植物油中磷含量的检测分析文献综述
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油茶磷元素含量测定
油茶是杜鹃植物科油茶属油茶种。
油茶种子中磷是一种重要的矿质元素,对人体有很多益处。
测定油茶磷元素含量的方法主要有以下几种:
1. 酸溶法测定:将油茶种子样品取出,经过干燥处理后,加入硝酸和盐酸等酸性溶液进行酸溶,然后用钼酸铵溶液做为指示剂进行滴定,根据滴定结果计算出磷元素含量。
2. 原子吸收光谱法测定:将油茶种子样品提取,制备成适合原子吸收光谱测定的溶液,然后通过原子吸收光谱仪器测定溶液中磷元素的吸收峰值,根据吸收峰值的大小计算出磷元素的含量。
3. 磷酸酶测定法:利用磷酸酶催化磷酸盐转化为无机磷酸盐的特性,制备油茶种子样品提取液,加入酶促反应底物,并测定底物消耗速度或产物生成速度的变化,通过标准曲线计算出磷元素的含量。
这些方法都是常用的测定油茶磷元素含量的方法,根据实际需要可以选择合适的方法进行测定。
M M F S C N J出口植物油含磷量的检验方法集团标准化工作小组 [Q8QX9QT-X8QQB8Q8-NQ8QJ8-M8QMN]MM_FS_CNJ_0297出口植物油含磷量分光光度法MM_FS_CNJ_0297出口植物油含磷量的检验方法1.适用范围本方法适用于出口植物油含磷量的测定。
2.主要试剂和仪器.主要试剂盐酸:分析纯;硫酸:分析纯;氧化锌:化学纯;钼酸钠溶液:称取钼酸钠于500ml容量瓶中,以200ml蒸馏水溶解,小心加入140ml硫酸,冷却后,用蒸馏水稀释至刻度,混匀,静置24h后备用;%硫酸肼溶液:称取硫酸肼溶于1000ml蒸馏水中,混匀;50%氢氧化钾溶液:50g氢氧化钾溶于50ml蒸馏水中,混匀;磷标准贮备液:称取在101℃干燥2h的基准磷酸二氢钾,精确至,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解,移入250ml容量瓶中,用蒸馏水洗净小烧杯,并入容量瓶内,稀释到刻度,混匀。
此溶液每毫升含磷1mg;磷标准工作液:用移液管吸取5ml磷标准贮备液于500ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,混匀。
此溶液每毫升含磷。
.仪器瓷坩埚:50ml;表面皿:直径约75mm;容量瓶:50ml、100ml、250ml、500ml;移液管:1ml、2ml、5ml、10ml;高温炉;分光光度计;分析天平。
3.过程简述.试验样品按照ZB X 04007-86《出口植物油取样方法》取得平均样品,混匀后供检验用。
.标准曲线的绘制分别量取磷标准工作液0,,,,,,于七只编号为1、2、3、4、5、6、7的50ml容量瓶中,再分别按编号顺序加蒸馏水,,,,,,0ml(以上各管含磷0,,,,,,),向各管依次加入硫酸肼及钼酸钠溶液。
加塞摇匀,放松塞子,于沸水浴中加热10min后取出,立即用流水冷却至室温,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,放置10min,以试剂空白为参比液或调节零点,用分光光度计于波长650μm处测定吸光度。
绘制标准曲线。
植物有效磷含量的测定(游离态磷)1.试剂配制(1)配100 ml l0%(w/v)的高氯酸,取7。
874 ml 72%的高氯酸溶液。
(高氯酸:分子量100.46,相对密度1.764)。
配800 ml 5%(w/v)的高氯酸,取31.494 ml 72%的高氯酸溶液。
(2)配制硫酸-钼酸铵溶液(溶液A):即0.5N H2SO4中含有0。
4%(w/v)的钼酸铵。
①溶解0.8g钼酸铵(NH4)6Mo7O24·4H2O于100ml水中。
②然后徐徐加入5 ml的浓H2SO4(98%).③充分混匀,冷却后加水至200 ml。
(3)配制10%(w/v)抗坏血酸溶液(溶液B):溶解2 g抗坏血酸于水中,最后加水至20 ml中,贮于棕色瓶中,在4℃冰箱保存。
(4)工作溶液:按体积比6:1混合溶液A和溶液B.注:工作溶液需要每天配制,配好后放置2小时后再使用。
2。
操作步骤(1)取0。
5克鲜样用液氮研磨成粉末,在4℃放置(冰上或者冰箱)至样品冻融,加入1ml 10%(w/v)的高氯酸(PCA)研磨均匀。
(2)匀浆液用5%(w/v)的高氯酸(PCA)稀释10倍,于冰上放置30分钟。
(3)于4℃,10000 g离心10分钟,上清液用于有效磷含量的测定(钼蓝法)。
(4)取2 ml工作溶液与1 ml样品上清液混合,于40℃温育20分钟。
(5)反应液在冰上冷却后,于820 nm可见光波长下测定吸收值。
如样品浓度过高,应适当稀释,使其OD值落在标线的线性范围内。
3.磷标准曲线的制作(1)磷标准溶液配制(60 ppm P):溶解0。
