维生素的测定25
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25羟基维生素d(25-oh-vd)的原理
25羟基维生素d(25-oh-vd)的原理是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）。
已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入与标记抗体特异结合的酶，再与底物一起温育。
底物经酶的催化变为有色产物，通过颜色变化对待测物质进行定量测定。
25羟维生素D是维生素D在体内的主要存在形式。
维生素D为类固醇衍生物，属脂溶性维生素，为环戊烷多氢菲类化合物。
维生素D主要由人体皮肤经紫外线照射后合成，少部分从食物或补充品中摄入。
维生素D不仅仅影响钙磷代谢，而且具有广泛的生理作用，是维持人体健康、细胞生长和发育的必不可少的物质，与多种疾病密切相关。
25羟基维生素临床意义
血清25-羟维生素D测定在临床诊断上的重要意义1、血清25羟维生素D的生成及代谢维生素D既是一种维生素，也是一种类固醇激素，主要包括VD2（麦角钙化醇）及VD3（胆钙化醇）体内可由胆固醇变为7-脱氢胆固醇储存在皮下，经阳光及紫外线作用下再转化为VD3，因而称7-脱氢胆固醇为维生素D3原。
在酵母和植物油中有不能被人吸收的麦角固醇，在阳光及紫外线照射下可转变为能被人吸收的VD2，所以称麦角固醇为D2原。
食物中维生素D在小肠中以乳糜微粒形式吸收，胆盐促进其吸收。
在血液与一种特异载脂蛋白-维生素D结合蛋白（DBP）结合后转运，先在肝脏线粒体经25-羟化酶系统作用转变为25-（OH）2 VD3，随后转运至肾小管上皮细胞在线粒体内经1α-羟化酶作用生成1,25（OH）2VD3，它是活性最强的维生素D代谢衍生物。
25-（OH）2 VD3是肝内的储存及血液中运输的形式，在肝内可与葡萄醛酸或硫酸结合，随胆汁排出体外［1］。
维生素D在体内转化为活性的1, 25 （OH）2VD3，通过其细胞内维生素D受体(VDR)介导.才能发挥作用。
VDR分布在全身多种组织细胞中，与1, 25 (OH)2VD3激素信号分子结合成激素-受体复合物,该复合物与靶基因特定DNA序列上的激素反应元件结合,对结构基因的表达产生调节, 从而调节机体钙磷代谢、细胞增殖与分化以及免疫功能等功能。
2、血清25羟维生素D在骨骼系统的临床意义存在于骨骼、肠道和肾脏的VDR发挥其经典的骨骼生物效应，促进钙的吸收利用。
1, 25 （OH）2VD3调节甲状旁腺素（PTH）和成纤维细胞生长因子23（FGF23）的分泌，对维持体内正常骨矿平衡和骨形成起到举足轻重的作用。
维生素D缺乏可能导致典型的钙的吸收利用降低如：佝偻病、骨软化症、骨量减少、骨质疏松症等。
近年来还发现，维生素D新的骨骼效应为：增强肌力、减少跌倒，防治骨质疏松性骨折［5］。
人体肌肉组织有特定的维生素D受体，老年人血清维生素D水平高可以增加肌肉力量，减少跌倒发生。
25-羟基维生素D的临床检测
25-羟基维生素D的临床检测SDD 张文娟一、什么是25-羟基维生素D检测维生素D(vitamin D)是一类脂溶性维生素，属固醇类衍生物，是包括人类在内的高等动物生命必需的重要营养素。
维生素D主要的生理功能是调节体内钙、磷代谢并维持血浆钙、磷水平稳定，参与个体牙齿和骨骼的正常生长发育。
维生素D主要包括五种化合物，分别为维生素D1、D2、D3、D4和D5，家族成员中最重要的是D2和D3，通常所说的维生素D即指这两种形式。
维生素D2（麦角钙化醇) 主要来源于蘑菇, 牛油果等植物性食物；维生素D3 (胆钙化醇) 一方面由皮肤中的7-脱氢胆固醇通过阳光中的紫外线照射裂解转化而来，一方面来源于人摄取的动物性食物，如海鱼, 蛋黄和黄油等[1, 2, 3, 4, 5]。
这两种形式的维生素D并没有生物活性，须与血液中的维生素D结合蛋白（VDBP）结合后，在肝脏中分别代谢成没有活性的体内储备形式的25-羟基维生素D2（骨化二醇）和25-羟基维生素D3(骨化三醇)[1, 4]。
非活性的维生素D在肾脏转换为具有生物活性的代谢物1,25-双羟基维生素D，行使激素功能（D-荷尔蒙）[1, 4]。
