肉桂多酚检测方法
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果汁中的多酚物质及测定食品产业网(2003-10-10)一、前言多酚物质是果汁的重要组成成分,已越来越多地引起人们的重视,并将其列为果汁的食品质量检测指标及工艺技术控制指标。
该指标的大小直接表明了果汁加工中工艺处理技术的好坏及氧化作用的程度。
在果汁品质鉴评上,多酚物质对果汁的色泽及口感也起重要作用,例果汁的杀口感及苦涩味等。
含量过低会失去该种果汁独特的风味,而含量过高则会使人产生不适感。
水果原料中所含酚类物质主要是羟基肉桂酸、羟基苯甲酸等酚酸和类黄酮化合物。
类黄酮化合物主要指儿茶酸类、红色和蓝色花青素及黄酮醇类物质。
黄烷酮类主要存在于柑桔类水果中。
儿茶酸和初花色素自由存在于果汁中,而花青素、黄酮醇则与糖结合,以葡萄糖苷的形式存在于果汁中,羟基肉桂酸和羟基苯甲酸则部分以酯和葡萄糖的形式存在于果汁中。
苹果汁和梨汁中的酚类物质有如下几种:羟基肉桂酸(例绿原酸)、黄烷醇( 儿茶酸)、无色花色素、花色素糖苷、黄酮醇及其糖苷(例芦丁)、碳酸酚、单宁(单宁酸)等。
黄烷醇及类黄酮化合物的络合物起酚类物质相同的作用,可以使果汁中的蛋白质类物质产生沉淀。
多酚物质的化学定性、定量检测及分离技术涉及到色普分析、光普分析、电泳分析、化学分析、仪器分析等数种分析方法联合应用,有时也用到沉降反应。
一般在生产实际应用的质量控制中,化学分析方法基本能满足测量果汁中多酚物质含量的要求。
化学分析方法利用了多酚物质的还原性、与芳香族化合物产生凝聚性及遇重金属离子产生络合物等特性。
由于验证这些特性具有较难的操作性,化学分析时一般应同时采用两种以上的反应原理和方法。
以苹果汁及梨汁的多酚含量分析为例,一种取样方法是在实验室现场榨汁取样,另一种取样方法是在生产车间的生产线上随机取样。
所用的分析试剂有:——利用其氧化作用及络合作用原理,用福林试剂测试总多酚物质——用香兰素(一种芳香醛)测试黄烷醇——用丁醇——盐酸混合物水解法,测类黄酮化合物二、测试方法及原理福林试剂是一种钨钠盐和钼钠盐的混合物,它能使多酚物质发生氧化还原反应。
多酚提取方法:多酚含量的提取按照Chiou等(2007)年的方法进行,取1g果肉,0-4℃冰浴研磨,加入10ml 75%甲醇,然后放入离心管中,超声波处理15min,然后摇床摇动12h,10, 500g离心10min,取上清液,然后残渣加入10ml 75%甲醇重复提取2次,合并上清液,用50ml蒸馏烧瓶30℃低压蒸馏2h,然后用蒸馏水溶解定溶到10ml,用于多酚含量的测定。
多酚检测方法:色谱条件:C18柱((250×4.6 mm);波长:280;流速:1 mL min-1流动相:A:乙酸/水(1:50, v:v)B:乙腈/甲醇(10:15, v:v)设置梯度洗脱:0 min:90% A and 10% B10 min:80% A and 20% B15 min:70% A and 30% B25 min:60% A and 40% B30 min:50% A and 50% B40 min:50% A and 50% B.标样图谱:(自己做的数据)标准样品重量g 定容体积ml 稀释倍数浓度g/ml ug/ml 出峰时间gallic acid 0.0061 25 100 0.00000244 2.44 4.914546 (+)catechin 0.0067 25 40 0.0000067 6.7 12.91146 ferulic acid 0.0059 25 40 0.0000059 5.9 21.38777 chlerogenic 0.0063 25 100 0.00000252 2.52 11.72349 caffeic acid 0.0097 25 100 0.00000388 3.88 15.92295 香豆酸0.0048 25 100 0.00000192 1.92 22.75522 phlorizin 0.005 25 100 0.000002 2 27.58096。
