第四章__化学物质成份的鉴定方法

第四章糖类物质的测定第四章糖类物质的测定第⼀节概述⼀、定义和分类碳⽔化合物统称为糖类，是由碳、氢、氧三种元素组成的⼀⼤类化合物，①碳⽔化合物在有机体中的重要作⽤。

糖蛋⽩糖脂－－⽣理功能物质核糖和脱氧核糖－－遗传物质能量来源、结构成分②作为⾷品⼯业的主要原料和辅助材料。

③⼯业发酵的主要碳源，如淀粉、糊精、双糖、单糖。

⼯业发酵过程可以根据糖量的变化判断发酵是否正常；可以根据残糖量确定发酵终点。

糖的分类有效碳⽔化合物——⼈体能消化利⽤的单糖、双糖、多糖(淀粉)。

⽆效碳⽔化合物——不能被⼈体消化利⽤的纤维素、半纤维素、果胶等多糖。

这些⽆效碳⽔化合物能改善消化系统功能，对维持⼈体健康有重要作⽤；纤维素类原料的有效利⽤是⽣物技术中具有挑战性的研究⽅向。

⼆. 糖类物质的分布和含量葡萄糖、果糖: ⽔果，蔬菜：0.96-5.82％，0.85-6.53％蔗糖：⽢蔗，甜菜：10-15％，15-20％；西⽠，菠萝：4％，8％乳糖：动物乳汁，⽜乳～4.7％麦芽低聚糖：异麦芽低聚糖在⾃然界不存在，⽽由淀粉⽔解产⽣低聚果糖、低聚半乳糖、低聚⽊糖：⾃然界少，多由⼈⼯酶法合成淀粉，纤维素，果胶在植物普遍存在三. 糖类物质的测定⽅法分类：直接法：指根据糖的物理化学性质作为分析原理的分析⽅法间接法：根据其它物质含量，⽤差减法计算出来，以总碳⽔化合物或⽆N 抽提物表⽰糖的化学性质—还原性单糖的羰基、酮基、羟基具有不同强度的还原能⼒：醛糖：与弱氧化剂溴⽔：形成糖酸；与较强氧化剂硝酸：醛基和伯醇基都被氧化为羧基，⽣成葡萄糖⼆酸；有时只有伯醇基被氧化成羧酸，形成糖醛酸。

酮糖：酮糖对溴的氧化作⽤没有反应，以此可将酮糖与醛糖分开；在强氧化剂作⽤下，酮糖在羰基处断裂，形成两个酸。

单糖在碱性溶液中，醛基和酮基都可烯醇化为活泼的烯⼆醇，⽽烯⼆醇有还原性，普通酮类则不能。

各种化学分析法⽤于测定可溶性糖总量对各种糖分别定量分析的⽅法⾊谱法：纸⾊谱、薄层⾊谱、GC、HPLC酶电极法、酶⽐⾊法：半乳糖脱氢酶：测半乳糖、乳糖葡萄糖氧化酶：测葡萄糖、蔗糖酶⽔解法：测淀粉含量糖类物质测定的其它⽅法：电泳法：对可溶性糖的分离、定量⽑细管电泳法对低聚糖、活性多糖测定本章重点介绍国内外标准分析⽅法，⼀些有影响的参考⽅法第⼆节可溶性糖类的测定⼀、可溶性糖类的提取和澄清可溶性糖类通常是指葡萄糖、果糖等游离单糖及蔗糖等低聚糖。

化学物质的鉴别
化学物质的鉴别是指通过一系列的化学和物理性质测试，确定未知物质的组成和特征，以将其与已知的化学物质进行区分和识别的过程。

化学物质的鉴别通常包括以下几个方面：
一、物理性质测试：包括颜色、形状、密度、溶解性、熔点、沸点等物质的常规物理性质测试，这些测试能够提供一些关于物质的基本特征。

