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（十四）1.三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？答：⑴物质对光的吸收具有加和性；⑵杂质的无关吸收在310~ 340 nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小。
2.用三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量时，三点波长选择的原则是什么？第一法和第二法有何不同？答：三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处（即λ1）;其他两点选择在λ1的两侧各选一点（λ2和λ3）。
（1）等波长差法：使λ3-λ1=λ1-λ2.Chp2010规定，测定维生素A醋酸酯时，λ1=328nm; λ2 =316nm; λ3=340nm，△λ=12nm.(2)等吸收比法：使Aλ2=A λ3=6/7A λ1.Chp2010规定，测定维生素A醇时，λ1=325nm; λ2 =310nm; λ3=334nm。
3.Chp收载的两种测定维生素A的方法：★第一法（等波长差法）（适用于酯式维生素A的测定）★第二法（等吸收比法）（适用于维生素A醇的测定）。
4.测定维生素A含量的基本步骤：第一步：选择A （A328 或A328(校正后)）第二步：求百分吸光系数。
第三步：求效价效价（IU/g）(样)=百分吸光系数*换算因数。
第四步：求标示量的百分含量。
5.维生素C的性质：⑴溶解性水中易溶，水溶液呈酸性。
在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。
⑵酸性：烯二醇结构—酸性。
▲C3-OH，pKa=4.17(共轭效应) ▲C2-OH，pKa=11.57(邻位羰基) 。
一元酸.能与NaHCO3作用生成钠盐。
⑶旋光性：维生素C分子中具有2个手性C原子，具有4种光学异构体。
其中生理活性最强的是L（+）-抗坏血酸。
⑷还原性：烯二醇基具极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸，加氢又可被还原为抗坏血酸。
⑸水解性维生素C因双使内酯环变得较稳定，和碳酸钠作用可生成单钠盐，不致发生水解。
但在强碱中，内酯环可水解，生成酮酸盐⑹具有糖的性质：VC结构类似糖结构，Molish试验。
⽣物药物分析思考题1.⽣物药物的特点？p71)相对分⼦质量的测定2）⽣物活性检查3）安全性检查4）效价测定5）⽣化法确证结构2.⽣物制品的质量检定包括哪些⽅⾯？p14⽣物制品的检定⼀般分理化检定、安全检定、效⼒检定三个⽅⾯3.⽣物药物常⽤的定量⽅法有哪些？p171）酶法2）电泳法3）理化测定法4）⽣物检定法4.什么是电泳？如何对其分类，分别有哪些？p94电泳是指带电粒⼦在电场中向与⾃⾝带相反电荷的电极移动的现象。
按⽀持物，可分纸电泳，醋酸纤维素薄膜电泳，淀粉凝胶电泳，琼脂糖凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
按凝胶形状分有⽔平平板电泳、圆盘柱状电泳及垂直平板电泳。
5.影响电泳迁移率的因素包括？p951）带电颗粒的性质2）电场强度3）溶液的ph值4）溶液的离⼦强度5）电渗作⽤6.⾎清蛋⽩常⽤什么电泳技术分离？核酸常⽤什么电泳技术分离？p99⾎清蛋⽩常⽤醋酸纤维素薄膜电泳技术分离，核酸常⽤琼脂糖凝胶电泳技术分离7.为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳是应⽤最⼴泛的凝胶电泳技术？p1001）聚丙烯酰胺聚合物分⼦中可解离的基因很少，因⽽电渗作⽤⼩，对样品的吸附作⽤很⼩，容易制备，并可再⽣吸收。
2）凝胶的孔径可以按需要控制其⼤⼩，因⽽具有可拉的分⼦筛效应，可以根据要分离物质分⼦的⼤⼩，选择适合的凝胶成分，使之既有适宜的空隙度，⼜有⽐较好的机械性质。
3）在⼀定浓度范围聚丙烯暗暗对热稳定。
凝胶⼏乎⽆⾊透明，因⽽电涌结果易观察，可⽤检测仪直接测定。
4）丙烯酰胺是⽐较纯的化合物，可以精制，减少污染。
5）聚丙烯酰胺凝胶在280n波长处没有吸收，利于样品蛋⽩电泳后的扫描检测。
8.SDS-PAGE电泳⽤于测定？其中SDS的作⽤是什么？p102SDS-PAGE电泳⽤于测定蛋⽩质的分⼦量。
SDS的作⽤是使蛋⽩质所带的负电荷远远超过天然蛋⽩分⼦的净电荷，消除了不同蛋⽩分⼦的电荷效应。
9.核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素？p98核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分⼦的⼤⼩、核酸分⼦的形状三个因素10.DNA分⼦在琼脂糖凝胶中泳动时，有什么效应与什么效应？DNA分⼦在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分⼦筛效应11.聚丙烯酰胺凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳，其定义和区别分别是什么？p102 & web12.什么是分⼦筛效应？p95分⼦筛效应：分⼦量或分⼦⼤⼩和形状不同的蛋⽩质通过⼀定的孔径分离胶时，受阻滞的程度不同⽽表现出不同的迁移率，这就是分⼦筛效应。