肉桂油中不饱和链和醛基的鉴定方法引言肉桂油是一种常用的药用和调味品,它含有丰富的不饱和脂肪酸和醛基物质。
鉴定肉桂油中不饱和链和醛基的方法对于其质量评估和功效分析具有重要意义。
本文将详细探讨肉桂油中不饱和链和醛基的鉴定方法。
鉴定方法一:色谱-质谱联用技术色谱-质谱联用技术是一种常用的分析方法,它将色谱和质谱两种技术相结合,能够同时得到物质的分离和结构信息。
下面是使用色谱-质谱联用技术鉴定肉桂油中不饱和链和醛基的步骤:1.样品制备:将肉桂油样品进行提取和纯化处理,以获取高纯度的样品溶液。
2.色谱分离:使用高效液相色谱(HPLC)或气相色谱(GC)对肉桂油样品进行分离,以将不饱和链和醛基等化合物分离出来。
3.质谱分析:将分离出的化合物通过质谱仪进行离子化和碎裂,得到质谱图。
4.质谱数据分析:根据质谱图中的峰形、相对分子质量和碎片离子等信息,结合数据库比对和谱图解析,确定肉桂油中不饱和链和醛基的种类和含量。
鉴定方法二:傅里叶变换红外光谱法傅里叶变换红外光谱法是一种常用的分析技术,它通过测量物质在红外辐射下的吸收谱图来分析物质的结构和功能基团。
下面是使用傅里叶变换红外光谱法鉴定肉桂油中不饱和链和醛基的步骤:1.样品制备:将肉桂油样品制备成固体样品或溶液样品。
2.测量光谱:使用傅里叶变换红外光谱仪对样品进行扫描,获取红外吸收谱图。
3.光谱解析:根据红外谱图中的吸收峰位置和强度,与已知化合物的参考光谱进行对比,确定肉桂油中不饱和链和醛基的存在。
鉴定方法三:核磁共振波谱法核磁共振波谱法是一种广泛应用的结构分析方法,能够得到物质的分子结构和相对数量的信息。
下面是使用核磁共振波谱法鉴定肉桂油中不饱和链和醛基的步骤:1.样品制备:将肉桂油样品进行溶解或乳化处理,以获得适合核磁共振测量的样品。
2.测量谱图:使用核磁共振仪对样品进行测量,获取核磁共振谱图。
3.谱图解析:通过分析谱图中的信号强度、峰形和峰位等信息,与已知化合物的核磁共振数据进行对比,确定肉桂油中不饱和链和醛基的存在。
一种肉桂总多酚提取物的制备方法及其应用一种肉桂总多酚提取物的制备方法及其应用发明人:卢欣王春丽(摘要:本发明公开了一种肉桂总多酚提取物,其特征在于按重量百分比计其中肉桂总多酚含量高于50%,杂质香豆素含量低于0.5%,桂皮醛含量低于5%。
该肉桂总多酚提取物是从肉桂中提取,经大孔树脂柱纯化制得,制备方法简单,提取效率高,生产成本低,安全性高,适于工业化生产。
该肉桂总多酚提取物可以制备成用于治疗、预防糖尿病及其并发症的口服片剂、口腔崩解片、含片、分散片、硬胶囊剂、软胶囊剂、缓释制剂、颗粒剂、丸剂、滴丸、口服液体制剂、干混悬剂等药物制剂。
)质香豆素含量低于0.5%,桂皮醛含量低于5%;而且,该肉桂总多酚提取物是通过包括以下步骤的方法进行的:(1) 将肉桂粉碎后,用10%~95%乙醇溶液提取至少一次,合并提取液,将提取液浓缩至几乎无醇味,加浓缩液0.5 倍~4 倍量的水稀释搅拌均匀,静置,除去沉淀物,得到肉桂粗提液;(2) 将(1) 所得的肉桂粗提液加于大孔吸附树脂柱,先用水或不高于15%的低浓度乙醇洗脱,将水或低浓度乙醇洗脱液弃去不用,除去极性大的杂质,再用20%~80%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,回收乙醇并浓缩,干燥,即得肉桂总多酚提取物。
2. 根据权利要求书1 所述的肉桂总多酚提取物,其特征在于所述的肉桂总多酚提取物中按重量百分比计总多酚含量高于60%,杂质香豆素含量低于0.1%,桂皮醛含量低于2.5%。
3. 根据权利要求1 或2 所述的肉桂总多酚提取物的应用,其特征在于肉桂总多酚提取物在制备治疗、预防糖尿病及其并发症的药物中的应用。
4. 根据权利要求3 所述的肉桂总多酚提取物在制备治疗、预防糖尿病及其并发症的药物中的应用,其特征在于所述的药物剂型包括:口服片剂、口腔崩解片、含片、分散片、硬胶囊剂、软胶囊剂、缓释制剂、颗粒剂、丸剂、滴丸、口服液体制剂、干混悬剂。
5. 根据权利要求1 或2 所述的肉桂总多酚提取物的应用,其特征在于肉桂总多酚提取物在制备有助于降低血糖的保健品中的应用。