D-荷尔蒙调节肠道的钙吸收, 骨骼的矿物质化, 成骨细胞的分化和骨质合成，此外该激素还会影响神经肌肉的功能。
作为维生素D在体内的主要储存形式，血清中的25-羟基维生素D浓度可以作为人体维生素D含量的最佳指标。
25-羟基维生素D是维生素D营养状态的评价指标，美国医学科学院推荐25-OHD的血浓度大于20ng/mL有利于骨骼健康，而许多文献将维生素D缺乏定义为血清25-OHD水平低于20ng/mL，不足为21-29ng/mL，充足为30ng/mL以上，而大于150ng/mL可能会导致中毒。
但是维生素D中毒极为罕见，而维生素D缺乏却十分常见，这与年龄、人种、肤色、生活习惯等等有关。
据统计，全球有超过10亿人缺乏维生素D[1, 6, 7]。
25—羟基维生素D测定试剂盒产品技术要求万孚
25—羟基维生素D测定试剂盒产品技术要求万孚25-羟基维生素D (25-OH Vitamin D)是一种重要的维生素D代谢产物，对机体的钙平衡调节、肌肉功能、免疫系统等功能至关重要。
近年来，随着人们对营养的重视以及对维生素D水平检测的需求增加，25-羟基维生素D测定试剂盒应运而生。
本文将从试剂盒的产品技术要求方面进行详细介绍。
1.试剂盒的成分及保存要求：试剂盒主要由预包被的抗体、酶标记的抗体、标准品、底物等组成。
试剂盒要求保存在2-8°C的低温环境中，避免日光直接照射。
2.试剂盒的使用注意事项：试剂盒在使用前应放置于室温下15-30分钟，避免试剂温度过低。
使用前应检查试剂盒的有效期，并对试剂进行观察，如有异常情况应停止使用。
3.试剂盒的操作流程：试剂盒的操作流程一般包括样本处理、试剂加入、孵育、洗涤和发光检测。
在样本处理步骤中，需要进行样本的提取、纯化和预处理等步骤，保证样本中的25-羟基维生素D浓度准确。
4.试剂盒的稳定性和精密度：试剂盒应具有良好的稳定性和高精密度。
稳定性表现为试剂盒在有效期内，试剂的成分和性能保持不变；精密度表现为试剂盒在重复使用过程中，结果的重复性和一致性。
5.试剂盒的检测范围和灵敏度：试剂盒的检测范围应满足临床需求，对不同样本类型和浓度范围的样本都具有较高的准确性和灵敏度。
灵敏度是指试剂盒能够检测到的最低25-羟基维生素D的浓度。
6.试剂盒的专属性：试剂盒应具有较高的专属性，能够准确检测25-羟基维生素D，而不对其他相关物质产生干扰。
专属性可以通过对常见干扰物的检测和抑制来评估。
7.试剂盒的参考值范围和结果解读：试剂盒应为使用者提供参考值范围，并提供对结果的解读。
不同年龄段和性别的参考值范围可能存在差异，因此使用者在解读结果时应根据相关标准进行判定。
8.试剂盒的质控要求：试剂盒需要具备质控功能，能够通过内部和外部质控样本的检测，评估试剂盒的性能稳定性，并对试剂盒的使用结果进行质量控制。
25-羟基维生素d测定意义
25-羟基维生素D测定意义在于了解人体内维生素D的储存水平，维生素D缺乏与许多疾病有关，如小儿比较常见的维生素D缺乏性佝偻病、骨软化症，老年人尤其是绝经后妇女，与骨外伤病人容易多发的成人骨质疏松症以及肾性骨病等。
25羟维生素D测定可用于上述疾病的诊断、鉴别与治疗效果的监测，25羟维生素D测定还可用于与维生素D缺乏相关的病症，如癌症、心血管系统疾病、自身免疫性疾病、糖尿病，以及抑郁症的监测，还可用于维生素D过量或者维生素D中毒的诊断。
具体来说，对儿童来说，维生素D是生长发育必不可少的物质，若是缺乏此物质，便会影响骨骼的生长发育，进而导致X型腿、O型腿、方颅等骨骼畸形，所以对儿童进行25-羟维生素D的检测，可用来预防维生素D缺乏，进而防止发生骨骼畸形；对妊娠期妇女来说，由于激素和代谢水平都较之前有所变化，可能会导致维生素D缺乏。
对妊娠期妇女进行25-羟维生素D的检测，可以减小宫内胎儿患先天性佝偻病的几率，并在医生指导下应用相应措施，防止流产等不良后果的发生；对老年人来说，维生素D也是需要定时补充的物质，因为它与骨骼的密度、肌肉强度有关。
若是维生素D缺乏，可能会使老年人行走能力下降，容易发生骨折，所以对老年人进行25-羟维生素D 的检测，可以降低老年人发生骨折的风险。
25-羟基维生素d测定化学发光法
标题：25-羟基维生素D测定化学发光法的研究与应用一、概述25-羟基维生素D是钙磷代谢中的重要物质，对人体骨骼健康和免疫系统起着至关重要的作用。
