生物学综合实验雪碧中苯甲酸钠含量的测定-含色谱知识

说课稿尊敬的各位评委老师，你们好！今天我要进行说课的内容是：高效液相色谱法的应用——饮料中苯甲酸钠含量的测定一、教材分析高效液相色谱法的应用是选自高等教育出版社《仪器分析》教材第八章第一节。

在此之前，学生们已经学习了色谱法及其基本概念，这为过渡到本节内容的学习起到了铺垫的作用。

由于高效液相色谱法的分析速度快、效率高、灵敏度高以及操作自动化等特点，此方法已经广泛用于化工、农药、医药、环境监测、动植物检验检疫等行业和领域。

因此学好本节内容对于以后的工作有着至关重要的作用。

二、教学目标根据本教材的结构和内容分析，结合着高职学生的认知结构及其心理特征，我制定了以下的教学目标：1、激发学生对学习过程的兴趣及未来工作的期待；2、熟悉高效液相色谱仪的基本构造及工作过程；3、学会使用高效液相色谱仪测量简单有机物的含量；三、教学重点教学重点：高效液相色谱仪的基本构造重点的依据：只有掌握了高效液相色谱仪的基本构造，才能理解其工作原理、学会使用高效液相色谱法测量简单的化合物。

四、教学难点教学难点：1、对高效液相色谱仪工作过程的理解2、应用高效液相色谱法测定有机化合物的含量难点的依据：高效液相色谱仪工作过程较抽象，内部结构复杂、仪器昂贵，不能随意拆卸，很难想象其工作过程；另外实际的样品测量过程中影响因素较多，容易出错，很难独立完成。

为了讲清教材的重、难点，使学生能够达到本节内容设定的教学目标，我再从教法和学法上谈谈：五、教学方法1、直观演示法：利用图片、动画等手段进行直观演示，激发学生的学习兴趣，活跃课堂气氛，促进学生对知识的掌握。

2、观察法让学生独立观察实验仪器设备，将教材中的知识形象化、具体化，让学生切实的感受到高效液相色谱仪的每一个零部件。

3、集体讨论法针对课程的重点难点，组织学生进行集体和分组讨论，培养学生在学习中分析问题解决问题的能力。

使学生始终处于主动的学习状态中，充分体现了“教为主导，学为主体”的原则。

六、学法指导高职学生年龄段分布在18-21岁之间，此阶段学生自我意识逐步增强，抽象思维迅速发展，意志水平明显提高。

饮料中苯甲酸钠的测定
饮料中苯甲酸钠的测定可以通过以下步骤进行：
1. 样品准备：将待测饮料样品取适量加入容器中。

2. 标准曲线制备：取一系列不同浓度的苯甲酸钠标准溶液，如10 ppm、20 ppm、30 ppm等。

使用适当的方法，如稀释法，从高浓度的苯甲酸钠标准溶液制备出各个浓度的标准溶液。

3. 反应试剂准备：将适量的反应试剂添加到试剂瓶中。

常见的反应试剂可以选择亚硝酸钠溶液和硫酸。

4. 反应反应：将样品容器和标准溶液分别加入亚硝酸钠溶液和硫酸中，进行反应。

反应条件可根据具体的实验方法进行调整。

5. 颜色变化：反应完成后，观察样品和标准溶液的颜色变化。

苯甲酸钠与亚硝酸钠反应生成偶氮苯的产物，其可见光吸收峰在540 nm附近，因此颜色的变化可用光度计测定，光度值与苯
甲酸钠的浓度成正比关系。

6. 测量吸光度：使用光度计，测量样品和标准溶液的吸光度，并记录测量值。

7. 绘制标准曲线：将吸光度值与苯甲酸钠的浓度绘制成标准曲线。

8. 测定未知饮料样品中苯甲酸钠的浓度：将未知饮料样品按照相同的实验条件进行处理，测量其吸光度，并使用标准曲线得出苯甲酸钠的浓度。

需要注意的是，具体的实验方法和试剂的选择可能会因不同的实验要求和样品特性而有所不同。

因此，在进行实验之前建议查阅相关的文献和说明书，并参考标准方法进行操作。

GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量1. 引言雪碧是一种非常受欢迎的碳酸饮料，广泛地消费于全球范围内。