药物分析实验思考题参考答案实验一 甲硝唑片溶出度的测定-----------------------------------------------------------------------------------------------1 实验二 RP(Reverse Phase)-HPLC(High Performance Liquid Chromatography)测定醋酸地塞米松片的含量2 实验三 Gas Chromatography(GC,气相色谱法)测定维生素E软胶囊的含量-----------------------------------------2 实验四 永停滴定法测定磺胺嘧啶的含量-----------------------------------------------------------------------------------3 实验五 复方磺胺甲噁唑片的含量测定--------------------------------------------------------------------------------------4 实验六 阿司匹林Aspirin的红外光谱(IR, Infrared Spectroscopy)鉴别-------------------------------------------------4 实验七 薄层扫描法测定卷烟中尼古丁的含量-----------------------------------------------------------------------------5 实验八维生素B1注射液的含量测定------------------------------------------------------------------------------------------5 实验九 荧光分光光度法测定维生素B2片的含量-------------------------------------------------------------------------6 实验十AAS法龙牡壮骨颗粒中钙的含量--------------------------------------------------------------------------------------6实验一 甲硝唑片溶出度的测定1. 何为溶出度？哪些类型药物需做溶出度实验？溶出度：是指药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。
（习题一）药物的鉴别与杂质检查一、练习思考题1. 药物鉴别的意义是什么？药品质量标准中常用的鉴别方法有哪些？2．什么是一般鉴别试验？什么是特殊鉴别试验？举例说明。
3．如何利用色谱法来鉴别药物？4．什么叫鉴别反应的空白试验和对照试验？其意义何在？5．试述杂质检查的意义、来源？6．什么叫限度检查？杂质限量如何计算？7．何谓特殊杂质？何谓一般杂质？分别举例说明？8．试述氯化物、硫酸盐、铁、重金属的检查原理、反应条件、标准溶液及最适宜的浓度范围。
9．什么叫恒重？恒重操作要注意哪些问题？10．氯化钠注射液（0.9%）中重金属检查：取相当于氯化钠0.45g的注射液，蒸发至约20mL，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2mL和水适量使成25mL，依法检查，含重金属不得过千万分之三。
问：（1）应取标准铅溶液（10μg Pb/mL）多少毫升？（2）若以氯化钠计，在该测定条件下，重金属的限量是多少？二、选择题1．下列叙述中不正确的说法是（B ）A. 鉴别反应完成需要一定时间B. 鉴别反应不必考虑“量”的问题C. 鉴别反应需要有一定的专属性D. 鉴别反应需在一定条件下进行E. 温度对鉴别反应有影响2．药物杂质限量检查的结果是1.0ppm，表示（E ）A. 药物中杂质的重量是1.0μgB. 在检查中用了1.0g供试品，检出了1.0μgC. 在检查中用了2.0g供试品，检出了2.0μgD. 在检查中用了3.0g供试品，检出了3.0μgE. 药物所含杂质的重量是药物本身重量的百万分之一3．药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它（D ）A. 是有疗效的物质B. 是对药物疗效有不利影响的物质C. 是对人体健康有害的物质D. 可以考核生产工艺和企业管理是否正常E. 可能引起制剂的不稳定性4．微孔滤膜法是用来检查（C ）A. 氯化物B. 砷盐C. 重金属D. 硫化物E. 氰化物5．干燥失重主要检查药物中的（D ）A. 硫酸灰分B. 灰分C. 易碳化物D. 水分及其他挥发性成分E. 结晶水6．