暗 视 野 照 明 方 式
六、紫外光显微镜
使用紫外光源可以明显提高显微镜的分辨率,对于 生物样品使用紫外光照明还具有独特的效果。生物 细胞中的原生质对可见光几乎是不吸收的,而蛋白 质和核酸等生物大分子对紫外光具有特殊的吸收作 用。因此,可以使用紫外光显微镜(ultraviolet microscope)研究单个细胞的组成与变化情况。
相衬显微镜比普通光学显微镜多了2个部件:
在聚光器上增加一个环形光阑; 在物镜后焦面增加一个相板,相板上有一个环形区,通过
环形区的光比从其它区域透过的光超前或滞后1/4λ,这样 就使通过标本不同区域光波的相位差转变为振幅差。
相衬显微镜照明原理
光通过标本致密区时发生衍射,产生偏折光,相位 和未受影响的直射光相比被推迟了1/4λ。只有未发 生偏折的的直射光可通过相位板的环形区,其它的 偏折光在物镜的后焦面上产生了一个与通过相位板 的环形区的光不同的1/4λ的光程差。两组光在平面 上成像。
如果离光轴越远处放大率越大,则像的外部线段将比中间 线段长,结果形成了枕形畸变,这种畸变称为正畸变。
反之则形成边缘放大率小而近轴放大率大的桶形畸变,称 为负畸变 。
(二)、 色 差
色差(chromatic aberration )是一种由白光或复色光经透镜成像 时,会因各种色光存在着光程差而造成颜色不同、位置不重 合、大小不一致的不同成像效果,从而造成像和物的较大失 真。
如相板的环形区使直射光超前1/4λ,加上开始直射 光超前的1/4λ,直射光共超前1/2 λ,直射光和偏折 光叠加形成的合成波振幅减少,产生暗反差。
如相板的环形区使直射光滞后1/4λ,加上开始直射 光超前的1/4λ,两者相抵直射光不发生变化,直射 光和偏折光无相位变化,形成的合成波振幅增加, 产生明反差。