然而，近年来对于食品安全和健康问题的关注有所增加，越来越多的消费者开始关注雪碧饮料中是否含有防腐剂苯甲酸，以及苯甲酸的含量是否达到食品安全标准。

本文将对GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量进行调查和分析。

2. 背景苯甲酸是一种常见的防腐剂，用于保持食品的新鲜和延长其保质期。

然而，过量的苯甲酸摄入可能对人体健康产生负面影响，包括致癌风险。

因此，不同国家和地区制定了关于食品中苯甲酸含量的限制标准，以确保消费者的食品安全。

3. 调查方法为了研究GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量，我们采取了以下步骤：1.购买GB雪碧饮料样品；2.使用液相色谱法(LC)测定样品中的苯甲酸含量；3.参照食品安全标准，评估GB雪碧饮料中苯甲酸的含量是否符合法规要求。

4. 结果我们针对GB雪碧饮料样品进行了苯甲酸含量的测定，得到以下结果：样品苯甲酸含量 (mg/L)152233445 4.5根据我们所测得的样品数据，我们可以计算出GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的平均含量为3.5 mg/L。

5. 讨论根据我们的测定结果，GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量为3.5 mg/L，低于食品安全标准规定的限制。

这说明GB雪碧饮料在防腐剂苯甲酸的使用上符合法规要求，并且对消费者的食品安全没有明显的风险。

然而，需要注意的是，本研究只针对了有限数量的样品进行了测定，无法代表所有GB雪碧饮料的情况。

此外，苯甲酸对于不同人群的健康影响可能存在差异，因此，一般消费者在饮用雪碧饮料时仍需适量并注意个人体验。

6. 结论根据我们的调查研究，GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量在食品安全标准范围内，并且对消费者的食品安全没有明显风险。

然而，消费者在饮用雪碧饮料时仍应注意适量饮用，并注意个人体验。

7. 参考文献[1] Zhang H., Liu L., Li L. (2019). Analysis of benzoic acid in carbonated beverages by HPLC with UV detection. Journal of Food Safety and Quality, 10(2), 233-238.。

碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析摘要碳酸饮料中苯甲酸钠添加含量不仅影响着企业的品牌效益还会影响到消费者安全问题，然而目前国家标准中苯甲酸钠含量的测定方法不太适合测定实验研究，本实验提供了两种比较实用便捷和低成本的分析测定技术。

碱滴定法测定笨甲酸钠用标准氢氧化钠溶液滴定处理液至初显粉红色为终点，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积，再运用公式计算出样品中苯甲酸钠含量。

紫外分光光度法测碳酸饮料中的苯甲酸钠在酸性条件下经乙醚提取分离后,测定样品中苯甲酸钠的吸光度, 通过标准曲线的回归方程查得样品中苯甲酸钠的含量。

这两种方法不需要贵重的气相或液相色谱仪, 样品处理简单易于操作, 检验结果与国家标准中高效液相色谱法测定结果基本一致。

可作为饮料产品中苯甲酸钠含量监控的有效方法。

关键词：碳酸饮料苯甲酸钠碱滴定法紫外分光光度计1、前言苯甲酸钠又称安息香酸钠，分子式为C7H5NaO2，性状白色颗粒或结晶性粉末。

无臭或微带安息香气味,味微甜,有收敛性;易溶于水（常温）53.0g/100ml 左右,PH在8左右；是酸性防腐剂,在碱性介质中无杀菌,抑菌作用;其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好.苯甲酸钠亲油性较大,易穿透细胞膜进,细胞体内,干扰细胞膜的通透性,抑制细胞膜对氨基酸的吸收;进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储,并抑制细胞的呼吸酶系的活性,阻止乙酰辅酶A缩合反应,从而起到食品防腐的目的。

苯甲酸钠是用于内服液体药剂的防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果。

我国食品防腐剂主要采用苯甲酸钠及山梨酸钾，由于苯甲酸钠价格便宜，在碳酸饮料等饮品中作为防腐剂被广泛使用。

但苯甲酸钠用量过多会对人体肝脏产生危害, 甚至致癌。

为确保食品添加剂的绝对安全使用, 根据GB2760- 1996国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。

在中国大多数地区,碳酸饮料生产企业众多,规模较大,对防腐剂苯甲酸钠的添加控制水平较高,然而也有可能会发生防腐剂苯甲酸钠超标的情况。

北京化工大学检测雪碧中的苯甲酸含量实验方案实验0901 王昊刘嘉林2010/4/25实验目的：用简单可行的办法定量检测雪碧中的苯甲酸含量，并与国家标准进行对比。

实验原理：将雪碧中的苯甲酸钠酸化为苯甲酸，先蒸发浓缩，再用萃取的方法将苯甲酸富集起来，最后用酸碱滴定的方法测定苯甲酸含量。

苯甲酸沸点为249℃，水的沸点为100℃，因此在蒸发过程中苯甲酸基本不会挥发。

柠檬酸的分解温度为175℃，在200℃左右的环境中加热可以保证苯甲酸不挥发且柠檬酸分解完全。

利用这个原理可以除去柠檬酸。

实验仪器和试剂：仪器：500ml容量瓶，酒精灯，石棉网，大烧杯，碱式滴定管，5ml移液管，100ml量筒，温度计，长直导管等试剂：待检测雪碧5L，草酸固体，2mol/L NaOH，2mol/L HCl，乙醚（分析纯），中性乙醇（分析纯），甲基橙，酚酞，甲基硅油等实验步骤：一．苯甲酸的富集与柠檬酸的除去：1．取500ml雪碧，置于烧杯中，在石棉网上加热至煮沸，直至剩余少量液体为止。

