；a、b、c三种单克隆（IgM+IgG）抗-D分别为加拿大Dominion公司（批号为NDMG04203）、德国Biotest公司（批号为1210905）和法国DIAGAST公司（批号为410000）产品，由长春博德生物技术有限责任公司提供，均在有效期内使用。
1.2.2 DNA制备：用TakaRa（大连宝生物工程有限公司产品）基因组DNA抽提试剂盒，扩增RhD基因2～7、9、10共8对外显子。
RhD阴性血型抗原分析在临床输血安全中的作用与意义摘要】目的：探讨RhD阴性血型抗原分析在临床输血安全中的作用与意义。
方法：选取我院患者并经过确诊的56例RhD阴性血型患者，对RhD阴性血型抗原进行分析。
结果：RhD阴性患者血型抗原分布中O型有25例，占比最大为44.6%；本次实验研究共检测出DEL型12名，占21.4%（12/56），其中，O型有5例，占比最大为41.7%（5/12）。
结论：分析RhD阴性血型抗原能够避免血液之间产生同种抗体，预防溶血性输血，从而提高患者的临床输血安全性。
【关键词】RhD阴性；抗原；输血安全【中图分类号】R55 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）23-0173-02患者的临床治疗中输血是十分普遍的现象，而选择合适的血型则是确保输血安全的基础。
在红细胞血型系统中Rh血型系统是目前已知的最重要血型系统之一，在临床上其应用价值与ABO血型相似[1]。
当红细胞上无Rh凝聚原时将其称为阴性。
而c、E、e5、D、C则是系统中具有免疫原性的抗原，极易引发溶血性贫血问题。
对我院56例RhD阴性血型患者进行抗原分析，以提高对临床输血治疗的指导意义。
1.资料与方法1.1 一般资料收集2013年1月到2016年12月我院2000例患者经过确诊的56例RhD阴性血型患者。
所有RhD阴性血型患者均已自愿签署知情同意书。
其中，男性患者有31名、女性患者25名，年龄区间为20～65岁、均值为（47.77±3.55）岁。
1.2 方法1.2.1仪器与试剂IgG抗-D血清、IgM抗-D、C、c、E、e血清和多抗人球蛋白试剂均为上海血液生物医药有限责任公司产品，2个不同厂家的IgG+IgM的抗-D血清分别为法国Diagast公司和德国Biotest公司产品；聚乙二醇试剂为长春博得生物技术有限公司产品，乙醚为常熟市杨园化工有限公司生产；O型RhD阳性RBC悬液(本室自配)；细胞洗涤离心机(日本久保田公司，型号KA-2200)，开口浴槽循环器(优莱博技术北京有限公司，型号MB-19）1.2.2检测分析RhD阴性试验：严格参照检测仪器的使用说明书进行操作，采用白瓷板法快速检测并借助IgM抗-血清来确认是否出现凝集现象，以此来判断是否为阴性。
３１２ＣｈｉｎＪＨｅｍｏｒｈ．２００７；１７（２）ＲｈＤ阴性Ｄｕ和Ｄｅｌ检测及临床意义
翟菊萍，王雪明，邵惠江，奚为乎
（苏州大学附属第一医院检验科，江苏苏州２１５００６）
摘要：目的探讨初筛为ＲｈＤ阴性样本中Ｄ”及Ｄｅｌ的检测及其临床意义。