230 g磷酸二氢铵(NH4H2PO4)于100 ml蒸馏水中,即得600 ppm P的磷标准溶液,再将600 ppm P的磷标准溶液用提取剂稀释10倍,得60 ppm P的磷标准溶液.(2)标准曲线绘制:将60 ppm P的标准磷溶液用提取剂稀释,分别制成0。
6、1.2、2。
4、3.6、4。
MM_FS_CNJ_0297出口植物油含磷量分光光度法MM_FS_CNJ_0297出口植物油含磷量的检验方法1.适用范围本方法适用于出口植物油含磷量的测定。
2.主要试剂和仪器.主要试剂盐酸:分析纯;硫酸:分析纯;氧化锌:化学纯;钼酸钠溶液:称取钼酸钠于500ml容量瓶中,以200ml蒸馏水溶解,小心加入140ml硫酸,冷却后,用蒸馏水稀释至刻度,混匀,静置24h后备用;%硫酸肼溶液:称取硫酸肼溶于1000ml蒸馏水中,混匀;50%氢氧化钾溶液:50g氢氧化钾溶于50ml蒸馏水中,混匀;磷标准贮备液:称取在101℃干燥2h的基准磷酸二氢钾,精确至,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解,移入250ml容量瓶中,用蒸馏水洗净小烧杯,并入容量瓶内,稀释到刻度,混匀。
此溶液每毫升含磷1mg;磷标准工作液:用移液管吸取5ml磷标准贮备液于500ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,混匀。
此溶液每毫升含磷。
.仪器瓷坩埚:50ml;表面皿:直径约75mm;容量瓶:50ml、100ml、250ml、500ml;移液管:1ml、2ml、5ml、10ml;高温炉;分光光度计;分析天平。
3.过程简述.试验样品按照ZB X 04007-86《出口植物油取样方法》取得平均样品,混匀后供检验用。
.标准曲线的绘制分别量取磷标准工作液0,,,,,,于七只编号为1、2、3、4、5、6、7的50ml容量瓶中,再分别按编号顺序加蒸馏水,,,,,,0ml(以上各管含磷0,,,,,,),向各管依次加入硫酸肼及钼酸钠溶液。
加塞摇匀,放松塞子,于沸水浴中加热10min后取出,立即用流水冷却至室温,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,放置10min,以试剂空白为参比液或调节零点,用分光光度计于波长650μm处测定吸光度。
绘制标准曲线。
.测定称取混匀的试样~,精确至,置于瓷坩埚中,加入氧化锌,于电炉上缓慢加热至炭化完全。
然后将坩埚置于温度为550~600℃的高温炉中灼烧2h,取出,放冷至室温,加入5ml蒸馏水及5ml盐酸,盖以表面皿,在电炉上加热微沸5min,取下后将溶液滤入100ml容量瓶中,以5ml热蒸馏水洗涤表面皿及坩埚,再以每次5ml热蒸馏水洗涤滤纸五次。
第23期 收稿日期:2019-09-02作者简介:赵俊英(1981—),女,山东德州人,讲师,主要从事分析测试工作。
菠菜中磷含量的测定赵俊英(陇东学院化学化工学院,甘肃庆阳 745000)摘要:本文用分光光度法测定菠菜中磷的含量,探讨了波长、显色时间、显色剂和还原剂等条件对吸光度的影响,在最优条件下测得菠菜中磷的平均含量为597.325mg·kg-1。
该方法具有操作简单、试剂用量少、消解速度快、等优点。
关键词:分光光度法;菠菜;磷含量中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号:1008-021X(2019)23-0105-03DeterminationofPhosphorusinSpinachZhaoJunying(CollegeofChemistryandChemicalEngineering,LongdongUniversity,Qingyang 745000,China)Abstract:Inthispaper,thecontentofphosphorusinspinachwasdeterminedbyspectrophotometry.Theconditionssuchaswavelength,colordevelopingtime,colorreagentandreducingagentetcwereexplored.Theresultshowedthattheaveragecontentofphosphorusinspinachwas597.325mg·kg-1.Themethodhastheadvantagesofsimpleoperation,lowdosageofreagents,fastdigestion,andsoon.Keywords:spectrophotometry;spinach;phosphoruscontent 目前磷作为食品中的一种常量元素,主要以核蛋白、磷蛋白、磷酯等有机态存在[1]。
植物油中磷含量测定方法
汪勇;王兴国;胡学烟;乔国平
【期刊名称】《粮食与油脂》
【年(卷),期】2001(000)011
【摘要】综述了植物油中磷含量的测定方法,包括比色法、浊度法、TLC、HPLC、红外等测定方法,其中一些测定方法有工业应用价值.