对25-羟基维生素D的测定方法研究是医学领域的重要课题。
目前，化学发光法作为一种高灵敏度、高特异性、简便易行的测定方法，受到了广泛关注。
本文旨在探讨25-羟基维生素D测定化学发光法的研究进展及其在临床中的应用。
二、25-羟基维生素D测定化学发光法的原理25-羟基维生素D测定化学发光法是通过25-羟基维生素D与特定底物酶反应产生的化学发光信号来测定血清中25-羟基维生素D的含量。
该方法的原理主要分为以下几个步骤：1. 血清中的25-羟基维生素D与酶结合，形成25-羟基维生素D-酶复合物。
2. 加入特定底物后，25-羟基维生素D-酶复合物催化底物发生化学反应，释放化学发光信号。
3. 测定化学发光信号的强度与25-羟基维生素D的浓度成正比，从而确定血清中25-羟基维生素D的含量。
三、25-羟基维生素D测定化学发光法的研究进展近年来，25-羟基维生素D测定化学发光法在临床医学中得到了广泛应用，并取得了一系列研究成果。
研究者们不断改进测定方法，提高了方法的灵敏度和特异性，使得25-羟基维生素D的测定结果更加准确可靠。
还有一些研究集中在探讨该测定方法在不同人裙和环境条件下的适用性，如儿童、孕妇、老年人、不同季节等。
研究结果表明，25-羟基维生素D测定化学发光法具有较好的稳定性和重复性，能够在不同样本中有效测定25-羟基维生素D的含量。
四、25-羟基维生素D测定化学发光法在临床应用中的意义1. 临床诊断：25-羟基维生素D的含量与骨骼健康、钙磷代谢等密切相关，因此在骨质疏松症、佝偻病、肾性骨病等疾病的诊断中有着重要的意义。
2. 药物治疗监测：临床上常常采用补充25-羟基维生素D的方式来治疗相关疾病，测定其含量可以指导治疗方案的制定。
3. 饮食调理：推荐不同人裙的饮食结构，保证摄入足够的25-羟基维生素D。
25-羟基维生素D(25-Hydroxyvitamin D)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求
25-羟基维生素D（25-Hydroxyvitamin D）测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）组成：试剂盒由预处理试剂1（PT1）、预处理试剂2（PT2）、磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（25-OH-VD-Cal）（选配）组成。
组成及含量见下表：预期用途：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中25-羟基维生素D （25-Hydroxyvitamin D）的含量。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于3.0 ng/mL。
2.3 准确度将已知浓度的25-Hydroxyvitamin D标准溶液加入到血清中，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.4 线性在[5.0，70.0] ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 重复性在试剂盒的线性范围内，检测高低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间差在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测高低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供25-羟基维生素D（25-Hydroxyvitamin D）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源至企业工作校准品。
总25羟基维生素D操作规程
