2016版高考生物二轮复习 专题能力提升练 十七 1.16微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用 Word版含答案

高考生物二轮专项检测试题（36）微生物的培养技术及应用一、选择题1．下列有关微生物营养物质的叙述，正确的是()A．是碳源的物质不可能同时是氮源B．微生物的培养都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可C．蛋白胨来源于植物，营养全面D．液体培养基有利于营养物质的吸收，可用于微生物的扩增培养解析：选D是碳源的物质同时也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误；并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源，自养的微生物不需要碳源，固氮微生物不需要氮源，B错误；蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，C错误；液体培养基中不加任何凝固剂，这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，利于微生物扩增培养，D正确。

2．下列有关制备培养基和倒平板的具体描述，正确的是()①待培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①③④⑤B．④⑤⑥C．①②④⑥D．③⑤解析：选D待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；不能将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；倒平板时培养皿只需要打开一条稍大于瓶口的缝隙，④错误；右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，⑤正确；等待平板冷却5～10 min，待培养基冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。

3．在微生物培养和现代生物学实验中的许多方面都要进行无菌操作，防止杂菌污染。

下列操作错误的是()①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行湿热灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①③B．②④C．③⑤D．④⑥解析：选D无菌操作包括消毒和灭菌。

选修一生物技术实践基础课时案39 微生物的培养和利用题组一全国课标卷高考集锦1．(2014·全国课标Ⅰ，39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。

回答下列问题。

(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。

(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成________色复合物。

用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。

(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____________________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________________。

答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌2.(2014·课标Ⅱ，39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。

回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。

在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。

据此可得出每升水样中的活菌数为________________。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过________灭菌。

在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。

跟踪强化训练(二十一)一、选择题1．(2016·江苏卷)下列关于中学“腐乳的制作”实验，叙述正确的是( )A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B．加料酒主要是为了灭菌，避免腐败变质C．发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌D．实验室制作的腐乳不宜直接食用[解析]加盐的目的是析出豆腐块中的水分，使豆腐块变硬，同时盐也能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

由于盐分较高，此阶段包括毛霉在内的各种微生物的生长受到严重抑制，A错误。

加料酒可抑制杂菌生长，避免腐乳变质，同时也与腐乳独特的香味形成有关，B错误。

在腐乳发酵过程中起主要作用的是毛霉，而不是乳酸杆菌，C错误。

在实验室中制作腐乳，其卫生条件达不到食用标准，D正确。

[答案] D2．(2016·四川卷)下列有关实验操作或方法所导致结果的描述，不正确的是( ) A．用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗可能会导致色素带出现重叠B．用葡萄制作果醋时，若先通入空气再密封发酵可以增加醋酸含量提高品质C．提取胡萝卜素时，若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低D．调查人群中色盲发病率时，若只在患者家系中调查将会导致所得结果偏高[解析]用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗，则色素分离的起点不同步，可能会导致色素带出现重叠，A正确；醋酸菌属于需氧型微生物，通入空气后密封会导致醋酸菌死亡，不能产生醋酸，B错误；胡萝卜素在酒精中的溶解度低于石油醚，故用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低，C正确；调查人群中色盲发病率应在人群中调查，若在患者家系中调查将会导致所得结果偏高，D正确。

[答案] B3．(2017·江苏卷)下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是( )A．控制发酵温度的主要目的是腐乳调味B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D．成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生[解析]控制发酵温度的主要目的是使毛霉等微生物能更好地生存、繁殖，并通过自身代谢来制作腐乳，A项错误；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和调味的作用，B项正确；毛霉的主要作用是分解脂肪和蛋白质，C项错误；成品腐乳表面的粘性物质主要由毛霉产生，毛霉属于真菌，D项错误。

【2016年高考考纲解读】1.微生物的利用：(1)微生物的分离和培养。

(2)某种微生物数量的测定。

(3)培养基对微生物的选择作用。

(4)利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。

2.生物技术在食品加工及其他方面的应用：(1)从生物材料中提取某些特定的成分。

(2)运用发酵加工食品的基本方法。

(3)测定食品加工中可能产生的有害物质。

【重点、难点剖析】一、微生物的培养与应用1．汇总微生物的基本技术(1)制备培养基：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。

