稳定与非控制 1gg [兼容模式]
- 格式:pdf
- 大小:693.80 KB
- 文档页数:35
igg抗体作用机制目前临床上使用的治疗抗体均为免疫球蛋白G(IgG)单克隆抗体,具有相同的基本结构(见图1):它们是分子量为150kDa的大型异二聚体蛋白分子,由四条多肽链、两条相同的重链(50kDa)和两条轻链(25kDa)组成)。
重链和轻链通过二硫键连接在一起,形成由恒定区域(CH和CL)和可变区(VH和VL)组成的Y形)。
重链的两个可变区域和CH1结构域组成抗原结合片段(Fab),每个可变结构域都包含互补决定区,这对于目标抗原具有高度的特异性。
重链的CH2和CH3结构域构成抗体的片段可结晶(FC)区域,可以与多种细胞表面受体结合,包括细胞上的FCg受体和新生儿FC受体(FCRn),以及补体系统的成分(即补体C1q)。
IgG分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类。
IgG类抗体药物的作用机制分为直接效应和间接作用两种。
直接效应有抑制型的,是指抗体类药物与肿瘤细胞或其它细胞上的抗原结合,抑制抗原与其受体结合,阻滞生长因子受体/黏附分子功能,或者改变细胞内信号通路,是非Fc 依赖。
如安维汀是VEGF抗体,抑制VEGF与VEGFR结合,从而抑制内皮细胞、单核细胞等细胞的迁移和分化,抑制新生血管和肿瘤生长和进展。
直接效应激动型的是指抗体直接与抗原结合激动抗原的活性,起到激动剂的作用。
间接作用是Fc依赖,包括ADCC效应((抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用)、ADCP效应((指抗体Fab结合细胞表面抗原,Fc结合巨噬细胞FcR,巨噬细胞吞噬肿瘤细胞)、CDC效应(补体作用)。
ADCC是指指抗体Fab结合细胞表面抗原,(Fc结合NK细胞FcR,杀伤靶细胞。
ADCP是指抗体Fab结合细胞表面抗原,Fc结合巨噬细胞FcR,巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。
CDC 是指抗体Fab结合细胞表面抗原,(Fc结合补体,形成膜攻击复合物裂解肿瘤细胞。
IgG1和IgG3具有强的ADCC、ADCP和CDC效应,而IgG2和IgG4则低的ADCC和CDC效应,IgG4具有中等强度的ADCP效应,而IgG2低的ADCP效应,一般根据抗原表达的细胞和抗原引起的效应不同选择不同类型的抗体。
RIG-I样受体介导的信号转导1 简介固有免疫(innate immunity)又称非特异性免疫( nonspecific immunity),是人体抵抗外来生物入侵的第一道防线。
与适应性免疫相比,固有免疫具有作用范围广、反应出现快、参与反应的免疫细胞多、相对稳定性和遗传性等特点。
近年来,固有免疫在分子水平上的识别及调控机制越来越受到关注。
哺乳动物的固有免疫识别及调控主要通过一系列的模式识别受体( pattern recognition receptor,PRR)识别病原微生物上表达的保守的病原体相关分子模式( pathogen associated molecular pattern,PAMP) 来实现,这种形式让机体不但可以发现入侵的病原体,而且能够识别其类型,并通过一系列信号途径活化效应分子,识别自我与非我,激活与调控固有免疫应答,并且相互协同或互相调节以形成调控网络,从而控制并清除病原体,在固有免疫中发挥独特的功能。
根据天然免疫中的病原模式识别受体的结构特点,PRR可以分为Toll样受体(Toll- like receptor,TLR)、RIG-I样受体(RIG-I like receptor,RLR)和NOD样受体[nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptor,NLR]等。
TLR家族属于I型跨膜蛋白,主要分布在细胞膜表面或者吞噬囊泡膜上。
因此它们只能识别细胞外或者经过吞噬进入细胞的PAMP,而对细胞质中的RNA病毒则无法做出反应。
RLR是抗病病毒先天免疫信号通路中重要的病毒受体,可以识别细胞内不同病毒的RNA,包括RIG-I (retinoic acid-induced gene I)、MDA5(melanoma differentiation-associated gene -5)和LGP2(laboratory of genetics and physiology 2)[1, 2]。
仪器使用指南© Copyright 2004,美国应用生物系统公司。
版权所有仅用于研究。
不得用于诊断程序。
本文件内容如有更改,恕不预先通知。
美国应用生物系统公司不承担本文件中任何错误的相关责任。
本文件在发表时被认为是完整的、准确的。
在任何情况下,美国应用生物系统公司均不得承担使用本文件相关的或引起的任何偶发的、特殊的、多重的或由其产生的损害。
购买须知:本仪器授权用于DNA序列分析和片段分析。
本授权协议包括在本仪器的购买价格中,相当于如下过程要求证书的前期费用部分:美国专利5,821,058和5,332,666要求的过程;目前和以后的专利美国专利,即美国应用生物系统公司拥有的或授权的、应要求授权协议的美国专利,其DNA序列分析和片段分析要求的所有过程;以及前述要求协议的国外副本的相应过程。
证书的特许运行组分可从美国应用生物系统公司购得,或使用购自授权供应商的授权试剂、按照这种试剂的标签权限而制备得到。
购买本仪器并不等同购买了上述过程的完整的、全部的证书或权利。
本仪器也经美国专利5,171,534许可,以及相应的国外副本仪器和系统要求的许可。
美国应用生物系统公司没有暗示同意任何权利,也没有在偿付要求下同意权利人有异议之权,也没有在所有的或授权的其它过程或系统要求下同意权利人有异议之权。
关于证书的详细情况,请联系美国应用生物系统公司授权主管:850 Lincoln Centre, Drive, Foster City,加州94404,美国。
