MG132的配制
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镁(MG)测定试剂盒(二甲苯胺蓝法)适用范围:该试剂盒用于体外定量测定人血清中镁的浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1(R1)和校准品(选配)组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲液≥100.0mmol/L 碳酸钾≥50.0mmol/LEGTA ≥0.05mmol/L二甲苯胺蓝≥0.01mmol/L1.2.2 校准品组成镁离子目标浓度:0.85mmol/L 该校准品为水基质液体校准品2.1 外观a) R1应为深蓝色溶液,无混浊,无未溶解物。
b) 校准品应为无色溶液,无混浊,无未溶解物。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不大于1.200。
2.4 分析灵敏度MG试剂盒测定浓度1.00mmol/L的被测物时,吸光度差值(ΔA)应不小于0.080。
2.5 准确度测试参考物质,相对偏差应不超过±5%。
2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。
2.6.2批间差批间相对极差(R)应不大于5%。
2.7 线性在(0,2.05]mmol/L范围内,MG试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900;在(0,1.00]范围内绝对偏差应不超过0.15mmol/L,在(1.00,2.05]范围内相对偏差应不超过±15%。
2.8校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供镁校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
校准品溯源至国家标准物质GBW09152。
2.9稳定性原包装的MG试剂盒在2℃~8℃避光保存,有效期为24个月。
试剂在规定的条件下保存到有效期末,产品的性能应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。
MG132/320-W型采煤机该型采煤机吸收了国内外同类产品的成熟的先进结构,集可靠性和先进性于一体,具有适应我国的国情,故障率低,方便维修保养,提高开机率,适用范围广的特点,能够提高高档普采工作面的单机效率。
采高范围:1.2~3米;最大生产能力:840吨/小时;适应倾角: ≤35°;适应煤层硬度: f≤4,是较薄煤层建设高产高效工作面的理想机型。
一、主要技术参数二、主要特点:1、本采煤机采用多部电机横向布置的结构方式,各部件纵向之间没有直接的动力传动,各部件的机械传动分别独立,改善了受力条件,提高了传动件的运动精度,并且简单可靠,大大提高了机械传动效率,降低了机体的发热程度,从根本上克服了电机纵向布置传动形式存在的漏油、噪声大等诸多不足。
2、为了增强机身的整体刚性及部件强度,液压传动部和电控箱合二为一设计,采用轧制钢板焊接结构,组焊后箱体整体回火处理,从而有效地增强了机身整体刚性和部件强度。
3、整机无底托架,机身三大部件之间采用大直径双定位销和四个楔形亚铃销以及螺钉联接紧固,该结构连接牢固可靠,同时降低了采煤机的高度,增加了过煤空间。
4、液压系统与MG150/375—W型采煤机完全相同,工作原理简单,液压元件可靠性高,系统工作裕度大,故障率低。
5、摇臂内传动件全部借用MG150/375—W型采煤机,裕度大,可靠性高。
6、调高油缸与液压锁采用分体式设计,方便故障处理及零部件的更换。
7、操纵灵活方便,机身中间设有牵引,调高操作手把,机身两端设有液控调高按钮和急停按钮。
8、拖缆架采用可翻转式设计,有效地解决了较薄煤层工作面出现的电缆弯转与拖缆架干涉的问题。
缆架干涉的问题。
9、行走箱内的行走轮采用了可实现自润滑的轴承代替原钢套或铜套的结构,可不用注油润滑,减少了维护的工作量,且提高了可靠性。
10、牵引电机,截割电机冷却水冷却电机后自由流出,提高了电机冷却的可靠性,使电机工作更加可靠。
11、将管路尽可能布置在机壳内部,使胶管的防护可靠,整机无护罩。
蛋白酶体抑制剂MG132对脑室室管膜下区神经干细胞增殖潜能的影响赵云鹤;张卫国;朱茜;杨桂姣;陆利【摘要】目的:观察侧脑室注射蛋白酶体抑制剂MG132对脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖能力的影响,了解蛋白酶体对NSCs增殖潜能的调控作用,从而进一步探讨蛋白酶体在帕金森病(PD)等老年性疾病神经元损伤中的可能作用机制.方法:选90日龄健康BALB/c小鼠,左侧侧脑室注射10 μg MG132,于注射后3 d、7 d、14 d提取SVZ总蛋白,荧光酶标仪检测蛋白酶体活性.同时腹腔注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),BrdU免疫荧光染色标记NSCs,动态观察蛋白酶体活性改变对NSCs增殖能力的影响.