25羟基维生素D测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：25羟基维生素D测定(缩写VD-T)；组合检验项目申请：贫血组合项目测定；临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对于测定和吸样有干扰的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清, 避免溶血。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定48h。
需较长时间保存应将血清存放于-20℃。
冰冻标本仅可冻融一次。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。
2.3.2采血后应使血液充分凝固，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白；可使用选用分离胶促凝的血液标本。
3 方法原理VD-T测定采用竞争化学发光免疫分析法，其检测原理来如下：第一步：将标本、预处理试剂1和预处理试剂2添加到反应管中，经过孵化，释放出与维生素D结合蛋白结合的25-羟基维生素D。
第二步：将预处理后的标本，抗25-羟基维生素D抗体碱性磷酸酶结合物添加到反应管中，经过孵化，样本中的25-羟基维生素D和抗5-羟基维生素D抗体碱性磷酸酶结合物形成复合物。
高效液相色谱法测定维生素预混合饲料中的25-羟基维生素D3
2020.11科学技术创新时间 /min 流速 /(mL/min) A /% B /% 0 0.8 15 85 10 1.0 0 100 15 1.0 0 100 16 0.8 15 85 200.8158525-羟基维生素D 3（25-OH-D 3），是维生素D 3在机体内的首个代谢产物，更易被吸收[1]。
目前，25-OH-D 3已广泛用于畜禽养殖业，用于提高蛋壳质量[2]、提高母猪怀孕率及窝产仔数[3-4]等。
目前关于饲料中25-OH-D 3含量测定的报道仅限于配合饲料及浓缩饲料[5-6],至于预混合饲料方面，仍为空白。
此外，维生素预混合饲料中25-OH-D 3的含量高，用量大，又是配合饲料和浓缩饲料中25-OH-D 3的来源。
因此，本文建立了维生素预混合饲料中25-OH-D 3含量测定的方法以期为维生素预混合饲料的质量控制提供技术手段。
1试验部分1.1仪器和试剂高效液相色谱仪（ACQUITY Arc ，Waters 公司）；电子天平（AB265-S ，梅特勒-托利多公司，精度为0.01mg ）。
25-OH-D 3标准品（Dr.Ehrenstorfer 公司，纯度为98.2%，批号为G155330）；甲醇为色谱纯；试验用水为一级水；维生素预混合饲料样品来自于市场收集。
1.2色谱条件采用Thermo AQUASIL-C 18色谱柱（规格为100mm ×3.0mm ，粒径3μm ），检测波长为264nm ；50μL 进样；柱温箱温度为30℃；流动相：A 相为水，B 相为甲醇，梯度洗脱程序见表1。
1.3试样溶液的制备称取维生素预混合饲料3g 置于50mL 棕色容量瓶中，加水10mL ，超声10min ，冷却；继续加入30mL 甲醇，混匀，超声提取20min ，冷却，用甲醇定容，稀释至刻度，摇匀；移取20mL 于离心管中，离心5min （6000转/min ）取上清，过0.22μm 滤膜，得到试样溶液。
25羟基维生素临床意义
血清25-羟维生素D测定在临床诊断上的重要意义1、血清25羟维生素D的生成及代谢维生素D既是一种维生素，也是一种类固醇激素，主要包括VD2（麦角钙化醇）及VD3（胆钙化醇）体内可由胆固醇变为7-脱氢胆固醇储存在皮下，经阳光及紫外线作用下再转化为VD3，因而称7-脱氢胆固醇为维生素D3原。
在酵母和植物油中有不能被人吸收的麦角固醇，在阳光及紫外线照射下可转变为能被人吸收的VD2，所以称麦角固醇为D2原。
食物中维生素D在小肠中以乳糜微粒形式吸收，胆盐促进其吸收。
在血液与一种特异载脂蛋白-维生素D结合蛋白（DBP）结合后转运，先在肝脏线粒体经25-羟化酶系统作用转变为25-（OH）2 VD3，随后转运至肾小管上皮细胞在线粒体内经1α-羟化酶作用生成1,25（OH）2VD3，它是活性最强的维生素D代谢衍生物。
25-（OH）2 VD3是肝内的储存及血液中运输的形式，在肝内可与葡萄醛酸或硫酸结合，随胆汁排出体外［1］。
