解决液相色谱仪自动进样器故障的方法

166 食品安全导刊 2020年1月Tlogy科技食品科技色谱学作为现代分离分析的一个重要领域，高效液相色谱已成为食品、药品、环保及工农业等学科领域的重要分离分析技术[1]。

为让老百姓吃得安全、吃得放心、吃得健康，高效液相色谱仪在保障食品安全和解决食品安全问题中起到了至关重要的作用。

随着液相色谱的广泛应用，在使用过程中如何进行故障排除就显得尤为重要。

1　仪器各指示灯均为红灯，提示漏液1.1　接头处漏液检测仪器各部件的漏液探测器部位，用滤纸擦拭是否有液体存在。

若有液体则先擦拭干净，并用吹风机吹干或自然风干。

有液体存在即为漏液部位，用扳手拧紧螺丝，再开机观察是否还有漏液现象。

1.2　色谱柱漏液实际工作中色谱柱需要经常更换，色谱柱尾端接头会容易松动出现漏液的现象。

这时需要稍微拧紧一下螺丝，如果还是漏液需要更换卡套螺丝[2]。

1.3　进样阀漏液液相色谱通用的进样阀为六通阀。

六通阀漏液可能是：①定量环柱塞，需更换定量环；②进样针头不合适需更换成匹配的进样针；③废液管阻塞需更换或疏通废液管；④废液管中产生虹吸时需保持废液管高于废液液面；⑤密封圈松动或磨损需进行调整或更换。

2　压力过高高效液相色谱仪在使用过程中经常出现压力波动的现象，这是因为系统无法提供稳定准确的流量，可通过以下方式进行排查。

2.1　检查流速破气阀打开排气时流速设置比较高，若关闭破气阀而流速没有调小，就会导致压力瞬间飙升，而导致停泵，将流速调小重新启动泵即可。

2.2　破气阀滤芯堵塞拆下破气阀将金属垫片挑出，会看到白色的过滤芯，过滤芯上有黑的脏东西就说明需要更换过滤芯了，换好后安装好问题基本就可以解决。

2.3　色谱柱堵塞拆下色谱柱没有压力，说明柱前压是正常的。

在安装上一根短柱，若压力正常，在安装上自用的色谱柱后压力还是变得很大，则色谱柱堵塞的可能性很大，就需要反冲或是更换色谱柱。

2.4　检测器检测器的流通池时间久了会被微生物或盐析等污染，拆下后对着光可以看到上面有黑色的脏东西，对其进行超声处理后这类问题就可以解决。

高效液相色谱仪使用中常见问题及对策高效液相色谱（HPLC）作为一种分离技术和方法，目前已经发展到一个全新的阶段。

高精度的输液泵，应用广泛的色谱分离柱，低噪音、高灵敏度的各种检测器和功能强大的数据处理软件系统的出现，都推动了液相色谱技术的迅猛发展。

液相色谱仪正以它分辨率高、分析速度快和应用广泛的优点倍受仪器分析工作者的青睐，广泛地应用于医药卫生、环境监测、食品检测等领域。

作者本人从事液相色谱分析工作二十多年，应用HPLC技术在血药浓度、生物胺、核苷酸、蛋白质浓度测定等实际工作中，积累了许多的方法和经验，在这里与大家交流，希望能对同行们有所帮助和借鉴，共同促进液相色谱分析技术的发展。

