实验十 气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量

实验十气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量一、实验目的1. 掌握GC内标法测定药物含量的方法与计算。

2. 熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。

二、主要仪器与试药无水乙醇（AR）对照品、正丁醇（AR）内标物、藿香正气水Agilent 6890N气相色谱仪、火焰离子化检测器（FID）、HP-5石英毛细柱、5ml 吸量管（2支）、100ml容量瓶（2个）、微量进样器三、实验内容乙醇具有挥发性，ChP采用气相色谱法测定各种制剂在20℃时乙醇的含量。

因中药制剂中所有的组分并非都能全部出峰，故采用内标法定量。

1.色谱条件与系统适用性试验——色谱柱：HP-5石英毛细柱（30.0m×320µm）；进样口温度：200℃，柱温80℃，检测器温度：250℃。

理论板数应不低于2000。

样品与内标物质峰的分离度应大于2。

2.标准溶液的制备：精密量取恒温至20℃的无水乙醇对照品和正丁醇内标各5mL，至100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得标准溶液。

3. 供试液的制备：精密量取恒温至20℃的藿香正气水10 mL和正丁醇5mL，至100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。

4.校正因子测定：取标准溶液1~2μL，连续注入气相色谱仪3次，记录峰面积值，算出平均值，计算校正因子。

5.供试液的测定：取供试液1~2μL，连续注入气相色谱仪3次，记录峰面积值，计算，即得。

四、注意事项1. 色谱柱的使用温度——各种固定相均有最高使用温度的限制，为延长色谱柱的使用寿命，在分离度达到要求的情况下尽可能选择低的柱温。

开机时，要先通载气，再升高气化室、检测室温度和分析柱温度，为使检测室温度始终高于分析柱温度，可先加热检测室，待检测室温度升至近设定温度时再升高分析柱温度；关机前须先降温，待柱温降至50℃以下时，才可停止通载气、关机。

