实验、磺胺嘧啶的重氮化滴定(永停滴定法)

一、实验目的1. 了解药物杂质检查的意义。

2. 掌握杂质检查的原理和方法。

3. 掌握杂质限量的计算方法。

二、实验原理磺胺嘧啶钠是一种广谱抗菌药物，主要用于治疗敏感菌引起的各种感染。

在进行磺胺嘧啶钠的质量控制时，杂质检查是一个重要的环节。

本实验通过一系列的化学试剂和实验方法，对磺胺嘧啶钠中的杂质进行定性、定量分析，以确保药品的质量符合国家标准。

三、实验仪器及材料1. 试剂：蒸馏水、甲基红、溴麝香草酚蓝、硝酸、硝酸银、氯化钡、草酸铵、醋酸、对氨基苯磺酸--萘胺、锌粉、碱性碘化汞钾、氯化铵、氢氧化钙、硫酸、高锰酸钾、醋酸铵、盐酸、硫代乙酰胺、氢氧化钠、甘油。

2. 仪器：烧杯，50ml试管，50ml具塞量筒，电子天平，电炉，恒温水浴箱、烘箱。

四、实验方法与步骤1. 酸碱度取磺胺嘧啶钠样品10ml，加入甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加入溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

2. 氯化物、硫酸盐与钙盐取磺胺嘧啶钠样品，分置3支试管中，每管各50ml。

- 第一管中，加入硝酸5滴与硝酸银试液（0.1mol/L）1ml；- 第二管中，加入氯化钡试液（取氯化钡的细粉5g，加水使溶解成100ml）2ml；- 第三管中，加入草酸铵试液（草酸铵3.5g，加水使溶解成100ml）2ml；观察3支试管，均不得发生浑浊。

3. 重金属取磺胺嘧啶钠样品，加入硫代乙酰胺试液1ml，观察是否产生黄色沉淀。

4. 异常毒性物质取磺胺嘧啶钠样品，加入氢氧化钠试液1ml，观察是否产生沉淀。

5. 杂质限量计算根据实验结果，对杂质进行定量分析，计算杂质限量是否符合国家标准。

五、实验结果与分析1. 酸碱度实验结果显示，磺胺嘧啶钠样品的酸碱度符合国家标准。

2. 氯化物、硫酸盐与钙盐实验结果显示，磺胺嘧啶钠样品的氯化物、硫酸盐与钙盐含量均未超过国家标准。

3. 重金属实验结果显示，磺胺嘧啶钠样品未检测到重金属。

4. 异常毒性物质实验结果显示，磺胺嘧啶钠样品未检测到异常毒性物质。

磺胺嘧啶是一种广谱的抗菌药物，可以被常规氯仿提取。

永停法是测定磺胺嘧啶含量的一种方法，其基本原理是利用磺胺嘧啶与永停试剂（1：1的氧化剂-还原剂复合物）的氧化还原反应，生成深红色络合物，其吸收峰为530nm。

该方法灵敏度高、重现性好、操作简便，是目前测定磺胺嘧啶含量的常用方法之一。

需要注意的是，该方法仅适用于磺胺嘧啶的含量低于50mg/g的样品，同时需要避免样品中有其他药物残留或者其他干扰物。

永停法测定磺胺嘧啶含量的计算公式如下：
磺胺嘧啶含量（%）= 试剂量（mg）× 0.01 × 100 ÷ 样品质量（g）
其中，0.01为磺胺嘧啶的摩尔质量/精确质量，也就是1g磺胺嘧啶的质量。

试剂量为永停试剂添加量，单位为毫克（mg）。

样品质量为永停试剂添加前样品的质量，单位为克（g）。

永停滴定法测定磺胺间甲氧嘧啶钠注射液含量的不确定度评定杨星;于晓辉;董玲玲;赵富华;万仁玲【摘要】Taking sulfamonomethoxine sodium injection for example, the uncertainty of content determination by dead-stop titration was evaluated.A mathematical mode of uncertainty evaluation was established and the sources of uncertainty were analyzed and evaluated during the whole determination procedure. Finally the expanded uncertainty was calculated and the result of content determination can be expressed as (95.3±0.8)% (k=2). It showed that the main sources of measurement uncertainty were measurement repeatability, calibration and the laboratory temperature variation.%以磺胺间甲氧嘧啶钠注射液为例，阐述永停滴定法含量测定结果的不确定度评定。