维生素D在体内转化为活性的1, 25 （OH）2VD3，通过其细胞内维生素D受体(VDR)介导.才能发挥作用。
VDR分布在全身多种组织细胞中，与1, 25 (OH)2VD3激素信号分子结合成激素-受体复合物,该复合物与靶基因特定DNA序列上的激素反应元件结合,对结构基因的表达产生调节, 从而调节机体钙磷代谢、细胞增殖与分化以及免疫功能等功能。
2、血清25羟维生素D在骨骼系统的临床意义存在于骨骼、肠道和肾脏的VDR发挥其经典的骨骼生物效应，促进钙的吸收利用。
1, 25 （OH）2VD3调节甲状旁腺素（PTH）和成纤维细胞生长因子23（FGF23）的分泌，对维持体内正常骨矿平衡和骨形成起到举足轻重的作用。
维生素D缺乏可能导致典型的钙的吸收利用降低如：佝偻病、骨软化症、骨量减少、骨质疏松症等。
近年来还发现，维生素D新的骨骼效应为：增强肌力、减少跌倒，防治骨质疏松性骨折［5］。
人体肌肉组织有特定的维生素D受体，老年人血清维生素D水平高可以增加肌肉力量，减少跌倒发生。
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1、方法原理 抗坏血酸(Vc)结构中有烯二醇存在，因此具有还原性，能 将蓝色染料2，6-二氯靛酚还原为无色的化合物，Vc则被 氧化为脱氢Vc，反应式如下：
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2,6-二氯靛酚具有酸碱指示及氧化还原指示的两种 特性。氧化态时呈深蓝色(碱介质中)或浅红色(酸性 介质，变色范围pH4～5)，还原态时为无色。
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维生素的分析是一项比较复杂的工作。其样品分析 的一般程序是：①用酸、碱或酶分解样品，使其中 的维生素游离出来；②用溶剂进行提取；③分离干 扰物质，对样液进行分离提纯；④用适当的方法进 行定量等。维生素的分析方法很多，选用方法时应 根据样品的品种、类型、待测维生素的性质、含量 以及干扰物质多少等因素来决定。
总抗坏血酸包括还原型、氧化型抗坏血酸和2,3-二 酮古乐糖酸。
Vc测定主要有：测定还原型Vc和氧化型Vc的总含 量（如荧光法，2,4－二硝基苯肼法、高效液相色 谱法等)及还原型Vc测定法(2,6－二氯靛酚滴定法， 电位滴定法，碘滴定法，钼蓝比色法，碘酸钾萃取 分光光度法等)两类, 其中,有些方法既可测定Vc全 量,也可测定还原型Vc,如酶法。
• VD 人体VD的主要来源并非食物，而是皮下7-脱氢胆固醇经
紫外线照射转变而来。海水鱼的肝脏含量最为丰富。
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• VE 具有抗氧化的功能，与机体的抗衰老有关。 人体所需大多来自谷类于植物油。 • VK 作用主要是促进肝脏生产凝血酶原，从而具 有促进凝血作用。绿叶蔬菜含量最为丰富，蛋黄、 大豆油和猪肝也是良好来源。
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高效液相色谱法、荧光法要求样品的纯度较高， 高效液相色谱法可以同时测得抗坏血酸和脱氢抗 坏血酸的含量，具有干扰少，准确度高，重现性 好，灵敏、简便、快速等优点，是上述几种方法 中最先进、可靠的方法，但需要有昂贵的仪器， 目前尚无法普遍采用。
ห้องสมุดไป่ตู้12
2.6-二靛酚滴定法测定的是还原型抗坏血酸，该 法简便，也较灵敏，但特异性差，样品中的其他 还原性物质(如Fe2+、Sn2+、Cu2+等)会干扰测定， 使测定值偏高。对深色样液滴定终点不易辨别， 如山楂，树莓，草莓等 。
根据这个特性．用碱性蓝色染料的标准溶液滴定植 物样品酸性浸出液中Vc到刚变浅红色为终点，由染 料的用量即可计算Vc的含量。
滴定终点的红色是刚过量的未被还原的(氧化型)染 料溶液在酸性介质中的颜色。
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2、注释
（1）偏磷酸是Vc的最佳稳定剂，且具有沉淀蛋白质的 作用。但其价格较贵，在室温下放置易转化为正磷 酸，降低对Vc的稳定性。草酸廉价易得,有与磷酸相 近的稳定性。而醋酸适于浸提含有Fe2+的样品。