购买须知:本美国应用生物系统公司3130/3130xl型基因分析仪的购买价格包括:美国专利5,567,292下一项有限的、不可转让的许可证,及其国外副本方法要求;美国专利6,358,385下一项有限的、不可转让的许可证,及其国外副本的元件要求。
应用荧光作为探测方法,本特定仪器用于电泳法。
此外没有暗示允许任何许可或权利,也没有同意权利人有异议之许可或权利,包括但不限于任何偿付要求。
Abbkine, Inc • Redlands, CA • USA •Not for further distribution without written consent. Copyright © Abbkine, Inc. IPKine® HRP, Goat Anti-Mouse IgG LCS# A25012Product InformationProduct Name: IPKine® HRP Conjugated Goat Anti-Mouse IgG Light Chain SpecificCatalog Number: A25012 Lot Number: Refer to vial Formulation: Liquid Size: 100ul/500ulStorage: Store at -20°C. Avoid repeated freeze / thaw cycles.Note: NoneBackground: 50kD or 25kD protein detection on Western blots after Immunoprecipitation is often suffered from heavy or light chain blotting contamination. Abbkine's IPKine® products solve these problems through less background noise, and enhanced accuracy. The light chain/Fc fragment specific optimization eliminates heavy/light chain interference, while serum proteins absorbed minimizes cross-reactivity with immunoglobulins from other species which may be present on blots. Abbkine's secondary antibodies are available conjugated to enzyme, biotin or fluorophore for use in a variety of antibody-based applications including Western Blot, ImmunoHistoChemistry, ImmunoFluorescence, Flow Cytometry and ELISA. We offer high quality secondary antibodies from goat, rabbit and donkey sources for your each application.Purity: Affinity purified using solid phase Mouse IgG(H+L) light chain with finally > 95% purity based on SDS-PAGE.Specificity: The antibody reacts with kappa light chains on mouse IgG, while it doesn’t react with the heavy chain of mouse IgG. It's cross-reaction with human, rabbit, rat, goat, sheep and bovine serum proteins has been specialized minimized, while it may cross-react with immunoglobulins from other species. It has no reactivity on non-immunoglobulin serum proteins.Application Notes: Optimal working dilutions should be determined experimentally by the investigator. Suggested starting dilutions are as follows: WB (1:10,000-1:100,000), IHC (1:500-1:5,000) and ELISA (1:5,000-1:100,000).Storage Buffer: 0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, 50% Glycerol pH 7.4.Stabilizer: 1% Bovine Serum Albumin (IgG and Protease Free).Preservative: No preservative added.Storage Instructions: Stable for one year at -20°C from date of shipment. For maximum recovery of product, centrifuge the original vial after thawing and prior to removing the cap. Aliquot to avoid repeated freezing and thawing.Note: The product listed herein is for research use only and is not intended for use in human or clinical diagnosis. Suggested applications of our products are not recommendations to use our products in violation of any patent or as a license. We cannot be responsible for patent infringements or other violations that may occur with the use of this product.。