多酚含量测定方法
嘿,朋友们!今天咱就来唠唠多酚含量测定方法这个事儿。
咱就说这多酚啊,那可真是个宝贝!它在好多食物里都有,对咱身体可有好处啦。
那怎么知道某种东西里多酚含量有多少呢?这就得靠一些专门的测定方法啦。
就好比说,你想知道一杯茶里有多少多酚,就像你想知道自己口袋里有多少钱一样,得有个办法去数清楚呀!这测定方法就像是你的小算盘,能帮你把这个数给算明白咯。
常见的一种方法呢,就像是侦探找线索一样,通过一些化学反应来找到多酚的踪迹。
把样品放进去,然后加上各种试剂,就等着看会有什么奇妙的变化发生。
这过程可有趣啦,就像变魔术一样,看着颜色变来变去,最后就能得出个结果来。
还有一种方法呢,就像是给多酚做个专属标记,然后能清楚地知道它在哪里,有多少。
这种方法更精确一些,但也稍微复杂一点。
你想想看啊,要是没有这些方法,咱不就像在黑夜里摸瞎,啥都搞不清楚啦?那多郁闷啊!咱得感谢那些聪明的科学家们,想出了这些办法来。
测定多酚含量,就像是给食物做个体检,能让我们更清楚地了解它们。
咱就能根据这个来选择更健康、更有营养的东西吃。
比如说,你知道某种水果多酚含量特别高,那你是不是就会更乐意吃它呀?
而且啊,这对食品行业也很重要呢!厂家可以根据测定结果来改进产品,让我们消费者吃得更放心、更满意。
这不是一举多得的好事吗?
总之呢,多酚含量测定方法可太重要啦!它就像一把钥匙,能打开我们了解食物的大门。
让我们能更好地享受美食,也能更好地照顾自己的身体。
所以啊,咱可不能小瞧了它哟!大家都要重视起来呀!。
目的:制定肉桂的质量标准。
适用范围:肉桂的检验责任人:化验员、化验室主任、质量部长。
标准依据:《中国兽药典》2010年版二部。
内容:本品为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl 的干燥树皮。
多于秋季剥取,阴干。
【性状】本品呈槽状或卷筒状,长30~40cm,宽或直径3~10cm,厚0.2~0.8cm。
外表面灰棕色,稍粗糙,有不规则的细皱纹及横向突起的皮孔,有的可见灰白色的斑纹;内表面红棕色,略平坦,有细纵纹,划之显油痕。
质硬而脆,易折断,断面不平坦,外层棕色而较粗糙,内层红棕色而油润,两层间有 1条黄棕色的线纹。
气香浓烈,味甜、辣。
【鉴别】 (1) 本品横切面:木栓细胞数列,最内层细胞外壁增厚,木化。
皮层散有石细胞及分泌细胞。
中柱鞘部位有石细胞群,断续排列成环,外侧伴有纤维束,石细胞通常外壁较薄。
韧皮部射线宽1~2列细胞,含细小草酸钙针晶;纤维常2~3个成束;油细胞随处可见。
薄壁细胞含淀粉粒。
粉末红棕色。
纤维大多单个散在,长梭形,长195~920μm,直径约至50μm,壁厚,木化,纹孔不明显。
石细胞类方形或类圆形,直径32~88μm,壁厚,有的一面菲薄。
油细胞类圆形或长圆形,直径45~108μm。
草酸钙针晶细小,散在于射线细胞中。
木栓细胞多角形,含红棕色物。
(2) 取本品粉末0.5g,加乙醇10ml,冷浸20分钟,时时振摇,滤过,滤液作为供试品溶液。
另取桂皮醛对照品,加乙醇制成每1ml含1μl 的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液 2~ 5μl,对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(17:3) 为展开剂,展开,取出,晾干,喷以二硝基苯肼乙醇试液。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】水分照水分测定法(第二法)测定,不得过15.0%。
总灰分不得过5.0%。
【含量测定】挥发油照挥发油测定法(乙法)测定。
GMP管理文件一.目的:为规范肉桂的检验标准和生产要求,特制定此标准。
二.适用范围:适用于中药材肉桂的质量检验。
三.责任者:质量检验员四.正文:检品名称:肉桂检验依据:《肉桂内控质量标准》检验仪器:显微镜干燥箱马弗炉高效液相色谱仪操作内容:【性状】本品呈槽状或卷筒状,长30~40cm,宽或直径3~10cm,厚0.2~0.8cm。
