弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验
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第十一章 弯曲菌属和螺杆菌属
采用C-13同位素呼吸试验检测的方法，患者只需要向特定 的一次性专用呼吸检测卡中轻吹一口气，就能检查出引起 胃肠病的病因“幽门螺杆菌”在患者体内的感染数量。通 过口服C-13尿素胶囊，进入胃部后，如果胃部存在幽门螺 杆菌，则此菌就会分解尿素酶水解尿素，尿素被水解后形 成CO₂（二氧化碳）随血液进入肺部并以气体排出，然后 检测患者呼出的气体中有没有被标记的C-13，如果有的话， 代表存在幽门螺杆菌。但需要注意的是，幽门螺杆菌正常 人体内都有，但是超过100dpm便易引起癌变。而且具有 传染性，是世界卫生组织指定的一类致癌源。
形小杆菌 • 暗视野或相差显微镜：投镖样或螺旋样运动
核酸检测
PCR方法检测粪便中弯曲菌核酸
（四）分离培养
• 关键：选择性培养基和孵育条件 • 常用培养基：改良的Skirrow’s 培养基、Campy-BAP等 • 培养条件：5%O2、10%CO2及85%N2 • 温度和时间：
空肠和大肠弯曲菌最适温度为42℃，一般72h后观察菌落； 胎儿弯曲菌最适温度是37℃，一般培养72h~7d观察菌落。 故临床标本需分别置于37℃和42℃中培养，以防漏检。 • 弯曲菌的菌落特征: 菌落细小，粉红灰色、灰白或黄灰色、轻微黏液样， 有些菌落沿接种线有拖尾样外观
• 弯曲菌能引起动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾 病。对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等。 可根据生长温度、生化反应结果进行鉴定
• 螺杆菌属有20余种，其中幽门螺杆菌是引起胃部疾病的重要 病原体，可以产生大量高活性脲酶。通过快速测定脲酶的活 性或代谢产物可以帮助诊断幽门螺杆菌感染
第十一章 弯曲菌属检验 螺杆菌属检验
南昌大学第二附属医院 张黎明
第一节 弯曲菌属
一、分类
5.4.2弯曲菌属微生物学检验
将活检粘膜组织在玻片上涂抹后，经革兰染色或单染色后镜检，如发现典型 形态的HP即可诊断
组织切片染色镜检
组织块经福马林固定、切片经W-S银染色、姬姆萨染色、HE染色和荧光染 色等染色后镜检HP，以W-S银染效果最好
免疫组化
用免疫组化法可检出胃粘膜组织切片中的完整HP及破碎的菌体或抗原成分
间接免疫荧光法（IIF）
核酸检测
PCR方法直接检测粪便标本中的弯曲菌，但目前尚未 被广泛采用
空肠弯曲菌（箭头所指），儿童粪便涂片
（四）分离培养与鉴定
1. 分离培养
粪便或肛拭标本直接接种改良Campy-BAP选择平板 血、脑脊液标本先接种于布氏肉汤增菌后转种分离培养基 微氧环境培养 空肠/大肠弯曲菌最适生长温度42~43℃，24h可观察菌落，
营养要求较高，一般需含血液或血清才能生长，常用的培 养基有哥伦比亚血琼脂、心脑浸液血琼脂、布氏菌血培养 基等
最适温度：37℃ 不能生长：42 ℃，25 ℃
三、生物学特性
HP生长缓慢，需经48~72h才长出菌落 圆形孤立的小菌落，无色半透明呈露滴状，直径约0.5~1mm， 血平板上有轻度溶血。 沿接种线扩散生长，融合成片，扁平，无色半透明
将接种后的平板放入微需氧和98%以上湿度的环境培养
鉴定
主要根据菌落特征、形态和染色性；37℃生长；氧化酶和触 酶均阳性、脲酶强阳性；对萘啶酸耐药、头孢噻吩敏感；在 1%甘油和1%胆盐中均不生长。HP的主要培养和生化特性见 表12-3
（四）分离培养与鉴定
分离培养
宜用新鲜配制的选择培养基。将标本的粘膜面在平板上 反复涂擦，或将标本研碎后用研磨棒蘸取适量匀浆接种
如于37℃培养则需48~72h 胎儿弯曲菌于25℃和37℃均可生长
组织切片染色镜检
组织块经福马林固定、切片经W-S银染色、姬姆萨染色、HE染色和荧光染 色等染色后镜检HP，以W-S银染效果最好
免疫组化
用免疫组化法可检出胃粘膜组织切片中的完整HP及破碎的菌体或抗原成分
间接免疫荧光法（IIF）
核酸检测
PCR方法直接检测粪便标本中的弯曲菌，但目前尚未 被广泛采用
空肠弯曲菌（箭头所指），儿童粪便涂片
（四）分离培养与鉴定
1. 分离培养
粪便或肛拭标本直接接种改良Campy-BAP选择平板 血、脑脊液标本先接种于布氏肉汤增菌后转种分离培养基 微氧环境培养 空肠/大肠弯曲菌最适生长温度42~43℃，24h可观察菌落，
营养要求较高，一般需含血液或血清才能生长，常用的培 养基有哥伦比亚血琼脂、心脑浸液血琼脂、布氏菌血培养 基等
最适温度：37℃ 不能生长：42 ℃，25 ℃
三、生物学特性
HP生长缓慢，需经48~72h才长出菌落 圆形孤立的小菌落，无色半透明呈露滴状，直径约0.5~1mm， 血平板上有轻度溶血。 沿接种线扩散生长，融合成片，扁平，无色半透明
将接种后的平板放入微需氧和98%以上湿度的环境培养
鉴定
主要根据菌落特征、形态和染色性；37℃生长；氧化酶和触 酶均阳性、脲酶强阳性；对萘啶酸耐药、头孢噻吩敏感；在 1%甘油和1%胆盐中均不生长。HP的主要培养和生化特性见 表12-3
（四）分离培养与鉴定
分离培养
宜用新鲜配制的选择培养基。将标本的粘膜面在平板上 反复涂擦，或将标本研碎后用研磨棒蘸取适量匀浆接种