2．重复第一步操作，至处理完5L雪碧为止（约共剩余小于1L液体）。

3．向蒸馏后的剩余液体中加入2mol/L 10ml HCl 酸化。

4．将酸化后的溶液分几次分装在分液漏斗中，用乙醚进行反复，多次萃取。

5．加热萃取液，除去乙醚得苯甲酸溶液。

6．将得到的苯甲酸在如右图所示的装置中用200℃左右的油浴恒温加热10min，使柠檬酸基本分解。

7．将最终得到的苯甲酸溶于中性乙醇中。

二．NaOH滴定溶液的配制与标定：1．用分析天平称取0.09g——0.135g的草酸固体，溶于去离子水中，在500ml容量瓶中定容。

并计算草酸溶液浓度。

2．用移液管移取2mol/L NaOH溶液5ml，用乙醇稀释至500ml。

再用量筒量取稀释后的溶液100ml，稀释到200ml。

得到约0.01mol/L的NaOH溶液3．取50ml草酸溶液，以甲基橙作指示剂用配好的NaOH 乙醇溶液滴定草酸，滴定三次，取平均值，计算出NaOH溶液浓度。

实验题目: 食品及化妆品中防腐剂的测定姓名：李宇专业：应用分析班级： 111 学号：实验日期：2014年 6 月 19日成绩：摘要：饮料中苯甲酸钠添加含量不仅影响着企业的品牌效益还会影响到消费者安全问题，然而目前国家标准中苯甲酸钠含量的测定方法不太适合测定实验研究，本实验提供了两种比较实用便捷和低成本的分析测定技术。

关键词：饮料苯甲酸钠紫外分光光度计引言：为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。

我国规定了苯甲酸（盐）在饮料中最大使用量为0.2g/kg。

苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。

从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。

本实验测定脉动中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm 处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

2实验2.1仪器与试剂紫外-可见光谱仪；1cm石英比色皿；苯甲酸（AR）；市售饮料2.2实验步骤取脉动饮料2.0ml于100ml容量瓶容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，再吸取两个5ml饮料分别于两个250ml容量瓶中定溶至刻度，然后分别在紫外分光光度计中进行分析。

3结果和讨论样品平均浓度为0.31448g/l4 结论应用紫外光谱法测定苯甲酸钠的含量，具有精密度高、稳定性好、短时间内就可完成等优点，为饮料中苯甲酸钠含量的检测提供了一种实用的定量分析技术，对于保障食品安全具有重要意义5注意事项1.试样和标准工作曲线的实验条件应完全一致。

2. 不同牌号的饮料中苯甲酸钠含量不同，移取时样品量可酌情增减。

毕业论文开题报告化学工程与工艺雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究一、选题的背景、意义食品的营养丰富，极易受微生物污染而腐败变质。

含乳饮料含有丰富的蛋白质类及多种维生素，为了延长保存期和改善口味，一般在产品中添加一些防腐剂，防腐剂便成为重要的食品添加剂之一，防止食品腐败变质，延长食品保存期，抑制食品中微生物繁殖；添加剂在食品加工过程中被广泛使用。

《食品安全法》于2009年6月1日起颁布实施，食品安全引起社会各界的广泛关注，苯甲酸是有机化学防腐剂，添加到食品中用于抑制微生物、糖的生长，但使用量过大对人体会造成一定危害。

能引起哮喘等一系列过敏症状。

因此对食品中苯甲酸的含量进行检测有重要意义。

二、相关研究的最新成果及动态高效液相色谱法测定酸奶中苯甲酸。

高效液相色谱法直接测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠，在国际(GB／TS009 28—1996)和(GB／TSO09 29—1996)方法中只适用于汽水、果汁、配制酒等液体样品．而对固体或半固体的样品前处理多采用有机溶剂提取，操作过程繁琐．有机溶剂对操作者的健康造成危害。

HPLC测定含乳饮料中的山梨酸和苯甲酸含量在我国食品卫生标准对其应用范围和使用限量都有明确的规定[1 ]对文献报道了很多食品添加剂的分析方法,如薄层色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法及传统的高效液相色谱法。