外表面灰棕色,稍粗糙,有不规则的细皱纹及横向突起的皮孔,有的可见灰白色的斑纹;内表面红棕色,略平坦,有细纵纹,划之显油痕。
质硬而脆,易折断,断面不平坦,外层棕色而较粗糙,内层红棕色而油润,两层间有1条黄棕色的线纹。
气香浓烈,味甜、辣。
【鉴别】(1)本品横切面:木栓细胞数列,最内层细胞外壁增厚,木化。
皮层散有石细胞及分泌细胞。
中柱鞘部位有石细胞群,断续排列成环,外壁伴有细胞束,石细胞通常外壁较薄。
韧皮部射线宽1-2列细胞,含细小草酸钙针晶;纤维常2-3个成束;油细胞随处可见。
薄壁细胞含淀粉粒。
粉末红棕色。
纤维大多单个散在,长梭形,长195-920um,直径约至50um,壁厚,木化,纹孔不明显,石细胞类方形或类圆形,直径32-88um,壁厚,有的一面菲薄。
油细胞类圆形或长圆形,直径45-108um。
草酸钙针晶细小,散在于射线细胞中,木栓细胞多角形,含红棕色物。
(2)取本品粉末0.5g,加乙醇10ml,冷浸20分钟,时时振摇,滤过,滤液作为供试品溶液,另取桂皮醛对照品,加乙醇制成每1ml 中含1ul的溶液,作为对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液2-5ul,对照品溶液2ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚-乙酸乙酯(17:3)为展开剂,展开取出,晾干,喷以二硝基苯肼乙醇试液。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】水分照水分测定法测定,不得过15.0%。
总灰分不得过5.0%。
【含量测定】挥发油照挥发油测定法测定。
本品含挥发油不得少于1.2%(ml/g)。
肉桂多酚检测方法1. 目的建立用紫外分光光度法测定肉桂多酚含量的标准检验操作规程。
2. 范围适用于肉桂提取物中多酚含量的检测。
3. 对照品没食子酸(Gallic acid , C6H2(OH)3COOH·H2O)4. 试剂4.1钨酸钠(Na2WO4·2H2O,分析纯)4.2钼酸钠(Na2MO4·2H2O,分析纯)4.3碳酸钠(Na2CO3·10H2O,分析纯)4.4盐酸(分析纯)4.5 85%磷酸(分析纯)4.6溴(分析纯)4.7硫酸锂(Li2SO4·H2O,分析纯)4.8水(蒸馏水)5. 仪器5.1 紫外-可见光分光光度计5.2 分析天平:感量0.00001g5.3超声波清洗仪:功率250W,频率40KHz5.4 玻璃量器:量筒(100ml)刻度试管,棕色容量瓶等。
5.5 电热套6. 溶液的制备6.1 磷钼钨酸试液(phosphomolybdotungstic reagent )取50g钨酸钠,12.5g钼酸钠于1000ml的圆底烧瓶中,加入350ml水溶解,加25ml 85%磷酸,50ml浓盐酸在电热套上加热回流10h,放冷,加硫酸锂75g和0.1ml溴,开口煮沸15分钟除去残留的溴,溶液的最终颜色为黄色,无蓝色和绿色痕迹(如果为绿色,可加入0.2ml溴,煮沸除去多余的溴),冷却至室温后加水定容至500ml,过滤,置棕色瓶中备用(应在2-8℃储存)6.2 对照品溶液的制备精密称取没食子酸约50mg于100ml的棕色容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,精密量取5ml,置50ml的棕色量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含没食子酸0.05mg)。
6.3 样品溶液的制备精密称取样品适量(相当于多酚2.5mg)约50mg于50ml容量瓶中,加水约40ml,超声提取30分钟后,放置至室温,用水定容至刻度,摇匀,过滤,即得样品溶液。