1高效液相色谱仪的基本工作原理高效液相色谱仪如图1所示，是由溶液贮器、高压泵、进样系统、色谱分离柱、检测器和数据处理系统几部分组成。

高压泵从溶液贮器中抽走流动相，流经整个仪器系统，形成密闭的液体流路。

样品通过进样系统注入色谱分离柱，在柱内进行分离。

柱流出液进入检测器，使已被分离的组分逐一被检测器收集，并将响应值转变为电信号后经放大被数据处理系统记录色谱峰，通过数据处理系统对记录的峰值进行存储和计算[1]。

液相色谱仪是依靠色谱柱进行分离的。

研究证明：物质的色谱过程是指物质分子在相对运动的两相（液相和固相）中分配“平衡”的过程。

液相色谱是以具有吸附性质的硅胶颗粒为固定相，各种洗脱液为流动相。

当液体样品在载体流动相的推动下，在液-固两相间作相对运动时，由于各组分在两相中的分配系数（K）不同，则使各自的移动速度不同，即产生差速迁移。

各组分在两相间经过多次分配，从而达到使混合物分离的目的。

上式反映了物质在两相中进行吸附、解吸、再吸附、再解吸…过程中，由于在两相中浓度的不同，而存在分配系数上的差异。

既然分配系数及其差异是引起组分在液相色谱柱分离的根本原因，那么，必然地也会同色谱理论中可测宏观量之间存在着某种定量关系，事实上，色谱理论中通常用容量因子k’的概念来反映物质在两相中的分配关系：k’值可以非常方便地表达组分在两相的分配，又很容易从色谱实验数据中直接测得，是色谱理论中重要的基本参数之一[2]。

高效液相色谱仪使用中常见故障及解决方法液相色谱常见问题解决方法1 高效液相色谱仪系统液相色谱仪紧要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统构成。

对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的紧要部位。

2 常见问题及解决方法高效液相作为一种高精密仪器，假如在使用过程中不依照正确操作的话，就简单导致一些问题。

其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。

1.柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要紧密注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分别效果及保留时间等紧密相关。

所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI（3.3 Bar）之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。

压力过高、过低都属于柱压问题。

压力过高：这是高效液相在使用中常见的问题，指的是压力蓦地上升，一般都是由于流路中有堵塞的原因。

此时，我们应当分段进行检查。

（1）.首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充分液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，假如液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。

处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。

假如液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查；（2）.打开Purge阀，使流动相不经过柱子，假如压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。

处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。

假如压力降至100PSI （6.7 Bar）以下，过滤白头正常，在检查；（3）.把色谱柱出口端取下，假如压力不下降，则是柱子堵塞。

处理方法：假如是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。

假如是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。

假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。

这时，假如柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很简单造成柱效下降，所以尽量少用。

自动进样器维修安全操作及保养规程自动进样器在现代实验室中发挥着重要的作用。

它是一种能够高效、精确地加入样品进入分析系统中的设备，并且在化学分析领域、环境分析领域、生物、药物分析领域有广泛的应用。

然而，如果进样器没有进行正确的维护和保养，就可能会出现一些故障。

本文旨在为您提供自动进样器的安全操作和保养规程，以帮助您轻松解决可能出现的问题。

安全操作1. 熟悉设备在使用自动进样器之前，务必先熟悉设备的各个部分和功能，熟悉设备的电源、网络口、进样器安装位置等。

要确保所有部件正常工作，以及所有流体路径排列正确。

如果您不确定设备的部分和功能，不要尝试操作它或任何部件。

在熟悉好所有的设备之后，也要熟悉好样品的情况。

2. 严格遵守实验室规章制度在实验室操作时，严格遵守实验室规章制度，穿戴工作服和安全眼镜。

在操作自动进样器之前，需要确保设备周围没有任何不必要的障碍，并把其他仪器放好。

同时在操作期间不可以强行开启进样器。

3. 范围选择置备需要进样的样品前，需要确定好样品的范围。

不同种类的样品需要进样器承受的压力不同，因此，需要选择适量的样品数量进行操作。

在实践操作期间，需要注意液体稀释和静电干扰。

4. 操作规范在操作自动进样器之前，需要检查进样器的样品针是否正常。

此外，必须按照使用说明来进行操作和连接进样器，确保液体样品顺畅流动，并且是正确地连接到分析系统上的。

在操作期间，要保持设备周围干燥，避免因为环境湿度过高对仪器造成损害。

另外，进样组件以及样品盘磨损后需要及时更换，否则可能会影响系统的稳定性和准确性。

5. 急救处理如果在进样器操作期间遇到紧急情况，必须立即停止设备，并进行急救处理。

如果液体样品溅到皮肤或者眼睛，需要立即用清水清洗，并及时就医。

保养规程保养是自动进样器能够长期、高效地运行的关键，可以延长设备的寿命，并大幅降低故障率和维护成本。

下面是关于自动进样器的基本保养规程：1. 定期检查进样器定期检查进样器是自动进样器保养中的关键步骤，既可以检查设备状态，也可以及时发现问题。

高效液相色谱仪常见故障排除方法1、操作过程若发现压力很小，则可能管件连接有漏，注意检查。

当出现错误警告(各组件指示灯均为红色)，一般为漏液，其中一个感应器中已有溶剂，漏液故障排除后，擦干，点击On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。