通过建立数学模型，分析不确定度来源，对各个不确定度分量进行了评估，计算了扩展不确定度，含量测定结果可表述为（95．3±0．8）％（k＝2）。

结果表明，重复性测量、校准和温度差异引入的不确定度为测量结果不确定度的主要来源。

【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】5页(P43-47)【关键词】磺胺间甲氧嘧啶钠注射液;含量测定;不确定度;永停滴定法【作者】杨星;于晓辉;董玲玲;赵富华;万仁玲【作者单位】中国兽医药品监察所，北京100081;中国兽医药品监察所，北京100081;中国兽医药品监察所，北京100081;中国兽医药品监察所，北京100081;中国兽医药品监察所，北京100081【正文语种】中文【中图分类】S859.84测量不确定度是表征赋予被测量值分散性的非负参数［1］，对实验室间比对、测量结果临界值的判断、方法的确认以及检测工作国际化等方面都有重要的意义。

磺胺嘧啶检验记录一．性状：本品为（应为白色或类白色的结晶或粉末）；无臭，无味；遇光色渐暗。

结果：二．鉴别：电子天平/型号：红外分光光度计型号： TJ270-30（A）1．取本品g（约0.1 g），加水与0.4%氢氧化钠溶液各3ml，振摇使溶解，滤过，取滤液，加硫酸铜试液1滴，即生成（黄绿色沉淀），放置后显(紫色)。

结果：2．取本品，依法操作（中国药典2010年版二部附录Ⅳ C），所得的本品红外光吸收图谱与对照图谱（光谱集570图）（应一致）。

图谱见打印附页结果：3．取本约mg（约50 mg），加稀盐酸1ml，缓缓煮沸使溶解。

放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液体数滴，生成（橙黄到猩红色）沉淀。

结果：三．检查：1．酸度：天平型号：取本品g，加水100ml，置水浴中振摇加热10分钟，立即放冷，滤过，分取滤液25ml，加酚酞指示液2滴与氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）0.20ml，显（粉红色）。

结果：2．碱性溶液的澄清度与颜色取本品g ，加氢氧化钠试液10ml熔解后，加水至25ml，溶液（应澄清无色）；如显色，与黄色3号标准比色液比较，（不的更深）结果：3．氯化物标准氯化钠溶液的制备：精密量取标准氯化钠贮备液ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

（每1ml 相当于10μg 的C l ）。

取两支配对的50ml 比色管，甲管为供试品管，乙管为对照品管。

取上述酸度项下的剩余的滤液25ml 置甲管中；另取标准氯化钠溶液 （5.0）ml ，置乙管中；在甲、乙两管中分别加稀硝酸 （10）ml ，加水使成40ml ，摇匀，加入硝酸银试液 （1.0）ml ，用水稀释成50ml ，摇匀，在暗处放置 （5）分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，甲管比乙管 （应不得更浓）。

结果：4．干燥失重： （规定减失重量不得过0.5％ ）天平型号： 电热恒温鼓风干燥箱/型号： 干燥温度： ℃取一个称量瓶，置干燥箱中干燥2小时，取出，移置干燥器中，放冷至室温，精密称定，W 1= g ；再置干燥箱中干燥1小时，取出，移置干燥器中，放冷至室温，精密称定，W 2= g ；称量瓶已恒重。

实验十三、磺胺嘧啶的重氮化滴定（永停滴定法）谭世界 11011020124一、目的与要求1、掌握永停滴定法的操作。

2、掌握重氮化滴定中永停滴定法的原理。

二、方法提要磺胺嘧啶是芳香伯胺类药物，它在酸性溶液中可与NaNO 2定量完成重氮化反应而生成重氮盐，反应式如下： NHSO 2NNH 2+NaNO 22HClNHSO 2NNN N Cl +NaCl H 2O++化学计量点后溶液中少量的HNO 2及其分解产物NO 在有数十毫伏外加电压的两个铂电极上有如下反应：阳极： NO + H2OHNO 2 + H + + e 阴极： HNO 2 + H ++e H 2O + NO因此在化学计量点时，滴定电池中由原来无电流通过而变为有恒定电流通过。