另设溶剂对照组左侧侧脑室注射等剂量DMSO,进行上述实验.结果:侧脑室注射MG132 3 d、7 d后,SVZ蛋白酶体活性较DMSO对照组显著降低(P<0.05),同时SVZ BrdU+ NSCs也显著减少至21±4和22±3,与DMSO对照组相比差异显著(P<0.05).随着MG132注射时间延长,14 d后SVZ蛋白酶体活性恢复至正常水平(P>0.05),BrdU+ NSCs数量MG132组(82±4)与DMSO组(67±6)相比无显著差别(P>0.05).结论:应用蛋白酶体可逆性抑制剂MG132短时期内能显著抑制SVZ蛋白酶体活性,并且能够降低NSCs增殖能力,提示蛋白酶体活性与NSCs增殖潜能密切相关.%AIM: To investigate the role of proteasome in the degeneration of neuron in age - related diseases such as Parkinson disease ( PD ) by observing the effects of proteasome inhibitor MG132 on the proliferation of neural stem cells ( NSCs ) in the subventricular zone ( SVZ ).METHODS: Stereotaxic microinjection of proteasome inhibitor MG132 at a dose of 10 μg into th e left lateral ventricle of 90 - day - old mice was performed.The control mice werereceived the same volume of DMSO into the left lateral ventricle.Three days, 7 days and 14 days after injection, the total proteins isolat from SVZ were subject to proteasome activity assay using the fluorescence microplate reader.Meanwhile, the mice were administered with 5 - bromo - 2' - deoxyuridine ( BrdU ) by intraperitoneal injection.The numbers of BrdU - positive cells were counted to examine the effect of MG132 on the proliferation of NSCs.RESULTS: After microinjection of MG132 into the left lateral ventricle, the proteasome activity in SVZ was significantly decreased on day 3 and day 7 post - injection ( P <0.05 ) as compared with the control animals.Furthermore, the numbers of BrdU+ cells in SVZ were significantly reduced to 21 ± 4 on day 3 and to 22 ± 3 on day 7 post - injection ( P < 0.05 ).After long periods of treatment with MG132, the proteasome activity in SVZ was restored to normal level on day 14 post - injection.At the same time, no statistical difference of BrdU+ cells between the mice treated with MG132 ( 82 ±4 ) and DMSO ( 67 ± 6 ) was observed ( P > 0.05 ).CONCLUSION: Short - term injection of reversible proteasome inhibitor MG132 attenuates the proteasome activity in SVZ, which in turn inhibits the proliferation of NSCs, suggesting that the proteasome activity may be closely related to the proliferation potential of NSCs.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2011(027)009【总页数】4页(P1704-1707)【关键词】蛋白酶体;MG132;神经干细胞;细胞增殖【作者】赵云鹤;张卫国;朱茜;杨桂姣;陆利【作者单位】山西医科大学人体解剖学教研室,山西,太原,030001;山西医科大学人体解剖学教研室,山西,太原,030001;山西医科大学人体解剖学教研室,山西,太原,030001;山西医科大学人体解剖学教研室,山西,太原,030001;山西医科大学人体解剖学教研室,山西,太原,030001【正文语种】中文【中图分类】R322.8神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是中枢神经系统的原始细胞,具有自我更新和多向分化潜能[1]。
