实验 微生物接种技术

微生物的接种技术1 目的1.1学习掌握微生物的几种接种技术1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节2 实验说明将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。

接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。

无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。

接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。

3 实验器材3.1 器械和用品酒精灯，玻璃铅笔，火柴，试管架、接种环、接种针、接种钩、滴管、移液管、三角型接种棒等接种工具。

3.2 菌种和培养基菌种：大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。

培养基：普通琼脂斜面和平板,营养肉汤,普通琼脂高层(直立柱)。

4 实验流程斜面接种法→液体接种法→固体接种法→穿刺接种法。

5 操作步骤5.1 斜面接种法斜面接种法主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种。

通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，肉汤中的纯培养物接种到斜面培养基上。

操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行，先点燃酒精灯。

将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在前，接种管在后，斜面向上管口对齐，应斜持试管呈45～0度角，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。

以右手在火焰旁转动两管棉塞，使其松动，以便接种时易于取出。

右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。

镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍，尤其是接镍铬丝的螺口部分，要彻底灼烧以免灭菌不彻底。

用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。

实验三微生物接种技术一、实验目的1、掌握无菌操作在微生物接种过程中的重要性。

2、掌握几种常用的微生物接种方法。

3、掌握微生物微生物扩大繁殖的基本方法。

4、认识微生物接种工具二、实验原理微生物接种技术是生物科学研究中最基本的操作技术。

由于实验目的、培养基种类及容器等不同，所用接种方法不同，如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等，以获得生长良好的纯种微生物。

为此，接种必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的无菌操作；同时，因接种方法的不同，常采用不同的接种工具，如接种针、接种环、移液管和玻璃刮铲等。

三、实验器材主要仪器及设备无菌室、超净工作台、培养箱、振荡器、接种针、接种环、接种钩、接种铲，试管固体斜面培养基、培养基平板、三角瓶液体培养基，PDA平板及斜面，牛肉膏-蛋白胨-琼脂平板、斜面培养基、牛肉膏-蛋白胨液体培养基、试管半固体培养基。

菌种大肠杆菌（Escherichia coli)、青霉(Penicillium sp．)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)、细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)放线菌等。

四、操作步骤(一)斜面接种技术具体操作如下：1、贴标签接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等。

贴在距试管口径2-3厘米的位置。

2、点燃酒精灯。

3、接种用接种环将菌种移接到贴好标签的试管斜面上。

无菌操作程序简述如下：⑴手持试管将菌种和用于接种的斜面两支试管用大拇指和其他四指握在左手中、使中指位于两试管之间。

斜面向上，并使它们位于水平位置(图a)。

⑵旋松棉塞先用右手将棉塞旋松，以便接种时易于拔出。

⑶取接种环右手拿接种环在火焰将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管的其余部分，均用火烧过灭菌。

⑷拔棉塞用右手的无名指、小指和手掌边先后拔出试管的棉塞，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧得过烫)，如图b、c所示。

⑸环冷却将灼烧过的接种环伸入菌种管，先使环接触没有长菌的培养基部分，使其冷却。

第1篇一、实验背景细菌接种实验是微生物学实验中的重要内容，通过对细菌进行分离、纯化和接种，我们可以研究细菌的生长、代谢、形态和生理特性。

本实验旨在通过学习细菌接种技术，掌握无菌操作的基本原则，了解细菌在不同培养基上的生长情况，为后续的微生物学研究打下基础。

二、实验目的1. 掌握无菌操作的基本原则，建立无菌观念。

2. 熟悉细菌的接种、分离培养方法和接种环的制作方法。

3. 观察细菌在不同培养基上的生长情况，了解细菌的生理特性。

4. 分析实验结果，提高实验技能。

三、实验方法1. 准备培养基：本实验选用三种培养基，分别为琼脂培养基、含有抗生素的琼脂培养基和富含糖分的琼脂培养基。

2. 细菌接种：采用平板划线分离法、斜面接种法、液体培养基接种法和穿刺接种法进行细菌接种。

3. 观察与记录：观察细菌在不同培养基上的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。

四、实验结果与分析1. 平板划线分离法：通过连续划线接种，将混合菌分离成单菌落。

观察发现，菌落形态、颜色、大小等特征各异，表明分离效果良好。

2. 斜面接种法：用接种环取单个菌落，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后从底部向上作连续曲线划线。