三、操作步骤精密称定S.D 约0.5g ，加盐酸（1→2）10ml 使溶解，再加蒸馏水50ml 及KBr1g ，在电磁搅拌棒下用NaNO 2液（0.1mol ∕L ）滴定，将滴定管的尖端插入液面下约2∕3处，滴定至终点。

在近终点同时蘸取溶液少许，点在淀粉—KI 试纸上试之。

记录终点时所用NaNO 2的体积，按下式计算S.D 的百分含量。

磺胺嘧啶% =%100S2503.0V C NaNO2NaNO2⨯⨯⨯ 四、注意事项1、电极活化:铂电极在使用前浸泡于含FeCl3溶液（0.5mol ∕L ）数滴浓HNO 2中30min ，临用时用水冲洗。

2、严格控制外加电压（80 ~90mV ）。

3、酸度：一般在1 ~2mol ∕L 为宜。

4、温度不宜过高，滴定管插入液面2∕3处使滴定速度略快，使重氮化反应完全。

五、数据及处理样品－01－－滴定曲线E(mV)V(mL)-278.7-545.017.0018.99终点 体积：18.995mL 浓度：0.09497mol/L, 94.97480%S 磺胺嘧啶(g) 0.5006终点体积（ml ） 18.995磺胺嘧啶%（仪器计算） 94.97480%磺胺嘧啶%（计算式） 95.0%六、思考及讨论1、通过实验，比较一下淀粉—KI 外指示剂于永停滴定法的优缺点答：①使用外指示剂无需对仪器的各种调试及预处理，但是指示剂的判断不够直 观，所以手续不够便利，可能因操作而引起较大误差。

一、目的：制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。

二、范围：适用于原料药磺胺嘧啶成品的标准操作程序。

三、职责：1. 检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2. 化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。

四、内容：1. 性状：取1g样品于洁净的玻璃皿上观察，本品应为白色、黄白色或粉白色结晶粉末或晶体。

溶解度：本品在稀酸和稀碱液中溶解，在96%乙醇和丙酮中微溶，在水中不溶。

2. 鉴别：2.1 红外鉴别：2.1.1 仪器：红外分光光度计2.1.3试剂：光学溴化钾、磺胺嘧啶对照品2.1.3 测试方法：按《XYK/SOP-QC7040红外分光光度法检查操作规程》操作，本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致。

2.2 薄层色谱：2.2.1 仪器：干燥箱、硅胶G薄层板、三用紫外仪、电子天平2.2.2 试剂：氨水、硝基甲烷、二恶烷、甲醇、磺胺嘧啶对照品2.2.3 测试方法：混合溶剂：浓氨水：甲醇（4:96）测试溶液：溶解20mg样品于3ml混合溶剂并稀释至5ml对照溶液：溶解20mg磺胺嘧啶对照品于3ml混合溶剂中并稀释至5ml展开剂：稀氨水-水-硝基甲烷-二恶烷（3:5:40:50）稀氨水:取浓氨溶液（25%~30% m/m）41g，用水稀释至100ml（100g/L~104g/L NH3）。

照《XYK/SOP-QC7024薄层色谱法检查操作规程》检查，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以稀氨水-水-硝基甲烷-二恶烷（3:5:40:50）为展开剂，展开至板的3/4后，在105℃下干燥，在254nm的紫外灯下检查，供试品溶液与对照溶液薄层板上的主斑点的大小和位置应保持一致。

2.3 熔点：2.3.1 仪器:熔点仪、油浴锅、干燥箱2.3.2 试剂：硅油、甲苯2.3.3 测定方法：取样品3.0g置于干燥洁净的试管中，将试管以45°倾斜浸泡在270℃的硅油中，样品将会分解形成白色或者黄白色的升华物，取升华物加入甲苯进行重结晶，结晶物在100℃条件下干燥，按XYK/SOP-QC7036熔点检验操作规程测定，其熔点应为123～127℃。