【总页数】3页(P34-36)
【作者】汪勇;王兴国;胡学烟;乔国平
【作者单位】江南大学食品学院,;江南大学食品学院,;江南大学食品学院,;江南大学食品学院,
【正文语种】中文
【中图分类】TQ646.2
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植物油中磷含量的检测分析——文献综述XXX(环境与生物工程学院指导教师:XXX)油脂中的磷含量是衡量油脂质量的一个重要指标。
目前,在我国国家标准中[1],对植物油中磷脂控制指标采用钼蓝比色法和重量法,钼蓝比色法法简单、快速,这种方法已经较为成熟;重量法利用磷脂吸水膨胀,密度增大,易于与油分离的特性,可粗略定量磷脂含量(包含不溶于丙酮的类脂)[2]。
国标钼蓝比色法虽可定量检测,但在实际工作中发现,该方法可准确检测精炼油中的磷含量,而对磷脂含量高的油脂,尤其是毛油,则会随着称样量的不同检测结果有很大差别。
国家标准、专业标准和国际通用的AOCS方法中对于称样量的规定也存在很大差别[3],这就给贸易和企业的质量控制增加了难度。
为此国外研究者在检测方法方面做了不少的研究。
1 研究背景及动态1.1 磷脂在植物油中的分布及其对油品的影响磷脂组成生物膜的主要成分,分为甘油磷脂与鞘磷脂两大类,分别由甘油和鞘氨醇构成。
磷脂为两性分子,一端为亲水的含氮或磷的头,另一端为疏水(亲油)的长烃基链。
因此,磷脂分子常与蛋白质、糖脂、胆固醇等其它分子共同构成脂双分子层,即细胞膜的结构[4]。
植物磷脂主要存在于油料种子,且大部分存在于胶体相,并与蛋白质、糖类、脂肪酸、菌醇、维生素等物质以结合状态存在,是一类重要的油脂伴随物[5]。
磷脂主要来源于植物油脂,如大豆毛油中磷脂含量约为0.1%-1.8%。
植物油中磷脂的含量从加工工艺上来讲,会增加脱酸环节中性油的损失及脱色白土的用量,而且还容易引起加氢催化剂的中毒。
精炼油中磷脂含量过高容易氧化影响产品色泽。
所以这是不利的。
在植物油储藏的方面,磷脂是导致油脂反色的原因之一;也会导致有些油脂(比如大豆油)的回味;所以磷脂不易于植物油的储藏[6]。
在烹饪方面,在煎炸食品的过程中会形成泡沫,若煎炸的食品水分含量较高,则会使泡沫迅速上升,引起溢锅,极易造成烫伤事故与火灾。
磷脂的不饱和性及易被氧化等性质,起着载运氧气的作用,使得油的耐煎炸程度大幅度降低,油很快变深、变黑。
目的意义磷参与植物体内多种代谢,促进碳水化合物的合成、转化和运输,施磷对提高作物产量和品质有明显的效果。
通过本实验掌握植物体内磷含量测定的方法及其原理。
一、实验原理测定磷含量的方法主要有磷钼蓝比色法(适宜含磷量较低)和钒钼黄比色法(适宜含磷量较高)等。
可直接用于植物组织可溶性磷的测定。
如用于植物材料全磷含量测定,需将材料用浓H2SO4—H202消煮转化为可溶性磷。
1.磷钼蓝比色法在适宜的酸性条件下,磷酸能与钼酸铵作用形成磷钼酸按,并被抗坏血酸或氯化亚锡等还原剂还原,生成蓝色的磷钼蓝,并在650 nm处有最大吸收蜂,其颜色深浅与含磷量成正比,可直接比色测定。
2.钒钼黄比色法待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸,溶液黄色的深浅与磷酸含量成正比,生成物在440nm波长有吸收高峰。
可用比色法定量磷。
此法的优点是黄色稳定,对显色条件要求不十分严格,操作简便,干扰物少,灵敏度较低,工作范围随选用的吸收波长而异。