二、化学反应测试：通过与已知试剂或物质发生特定的化学反应，检测未知物质的化学性质。

例如，酸碱中和试验、气体生成反应、还原性和氧化性反应等。

三、光谱分析：使用光谱技术如红外光谱、紫外-可见光谱、质谱等，检测物质的分子结构和化学键信息，从而确定其组成和结构。

四、色谱分析：包括气相色谱、液相色谱等技术，通过物质在不同相分离和移动的特性，进行物质的分离和鉴别。

五、其他特殊测试：根据需要，还可以进行其他特殊的化学分析和测试，如热分析、电化学分析、放射性分析等。

通过以上一系列的测试和分析，可以获得关于化学物质的各种性质和特征信息，从而确定其组成和特征，并将其与其他已知化学物质进行区分和识别。

第1课时 蛋白质的分离与提取学习导航明目标、知重点难点掌握电泳法分离大分子的原理。

(重点) 运用常用的方法提取和分离蛋白质。

(重、难点)[学生用书P48]一、阅读教材P 71～72分析蛋白质的分离与纯化 1．生物细胞中的蛋白质提取(1)在提取蛋白质时，可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎，使蛋白质从细胞中释放出来，并使其溶解在适当的抽提液中。

(2)抽提液的选择需要根据蛋白质的特性而定，一般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提，碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提，脂蛋白等则可用有机溶剂抽提。

2．蛋白质的分离方法(1)离心沉降法：通过控制离心速度，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层。

(2)薄膜透析法：利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与其他小分子化合物分离的方法。

(3)凝胶色谱法①概念：根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。

②原理a ．凝胶⎩⎪⎨⎪⎧形态：微小的多孔球体组成：大多由多糖类化合物构成结构：内部具有很细微的多孔网状结构b ．分离的过程进入凝胶颗粒内 部的难易程度路程移动速度小分子 蛋白质 容易较长 较慢大分子 蛋白质无法进入 较短 较快二、阅读教材P73～77完成血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及凝胶色谱法分离血红蛋白的操作1．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳配制试剂→准备器材→架滤纸桥→浸泡薄膜→细心点样→平悬薄膜→实施电泳→染色→漂洗→脱色。

2．凝胶色谱法分离血红蛋白样品处理→血红蛋白的释放、分离和透析→凝胶的制备→色谱柱的装填→样品的加入→洗脱与收集。

判一判(1)酸性蛋白质用酸性溶液抽提，水溶性蛋白质用透析液抽提，脂溶性蛋白质用稀碱性溶液抽提。

(×)(2)电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动的过程。

(√)(3)电泳时泳动速度取决于带电颗粒的大小、形状、所带静电荷多少。

(√)(4)离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的原理是一样的。

(×)(5)凝胶色谱法是根据蛋白质分子量的大小而对其进行有效分离的方法。

第四章 药品检验方法《中国药典》附录收载的药品检验方法:附录Ⅲ 一般鉴别试验附录Ⅳ 分光光度法：紫外、红外、原子吸收、荧光、火焰光度法；附录Ⅴ 色谱法：纸、薄层、柱、高效、气相、电泳、毛细管电泳、分子排阻、离子色谱法； 附录Ⅵ 物理常数测定方法：熔点测定法、旋光度测定法、折光率测定法； 附录Ⅶ 官能团测定方法：氮测定法、脂肪和脂肪油测定法； 附录 Ⅷ 一般杂质检查方法：氯化物、干燥失重；附录 Ⅸ 物理测定方法：溶液颜色、澄清度、X 射线衍射法、质谱法 附录 Ⅹ 制剂的检查方法：崩解时限、溶出度；附录 Ⅺ 生物学测定方法：抗生素微生物检定法、热原；附录 Ⅻ 生物化学测定方法：细胞色素C 活力测定法、胰岛素生物测定法。