7. 测定精密吸取样品溶液和对照品溶液各2.0ml于25ml的容量瓶中,加磷钼钨酸试液1ml,再分别加水10.0ml,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀,放置30分钟,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法,在760nm的波长处测定溶液的吸光度。
肉桂多酚的药理作用研究进展作者:胡少平来源:《云南中医中药杂志》2014年第05期关键词:肉桂多酚;药理;研究进展中图分类号:R969文献标志码:A文章编号:1007-2349(2014)05-0079-03肉桂(cinnamomum cassia presl)为樟科植物肉桂的干燥树皮,性辛甘,归肾、脾心、肝经,具有补火助阳、散热止痛、温通经脉的功效,作为香料与药物有着悠久的历史[1]。
肉桂对心血管系统、消化系统和免疫系统疾病均有良好的疗效,具有镇痛、抗菌和抗肿瘤等作用,主要活性成分有肉桂醛,肉桂酸,挥发油,多酚类,多糖类以及无机物等[2]。
桂皮醛,肉桂精油等的药理作用已有很深入的研究,对肉桂多酚的药理研究在最近几年取得了重大进步。
本文将近年来国内外肉桂多酚在药理作用的研究进行总结,旨在更清晰的了解肉桂多酚并为研究者进一步开发肉桂提供参考。
1肉桂多酚的主要成分及提取工艺肉桂中含有的已鉴定出结果的多酚主要为类黄酮类及其多聚体化合物,包括儿茶素,表儿茶精,肉桂多酚A2、A 3、A4,甲基羟基査耳酮,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),原花青素-A,原花青素-B(单倍体、二聚体、三聚体、多聚体),缩合单宁,阿魏酸等。
Luo[3]在肉桂水提物中分离出3种新化合物,两个为木脂素糖苷和一个酚苷。
多酚是肉桂中的主要成分,随着其药理作用日渐被人们所关注,体提取工艺也被逐渐优化。
平华等[4]最先通过正交试验设计确定提取肉桂中多酚物质的最佳工艺条件:加水量为药物粉末的12倍,温度60℃和提取时间1h,此条件下多酚提取率达到最高,为5.04 mg/g。
姜琼等[5]后也对乙醇体积分数、料液比、提取温度、提取时间等条件做了优化,最佳提取工艺为乙醇体积分数30%,料液比1:10,提取温度80℃,提取时间90 min,总多酚平均提取率为3.9%。
陆文耀等[6]在肉桂多酚的提取工艺上取得了突破。
其在水提法的基础上加了酶催化,在温度40℃,加酶量为0.15%,pH为6时提取2 h,多酚提取率为15.49 mg/g,与水提法比较提高了20.92%。
4-肉桂苯酚测试标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容可以从以下几个方面来进行描述:肉桂苯酚是一种常用的化学试剂,具有多种应用领域。
它是一种有机化合物,常见于肉桂和肉桂油中,因其具有较强的香气特性而被广泛应用于食品、香精、医药和化妆品等行业。
在食品工业中,肉桂苯酚常用作香料添加剂,能够增添各种食品的香味,提升其口感和品质。
同时,肉桂苯酚还具有抗氧化和抗菌的作用,能够延长食品的保鲜期,这使其在食品工业中得到了广泛应用。
在香精行业中,肉桂苯酚被广泛用于制作各类香水、香薰和空气清新剂等产品。
其独特的香气能够给人带来舒适和愉悦的感受,因此深受消费者的喜爱。
此外,肉桂苯酚还具有一定的药用价值。
它被广泛用于中药配方中,用于治疗消化不良、食欲不振、感冒发热等症状。
其具有抗菌、抗炎和镇痛的作用,使其成为中药制剂中不可或缺的一部分。
最后,在化妆品领域,肉桂苯酚也是一种重要的成分。
由于其具有抗氧化和抗菌的特性,因此被广泛用于护肤品中,能够提供肌肤的保护和修复效果。
综上所述,肉桂苯酚作为一个多功能的化学试剂,在食品、香精、医药和化妆品等领域都有着广泛的应用。
本文将重点介绍肉桂苯酚的测试标准及其相关内容,以期能够为相关行业提供参考和指导。
1.2文章结构1.2 文章结构本文结构如下:引言部分首先概述了本文的主题,即肉桂苯酚测试标准。
接着介绍了文章整体的结构,包括正文部分的两个要点以及结论部分的总结要点和对未来研究的展望。
通过这样的结构,读者可以清晰地了解整篇文章的内容安排。
正文部分将重点分为两个要点来讨论肉桂苯酚测试标准。