选用波长(nm)400nm 440nm 470nm 490nm测磷工作范围(mg/g)0.75-5.5 2.0-15 4-7 7-20二、材料、设备及试剂1.材科玉米、接骨木、瓜类、葡萄等幼苗;各种植物的根、茎、叶、种子及全株过60-80目筛干粉。
2.设备电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、漏斗、小纸等。
3.试剂(1)2.5%钼酸铵溶液称取(NH4)2M o O4鸣’25g用蒸馏水溶解并定容至1000ml。
(2)10mg/L磷标准液精确称取烘至恒重的分析纯KH2PO40.4398g加蒸馏水溶解定容至1000m1,摇匀;取此液10ml定容至100ml即为10mg/L磷标准液。
(3)10%抗坏血酸溶液(现用现配)。
‘(4)定磷试剂按下列顺序及比例将各试剂混合即成。
蒸馏水、6mol/L硫酸、2.5%钼酸铵、10%抗坏血酸按2:1:1:1(体积比)混合,贮于棕色瓶内。
若变为棕黄色即不能使用。
食品中磷的测定方法研究1 前言磷是人体内的重要元素之一,对人体生命活动有着十分重要的作用.人体缺乏对磷元素的摄取,会引起骨骼和牙齿发育不正常、骨质疏松、软骨病、拘楼病等症状.但过多的摄入磷,会引起多动症、导致人呕吐、引起肾功能障碍,也可以使肾病晚期患者产生各种机能紊乱,比如引起心脏病和骨病,甚至引起死亡.磷是组成核酸的关键元素并控制“核酸分子信息的传递”.由于磷对生命体有着不可低估的作用,因而准确测定食品样品中磷的含量和存在形式显得尤为重要.我国是一个农业大国,农业生产对国民经济以及人民生活有着举足轻重的作用.农作物病虫害是影响农业生产的主要问题,而有机磷(OPs)农药是一类高效、广谱的杀虫剂,在防治农作物病虫害等方而发挥着巨大的作用.随着有机磷农药使用量的不断增加,逐渐暴露出许多缺点,其中最主要的就是农药残留问题.食品中的有机磷农药残留问题严重影响了消费者的健康,由农药残留引发的食品安全问题已成为当今各国政府和社会各界广为关注的焦点问题之一. 建立快速、可靠、灵敏和实用的有机磷农药残留检测技术对保护生态环境、保证食品安全、保障人类健康有着重要而深远的意义.共识于食品中磷元素对人体健康的重要影响及有机磷农药残留对人体健康的危害, 许多研究者已经开发出各种检测食品中总磷及有机磷农药的方法,本文将在前人工作的基础上综述近年来食品中磷的检测方法研究进展.1.1食品中的磷及其功能磷是人体含量较多的元素,是构成人体骨骼的主要元素,钙磷比值是判断软骨症的主要指标[1],是细胞膜和核酸的构成成分,还参与生命活动的很多代射过程[2],人体日需要量为磷酸盐017 g[3]。
目前,市场上添加磷的食品品种非常多,所以研究出新的磷测定方法是非常有意义的。
食品中磷的测定方法主要有分光光度、原子吸收光谱法,食品中磷酸根的测定[4]。
如果按第一法分光光度法来检验,前处理时,赶酸的程度很难控制,赶酸的时间又长。
赶酸的程度会直接影响结果,结果会很难显色或颜色太浅,长时间放置也没有改变,线性非常差。
植物油中农药残留分析的研究现状与发展趋势江静;梁盛斌;蒙丽琼【摘要】植物油中农药的残留严重威胁到人体的健康,所以农药残留分析检测技术尤为重要.文章综述了国内外常用的农药残留提取和测定方法,包括:固相萃取、固相微萃取、超临界流体萃取法、基质固相分散萃取法、微波辅助萃取等提取技术及气相色谱法、液相色谱法、液相色谱-质谱联用法和气相色谱-质谱联用法等检测技术.文章评述了这些方法的优点与缺陷,并提出了食用植物油中农药残留检测方法的发展趋势.【期刊名称】《大众科技》【年(卷),期】2016(018)009【总页数】2页(P38-39)【关键词】农药残留;提取方法;分析检测【作者】江静;梁盛斌;蒙丽琼【作者单位】中国检验认证集团广西有限公司,广西防城港 538001;中国检验认证集团广西有限公司,广西防城港 538001;中国检验认证集团广西有限公司,广西防城港 538001【正文语种】中文【中图分类】S482.1我国是植物油料消费大国,且中国油料作物的进口量占世界第一位[1]。