观察到菌落生长均匀，斜面顶端菌落较密集。

3. 液体培养基接种法：用接种环取菌少许，在试管内壁与液面交接处的管壁上轻轻研磨，使细菌混合于培养液中。

观察到菌液均匀，无沉淀物。

4. 穿刺接种法：用接种针取细菌少许，从半固体培养基中央，平行于管壁垂直刺入，接近管底但不可接触管底，然后接种针沿原路退出。

观察到菌落生长良好，无细菌扩散。

五、实验总结1. 本实验成功掌握了无菌操作的基本原则，确保了实验结果的准确性。

2. 通过学习细菌接种技术，了解了不同接种方法的特点和适用范围。

3. 观察了细菌在不同培养基上的生长情况，为后续的微生物学研究提供了基础数据。

4. 在实验过程中，发现了实验操作中的不足，如接种环消毒不彻底、培养基制备不规范等，为今后的实验提供了改进方向。

微生物常用的接种方法首先，最常见的接种方法之一是平板接种。

平板接种是将微生物接种在富有营养物质的平板培养基表面上，通过均匀涂抹的方式使微生物均匀分布在培养基表面。

这种方法适用于对微生物营养需求较高的情况，可以有效地促进微生物的生长和繁殖。

在进行平板接种时，需要注意使用无菌技术，避免外界的污染对实验结果的影响。

其次，液体接种是另一种常用的接种方法。

液体接种适用于对微生物生长环境有一定要求的情况，可以提供更加精确的实验条件。

在液体接种时，需要将微生物接种在含有适当营养物质的培养基中，通过摇床或培养箱等设备进行培养。

这种方法可以更好地模拟微生物在自然环境中的生长状态，对于一些特殊微生物的研究具有重要意义。

另外，还有一种常用的接种方法是斜面接种。

斜面接种是将微生物接种在培养基斜面上，通过均匀涂抹的方式使微生物均匀分布在斜面上。

这种方法适用于对微生物的形态和生长特性有一定要求的情况，可以更好地观察微生物的生长情况和形态特征。

在进行斜面接种时，需要注意斜面的倾斜角度和培养基的均匀涂抹，以保证实验的准确性和可靠性。

除了上述常见的接种方法外，还有一些其他特殊的接种方法，如深层接种、滴定接种等，它们适用于特定的研究需要，可以根据实验的具体要求进行选择和应用。

总的来说，微生物常用的接种方法包括平板接种、液体接种、斜面接种等多种形式，科研工作者可以根据实验的具体要求选择合适的接种方法。

在进行接种时，需要注意使用无菌技术，避免外界的污染对实验结果的影响。

通过合理选择和应用接种方法，可以更好地促进微生物的研究和实验，为微生物学领域的发展做出更大的贡献。

微生物纯种分离,培养及接种技术实验原理微生物纯种分离、培养及接种技术是微生物学中最基本的实验技术之一。

其目的是从混合的微生物菌群中分离出单一的微生物菌落，并在适宜的培养条件下进行纯化和生长，以获得纯种微生物。

一、实验器材和试剂1.灭菌针2.毛细胞计数板3.显微镜4.平板接种器、针头5.无菌匀浆棒、吸管6.细菌培养基7.消毒液二、实验步骤1. 样品处理及制备首先需要选择一份待测试的样品，包括土样、水样、空气、食品等，然后将样品采集到无菌容器中，再将其送到实验室。