(2)无菌技术：主要指消毒和灭菌。

(3)倒平板操作：待培养基冷却至50_℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板。

(4)平板划线操作：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。

如图：2．完善下面某种微生物的分离与计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。

②测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数。

③过程：土壤取样―→样品的稀释―→微生物的培养与观察。

(2)分解纤维素的微生物的分离①实验原理即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

②流程：土壤取样―→选择培养―→梯度稀释―→涂布平板―→挑选菌落。

(3)鉴定方法【误区归纳】1．自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。

②含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。

2．平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同①第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。

专题8 生物技术实践第1讲微生物的利用及生物技术在食品加工中的应用1．下列关于微生物培养和利用的叙述，不正确的是( )A．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少答案 A解析用稀释涂布平板法可以分离微生物，也可以对微生物进行计数；接种划线可以将菌体分散，经过培养可以得到单菌落；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌；在泡菜腌制过程中，开始时亚硝酸盐含量增加，一般腌制10天后含量开始下降。

2．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是( )A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C．变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同的发酵条件答案 A解析果酒发酵利用的是酵母菌，酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，果醋发酵利用的是醋酸菌，醋酸菌的代谢类型是异养需氧型。

3．下列关于腐乳制作过程中后期发酵的叙述，不正确的是( )A．后期发酵中腐乳风味形成与蛋白质的降解密切相关B．后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程C．盐的用量、酒的种类和用量、温度等均影响后期发酵D．前期发酵过程中毛霉的生长情况对后期发酵无直接影响答案 D解析腐乳制作过程中，前期发酵主要是毛霉生长，毛霉分泌蛋白酶、脂肪酶等多种酶，与腌制腐乳的调料中的微生物协同作用，使腐乳坯中的蛋白质和脂肪缓慢水解，生成小分子的肽、氨基酸和甘油、脂肪酸等，形成鲜、香等特有的风味。

4．如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

(1)________。

(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是______，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。

专题能力提升练十八生物技术在其他方面的应用(45分钟·100分)1.(10分)(2015·厦门二模)下面是月季花药培养产生花粉植株的两种途径，请回答：途径1：花药中的花粉①丛芽生根移栽途径2：花药中的花粉愈伤组织丛芽生根移栽(1)途径1中的①为，经途径2形成的花粉植株常常会发生变化，因此还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。

(2)选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。

某品种月季的花粉细胞核不易着色，操作时应先在中处理20 min，取出放在载玻片上，加溶液染色，盖上盖玻片后在普通光学显微镜下检查。

剥离花药接种时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生。

(3)实验中发现愈伤组织被真菌污染，实验人员做了探究培养基灭菌时间与污染率关系的实验，结果如下图所示。

据图可初步判断：随培养基灭菌时间的延长，。

可见，污染(填“是”或“不是”)由培养基灭菌时间造成的。

【解析】(1)①是胚状体，途径2形成的花粉植株染色体组的数目常会发生变化，因此需要对培养出来的植株进一步鉴定和筛选。

(2)对不易染色的花药进行镜检时，应先将其在卡诺氏(固定)液中固定，再用焙花青—铬矾溶液染色。

(3)由实验结果可知，随培养基灭菌时间的延长，污染率在一定范围内波动，说明培养基灭菌时间对污染率影响不大。

答案：(1)胚状体染色体组的数目(染色体数)(2)卡诺氏(固定)液焙花青—铬矾愈伤组织(3)污染率在一定范围内波动(污染率变化不大) 不是2.(15分)(2015·贵阳二模)运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。

(1)自古酒就与人类生活息息相关。

在图甲所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是装置，发酵是否成功可用对发酵产物进行检验确认。