1
维生素是维持人体正常生理功能所必需的一类有 机化合物。 维生素按其溶解性可分为： 水溶性维生素 • 抗坏血酸（Vc） 具有酸性和强还原性，水果中 柑橘、柠檬含量较高，为40-50mg%，红果和枣 的含量更高，枣中540mg%。
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• 硫胺素（VB1） 缺少，则神经组织功能不足，可出现相
应的神经肌肉症状如多发性神经炎、肌肉萎缩及水肿。谷类、
根据Vc在酸性溶液中相对较稳定这一特性，历来采 用的提取剂都是各种各样的酸性溶液,现在一般采用 的主要是2%偏磷酸、2%草酸溶液，其次是8%醋酸、 10%三氯乙酸及偏磷酸-醋酸混合液。
存在于动、植物食品中。
• 生物素 参与体内的固定CO2（羧化）和转羧基作用。分
布广泛，肠道细菌亦能合成。
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脂溶性维生素
• VA 具有促进正常生长与繁殖、维持上皮组织与视力正常的
生理功能。只存在于动物性食品中，肝、肾鸡蛋、鱼卵和全奶 等。植物则可提供作为维生素A元的类胡萝素或胡萝卜素，如 菠菜、胡萝卜、红心甘薯、辣椒，以及水果如杏、柿子等。
下面重点介绍维生素C、维生素B1和B2以及作为维 生素A原的β-胡萝卜素的测定。
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一、维生素C的测定
维生素C又称抗坏血酸。 （1）纯品为白色无臭结晶，熔点为190～192℃。 （2）溶于水或乙醇中，不溶于油剂。 （3）在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，
在弱酸条件下较稳定。
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碘滴定法不适于花青素含量高的果蔬样品Vc测定。
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（一）还原型维生素C的测定
维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后 的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。 进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生 理作用。在食品中，这三种形式均有存在，但主 要是前两者，故许多国家的食品成分表均以抗坏 血酸和脱氢抗坏血酸的总量表示。
豆类及肉类含量较多，动物性食品中以肝、肾、脑含量较多。
• 核黄素（VB2） 需要量与能量代谢有关。动物性食品比
植物性食品含量高，肝脏达2mg/100g
• 烟酸（Vpp） 可预防癞皮病发生。含量最多的是蘑菇、
酵母等，肝脏为10mg/100g。
• 叶酸
叶酸为各种细胞生长所必需。动物肝脏、豆类、
各种绿叶蔬菜和水果含量较多。
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2,4-二硝基苯肼比色法和荧光法测得的是抗坏血 酸和脱氢抗坏血酸的总量，操作麻烦，耗时较长。
但也易受色素影响,当待测液本身有颜色时,消光 值会受到影响,从而影响到测定结果的准确性。
14
钼蓝比色法则不然,该法不易受样品提取液颜色的影 响。
紫外分光光亮法是操作简便，不受样品提取液颜色 的影响，但是重复间偏差较大 。
3
• 维生素B6 可帮助糖类、脂肪和蛋白质分解、利用，也帮
助糖元由肝脏或肌肉中释放热能。蛋黄、肉、鱼、乳，以及谷 类、种子外皮、蔬菜含量丰富。
•维生素B12 唯一含金属（钴）的维生素，机体中含量降至
0.5mg/100g左右便会出现贫血，即恶性贫血。主要来源为肉 类，以内脏、鱼类、蠔类及蛋类为多。
• 泛酸（VB3） 与糖类、脂肪和蛋白质代谢有密切关系。广泛
