放射自显影的定义、基本类型和材料

放射自显影放射自显影(autoradiography)放射自显影的原理是利用放射性同位素所发射出来的带电离子(α或β粒子)作用于感光材料的卤化银晶体，从而产生潜影，这种潜影可用显影液显示，成为可见的"像"，因此，它是利用卤化银乳胶显像检查和测量放射性的一种方法。

放射性核素的原子不断衰变，当衰变掉一半时所需要的时间称为半衰期。

各种放射性核素的半衰期长短不同(表)，在自显影实验中多选用半衰期较长者。

对于半衰期较短的核素，应选用较快的样品制备方法，所用剂量也应加大。

表自显影实验中常用核素的半衰期与能量名称半寿期粒子类型能量(MeV) 名称半寿期粒子类型能量(MeV)3H 12.3 yr β 0.018 45Ca 152 d β 0.2611C 20 min β 0.981 59Fe 45 d β 0.4614C 5700 yr β 0.155 γ 1.3032P 14.3 d β 1.71 60Co 5.3 yr β 0.30835S 87.2 d β 0.167 64Cu 12.8 hr β 0.657131I 8.0 d β0.25 γ 1.35放射自显影技术放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。

放射自显影术（radioautogra phy；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。

其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。

然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量，放射自显影的切片还可再用染料染色，这样便可在显微镜下对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定。

放射性自显影法放射性自显影法与普通照相的曝光、显影、定影原理相似，此法是利用放射性同位素所放出之射线使照相乳胶“感光”，再经显影和定影处理，将乳胶中因受辐照而致敏的卤化银颗粒还原成金属银，洗去未“感光”的卤化银后则图像自然显示出来。

图像中任何区域的黑度取决于留存的金属银的量，它反映了射线在这个区域所沉积的能量。

这种方法以照相乳胶或核乳胶（卤化银颗粒更细）作为“仪器”，记录、检查和测量整体和组织、细胞和亚细胞水平中放射性示踪物的分布、进行定性和半定量测定，称为放射自显影法。

由于放射性物质往往在研究对象中呈不均匀分布，因此可利用一系列不同的图像判断放射性物质在组织或细胞中的动态关系，从而揭示精确的代谢动态过程，所以这种实验技术以其特有的功效从放射性被发现至今仍一直被广泛使用。

目前常用的自显影方法有以下几种类型：①接触法，最简单的一种，一般利用照相胶片或X光胶片，使含有放射性物质的标本表面与胶片上的乳胶层表面紧密接触，经过一定时间“曝光”后，将标本与胶片分开，胶片经过显影、定影等处理后即可得到自显影图像。

此法的分辨率受胶片上乳胶层的厚度及颗粒大小的限制，一般为10～30微米，适用于小的动、植物整体标本，大体解剖学的和组织学的切片以及薄层、纸层和电泳图谱的自显影等；②液体乳胶法，目前应用较广泛的一种。

一般是将液体乳胶直接涂布到载玻片的组织切片上，“曝光”后连同标本一起进行显影、定影、冲洗和染色，并最后封固在一起。

此法的分辨率可达1～10微米，可进行细胞内定位；③电镜自显影法，是放射自显影与电子显微镜相结合的一种新技术。

需使用颗粒均匀、大小适中、密度一般为1013银颗粒/厘米3的核乳胶。

含有标记物质的样品需制成超薄切片，切片可以捞在带支持膜的铜网上或载玻片上。

采用浸涂法、环套法或泡盖法等使乳胶形成一单晶体层敷盖在切片上，再经“曝光”、冲洗和染色等处理。

此法的分辨率可达0.05～0.1微米，能分辨DNA分子的一条链，故又称为“分子自显影法”。

放射自显影技术实验核医学易生物 w w w .e b i o e .co m概念：放射性核素所产生的射线直接作用于感光材料，使其产生潜影，经显影、定影处理而得到与生物标本中放射性核素所在部位、强度一致的由银颗粒组成的影像。

这种利用感光材料记录、检查和测量放射性示踪剂在生物体内准确位置和数量的方法，称为放射性自显影术。

(autoradiography,ARG radioautogram)易生物 w w w .e b i o e .co m易生物 w w w .e b i o e .co m易生物 w w w .e b i o e .co m(二)潜影的消退第二节放射自显影的材料一、感光材料的种类和选择(一)核乳胶(nuclear emulsion)1.液体核乳胶2.核乳胶干板3.揭膜核乳胶易生物 w w w .e b i o e .co m第三节放射自显影的基本技术和方法一、放射自显影术的主要类型（一）宏观自显影术(macroscopic autoradiography,M-ARG)观察的范围比较大，要求的分辨率较低，只能用肉眼或放大镜观察，可根据黑度判断示踪的部位和定量。

是研究物质代谢的主要方法。

易生物 w w w .e b i o e .co m易生物 w w w .e b i o e .co m易生物 w w w .e b i o e .co m易生物 w w w .e b i o e .co m（二）光镜自显影术(light microscopic autradiography,LM-ARG)研究放射性物质在组织或细胞内的定位情况，观察范围较小，分辨率要求较高，以银颗粒判断示踪剂的部位和定量。

