19、受体细胞的种类:1)原核生物细胞例：大肠杆菌；枯草芽抱杆菌；蓝细菌；2)真核生物细胞包含酵母细胞、植物细胞、动物细胞。
19、常用于分了杂交的探针标记物可分为放射性及非放射性两大类，非放射性探针包括生物素标记探针、地高辛标记探针、荧光素标记探针。
20、根据待测核酸的来源以及将其分子结合到固相支持物上的方法的不同，核酸分子杂交检测法可分为菌落印迹原位杂交、斑点印迹杂交、Southern印迹杂交(DNA)和Nothern印迹杂交(RNA)四类。
(PS:如果只要检测克隆菌株、动植物细胞株或转基因个体、器官、
组织提取的总DNA或RNA样品中是否含有日的基因，则可采用斑点印迹杂交(dot blotting)或狭线印迹杂交(slot blotting)进行检测。
菌落(或噬菌斑)原位杂交是直接把菌落或噬菌斑印迹转移到用于杂
交的膜上，经溶菌和变性处理后使DNA暴露出来并与滤膜原位结合, 再用
DNA探针与其杂交。)
21、重组子筛选的方法：1)遗传表里直接筛选2)依赖于重组子结构特征分
析筛选3)核酸分子杂交分析4)免疫化学分析检测5)PCR 筛选法。
22、重组基因导入受体细胞的方法:C評(诱导大肠杆菌)转化法、电
激穿孔、基因枪法、显微注射法、病毒转染法
二、名词解释
1、多克隆位点（MCS）：是包含多个（最多20个）限制性酶切位点的一
段人工DNA序列。
2、衔接头：化学合成的寡核昔酸，含有一种以上的限制性核酸内切酶识别
序列。其一端或两端具有一种或两种内切酶切割产生的黏性末XL1J
炳。
3、限制性内切核酸酶：识别双链DNA中特定的核昔酸序列（识别序列），并在识别序列上使每条链的一个磷酸二酯键断开的一类酶，简称限制酶。
4、回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。
5、同裂酶：识别相同序列的限制性内切酶称为同裂酶。它们的切割位点可能不同
6、同尾酶：切割不同的DNA片段，但产生相同的粘性末端的一类限制性内切酶。
7、星性活性：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，又称Star活性。
8、克隆载体：一种能携带外源DNA片段进入受体细胞，并在受体细胞中得以维持或表达的DNA分子。
9、（质粒的）不亲和性：在没有选择压力的情况下，两种亲源关系密切的不同质粒，不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。
10、显性质粒（表达型质粒）:指携带除与自身复制和转移相关的基因，还携带一些使宿主细胞呈现新性状基因的质粒。
11＞隐蔽质粒：不能使宿主细胞呈现新性状的质粒。
12、基因组文库：指贮存了某种牛物全部基因信息的一个受体菌群体。
13、cDNA基因文库：某种生物材料的基因转录产物mRNA经反转录形成不同的cDNA片段，与克隆载体重组后贮存在受体菌群体中，这样的群体称为cDNA基因文库。
14、受体细胞：又称为猪主细胞或寄主细胞等，从实验技术上讲，是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从实验目的上讲，是有应用价值和理论研究价值的细胞。
15、感受态细胞：指处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态的细胞。
16、分子探针：指具有同特异性目标分子产生很强的相互作用并可对其相互作用的产物进行有效检测的DNA分子、RNA分子和蛋白质分
了。
三、简答题
1、简述聚合酶链式反应的基木原理、步骤和所需物质（反应物）。原理：模仿细胞内发牛的DNA半保留复制过程，在体外由酶催化合
成特异性DNA片段。
步骤：1）变性:冃的双链DNA片段在94°C下解链；
2）退火:两种寡核昔酸引物在适当温度（50°C左右）下与模板上的目的序列通过氢键配对；
3）延伸：DNA模板一引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为