2、连接柱子与管线时，应注意拧紧螺丝的力度，过度用力可导致连接螺丝断裂。

柱接头处易发生漏液，可能情况为接头Fittings中间的管子未和接口处贴紧。

不同厂家的管线及色谱柱头结构有差异，最好不要混用，必要时可使用PEEK管及活动接头;3、操作过程若发现压力非常高，则可能管路已堵，应先卸下色谱柱，然后用分段排除法检查，确定何处堵塞后解决。

若是保护柱或色谱柱堵塞，可用小流量流动相或以小流量异丙醇冲洗，还可采用小流量反冲的办法(新柱不提倡)，若还是无法通畅，则需换柱;4、运行过程中自动停泵，可能为压力超过上限或流动相用完;5、样品瓶中样品较少，自动进样器进样针无法到达液面，可采用调低进样针进样高度的办法，注意设置时不要使进样针碰到瓶底，微量样品分析应使用微量样品瓶;6、自动进样器进样针未与样品瓶瓶口对准时，需重新定位。

7、泵压不稳或流量不准，可能为柱塞杆密封圈问题或seal wash垫圈问题，需更换;8、基线产生不规则噪声，可能原因为系统不稳定或没达到化学平衡(使其平衡，若用离子对试剂，在首次使用使需要足够的时间和溶剂体积，色谱柱才能达到足够的平衡)，流动相被污染(更换流动相，清洗储液器、过滤器，冲洗并重新平衡系统)，色谱柱被污染(为证明可能的原因更换系统的色谱柱或使用一根同类的被证明性能好的色谱柱)，检测器不稳定;9、短期有规则的噪声，可能原因为泵压不稳或泵脉冲，调节溶剂不适当(如两种溶剂的互溶性问题)，泵入口管路松或堵塞，泵太脏，泵柱塞磨损，检测器不稳定;10、长期有规则噪声，可能原因为室温不稳(未使用柱温箱)或使用柱温箱不当;11、基线漂移，可能原因为系统不稳或没有达到化学平衡，室温不稳(未使用柱温箱)，流动相污染或分解，柱污染，检测池泄漏，系统泄漏，固定相流失(另选流动相，另选色谱柱)，测定的波长选择错误(对溶剂有吸收)，样品组分保留太长(用强度合适的溶剂清洗色谱柱)，检测器不稳定;12、每次进样时的保留时间不重复，可能原因为系统不稳或未达到化学平衡，由于气泡、各部件磨损等原因引起的泵压或泵脉冲输液不稳定，进样体积太大或样品浓度太高平衡被破坏，溶剂配比不合适，柱被污染;13、无峰，可能原因为检测器选择错误，使用错误的流动相，样品降解;14、色谱峰比预计的小，可能原因为进样体积错误，检测器灯故障，进样问题(瓶号错、进样体积不合适、进样错误、针头堵塞);15、峰变宽，可能原因为进样体积太大或样品浓度太高，过滤器、保护柱入口、柱入口或连接管路有部分堵塞，检测器时间常数设置错误，进样器问题(如阀漏、针头堵塞或损坏)，柱或保护柱被污染，对流动相来说样品溶剂太强，使用错误的色谱柱，温度变化;16、出现双峰/肩峰，可能原因为保护柱或柱入口部分阻塞，柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效，进样体积太大或样品浓度太高(样品过载)，平衡破坏;17、前沿峰，可能原因为进样体积太大或样品浓度太高(样品过载)，平衡破坏，对于流动相来说样品溶剂非极性太强(对于反相柱)，柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效;18、脱尾峰，可能原因为柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效，进样器问题(如阀漏等)，检测器时间常数设置错误;19、出现鬼峰，可能原因为流动相被污染，样品预处理时产生降解或混入杂质，先前进样的流出物，样品定量管清洗不当，注射器脏，柱被污染，进样装置被污染，流动相中含有稳定剂/稳定剂变化。

