重组鼠疫菌F1抗原的纯化及其在ELISA检测鼠疫免疫中的应用

鼠疫概况鼠疫是一种人和动物共患的自然疫源性、烈性传染病。

在亚洲、非洲和美洲的一些国家和地区迄今每年仍有散在的流行。

甚至在美国也有感染者将鼠疫带人首都华盛顿的报告。

世界上曾发生三次大流行，第一次发生在公元6世纪，从地中海地区传入欧洲，死亡近1亿人；第二次发生在14世纪，波及欧、亚、非；第三次是18世纪，传播32个国家。

14世纪大流行时波及我国。

进入20世纪以后，世界上仍然有60多个国家和地区曾有过鼠疫流行。

病因鼠疫耶尔森氏菌于1894年在香港首次分离，属肠杆菌科，耶尔森氏菌属，是革兰氏染色阴性的兼性厌氧菌，显微镜下观为两头钝圆的短小杆菌，有荚膜，无鞭毛，无芽孢，菌落中心隆起，有粗糙颗粒，边缘不整齐。

它生长的最适PH为6.9-7.1，温度28-30℃，对高温和化学消毒剂敏感。

大多数鼠疫菌有6MD、45MD、65MD三个质粒。

其中6MD质粒为鼠疫菌所独有，在这个质粒上有产生鼠疫杆菌素的pst基因和血浆凝固酶及胞浆素原活化因子pla基因，后者被认为与人类致病有关。

45MD质粒为耶尔森氏菌属中三种致病菌共有，它参与温度与低Ca2+反应调节作用，主要分泌一些外膜蛋白(Yops)和产生具有抗吞噬作用的V抗原，这个质粒丢失后，鼠疫耶尔森氏菌将失去对低Ca2+反应的能力和相应的毒力。

65MD质粒为鼠疫菌特有，在这个质粒上存在着编码鼠疫菌最为重要的特异性和保护性抗原?F1抗原的基因。

鼠疫F1抗原的单克隆抗体是近年来开展鼠疫快速诊断研究的重要课题。

在鼠疫菌的染色体上还存在着一个能够聚集氯化血红素的hms基因和另一个与细胞铁转运机制有关的irp基因，与它们相对应的pgm阳性表型和铁调节蛋白都与鼠疫菌在特定条件下的毒力有关。

同时，在37℃，pH6时，鼠疫耶尔森氏菌还可以产生一种抗原，它对巨噬细胞有细胞毒性作用。

传播方式通过跳蚤传播，流行于鼠类间的自然疫源性疾病。

该病病原体的贮存宿主是野生啮齿类动物，兔形目和食肉目动物也可是人类的传染源。

鼠疫临床诊断标准
【诊断标准】
一、疑似病例：
起病前10日内，曾到过鼠疫动物病流行区或有接触鼠疫疫源动物及其制品，鼠疫病人或鼠疫菌培养物的历史。

突然发病，病情迅速恶化的高热病人，具有下列症候群之一者，应考虑为疑似病例。

1.急性淋巴结肿胀，剧烈疼痛、出现被迫性体位；
2.呼吸困难，咳血性痰；
3.具有毒血症候、迅速虚脱；
4.伴有重度中毒症候的其他症候群；
5.在没有接种过鼠疫菌苗的病人血清中，被动血凝试
验1:20以上滴度的抗鼠疫菌杆菌F1抗体，或用其
他经国家级单
位认可（确定）的试验方法检测达到诊断标准的，亦
应做出疑似病例的追溯诊断。