igg四种亚型的区别
IGG是人体免疫系统中的一种免疫球蛋白,分为四种亚型:IGG1、IGG2、IGG3和IGG4。
这四种亚型在结构、功能和表
达方式上有一些差异,下面是它们之间的主要区别:
1. 结构差异:IGG1、IGG2、IGG3和IGG4在氨基酸序列上有
一定的差异,导致它们的结构略有不同。
IGG1和IGG3有更
长的重链和重链糖基化,而IGG4则具有较短的重链。
2. 功能差异:IGG1是最重要的抗体亚型,具有广泛的免疫调
节功能,可以激活补体系统、介导细胞毒性和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性。
IGG3也具有类似的功能,但抗体活性会更强。
IGG2和IGG4的功能主要是通过抗体依赖性细胞介导的
细胞毒性来表达。
3. 免疫应答:IGG1和IGG3是典型的免疫应答亚型,主要在
初次感染后产生,其产生主要受到细胞介导的免疫应答的调节。
IGG2和IGG4则是辅助免疫应答亚型,在体内主要通过抗原
再激活和免疫记忆来产生。
4. 发炎反应:IGG1、IGG2和IGG3在发炎反应中起到重要的
作用,包括激活补体、吞噬细胞作用和中和致病微生物。
IGG4则被认为是一种非发炎性抗体,其主要功能是通过阻断
其他亚型的功能来抑制过度炎症反应。
[化学发光]美国Beckman公司UniCel DxI800免疫分析仪迎接PG级超微量检测时代的来临免疫定量分析的发展历程1960年代以前人工免疫检测阶段1960-70年代非标记免疫发展阶段放射标记免疫发展阶段1970-80年代免疫分析新项目不断产生临床应用领域迅速拓展荧光免疫发展阶段1980-90年代免疫检测逐渐常规化检测原理发展阶段化学发光,电化学发光1990-2000年标记免疫检测原理日臻成熟优化系统均衡,清洗分离手技术的发展2000-2003年免疫自动化发展阶段;进一步吸收大生化检测的自动化技术成就,采用系统叠加的方式以寻求更快的检测速度免疫分析技术的自动化智能化发展,是临检领域继生化全自动分析时期的又一个标志性的重要阶段。
其推动力源自一些大型实验室在免疫检测应用方面的进一步拓展和规模化,对免疫分析系统的检测速度、自动化和智能化性能提出了更高的要求。
智能化方面提高了系统流程管理的智能化程度,将系统的自动化性能推进到了一个新的智能化阶段,并进一步强化了全方位的系统监控功能,保证了自动化的可控性。
自动化方面进一步完善系统的自动化性能,加强系统的简便性、灵活性和前赡性,例如多种的进样方式、尽可能简洁的日常保养程序等,并提高了与轨道自动化的顺应性。
系统化方面改变了原有检测仪器将系统进行简单并连组合以提高检测速度的做法,在继承原有分系统的独立性优点的基础上,采用同一套分析和探测系统,保证系统的整体性和结果的统一性。
UniCel TM DxI 800 展现自动化非凡成就引领智能免疫时代DxI 800智能化整系统运行,突破分系统简单组合的传统方式,采用分立一体化整系统的专利设计分立的4个进样通道1.加快进样速度,减少样品的机上滞留时间;2.任何一个进样通道出现故障,不影响其他通道的进样操作,提供了整系统操作的灵活性;3.根据需要可以任意指定某个通道用于特定检测的进样,以保证整系统的流程优化;4.可以独立的对任何一个进样通道进行配件更换或维修。
干扰消除蛋白Interference-Eliminating Proteins, IEPs简介非特异性干扰特异性干扰:人抗小鼠抗体(HAMAs)HAMA血清实验对比数据各种IEP组合在多种检测中的应用非特异性IEPs参数特异性IEPs参数参考文献与专利4 5 6 8 9 13 14 16 18目 录34干扰消除干扰消除是免疫检测试剂盒研发中的一项重要任务:检测系统的灵敏度增加,更高的精密度和最方便的操作均需要高效的干扰消除。
同时,为保证质量还会有其他更严格的要求。
罗氏公司提供的干扰消除产品能够完美地满足这一需求。
步骤1用于去除非特异性干扰。
非特异性干扰是产生高背景信号的主要原因,同时也是其它或多或少不确定的干扰来源。
步骤2用于消除特异性HAMA干扰,该干扰可引起显著的假阳性或假阴性信号。
非特异性干扰是指固相和检测成分之间所有多余的结合。
特异性干扰则是指针对于标记酶,检测抗体之间的干扰(HAMA干扰)1)。
另一个重要概念是单价和多价干扰之间的区别。
根据具体的检测形式,基本型的单价IEP(干扰消除蛋白)便足够以消扰干扰的效应。
但是如果出现多价干扰的影响,干扰的消除则变得更为复杂,并需要多价的干扰消除产品。
步骤1:消除非特异性干扰使用单体试剂使用多聚体试剂步骤2:消除特异性干扰(HAMAs)——按检测类别分类从基本型的IEP(a)开始,然后根据实际情况可选用(b),进而选用(c)。
MAK33 IgG1MAK33 IgG1/IgG1 Poly MAK33 Framework MAK33 IgG1MAK33 IgG1/Fab1 Poly MAK33 Framework MAK IgG2a/2b Polyabc 检测形式:IgG1/IgG1IgG1/Fab1IgG2a/IgG2b5非特异性干扰罗氏提供的干扰消除方案适用于几乎全部的常见干扰类型。
步骤1:满足消除非特异性干扰引起的背景问题的需要步骤2:对于人抗小鼠抗体干扰,可针对不同的检测种类提供高度特异的个性化解决方案消除检测干扰的第1步是除去所有非特异性的干扰。