六通阀的示意图
色谱柱系统的故障
柱温箱的温度控制失灵 系统和保留时间压力改变， 色谱柱堵塞 系统压力升高 色谱柱柱效下降或色谱柱损坏 样品出峰时间改变，峰形变坏，分离效果 变差
检测器
检测器的类型 紫外或二极管阵列检测器 荧光检测器 示差折光检测器 电化学检测器 蒸发光散射检测器
紫外/可见光检测器的光路系统， 氘灯提供190nm～600nm 紫外/可见光检测器的光路系统，由氘灯提供190nm～600nm 宽带光谱，光线径直射到全息凹面光栅上 宽带光谱，光线径直射到全息凹面光栅上，衍射的单色光射到 半透射反光镜，被分成两束光线，一束经流通池后照射到测量 半透射反光镜，被分成两束光线，一束经流通池后照射到测量 光电池上，另一束经参比池照射到参比光电池上， 光电池上，另一束经参比池照射到参比光电池上，光电池把光 能量转换成微小电流信号， 能量转换成微小电流信号，光栅由一台微机控制的步进电机精 确地驱动以改变波长。 确地驱动以改变波长。如图所示：
泵头有气泡 排气 进口阀或出口阀失灵 超声清洗或更换 系统泄露 用了错误的流动相或流动相比例不对 用了错误的色谱柱 色谱柱或保护柱或混合过滤器有堵塞的现象 色谱柱的柱温不对 压力模块出现故障，通常是压力传感器或仪器主板的问题
基线问题 （一）基线的漂移
光源的未完全稳定，解决方法：延长仪器预热时间， 流动相的比例在变化，和色谱柱之间未达到化学平衡，延 长平衡时间 环境温度在变化 保持恒温 色谱柱或流通池被污染
基线问题 （二）基线的噪声
电信号噪音 特征： ①很均匀密集的毛刺，光源能量过低或者光路污染，更换光 源或清洗光路，仪器接地不良 ②突然出现的无规则的脉冲式尖锐信号，且与流动相流速无 关，仪器的电路板的问题，检查仪器接地情况或者报修

查密封垫圈或者单向阀有否磨损,一旦磨损要及时
更换。
仪器管路液体泄漏是导致系统压力不稳定的最
常见情况。 漏液严重时,仪器自身会发出系统压力
过低的警报。 轻微泄漏则可用干燥的餐巾纸擦拭管
路外部,观察纸巾是否被渗入液体进行判断。 泄漏
孔璐璐,等:高效液相色谱技术中常见问题分析及解决方法
97
可能由管路松动或管路损坏引起,对于前者,重新拧
1. 1. 1 样品前处理不当
样品前处理不当可能会产生鬼峰,一般源于两
96
个途径:一是所用试剂被污染;二是测试容器不干
净。 鉴别起来比较简单:使用试剂稀释样品,如果待
测样品出峰明显减小而鬼峰变化不大,则鬼峰源自
试剂污染。 如果洁净容器后重新检测鬼峰消失,则
鬼峰源自容器的污染。
1. 1. 2 流动相污染
的空气。 这种情况可预先将流动相进行超声脱气处
每次补充流动相时以直接补给的方式,没有对贮液
理,然后再装入储液瓶中待用。 二是由于水相和有
瓶进行清洗更换,富集的污染物就会进入到仪器流
机相的物理化学性质存在差异,两者在相互混合时,
路中产生鬼峰。
增加了空气在两种流动相中的溶解度。 对于这种情
上述问题的解决方法是更换流动相,即使用干净
样品的相溶性,如没有特殊原因,一般选择流动相作
留以及色谱柱和仪器管路中污染物的富集。
为待测组分的溶剂,以降低由于待测样品在流动相
在不改变测试条件情况下,如果鬼峰每次有规
中溶解性差引入的空气量。
律地出现在色谱图的相同位置,则污染很可能来自
液相色谱仪采用动态混合器和静态混合器将不
于自动进样器端。 这时可将自动进样针和针座拆
Key words: high performance liquid chromatography; common problems; influence factors;