如于37℃培养则需48~72h 胎儿弯曲菌于25℃和37℃均可生长
11第十一章 弯曲菌属检验、螺杆菌属检验 (1)
第十一章弯曲菌属检验、螺杆菌属检验一、名词解释1.Helicobacter pylori二、选择题【A1型题】1.弯曲菌属中引起腹泻的常见病原菌是A、空肠弯曲菌B、大肠弯曲菌C、胎儿弯曲菌D、粘膜弯曲菌E、猪肠弯曲菌2.大多数的弯曲菌生长时的最佳气体环境是A、5%氧气、10%二氧化碳及85%氮气B、普通大气C、20%氧气、10%二氧化碳及70%氮气D、10%二氧化碳E、5%氧气、20%二氧化碳及75%氮气3.主要引起肠外感染的细菌是A、空肠弯曲菌B、大肠弯曲菌C、胎儿弯曲菌D、粘膜弯曲菌E、猪肠弯曲菌4.与吉兰-巴雷综合症有关的细菌是A、空肠弯曲菌B、大肠弯曲菌C、胎儿弯曲菌D、粘膜弯曲菌E、猪肠弯曲菌5.空肠/大肠弯曲菌的最适生长温度是A、4℃B、25℃C、37℃D、42℃E、50℃6.可用于幽门螺杆菌快速诊断的方法是A、脲酶试验B、糖类发酵试验C、氧化酶试验D、DNA酶试验E、触酶试验7. 关于幽门螺杆菌的形态特征，错误的是A、菌体细长弯曲呈螺形、S形或海鸥形B、革兰染色阴性C、菌体一端或两端可有多根带鞘鞭毛D、在固体培养基上生长时，除典型的形态外，有时可出现杆状或圆球状E、有芽胞位于次极端8.关于幽门螺杆菌的培养特性，错误的是A、微需氧B、相对湿度在98%以上为宜C、营养要求较高D、生长缓慢E、最适生长温度为25℃9.关于幽门螺杆菌的生化反应特性，错误的是A、不能利用糖类B、产生的脲酶相当于普通变形杆菌的20～70倍C、对酸敏感D、氧化酶阴性E、生理浓度的胆盐可抑制幽门螺杆菌生长10.关于弯曲菌的生物学特性，错误的是A、革兰阴性，菌体弯曲B、两端单鞭毛或一端单鞭毛C、对热敏感D、全部对头孢噻吩耐药E、37℃均能生长【B型题】11～14题：A、4℃生长B、头孢噻吩耐药C、奈啶酸耐药D、马尿酸盐水解试验阳性E、脲酶阳性11.胎儿弯曲菌12.空肠弯曲菌13.空肠弯曲菌空肠亚种14.幽门螺杆菌【X型题】15.实验室为了分离弯曲菌，应至少同时放置几个温度条件下培养，才能不漏检A、4℃B、25℃C、37℃D、42℃E、56℃16. 幽门螺杆菌感染可引起以下哪些疾病A、胃炎B、胃癌C、消化性溃疡D、腹泻E、肝炎17.空肠弯曲菌下列哪些试验是阳性A、氧化酶试验B、马尿酸盐水解试验C、醋酸吲哚水解试验D、血浆凝固酶试验E、糖发酵试验三、问答题1.临床检查幽门螺杆菌感染有哪些手段？。
医学：空肠弯曲菌幽门螺杆菌
对人类健康的潜在影响
预防和控制疾病的
传播
深入研究空肠弯曲菌幽门螺杆菌 的传播方式和途径，有助于制定 有效的预防和控制策略，降低疾 病的传播风险。
提高公众健康意识
加强对空肠弯曲菌幽门螺杆菌的 宣传和教育，提高公众对该细菌 的认识和重视程度，促进健康生 活习惯的养成。
促进国际合作与交
流
加强国际间的合作与交流，共同 应对空肠弯曲菌幽门螺杆菌对人 类健康的威胁，分享研究成果和 经验。
人体免疫系统对空肠弯曲 菌幽门螺杆菌的感染产生 免疫反应，导致炎症和组 织损伤。
症状与表现
上腹部疼痛
空肠弯曲菌幽门螺杆菌 感染后，患者常出现上 腹部疼痛，呈持续性或
阵发性。
消化不良症状
感染后可能出现食欲不 振、腹胀、恶心、呕吐
等症状。
消化道出血
其他症状
严重感染可能导致消化 道出血，表现为呕血、
黑便等症状。
特性
主要寄生于哺乳动物和鸟类的肠 道中，具有高度传染性，可通过 粪口途径传播。
发现与历史
发现
1974年，科学家在澳大利亚的两名儿童胃液中首次发现空幽 菌。
历史
自发现以来，空幽菌在全球范围内引起了广泛的关注和研究 。
分布与传播
分布
空幽菌在全球范围内均有分布，主要在发展中国家流 行。
传播途径
主要通过粪口途径传播，如食用被污染的食物或水源， 或接触被感染者的粪便。
了解其在人体内的生存、繁殖和致病机制，有助于开发更有效的治疗和预防方法。
探索新型抗菌药物的研发
随着细菌耐药性的增加，开发新型抗菌药物成为迫切需求，应加强研究以应对抗药性问 题。
开展跨学科合作研究
医学、生物学、化学等多学科的合作有助于更全面地了解空肠弯曲菌幽门螺杆菌的特性， 推动研究进展。
幽门螺杆菌培养及鉴定标准操作规程
幽门螺杆菌培养及鉴定标准操作规程幽门螺杆菌培养及药敏1. 形态与染色革兰阴性，菌体细长，大小为(0.3-1)微米*(1.5-5)微米，弯曲成螺旋形，S 形，末端成弯曲状，胃黏膜病理切片标本可见螺旋形细菌。
电子显微镜下，菌体的一端可伸出2,6条带鞘的鞭毛。
2.培养特性微需氧，最适气体环境为5%~7%O2，5%~10%CO2，最适温度为36度~37度，25度和42度时均不生长。
在加入5%~7%兔或羊血的牛心脑浸液布氏琼脂，哥伦比亚血琼脂，改良Skirrow平板或在Karmali弯曲菌血琼脂平板上分离的阳性率较高，但生长缓慢，应每2日观察一次。
菌落细小，针尖状，半透明，不溶血。
3. 感染与致病机理幽门螺杆菌感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT) 淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。
1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构(WHO/IARC) 将幽门螺杆菌定为?类致癌原。