• 维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质，它们 一般在动物和人体内不能合成或合成数量少，满足 不了动物和人体的需要，必须依靠从食物中摄取。 在食物中缺乏了任何一种维生素，人和动物都会发 生特有的缺乏症状，如缺乏维生素A、B和C时，可 分别引起夜盲症、脚气病和坏血病等，严重时足以 致命。某些维生素含量的高低，是评价农产品品质 的重要指标之一。
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1、方法原理 抗坏血酸(Vc)结构中有烯二醇存在，因此具有还原性，能 将蓝色染料2，6-二氯靛酚还原为无色的化合物，Vc则被 氧化为脱氢Vc，反应式如下：
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2,6-二氯靛酚具有酸碱指示及氧化还原指示的两种 特性。氧化态时呈深蓝色(碱介质中)或浅红色(酸性 介质，变色范围pH4～5)，还原态时为无色。
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维生素的分析是一项比较复杂的工作。其样品分析 的一般程序是：①用酸、碱或酶分解样品，使其中 的维生素游离出来；②用溶剂进行提取；③分离干 扰物质，对样液进行分离提纯；④用适当的方法进 行定量等。维生素的分析方法很多，选用方法时应 根据样品的品种、类型、待测维生素的性质、含量 以及干扰物质多少等因素来决定。
总抗坏血酸包括还原型、氧化型抗坏血酸和2,3-二 酮古乐糖酸。
Vc测定主要有：测定还原型Vc和氧化型Vc的总含 量（如荧光法，2,4－二硝基苯肼法、高效液相色 谱法等)及还原型Vc测定法(2,6－二氯靛酚滴定法， 电位滴定法，碘滴定法，钼蓝比色法，碘酸钾萃取 分光光度法等)两类, 其中,有些方法既可测定Vc全 量,也可测定还原型Vc,如酶法。
• VD 人体VD的主要来源并非食物，而是皮下7-脱氢胆固醇经
紫外线照射转变而来。海水鱼的肝脏含量最为丰富。
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• VE 具有抗氧化的功能，与机体的抗衰老有关。 人体所需大多来自谷类于植物油。 • VK 作用主要是促进肝脏生产凝血酶原，从而具 有促进凝血作用。绿叶蔬菜含量最为丰富，蛋黄、 大豆油和猪肝也是良好来源。
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高效液相色谱法、荧光法要求样品的纯度较高， 高效液相色谱法可以同时测得抗坏血酸和脱氢抗 坏血酸的含量，具有干扰少，准确度高，重现性 好，灵敏、简便、快速等优点，是上述几种方法 中最先进、可靠的方法，但需要有昂贵的仪器， 目前尚无法普遍采用。
ห้องสมุดไป่ตู้12
2.6-二靛酚滴定法测定的是还原型抗坏血酸，该 法简便，也较灵敏，但特异性差，样品中的其他 还原性物质(如Fe2+、Sn2+、Cu2+等)会干扰测定， 使测定值偏高。对深色样液滴定终点不易辨别， 如山楂，树莓，草莓等 。
根据这个特性．用碱性蓝色染料的标准溶液滴定植 物样品酸性浸出液中Vc到刚变浅红色为终点，由染 料的用量即可计算Vc的含量。
滴定终点的红色是刚过量的未被还原的(氧化型)染 料溶液在酸性介质中的颜色。
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2、注释
（1）偏磷酸是Vc的最佳稳定剂，且具有沉淀蛋白质的 作用。但其价格较贵，在室温下放置易转化为正磷 酸，降低对Vc的稳定性。草酸廉价易得,有与磷酸相 近的稳定性。而醋酸适于浸提含有Fe2+的样品。
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维生素是维持人体正常生理功能所必需的一类有 机化合物。 维生素按其溶解性可分为： 水溶性维生素 • 抗坏血酸（Vc） 具有酸性和强还原性，水果中 柑橘、柠檬含量较高，为40-50mg%，红果和枣 的含量更高，枣中540mg%。
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• 硫胺素（VB1） 缺少，则神经组织功能不足，可出现相
