高效大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的临床新用途摘要粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF）是一个具有多项潜能的造血生长因子，因为它不仅能够促进造血前体细胞的增殖、分化和成熟，而且对其他的细胞，如抗原递呈细胞（APC）、成纤维细胞、角质细胞、皮肤粘膜细胞等，均有着不同程度的刺激作用。

由于GM-CSF对骨髓抑制的修复作用，目前在临床上的用途主要是用于治疗恶性肿瘤因放、化疗所致的白细胞减少症，有关这方面的报道已有很多，GM-CSF在升高白细胞方面的作用已经比较肯定。

近年来有许多研究报道表明，GM-CSF对恶性肿瘤放、化疗后所致的口腔粘膜溃疡有着很好的治疗作用，以及在抗病毒、抗真菌感染等的治疗中也有着良好的疗效。

关键词重组人粒细胞- 巨噬细胞集落刺激因子；临床新用途《中国书资料分类法》分类号R730.5; R456自1985年Sieff［1］等发表第1篇有关重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulatingfactor,rhGM-CSF）的文章以来，rhGM-CSF的临床用途逐渐引起了各位学者的兴趣，这些年来有关rhGM-CSF研究报道的文献每年均在千篇左右。

作为一个多潜能的造血生长因子，它的主要临床应用是促进骨髓造血，目前在临床上rhGM-CSF已成功地用于治疗恶性肿瘤放、化疗后所致的白细胞减少症，以及用于骨髓移植、再生障碍性贫血和某些存在白细胞低下的免疫缺陷性疾病的治疗等。

近些年的研究发现，GM-CSF不仅能够作用于造血干、祖细胞促进骨髓造血，而且还作用于目前已知体内功能最强的抗原提呈细胞——树突状细胞，以促进免疫应答，调节免疫反应［2，3］。

另外，GM-CSF还作用于角质细胞、成纤维细胞、粘膜细胞等。

集落刺激因子研究进展集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)是在进行造血细胞体外研究中发现的一类细胞因子，能刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段的造血祖细胞增殖分化，并在半固体培养基中形成相应细胞集落。

从广义上，凡是刺激造血的细胞因子都可以统称为CSF随着研究的深入，发现集落刺激因子可以动员骨髓中中性粒细胞迁移至外周血中；促进骨髓中中性粒细胞前体分化和增殖；增强中性粒细胞的功能。

主要包括IL-3、IL-7、Flt3L、GM-CSFM-CSF G-CSF SCF EPO和TPO 等。

白介素IL-3可刺激皮肤上皮细胞、CD4-CD8-TC a B细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞的增殖，阻值肥大细胞发生程序性死亡。

干细胞因子(Stem Cell Factor, SCF)又称肥大细胞因子，是c-kit的配体，主要以跨膜型、分泌型形式存在。

SCF主要由骨髓基质细胞产生。

SCF促进IL-3依赖的早期造血前体细胞的增殖和分化，促进肥大细胞增殖，促进黑色素母细胞的增殖。

Flt3配体存在形式分为跨膜型、分泌型，主要来自基质细胞。

Flt3配体刺激原始造血干细胞的增殖和分化。

红细胞生成素(Erythropoietin , EPO是一种刺激红细胞产生的糖蛋白，主要源自肾小管周围间质细胞。

EPO促进骨髓红细胞前体分化成为成熟红细胞。

EPO特异的作用于红细胞样前体，对其它细胞系几乎没有作用。

EPO刺激骨髓中红细胞样前体细胞产生红细胞样集落形成单位和红细胞样爆发形成单位。

血小板生成素(Thrombopoietin , TPO)，主要来自平滑肌细胞及内皮细胞。

TPO刺激骨髓巨核细胞分化成熟为血小板。

表：集落刺激因子基本概述名称分子量细胞来源靶细胞主要功能T细胞未成熟祖细胞诱导多能和定向干细胞的增殖和分化，IL-320-26诱导中性粒、嗜碱性粒、单核细胞活化、增殖、分化纤维母细胞，骨髓基质未成熟祖细胞促进淋巴细胞的生长和分化IL-725细胞T细胞，内皮细胞，单未成熟祖细胞，刺激骨髓各系前体细胞生长分化，刺激核吞噬细胞，纤维母细定向祖细胞，单骨髓前体细胞向粒细胞和单核细胞分GM-CSF22胞核吞噬细胞化，促进粒细胞和单核吞噬细胞分化，促进肿瘤细胞生长M-CSF40单核吞噬细胞，内皮细定向祖细胞刺激骨髓单核吞噬细胞分化成熟胞，纤维母细胞单核吞噬细胞，内皮细定向祖细胞促进粒细胞分化G-CSF19胞，纤维母细胞EPO肾细胞刺激红细胞前体细胞分化成熟SCF24骨髓基质细胞激活多能干细胞，诱导肥大细胞分化TPO60平滑肌细胞，内皮细胞刺激骨髓巨核细胞分化成熟巨噬细胞集落刺激因子(Marcrophage CSF, M-CSF),又称为CSF-1最初发现其存在于血清、尿或其它体液中，主要由单核-巨噬细胞、淋巴细胞、内皮细胞、纤维母细胞、上皮细胞等产生。