幽门螺杆菌进入胃后，借助菌体一侧的鞭毛提供动力穿过黏液层。
研究表明，幽门螺杆菌在粘稠的环境下具有极强的运动能力，强动力性是幽门螺杆菌致病的重要因素。
幽门螺杆菌到达上皮表面后，通过粘附素，牢牢地与上皮细胞连接在一起，避免随食物一起被胃排空。
并分泌过氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶，以保护其不受中性粒细胞的杀伤作用。
幽门螺杆菌富含尿素酶，通过尿素酶水解尿素产生氨，在菌体周围形成“氨云”保护层，以抵抗胃酸的杀灭作用。
4. 生化反应氧化酶试验阳性，不分解任何糖类，尿素试验强阳性，触酶试验阳性，H2S，马尿酸钠和硝酸盐还原试验均阴性，25ºC和42ºC时均不生长，对奈啶酸耐药。
5. 本菌鉴定特征涂片(或胃黏膜活检标本)查见螺旋形或S形细菌:微需氧，生长缓慢，25ºC和42ºC时均不生长;氧化酶，触酶试验阳性，尿素试验强阳性。
6.临床意义6.1 有门螺杆菌寄生于人的胃黏膜上，感染后可引起胃黏膜的急性炎症反应，临床表现为腹痛，消化不良等症状。
大肠弯曲菌
5. 用抗体包被的乳胶颗粒，遇到相应的弯曲菌 时便可出现反应。可用于鉴定空肠／大肠弯
曲菌，具有高度敏感性和特异性。
6.DNA 探针： DNA-DNA 杂交可以用于鉴别大
肠弯曲菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌、
区别空肠弯曲菌和其他的弯曲菌。
第二节 螺杆菌属
幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃
疡和胃癌等疾病相关。
病人禁食一夜，进食用13c或14c标记的尿 素，HP产生的尿素酶分解脲素释放 CO2， 因此可测定病人呼吸中释放带有同位素 的CO2量，如CO2含量超过标准，提示有 HP存在。 该方法敏感性与特异性均好。
2．培养在含有5％O2、10％C02、85％N2的微
需氧和98％以上湿度的环境培养。
3．鉴定 根据形态和染色性, 菌落特征； 37℃
生长，43％、25％不生长；氧化酶和过氧化 氢酶均阳性、脲酶强阳性；对萘啶酸耐药、 头孢噻吩敏感；在1％甘油和1％胆盐中均不 生长。
4.快速脲酶试验
是—种简便实用、快速敏感、较为准确可靠的 诊断方法。脲酶试剂由尿素、基质、酚红指示 剂等组成, 将小块的活组织块放人装有尿素培 养基瓶内，如培养基由黄变为红色为阳性，提 示该菌脲酶已将尿素分解。
3. HP菌株间具有共同抗原。与空肠弯曲菌菌体
外膜蛋白无交叉免疫反应，但其鞭毛蛋白具
有明显的交叉反应。
3.培养特性
1.HP 为微需氧菌，在 5 ％ O2、10％C02、
85％N2的中生长良好。最适温度为
37℃, 25℃不生长，42℃少数生长，
此与弯曲菌属不同。
2.HP对湿度(85%以上)要求较高，营养要 求较高需含血液才能生长，常用血琼脂 培养基,需经72h才长出菌落，故在培养 基中添加多粘菌素B(250U/ L)、万古霉 素 ( 6 mg／L)、 两 性 霉 素 ( 2 mg／L)、 TMP(5mg／L)等以抑制杂菌生长。 3.HP 的菌落形态为圆形孤立的小菌落， 无色半透明呈露滴状。
弯曲菌,螺杆菌
侵袭力 毒素
表面结构： 鞭毛（强推动力） 粘附因子
侵袭酶 过氧化氢酶，蛋白酶，磷脂酶 尿素酶-形成氨云保护层
空泡毒素-VacA基因表达（空泡样病变） 细胞毒素-CagA基因表达
侵袭酶的作用：
过氧化氢酶：HP产生的过氧化氢酶是一种重要 的保护酶，它使H2O2被分解成水，为其创造生 存环境，免遭杀灭，也可以抑制中性粒细胞的杀 菌作用。
蛋白酶：破坏胃粘膜的完整性，使粘液易于溶解， 疏水性小，胃粘膜易被胃酸和胃蛋白酶损害。
磷脂酶：HP产生的磷脂酶分解长链脂肪酸，不 能组成正常的磷脂双分子层，影响上皮细胞的完 整性。
尿素酶的作用：
致病过程
诱发胃癌的可能机制
粘膜组织损伤
壁细胞数量减少，胃酸分泌减少 氨云的产生
pH升高利于细菌繁殖 致癌物质N-亚硝基化合物合成
螺杆菌属和弯曲菌属
螺杆菌属（ Helicobacter ） 弯曲菌属（ Campylobacter ）
第一节 螺杆菌属 Helicobacter
代表菌是幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp) Hp的发现更新了人们对胃、十二指肠疾病的传
统观念，Hp可能与胃癌有关
２００５年，诺贝尔奖 澳大Βιβλιοθήκη 亚科学家巴里·马歇尔和罗宾·沃伦。
Barry J. Marshall和J. Robin Warren
主要生物学性状
形态：G-（革兰阴性） 细长的弯曲菌，呈螺形、S形 一端有2~6根鞭毛，运动活泼
生长：微需氧，42℃能生长，营养要求高， 抵抗力较弱，生长缓慢，3d以上才可见菌落
生化反应：脲酶丰富，快速脲素酶试验阳 性具鉴定意义（所以可以在胃的酸性环境下生 存）
大肠弯曲菌
第十六章弯曲菌属 与螺杆菌属
பைடு நூலகம்
第一节 弯曲菌属
是一类呈逗点状或s 形的G- 菌，广泛分布
于动物界，其中有些可引起动物与人类的
腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾病。对人