(2)图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图。

点加提取样品的是点，点加标准样品的是点，该鉴定实验的方法叫做。

专题2 微生物的培养与应用一、选择题1．(2017·江西吉安期末)下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )A．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少2．有关稀释涂布平板法的叙述错误的是( )A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后选取不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度D．结果都是在培养基表面由单个细胞形成单个的菌落3．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂糖④不加琼脂糖⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦4．下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是( )A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源二、非选择题5．在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。

(2)分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、Mg－SO4·7H2O、KCl、H2O。

若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述________成分，并加入________________，以补充________源。

(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。

在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确。

素能演练提升(十六)（内容：实验设计与探究满分:100分时间:45分钟)一、选择题（每小题4分,共60分)1.下列实验方法都能达到物质分离目的的是（)①纸层析法②同位素标记法③染色法④离心法A。

①② B.②③C。

②④D。

①④解析:纸层析法是根据物质在层析液中溶解度不同而扩散速度不同,从而达到分离目的。

离心法是根据样品中各成分的密度不同进行分离。

同位素标记法是用同位素追踪物质的运行和变化规律。

染色是将不同物质染成不同的颜色,进行物质的鉴定.答案：D2。

对于一个封闭的水族箱生态系统,下列说法正确的是( ）A.应尽量增加水族箱中生物的种类和数量,以提高该生态系统的抵抗力稳定性B。

水族箱应放在每天都能照射到强光的地方,保证能量源源不断地输入生态系统C.水族箱生物群落起初比较简单,演替必定使其变得越来越复杂D。

这种生态系统的抵抗力稳定性较低，存在的时间可能很短暂解析:水族箱生态系统是小型人工生态系统，由于空间等资源有限,水族箱中投放的生物种类和数量不宜过多。

由于该生态系统对温度的调节能力较弱,因此水族箱不能放在强光下,以免水温迅速升高,影响生物的生命活动。

由于水族箱中的生物繁殖能力、食物、空间等受到了限制，生物种类相对较少,营养结构简单,生态系统自我调节能力弱,因此生物群落演替的结果是生物种类减少,最终使生态系统遭到破坏，故该生态系统的抵抗力稳定性较低,存在的时间短暂。

答案:D3.某生物小组为测定适合杨树枝条扦插的最适NAA（α—萘乙酸）浓度,设计了下列实验步骤：①配制相对浓度依次为2,2.5,3,3.5,4，4.5,5，5.5，6的NAA溶液9份,并编号为1～9。

②将杨树枝条随机均分为9份,并将枝条的基部分别浸泡在1～9号NAA溶液中。

③一天后，取出枝条分别进行扦插。

④十天后,对扦插枝条的生根情况进行统计并记录。

下列选项中,依次属于该实验单一变量和无关变量的是（）A。

枝条的生根数量；枝条的长度、生长状况等B。

2016年高三二轮复习讲练测之讲案【新课标版生物】专题16 生物技术实践考向01 微生物的利用1.讲高考（1）考纲要求简述微生物培养、选择及应用。

（2）命题规律预计2016年高考命题会结合相关实例考查微生物的培养及利用。

（3）高考试题展示1.【2015江苏卷】做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是（ ） A. 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D. 用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上【答案】D【考点定位】微生物的分离与培养的实验操作。

2．【2015新课标Ⅰ卷】已知微生物A 可以产生油脂，微生物B 可以产生脂肪酶。

脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。

回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A 菌体中的油脂通常可用于 染色。

微生物A 产生的油脂不易挥发，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B 的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B 的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，℃条件下该酶活力最小。

为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕℃设计后续实验。

【答案】（1）苏丹III（或者苏丹IV）萃取法（2）油脂（3）血细胞计数板稀释涂布平板（4）45 40【考点定位】本题考查了油脂的提取和鉴定、微生物的分离、菌体计数、及温度对酶活性的影响等知识点。

2.讲基础1.有关微生物实验的基本方法(1)制备培养基：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