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子实验动物研究进展
潘伯荣;梁国栋
【期刊名称】《浙江医学情报》
【年(卷),期】1995(000)004
【摘要】粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granul—ouyte—macrophage colony—stimulatingfactor,GM—CSF)已通过基因重组,制得纯化的 rhGM—CSF,并显示出良好的应用前景。

大量实验研究表明,rhGM—CSF 是所有粒细胞的全刺激物(pan—stimulator),有多种刺激造血。

【总页数】5页(P9-12,8)
【作者】潘伯荣;梁国栋
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R392.11
【相关文献】
1.粒细胞巨噬细胞集落刺激因子作为预防及治疗性疫苗佐剂的研究进展 [J], 董向锋;周兴军
2.粒细胞巨噬细胞集落刺激因子作为免疫佐剂在肿瘤疫苗中的研究进展 [J], 郭银燕;赵伟;文剑
3.SARS-CoV-2易感实验动物研究进展 [J], 周小青;唐成程;邹庆剑
4.实验动物抑郁模型研究进展 [J], 宇庆迎;杨莹;刘墨林;褚玉鹤;夏小雯;薛玲
5.男性不育实验动物模型建立的研究进展 [J], 李怡佳;边艳超;李硕;肖瑞
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）水平。

用纯化的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF），再与HRP 标记的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片（48） 2 片（96）密封袋 1 个 1 个酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存标准品：45ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子说明书注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子用于防治肿瘤病人因化疗、放疗引起的白细胞减少。

下面是店铺整理的注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子说明书，欢迎阅读。

注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子商品介绍通用名：注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子生产厂家: 哈尔滨里亚哈尔生物制品有限公司批准文号：国药准字S1*******药品规格：150μg,冻干粉药品价格：￥159元注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子说明书【通用名】注射用重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(γhGM-CSF)【商品名】里亚尔【英文名】LEUBENE【汉语拼音】Liyaer【主要成分】活性成份：重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(γhGM-CSF)。

非活性成份：甘露醇、氨化钠、磷酸氯二钠、磷酸二氯钾、聚乙二醇(4000)、人血白蛋白。

【性状】白色无菌冻干粉针，易溶于水、pH6.9-7.1。

【适应症】用于防治肿瘤病人因化疗、放疗引起的白细胞减少。

【用法用量】癌症化疗或放疗后。

3-10µg/kg/d，皮下注射持续5-7天(注意：本药不应与抗癌化疗药同时使用，应在化疗停止24小时后可使用)，根据白细胞回升速度和水平，确定维持量。

用1ml的无菌生理盐水溶解(切勿剧烈振荡)，可在腹部、大腿外侧或上臀三角肌处进行皮下注射(要求：注射后局部皮肤隆起约1cm2，以便药物慢慢吸收)。

【药理作用】里亚尔作用于造血祖细胞，促进其增殖和分化，其很重要作用是刺激粒、单核巨噬细胞成熟，促进成熟细胞向外周血释放，并能促进巨噬细胞及嗜酸性细胞的多种功能。

吸收、分布、消除，自愿者皮下注射3、10或20µg/kg和静注3至30µg/kg可观察到血浓峰值和曲线下面积(AUC)随剂量的增大而增高。

皮下注射里亚尔，在3-4小时血浓达到峰值，静注里亚尔的消除半衰期为1-2小时，皮下注射则为2-3小时。

4032 ｜中国组织工程研究｜第25卷｜第25期｜2021年9月不同诱导极化方式对大鼠骨髓来源巨噬细胞增殖、凋亡及吞噬能力的影响李 莉1，2，卓 瑾1，2，郑 玲3，周 玲4，王启松1，2，罗 岚2，骆 凯2文题释义：骨髓源性巨噬细胞：人骨髓来源巨噬细胞分离自骨髓，骨髓细胞中存在未分化的巨噬细胞前体，通过加入巨噬细胞集落刺激因子来分化培养出巨噬细胞。

巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。

巨噬细胞属不繁殖细胞群，在适宜条件下可生活两三周，多用做原代培养，难以长期生存。

吞噬作用：高等动物具有一些特化的吞噬细胞，包括巨噬细胞和中性粒细胞。

它们通过吞噬菌体摄取和消灭感染的细菌、病毒、损伤的细胞、衰老的红细胞。

吞噬作用是生物体最古老的，也是最基本的防卫机制之一。

对于其要消灭的对象无特异性，在免疫学中称之为非特异性免疫作用。

摘要背景：经典激活巨噬细胞和替代激活巨噬细胞具有不同的表型和功能，目前尚鲜有研究探讨不同诱导方式对骨髓来源巨噬细胞生物学功能的影响。

目的：探讨不同诱导极化方式对大鼠骨髓来源巨噬细胞生物学行为的影响。

方法：通过原代细胞形态学观察、瑞氏染色和流式细胞术对体外分离培养的大鼠骨髓来源巨噬细胞进行鉴定。

经γ-干扰素和脂多糖、白细胞介素4分别诱导激活24 h ，倒置显微镜观察细胞形态，Real time-PCR 检测细胞表面标记物Nos2和Arg1的表达，CCK-8法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡水平，中性红染色鉴定细胞吞噬功能。