致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯 曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常见病 原菌。
该菌借助于鞭毛和外膜蛋白与空肠上皮细胞
结合，侵入生长繁殖，产生肠毒素、细胞毒
素和内毒素等物质，引起肠炎和肠道外感染。
腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现，
转为粘液脓血样便，甚至血便。有发热腹痛、
恶心不适等症状。可在1周内消退，20％患者
症状可持续1-3周。
微生物特性
1.形态结构 G-菌体弯曲呈逗点。无芽孢有鞭 毛。运动活泼，呈投镖样为其特征。 2.基因组及抗原成分 基因组大小仅为大肠杆 菌的35％； DNA的G+C为30-38mol％。 按O抗原不同分为65个血清型。 3.培养特征 为微需氧菌，最佳气体环境通常 为含5％氧气、10％二氧化碳及85％氮气。 4.抵抗力不强，在室温下可迅速死亡。对热 敏感，标本在4℃冰箱可保存3周。
5. 用抗体包被的乳胶颗粒，遇到相应的弯曲菌 时便可出现反应。可用于鉴定空肠／大肠弯
曲菌，具有高度敏感性和特异性。
6.DNA 探针： DNA-DNA 杂交可以用于鉴别大
肠弯曲菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌、
区别空肠弯曲菌和其他的弯曲菌。
第二节 螺杆菌属
幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃
疡和胃癌等疾病相关。
4.理化性状
HP生化反应不活跃，不能利用糖类。 HP具有大量高活力的胞外脲酶，故脲酶活性 的测定可作为HP的快速诊断方法。 还能产生氧化酶、触酶、碱性磷酸酶、 α- 谷 氨酰转肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。
பைடு நூலகம்
第一节 弯曲菌属
是一类呈逗点状或s 形的G- 菌，广泛分布
于动物界，其中有些可引起动物与人类的
腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾病。对人
致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯 曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常见病 原菌。
该菌借助于鞭毛和外膜蛋白与空肠上皮细胞
结合，侵入生长繁殖，产生肠毒素、细胞毒
素和内毒素等物质，引起肠炎和肠道外感染。
腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现，
转为粘液脓血样便，甚至血便。有发热腹痛、
恶心不适等症状。可在1周内消退，20％患者
症状可持续1-3周。
微生物特性
1.形态结构 G-菌体弯曲呈逗点。无芽孢有鞭 毛。运动活泼，呈投镖样为其特征。 2.基因组及抗原成分 基因组大小仅为大肠杆 菌的35％； DNA的G+C为30-38mol％。 按O抗原不同分为65个血清型。 3.培养特征 为微需氧菌，最佳气体环境通常 为含5％氧气、10％二氧化碳及85％氮气。 4.抵抗力不强，在室温下可迅速死亡。对热 敏感，标本在4℃冰箱可保存3周。
5. 用抗体包被的乳胶颗粒，遇到相应的弯曲菌 时便可出现反应。可用于鉴定空肠／大肠弯
曲菌，具有高度敏感性和特异性。
6.DNA 探针： DNA-DNA 杂交可以用于鉴别大
肠弯曲菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌、
区别空肠弯曲菌和其他的弯曲菌。
第二节 螺杆菌属
幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃
疡和胃癌等疾病相关。
4.理化性状
HP生化反应不活跃，不能利用糖类。 HP具有大量高活力的胞外脲酶，故脲酶活性 的测定可作为HP的快速诊断方法。 还能产生氧化酶、触酶、碱性磷酸酶、 α- 谷 氨酰转肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。
螺杆菌属与弯曲菌属
过接触禽畜粪便、污染的食 物感染）。
谢谢观看
一、螺杆菌属
（三）微生物学检查
检查方法
镜检
分离培养与鉴定
快速诊断试验
尿素酶试验
一、螺杆菌属
（四）防治原则
目前尚无有效的预防措施，以尿素酶 和热休克蛋白作为抗原开发幽门螺杆 菌的疫苗正在研制中。
二、弯曲菌属
• 插入图片
空肠弯曲菌
1.G－菌，细长呈S状、螺旋形 或海鸥展翅状排列。
2.致病物质为霍乱样肠毒素等。 3.主要引起婴儿急性肠炎（通
一、螺杆菌属
（二）致病性与免疫性
01 致病物质
鞭毛与尿素酶 黏附素 脂多糖 毒素（空泡毒素VacA、细胞
毒素相关CagA）
幽门螺杆菌致病
一、螺杆菌属
（二）致病性与免疫性
02 所致疾病
人是唯一肯定传染源。 功能性消化不良、慢性胃炎、 消化性溃疡、胃癌、胃淋巴瘤、 胃肠道外疾病。 IgA和IgG→感染或疾病的标志
01 形态与染色
幽 门 螺 杆 菌 为 革 兰 阴 性 菌 ， 大 小 为 (2 ～ 4)μm×(0.5～1.0)μm，呈弧形或S形或海鸥状， 一端或两端有多根鞭毛，运动活泼。