易生物 w w w .e b i o e .co m易生物 w w w .e b i o e .co m1.石蜡切片自显影：2.冰冻切片自显影(易扩散)：3.细胞涂片自显影：(三)电镜自显影术(electronmicroscopicautoradiography, EM-ARG)研究放射性物质在亚细胞结构水平上的精确定位，观察范围更小，分辨率要求极高，以单层银颗粒的分布判断示踪剂的部位和定量。

放射自显影技术名词解释
放射自显影技术，简称放射自显影（Radiographic Imaging），是一种常见的医学成像技术，用于检查人体内部组织和器官的形态、结构和功能。

在这种技术中，患者接受放射线照射，然后通过感光片或数字探测器捕捉到透过身体的放射线，形成一幅影像。

以下是一些与放射自显影技术相关的常见名词解释：
1. 放射线：高能量的电磁波或粒子，通过人体组织时能够穿透并被捕捉成影像。

2. 导影剂：一种用于增强影像对比度的药物，通过在人体内注射或口服，可以使特定组织或器官在放射线下更容易被看清楚。

3. 感光片：一种类似于胶片的光敏物质，用于捕捉透过身体的放射线的影像。

4. X射线机：一种专门用于产生X射线的装置，包括X射线
管和加速器，可以产生高能量的电磁辐射。

5. 造影技术：一种利用导影剂增强特定组织或器官对比度的技术，常用于放射自显影中。

6. 数字放射机：使用数字化探测器来捕捉和显示透过身体的放射线形成的数字影像的设备。

7. CT扫描：又称为计算机断层扫描（Computed Tomography），一种结合X射线和多个角度扫描技术，生成
具有高分辨率的三维体像的成像技术。

8. MRI扫描：又称为磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging），一种使用强磁场和无线电波来生成人体内部详细的影像的成像技术。

9. 放射科医师：专门从事解读和分析放射自显影影像的医生，能够发现异常，并与其他医生一起诊断和治疗疾病。

10. 辐射剂量：患者从放射线照射中所接受的辐射量，需要控制在一定范围内以确保安全。

放射自显影（Autoradiography）是一种在生物学和分子生物学领域中广泛应用的技术，用于检测和定位含有放射性同位素标记物质的样品。

在蛋白质磷酸化研究中，放射自显影主要用于可视化和量化蛋白质磷酸化事件。

具体应用步骤如下：
1.标记过程：首先，研究人员会在细胞或组织样本中引入放射性同位素标记
的磷酸盐（如³²P），这些标记的磷酸盐会被细胞内的激酶用于蛋白质的磷
酸化过程，因此，当蛋白质被磷酸化时，相应的氨基酸残基（如丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸）会携带放射性标记。

2.蛋白质提取与分离：之后，收集并提取样本中的蛋白质，通常使用SDS-
PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）来分离不同大小的蛋白质。

3.凝胶转移：在某些情况下，为了更方便地检测和后续分析，分离出的蛋白
质还会通过Western Blotting转移到固相支持介质（如硝酸纤维素膜或
PVDF膜）上。

4.放射自显影：将分离或转移后的蛋白质凝胶或膜置于感光胶片上，经过一
段时间的曝光，使得放射性同位素发射的β粒子或γ粒子使胶片感光，形
成黑度图像。

黑度较高的区域对应着放射性标记较高的蛋白质分子，即磷酸化水平较高的蛋白质。

5.数据分析：通过分析放射自显影图上的斑点或条带，可以确定蛋白质的磷
酸化位点数量、位置以及相对的磷酸化程度。

这种技术的优势在于它能够非常灵敏地检测到微量的磷酸化蛋白质，并且可以在分子水平上提供定位信息。

然而，随着非放射性检测技术的发展，如质谱法（Mass Spectrometry）的普及，虽然放射自显影仍然是经典的方法之一，但在某些场合下已经被更为安全和高效的新型技术所替代或补充。

放射自显影名词解释
放射自显影是一种在暗室环境下，照射已暴露于光线或其他辐射下的物体或物质后产生可见影像的现象。

这种现象通常出现在一些物质暴露于光线或其他辐射后，随着时间的推移，在光线消失的情况下仍然保持影像的能力。

放射自显影的原理涉及物质在暴露于光线或其他辐射后，通过吸收和存储能量，形成暂时性的激发状态。

即使光线或辐射停止，这些物质仍然能够在一定时间内释放被吸收的能量，并产生可见的光，形成影像。

最常见的放射自显影是在摄影和影像技术中使用的自显影片或类似物质。

这种物质在受到光线曝光后，在黑暗环境中依然可以产生可见的影像。

这种特性使得它们在暗室条件下工作变得可能，例如X 光片、一些辐射影像技术和光学显微镜的使用中都可以看到类似的效果。

放射自显影的原理使得这些物质成为影像技术中的重要工具，能够在没有直接光源的情况下产生可见的影像，对于医学诊断、科学研究和工程领域的检测有着重要的应用。

放射自显影术是利用放射性核素放出的核射线使感光材料中的卤化银感光，形成图像，来记录、检查和测量(半定量测量)标本中放射性示踪剂的部位及强弱的方法。

这种技术得到的图像，称为放射白显影像(autorad—gram，ARG)。

ARG 用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机制、作用部位等。

放射自显影技术是研究细胞增殖、代谢活动和各种理化因素对细胞影响的重要手段．能够解释细胞分子水平的动态变化．使之成为显微镜下可见的形态，并可用于定位和定量分析．是生命科学研究中一项应用广泛的重要技术。