结果与结论：经γ-干扰素和脂多糖联合刺激的骨髓来源巨噬细胞高表达M1型细胞表面标记物Nos2，可促进细胞凋亡并且降低细胞的吞噬功能；而经白细胞介素4刺激的骨髓来源巨噬细胞则高表达M2型细胞表面标记物Arg1，提高细胞增殖和吞噬能力，抑制细胞凋亡。

结果表明，不同诱导极化方式可影响骨髓来源巨噬细胞的生物学行为。

关键词：骨髓；巨噬细胞；1型巨噬细胞；2型巨噬细胞；极化；γ-干扰素；脂多糖；白细胞介素4 缩略语：骨髓来源巨噬细胞：bone marrow-derived macrophages ，BMMsEffects of different induced polarization methods on the proliferation, apoptosis and phagocytosis of rat bone marrow-derived macrophagesLi Li 1, 2, Zhuo Jin 1, 2, Zheng Ling 3, Zhou Ling 4, Wang Qisong 1, 2, Luo Lan 2, Luo Kai 21Fujian Key Laboratory of Oral Diseases & Fujian Provincial Engineering Research Center of Oral Biomaterial & Stomatological Key Laboratory of Fujian College and University, Fuzhou 350002, Fujian Province, China; 2Institute of Stomatology, Fujian Medical University & Center of Oral Tissue Engineering, Fujian Medical University & Hospital of Stomatology, Fujian Medical University, Fuzhou 350002, Fujian Province, China; 3Fujian Armed Police Corps Hospital, Fuzhou 350003, Fujian Province, China; 4Fujian Provincial Governmental Hospital, Fuzhou 350003, Fujian Province, Chinahttps:///10.12307.2021.016投稿日期：2020-07-13送审日期：2020-07-13采用日期：2020-08-22在线日期：2020-12-31中图分类号： R459.9；R394.2；R318文章编号：2095-4344(2021)25-04032-06文献标识码：B1福建省口腔疾病研究重点实验室，福建省口腔生物材料工程技术研究中心，福建省高校口腔医学重点实验室，福建省福州市 350002；2福建医科大学口腔医学研究院，福建医科大学口腔组织工程研究中心，福建医科大学附属口腔医院，福建省福州市 350002；3福建武警总队医院，福建省福州市 350003；4福建省级机关医院，福建省福州市 350003第一作者：李莉，女，1994年生，福建省尤溪县人，汉族，博士研究生，主要从事牙周病方面的研究。

粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，GM-CSF）主要由T细胞和巨噬细胞产生，能够诱导粒细胞前体和巨噬细胞前体细胞呈集落生长，故简称为粒－巨细胞集落刺激因子。

GM-CSF有严格的种属特异性，其在体内的主要生物学作用是维持粒细胞系和单核细胞系细胞的存活、促进生长、诱导分化和增强吞噬功能和杀菌作用；诱导树突状细胞成熟和功能分布。

在体外实验，主要用于培养树突状细胞和某些GM-CSF依赖的细胞系。

本品是利用基因重组技术表达的小鼠源性的细胞因子。

由于GM-CSF 具有严格的种属特异性，本品只能用于培养小鼠的树突状细胞和小鼠来源的细胞系，也不能用人的GM-CSF替代。

来源：含小鼠GM-CSF基因质粒的E. coli。

分子量：14.8kDa，125个氨基酸。

纯度：采用SDS-PAGE银染法，纯度>98%内毒素：<0.03EU/μg活性：小鼠细胞因子依赖的细胞株（FDC-P1）增殖试验，ED50 为0.1 - 0.3 ng/mL；采用C57BL/6小鼠股骨骨髓细胞培养法测定克隆形成能力，比活性可国外著名公司的同类产品媲美。

保存：冻干粉在－20℃～－70℃中的保存期超过3年；稀释液（蛋白总浓度>50µg/ml）在2℃～4℃为1个月，在－20℃～－70℃中为三个月。

注意事项：建议用作细胞培养用时，用含10％的小牛血清的完全培养基溶解和稀释。

避免反复冻融。

absin粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）：小鼠股骨骨髓来源的树突状细胞培养：10ng/ml的rmGM-CSF。

采用我司细胞因子培养的小鼠股骨骨髓来源的树突状细胞见下图。