幽门螺杆菌 （电镜彩色照片）
一、螺杆菌属
（一） 生物学性状
02 培养特性与生化反应
营养要求高 、需要一定湿度 细小、针尖状、半透明菌落 不分解糖，氧快速尿素酶（+）
课程目标
2.熟悉
幽门螺杆菌及 空肠弯曲菌的 致病性。
1.掌握
幽门螺杆菌的生物学 特点。
3.了解
空肠弯曲菌的生物学特点 ，螺杆菌属与弯曲菌属的 检查及预防方法。
一、螺杆菌属
螺杆菌属为革兰阴性螺形杆菌，有20余种，代表种是幽门螺杆菌，是慢性胃炎的主要病原体 ，与消化性溃疡和胃癌的发生关系密切。
谢谢观看
一、螺杆菌属
（三）微生物学检查
检查方法
镜检
分离培养与鉴定
快速诊断试验
尿素酶试验
一、螺杆菌属
（四）防治原则
目前尚无有效的预防措施，以尿素酶 和热休克蛋白作为抗原开发幽门螺杆 菌的疫苗正在研制中。
二、弯曲菌属
• 插入图片
空肠弯曲菌
1.G－菌，细长呈S状、螺旋形 或海鸥展翅状排列。
2.致病物质为霍乱样肠毒素等。 3.主要引起婴儿急性肠炎（通
一、螺杆菌属
（二）致病性与免疫性
01 致病物质
鞭毛与尿素酶 黏附素 脂多糖 毒素（空泡毒素VacA、细胞
毒素相关CagA）
幽门螺杆菌致病
一、螺杆菌属
（二）致病性与免疫性
02 所致疾病
人是唯一肯定传染源。 功能性消化不良、慢性胃炎、 消化性溃疡、胃癌、胃淋巴瘤、 胃肠道外疾病。 IgA和IgG→感染或疾病的标志
01 形态与染色
幽 门 螺 杆 菌 为 革 兰 阴 性 菌 ， 大 小 为 (2 ～ 4)μm×(0.5～1.0)μm，呈弧形或S形或海鸥状， 一端或两端有多根鞭毛，运动活泼。
幽门螺杆菌 （电镜彩色照片）
一、螺杆菌属
（一） 生物学性状
02 培养特性与生化反应
营养要求高 、需要一定湿度 细小、针尖状、半透明菌落 不分解糖，氧快速尿素酶（+）
课程目标
2.熟悉
幽门螺杆菌及 空肠弯曲菌的 致病性。
1.掌握
幽门螺杆菌的生物学 特点。
3.了解
空肠弯曲菌的生物学特点 ，螺杆菌属与弯曲菌属的 检查及预防方法。
一、螺杆菌属
螺杆菌属为革兰阴性螺形杆菌，有20余种，代表种是幽门螺杆菌，是慢性胃炎的主要病原体 ，与消化性溃疡和胃癌的发生关系密切。
空肠弯曲菌和幽门螺杆菌
可通过食物或水传播给人类。
它是一种人畜共患病原体，可引 起急性肠炎和腹泻等症状，通常 在食用被污染的食物或水后感染。
空肠弯曲菌感染通常在几天内自 行消退，但有时可能导致严重的 疾病，如出血性肠炎和败血症等。
什么是空肠弯曲菌？
空肠弯曲菌是一种常见的细菌， 通常存在于家禽和野生鸟类中，
可通过食物或水传播给人类。
促进国际合作与交流
在全球范围内提高对这两种细菌的认识， 促进国际间的合作与交流，共同应对细菌 感染的挑战。
提高公众对这两种细菌的认识的重要性
增强防范意识
提高公众对空肠弯曲菌和幽门螺杆菌的认 识，使人们更加重视个人卫生和环境卫生，
采取预防措施，降低感染风险。
促进早期发现和治疗
了解这两种细菌的传播方式和症状表现， 有助于早期发现和治疗感染者，减少传播 范围和影响。
加强食品和水源监管
政府和相关部门应加强对食品和水源 的监管，确保它们符合卫生标准，减 少细菌污染的可能性。
教育公众
通过教育和宣传活动，提高公众对这 两种细菌的认识，了解其传播方式和 预防措施。
改善卫生设施
加强公共卫生设施的建设和维护，提 供充足的洗手设施和清洁水源，以降 低感染风险。
如何控制空肠弯曲菌和幽门螺杆菌的传播
空肠弯曲菌的传播方式
粪口传播
空肠弯曲菌主要通过粪便 污染水源或食物，再经口 摄入传播。
直接接触
与感染者直接接触，如接 吻、拥抱等行为也可能传 播该菌。
动物传播
接触受感染的动物，如鸡、 鸭等也可能传播空肠弯曲 菌。
空肠弯曲菌的症状和影响
01
02
03
04
腹泻
感染空肠弯曲菌后，可能出现 腹泻症状，多为水样便，持续
它是一种人畜共患病原体，可引 起急性肠炎和腹泻等症状，通常 在食用被污染的食物或水后感染。
空肠弯曲菌感染通常在几天内自 行消退，但有时可能导致严重的 疾病，如出血性肠炎和败血症等。
什么是空肠弯曲菌？
空肠弯曲菌是一种常见的细菌， 通常存在于家禽和野生鸟类中，
可通过食物或水传播给人类。
促进国际合作与交流
在全球范围内提高对这两种细菌的认识， 促进国际间的合作与交流，共同应对细菌 感染的挑战。
提高公众对这两种细菌的认识的重要性
增强防范意识
提高公众对空肠弯曲菌和幽门螺杆菌的认 识，使人们更加重视个人卫生和环境卫生，
采取预防措施，降低感染风险。
促进早期发现和治疗
了解这两种细菌的传播方式和症状表现， 有助于早期发现和治疗感染者，减少传播 范围和影响。
加强食品和水源监管
政府和相关部门应加强对食品和水源 的监管，确保它们符合卫生标准，减 少细菌污染的可能性。
教育公众
通过教育和宣传活动，提高公众对这 两种细菌的认识，了解其传播方式和 预防措施。
改善卫生设施
加强公共卫生设施的建设和维护，提 供充足的洗手设施和清洁水源，以降 低感染风险。
如何控制空肠弯曲菌和幽门螺杆菌的传播
空肠弯曲菌的传播方式
粪口传播
空肠弯曲菌主要通过粪便 污染水源或食物，再经口 摄入传播。
直接接触
与感染者直接接触，如接 吻、拥抱等行为也可能传 播该菌。
动物传播
接触受感染的动物，如鸡、 鸭等也可能传播空肠弯曲 菌。
空肠弯曲菌的症状和影响
01
02
03
04
腹泻
感染空肠弯曲菌后，可能出现 腹泻症状，多为水样便，持续