农药在油料作物的病虫害防治中发挥着至关重要作用,残留的农药通过食物及食物链的传递严重威胁人体的健康[2-3]。
农药残留水平一般在 ng、pg、甚至 fg水平,而且各类食品组成成分复杂,常用农药有数百种,各类农药的理化性质差异性很大,因此要求分析方法灵敏度高、特异性强[4]。
本文就近年来食用植物油中农药残留提取和分析方法做了综述,并提出了食用植物油中农药残留检测方法的发展趋势。
2.1 固相萃取法(SPE)固相萃取是由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来。
Holland等[5]用C18柱筛选葡萄酒中74种农药,方法快速,重现性好。
与传统的液液萃取法相比较,该方法可以提高分析物的回收率,更有效的将分析物与干扰组分分离,减少样品预处理过程,操作简单,省时、省力。
2.2 固相微萃取(SPME)固相微萃取是在固相萃取技术上发展起来的一种微萃取分离技术,但固相微萃取不是将待检测物全部萃取出来,其原理是建立在待测物在固相和水相之间达成的平衡分配基础上。
食用植物油快速检测方法分析论文食用植物油快速检测方法分析论文摘要:过氧化值属于食物卫生指标的组成部分,能准确反映出油脂酸败程度,因此,检测人员对食用植物油的营养价值以及安全性进行检测时,经常使用过氧化值快速检测方法。
本文主要阐述了该种检测方法需要的材料、试剂,分析了具体检测过程和检测结果,旨在为食用植物关键词:关于食物的论文过氧化值属于食物卫生指标的组成部分,能准确反映出油脂酸败程度,因此,检测人员对食用植物油的营养价值以及安全性进行检测时,经常使用过氧化值快速检测方法。
本文主要阐述了该种检测方法需要的材料、试剂,分析了具体检测过程和检测结果,旨在为食用植物油的快速检测提供依据。
食用植物油是人类膳食中不可或缺的物质,对人体健康产生重要影响。
植物油长期存放后容易发生变质,主要是因为其发生了氧化反应,油中的酸价以及过氧化物含量超过正常值,不仅营养价值变低,安全性也得不到保证。
因此,需要采用科学的`方法对食用植物油中的过氧化值进行检测。
1过氧化值检测的材料、试剂及检测方法1.1材料与试剂首先要准备食用植物油样品,将所有油样都标好号。
1-11号为不同品牌的植物油;1-7号为市面散装食用油;1-3号为品牌油样,久置处理;1-5号为普通油样,久置处理;1-6号为地沟油;1-13号为煎炸老油。
需要的试剂为次甲基蓝、藏红花、液体石蜡、乙醇、葡萄糖和氢氧化钠。
其中次甲基溶液浓度为0.2%,制备过程如下:准备100mL无水乙醇以及0.2g次甲基蓝,将后者溶于前者中,完成后移至滴瓶中。
藏红花溶液浓度为0.2%,要求为碱性,制备过程如下:准备100mL去离子水和0.2g碱性藏红花,将后者溶于前者,完成以后移至滴瓶中。
1.2具体检测方法油脂经过久置或者重复利用以后其中的一些物质可能会被氧化,产生过氧化物,而过氧化物具有氧化能力,能实现物质由还原态到氧化态的转变,反应过程中颜色会发生变化,快速检测试验时就通过氧化态颜色深浅来判断过氧化物含量,最终判断出过氧化值的高低。
