E DNA需要量大, 检测技术繁杂, 难以用于大规模 的育种实践中。在植物分子标记辅助育种中需要将 RFLP转换成以PCR为基础的标记。
PCR-RFLP
PCR-RFLP Analysis
TT: 55+68+135+241+302bp CT: 55+68+135+241+302+543bp
CC: 55+68+135+543bp
大家应该也有点累了, 稍作休息
大家有疑问的, 可以询问和交
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DNA标记的分类
依据多态性的检测手段,DNA标记可分为四大类: (1)基于DNA-DNA杂交的DNA标记.
该标记技术是利用限制性内切酶及凝胶电 泳分离不同生物体的DNA分子,然后用经标记 的DNA探针,通过放射自显影或非同位素显色 技术来揭示DNA的多态性.其中最具代表性的 是发现最早和应用广泛的RFLP标记.
2)序列多态性: DNA片段碱基排列顺序的个体差别。 单核苷酸多态性
(single ucleotidepolymorphism,SNPs) 原因: 碱基的置换、插入、缺失。 特点: 多位于非编码区,选择压力。 数量多,1/1000 bp,300万 二态性,2个等位基因,多态性 程度较低。 孤立事件,人类遗传学意义大。
的插入、缺失、重排或点突变所引起的
。这种差异反映在酶切片段的长度和数
目上碱基组成的序列,并在这些序列位
限制性片段长度多态性的DNA基础 (1) 识别部位的点突变: 碱基的替换、修
饰(甲基化)或插入与缺失。 (2) 识别部位间的片段插入与缺失。 (3) 识别部位间的重复序列数目的变化。
基因型判定
由于在变性胶中PCR产物是单链, 并且不 受其碱基组成影响, 因此, 如果微卫星PCR产 物两条互补链分子质量相近, 在变性胶中纯 合子为单带, 杂合子为双带;如果微卫星 PCR产物两条互补链分子质量相差较大, 在 变性胶中纯合子为双带, 杂合子为四条带。