微生物的实验室培养PPT演示文稿

沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动)
4.培养基的用途 液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中， 所有防止杂菌污染的方法。无论是随后 将要学到的倒平板、平板划线操作，还 是平板稀释涂布法，其操作中的每一步 都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。 只有熟练、规范地进行无菌操作，才可 能成功地培养微生物。
菌落：
• 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 • 菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落
细菌的菌落特征 因种菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的
病毒的结构
病毒
SARS病毒、
禽流感病毒
朊病毒（蛋白质病毒）
2、病毒的增殖：
真菌
酵母菌和霉菌
青霉 如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构
生殖
孢子生殖
直立菌丝
营养菌丝
腐生生活
细菌的营养类型
• 根据细菌所利用的能源和碳源的不同， 将细菌分为两大营养类型。 • 自养菌（autotroph） • 异养菌（heterotroph） • 腐生菌 • 寄生菌 大部分病原菌
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份 致病微生物的过程。区分为高程度消毒 （High-level Disinfection）、中程度 消毒（Intermediate-level Disinfection）、低程度消毒（Lowlevel Disinfection）三种方式。
人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细 胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如 血清）。
血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋 白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、 冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
专题2 :微生物的培养与应用
微生物基础知识
病毒
细菌
病毒界
微生物包括哪五类： 放线菌 真菌 原生动物
原核生物界 真菌界
原生生物界
特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通 常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有 的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿 素.不能进行光合作用.
细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染 色后显微镜观察
合成培养基:
根据细胞生存所需物质的种类和 数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、 维生素、碳水化合物、无机盐和其它 一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相 对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满 足体外细胞生长需要。
天然培养基：
天然培养基有血清、血浆、和组 织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某 些实验产物的提取和实验结果的分析; 易发生支原体污染;
(2)灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌： 160-170 ℃下加 热1-2h。 3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃ 下维持15-30min.
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、 次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞
2.不同的微生物往往需要采用不同 的培养基配方 (参考教材附录内容)
3.不管哪种培养基，一般都含有水、 碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质， 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必 需，而自身不能合成的化合物,如维生素、 某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二 氧化碳、渗透压等的要求。
细菌的外形与大小
细菌的构造
细菌细胞由外向里 依次有鞭毛、菌 （纤）毛、荚膜、 细胞壁、细胞膜、 细胞质，细胞质 中又有液泡、储 存性颗粒、核质 等。
图1-3 细菌的结构
*细胞壁
• 结构特点：坚韧且有弹性 • 细胞壁有哪些功能？ • ①固定细胞外形；

②保护细胞免受外力的损伤； ③阻拦大分子物质进人细胞； ④使细胞具有致病性及对 噬菌体的敏感性。
一、课题目标： 了解有关培养基的基础知识，进行无 菌技术的操作，进行微生物的培养。 二、课题重点和难点： 无菌技术的操作。 三、技能目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和 平板划线法等基本操作技术，熟练、规范 地进行无菌操作，成功地培养微生物。
一、基础知识：
（一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成 的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 1.培养基的类型和用途 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培 养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌 种分离、鉴定菌落等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别 培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成 培养基。
伤 寒 杆 菌 细 胞 壁 中 含 毒 素
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠 体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才 死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水 分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.
（2）灭菌的定义：
以化学剂或物理方法消灭所有微 生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、 霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工 作中最普通也是最重要的技术。
3.常用的消毒与灭菌的方法 (1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……