第一个要点将详细介绍肉桂苯酚的相关背景知识,包括其化学性质、用途以及可能存在的危害性。
同时,还将介绍已有的肉桂苯酚测试标准的情况,对其进行评估和分析。
第二个要点将讨论肉桂苯酚测试标准的制定和应用。
主要包括标准制定的背景和必要性、标准制定的过程和参与者以及标准的应用情况。
此外,还将介绍相关的测试方法和技术,以及测试结果的评估和解读。
第1篇一、实验目的1. 了解肉桂的化学成分及提取方法;2. 掌握提取过程中常用的溶剂及提取方法;3. 掌握肉桂的鉴定方法;4. 分析肉桂提取物的化学成分。
二、实验原理肉桂皮是肉桂树的干燥树皮,具有独特的香气和药用价值。
肉桂皮中含有多种化学成分,如挥发油、黄酮类、生物碱等。
本实验采用溶剂提取法提取肉桂皮中的有效成分,并通过化学鉴定方法对提取物进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:肉桂皮粉末、无水乙醇、乙酸乙酯、苯、硅胶、活性炭等。
2. 实验仪器:回流提取器、旋转蒸发仪、分光光度计、色谱柱、薄层色谱板、紫外灯等。
四、实验方法1. 肉桂皮提取(1)称取一定量的肉桂皮粉末,置于回流提取器中;(2)加入适量无水乙醇,加热回流提取2小时;(3)冷却后,过滤提取液,得到肉桂皮提取物。
2. 肉桂皮鉴定(1)薄层色谱法:将肉桂皮提取物点在薄层色谱板上,用不同极性的溶剂进行展开,观察色谱峰,与标准品进行对比;(2)紫外光谱法:将肉桂皮提取物进行紫外光谱扫描,与标准品的光谱图进行对比;(3)气相色谱法:将肉桂皮提取物进行气相色谱分析,与标准品进行对比。
五、实验结果与分析1. 肉桂皮提取实验成功提取了肉桂皮中的有效成分,提取率为80%。
2. 肉桂皮鉴定(1)薄层色谱法:通过展开后观察,发现色谱峰与标准品相似,初步判断提取物中含有挥发油、黄酮类等成分;(2)紫外光谱法:通过紫外光谱扫描,发现提取物与标准品的光谱图相似,进一步确认提取物中含有挥发油、黄酮类等成分;(3)气相色谱法:通过气相色谱分析,发现提取物与标准品具有相似的特征峰,进一步确认提取物中含有挥发油、黄酮类等成分。
六、实验讨论1. 实验中使用的溶剂对提取效果有较大影响,无水乙醇和乙酸乙酯提取效果较好;2. 肉桂皮提取过程中,提取时间、温度、溶剂用量等因素对提取效果有较大影响;3. 肉桂皮鉴定方法中,薄层色谱法、紫外光谱法、气相色谱法等均可用于鉴定,可根据实际情况选择合适的方法。
多酚测定方法原理原理以没食子酸为主的多酚类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物,该化合物在765nm处有最大吸收,且吸收值与多酚化合物含量成正比,以没食子酸为标准物质,标准曲线法定量。
试剂(1)钨酸钠――钼酸钠混合溶液:称取50.0g钨酸钠,12.5g钼酸钠,用350ml水溶解到1000ml的回流瓶中,加入25ml磷酸及50ml盐酸,充分混匀,小火加热回流两小时,再加入75g硫酸锂、25ml蒸馏水、数滴溴水,然后继续沸腾15min(至溴水完全挥发为止),冷却后,转入500ml容量瓶定容,过滤,至棕色瓶中保存,使用时稀释一倍。
(2) 75g/L碳酸钠溶液:称取37.5g无水碳酸钠溶于250ml温水中,混匀,冷却,稀释至500ml,过滤到储液瓶中备用。
(3)没食子酸标准储备液:准确称取0.1100g一水合没食子酸,溶解并定容至100ml,此溶液没食子酸质量浓度为1000mg/L,在冰箱中2――3度可保存五天。
(4)没食子酸标准使用液:分别称取1000mg/L的没食子酸标准储备液0、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml和5.0ml至100ml容量瓶中,定容,溶液质量浓度为0、10.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L、40.0mg/L、50.0mg/L。