2. 进样操作——为获得较好的精密度和色谱峰形状，进样时速度要快而果断，并且每次进样速度、留针时间应保持一致。

GC法测定藿香正气水与藿香正气口服液中乙醇的含量海峡药学2009年第2l卷第11期复进样5次,按峰面积计算丹参酮ⅡA的RSD为0.13%,结果表明丹参酮ⅡA进样精密度良好.2.7重复性试验取批号为20060215样品.分别称取5份按供试品溶液制备方法制备并测定,平均含丹参酮ⅡA0.5172mg-g～,RSD为0.263%.2.8稳定性试验取同一批样品的供试品溶液分别在0,1,2,4,8h进样.供试品溶液在8h内基本稳定,5次测定丹参酮ⅡA峰面积的RSD分别为O.33%.2.9收率试验精密称取已知含量的本品内容物适量,分别精密加入一定量的对照品储备溶液,按供试品溶液制备方法制备并测定,计算回收率,结果(见表1).2.10样品测定按上述方法测定3批样品,测定数据(见表2).表1回收率试验结果批号丹参酮ⅡA含量(mg?gI1)每粒胶囊含量(mg/粒)根据以上测定结果.本品每粒含丹参酮ⅡA应不低于为0.18mg(每粒胶囊重0.4g).3讨论3.1流动相比例的选择我们曾考查了甲醇:水(70:30),甲醇:水(75:25),甲醇:水(80:20)3种流动相.丹参酮ⅡA保留时间分别为48.788min,30.429min,18.596rain.根据试验结果,我们选择甲醇:水(80:20)为流动相,分离效果好,保留时间适中..3.2测定波长的选择我们用UV-2540(岛津)紫外分光光度计仪器对丹参酮ⅡA进行了扫描,测得最大吸收波长为268.07nm.参考中国药典丹参酮ⅡA测定波长为270nm,因此最终选择丹参酮ⅡA测定波长为270nm.3.3提取方法的选择对批号为20081016样品采用不同的方法提取丹参酮ⅡA:(1)用甲醇超声20min;(2)用甲醇加热回流60min,再用甲醇补足减失的重量.试验结果表明,用甲醇加热回流比用甲醇超声20min更能够将丹参酮ⅡA提取完全.对批号为20081016样品采用不同的时间(30min,60min, 90min,120min)提取,结果显示,用甲醇加热回流60min就能够将丹参酮ⅡA提取完全,因此选择用甲醇加热回流60rain 即可.3.4本实验表明采用HPLC法测定丹参酮ⅡA的含量.回收率较高,重现性较好,可有效地对复方银杏通脉胶囊进行含量控制.参考文献[1]陈登丰.黄长水,李光华.等.复方银杏通脉胶囊的研制….中国医院药学杂志,2000,20(3):146.147.[2]阴健,郭力弓主编.中药现代研究与临床应用[M].北京:学苑出版社,1993,172—180.[3]中国药典.一部[s].2005,附录33.(4]郭力主编.中药化学实验(M].北京:科学出版社,2008.72.(5]国家药典委员会编.中国药典.一部【S].北京:化学工业出版社,2005.52.GC法测定藿香正气水与藿香正气口服液中乙醇的含量陈文娟【福建生物工程职业技术学院福州350002)摘要:目的建立以正丙醇为内标物.测定藿香正气水及口服液中乙醇含量的毛细管柱气相色谱法.方法以日本岛津公司DB-WAX石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25um)作为分析用色谱柱.柱温为70”C;进样口温度为180E;FID温度为200℃;柱前压100KPa;高纯氮作载气; 分流比为100:1;进样量为0.5vL.结果在选定的条件下.乙醇分别在1%--5%;O.004%～0.08%范围内与峰面积/内标峰面积之比呈良好的线性关系(r分别为0.9999和0.9996).结论本法快速,简便,准确,适用于藿香正气水与口服液中乙醇的测定.关键词:藿香正气水;藿香正气口服液;气相色谱法;乙醇中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1006.3765【2009).0l1-0064.03 DeterminationoftheethanolinHuoxiangZhengqiwaterandHuoxiang作者简介:陈文娟,女(1976一),硕士研究生,现任福建生物工程职业技术学院助教,主要从事药物分析及天然产物研究,开发与应用.联系电话:0591—83116620,E—mail:********************64?StraitPharmaceuticalJournalV ol21No.112009 ZhengqioralliquidbyGOCHENWen.juan(FujianBiologicalEngineeringV ocationalCollege,Fuzho u350002,China)ABSTRAOT:OBJ 『ECTIVEToestablishaGCmethodwithpropanolasinternalstandardforthed eterminationof ethanolinHuoxiangZhengqiwaterandHuoxiangZhengqioralliquid.MET HoDSASHIMADZUDB—WAXcapillarycolumn(30m×0.25ram×0.25m)wasusedat70℃.Thetemperature oftheentranceofthecapillaryvesselcolumn:was180℃.temperatureofthedetectorwas200℃;N2wascarr iergas,splitratewas100:1;samplequantitywas0.5”I.RESUL TSUndercertainchromatogramcondition,there waslinearrelationofethanolandthepeakareainthescopeof1%～5%(r=0.9999),0.004%～0.08%(r=0.9996),respectively.CONCLUSIONThismethodisarapid,simple,accurate,whichsuitableforthedeterminationo ftheethanolinHuoxiang ZhengqiwaterandHUOXiangZhengqiora1liquid.KEYWORDS:HuoxiangZhengqiwater;HuoxiangZhengqioralliquid;GC; Ethanol藿香正气水由苍术,陈皮,厚朴,白芷,茯苓等10味中药组成,具有解表祛暑,理气和中之功效,广泛应用于外感风寒,脘腹胀痛,呕吐,泄泻等症,是夏季必备良药【1J,为(中国药典> (2005版)一部【2收载品种,被国家药监局定为首批非处方药.其中.乙醇含量的检测是一项重要指标,现行药典中采用填充柱气相色谱法测定,本文采用石英毛细管柱气相色谱法测定乙醇的含量.