植物油中磷含量的检测分析——文献综述XXX(环境与生物工程学院指导教师:XXX)油脂中的磷含量是衡量油脂质量的一个重要指标。
目前,在我国国家标准中[1],对植物油中磷脂控制指标采用钼蓝比色法和重量法,钼蓝比色法法简单、快速,这种方法已经较为成熟;重量法利用磷脂吸水膨胀,密度增大,易于与油分离的特性,可粗略定量磷脂含量(包含不溶于丙酮的类脂)[2]。
国标钼蓝比色法虽可定量检测,但在实际工作中发现,该方法可准确检测精炼油中的磷含量,而对磷脂含量高的油脂,尤其是毛油,则会随着称样量的不同检测结果有很大差别。
国家标准、专业标准和国际通用的AOCS方法中对于称样量的规定也存在很大差别[3],这就给贸易和企业的质量控制增加了难度。
为此国内外研究者在检测方法方面做了不少的研究。
1 研究背景及动态1.1 磷脂在植物油中的分布及其对油品的影响磷脂组成生物膜的主要成分,分为甘油磷脂与鞘磷脂两大类,分别由甘油和鞘氨醇构成。
磷脂为两性分子,一端为亲水的含氮或磷的头,另一端为疏水(亲油)的长烃基链。
因此,磷脂分子常与蛋白质、糖脂、胆固醇等其它分子共同构成脂双分子层,即细胞膜的结构[4]。
植物磷脂主要存在于油料种子,且大部分存在于胶体相内,并与蛋白质、糖类、脂肪酸、菌醇、维生素等物质以结合状态存在,是一类重要的油脂伴随物[5]。
磷脂主要来源于植物油脂,如大豆毛油中磷脂含量约为0.1%-1.8%。
植物油中磷脂的含量从加工工艺上来讲,会增加脱酸环节中性油的损失及脱色白土的用量,而且还容易引起加氢催化剂的中毒。
精炼油中磷脂含量过高容易氧化影响产品色泽。
所以这是不利的。
在植物油储藏的方面,磷脂是导致油脂反色的原因之一;也会导致有些油脂(比如大豆油)的回味;所以磷脂不易于植物油的储藏[6]。
在烹饪方面,在煎炸食品的过程中会形成泡沫,若煎炸的食品水分含量较高,则会使泡沫迅速上升,引起溢锅,极易造成烫伤事故与火灾。
磷脂的不饱和性及易被氧化等性质,起着载运氧气的作用,使得油的耐煎炸程度大幅度降低,油很快变深、变黑。
此外,磷脂还会降低成品油的烟点,其具体表现为油脂在煎炸、爆炒时稍微受热就会产生大量的油烟[7]。
由此可见,磷脂对植物油的烹饪方面也有不利影响。
1.2 磷脂检测的方法从以上磷脂对植物油的加工储藏烹饪这三个方面来看,磷脂的含量对于植物油有不小的影响的,所以对于磷含量的检测是十分必要的。
对磷脂的检测方法有比色法、浊度法、TLC、HPLC,红外检测法等。
1.2.1 比色法比色法测定油脂中磷含量的原理是含有磷脂的试样与金属氧化物灰化时,试样中的磷成为磷酸盐,再加酸溶解而得磷酸根,在加入钼酸盐后生成磷钼酸盐。
磷钼酸盐被还原成蓝色的络合物钼蓝。
产生蓝色的深度与磷的含量成正比。
将被测液与标准溶液在相同条件下比色定量,即可测得磷的含量。
将磷的含量再乘以相应的换算系数,即得磷脂的含量[8]。
在研究比色法实验中,Enzo A.Tosi等[9]用抗坏血酸代替有致癌性的硫酸肼做还原剂,并用吐酒石做催化剂。
并且比较了有无催化剂存在的情况下,钼蓝络合物形成的速度。
显色后的溶液在888nm下测定吸光度,标准曲线的相关系数r=0.9993。
反观国内的研究,例如辛凤鲜等[10]对GB5537-85进行了改进:首先将在电炉上炭化,改为用明火直接燃烧,使炭化时间从几小时缩短为10-15分钟。
其次将灰化2小时改为灰化1小时。
再者将50ml 定容步骤取消,改为直接定容到100ml,比色。
改进方法的测定结果和国标有很好的一致性,测定上限是含磷量500 ppm,但其耗时只有国标方法的一半,为2 -2.5小时。
