验证性试验
实验十三诺氟沙星(氟哌酸)胶囊含量测定
一、目的要求
1.掌握非水滴定法的原理及操作。
2.熟悉非水滴定在药物分析中的应用。
二、仪器与试药
1.仪器
Mettler AL204电子天平酸式滴定管规格：25mL
752型紫外可见分光光度仪
刻度移液管规格：1mL、2mL 定量滤纸（直径10cm）
容量瓶规格：100mL 500mL 漏斗试管
2.试药
诺氟沙星胶囊规格：0.2g 丙二酸醋酐氢氧化钠
高氯酸滴定液(0.1mol/L) 冰醋酸橙黄Ⅳ指示液
三、实验原理
诺氟沙星原料：以生物碱盐（BH+）的形式存在，滴定过程就是一个置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合较弱的酸。
BH+.A- + HClO4 BH+.ClO4-+ HA
诺氟沙星制剂：诺氟沙星以游离生物碱（B）的形式存在，为弱碱，溶于冰醋酸后，其碱强度被均化到溶剂阴离子的强度水平，增加诺氟沙星的碱性，以橙黄Ⅳ指示液为指示剂，可用高氯酸滴定液进行滴定。
BH+ + OH- B + H2O
B + HA
C BH+ + A C-
HClO4 + HA C ClO4 -+ H2A C+
H2A C+ + A C- 2HA C
四、实验内容
C16H18FN3O3 319.24
[鉴别]
(1)取本品内容物适量(约相当于诺氟沙星0.15g)置干燥试管中，加丙二酸0.1g与醋酐2mL，振摇，并在80～90℃水浴中加热10～15min，显红棕色。
(2)取本品内容物适量，加0.4％氢氧化钠溶液适量，振摇使诺氧沙星溶解，稀释成每1mL中含诺氟沙星5μg，滤过，弃去初滤液，取续滤液，在273，325与336nm波长处测定有最大吸收。[含量测定]
精密称取本品内容物适量(约相当于诺氟沙星0.25g)，加冰醋酸30mL，振摇使诺氟沙星溶解，
加橙黄Ⅳ指示液10滴，用高氯酸液(0.1mol/L)滴定，至溶液显紫红色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL 0.1mol/L 的高氯酸液相当于31.93mg 的C 16H 18FN 3O 3。
本品含诺氟沙星应为标示量的90.0～110.0％。
五、注意事项
1.0.1mol/L 的高氯酸溶液的配制及标定参见ChP2010版附录。高氯酸不稳定，注意避光保存。
2.水的体积膨胀系数较小（0.21×10-3/C 0），一般酸碱标准溶液的浓度受室温改变的影响不大。而多数有机溶剂的体积膨胀系数较大，例如，冰醋酸的体积膨胀系数为（1.1×10-3/C 0）其体积随温度改变较大。所以高氯酸冰醋酸溶液滴定样品时和标定时温度若有差别，则应重新标定或按下式将标准溶液的浓度加以校正：
()
0101T T 0011.01C C -+= 式中：0.0011为冰醋酸的体积膨胀系数，t 0为标定时的温度，t 1为测定时的温度，C 0为标定时的浓度，C 1为测定时的浓度。
3.现行药典对本品含量测定的方法为HPLC 法。
六、思考题
1.非水滴定应用于药物分析有何特点? 哪几类药物适合用非水滴定法测定其含量。
2试推导该含量测定中的计算公式。
七、参考文献
《中国药典》2010年版二部，642，化学工业出版社。