在进行样品处理之前，需要先进行简单的初步处理，将样品进行稀释或者过滤，将其中的杂质和大颗粒物去除，以利于后续实验的操作。

接下来需要进行制备培养基，根据不同的微生物种类，需要选择适当的培养基进行培养。

通常情况下，我们可以使用凝胶培养基、液体培养基、甜菜汁培养基等，以满足微生物在不同环境下生长所需的营养物和成分。

2.分离纯化分离纯化是该实验的关键步骤。

将经过预处理的样品移到无菌试管中，打开试管口，加入适量的制备好的培养基，然后利用匀浆棒或吸管将混合物均匀混合。

然后利用平板接种器将混合物接种到培养基平板上，使其密切接触。

然后将接种好的平板置于恒温箱中，以利于微生物的生长和营养物质的自我繁殖。

在接种后2-7天内，不同类型的微生物将在培养基平板上生长出不同的菌落，每一种菌落都代表一种单一的微生物。

将这些菌落分离提取，并再次进行培养，就能得到单纯的微生物菌种。

3.纯种微生物菌种接种在获得单纯的微生物菌种之后，需要将其再次接种到培养基中进行培育。

将相应体积的纯种菌种接种到培养基平板上，使其能够生长繁殖。

在接种后约24小时内，微生物将在培养基中生长出许多菌落。

根据菌落的特征和形态，可以对不同的微生物进行鉴定和分类。

如果需要进行更加深入的分析，可以对微生物菌种进行进一步培养、萃取定量和测序等工作，以获取更多的相关信息。

三、实验注意事项1. 实验前需要保证实验室内部环境和仪器均为无菌状态。

微生物学实验中接种技术接种技术是微生物学试验中最常用的基本操作技术，接种就是利用接种工具在无菌条件下将培养物往新的培养基上移植。

(一)接种工具常用的接种工具有接种针、接种环、接种铲、涂布棒等。

接种细菌或酵母菌用接种环或接种针，接种环(或接种针)有一次性的塑料材质的，已灭菌可挺直用法，也有铂金或镍铬合金的。

假如用法金属材质的，用法前后均应在火焰上彻底灼烧灭菌，灭菌时右手持接种环(或接种针)的木柄或塑料柄，将金属部分竖立于火焰中，慢慢下移使金属环(或接种针)烧红，并将接种环(或接种针)和柄之间的金属棒也通过火焰数次。

取菌时，必需待接种环(或接种针)冷却后方可用法。

接种某些不易和培养基分别的放线菌和真菌时，有时用接种钩或接种铲。

用涂布法在琼脂平板上分别单个菌落时需用涂布棒。

常用的接种工具见图4-1。

图4-1 常用的接种工具a.接种针b.接种环c.接种钩d.接种护e.移液管f.滴管g.涂布棒h.微量取液器 (二)常用的接种办法按照目的不同，可分离采纳接种环、接种针、移液管等举行斜面培养基接种、液体培养基接种和半固体培养基穿刺接种等。

1.斜面培养基接种将微生物从一个斜面培养基接种至另一个斜面培养基上的办法，称为斜面培养基接种。

斜面培养基接种主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种，操作办法如下： (1)左手持菌种管与培养基管，斜面皆向上，菌种管在外侧，右手用拿毛笔的姿态持接种环，将铂丝与欲进入试管的柄部通过火焰灭菌。

(2)右手的小指与掌心夹下培养基管的棉塞，第四指与小指夹下菌种管棉塞，管口通过火焰。

(3)接种环伸入菌种管，蘸取少许菌种。

(4)接种环伸入培养基管，在斜面上蜿蜓划线，或者划直线。

注重沾有菌种的接种环不行碰管口与其他地方。

(5)管口再通过火焰，并将棉塞塞于本来的试管。

(6)接种环灭菌。

2.液体培养基接种液体培养基接种基本上与斜面培养基接种法相同，不同之处是，将挑取的菌种移种至液体培养基管中时，斜持试管，将菌涂于液面处管壁上，试管竖立以后菌种即在液体内。