分析步骤(3)标准曲线的绘制:吸取0、10.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L、40.0mg/L、50.0mg/L的没食子酸标准使用液各1.0ml,分别加5.0ml水,1.0ml钨酸钠――钼酸钠混合溶液和3.0ml 碳酸钠溶液,混匀,没食子酸标准溶液浓度分别为0、1.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L、5.0mg/L,显色,放置2小时,以标准曲线的“0”管为空白,在765nm波长下测定标准溶液的吸光度,以没食子酸浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
(4)样品的测定:吸取1.0ml试样提取液,分别加入5.0ml水,1.0ml钨酸钠――钼酸钠混合溶液和3.0ml 碳酸钠溶液,显色,放置2小时,以标准曲线的“0”管为空白,在765nm波长下测定试样溶液的吸光度,根据标准曲线求出试样溶液的多酚浓度,以没食子酸计,如果吸光度值超过5.0mg/L没食子酸的吸光度时,将样品提取液稀释后重新测定。
多酚检测方法5.6 分光光度法(UV)测定提取物中多酚含量的操作规程5.6.1 试剂:5.6.1.1 盐酸(AR)5.6.1.2 磷酸(AR)5.6.1.3 重蒸水(HPLC级)5.6.1.4 钼酸钠(AR)5.6.1.5 钨酸钠(AR)5.6.1.6 硫酸锂(AR)5.6.1.7 溴(AR)5.6.1.8 乙醇(AR)5.6.1.9 无水碳酸钠(AR)5.6.2 对照品表儿茶素(购自Sigma 公司)标定含量的提取物对照样5.6.3 仪器和用具5.6.3.1 玻璃仪器:容量瓶(50ml)、移液管(1ml、10ml)、比色皿:1cm、量筒。
5.6.3.2 电子天平:1/10000(德国产赛多利斯)5.6.3.3 紫外分光光度计(上海产53WB)5.6.3.4超声波清洗器5.6.4 操作步骤:5.6.4.1 斐林C试剂的配置:在2L的磨口瓶回流装置内加入100g 钨酸钠(NaWO4.2H2O),25g钼酸钠(NaMO4.2H2O),700ml重蒸水,再加入50ml磷酸及100ml盐酸,充分混合后在电加热帽加热至微沸腾,保持温度回流10小时,再加入150g硫酸锂(LiSO4),50ml重蒸水及数滴溴,然后打开口继续加热15分钟,以便驱除过量的溴,冷却至室温用重蒸水定容至1L,过滤放入棕色瓶中于冰箱保存。
使用前取一定体积再稀释1倍使用,没有稀释的斐林C试剂可长期贮藏在冰箱中,一般情况试剂呈金黄色,如果试剂呈绿色则弃去。
5.6.4.2 20%碳酸钠溶液的配置:精密称取20g无水碳酸钠置于100ml容量瓶中,加入重蒸水超声溶解,冷却至室温,用重蒸水定容至刻度,备用。
5.6.4.3. 测定:5.6.4.3.1 精密称取提取物粉末15mg加入50ml容量瓶中,用50%的甲醇超声15min使溶解,冷却至室温,50%甲醇定容至刻度,摇匀。
5.6.4.3.2 精密吸取上述溶液1ml至50ml容量瓶中,加入20~30ml重蒸水,再加入2.5ml稀释后的斐林C试剂,静置8min,后加入10ml20%的碳酸钠溶液,用重蒸水定容至刻度,静置2h。
多(总)酚含量测定法(Folin-Ciocalteu试剂法)李熙灿/Xican Li(广州中医药大学)[文献] Xican Li, Jing Lin, Yaoxiang Gao, Weijuang Han, Dongfeng Chen. Antioxidant activity and mechanism of Rhizoma Cimicifugae. Chemistry Central Journal. 2012; 6(1):140.操作图解[溶液配制]1Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
2 15%Na2CO3溶液(W/V)的配制取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
3 标准溶液的配制(以连苯三酚为例)精确称取连苯三酚标准品10mg.用水溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的对照品标准溶液。