清洗柱或更换柱 清洗六通阀 清晰检测器
管路污染
冲洗
流动相中含有稳定剂 或稳定剂变化
使用无防腐溶剂
8.保留时间变 化
现象
保留时 间不重 复
判断
系统不问或未达 到平衡
室温波动大
柱被污染 溶剂配比不合适 进样体积太大或 样品浓度太高
故障排除
分析之前应有足够的时间 使系统平衡 使用柱温箱、将系统置于 恒温、空气对流小的环境 冲洗柱或更换柱 调节溶剂配比
检测器内有气泡
用甲醇或其他强极性的溶剂 冲洗流通池
用强极性的溶剂清洗系统
清洗检测器，在检测器后面 安装背景压力调节器
检测器灯能量不足
更换灯
12.规则基线 噪音
现象
规则基 线噪音
判断
故障排除
流动相、检测 器或泵内有气 泡
流动相脱气，冲洗系统除去检 测器或泵内的空气
室温不稳
稳定环境温度。使用柱温箱、 将系统置于恒温、空气对流小 的环境
鬼
洗脱物
峰
注射器脏
故障排除
用标准品对照、检查样品处理过程， 换新样品
增加分析时间或梯度洗脱、提高流 速、如问题仍存在，两次进样间用 强溶剂冲洗色谱柱
清洗注射器、冲洗进样口
现象
判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
色谱图 出现鬼 峰
柱被污染 六通阀污染 检测器污染
峰变 宽
环境温度变化 漏夜
使用柱温箱 检查漏夜的位置并维修
出现两个或多个未被完 全分离的物质的峰
选择其它色谱条件以改善分 离效果
检测器时间常数太大
使用较小的时间常数
4.峰分叉

78宁夏农林科技，Ningxia Journal of Agri.and Fores.Sci.&Tech. 2020，61(11 ):78-80高效液相色谱仪常见故障及解决方法吴江瑞，马燕，黄燕，孔祥明，杜越，魏晓琴，李慧中卫市农产品质量安全检验检测中心，宁夏中卫755000摘要：高效液相色谱法在农产品检测领域发挥着重要作用。

文章分析了高效液相色谱仪在使用中常见故障产生的原因，提出了常见故障解决方法，以期为检测人员提供参考。

关键词：高效液相色谱；常见故障；解决方法中图分类号：0657.31 文献标识码:A文章编号：1002-204X(2020)11-0078-03doi:10.3969/j.issn.1002-204x.2020.11.027Analysis of HPLC Common Faults Causes and SolutionsWu Jiangrui, Ma Yan, Huang Yan, Kong Xiangming, Du Yue, Wei Xiaoqin, Li Hui(Zhongwei City Agricultural Products Quality Safety Detection and Testing Center,Zhongwei,Ningxia 755000) Abstract High performance liquid chromatography plays an important role in the detection and testing of agricultural products.In this paper,the causes of common faults during the application of HPLC were analyzed.The solutions were also put forward,aiming to provide references for more testing personnel.Key words HPLC;Common faults;Solutions高效液相色谱法是农产品质量安全控制过程中不可缺少的重要方法，具有分离速度快、检测效率高、重现性好等特点，尤其在检测极性较强、相对分子质量较大、不易气化或受热易分解的农药中更能显示其优越性[1-2]。

高效液相色谱仪使用中常见故障及解决方法1 高效液相色谱仪系统液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。

对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。

2 常见问题及解决方法高效液相作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。

其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。

2.1 柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。

所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI（3.3 Bar）之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。

压力过高、过低都属于柱压问题。

2.1.1 压力过高这是高效液相在使用中最常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。

此时，我们应该分段进行检查。

(1).首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。

处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。

如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查；(2).打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。

处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。

如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下，过滤白头正常，在检查；(3).把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。