二、确诊病例：
1.在疑似病人或尸体材料中检出具有毒力的鼠疫杆
菌，是确诊首例鼠疫病人的唯一依据。

2.当一起人间鼠疫已经确诊后，在病人或尸体材料中
检出鼠疫杆菌的F1抗原或血清F1抗体升高4倍以
上，亦可对续发病例做出确诊。

实验确诊：疑似病例加1或2。

【传播途径】
人间鼠疫主要由蚤类为媒介，主要途径为：鼠→蚤→人。

肺鼠疫经呼吸道形成人→人的传播，可迅速造成人类肺鼠疫大流行。

【消毒】
对光、热、干燥及一般消毒剂均敏感，加热100℃1分钟，日光照射4-5小时及5%来苏儿、5%氯胺等均可迅速杀灭。

商丘市第二人民医院鼠疫防治知识培训测试题一、选择题1、鼠疫是我国法定传染病。

A.甲类B.乙类C.丙类D.丁类2、鼠疫主要以为媒介而传播。

A.蚊虫B.鼠蚤C.昆虫D.家禽3、鼠疫的临床分型中，最为凶险。

A.腺鼠疫B.肺鼠疫C.败血症鼠疫D.其他类鼠疫4、在鼠疫的血清检查中，可对鼠疫感染做出快速诊断的是。

A.接血凝法（PHA）B.酶联免疫吸附试验（ELISA）C.放射免疫沉淀试验（RIP）D.荧光抗体法（FA）5、是消灭鼠疫的根本性措施。

A.鼠疫疫苗接种B.消灭鼠疫传染源C.切断传播环节D.抗生素治疗6、鼠疫是主要通过下列哪种媒介传播的自然疫源性烈性传染病。

A.野鼠B.鼠蚤C.蚊子D.家鼠7、鼠疫耶尔森菌属肠杆菌科耶尔森菌属，是哪种细菌：A.G-，需氧菌B.，厌氧菌C.需氧菌D.厌氧菌8、发现鼠疫疑似病例后，应以最快的通讯方式向当地疾控中心报告，报道的时限为A.城市2小时内，农村4小时内B.城市4小时内,农村6小时内C.城市6小时内，农村12小时内D.城市12小时内，农村24小时内9、鼠疫分型中病死率极高，最严重的临床类型是。

A.肺鼠疫B.腺鼠疫C.败血症型鼠疫D.肠鼠疫二、是非题1.鼠疫是危害人类最严重的烈性传染病之一。

（）2.鼠疫杆菌对抗菌素中的青霉素很敏感。

（）3.鼠疫杆菌耐热但不耐寒，在-30度低温下即可死亡。

（）4.鼠疫不存在有隐性感染及带菌现象，隐性感染者和带菌者不可作为传染源传播鼠疫。

（）5.鼠疫的发病率及病死率一般无年龄、性别差异。

不同人群发病率的高低主要取决于与传染源接触的机会。

（）6.肺鼠疫为最严重的一型，病死率极高，俗称“黑死病”。

（）7.对鼠疫接触者应检疫7天，对曾接受预防接种者，检疫期应延至14天。

（）8.检测鼠疫患者或动物血清中F1抗体，急性期间隔两周的血清抗体滴度呈4倍以上增长，或一次滴度》1：100时有诊断价值。

（）9.鼠疫疫苗一般每年接种一次，必要时6个月后再接种一次。

鼠疫诊疗方案（2023 年版）鼠疫（Plague）是由鼠疫耶尔森菌（Yersinia pestis）感染引起的，在啮齿动物等宿主动物间流行的一种自然疫源性疾病，在一定条件下通过蚤叮咬及其他途径（直接接触传播、呼吸道传播等）传播给人类，造成人间鼠疫。

鼠疫是《中华人民共和国传染病防治法》规定的甲类传染病。

为做到对鼠疫病例的早发现、早治疗，减少重症与死亡，在2011 年《鼠疫诊疗方案（试行）》的基础上，结合国内外研究进展和诊疗经验，制定本诊疗方案。

一、病原学鼠疫的病原菌为鼠疫耶尔森菌（以下简称鼠疫菌），属于肠杆菌科、耶尔森菌属。

在光学显微镜下为革兰染色阴性、两端钝圆、两极浓染的短小杆菌，菌体长约1~3μm，宽.5~0.8μm，有荚膜，无鞭毛，无芽孢。

鼠疫菌基因组由一条环状染色体（约4.6Mb，G+C%约47.6mol%）和至少3 个质粒pPCP1（pPst，约9.5kb）、pCD1 （pYV，约70kb）和pMT1（pFra，约100kb）组成，含有4000 多个编码序列（CDS）和100~140 个插入序列，在致病上起到关键作用。

