实验一++细菌的形态结构观察及显微镜油镜的...

一、实验目的1. 掌握显微镜油镜的使用方法。

2. 通过观察细菌的形态结构，了解细菌的基本特征。

3. 熟悉细菌的分类方法，为后续的细菌鉴定工作打下基础。

二、实验原理细菌是微生物的一种，具有个体微小、结构简单、繁殖迅速等特点。

细菌的形态结构主要包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等基本结构，以及鞭毛、荚膜、芽孢等特殊结构。

通过观察细菌的形态结构，可以初步判断其种类，为后续的细菌鉴定工作提供依据。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌。

2. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、无菌操作台、无菌试管、酒精灯、火柴、镊子、滴管、染色液（结晶紫、碘液、番红）等。

四、实验步骤1. 细菌涂片制作（1）取无菌试管，加入适量的细菌培养液。

（2）用无菌镊子取少量细菌培养液，滴于载玻片上。

（3）用无菌盖玻片轻轻压在细菌培养液上，使细菌均匀分布。

（4）用酒精灯对载玻片进行轻微加热，使细菌固定。

2. 细菌染色（1）用滴管滴加适量的结晶紫染液于载玻片上的细菌涂片上。

（2）染色约1分钟，然后用滴管滴加适量的碘液。

（3）染色约1分钟，用蒸馏水冲洗载玻片上的染色液。

（4）用番红染液复染约1分钟，用蒸馏水冲洗载玻片上的染色液。

3. 细菌观察（1）将载玻片置于显微镜下，调整光圈和焦距，使视野清晰。

（2）观察革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌的形态结构。

（3）记录观察结果，包括细菌的大小、形状、排列方式、染色特性等。

五、实验结果与分析1. 革兰氏阳性球菌：呈球形，直径约1～2微米，排列成单行、双行或链状。

染色后，菌体呈紫色。

2. 革兰氏阴性球菌：呈球形，直径约1～2微米，排列成单行、双行或链状。

染色后，菌体呈红色。

3. 革兰氏阳性杆菌：呈杆状，直径约0.5～1微米，长度约为2～5微米，排列成单行、双行或链状。

染色后，菌体呈紫色。

4. 革兰氏阴性杆菌：呈杆状，直径约0.5～1微米，长度约为2～5微米，排列成单行、双行或链状。

实验一细菌的形态结构观察及显微镜油镜的使用【目的和要求】1．熟悉微生物实验室规则并xx。

2．掌握细菌基本形态和特殊结构的观察方法。

3．掌握光学显微镜油镜的使用和维护方法，了解荧光显微镜和暗视野显微镜的构造和使用方法。

【试剂与器材】1．示教片：各种球菌、杆菌、弧菌、荚膜、鞭毛、芽胞的示教片。

2．器材及其他：光学显微镜、载玻片、擦镜纸、香柏油、脱油剂等。

【实验内容】一、细菌基本形态和特殊构造的观察1．细菌的基本形态（各种球菌、杆菌、弧菌等）观察要点：注意细菌的染色性、相对大小、形状及排列方式。

2．特殊结构的观察（荚膜、芽胞、鞭毛）观察要点：注意这些特殊结构的大小、形状及其在菌体中的位置，均有助于细菌的鉴定。

二、光学xx油镜的使用1．光学xx的构造光学显微镜是观察细菌形态最常用的一种仪器，其构造分为机械部分和光学部分，机械部分包括：镜座、镜臂、载物台、镜筒、镜头转换器、调焦装置等；光学部分包括：接物镜、接目镜、反光镜、聚光器、光圈等（见图1-1）。

图1-1光学xx的构造显微镜的接物镜有低倍镜、高倍镜、油镜三种，放大倍数依次增高，其识别方法为：（1）低倍镜：镜头标志为10×或，镜头最短，其上常刻有黄色环圈。

（2）高倍镜：镜头标志为40×或，镜头较长，其上常刻有蓝色环圈。

（3）油镜：镜头标志为100×或，镜头最长，其上常刻有白色环圈，或“oil”字样。

2．油镜的使用原理图1-2xx油镜的使用原理油镜的放大倍数高而透镜很小，自标本片透过的光线，因玻片和空气的折光率不同（玻璃n=1.52，空气n=1.0），部分光线经载玻片进入空气后发生折射，不能进入接物镜，致使射入光线较少，物象不清晰。