二、分光光度法分光光度法: 是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性、定量分析的方法。

基本原理：定量分析的基础是光的吸收定律。

E 为吸收系数，在药品检验中使用的是比吸收系数。

（一）紫外-可见分光光度法紫外分光光度法是根据药物对紫外-可见光的特征吸收对药物进行定性和定量的分析方法。

紫外分光光度法灵敏、简便，准确度比较高，是药物鉴别、检查和含量测定的常用方法。

1. 仪器的校正和检定 （1）波长的校正利用仪器汞灯或氘灯的较强谱线或钬玻璃的尖锐吸收峰进行校正；也可以用高氯酸钬溶液的吸收峰进行校正。

仪器波长的允许误差：紫外区：±1n m ; 500n m 附近：±2n mECl I IT A =-=-=0lglg（2）吸光度的准确度用重铬酸钾的硫酸溶液检定。

（3）杂散光的检查杂散光是一些不在谱带范围内且与所需波长相隔较远的光，一般来自光学仪器表面的瑕疵。

检查方法：配制碘化钠和亚硝酸钠溶液，在规定波长处测定透光率，应小于规定值。

2. 对溶剂的要求溶剂的使用范围不能小于截至波长；溶剂在不同波长范围内的吸光度应小于规定值。

3. 吸光度的测定方法（1）使用空白校正的方法 用同批溶剂作为空白。

第4章药物的鉴别试验依据药典进行的药物分析主要有三大项内容：鉴别、检查和含量测定。

药物的鉴别试验（ldentification test)，是利用药物的分子结构所表现的特殊的化学行为（如进行化学反应、测定药物的理化常数等）或光谱、色谱、生物学等特征，来判断药品的真伪。

药物的鉴别在药品质量检验工作中属首项工作。

只有在药物被鉴别无误、证实被分析的药物是真的后，才有必要接着进行检查和含量测定等分析工作。

药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。

这些鉴别试验方法虽然具有一定的专属性，但是还不足以用来确证化合物的结构，因而一与分析化学中的定性鉴别有所区别，不能用来鉴别未知物。

因此，《中国药典》（2010年版）凡例中对药品“鉴别”项目的要求是：鉴别项下规定的试验方法，系根据反映该药品某些物理、化学或生物学等特征所进行的药物鉴别试验，不完全代表对该药品化学结构的确证。