其中，pPCP1 编码外膜蛋白纤溶酶原激活物（Pla, plasminogen activator），可干扰血液凝固和补体激活，以增强鼠疫菌株的毒力。

pCD1 编码一系列Yops 和Ⅲ型分泌系统（T3SS），T3SS 将Yops 输送到宿主细胞内，在感染过程中抗吞噬和诱导巨噬细胞凋亡，促进感染早期的免疫逃逸。

pMT1 编码合成F1 抗原和鼠毒素，可增强对单核细胞的抗吞噬能力。

鼠疫菌的脂多糖缺乏O 侧链，即缺乏O 抗原，因此鼠疫菌没有血清分型。

与其他细菌的荚膜为多糖不同，鼠疫菌的荚膜成分为糖基化蛋白，是鼠疫菌的主要表面抗原，被称为F1 抗原。

我国学者依据鼠疫菌生化反应、生态学特征等，将我国的鼠疫菌分为17 个生态型。

鼠疫菌在4~40℃都可生长，最适生长温度为28~30℃，最适pH 值为6.9~7.1，对紫外线、高温和常用化学消毒剂敏感。

鼠疫的治疗方法及预防措施随着人类饮食文化的发展，越来越多的动物被人类当做新奇的食物，而由此导致越来越多动物疾病由口进入人体，引发疫病。

那么，鼠疫的预防措施有哪些呢?下面和小编一起来了解一下吧。

什么是鼠疫?鼠疫是鼠疫杆菌借鼠蚤传播为主的烈性传染病，系广泛流行于野生啮齿动物间的一种自然疫源性疾病。

临床上表现为发热、严重毒血症症状、淋巴结肿大、肺炎、出血倾向等。

鼠疫在世界历史上曾有多次大流行，死者以千万计，我国在解放前也曾发生多次流行，病死率极高。

患鼠疫原因有哪些?1、鼠蚤叮咬经鼠蚤传播，鼠蚤叮咬是主要的传播途径，啮齿动物→蚤→人的传播是腺鼠疫的主要传播方式。

2、呼吸道感染经呼吸道飞沫传播，通过呼吸、谈话、咳嗽等，借飞沫形成“人→人”的方式传播，并可造成人间鼠疫的大流行。

3、皮肤感染经皮肤传播，剥食患病啮齿动物的皮、肉或直接接触患者的脓血或痰，经皮肤伤口而感染。

4、消化道感染人吃了未彻底煮熟的染菌肉而感染。

鼠疫的症状有哪些?潜伏期：腺型2～8天;肺型数小时至2～3天;曾经预防接种者可延至9～12天。

1、轻型有不规则低热，全身症状轻微，局部淋巴结肿痛，偶可化脓，无出血现象，多见于流行初、末期或预防接种者。

2、腺型最多见，常发生于流行初期。

急起寒战、高热、头痛、乏力、全身酸痛偶有恶心、呕吐、烦躁不安、皮肤瘀斑、出血。

发病时即可见蚤叮咬处引流区淋巴结肿痛，发展迅速，第2～4天达高峰。

腹股沟淋巴结最常受累，其次为腋下、颈部及颌下。

由于淋巴结及周围组织炎症剧烈，使患者呈强迫体位。

如不及时治疗，肿大的淋巴结迅速化脓、破溃、于3～5天内因严重毒血症、继发肺炎或败血症死亡。

治疗及时或病情轻缓者腺肿逐渐消散或伤口愈合而康复。

3、肺型可原发或继发于腺型，多见于流行高峰。

肺鼠疫发展迅猛，急起高热，全身中毒症状明显，发病数小时后出现胸痛、咳嗽、咳痰，痰由少量迅速转为大量鲜红色血痰。

呼吸困难与发绀迅速加重。

肺部可以闻及湿性?音，呼吸音减低，体征与症状常不相称。

卫生部办公厅关于印发《鼠疫诊疗方案(试行)》的通知文章属性•【制定机关】卫生部(已撤销)•【公布日期】2011.02.11•【文号】卫办应急发[2011]18号•【施行日期】2011.02.11•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】医疗安全与血液,健康促进,免疫规划正文卫生部办公厅关于印发《鼠疫诊疗方案（试行）》的通知（卫办应急发[2011]18号）各省、自治区、直辖市卫生厅局，新疆生产建设兵团卫生局：为进一步做好鼠疫病例诊疗工作，全力维护人民群众的身体健康和生命安全，我部组织编写了《鼠疫诊疗方案（试行）》。

现印发给你们，供医疗机构在鼠疫临床诊疗工作中使用。

二〇一一年二月十一日鼠疫诊疗方案（试行）鼠疫是我国传染病防治法规定的甲类传染病，原发于鼠疫自然疫源地的啮齿类动物之间，主要通过蚤类相互传播。

为最大限度地挽救生命，本方案根据已有的临床治疗经验和实验研究资料，提出对鼠疫的综合治疗措施，以指导临床救治。

一、病原学和流行病学（一）病原学。

鼠疫的致病菌为鼠疫菌，其分类学位置为细菌域、变形菌门、γ-变形菌纲、肠杆菌目、肠杆菌科、耶尔森菌属、鼠疫耶尔森菌。

鼠疫菌在光学显微镜下为革兰染色阴性、两端钝圆、两极浓染的短小杆菌，菌体长约1-2μｍ，宽0.5-0.7μｍ，有荚膜，无鞭毛，无芽孢；基因组由一条环状染色体（约4.6Mb）和3个质粒（pPCP1、pCD1、pMT1）组成，含有4000多个编码序列和大量的插入序列，具有高度的流动性。