处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。

如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。

假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。

这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。

近年来，岛津液相色谱仪在科学研究和工业生产中得到了广泛的应用。

然而，随着使用时间的增长，液相色谱仪也可能会出现一些常见故障，这些故障有些对实验结果产生了很大的影响。

深入了解液相色谱仪的常见故障及其维修方法对于科研工作者和技术人员来说是至关重要的。

**1. 压力不稳定问题**在使用岛津液相色谱仪时，有时可能会遇到压力不稳定的问题。

这可能会导致色谱柱的寿命缩短，影响分离效果。

该问题出现的主要原因可能有色谱柱堵塞、柱温控制不稳定、进样器堵塞等。

解决该问题的方法有清洗色谱柱、调节柱温、清洗进样器等。

**2. 噪声干扰问题**另外，噪声干扰也是岛津液相色谱仪常见的故障之一。

噪声干扰可能会导致谱图产生异常，严重影响实验结果。

出现噪声干扰的原因可能有进样器堵塞、溶剂气泡、泵的脉动等。

解决该问题的方法包括排除气泡、改善进样器的清洗方法、调节泵的流速等。

**3. 回路漏液问题**回路漏液也是岛津液相色谱仪常见的故障之一。

回路漏液会导致进样器稀释效果不佳，影响实验结果。

回路漏液的原因可能有连接处松动、密封圈老化等。

解决该问题的方法包括更换密封圈、重新调整连接处的紧固度等。

**4. 泵的压力不稳定问题**液相色谱仪泵的压力不稳定也是一个常见的故障。

泵的压力不稳定可能会导致进样量不准确，影响分析的准确性。

出现这一问题的原因可能有泵的柱塞磨损、密封圈老化等。

解决该问题的方法包括更换柱塞、更换密封圈等。

总结回顾，液相色谱仪在实验过程中可能会遇到各种故障，如压力不稳定、噪声干扰、回路漏液和泵的压力不稳定等。

解决这些故障需要技术人员有较强的实操能力和丰富的经验。

除了平时的维护保养，定期的维修和保养也是至关重要的。

只有不断改进维护的技术和方法，才能更好地保障液相色谱仪的正常运行。

个人观点及理解：对于液相色谱仪的维护保养我一直非常重视，我认为只有定期的检查和维护才能延长仪器的使用寿命，保证实验结果的准确性。

在解决液相色谱仪常见故障时，需要及时沟通和协作，找出问题的根源并采取有效措施加以解决，这样才能确保实验的顺利进行。

液相色谱使用中的常见细节问题液相色谱常见问题解决方法液相色谱对于多数人来说都是很好上手的仪器了，但是就算是用过几年、阅历丰富的分析员都会习惯于一些错误的操作（师傅教错了？），常常导致一些仪器故障。

便利快捷的分析过程当然紧要，但是为了多做样品而疏忽了一些必不可少的步骤，往往得不偿失，哪些操作不能做？哪些懒儿不能偷？那些小概率的故障师傅没教怎么办？液相使用过程中有哪四大关键因素要注意？本文一一告知你哦！流动相不过滤。

由于尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。

流动相在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可接受Millipore滤膜（0.2m 或0.45m）等滤器。

泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。

输液泵的滤器应常常清洗或更换。

使用后没有适时清洗泵流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。

假如将含缓冲液的流动相留在泵内，由于蒸发或泄漏，甚至只是由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。

因此，必需泵入纯水将泵充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂（对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇—水）。

流动相走空。

泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，zui终产生漏液。

没有流动相流出，又无压力指示怎么办？可能是泵内有大量气体，这时可打开泄压阀，使泵在较大流量（如5ml/min）下运转，将气泡排尽，也可用一个50ml针筒在泵出口处帮忙抽出气体。

另一个可能原因是密封环磨损，需更换。

压力和流量不稳了？原因可能是气泡，需要排出；或者是单向阀内有异物，可卸下单向阀，浸入丙酮内超声清洗。

有时可能是砂滤棒内有气泡，或被盐的微细晶粒或繁殖的微生物部分堵塞，这时，可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡，或将砂滤棒浸入稀酸（如4mol/L硝酸）内快速除去微生物，或将盐溶解，再立刻清洗。