4 连苯三酚标准曲线的绘制APyrogallol Concentration mg/mLA = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL ,A 值在0.039-1.928之间。
5 样品溶液的配制 样品母液(1mg/mL ):精确称取样品2mg ,用95乙醇溶解并定容到2mL ,得1mg/mL 样品母液。
试剂+即可,注意观察A 值大小。
6 多酚含量的计算依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
7 说明7.1 不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;7.2 Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 M,使用前最好稀释。
也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。
肉桂多酚检测方法
1. 目的
建立用紫外分光光度法测定肉桂多酚含量的标准检验操作规程。
2. 范围
适用于肉桂提取物中多酚含量的检测。
3. 对照品
没食子酸(Gallic acid , C6H2(OH)3COOH·H2O)
4. 试剂
4.1钨酸钠(Na2WO4·2H2O,分析纯)
4.2钼酸钠(Na2MO4·2H2O,分析纯)
4.3碳酸钠(Na2CO3·10H2O,分析纯)
4.4盐酸(分析纯)
4.5 85%磷酸(分析纯)
4.6溴(分析纯)
4.7硫酸锂(Li2SO4·H2O,分析纯)
4.8水(蒸馏水)
5. 仪器
5.1 紫外-可见光分光光度计
5.2 分析天平:感量0.00001g
5.3超声波清洗仪:功率250W,频率40KHz
5.4 玻璃量器:量筒(100ml)刻度试管,棕色容量瓶等。
5.5 电热套
6. 溶液的制备
6.1 磷钼钨酸试液(phosphomolybdotungstic reagent )
取50g钨酸钠,12.5g钼酸钠于1000ml的圆底烧瓶中,加入350ml水溶解,加25ml 85%磷酸,
50ml浓盐酸在电热套上加热回流10h,放冷,加硫酸锂75g和0.1ml溴,开口煮沸15分钟除去残留的溴,溶液的最终颜色为黄色,无蓝色和绿色痕迹(如果为绿色,可加入0.2ml溴,煮沸除去多余的溴),冷却至室温后加水定容至500ml,过滤,置棕色瓶中备用(应在2-8℃储存)
6.2 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸约50mg于100ml的棕色容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,精密量取5ml,置50ml的棕色量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含没食子酸0.05mg)。
6.3 样品溶液的制备
精密称取样品适量(相当于多酚2.5mg)约50mg于50ml容量瓶中,加水约40ml,超声提取30分钟后,放置至室温,用水定容至刻度,摇匀,过滤,即得样品溶液。
7. 测定
精密吸取样品溶液和对照品溶液各2.0ml于25ml的容量瓶中,加磷钼钨酸试液1ml,再分别加水10.0ml,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀,放置30分钟,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法,在760nm的波长处测定溶液的吸光度。
8. 结果计算
按照下面的公式计算样品多酚的含量。
Ax×Ws
含量(%)= ×100%
W x×As×20
式中:
Ax —样品溶液的吸光度值;
As —对照品溶液的吸光度值;
Ws —对照品的称样量(mg);
W x —样品的称样量(mg)。