高考大题集训练(四)生态环境大题集训练，练就慧眼和规范，占领高考制胜点！45分钟，100分。

1.(12分)下图甲为某小型湖泊中的食物网示意图，图乙表示不同体长露斯塔野鲮鱼的食性相对值，请据图分析回答：(1)在生态学中，该湖泊中所有生物称为。

露斯塔野鲮鱼与罗氏沼虾的种间关系是。

(2)某研究小组欲用标志重捕法调查露斯塔野鲮鱼的种群密度时，由于被标记个体更易被发现而被捕食，则会导致种群密度估算结果(填“偏高”“偏低”或“不变”)。

(3)富含磷元素的生活用水的大量流入会导致水华，说明生态系统的自我调节能力是。

实践中可以投放露斯塔野鲮鱼控制藻类的数量。

投放的露斯塔野鲮鱼体长应，其原因是。

(4)若体长为4.2 cm的露斯塔野鲮鱼增重4 kg，至少需要消耗藻类kg。

【解析】(1)湖泊中所有生物称为群落，由食物网可知，露斯塔野鲮鱼捕食罗氏沼虾，二者为捕食关系，露斯塔野鲮鱼与罗氏沼虾共同捕食藻类，为竞争关系。

(2)由于被标记个体更易被发现而被捕食，因此重捕个体中有标记的个体偏低，根据标志重捕法计算公式可知，种群密度的估算值偏高。

(3)水华的出现说明生态系统的自我调节能力是有限的。

要控制藻类的数量，投放的露斯塔野鲮鱼应主要以植物为食，因此应投放体长大于或等于4.2 cm的露斯塔野鲮鱼。

(4)体长为4.2 cm的露斯塔野鲮鱼肉食性比例为25%，植食性比例为75%，则露斯塔野鲮鱼增重4 kg体重，其中1 kg来自罗氏沼虾，3 kg 来自藻类，根据能量传递效率，要消耗藻类最少，能量传递效率应按20%计算，则最少消耗的藻类重量=1÷20%÷20%+3÷20%=40 kg。

答案：(1)群落竞争和捕食(2)偏高(3)有限的大于或等于4.2 cm体长大于或等于4.2 cm的露斯塔野鲮鱼植食性比例高，消耗的藻类多(4)402.(12分)下图是我国南方某地桑基鱼塘示意图，甲、乙、丙、丁、戊分别表示5种不同的鱼在池塘中的分布，回答下列问题：(1)该池塘中的全部甲种鱼构成。

专题能力提高练十七微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用(45 分钟· 100 分)1.(14分)(2015·郑州二模)牛奶是微生物生长的优秀培育基。

生鲜牛奶中的微生物状况反应了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和储藏。

牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。

为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化状况。

做以下图操作。

用无菌吸管从锥形瓶中汲取 1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL 无菌水的试管中，混淆均匀，这样再重复 2 次。

请回答以下有关问题。

(1)巴氏消毒法是，使用这类方法对生鲜牛奶进行消毒的利处是。

(2)取最后的牛奶稀释液0.1 mL 滴在培育基长进行涂布。

应选择的涂布工具是以下图中的。

(3)图中所示方法为稀释涂布平板法，理想状况下，培育一段时间后可在培育基表面形成菌落。

若用该方法培育设置了 3 个培育皿，菌落数分别为35、33、34，则能够推断每毫升生牛奶中含细菌数为个，运用这类方法统计的结果常常较实质值( 填“偏大”或“偏小”) ，原由是。

(4)消毒后的牛奶中绝大多数细菌被杀死，若持续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数目，则在操作步骤上应做什么变动？。