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• a.病毒感染：按发病率高低顺序分别为：轮状病毒(其中包括A组轮状病毒、成人腹泻轮 状病毒)、肠腺病毒、诺沃克病毒、埃可病毒、星状病毒、冠状病毒、嵌杯样病毒、 Norwalk因子以及其他病毒感染所引起的腹泻等。
• b.细菌感染：细菌感染所致的感染性腹泻十分常见，呈全球性分布，如细菌性痢疾、 沙门氏菌感染、霍乱、副溶血弧菌感染、弯曲菌感染、溃疡性肠结核以及金黄色葡萄 球菌胃肠炎等。
近年来发现了弯曲菌的许多新种和亚种。
二、临床意义
• 空肠/大肠弯曲菌广泛分布于温血动物。未经处理的水以及 生牛乳是人类感染的主要来源。弯曲菌的传播途径主要以食 物和水的传播为多见，经口摄入是本菌最主要的传播方式 – 腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现 – 感染后可引发吉兰-巴雷综合症和反应性关节炎
• c.真菌感染：如肠念珠菌病等。 • d.寄生虫感染：如阿米巴肠病、梨形鞭毛虫病、血吸虫病、钩虫病、姜片虫病以及绦
虫病等。 • ②非感染性腹泻：如炎症性肠病(包括慢性非特异性溃疡性结肠炎和克隆病)、急性出血
性坏死性肠炎、放射性肠炎以及缺血性肠病等均可有腹泻，结肠憩室炎或结肠息肉并 发结肠炎也可伴有腹泻。 • (2)肿瘤：肠道肿瘤，如小肠恶性淋巴瘤、结肠癌以及直肠癌等，导致肠粘膜的浸润、 糜烂和溃疡等病变，均可引起腹泻；Apud瘤、胃泌素瘤、类癌以及胰性霍乱等，则由 于产生大量的胃肠肽类物质而引起腹泻。 • (3) 吸收障碍：小肠粘膜受损，如小儿乳糜病、热带和非热带斯泼卢病、乳糜管或肠系 膜淋巴结病变等引起的肠腔内菌群失调以及小肠部分切除或短路手术等，均可引起营 养物质的吸收障碍而引起腹泻。 • (4)食物中毒：如葡萄球菌肠毒素所引起的食物中毒、海豚中毒以及肉毒中毒等。 • (5)化学品中毒：如砷、汞、磷及酒精等中毒。 • (6)药物作用：泻剂如硫酸镁等；拟副交感神经药如新斯的明、乙酰胆碱及毛果芸香碱 等；广谱抗生素如林可霉素及氯林可霉素；降压药如胍乙啶及利血平等都能引起腹泻。 • (7)肠变态反应性疾病：因对乳品及鱼虾等食物过敏，引起肠的变态反应性疾病，导致 腹泻。 • (8)其他：如尿毒症及营养不良等。
• 通常空肠/大肠弯曲菌的鞭毛是较细且紧密盘绕的两端单 鞭毛；胎儿弯曲菌胎儿亚种的鞭毛为波浪状的一端单鞭毛。 弯曲菌的运动非常活泼，呈投镖样或螺旋样前进
三、生物学特性
• 2.培养特性 • 弯曲菌为微需氧菌，空肠弯曲菌和其他大多数弯曲菌生长时需氧浓度
为5%~10%（V/V）。最佳气体环境为含5%氧气、10%二氧化碳及85% 氮气 • 营养要求高，在普通培养基上不生长。需加入血液、血清才能生长。 常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。这些培养基以 血琼脂为基础，加人多种抗生素，能抑制肠道正常菌群，而有利于本 菌的分离。空肠弯曲菌初次分离时，经48h培养可形成两种菌落；一 种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生 长的菌落；另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细 小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。
三、生物学特性
• 3.生化反应
• 试验项目 空肠弯曲杆菌 空肠弯曲杆菌 多氏亚种结肠弯曲杆菌 胎儿弯曲菌 胎儿亚种琢豚弯曲杆菌 乌普萨拉弯曲杆菌
• 25℃生长
－
+/－
－
+
D
0
• 37℃生长
＋
＋
＋
＋
＋
＋
• 42℃生长
＋
+/－
＋
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＋
• 硝酸盐还原试验
＋
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＋
＋
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• 3.5%Nacl耐受试验 －
－
－
－
• 正常人一般每日排便一次，个别人每日排便2～ 3次或每2～3日一次，粪便的性状正常，每日排 出粪便的平均重量为150～200g，含水分为60
％～75％。
你知道的导致腹泻的原因有哪些？
腹泻常见病因
• (1)肠道炎症：肠道炎症所引起的腹泻可分为感染性炎症性腹泻和非感染性腹泻两类： ①感染性炎症性腹泻：为最常见的一类腹泻，常见于：
• 胎儿弯曲菌主要引起肠外感染 – 其中胎儿亚种为主要的人类致病菌 – 可致人类菌血症、心内膜炎、血栓性静脉炎、活动性关 节炎、脑膜炎、肺部感染、胸膜炎、腹膜炎、胆囊炎等
三、生物学特性
• 1.形态染色
• 革兰阴性，菌体弯曲呈逗点、弧形、S形、螺旋形或典型 的海鸥展翅（gull wing）形。陈旧培养物可呈球形或长丝 状。无芽胞。
弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验
消化系统
• 腹泻