方法快速,简便,适用于藿香正气水中乙醇的测定.1仪器与试药1.1仪器Et本岛津2010气相色谱仪.AOC-20i自动进样器.1.2试药甲醇(HPLC)为上海星可生化有限公司生产,无水乙醇(优级纯,含量大于99.8%)为天津市巴斯夫化工有限公司生产,正丙醇(分析纯)为国药集团化学试剂有限公司生产.2试验方法与结果2.1色谱条件日本岛津DB-WAX石英毛细管色谱柱(30.0m×0.25ram;0.25gm);载气:高纯氮(纯度大于99.999%);汽化室温度:180℃;FID温度:200℃:柱前压:100KPa;线速度:31.8cm/sec;柱流量:1.25mL?rninI1;分流进样,分流比为:100:1;进样量:0.5L;柱温:70℃(hold4min).尾吹气:氮气,流速为30mL-minI1;氢气流速为:40mL?min_1;空气流速为400mL?min～.2.2溶液的配制2.2.1内标溶液的配制:精密量取正丙醇50mL.置lOOmL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,备用.2.2.2对照品溶液的配制:精密量取无水乙醇25mL,置100mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀(A液).精密量取无水乙醇lmL,置100mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀(B液).分别用0.45,um滤膜过滤,即可.2.2.3供试品溶液的配制;精密量取供试品溶液1mL,置25mL量瓶中,精密加入内标溶液2mL.用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,用0.45gm滤膜过滤,即可.2.3空白对照试验取溶剂甲醇,用0.45~um滤膜过滤,按2.1项下色谱条件进样分析,记录色谱图(见图1),据测定结果,可知未检出乙醇.2.4系统适用性试验取对照品溶液(A液)1mL置25mL量瓶中.精密加入内标溶液2mL,用甲醇稀释至刻度,按”2.厂项下色谱条件进行测定,测得乙醇与正丙醇的理论塔板数分别为31848.594和45439.735;甲醇一乙醇,乙醇一正丙醇色谱峰间的分离度分别为3.135和13.602.2.5标准曲线的绘制精密量取对照晶溶液(A液)1,2,3,4,5,10mL,分别置25mL量瓶中,分别精密加入内标溶液2mL,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀.按”2.1”项下色谱条件进行测定,记录色谱图.得对照品色谱图(见图2).以对照品的浓度(C)为横坐标,以对照品峰面积与内标物峰面积之比(AR/As)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程(方程A)为Y:20.154x一0.0148(r=0.99995,n=6).精密量取对照品溶液(B液)0.1,0.2,0.5,1,2mL,分别置25mL量瓶中,分别精密加入内标溶液2mL,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀.按”2.1”项下色谱条件进行测定,记录色谱图,得对照品色谱图.以对照品的浓度(C)为横坐标,以对照品峰面积与内标物峰面积之比(AR/As)为纵坐标,绘制标准曲线.得回归方程(方程B)为Y=15.117x-0.0002(r=0.9996,n=5).2.6精密度试验取标准曲线项下的对照品溶液(A液)2.0mL置25mL量瓶中,精密加入内标溶液2mL,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀.按”2.1”项下色谱条件进行测定,连续进样6次.记录色谱图,测得的对照品峰面积与内标峰面积之比为0.3934,0.3919,0.3921,0.3919,0.3939和0.3912,其RSD=0.26%n=6).2.7重复性试验取同一批号的藿香正气水5份,按”2.2.3”制备后.按”2.1”项下色谱条件分别进样分析,记录色谱图,其中.对照品峰面积与内标峰面积之比为0.3682,0.3669,0.3663,0.3697,0.3693和0.3671,其RSD=0.37%(n=6).2.8稳定性试验取同一份藿香正气水按”2.2.3”制备后,65?海峡药学2009年第21卷第11期按”2.1”项下色谱条件分别隔0,1,2…468h测定一次,测得样品溶液在8h内的色谱图,其中乙醇峰面积与内标物峰面积之比为0.3643,0.3654,0.3646,0.3631,0.3638和0.3649,其RSD=0.22%(n=6).表明供试品溶液在8h内稳定.2.9样品中乙醇的含量测定2.9.1藿香正气口服液中乙醇的残留量测定:精密量取某厂家的藿香正气口服液4mL,置25mL量瓶中,分别精密加入内标溶液2mL.用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,按”2.1’’项下色谱条件进行测定,记录色谱图(见图3).代入方程B计算出供试品中乙醇的含量,所得结果(见表1).表1藿香正气口服液中乙醇残留量测定数据表2藿香正气水中乙醇含量测定数据2.9.2藿香正气水中乙醇含量测定:精密量取某厂家藿香正气水按”2.2.3”制备后,摇匀,按”2.1”项下色谱条件进行测定.记录色谱图(见图4).代入方程A计算出供试品中乙醇的含量,所得结果(见表2).3讨论现行<中国药典)一部中收载的藿香正气水辅料为乙醇且含量应在4O%～5O%.本文采用石英毛细管柱气相色谱法测定5个厂家藿香正气水及藿香正气口服液中乙醇的含量, 结果表明.辅料为乙醇的藿香正气水中,乙醇的含量均符合药典规定;辅料为聚山梨酯一80的藿香正气口服液中乙醇的残留量均低于0.5%【3】.藿香正气水中的乙醇不仅可以起到防腐作用,且与有效成分的含量有关,但是这类藿香正气水由于含有大量乙醇,口感刺激,不利于儿童,老人用药.藿香正气口服液口感较温和,微甜,适合儿童及老人服用,但该类藿香正气口服液添加了聚山梨酯一8O.其用量有待于进一步测定.66?l2045图1空白对照色谱图23图2对照品溶液色谱图12暑图3藿香正气口服液色谱圉图4囊香正气水色谱图参考文献[1)栗志红,廖跃德.高效液相色谱法测定藿香正气水中厚朴酚,和厚朴酚的含量(J].福建中医药,2006,37(2):44.[2]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[s】.一部.2oo5版,北京:化学工业出版社,2005.661.(3】国家药典委员会编.中华人民共和国药典[s】.二部.附录.2005 版,北京:化学工业出版社,2005,56.。