检查某药品杂质限量时，称取供试品W(g)，量取待检杂质的标准溶液体积为V(mL)，浓度为C(g/mL)，则该药品的杂质限量是（C ）A. W/（C．V）ⅹ100%B. C．V．Wⅹ100%C. V．C/Wⅹ100%D. C．W/Vⅹ100%E. V．W/Cⅹ100%（习题二）制剂分析一、练习思考题1．药物制剂分析有何特点？2．含量均匀度的含义是什么？什么情况下要进行含量均匀度测定？3．什么叫标示量？制剂的含量限度表示方法有哪几种类型？4．中药制剂的常用鉴别试验有哪些？5．生化药物的特点是什么？6．精密量取维生素C注射液4mL（相当于维生素C 0.2g），加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5min，加稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显蓝色，并持续30s不褪。
答：盐溶：蛋白质在第离子强度的介质中表现为溶解，盐析：蛋白质在高离子强度介质中表现为盐析。
常用盐为硫酸铵，原因：高盐吸水，夺取水相*常用于蛋白质沉淀的方法有哪些？答：盐析法、PEG沉淀法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法、热处理沉淀法*色谱法纯化蛋白质常用哪些类型？分别根据什么原理进行分离？答：排阻色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水色谱、经典的吸附色谱等。
原理上述有写*什么是密度梯度离心？答：密度梯度离心：一种在连续或者不连续的密度梯度介质中，将物质进行离心的方法。
（装载密度梯度介质，梯度介质有足够大的溶解度，常用介质：蔗糖密度梯度系统，制备：梯度混合器，层层铺垫，介质的最大密度比沉降样品的最小密度小。
，适用于大小有别而密度相似的样品）*什么是透析？主要用途是什么？答：透析：样品装入由半透膜制成的透析袋，透析膜允许容积小分子的溶质通过，而大分子则载留在袋内。
用途：透析的主要用途是从生物大分子样品中除去盐类或其它小分子物质。
透析法也可以用来除去与生物大分子结合较弱的小分子或离子，如金属离子及酶的辅助因子NAD，FAD等*蛋白质的定量方法有哪些？答：1光谱法（紫外吸收光谱法）2化学法（凯氏定氮法测有机物含氮量经典方法，双缩脲法，福林－酚法，染料结合方法）*什么是凯氏定氮法？试分析出现奶粉事件的原因以及改进办法？答：凯氏定氮法：测定化合物或者混合物中的总氮量的一种方法（方法：消化 用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵；（耗时），蒸馏 用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发；吸收 用酸性溶液（硼酸）吸收气态氨（使[H+] ），滴定 用已标定的无机酸滴（使[H+] 恢复），计算总氮量）。
奶粉事件的原因：有毒奶粉中主要是过多添加了三聚氰胺，而奶粉中常常需要测定食品的蛋白质含量，由于直接测量蛋白质技术上比较复杂，所以常用凯氏定氮法的方法，通过测定氮原子的含量来间接推算食品中蛋白质的含量。
由于三聚氰胺与蛋白质相比含有更多的氮原子，所以在一些事件中被一些造假者利用，添加在食品中以造成食品蛋白质含量较高的假象。
东南大学制药工程专业-药物分析思考题（范文）第一篇：东南大学制药工程专业-药物分析思考题（范文）1.药品质量标准分析方法验证的目的和内容。
目的：证明采用的方法适合于相应检查要求，在建立药品质量标准时分析方法要验证；药品生产工艺变更、制剂组分改变、原分析方法修订时，质量准备分析方法也需要验证此亦为方法再验证。
内容：重复性、中间精密度、重现性2.药物鉴别实验所要求的效能指标是什么？准确度，精密度：重复性、中间精密度、重现性，专属性，检测限，定量限，线性，范围和耐用性；3.亚硝酸钠滴定法指示终点的方法有哪些？CP采用哪些？有电位法、永停滴定法、外指示剂法、内指示剂法。
永停滴定法，CP有亚硝酸钠，溴化钾，盐酸；4.用化学方法区别下列化合物。
盐酸普鲁卡因、丁卡因、对乙酰氨基酚、对乙酰氨基酚:氯化铁，变色普鲁卡因：氢氧化钠，即产生沉淀丁卡因：在酸性溶液中和亚硝酸钠反应，即生成乳白色沉淀。
5.对乙酰氨基酚中对氨基酚的检查原理是什么？1、2、加三氯化铁试液即显蓝紫色在稀盐酸中水解后，在酸性溶液中与亚硝酸钠试液进行重氮化反应，生成的重氮盐再与碱性ß-萘酚偶合生成红色偶氮化合物6.盐酸普鲁卡因注射用为什么会变黄？结构中有酯键，可水解，注射液制备过程中受到灭菌时间、时间。
溶液Ph储藏时间以及光线和金属离子的影响，水解生成对氨基苯甲酸和二乙胺基乙醇。
对。
受热或时间延长，进一步脱羧转化为苯胺而苯胺又被氧化为有色物，而成黄色。
7．苯骈吩噻嗪药物的紫外吸有什么特点，是由什么结果引起的？其氧化产物和未取代苯骈吩噻嗪的紫外有什么区别?由硫氮杂蒽母核共轭三环的π系统引起。
一般有三个吸收峰值。
205.254.300nm。
最强峰一般在254附近。
易被氧化为砜或者亚砜有四个吸收峰。
取代2或10位时会引起最大峰的位移。