需要完整说明书和图纸的请联系要完整的说明书和图纸请联系QQ1021181168 本人承接各种机械类毕业设计与课程设计. 价格详谈.亲,期待你的光临!!!!!!!第一章绪论一、我国主要煤机装备的现状和水平,改革开放二十多年来,特别近10年来,在原煤炭部、国家煤炭工业局的领导和大力扶持下,我国煤矿机械制造企业经过改革、改组、改造、强化管理和技术创新,煤机产品有了较快的发展,在产品品种、技术水平和质量等方面都有了长足的进步。
随着一批具备国际技术水平的采煤机械产品相继开发成功,2000年我国综采工作面平均年产为87.24万吨,比1990年的54.77万吨,提高了约60%。
综采装备能力已经达到日产万吨的水平。
此外,国产煤机装备还出口印度、俄罗斯、土耳其等国家,取得了较好的经济效益。
目前国产煤机装备基本满足了国内煤矿生产建设的需要,部分产品达到了国际九十年代末期水平。
主要体现:电牵引采煤机:已成功开发出直流调速型、交流变频调速型、开关磁阻调速型、电磁调速型四种形式约30余种不同型号的电牵引采煤机,并全部实现机载,装机功率最高可达1250Kw,电压3.3Kv。
液压支架:能基本满足不同地质条件的煤矿需求。
最大支护高度达到5米,最大缸径为380毫米,最大工作阻力为11000KN,部分支架寿命试验超过35000次,快速移架的液压系统已使支架完成降移升循环时间缩短至12--15秒,并与外商合作制造出电液控制系统。
尽管"九五"期间煤机产品在技术质量性能等方面取得了长足的进步,但与国际先进水平相比还存在着差距,主要反映在拥有自主知识产权的产品少,质量不稳定,可靠性不高等问题。
二、"九五"煤机企业技术创新的基本经验自从1992年煤炭工业开展高产高效矿井建设以来,特别是1994年原煤炭部作出《关于加快高产高效矿井建设的决定》以来,我国煤炭工业机械化、现代化建设有了较快的发展。
煤炭工业的技术进步有力促进了煤机产品的发展。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线:400-168-3301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询:*****************碧云天网站微信公众号网址:MG-132 (Proteasome抑制剂)产品编号产品名称包装S1748-1mg MG-132 (Proteasome抑制剂) 20mg/ml×0.05mlS1748-5mg MG-132 (Proteasome抑制剂) 5mgS1748-25mg MG-132 (Proteasome抑制剂) 25mg产品简介:MG-132也写作MG132,也称Z-LLL-CHO、Z-Leu-Leu-Leu-CHO、Z-Leu-Leu-Leu-al或Carbobenzoxy-L-leucyl-L-leucyl-L-leuc inal,是一种常用的Proteasome抑制剂,即蛋白酶体抑制剂。
MG-132可以通透细胞,选择性抑制Proteasome,Ki=4nM。
可以激活JNK1并抑制NF-κB的激活(IC50=3µM)。
在10µM时可以诱导PC12细胞产生neurite outgrowth。
MG-132分子量为475.62,分子式为C26H41N3O5,CAS Number:133407-82-6。
本产品纯度大于99%。
本MG-132为进口分装,其中20mg/ml包装产品用DMSO配制,共0.05ml。
5mg和25mg包装为粉末装。
包装清单:产品编号产品名称包装S1748-1mg MG-132 (Proteasome抑制剂) 20mg/ml×0.05mlS1748-5mg MG-132 (Proteasome抑制剂) 5mgS1748-25mg MG-132 (Proteasome抑制剂) 25mg—说明书1份保存条件:-20ºC避光保存,半年有效。
MG132/320—W型采煤机MG132/320—W型双滚筒液压无链电牵引采煤机,主要技术参数如下:机面高度954mm,整体外形尺寸:5894×975×735 mm;最大不可拆组件尺寸 mm :2720×975×650;最大不可拆组件重量4500kg;采高范围1。
4~2.9m,牵引方式:电牵引,牵引速度:0~5。
5m/min,滚筒直径1400mm,截深0。