• 腹泻（diarrhea）是一种常见症状，是指排便次 数明显超过平日习惯的频率，粪质稀薄，水分 增加，每日排便量超过200g，或含未消化食物 或脓血、粘液。腹泻常伴有排便急迫感、肛门 不适、失禁等症状。腹泻分急性和慢性两类。 急性腹泻发病急剧，病程在2～3周之内。慢性 腹泻指病程在两个月以上或间歇期在2～4周内 的复发性腹泻。
3.生化反应
• 本属细菌生化反应不活泼。不分解糖类、 不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试 验均阴性。氧化酶均为阳性，大多数弯曲 菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性，空肠 弯曲菌马尿酸水解试验阳性医.学教育网搜 集整理。
• 其中有些可引起动物与人类的腹泻、胃肠 炎和肠道外感染等疾病
• 对人致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎 儿弯曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常 见病原菌
一、分类
• 弯曲菌原归属于弧菌属，1973年正式命名为 弯曲菌属
• Campylobacter源自希腊语意为弯曲的杆状 • 1984年在伯杰手册中将其分为5个种(亚种)。
－
－
• 硫化氢试验（纸条法）
＋
＋
＋
＋
＋
• 硫化氢试验（TSI） －
－
D
－
＋
－
• 过氧化氢酶试验
＋
＋
＋
＋
＋
－
• 氧化酶 ＋
＋
＋
＋
＋
＋
• 麦康凯琼脂
＋
1％甘氨酸生长试验 ＋
＋
＋
＋
＋
＋
• 马尿酸水解试验
＋
＋
－
－
－
－
• 奈啶酮酸试验
S
S
S
R
R
S
• 头孢菌新素试验
R
R
R
S
S
S
• 注：＋：90％以上阳性；D：11－89％阳性；－：90％以上阴性 ；〔－〕：一般不生长。 • R为耐受，S为敏感。
弯曲菌属与螺杆菌属
• 弯曲菌属与螺杆菌属是分类学上两个独立 的菌属
• 大小及形态相似，显微镜下为革兰染色阴 性菌，呈弧形或螺旋形菌，较难区别
• 为了便于鉴别诊断，将这两类细菌放在同 一章介绍
第一节 弯曲菌属
• 弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗点 状或S形的革兰阴性菌，广泛分布于动物 界
• b.细菌感染：细菌感染所致的感染性腹泻十分常见，呈全球性分布，如细菌性痢疾、 沙门氏菌感染、霍乱、副溶血弧菌感染、弯曲菌感染、溃疡性肠结核以及金黄色葡萄 球菌胃肠炎等。
近年来发现了弯曲菌的许多新种和亚种。
二、临床意义
• 空肠/大肠弯曲菌广泛分布于温血动物。未经处理的水以及 生牛乳是人类感染的主要来源。弯曲菌的传播途径主要以食 物和水的传播为多见，经口摄入是本菌最主要的传播方式 – 腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现 – 感染后可引发吉兰-巴雷综合症和反应性关节炎
• c.真菌感染：如肠念珠菌病等。 • d.寄生虫感染：如阿米巴肠病、梨形鞭毛虫病、血吸虫病、钩虫病、姜片虫病以及绦
虫病等。 • ②非感染性腹泻：如炎症性肠病(包括慢性非特异性溃疡性结肠炎和克隆病)、急性出血
性坏死性肠炎、放射性肠炎以及缺血性肠病等均可有腹泻，结肠憩室炎或结肠息肉并 发结肠炎也可伴有腹泻。 • (2)肿瘤：肠道肿瘤，如小肠恶性淋巴瘤、结肠癌以及直肠癌等，导致肠粘膜的浸润、 糜烂和溃疡等病变，均可引起腹泻；Apud瘤、胃泌素瘤、类癌以及胰性霍乱等，则由 于产生大量的胃肠肽类物质而引起腹泻。 • (3) 吸收障碍：小肠粘膜受损，如小儿乳糜病、热带和非热带斯泼卢病、乳糜管或肠系 膜淋巴结病变等引起的肠腔内菌群失调以及小肠部分切除或短路手术等，均可引起营 养物质的吸收障碍而引起腹泻。 • (4)食物中毒：如葡萄球菌肠毒素所引起的食物中毒、海豚中毒以及肉毒中毒等。 • (5)化学品中毒：如砷、汞、磷及酒精等中毒。 • (6)药物作用：泻剂如硫酸镁等；拟副交感神经药如新斯的明、乙酰胆碱及毛果芸香碱 等；广谱抗生素如林可霉素及氯林可霉素；降压药如胍乙啶及利血平等都能引起腹泻。 • (7)肠变态反应性疾病：因对乳品及鱼虾等食物过敏，引起肠的变态反应性疾病，导致 腹泻。 • (8)其他：如尿毒症及营养不良等。
• 通常空肠/大肠弯曲菌的鞭毛是较细且紧密盘绕的两端单 鞭毛；胎儿弯曲菌胎儿亚种的鞭毛为波浪状的一端单鞭毛。 弯曲菌的运动非常活泼，呈投镖样或螺旋样前进
三、生物学特性
• 2.培养特性 • 弯曲菌为微需氧菌，空肠弯曲菌和其他大多数弯曲菌生长时需氧浓度
为5%~10%（V/V）。最佳气体环境为含5%氧气、10%二氧化碳及85% 氮气 • 营养要求高，在普通培养基上不生长。需加入血液、血清才能生长。 常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。这些培养基以 血琼脂为基础，加人多种抗生素，能抑制肠道正常菌群，而有利于本 菌的分离。空肠弯曲菌初次分离时，经48h培养可形成两种菌落；一 种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生 长的菌落；另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细 小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。