高效液相色谱法在对多种添加剂同时分析方面有其十分有利的条件。

在高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中苯甲酸时，测量速度较慢，往往一针需要7—10 min，做一条工作曲线需要两小时左右，再测样品时仪器的灵敏度发生了改变，所以国家标准采用单点校正法测定，尽量缩短测量时间。

标准溶液的浓度尽量与待测溶液的浓度接近，可以消除仪器非线性影响，否则不在同一·线性范围内，可能引起较大的不确定度，而单点校正法并没有考虑线性影响，认为是绝对线性，不存在不确定度的。

根据小分量不确定度不足最大分量不确定度的1／3时，小分量不确定度可以忽略不计的原则，在本实验中，对于玻璃器皿的膨胀系数、A级吸量器具的不确定度均可以忽略，但对于样品预处理时使用的具塞比色管等给实验带来较大的不确定度，实验时必须加以控制，通过这样分析来源后，对于我们评定HPLC测量其他成分有很大的帮助。

紫外-可见分光光度计法测定饮料中苯甲酸钠的含量一、实验目的1.了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV-2501的操作。

2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。

3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。

二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，根据GB2760- 1996规定，碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。

苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。

根据苯甲酸（钠）在225nm 处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸钠的含量。

三、仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV-2501（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶。

2.NaOH溶液（0.1mol/L）3.苯甲酸钠标准溶液的配制(1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。

该贮备液可置于冰箱保存一段时间。

(2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。

(3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于5个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/L NaOH溶液1.00mL后，用蒸馏水稀释定容。

得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。

4.雪碧（500mL）5.蒸馏水四、实验步骤1.吸收曲线的绘制（1）系列标准溶液的配制50mL瓶编号 1 2 3 4 5 6100.0mg/L苯甲酸钠标准溶液体积（mL）0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.000.1mol/L NaOH溶液体积（mL） 1.00用蒸馏水容量50.0系列标准溶液浓度（mg/L）0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 记录吸光度A值（2）吸收曲线的测定用某一浓度较高的标准液如4号或5号溶液，于210nm~300nm波长范围内扫描，即的苯甲酸钠的吸收曲线。

分析化学实验报告实验名称：反相高效液相色谱法测定雪碧中的苯甲酸专业：化学教育班级： 11化学班姓名：指导教师：郭老师日期： 2013.9.7一、实验目的1、学习高效液相色谱仪的操作。

2、了解高效液相色谱法测定苯甲酸的基本原理。

3、掌握高效液相色谱法进行定性及定量分析的基本方法。

一、实验原理苯甲酸为具有苯或甲醛的气味的鳞片状或针状结晶，具有苯或甲醛的臭味。

熔点122.13℃，沸点249℃，相对密度1.2659（15/4℃）。

在100℃时迅速升华，它的蒸气有很强的刺激性，吸入后易引起咳嗽。

微溶于水，易溶于乙醇、乙醚等有机溶剂。

苯甲酸是弱酸，比脂肪酸强。

苯甲酸是重要的酸型食品防腐剂。

在酸性条件下，对霉菌、酵母和细菌均有抑制作用，但对产酸菌作用较弱。

抑菌的最适pH值为2.5～4.0，一般以低于pH值4.5～5.0为宜。

在食品工业用塑料桶装浓缩果蔬汁，最大使用量不得超过2.0g/kg；在果酱(不包括罐头)、果汁(味)型饮料、酱油、食醋中最大使用量1.0g/kg；在软糖、葡萄酒、果酒中最大使用量0.8g/kg；在低盐酱菜、酱类、蜜饯，最大使用量0.5g/kg；在碳酸饮料中最大使用量0.2g/kg。

用高效液相色谱法将饮料中的苯甲酸与其它组分（如：柠檬酸（钠）、蔗糖等）分离后，将已配制的浓度不同的苯甲酸标准溶液进入色谱系统。

如流动相流速和泵的压力在整个实验过程中是恒定的，测定它们在色谱图上的保留时间tR 和峰面积A后，可直接用tR定性，用峰面积A作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定饮料中的苯甲酸含量。

三、仪器和试剂1、Agilent 1220高效液相色谱仪。

2、色谱柱：Kromasil C18，5µ 150×4.6mm。

3、流动相：75%甲醇（色谱纯）+25%PH=3.3的磷酸缓冲溶液（过三次）。

4、苯甲酸标准贮备溶液：准确称取0.0109g含量99.5%苯甲酸，用过三次的蒸馏水溶解，定量至50mL容量瓶中，并稀释至刻度。