63m,配套电机功率:2×132+55kW,电压:1140V,降尘采用内外喷雾方式,供水量:240L/min;设计生产能力550t/h,机重21000kg(不含滚筒),最大不可拆卸件重4.5t。
该型采煤机吸收了国内外同类产品的成熟的先进结构,集可靠性和先进性于一体,具有适应我国的国情,故障率低,方便维修保养,提高开机率,适用范围广的特点,能够提高高档普采工作面的单机效率。
采高范围:1。
2~3米;最大生产能力:840吨/小时;适应倾角:≤35°;适应煤层硬度:f≤4,是较薄煤层建设高产高效工作面的理想机型.1、本采煤机采用多部电机横向布置的结构方式,各部件纵向之间没有直接的动力传动,各部件的机械传动分别独立,改善了受力条件,提高了传动件的运动精度,并且简单可靠,大大提高了机械传动效率,降低了机体的发热程度,从根本上克服了电机纵向布置传动形式存在的漏油、噪声大等诸多不足.2、为了增强机身的整体刚性及部件强度,液压传动部和电控箱合二为一设计,采用轧制钢板焊接结构,组焊后箱体整体回火处理,从而有效地增强了机身整体刚性和部件强度。
3、整机无底托架,机身三大部件之间采用大直径双定位销和四个楔形亚铃销以及螺钉联接紧固,该结构连接牢固可靠,同时降低了采煤机的高度,增加了过煤空间。
4、液压系统与MG150/375-W型采煤机完全相同,工作原理简单,液压元件可靠性高,系统工作裕度大,故障率低。
5、摇臂内传动件全部借用MG150/375—W型采煤机,裕度大,可靠性高.6、调高油缸与液压锁采用分体式设计,方便故障处理及零部件的更换。
结果1.MGl32对细胞形态学的影响生长状态良好的SMMC-7721肝癌细胞,培液中加入蛋白酶体抑制剂MGl32至终浓度分别为2uM,5uM,lOuM,对照组加入等体积的DMSO。
培养24小时后,通过倒置光学显微镜观察发现,MGl32处理后的细胞生长缓慢、细胞皱缩、形态变不规则形,24小时后细胞脱落死亡程度呈现浓度依赖性(Fig1.1)。
Fig1.1MorphologicalchangeofSMMC-7721cellsaftertreatmentwithDMSO(A)、MGl322uM(B)、5uM(C)、lOuM(D)for24h(200X)4.Hoechst染色法检测细胞凋亡生长状态良好的SMMC.7721肝癌细胞,培液中加入蛋白酶体抑制剂MGl32至终浓度分别为2uM,5uM,10uM,对照组加入等体积的DMSO。
培养24小时后,用Hoechst染色法进行活细胞染色分析,在荧光显微镜下观察细胞核形态。
结果显示(Fig1.4),经MGl32处理后的细胞出现明显凋亡,可见凋亡小体。
SMMC-7721cellsafter24htreatmentwithFig1.4HoechstdyestainingassayofDMSO(A);MGl322uM(B);SuM(C);10uM(D)(200×)Fig.1正常细胞中存在着内质网中的质量控制(ERqualitycontr01),能将偶尔产生的错误折叠的蛋白质通过26S蛋白酶体或内质网相关途径(ERassociateddegression,ERAD)途径降解。
在应激情况下,细胞通过产生UPR-ERstress减少需要折叠的蛋白质来源,加强蛋白质的折叠及清除内质网中积累的未折叠蛋白,使细胞在内外环境不利的情况下仍能存活。
UPR程度不同可导致XBPl基因不同程度地循环活化,因此内质网应激程度也有所不同。
如果严重情况下细胞产生UPR-ERstress仍不能克服内质网中不断积累的未折叠蛋白质,则内质网应激可活化胱冬肽酶12(easpase12)导致细胞凋亡[81。
MG132的配制:
质量:5mg 分子量:475.62 配制母液浓度:1mM 工作浓度:1μM
5mg/475.62/X (L) =1mM
X=10.5ml
去一定量的MG132粉剂,按以上的公式计算出所需要加入的溶剂量。
(溶剂为DMSO)。
1、在96孔板中接种HEK293/tau441细胞系。
共设空白对照组、实验对照组、0.5μM组、1μM组、2μM组和5μM组,每组设5个平行样,每孔加100μL 细胞悬液,但空白对照组中只加培养基不加细胞。
2、37 ℃、5%CO2的饱和湿度下培养24h。
3、用新鲜培养基将1 mM的MG132母液稀释成100μM 。
向5μM实验组的每孔中加入5μL的100μM的MG132母液,使MG132的终浓度达到5μM
向2μM实验组的每孔中加入2μL的100μM的MG132母液,使MG132的终浓度达到2μM
向1μM实验组的每孔中加入1μL的100μM的MG132母液,使MG132的终浓度达到1μM
向0.5μM实验组的每孔中加入0.5μL的100μM的MG132母液,使MG132的终浓度达到0.5μM
实验对照组加相对量的DMSO,继续培养24h。
4、取出培养板,每孔加入5mg/mL 的MTT溶液10μL,37℃反应3h。
5、每孔加入100μL10%SDS-0.01N HCl溶液,37℃溶解过夜。
6、用酶标仪测量各孔吸光值(测量波长为570nm)。
按下式计算抑制率:
对照组OD值 - 实验组OD值
抑制率 = ———————————————×100%
对照组OD值
抑制率为50%时的样品所稀释的倍数为ID50,抑制率为50%时的样品浓度为IC50。