放射自显影术的原理和普通光学摄影的原理基本相同，都是使感光材料曝光后，发生化学变化，经过显影和定影处理．得到图像。

放射自显影技术是利用放射性核素标记生物分子，并使其掺人细胞内。

由于放射性核素在衰变过程中放出的射线可以使核乳胶感光，形成潜影，经过显影剂作用，把潜影部分的溴化银还原成黑色颗粒，再经过定影剂处理，把未还原的溴化银颗粒溶解洗掉，就得到了清晰的自显影图像。

经过放射自显影的标本还可再用染料染色．根据样品中银颗粒的所在部位和数量进行定位和定量分析．了解细胞代谢的状态和动态变化过程。

ARG的原理可通过以下步骤来理解：(1)感光材料中的溴化银被带电粒子作用，释放出电子：A gBr+β→Ag+ +Br十e一(2)该电子立即被荷正电的银离子所俘获：e一+Ag+→Ag(3)很多荷正电的银离子被还原．在溴化银分子中形成潜影：Ag......Ag→nAg在潜影处聚集的银原子数量很少．只占原晶体量的十亿分之一。

然而，这微量的金属银却起着重要的催化作用，促使溴化银晶体还原成金属银，因而称为显影中心。

(4)潜影经显影、定影处理后，即显示放射自显影图像，其图像银粒黑化的程度取决于组织标本中放射性活度的多少，呈正比关系。

对核乳胶曝光后形成潜影的过程及其机制还不完全清楚。

一般认为．感光乳胶中的溴化银是以微晶体颗粒悬浮于明胶中，每颗溴化银晶体如‘和Br一的点阵组成，在制备乳胶的过程中，又要使点阵产生缺陷，这些缺陷便构成潜影形成的敏化中心(sensitivity speck)，当核射线、光线、热、压力或张力等作用于溴化银时，离子中的电子便向敏化中心移动，形成带阴电荷的静电层，然后荷阳电的银离子便向此处聚集而变为银原子。

放射自显影术是利用放射性核素放出的核射线使感光材料中的卤化银感光，形成图像，来记录、检查和测量(半定量测量)标本中放射性示踪剂的部位及强弱的方法。

这种技术得到的图像，称为放射白显影像(autorad—gram，ARG)。

ARG 用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机制、作用部位等。

放射自显影技术是研究细胞增殖、代谢活动和各种理化因素对细胞影响的重要手段．能够解释细胞分子水平的动态变化．使之成为显微镜下可见的形态，并可用于定位和定量分析．是生命科学研究中一项应用广泛的重要技术。

放射自显影术的原理和普通光学摄影的原理基本相同，都是使感光材料曝光后，发生化学变化，经过显影和定影处理．得到图像。

放射自显影技术是利用放射性核素标记生物分子，并使其掺人细胞内。

由于放射性核素在衰变过程中放出的射线可以使核乳胶感光，形成潜影，经过显影剂作用，把潜影部分的溴化银还原成黑色颗粒，再经过定影剂处理，把未还原的溴化银颗粒溶解洗掉，就得到了清晰的自显影图像。

经过放射自显影的标本还可再用染料染色．根据样品中银颗粒的所在部位和数量进行定位和定量分析．了解细胞代谢的状态和动态变化过程。

ARG的原理可通过以下步骤来理解：(1)感光材料中的溴化银被带电粒子作用，释放出电子：A gBr+β→Ag+ +Br十e一(2)该电子立即被荷正电的银离子所俘获：e一+Ag+→Ag(3)很多荷正电的银离子被还原．在溴化银分子中形成潜影：Ag......Ag→nAg在潜影处聚集的银原子数量很少．只占原晶体量的十亿分之一。

然而，这微量的金属银却起着重要的催化作用，促使溴化银晶体还原成金属银，因而称为显影中心。

(4)潜影经显影、定影处理后，即显示放射自显影图像，其图像银粒黑化的程度取决于组织标本中放射性活度的多少，呈正比关系。

对核乳胶曝光后形成潜影的过程及其机制还不完全清楚。

一般认为．感光乳胶中的溴化银是以微晶体颗粒悬浮于明胶中，每颗溴化银晶体如‘和Br一的点阵组成，在制备乳胶的过程中，又要使点阵产生缺陷，这些缺陷便构成潜影形成的敏化中心(sensitivity speck)，当核射线、光线、热、压力或张力等作用于溴化银时，离子中的电子便向敏化中心移动，形成带阴电荷的静电层，然后荷阳电的银离子便向此处聚集而变为银原子。