三、生物学特性
• 3.生化反应
• 试验项目 空肠弯曲杆菌 空肠弯曲杆菌 多氏亚种结肠弯曲杆菌 胎儿弯曲菌 胎儿亚种琢豚弯曲杆菌 乌普萨拉弯曲杆菌
• 25℃生长
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• 37℃生长
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• 42℃生长
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• 硝酸盐还原试验
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• 3.5%Nacl耐受试验 －
－
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• 正常人一般每日排便一次，个别人每日排便2～ 3次或每2～3日一次，粪便的性状正常，每日排 出粪便的平均重量为150～200g，含水分为60
％～75％。
你知道的导致腹泻的原因有哪些？
腹泻常见病因
• (1)肠道炎症：肠道炎症所引起的腹泻可分为感染性炎症性腹泻和非感染性腹泻两类： ①感染性炎症性腹泻：为最常见的一类腹泻，常见于：
• 胎儿弯曲菌主要引起肠外感染 – 其中胎儿亚种为主要的人类致病菌 – 可致人类菌血症、心内膜炎、血栓性静脉炎、活动性关 节炎、脑膜炎、肺部感染、胸膜炎、腹膜炎、胆囊炎等
三、生物学特性
• 1.形态染色
• 革兰阴性，菌体弯曲呈逗点、弧形、S形、螺旋形或典型 的海鸥展翅（gull wing）形。陈旧培养物可呈球形或长丝 状。无芽胞。
弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验
消化系统
• 腹泻
• 腹泻（diarrhea）是一种常见症状，是指排便次 数明显超过平日习惯的频率，粪质稀薄，水分 增加，每日排便量超过200g，或含未消化食物 或脓血、粘液。腹泻常伴有排便急迫感、肛门 不适、失禁等症状。腹泻分急性和慢性两类。 急性腹泻发病急剧，病程在2～3周之内。慢性 腹泻指病程在两个月以上或间歇期在2～4周内 的复发性腹泻。
3.生化反应
• 本属细菌生化反应不活泼。不分解糖类、 不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试 验均阴性。氧化酶均为阳性，大多数弯曲 菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性，空肠 弯曲菌马尿酸水解试验阳性医.学教育网搜 集整理。
• 其中有些可引起动物与人类的腹泻、胃肠 炎和肠道外感染等疾病
• 对人致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎 儿弯曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常 见病原菌
一、分类
• 弯曲菌原归属于弧菌属，1973年正式命名为 弯曲菌属
• Campylobacter源自希腊语意为弯曲的杆状 • 1984年在伯杰手册中将其分为5个种(亚种)。
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• 硫化氢试验（纸条法）
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• 硫化氢试验（TSI） －
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• 过氧化氢酶试验
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• 氧化酶 ＋
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• 麦康凯琼脂
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1％甘氨酸生长试验 ＋
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• 马尿酸水解试验
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• 奈啶酮酸试验
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• 头孢菌新素试验
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• 注：＋：90％以上阳性；D：11－89％阳性；－：90％以上阴性 ；〔－〕：一般不生长。 • R为耐受，S为敏感。
弯曲菌属与螺杆菌属
• 弯曲菌属与螺杆菌属是分类学上两个独立 的菌属
• 大小及形态相似，显微镜下为革兰染色阴 性菌，呈弧形或螺旋形菌，较难区别
• 为了便于鉴别诊断，将这两类细菌放在同 一章介绍
第一节 弯曲菌属
• 弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗点 状或S形的革兰阴性菌，广泛分布于动物 界