液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法1、样品量不足，解决办法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。

可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3、样品与检测器不匹配。

根据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多。

调整衰减即可。

5、检测器时间常数太大。

解决办法为降低时间参数6、检测器池窗污染。

解决办法为清洗池窗。

7、检测池中有气泡。

解决办法为排气。

8、记录仪测压范围不当。

调整电压范围即可。

9、流动相流量不合适。

调整流速即可。

10、检测器与记录仪超出校正曲线。

解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。

其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

1、拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。

这时，如果柱压仍不下降，再检查；4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。

若柱压还高，请与厂商联系。

一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。

液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡快速变化现象1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

液相色谱仪的维护与维修一、常见故障与排除方法1、泵①单向阀现象：柱压波动范围很大。

原因：单元向阀污染或阀内进入气泡引起。

污染使得球与阀座密封不严，液流倒流，压力不稳，或球与阀座粘在一起阻死。

气泡进入阀中会紧贴在阀体的一侧，使球难以返回到阀座，引起倒流，使压力和流速变化范围大，有时甚至为零。

措施：对于污染用不同极性的一系列溶剂冲洗有可能解决问题，如用25mL水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷依次冲洗。

或拆下进出单向阀放在10%的硝酸液内超声清洗30~60min，若仍不解决问题则要更换单元向阀。

对于阀内进入气泡不必弄清气泡存在何处，只要打开泄液阀大流速冲洗就可解决问题，在冲洗泵时可用扳手迅速打开泵头上的输出管路，以促进气泡排出。

②塞杆密封垫现象：在高压下压力不稳定，从泵头渗漏流动相液体，反映在分析结果上是样品保留时间的改变。

原因：垫圈与运动着的柱塞杆紧紧接触，是液相色谱系统中最易磨损的部件。

缓冲液或其它含盐的流动相更加速垫圈的磨损。

垫圈磨损是不可避免的。

措施：一旦垫圈损坏只有进行更换。

更换时注意要将柱塞杆缩至最后，松开泵头的两根收紧螺钉，操作时处处以平衡的动作进行，切不可摇动或上下摆动泵头，否则柱塞杆极易折断。

③塞杆现象：无流动相流出，压力波动，更换新的垫圈后仍渗漏。

原因：一旦出现以上现象，只有更换柱塞杆。

更换进要用专用工具，由于此项操作比较复杂困难，故需请专业维修工程师来解决。

也可自行按说明书的指导仔细进行。

2、进样系统当测量样品的面积，峰高数据不重复时，则要考虑进样系统的问题。

①手动进样器首先检查手动进样器是否有渗漏，一般是由于污染使转子磨损或用尖头的针扎进手动进样器，划伤了转子。

因此在定期清洗进样器，使用缓冲液后，要用水进行充分的冲洗，以防沉积结晶盐，磨损转子。

如确定转子已磨损，则要更换转子。

若有进样器管路部分阻塞，可分段检查，将阻塞的管路拆下，反装在泵出口处进行反冲。

②自动进样品A、针密封垫损坏。

此时出现渗漏。

安捷伦液相色谱仪使用问题与解决方法液相色谱常见问题解决方法Agilent液相色谱仪是一种应用特别广泛的有机多组分化学分析仪器。

它具有分别效能高,分析速度快,样品用量少,可进行多组分测量等优点。

Agilent液相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。

它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。

一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。

但是由于人员素养样品的性质以及仪器本身等方面的原因,常常显现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。