鼠疫菌最适生长温度为28-30℃，最适pH值为6.9-7.1，对高温和常用化学消毒剂敏感。

（二）流行病学。

鼠疫是一种自然疫源性疾病，其自然疫源地分布在亚洲、非洲、美洲的60多个国家和地区。

我国目前存在着12种类型的鼠疫自然疫源地。

1.传染源。

（1）鼠疫染疫动物。

自然感染鼠疫的动物都可以作为人间鼠疫的传染源（据统计，世界上有300多种），包括啮齿类动物（鼠类、旱獭等）、野生食肉类动物（狐狸、狼、猞猁、鼬等）、野生偶蹄类动物（黄羊、岩羊、马鹿等）、家养动物（犬、猫、藏系绵羊等）。

仓鼠会传播鼠疫吗仓鼠和老鼠是有本质的区别，虽然都是鼠，但它并不是老鼠的一种。

仓鼠很爱干净，只要主人在饲养上注意食物的干净卫生，不喂太多的含水分高的食物，避免因为拉肚子死掉，那么仓鼠会传播鼠疫吗？生物灾害安全小知识：这个问题很多人的看法都是不相同的，但至今并没有任何统计数据显示它们有携带鼠疫病菌。

其实只要把仓鼠的卫生做好，做好鼠疫防治措施，也就不用担心会不会有鼠疫的风险的了，那么鼠疫的预防措施有哪些？(1)个人防护：进入疫区的防疫人员应穿衣裤相连的衣帽、戴口罩、防护眼镜、胶皮手套及长筒靴。

接触患者或病鼠后可用磺胺嘧啶或四环素每天2g分4次服或链霉素每天1g分2次肌注，疗程均为6天。

但有的作者曾对甘肃省保存的382株鼠疫杆菌进行了12种抗菌药物的敏感性测定，认为鼠疫杆菌对磺胺类药物均不敏感。

(2)预防接种：目前世界上普遍认为现有的几种免疫制剂，无论是鼠疫活菌苗、死菌或提纯菌苗，在预防人间鼠疫发生上其免疫效果均不理想，主要是接种后免疫强度不高，免疫效期短，不能完全保证免疫人群不发病。

我国目前用无毒活菌苗。

皮肤划法的反应较轻易被接受但划痕深浅及进入人体的菌苗不易掌握。

也可用皮下注射，成人1ml(含无毒活菌10亿个)，儿童酌减。

接种后10天产生免疫力，1个月后达高峰，6个月后逐渐下降，1年后消失。

为保证免疫效果，每6～12个月需加强复种1次。

接种对象为疫区、周围人群和防疫人员，国外利用基因重组技术制备的F1亚单位菌苗和V抗原菌苗在实验动物可产生高效价的免疫抗体，对大剂量鼠疫菌攻击有满意的保护作用，有望成为一种更安全、有效的鼠疫菌苗用于临床。

提醒您：如果看完上述还不了解的话，可以了解下鼠疫知识，另外生物灾害知识和自然灾害知识在本网站也可以查看。

鼠疫疫苗的应用原理图表简介鼠疫是一种由鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia pestis）引起的高度传染性疾病。

该疾病主要通过跳蚤的叮咬传播，也可以通过鼠类的粪便和尿液传播给人类。

鼠疫具有较高的致死率，曾经在历史上造成了多次大规模的疫情。

为了控制鼠疫的传播，鼠疫疫苗得到了广泛的应用。

本文将介绍鼠疫疫苗的应用原理，并附上相关的图表说明。

鼠疫疫苗的应用原理鼠疫疫苗的应用原理主要基于免疫学的原理。

通过向机体注射鼠疫疫苗，可以刺激机体产生针对鼠疫耶尔森氏菌的抗体，从而实现对鼠疫的保护。

以下是鼠疫疫苗的应用原理图表：步骤描述第一步鼠疫疫苗注射到机体第二步鼠疫疫苗中的抗原刺激机体产生免疫反应第三步机体产生针对鼠疫耶尔森氏菌的特异性抗体第四步特异性抗体与鼠疫耶尔森氏菌结合，阻止其进一步感染第五步机体对鼠疫具备免疫力，可以有效抵御鼠疫的侵害鼠疫疫苗的应用原理图表说明第一步：鼠疫疫苗注射到机体在这一步骤中，鼠疫疫苗被注射到机体内。