本章讲授药物常用的方法和药物的一般鉴别试验，其中以化学鉴别法和仪器鉴别法为重点。

4.1鉴别试验的项目鉴别项下规定的实验方法，仅仅适用于鉴别药物的真伪。

对于原料药，还应该结合“性状”项下的外观和物理常数进行确认。

4.1.1性状（Description)药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数等。

性状观测是药品检验工作的第一步，也是不可省略的极其重要的一步。

只有性状符合规定的供试品，方可继续检查杂质限量和测定含量，否则不必进行检查和含量测定。

1．外观所谓药品的外观，是指药品的外表感官和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。

如《中国药典》（2010年版）对维生素A的描述为“本品为淡黄色溶液或结晶与油的混合物（加热至60℃应为澄清溶液）；无臭；在空气中易氧化，遇光易变质。

”对于维生素AD的描述为“本品或本品内容物为黄色至橙红色的澄清油状液体；无败油臭或苦味”。

初中化学物质的鉴定及鉴别方法物质的鉴定和鉴别是化学实验中非常重要的一环，它们能够帮助我们确定所研究的物质的组成和性质。

在初中化学中，我们通常使用一些简单的方法来进行物质的鉴定和鉴别。

以下是一些常用的方法：1.颜色鉴别法：通过观察物质的颜色可以初步判断其成分。

比如，我们知道氧化铁会呈现红色，氯化铜会呈现蓝色。

2.布洛萨斯试剂：布洛萨斯试剂是一种常用的化学试剂，它可以检测还原性物质的存在。

比如，将布洛萨斯试剂滴加到一个物质上，如果物质变成蓝紫色，则说明该物质可能含有还原性物质。

3.密度鉴别法：不同物质的密度是不同的。

利用密度鉴别法，我们可以测定物质的密度，并将其与已知物质的密度进行对比，从而判断物质的成分。

4.溶解性鉴别法：物质在不同溶剂中的溶解性也是不同的。

通过观察物质在水、酒精等溶剂中的溶解情况，我们可以初步判断物质的性质。

5.燃烧鉴别法：不同物质在燃烧时的现象也是不同的。

比如，有机物燃烧时会产生火焰和烟雾，无机物燃烧时会发出特殊的光和热。

6.pH鉴别法：物质的酸碱性也是鉴别物质的重要指标之一、利用酸碱指示剂或pH试纸，我们可以测试物质的酸碱性，并据此进行鉴别。

7.化学反应鉴别法：利用物质与其他物质之间的化学反应可以鉴别物质的性质。

比如，将物质与酸反应，产生气体的话，可以初步推断物质可能为一种酸。

需要注意的是，以上方法仅仅是一些初步的鉴别手段，在正式的实验中还需要结合更复杂的实验方法和仪器来进行准确鉴别。

另外，对于一些特殊的物质，比如金属离子，我们可以通过火焰颜色的鉴别来确定其种类。

每种金属离子在燃烧时都会有不同的颜色，利用这一特性，我们可以通过观察金属离子在搭配适当试剂（比如硝酸钠）后燃烧的颜色来鉴别物质的成分。

总结起来，物质的鉴定和鉴别方法多种多样，我们可以根据实际需要和实验条件选择合适的鉴定方法，对物质进行准确的鉴定和鉴别。

这些方法不仅可以帮助我们认识和理解物质的组成和性质，还具有推动科学研究和实际应用的重要意义。

化学物质的组成和结构分析方法化学物质的组成和结构分析方法在化学研究和工业生产中起着至关重要的作用。

以下是常用的化学物质分析方法：光谱分析方法红外光谱法红外光谱法是一种常用的化学物质结构分析方法。

这种方法基于反应物分子所吸收的红外光谱图谱，可以确定分子中的化学键类型。

该方法适用于固体、液体和气体中化学结构的分析。

傅里叶变换红外光谱法傅里叶变换红外光谱法是红外光谱法的一种变种。

它通过将原始数据进行傅里叶变换得到更精确的谱线数据，可以用于定量分析和催化剂研究。

核磁共振谱法核磁共振谱法对确定分子中原子的位置和化学键的环境非常有用。

这种方法通过测量样品中核磁共振信号的位置和强度来确定分子结构。

核磁共振谱法适用于固体、液体和气体中分子结构的分析。

质谱分析方法质谱法化学物质的质谱分析法可以分析分子的质量和结构。

这种方法通常使用带有样品的电离器将样品转化为带电离子，然后在质谱仪中测量分子离子的质谱重量比。

这种方法可用于分析固体、液体和气体体系中的化合物。

色谱分析方法高效液相色谱法高效液相色谱法是现代化学分析中常用的分析方法。

这种方法通常使用高压泵将样品从柱中推出，通过检测样品通过柱后的信号来分析样品成分。

高效液相色谱法广泛应用于药物分析、生物分析和环境分析中。

气相色谱法气相色谱法通过分离气相或挥发性有机物的混合物中的化合物以确定其组成。

该方法基于样品与气体载体相互作用的不同程度，不同化合物会在柱中有不同的保留时间，通过检测各成分的时间来分析样品成分，适用于大部分的气相或挥发性有机物化合物的分析。