在油镜和载玻片之间滴加和玻璃折光率相近的香柏油（n=1.515），则使进入油镜的光线增多，视野光亮度增强，物象清晰（见图1-2）。

3．使用方法（1）采光：使用显微镜时必须端坐，将显微镜放在胸前适当位置。

实验一油镜的使用及细菌形态的观察普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。

以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成,而当前使用的显微镜由一套透镜组成。

普通光学显微镜通常能将物体放大1500?2000倍。

一显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分:一为机械装置,一为光学系统,这两部分很好的配合,才能发挥显微镜的作用。

1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件1镜座 ?镜座是显微镜的基本支架,它由底座和镜臂两部分组成。

在它上面连接有载物台和镜筒,它是用来安装光学放大系统部件的基础。

2镜筒 ?镜筒上接接目镜,下接转换器,形成接目镜与接物镜装在转换器下间的暗室。

从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。

因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。

镜筒长度的变化,不仅放大倍率随之变化,而且成像质量也受到影响。

因此,使用显微镜时,不能任意改变镜筒长度。

国际上将显微镜的标准筒长定为160mm,此数字标在物镜的外壳上。

3物镜转换器 ?物镜转换器上可安装3?4个接物镜,一般是三个接物镜低倍、高倍、油镜。

Nikon显微镜装有四个物镜。

转动转换器,可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通,与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。

4载物台? 载物台中央有一孔,为光线通路。

在台上装有弹簧标本夹和推动器,其作用为固定或移动标本的位置,使得镜检对象恰好位于视野中心。

5推动器? 是移动标本的机械装置,它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的,好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺,构成很精密的平面座标系。

如果我们须重复观察已检查标本的某一部分,在第一次检查时,可记下纵横标尺的数值,以后按数值移动推动器,就可以找到原来标本的位置。

6粗动螺旋 ?粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件,老式显微镜粗螺旋向前扭,镜头下降接近标本。

新近出产的显微镜如Nikon显微镜镜检时,右手向前扭载物台上升,让标本接近物镜,反之则下降,标本脱离物镜。

一、实验目的1. 掌握显微镜油镜的使用方法。

2. 观察细菌的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。

3. 了解细菌的特殊结构，如鞭毛、荚膜、芽孢等。

4. 培养对细菌形态结构的识别能力。

二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有多种形态结构。

通过显微镜观察，可以了解细菌的基本形态和特殊结构，为细菌的分类、鉴定和致病性研究提供依据。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：细菌样本、革兰氏染色液、芽孢染色液、水浸片、盖玻片、载玻片等。

2. 仪器：光学显微镜、酒精灯、载物台、切片刀、镊子等。

四、实验步骤1. 观察细菌样本（1）将细菌样本滴在载玻片上，用盖玻片封口。

（2）在显微镜下观察细菌的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。

2. 革兰氏染色（1）将革兰氏染色液滴在细菌样本上，用酒精灯加热。

（2）观察染色后的细菌，判断其革兰氏分类。

3. 芽孢染色（1）将芽孢染色液滴在细菌样本上，用酒精灯加热。

（2）观察染色后的细菌，判断其芽孢存在与否。

4. 观察细菌特殊结构（1）观察细菌是否有鞭毛、荚膜等特殊结构。

（2）通过水浸片观察细菌的运动。

五、实验结果与分析1. 细菌样本的基本形态结构（1）观察到的细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等基本结构。

（2）部分细菌具有鞭毛、荚膜等特殊结构。

2. 革兰氏染色结果（1）部分细菌呈现革兰氏阳性，细胞壁较厚，不易着色。

（2）部分细菌呈现革兰氏阴性，细胞壁较薄，易着色。

3. 芽孢染色结果（1）部分细菌存在芽孢，呈圆形或椭圆形。

（2）部分细菌无芽孢。

4. 细菌特殊结构观察结果（1）部分细菌具有鞭毛，呈螺旋状。

（2）部分细菌具有荚膜，呈透明状。

六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了显微镜油镜的使用方法。

2. 观察了细菌的基本形态结构和特殊结构，了解了细菌的生物学特性。

3. 培养了对细菌形态结构的识别能力，为今后的学习和研究奠定了基础。

七、注意事项1. 使用显微镜时，注意调节光圈和焦距，确保观察清晰。

实训一显微镜油镜的使用及细菌形态结构观察实训指导实训目标能利用显微镜油镜观察细菌的基本形态和特殊结构，并会进行显微镜的保养。

仪器及材料显微镜、香柏油、乙醇乙醚或二甲苯、擦镜纸、细菌染色标本片。

方法与步骤一、油镜的识别油镜是接物镜的一种，使用时需在物镜和载玻片之间添加香柏油，因此称为油镜。

可根据以下几点识别。

1•一般来讲，接物镜的放大倍数越大，长度就越长，作为光学显微镜，油镜的放大倍数最大，故油镜最长。

2.油镜的放大倍数为90X或100X ,使用时应查看油镜上标明的倍数。

3.不同光学仪器厂生产的各类显微镜，往往在接物镜上有一白色色环作为油镜的标记，或直接在油镜头上标有“油”字或“ oil ”字样，有的标有“HI” 字样。

二、油镜的使用原理主要避免部分光线折射的损失。

因空气的折光率(n=1.0)与玻璃的折光率(n=1.52)不同，故有一部分光线被折射，不能射入镜头，加之油镜的镜面较小，进入镜中的光线比低倍镜、高倍镜少得多，致使视野不明亮。