应的神经肌肉症状如多发性神经炎、肌肉萎缩及水肿。谷类、
根据Vc在酸性溶液中相对较稳定这一特性，历来采 用的提取剂都是各种各样的酸性溶液,现在一般采用 的主要是2%偏磷酸、2%草酸溶液，其次是8%醋酸、 10%三氯乙酸及偏磷酸-醋酸混合液。
存在于动、植物食品中。
• 生物素 参与体内的固定CO2（羧化）和转羧基作用。分
布广泛，肠道细菌亦能合成。
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脂溶性维生素
• VA 具有促进正常生长与繁殖、维持上皮组织与视力正常的
生理功能。只存在于动物性食品中，肝、肾鸡蛋、鱼卵和全奶 等。植物则可提供作为维生素A元的类胡萝素或胡萝卜素，如 菠菜、胡萝卜、红心甘薯、辣椒，以及水果如杏、柿子等。
下面重点介绍维生素C、维生素B1和B2以及作为维 生素A原的β-胡萝卜素的测定。
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一、维生素C的测定
维生素C又称抗坏血酸。 （1）纯品为白色无臭结晶，熔点为190～192℃。 （2）溶于水或乙醇中，不溶于油剂。 （3）在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，
在弱酸条件下较稳定。
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碘滴定法不适于花青素含量高的果蔬样品Vc测定。
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（一）还原型维生素C的测定
维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后 的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。 进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生 理作用。在食品中，这三种形式均有存在，但主 要是前两者，故许多国家的食品成分表均以抗坏 血酸和脱氢抗坏血酸的总量表示。
豆类及肉类含量较多，动物性食品中以肝、肾、脑含量较多。
• 核黄素（VB2） 需要量与能量代谢有关。动物性食品比
植物性食品含量高，肝脏达2mg/100g
• 烟酸（Vpp） 可预防癞皮病发生。含量最多的是蘑菇、
酵母等，肝脏为10mg/100g。
• 叶酸
叶酸为各种细胞生长所必需。动物肝脏、豆类、
各种绿叶蔬菜和水果含量较多。
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2,4-二硝基苯肼比色法和荧光法测得的是抗坏血 酸和脱氢抗坏血酸的总量，操作麻烦，耗时较长。
但也易受色素影响,当待测液本身有颜色时,消光 值会受到影响,从而影响到测定结果的准确性。
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钼蓝比色法则不然,该法不易受样品提取液颜色的影 响。
紫外分光光亮法是操作简便，不受样品提取液颜色 的影响，但是重复间偏差较大 。
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• 维生素B6 可帮助糖类、脂肪和蛋白质分解、利用，也帮
助糖元由肝脏或肌肉中释放热能。蛋黄、肉、鱼、乳，以及谷 类、种子外皮、蔬菜含量丰富。
•维生素B12 唯一含金属（钴）的维生素，机体中含量降至
0.5mg/100g左右便会出现贫血，即恶性贫血。主要来源为肉 类，以内脏、鱼类、蠔类及蛋类为多。
• 泛酸（VB3） 与糖类、脂肪和蛋白质代谢有密切关系。广泛
• 维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质，它们 一般在动物和人体内不能合成或合成数量少，满足 不了动物和人体的需要，必须依靠从食物中摄取。 在食物中缺乏了任何一种维生素，人和动物都会发 生特有的缺乏症状，如缺乏维生素A、B和C时，可 分别引起夜盲症、脚气病和坏血病等，严重时足以 致命。某些维生素含量的高低，是评价农产品品质 的重要指标之一。