以上是化学物质的组成和结构分析方法的简要介绍，科学家们可以根据实际需求在进行实验时选择合适的方法。

第四章药物的含量测定方法与验证1、药物的含量：指药物中所含主成分的量，是评价药物质量的重要标准。

2、可供药物含量测定的分析方法：（1）容量分析法①优点：操作简便，结果准确，方法耐用性高。

②缺点：方法缺乏专属性。

③适用：适用于对结果准确度与精密度要求较高的样品的测定。

（2）光谱分析法①优点：简便，快速，灵敏度高，并具有一定的准确度。

②缺点：方法专属性稍差。

③适用：适用于对灵敏度要求较高、样本量较大的分析项目。

（3）色谱分析法①优点：高灵敏度与高专属性，并具有一定的准确度。

②缺点：结果计算需要对照品。

③适用：适用于对方法的专属性与灵敏度要求较高的复杂样品的含量测定。

3、为确保分析结果的可靠性，要求分析方法应准确、稳定、耐用。

4、验证内容包括：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

§4-1 定量分析方法的分类与特点一、容量分析法容量分析法：也称滴定法。

是将已知浓度的滴定液（标准物质溶液）由滴定管滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通过适当方法指示），然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系计算出被测药物的含量。

当滴定液与被测药物完全作用时，反应达到化学计量点。

在进行容量分析时，当反应达到化学计量点时应停止滴定，并准确获取滴定液被消耗的体积。

但在滴定过程中反应体系常常无外观现象的变化，必须借助适当的方法指示化学计量点的到达。

其中，最常用的方法是借助指示剂的颜色或电子设备的电流或电压变化来判断化学计量点。

指示剂的颜色或检测设备的电信号的突变点通常被称为滴定终点。

但滴定终点与滴定反应的化学计量点不一定恰好符合，二者之差被称为滴定误差。

滴定误差是容量分析法中系统误差的重要来源之一，为了减少滴定误差，要选用合适的指示剂或指示方法（如在非水溶液中常见用电位滴定法），使滴定终点尽可能的接近滴定反应的化学计量点。

（一）容量分析法的特点与适用范围1、容量分析法的特点（1）方法简便易行：本法所用仪器廉价易得，操作简便、快速。

有机化合物鉴定实验利用实验鉴定化合物有机化合物鉴定是有机化学中一个重要的实验技术，通过一系列的实验操作和分析测试，确定化合物的结构、性质和组成。

本文将介绍几种常用的有机化合物鉴定实验方法和技术。

一、熔点实验有机化合物的熔点是其非常重要的物理性质，可以作为鉴定化合物的一种手段。

熔点实验的步骤如下：1. 准备干净的熔点管和样品，将样品填入熔点管的开口处。

2. 将熔点管中的样品放置在熔点仪上，逐渐升温直至观察到样品开始熔化的温度。

3. 记录下开始熔化和完全熔化的温度范围，与已知的熔点数据进行对比，可以初步判断样品的纯度。

二、红外光谱分析红外光谱是鉴定有机化合物非常常用的一种分析技术，通过测量有机化合物在红外辐射下的吸收光谱，可以确定化合物的官能团和分子结构。

红外光谱分析的步骤如下：1. 准备有机化合物样品，制备样品薄膜。

2. 将样品薄膜放置在红外光谱仪的样品槽中，选择适当的波数范围进行扫描。

3. 观察样品的红外吸收谱图，根据波峰的位置和强度，判断化合物中存在的官能团和结构。

三、质谱分析质谱分析是通过测量有机化合物分子在质谱仪中产生的离子信号，来确定化合物的分子量和结构。

质谱分析的步骤如下：1. 准备合适的有机化合物样品，将样品溶解在质谱仪可溶解的溶剂中。

2. 将溶解后的样品注入质谱仪，进行质谱扫描。

3. 分析得到的质谱图，观察离子信号的相对强度和质荷比，分析化合物的分子量和可能的分子结构。

四、核磁共振分析核磁共振是鉴定有机化合物结构和确定官能团的重要手段，通过测量核磁共振谱图，可以得到有机化合物分子的结构信息。

核磁共振分析的步骤如下：1. 准备有机化合物样品，溶解在适当的溶剂中。

2. 将溶解后的样品注入核磁共振仪中，选择合适的核磁共振谱图模式，如^1H-NMR或^13C-NMR。

3. 观察核磁共振谱图，分析峰的位置和积分强度，确定化合物的结构和官能团。

总结：有机化合物鉴定实验利用实验鉴定化合物具有重要意义。