方法采用常规血清学方法初筛ＲｈＤ，用抗人球蛋白试验（ＡＨＧ）检测Ｄ”，应用三氯甲烷，三氯乙烯吸收放散法检测Ｄｅｌ。
结果在１００例ＲｈＤ阴性中经ＡＨＧ实验确认为Ｄｕ型者ｌ例（１％），吸收放散试验确认Ｄｅｌ型者８例（８％）。
结论Ｄ”、Ｄｅｌ型血清学筛选容易漏检为ＲｈＤ阴性，为了临床输血安全，经常规血清学检测ＲｈＤ阴性者，应当再用间接抗球蛋白试验及吸收放散实验检测是否为Ｄｕ及Ｄｅｌ。
关键词：Ｒｈ血型；Ｄ“；Ｄｅｌ；吸收放散试验
中图法分类号：Ｒ４５７．１２文献标识码：Ａ文章编号：１００９—８８１Ｘ（２００７）０２—３１２—０２
１９３９年，Ｌｅｖｉｎｅ和Ｓｔｅｔｓｏｎ发现了人类Ｒｈ血型系统，研究证明该系统是临床最重要的血型系统之一，也是人类２３个红细胞血型系统中最复杂最富有多态性的系统，该系统抗原抗体不匹配能引起溶血性输血反应、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血【Ｉ】，新生儿溶血病在临床上发病率仅次于由ＡＢＯ血型抗体引起的溶血性疾病，但由它引起的溶血病病情比由ＡＢＯ血型抗体引起的溶血病病情更加严重冈，Ｄ抗原在Ｒｈ系统中免疫原性最强，有文献报道，ＲｈＤ阴性个体输人１个单位（２００ｍＬ）ＲｈＤ阳性血液后，产生同种抗体的概率为５０％一７５％ｔ３棚，因此人们对Ｒｈ血型Ｄ抗原的研究倍加重视，现将我们的研究结果报道如下。
１材料与方法
１．１检测对象２００５年１０月～２００６年０６月苏大附一院门诊、住院病人及苏州市红十字血站献血员，均经常规血型血清学方法检测后初筛的ＲｈＤ阴性者共１００例。
１．２材料单克隆抗Ｄ血清（ＩｇＭ＋ＩｇＧ）购自德国ＢｉｏｔｅｓｔＡＧ公司。
“０”型ＲｈＤ阳性试剂红细胞：随机取已知ＲｈＤ阳性“０”型红细胞３份，洗涤３次后配成５％红细胞悬液。
离心机：购自瑞士ＤｉａＭｅｄ公司。
微柱凝胶反应卡购自瑞士ＤｉａＭｅｄ公司。
不完全抗Ｄ（ＩｇＧ）由上海市血液中心提供。
微柱凝胶血型卡：购自长春博迅公司。
１．３方法
１．３．１ＲｈＤ常规血型血清学初筛按照微柱凝胶血型卡操作说明书操作。
１．３．２Ｄ”检测将初筛ＲｈＤ阴性者的红细胞与单克隆抗Ｄ（ＩｇＭ＋ＩｇＧ）及不完全抗Ｄ血清（ＩｇＧ）做ＡＨＧ，设阴性及阳性对照。
抗Ｄ血清５０¨Ｌ及５％被检红细胞５０肛Ｌ加入微柱凝胶反应卡中，３７℃孵育３０ｍｉｎ，１０００ｒｐｍ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，观察结果。
与２种抗Ｄ全部凝集或部分凝集者判定为Ｄ”，并重复试验验证。
１．３．３Ｄｅｌ检测确证Ｒｈ阴性标本作三氯甲烷，三氯乙烯吸收放散试验【５】，将被检ＲｈＤ阴性压积红细胞与不完全抗Ｄ血清按１：１混匀，３７℃孵育Ｉｈ，然后洗涤６次，末次洗涤后移取部分上清液至另外标记试管中，其余弃尽上清液，加入与之等体积的生理盐水，再加入与之等量的三氯甲烷／三氯乙烯（１：１）混合液，加盖振摇１０ｓ，倒置ｌｍｉｎ使之混匀，开盖后３７℃水浴５ｍｉｎ；１０００ｒｐｍ／ｍｉｎ离心５ｒａｉｎ，取上层深红色放散液１００ＩＬＬ加５％“０”ＲｈＤ阳性红细胞５０斗Ｌ，３７℃孵育３０ｒａｉｎ，生理盐水洗涤１次，末次洗涤后弃尽上清液，加入少量稀释液，加人微柱凝胶反应卡中，１０００ｒｐｍ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，观察结果，阳性者经重复试验验证后确定为Ｄｅｌ型。