实验二 气相色谱外标法定量测定乙醇含量一、 实验目的1、熟悉气相色谱仪的操作步骤2、学习外标法定量的基本原理和测定方法二、基本原理所谓的外标法就是应用欲测组分的纯物质来制作标准曲线。

用欲测组分的纯物质加稀释剂（对液体试样用溶剂稀释，气体试样用载气或空气稀释）配制成不同质量分数的标准溶液，取固定量标准溶液进样分析，从所得色谱图上测得相应信号（峰面积或峰高），然后绘制响应信号（纵坐标）对质量分数（横坐标）标准曲线。

分析时，取和绘制的标准曲线时同样量的试样（固定量进样），测得该试样的响应信号，由标准曲线即可查出其质量分数。

用外标法进行定量具有不使用校正因子，操作简单，计算方便等优点，但是这种方法结果的准确度主要取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。

本实验以未知含量的乙醇样品为待测物，利用外标法，测定样品中乙醇的质量分数。

三、实验仪器与试剂仪器：1）GC7700 气相色谱仪、TCD 检测器 2）微量进样器 10μl 3）色谱柱 试剂：乙醇（分析纯）， 去离子水 载气：高纯氮四、实验步骤1．标准溶液的配制：在实验课前配好1号、2号、3号、4号、5号标准溶液（50–500ppb ） 2．GC7700（TCD ）的操作步骤：1）打开载气总阀门，至0.4 MPa ，保持半小时。

2）打开设备电源，TCD 设为“开”，设置各路温度参数，TCD 电流为“0”。

3）开启T2000工作站，观测设备输出信号。

4）15分钟后，气路稳定，确定TCD温度高于100o C并初步稳定,根据分析条件设TCD电流。

5）观测 TCD基线，调至可视范围，基本稳定后，调零（0-5mv）.6）进样分析，如出倒峰，则可通过修改TCD极性校正。

7）进样结束后，进行降温设置，或调用关闭设置，关闭TCD电流，各温度设置降到80o C 以下，关电源，关载气。

3．标准曲线的绘制：用微量进样器向色谱柱中进1号、2号、3号、4号、5号标准溶液各1μl，得到各标准溶液的色谱图，进行数据处理，绘制出标准曲线。

气相色谱发测定藿香正气液中乙醇含量（宜宾学院化学系宜宾 644000）袁杰摘要;讨论了藿香正气液气相中乙醇的气相色谱法测定条件，并对乙醇进行定量的测定。

关键词：藿香正气液乙醇气相色谱Abstract;Determination of the ethanol in HuoxiangZhengqi oral lquid by GC.Keywords：HuoxiangZhengqi oral lquid；Ethanol；GC.藿香正气水由苍术、陈皮、厚朴、白芷、茯苓等10味中药组成，具有解表祛暑、理气和中之功效，广泛应用于外感风寒、脘腹胀痛、呕吐、泄泻等症，是夏季必备良药【1】，为(中国药典> (2005版)一部【2】收载品种，被国家药监局定为首批非处方药。

其中乙醇含量的检测是一项重要指标，乙醇具有挥发性，《中华人民共和国药典》中采用气相色谱法测定各种制剂在20℃时乙醇的含量，因中药制剂中所有组分并非都能全部出峰，故采用内标法定量。

本文采用石英毛细管柱气相色谱法测定乙醇的含量。

方法快速、简便，适用于藿香正气水中乙醇的测定。

1 仪器与试药1．1仪器：Et日本岛津2010气相色谱仪。

1．2试药:无水乙醇(优级纯，含量大99.8％)，藿香正气水，正丁醇(内标物)。

2 试验方法与结果2．1 色谱条件日本岛津DB-WAX石英毛细管色谱柱 (30．0mm×0．25mm；0．25μm)；载气：高纯氮(纯度大于99．999％)；汽化室温度：180℃；FID温度：200℃：柱前压：86.3KPa；线速度：41.5cm／sec；柱流量：1．27mL·min-1；分流进样，分流比为100：1；进样量：0．5μL；柱温：80℃ (hold4min)。

尾吹气：氮气，流速为30mL·min-1；氢气流速为：40mL· min_1；空气流速为400mL·min-1。

2．2 溶液的配制2.2.1标准溶液的配制：精密量取正丁醇与无水乙醇各1mL。

第1期气相色谱测定餐香正气水中的乙醇33气相色谱测定蕾香正气水中的乙醇马孙艳涛（吉林师范大学化学学院，吉林四平#36000%摘要利用气相色谱法测定董香正气水中乙醇含量。