为了增强视野的亮度，在镜头和载玻片之间滴加一些香柏油，这样绝大部分的光线射入镜头，使视野明亮，物像清晰。

因香柏油的折光率(n=1.515)和玻璃的相近。

三、使用方法1•放置显微镜使用时应放置在便于采光(电光源显微镜除外)而平稳的实验桌或实验台上。

2.调节视野亮度尽量升高聚光器，放大光圈，调节反光镜，使射入镜头的光线最强。

3.标本片的放置于标本片的欲检部位，用香柏油壶滴加香柏油一滴，将标本片固定于载物台正中，用油镜检查。

4.镜检首先眼睛从镜筒右侧注视油镜头，小心转动粗调节器，使镜筒下降，直至油镜头浸没油中，几乎与玻片相接触，但不要碰到玻片。

然后，一面从目镜观察，一面徐徐转动粗调节器使镜筒上升，待得到模糊物像时，再换用细调节器，直至物像完全清晰为止。

此时，切勿用粗调节器下降油镜，以免压碎玻片，损坏油镜头。

5.油镜的保养油镜用毕，应以擦镜纸拭去镜头上的香柏油，如油已干或透镜模糊不清，可滴加少量二甲苯于擦镜纸上，拭净油镜头，并随即用擦镜纸拭去二甲苯（以免二甲苯溶解粘固镜片的胶质使其脱胶，致使镜片移位或脱落），然后，把低倍镜转至中央，高倍镜和油镜转成“八”字形，使镜筒和聚光器下降，反光镜垂直，用绸布包好放入镜箱，存放于阴凉干燥处，避免受潮生锈。

实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察本次实验主要介绍了显微镜油镜的使用以及细菌形态的观察。

显微镜是生物科学中最基本最必要的仪器，也被称为生命科学研究的窗口。

而观察细菌形态则是微生物学重要的研究内容之一，对于深入了解微生物的特性和分类十分关键。

一、显微镜油镜的使用1、准备工作在使用显微镜前，需要对仪器做一些准备工作，具体如下：（1）检查显微镜是否清洁干净。

使用棉花棒和无水酒精擦拭镜头和接口。

（2）插入镜片，拧紧螺丝。

注意，平光镜的凹面朝上。

（3）透镜的高度应调整至最高点，油镜周围涂上润滑油。

（4）在准备好玻片后，使用无菌针将样本划到玻片上。

2、操作步骤（1）将玻片插入载置物台。

调整光源，使其在镜片下方成圆形状。

（2）使用低倍放大的物镜，在载置物台下调整样本位置，然后转动焦点，调整到最清晰的位置。

（3）切换到高倍物镜。

在不移动载置物台的情况下，调整焦距直至视野内的细胞详细可见。

（4）将油镜轻轻接触载置物台上的镜片，调节光源以得到最佳观察效果。

（5）旋转调节管，使细胞从上到下等比例进入视野，观察细菌的形态、大小、数量等。

二、细菌形态的观察1、细菌分类根据细菌的细胞形态、大小、结构和移动方式等特征，可以将细菌分为不同的分类。

细菌形态既包含单细胞长条状物、圆球体等基本形态，又包括复杂的细胞、菌株组成的群体等。

常见的细菌形态有以下几种：（1）球菌（cocci）：球形或椭圆形的细胞。

（2）杆菌（bacilli）：棒状或柱状的细胞。

在实验过程中，使用显微镜观察样本，发现细菌形态上虽然存在一定的差异，但一般表现为以下情况：（1）球菌或细圆菌：呈球形，直径一般在0.5-2μm之间。

（3）螺旋菌：呈螺旋形，长度几乎无限制，直径0.5-1μm左右。

然而，即使细菌大小、形态有所不同，它们的细微结构也存在着明显的相似性，这种结构相似性在分类学上具有相当的意义。

细菌形态的观察是微生物学中非常重要的基础工作，通过观察细菌的形态、大小、数量等，能够更好地了解微生物的生长繁殖规律，对于深入研究微生物的特性、分类以及对环境的影响等方面具有非常重要的价值。