２结果
对初筛为Ｄ阴性的１００例标本以不完全抗Ｄ（ＩｇＧ）及单克隆抗Ｄ（ＩｇＭ＋ＩｇＧ）作ＡＨＧ，１例阳性（１％），为Ｄ“。
ＡＨＧ阴性标本９９例，经三氯甲烷／三氯乙烯吸收放散试验，检出Ｄｅｌ型８例（８％）。
３讨论
临床上凡带有Ｄ抗原者被称为ＲｈＤ阳性，不带
收稿Ｅｔ期：２００６—１１－０６作者简介：翟菊萍（１９７８一），女，江苏苏州人，医学学士，技师，主要从事临床输血工作。
中国血液流变学杂志．２００７；１７（２）３１３
Ｄ抗原者被称为ＲｈＤ阴性。
ＲｈＤ阴性在中国汉族人中占０．２％一０．５％。
ＲｈＤ阴性的个体绝大多数缺失ＲｈＤ基因，但某些ＲｈＤ阴性个体的产生是由于ＲｈＤ基因部分缺失或Ｄ基因突变后产生的，通常称为Ｄ“，可用ＡＨＧ检出。
另有一些ＲｈＤ阴性是由于Ｄ基因完整存在而Ｄ抗原数目减少，常用吸收放散试验来证明。
通常Ｄ阴性的红细胞上带有微弱的Ｄ抗原，称为Ｄ洗脱阳性（Ｄｅｌ）。
本组１００例初检为ＲｈＤ阴性的标本，经ＡＨＧ法检出Ｄ“１例０／ｌｏｏ），经吸收放散试验检出Ｄｅｌ８例（８／９９）。
该结果与国内相关报道Ｄｅｌ为１３．２％一３２．８％相比要低。
ＲｈＤ检测具有非常重要的临床意义，是由于ＲｈＤ阴性经免疫后产生抗Ｄ抗体的机率很高，为５０％一７５％【３一，且在预防迟发性溶血性输血反应及新生儿溶血病的发生起着重要作用。
当ＲｈＤ阴性，Ｄ“作为受血者时，经Ｄ阳性的红细胞免疫后有可能产生抗Ｄ抗体，而Ｄｅｌ的人是否会产生免疫，一般研究认为不会产生，原因为Ｄｅｌ则基本保留ＲｈＤ基因嘲。
所以Ｄ”作为受血者时应视作Ｄ阴性。
当Ｄ“，Ｄｅｌ作为供血者时，其与Ｄ抗原～样具有免疫原性，应视作Ｄ阳性。
所以，供者血液做Ｄ阴性确证试验是必须的。
一直以来，ＡＨＧ试验是ＲｈＤ阴性确认的最终手剧６１。
然而研究说明ＡＨＧ试验鉴定的ＲｈＤ阴性中，改用更敏感的三氯甲烷，三氯乙烯吸收放散试验仍有相当一部分个体可检出Ｄｅｌ。
本研究中我们将深红色放散液与“０”型ＲｈＤ阳性红细胞孵育后洗涤一
（上接第３１１页）
参考文献
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另外国内一些实验室已建立ＰＣＲ方法检测Ｄｅｌ基因型【．７１，操作简单快捷，但是ＰＣＲ方法可能会出现假阳性结果，亦可能因基因的突变或变异，造成错误的结果，同时还受一定的仪器设备条件的限制，所以临床还不能普遍推广使用。
目前，全国大部分血站提供给临床的ＲｈＤ阴性血液，由于没有检测Ｄｅｌ或用ＰＣＲ方法检测ＲｈＤ基因及Ｄｅｌ基因型，给ＲｈＤ阴性患者的输血带来一定的隐患。
（感谢苏州市红十字血站提供部分标本）
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