此外还有朱振中等[11]认为国标中的钼蓝比色法受到温度、酸度、还原剂等因素影响,存在灵敏度和选择性不足的情况。
他们在有聚乙烯醇存在的情况下,用孔雀绿一钼酸按溶液和经过灰化的油脂显色,得到一种稳定的杂多酸缔合物。
该缔合物至少可以稳定24小时,在OugP/25ml一12ugp/25ml范围内,635nm下符合比耳定律,得到的标准曲线相关系数r=0.9999。
利用分光光度计进行比色法测定精炼油脂中微量磷脂的含量,其方法简单,设备投资较小,易于推广;并且该法测量结果准确,灵敏度高,可作为油厂进行精炼油脂中微量磷脂含量测定的操作方法。
然而此法操作步骤烦多、复杂,化验员必须经过专门培训才能胜任,检测时必须严格按操作方法和程序进行。
并且本方法是以测定油脂中的磷含量来推定磷脂含量的,容易受油脂中非磷脂的其他有机或无机含磷物的影响,例如油脂中若含有磷酸等残留物,最终检测的结果会把磷酸误以磷脂的形式表现出来,从而导致检测结果失真。
这一点正如用凯氏定氮法测定奶粉中蛋白质含,结果把奶粉中添加的三聚氰胺等含氮物也作为蛋白质含量表现出来一样。
1.2.2 浊度法此种试验方法是用浊度仪快速、较准确的测定大豆油和玉米油中磷脂含量的方法。
根据油中磷脂含量的不同,其浊度也不同的原理。
Roger等[12]根据油中磷脂含量的不同,其浊度也不同的原理,用浊度仪建立了一种快速、较准确的测定大豆油和玉米油中磷脂含量的方法。
浊度法测定油中磷脂含量的相对误差较大,但是快速,一般测定一个样品只要15-30分钟。
适于生产时及时监控。
但油中其他杂质如:白土、金属微粒、高水分含量(>0.5%),高含皂量(>500ppm)会使浊度(NTu)升高。
但此方法得到AOCS统一方法委员会的推荐,许多大型企业也采用此法。
1.2.3 薄层色谱法不论是TLC(薄层色谱)还是HPLC(高效液相色谱)分析磷脂的组成,都是利用正相的硅胶对磷脂各部分进行吸附,再用展开剂(流动相)对吸附的样品洗脱解吸。
根据各组成部分的极性差异达到分离的目的。
J.M.Nazi等[13]用TLC一显影光密度分析法,测定大豆油中磷脂含量及组成。
他先用2%水水化大豆油,离心分离油脚,再用丙酮去除油脚中的水分和油脂。
干燥后得到的粗磷脂通过硅胶柱用氯仿洗脱中性油,用甲醇洗脱回收其中的磷脂。
得到的磷脂用氯仿一甲醇一水(75:25:3V/V/V)展开,用钼酸铵和高氯酸显色。
显色的薄板用显影光密度分析仪扫描,分析各组分的含量。
薄层色谱法中用来定量分析更容易受到误差的影响,薄层色谱受温度和湿度的影响比较大,因此应该控制环境的温度和湿度。
另外,薄层色谱的重现性较差,不同厂家的薄层板、薄层板的活化温度时间,饱和度,展开剂的极性等对实验的结果都有较大的影响,而且薄层扫描法准确度及重复性相对于HPLC 等也较低,对分析技巧要求很高。
1.2.4 高效液相色谱法HPLC法是一种能快速准确检测油脂中磷脂含量及组成的方法,一般的柱固定相为硅胶,但流动相种类繁多,检测器有紫外,荧光,折光指数和红外等。
T.L.Mounts等[14]用HPLC分析毛油中磷脂含量及组成的变化以评估大豆的变质情况,毛油中磷脂用固相萃取方法得到。
磷脂样品用异丙醇一正己烷一水从42:56:2(V/V/V)到51:38:11(V/V/V)梯度洗脱,在206nm下检测含量,破坏的大豆制取油的磷脂含量降低,不同的磷脂受磷脂酶破坏程度不同,按磷脂酶破坏的难易顺序依次是PE、PI、PS、PE和PA[15]。