所以把握一种精准、快速的排出Agilent液相色谱仪故障的方法特别紧要。

安捷伦液相色谱仪12601 、如何成为真正的液相高手（1）、确定要珍惜仪器厂商供应的各种培训，由于他们的培训很有针对性，而且很专业。

（2）、要多做，液相是一个比较多而杂的系统，在做样的过程中，总会碰到各种问题，通过本身的大脑解决问题，渐渐积累就会穴道很多东西。

其次要敢于动手，不要总挂念会把仪器弄坏，拆仪器的时候细心一点就好了，记着各个部件的次序，连接方式。

动手次数多了，成功的机会就多了，也就更有信念了。

（3）、要看一些相关理论的书籍，要了解一些关于液相的分别原理，如何优化色谱系统和峰形，能够本身解决一些分别的问题。

这样才是一个液相高手。

假如只是会很娴熟的使用工作站和维护和修理仪器，排出故障，我觉得这只是一个操作高手，而不是一个真正的液相高手。

2、新装82341 GPIB 板，如何与ChemStation 通讯？在 LC ChemStation CD—ROM 中有安装说明，还包括驱动程序安装信息。

请在Windows Explorer 中查看子目录：ManualsInstallationLC Systems。

您在此处可找到《安装手册》，其中包含有关如何安装 GPIB 板以及如何调用驱动程序的渐渐操作说明。

3、为什么进样后在工作站在线图谱上看不到红色开始线？ChemStation 软件有一个“在线图谱”窗口，在此窗口中可显示从所连接的检测器接收到的全部信号。

液相色谱仪常见故障及解决方法液相色谱解决方案1、气泡溢出流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入液相色谱流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。

原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，堵塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。

处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，连续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏，流动相可以流畅地通过过滤器。

打开泄压阀，打开泵，流速调至 1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。

即可将过滤器清洗干净。

关闭泄压阀，纯甲醇冲洗半小时即可。

液相色谱仪2、峰面积重复性不佳（1）进样阀漏液。

（2）加样针不到位。

（3）液量不足。

处理对于*种情况更换进样阀垫圈；对于第二种情况保证加样针插到底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJECT状态，以保证进样量的精准。

日常工作中，液相色谱仪的保养特别紧要，如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中，储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液，每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净，防止无机盐析出或沉积；样品的前处理也很紧要，任何样品都要尽可能地去除杂质，完全溶解，尽量削减对色谱柱的污染，以延长色谱柱的使用寿命，同时避开注射过浓的样品溶液，以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞；色谱柱作好标记，用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

3、柱压高原因（1）缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内。

（2）样品污染沉积。

处理对于*种情况先用40～50℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压渐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟；对于第二种情况，由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定），再用换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。

液相色谱仪自动进样器故障排除方法液相色谱仪自动进样器是实验室中常见的色谱仪配置之一，它可以实现自动、快速地进行进样分析。

然而，在使用自动进样器的过程中，难免会遇到各种故障和问题，这些问题不仅会影响实验进度，还可能造成数据错误。

本文将介绍液相色谱仪自动进样器的常见故障及其排除方法。

常见故障及其排除方法进样针未插入或插入不良进样针未插入或插入不良是自动进样器最常见的问题之一，可能会导致进样失败或进样量偏差，需及时排除。

排除方法1.检查进样针是否插入到了自动进样器的底部；2.检查进样针是否没有被拧好；3.确认使用正确的进样针。

进样量偏差进样量偏差可能会导致实验数据的误差，需要排除。

排除方法1.检查进样器是否需要清洗或更换；2.调节进样器的体积或速度参数；3.检查进样器提供的数据类型是否与所需数据类型相匹配。

进样针损坏进样针可能会损坏，导致进样失败或进样量偏差。

排除方法1.更换损坏的进样针；2.检查进样针是否正确插入到了进样器中；3.检查进样器其他部件是否存在损坏并及时维修或更换。

进样针堵塞进样针可能会被样品堵塞，导致进样失败或进样量偏差，甚至可能损坏进样针。

排除方法1.清洗进样针，使用适当的溶剂进行清洗；2.更换被堵塞的进样针；3.调整进样针的温度参数。

进样器泄漏进样器泄漏会导致进样失败，可能会影响实验数据的准确性。

排除方法1.检查进样器密封件是否正常；2.检查进样器部件是否存在损坏；3.重新安装进样器并调整扣紧程度。

总结液相色谱仪自动进样器是实验室常见的分析仪器，它能够实现高效、准确的样品进样。

但在使用过程中，可能会遇到各种故障和问题，如进样针未插入或插入不良、进样量偏差、进样针损坏等。

本文介绍了常见故障及其排除方法，可以帮助读者解决自动进样器问题，并确保实验数据的准确性。