【分析】 (1) 巴氏消毒法是70～ 75℃煮 30 min 或 80℃煮 15 min 。

既能够杀死牛奶中的微生物，而且牛奶的营养成分不被损坏。

(2) 稀释涂布平板法接种用的工具是涂布器，即图中 B 所示。

(3)3 个培育皿上的菌落数均匀值为34，稀释倍数是104，依据公式可得，每毫升生牛奶中含细菌数为：34÷0.1 × 104=3.4 × 106。

因为当两个或多个细胞连在一同时，平板上察看到的不过一个菌落，所以该方法统计的菌落数常常比实质数目低。

(4)消毒后的牛奶中绝大多数细菌被杀死，所以减少稀释次数也能够获取切共计数要求的平板。

答案： (1)70 ～ 75℃煮 30 min( 或 80℃煮 15 min)牛奶的营养成分不被损坏(2)B(3)3.4× 106偏小当两个或多个细胞连在一同时，平板上察看到的不过一个菌落( 个别菌落可能是由2个或多个细菌形成)(4)稀释次数减少【规律技法】微生物计数偏差剖析(1)显微计数法：实验值比实质值偏高。

必考点31　微生物的利用与传统发酵技术的应用依纲排查1.微生物的利用(1)常用的微生物的分离与测定方法有哪些？(2)培养基的种类及配制的一般流程是什么？(3)微生物筛选的基本原理是什么？计数的常用方法有哪些？1．理清微生物培养的“5”种基本技术(1)培养基的制备：计算→________→溶化→________→倒平板。

附近倒平板。

稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到种传统发酵食品的技术呼吸类型原理题组一　聚焦微生物的利用1．微生物利用的相关判断(3)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(2011·重庆，2A)( )(4)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(2009·安徽，6D)( )(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013·江苏，18A改编)( ) 2．(2015·江苏，19)做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是( )A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上3．(2014·新课标Ⅱ，39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。

回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。

在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。

据此可得出每升水样中的活菌数为______________。

【导学教程】2016届高考生物一轮总复习专题二微生物的培养和利用限时检测（选修1）[限时45分钟；满分100分]一、选择题(每小题5分，满分20分)1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，不正确的是A．操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸C．灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解D．将培养基冷却到约50 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板解析琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再灭菌。

答案 C2．(2014·南通调研)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养解析①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源干上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确。

答案 B3．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。

某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。

下列相关叙述错误的是A．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C．若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源D．使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落解析若④为对照实验，则④中培养基应含除苯酚外的其他碳源，⑤中以苯酚作为唯一碳源。

素能演练提升(十七)（内容：生物技术实践满分：100分时间：45分钟)1.(10分)（2015江苏，31）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值.为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究.请回答下列问题。

（1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是(填序号）。

①酒精灯②培养皿③显微镜④无菌水（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是。

（3）向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是。

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落（见上图）.图中降解圈大小与纤维素酶的有关。

图中降解纤维素能力最强的菌株是(填图中序号）。

（5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株更适合用于人工瘤胃发酵，理由是。

解析：本题考查微生物的培养。

（1)在样品稀释过程中需用到无菌水，涂布平板时需酒精灯、培养皿，都不需显微镜。

（2)筛选纤维素酶高产菌，采用稀释涂布法时菌液不宜过多，否则菌体堆积，无法获得单菌落,影响分离效果。

(3）分装培养基时,若试管口粘附有培养基,盖棉塞时会粘附于棉塞上，易受到空气中微生物的污染,进而造成培养基污染。

（4)纤维素与刚果红结合形成红色复合物,当纤维素酶高产菌分泌纤维素酶降解纤维素后，红色消失，从而使菌落周围出现透明圈。

产生纤维素酶越多，活性越强,则分解的纤维素越多，产生的透明圈越大.据此可以看出,图中菌落①透明圈最大,降解纤维素能力最强.（5)发酵过程,微生物细胞呼吸产热,温度较高并产生酸性物质如CO2或乳酸使pH降低.因此，耐高温、耐酸的菌株更适合用于人工瘤胃发酵。

答案：(除注明外，每空1分）（1）③(2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积，影响分离效果（2分）（3)避免培养基污染棉塞(4）量与活性（2分）①(5）J4 发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高(2分）图12.（7分）(2015江苏南京5月调研)研究酶的化学性质和作用机理,有助于了解生命活动的规律并指导生产和生活实践.请回答下列问题。