高效液相色谱法具有快速、易于自动化操作等特点,但是所用色谱柱价格昂贵而且性能稳定性有待进一步提高,另外所用紫外检测器对磷脂的灵敏度偏低,特别是对粗磷脂提取物中的中性磷脂无法准确定量。
新进的蒸发光散射检测器和质谱检测器等虽然检测效果良好,但是价格偏高,仍有待进一步被普及。
而且采用液相色谱分析检测磷脂需要样品就有一定的纯度,尤其是被测样品中磷脂的含量很低并且样品需要经过复杂的处理时就会显现出它的劣势,所以在一定程度上限制了高效液相色谱的应用。
1.2.5 红外检测法红外光谱[16]是一种分子振动光谱,通过对红外光谱谱图的解析可以获得分子结构的大量信息,任何气体、液体、固态样品均可进行红外光谱测定。
因为红外可以被任何一种化合物吸收,特别是有机化合物,它们的红外光谱通常能够显示结构信息,从而红外光谱在有机化合物的结构解析中发挥着重要的作用。
ai等[17]用傅立叶转换红外检测器(FTIR)测定植物油中磷脂含量,先用标准磷脂混合样品(含39%PC、22%Pl、27%PE)溶解在正己烷中,配成各种浓度的标准溶液,用于确定磷脂的各种化学键振动的波数,并绘制标准曲线。
利用红外光谱法检测磷脂的含量具有简单,方便,迅捷的优点。
不需要对样品进行过多的处理,可以实现实时检测。
应用红外光谱法进行定量分析具有诸多优点,它的谱带较多,选择余地大,因此,对多组分或者单一组分样品能够用这种方法进行准确的定量分析,此外,样品的状态不能限制这种方法的应用,能够对液体、气体和固体标本进行分析,所以,红外光谱在样品的定量分析中得到广泛的应用。
但是,红外光谱也存在一定的缺点,就是在定量分析时灵敏度较低,尚不适用于微量组分的确定,有待进一步的研究发展[18]。
1.2.6 煅烧法王肇慈[19]研究了一种能替代280℃加热试验的快速、准确、简便易行的定量测定食用植物油磷脂含量的新方法。
用甲醇、冰乙酸溶液提取油脂样品中的磷脂,然后用硫、过氧化氢消化提取液,使磷脂中的磷转化为磷酸,再在酸性条件下与显色剂作用,生成钼蓝,在波长680nm处测定其吸光度,与标准系列比较定量。
消化时间只需15分钟,整个测定时间1小时。
在大豆油、菜籽油中加入0.04~0.20%磷脂,回收范围89.9~96.4%。
对菜籽油、大豆油、花生油和棉籽油样品,在不同实验室条件下,各测定5次,测定结果:变异系数≦8.3%,t<t0.05。
油脂样品中磷脂的最低检出含量为0.005%。
煅烧法测出来的是油的总磷量,包括有机磷和无机磷,所以并不适合测定磷脂含量。
2 评述现在的主流检验方法有:比色法,浊度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、红外检测法以及煅烧法。
这其中的薄层色谱法和高效液相色谱法限制多,想到的到好的效果实验的成本颇高,而且过程繁琐,所以这两种方法是尚未完善但前景十分好的方法,薄层色谱的研究方向主要是提高知名度,统一薄层板的参数,而高效液相色谱法主要是提高灵敏度,以及降低其以其成本方面。
浊度法和红外检测法,这两种检测方法差不多,都具有简单、方便、快捷的优点,但是浊度法相对误差大,所受影响多,想要提升精度要去除油中的杂质;反观虽然磷脂含量低的时候灵敏度较低,但是比浊度法有跟多的提升空间,主要是提升仪器的灵敏度。
比色法灵敏度高,精度也高,是一种十分成熟的检测方法,但是操作比较复杂,现在的研究方向主要是在减少实验所需时间以及减少油中无机磷对其检测结果产生的干扰减少失真的可能性上。
3 结论目前对于研究植物油含磷量检测方法的方向主要有两个分别是:缩短检测所需的时间以及提高检测的精度。