色谱柱为DB-WAX（30mX0.32mm,0.25 *m$汽化室温为210'；色谱柱温度为45',保留6mn,再以30'/min的速率升至220',保留3mn；检测器温度为230'；线速为19.7cm/sec o通过该实验能使学生熟练掌握气相色谱仪的基和工作原理,熟悉气相色谱法定性、定量分析品。

关键词：气相色谱正气水《国家中长改革和（2010—2020）》提岀）一位学生！,为每一位学生提供符合其自的'1-3（。

数据在化学教学中经常接触到，但是一般情况下并观，所以使用的仪器和技术可以多形态、多其，培养学生的观察能力、动手验仪器的能力以及的科学，并能够提升学生的和表达能力'一5°目前，手持技术利用传感器对一些微小的和化的数据进行测定（如酸度、温度和压强$然而自然界中大部分物质都是混合物，气相色谱品分离和测中常见的一种仪器！分率高、灵敏度高、选择性好、分析快和应用范围广等优：6-8：,在样品分析中占位。

，在中学化学教学过程中开设气相色谱分离混合物的拓验是非常的。

香正气水为一酊剂，由苍术、陈皮、广霍香等十中药组成'一10（，药品制备过程中所用到的溶剂为乙「，乙醇的含量对于药品的有效成分和稳定性有一定的影响，所以需对该类制剂含量检查口1-2。

1实验部分1.1实验原理谱法的实质是一理化学分离分析方法，基于混合物中各组分在相溶的两相中，具的分配系数，当两相做相，混合物中组分在两相间进行反复多次的分配，使得各组分在率上产生，从而得到分离。

各组分之间按照分配系数的后谱柱，分配系数小的，分配系数大的后流出。

被分离后的各组分再被载气带测器中，检测器组分的浓（或质量）的变化，转变成电压（或电流）的变化，由记录仪记录下来（如图1$得到的电压（电流）-时间曲线即浓度-时间曲线，称为色谱线（或色谱图）根据色谱图中保留时间对混合物中成分进行定性分析！和峰面积进行定量分析。

气相色谱检测气体乙醇的方法答案：一、气相色谱检测乙醇的基本原理气相色谱是一种基于蒸气化技术的分离和检测方法，其检测乙醇的原理是基于乙醇在分子筛上的吸附、扩散和脱附等过程。

通过对乙醇样品进行进样、分离、检测和定量分析，可以得到样品中乙醇及其他成分的含量信息。

二、乙醇气相色谱检测方法步骤1. 样品准备：将待测样品溶解于蒸馏水或其他适合的溶剂中，制成适当浓度的样品溶液。

2. 进样处理：将样品溶液用进样器加入气相色谱仪中，并通过加热脱附的方式将样品溶液中的乙醇转化为气态乙醇。

3. 柱温程序升温：在列柱温度升温的过程中，通过扩散和分离作用将气流中的乙醇分离开来。

4. 检测器检测：在检测器的作用下，分离出的乙醇会尽快到达检测器，并通过检测器对乙醇的检测和定量分析。

5. 结果处理：检测器将数据传输至计算机上进行处理，并输出各组分的相对峰面积、峰高、峰面积百分比及峰面积比、峰宽等定量分析数据和色谱图。

三、乙醇气相色谱检测方法的优缺点乙醇气相色谱检测方法具有以下优点：1. 灵敏度高：可以检测到非常微量、低浓度的乙醇。

2. 手段简单：操作简便，不需要特别复杂的实验仪器和条件。

3. 分离效果好：可以将样品中的乙醇和其他成分分离开来，保证检测的准确性。

但是，该方法也存在一些不足之处：1. 无法检测水样品：由于气相色谱检测乙醇需要将其转化为气态乙醇，因此无法对水样品进行检测。

2. 检测时间较长：相对于其他检测方法，气相色谱检测乙醇需要较长时间进行样品的分离和检测，平均检测时间为几分钟，有时可能需要几十分钟以上。

四、乙醇气相色谱检测的适用范围乙醇气相色谱检测方法适用于以下情况：1. 应用于乙醇生产和质量控制领域。

2. 适用于药品、化妆品、食品、生产车间等乙醇含量检测。

3. 应用于乙醇污染物检测领域。

【结论】乙醇气相色谱检测是一种有效的检测方法，能够对乙醇和其他成分进行精确、快速、准确的分离和定量分析。

但是，在应用过程中也需要考虑其不足之处，选择合适的检测方法进行分析。