7.简述铈量法测苯骈吩噻嗪药物的原理：硫酸铈具有较高氧化电位为一价还原，对吩噻嗪无副反应。
吩噻嗪在滴定时先失去一个电子形成红色的自由基离子，达到化学计量点时其均失去2个电子且无色。
思考题*生物药物的特点？答：1都为生物大分子，2.组成，结构复杂，具有严格的空间构象，以维持其生理功能 3 近与人体的正常生理物质4 安全毒性小5 更高的生化机制合理性，和特定的治疗有效性特点：1相对分子质量需测定性2 生物活性检查3 安全性检查 4 效价测定 5 生化发结构测定*生物制品的质量检定包括哪些方面？答：1理化测定 2.安全检定3效力检定理化检定：外观，真空度和溶解时间，蛋白质，防腐剂，纯度，其他安全检定：一般安全性检查杀菌，灭活，脱毒外源性污染过敏性检查效力检定：动物保护力活疫苗抗毒素和类毒素血清学实验*生物药物常用的定量方法有哪些？答： 1 酶法 2 电泳法 3 理化测定 4 生物检定法*什么是电泳？如何对其分类，分别有哪些？答：电泳是指带电粒子在电场力的作用下与自身所带相反的电荷方向移动分类：按支持物可分为：纸电泳，醋酸纤维素薄膜电泳，淀粉凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳，聚丙烯酰胺凝胶电泳按凝胶形状可分为：水平平板电泳，圆盘柱状电泳，垂直平板电泳*影响电泳迁移率的因素包括？答：1，带电粒子的性质，电子带静电荷越多，越接近球形，电泳速度快2，电场强度，越强速度越快 3 溶液的ph值，对于蛋白质来说，当ph接近等电点，速度越快，4离子强度，离子强度越小，速度越快5电渗作用，阻碍*血清蛋白常用什么电泳技术分离？核酸常用什么电泳技术分离？答：醋酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖电泳*为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳是应用最广泛的凝胶电泳技术？答：1 page解离基因量很少，电渗流少，吸附量低，容易制备，2 机械性较好，孔隙可以调节凝胶比重实现可调，具有可拉性分析筛效应3，一定范围对热稳定，无色透明，容易观察，4Acr较纯，可精制，污染小 5 page在280nm 没有吸收利于pro的检测。
*SDS-PAGE电泳用于测定？其中SDS的作用是什么？答：sds主要是用来测定蛋白质的分子量，其中sds作用有两个：1，消除不同蛋白表面表面电荷效应，2引起蛋白构象改变，消除蛋白质的结构效应*核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素？答：凝胶浓度，核酸的大小，核酸的形状*DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有什么效应与什么效应？答：分子筛效应和电荷效应*聚丙烯酰胺凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳，其定义和区别分别是什么？答：1.连续系统：缓冲液的离子成分、PH、凝胶浓度、电位梯度都相同，带电颗粒电泳时仅具有电荷效应、分子筛效应。
第二章1，名解多元线性回归分析：自变量大于1的线性回归问题分析。
牛顿-雷扶生法：设初始值10=x ，根据牛顿迭代式)()(1k k k k x f x f x x '-=+，收敛标准：ε≤--1n n x x ，ε是一个足够小的数，称为收敛指标。
插值：求出通过所给所有实验数据点的曲线，根据求得的函数得到插值点的函数值。
（另：在离散数据的基础上补插连续函数，使得这条连续函数通过全部给定的离散数据点，从而估算出函数在其他点处的近似值。
）拟合：找出能反映因变量和自变量内在联系的数学表达式的过程称为拟合。
2，试解释线性回归方程组可能遇到的奇异方程和病态方程组的实际意义奇异方程：行列式为零的矩阵为奇异矩阵，奇异矩阵不能求逆。
对线性方程组AX=B ，系数矩阵A （m=n ）或A ’A(m ≠n) 若为奇异矩阵则方程组无解。
病态方程组：线性方程组AX=B ，系数矩阵A （m=n ）或A ’A(m ≠n)非奇异，方程组有解，但其解有时却无法接受，此时方程组属于病态方程组，病态方程组的系数矩阵常常会由于微小的误差使方程组的解发生极大的变化。
由于化学测量中涉及到的线性方程组的系数一般都是实验测量值或由测量值计算得到，实验测量误差的不可避免使得方程组的系数常有一定的误差。
应努力建立条件数小的方程组，避免因解病态方程组造成的误差。
因此，为了判别线性方程组能否用矩阵方法来求解，或所求得的解能否接受，必须先进行奇异方程和病态方程组的判断。
3，什么叫迭代法？如何应用牛顿-雷扶生法解高次方程？应该注意什么问题？迭代法：对方程f(X) = 0 求近似解，使f(X*)≈0，设初值X0，按一定规则生成新值X1，依次计算生成数列: X0,X1,X2,X3……Xn ，lim Xn =X*，收敛标准：│ Xn-Xn-1│< ε ，ε是一个足够小的数。
应用牛顿-雷扶生法：设初始值10=x ，根据牛顿迭代式)()(1k k k k x f x f x x '-=+ ，收敛标准：ε≤--1n n x x ，ε是一个足够小的数。