通常情况下，鼠疫疫苗是通过皮下注射或肌肉注射的方式给予。

第二步：鼠疫疫苗中的抗原刺激机体产生免疫反应鼠疫疫苗中含有鼠疫耶尔森氏菌的抗原物质。

抗原物质能够刺激机体的免疫系统产生免疫反应。

免疫反应是机体对外来物质的一种防御反应。

第三步：机体产生针对鼠疫耶尔森氏菌的特异性抗体在接种鼠疫疫苗后，机体的免疫系统会产生针对鼠疫耶尔森氏菌的特异性抗体。

这些抗体具有与鼠疫菌结构相关的特异性，能够与鼠疫菌发生特异性的结合。

第四步：特异性抗体与鼠疫耶尔森氏菌结合，阻止其进一步感染一旦机体产生了针对鼠疫菌的特异性抗体，这些抗体就可以与鼠疫菌结合。

特异性抗体与鼠疫菌结合后，可以阻止鼠疫菌进一步感染机体的组织和器官，从而发挥保护作用。

第五步：机体对鼠疫具备免疫力，可以有效抵御鼠疫的侵害经过鼠疫疫苗免疫后，机体会产生对鼠疫菌的免疫力。

这种免疫力可以持续一段时间，使得机体对鼠疫具备保护作用。

即使接触到鼠疫菌，机体也能够有效地抵御其侵害。

鼠疫菌F1抗原检测试剂盒(胶体金法)
药品名称：
通用名称：鼠疫菌F1抗原检测试剂盒(胶体金法)
英文名称：暂无
成份：
检测卡 15人份/盒，说明书 1份/盒。

其中，检测卡装于密封铝箔袋中，每袋中含检测卡1个，滴管1支，干燥剂1个。

产品有效期：室温干燥保存，有效期18个月。

附件：注册产品标准，产品说明书。

适应症：
本产品用于检测人血清及组织、动物血清及组织样本中的鼠疫菌F1抗原。

本品仅用于疑似鼠疫菌引起的生物恐怖事件的现场筛查，由国家特定单位使用，检测结果，尤其是阳性结果，应由国家特定部门报告。

用法用量：
暂无
不良反应：
暂无。

禁忌：
暂无。

注意事项：
暂无。

贮藏：
暂无
有效期：
暂无
标准文号：
国食药监械(准)字2012第3401172号。

鼠疫菌种特异性抗原
宋志忠;тюменпеваи.с;АфанасцевЕ.Н;杨桂荣
【期刊名称】《中国地方病防治杂志》
【年(卷),期】1999(14)3
【摘要】鼠疫菌和其它微生物一样具有许多免疫活性物质,大部分与其它细菌并无区别,其中只有少数抗原是鼠疫菌所特有的。

弄清这些抗原的特性是研究鼠疫菌免疫机制及完善鼠疫诊断方法的基础。

目前公认的鼠疫菌种特异性抗原有:荚膜抗原(Fra Ⅰ),“鼠毒素”,(Fra Ⅱ),纤维蛋白溶解酶及血浆凝固酶(FC)。

【总页数】4页(P160-163)
【关键词】鼠疫;菌种;特异性抗原;FraI抗原;FraⅡ抗原
【作者】宋志忠;тюменпеваи.с;АфанасцевЕ.Н;杨桂荣
【作者单位】斯塔夫罗波尔鼠疫防治研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R378.61
【相关文献】
1.制定来源于中国各类鼠疫自然疫源地鼠疫菌种的新编号方案的建议 [J], 俞东征;海荣;夏连续
2.中国鼠疫菌种资源遗传特征分析 [J], 俞东征;海荣;董兴齐;李敏;夏连续;史献明;魏建春;崔百忠;王鹏;孙连芝;张志凯;胡源;张恩民
3.云南省鼠疫菌种信息管理系统的建立 [J], 王鹏;郭英;于国林;董兴齐
4.鼠疫菌种管理信息系统的开发与利用 [J], 鞠成;李婧;申晶;王卓;邵奎东;张市;迟秀娟
5.中国鼠疫菌种资源利用与安全性分析 [J], 海荣;俞东征
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