碱性嫩黄O分子印迹聚合物的固相萃取性能研究

摘要:分子印迹技术是制备对特定目标分子具有特异性识别能力的高分子材料的技术，所制备的高分子材料被称为分子印迹聚合物.分子印迹聚合物因具有预定性、识别性和实用性三大优点己]’一泛应用于分离、模拟抗体与受体、催化剂以及仿生传感器等方面和领域，显示出了]’一泛的应用前景.作者对分子印迹技术的发展历史、基木原理、分类、应用现状以及一些新的研究热点进行了综述.关键词:分子印迹技术;分子印迹聚合物;研究进展1分子印迹技术的基本原理分子印迹是制备对特定目标分子具有特异性识别能力的高分子材料的过程，目标分子又叫作模板分子或者印迹分子.分子印迹技术则是指为了获得在空间和结合位点上与目标分子相匹配的高分子材料的制备技术川.分子印迹聚合物的制备过程一般包括三个过程:cm首先根据模板分子选择合适的功能单体，并在致孔溶剂中使功能单体与模板分子通过两者官能团之间的相互作用(包括共价、氢键及其他一些弱作用)形成某种可逆复合物;(2)加入交联剂，在引发剂的作用下引发单体进行光聚合或热聚合，将模板分子与功能单体形成的可逆复合物“冻结”起来，使得模板分子被包埋在所形成的刚性高分子材料内;(3)采用物理或化学的方法将模板分子从高分子材料中洗脱出来，在模板分子所占据的空间位置和结构处遗留下来一个三维孔穴，该孔穴在尺寸、形状和结构方而与模板分子相匹配，同时由于功能单体具有与模板分子官能团互补的功能性官能团，因此所合成的分子印迹聚合物能够特异性的与模板分子进行识别和结合(见图1).因为分子印迹聚合物是根据模板分子“量身定做”的，因此分子印迹聚合物对模板分子(或结构类似物)具有较高的特异性识别能力，这种识别类似于生物学中酶和底物之间的相互作用，并且这种识别能力可以和(单克隆)抗体相媲美，分子印迹聚合物被MOSBACH教授形象地称为“塑料抗体”。

2分子印迹技术的分类按照功能单体与模板分子之间结合方式以及作用力的不同，分子印迹技术分为预组装法和自组装法两种(图2)，在两者的基础上又衍生出了结合两种基本方法特点的结合法.2.i预组装法(又名共价法)在预组装法中，模板分子以可逆共价键的形式与功能单体结合并形成相应的复合物，复合物与交联剂交联聚合形成相应的高分子聚合物，最后通过化学方法使可逆共价键断裂而除去模板分子并得到相应的分子印迹聚合物.预组装法的优点是分子印迹聚合中的结合基团空间位置上精确固定并排列，使得所制备的分子印迹聚合物对目标化合物的结合力较强，专一性较高.其缺点是由于共价键作用较强，在分子识别和再生过程中结合和解离速度较慢，达到热力学平衡所需时间较长，不适于快速识别与分析.到目前为{卜，采用预组装的方法，研究人员己经成功制备腺A}吟、芳香化合物、糖类及其衍生物的分子印迹聚合物。

分子印迹固相萃取小柱
分子印迹固相萃取小柱是一种应用了分子印迹技术的固相萃取柱。

这种小柱主要用于分离和纯化目标分子，例如在样品预处理、色谱分析、生物医药等领域中。

分子印迹技术是一种通过高分子聚合物的合成和识别过程，制备出对特定目标分子具有特异性识别能力的聚合物的技术。

这种技术可以用于制备分子印迹固相萃取小柱，通过对目标分子的特异性识别，实现对目标分子的高效分离和纯化。

分子印迹固相萃取小柱的主要优点包括：
1. 特异性识别：由于分子印迹技术的原理，小柱可以对目标分子进行特异性识别，从而实现高效分离和纯化。

2. 高吸附容量：由于聚合物的合成过程中可以控制聚合物的结构和性质，因此可以制备出具有高吸附容量的分子印迹固相萃取小柱。

3. 可重复使用：与常规的吸附剂相比，分子印迹固相萃取小柱具有较高的耐用性，可以在多次使用后仍保持良好的性能。

4. 操作简便：使用分子印迹固相萃取小柱进行分离和纯化操作简便，可以快速地完成样品的处理。

总之，分子印迹固相萃取小柱是一种高效、特异性的分离和纯化工具，具有广泛的应用前景。

如需了解更多信息，建议咨询专业人士。

分子印迹固相萃取什么是分子印迹固相萃取？分子印迹固相萃取是一种基于分子印迹技术的固相萃取方法。

分子印迹技术是一种通过特异性识别目标分子的方法，利用模板分子在聚合物基质中形成特定的空腔结构，从而实现对目标分子的选择性识别和提取。

分子印迹固相萃取的原理是利用具有亲和性的分子印迹聚合物固定在固相载体上，通过分子印迹聚合物与目标分子的特异性相互作用来实现对目标分子的萃取和富集。

分子印迹固相萃取的应用领域分子印迹固相萃取技术在分析化学领域具有广泛的应用，主要包括以下几个方面：1. 环境监测分子印迹固相萃取可以应用于环境监测中对水、土壤和大气中的有机污染物的富集和分析。

通过选择合适的模板分子和功能单体，可以实现对特定有机污染物的选择性富集，提高样品的灵敏度和分析效果。

2. 食品安全检测食品中的残留农药、兽药和重金属离子等有害物质对人体健康具有潜在风险。

利用分子印迹固相萃取技术可以实现对食品中有害物质的选择性富集和分析，提高食品安全检测的准确性和可靠性。

3. 药物分析在药物分析领域，分子印迹固相萃取可以用于药物代谢产物的富集和分离，以及药物在体内的动力学研究。

通过选择合适的模板分子和功能单体，可以实现对药物分子的高选择性和高灵敏度的分析。

4. 生物分析分子印迹固相萃取在生物领域的应用主要集中在蛋白质和肽段的富集和分离领域。

通过选择合适的模板分子和功能单体，可以实现对特定蛋白质和肽段的选择性富集和分析，为蛋白质组学研究和生物分析提供更好的方法和手段。

分子印迹固相萃取的优势和挑战分子印迹固相萃取技术具有以下几个优势：1.高选择性：分子印迹聚合物可以通过模板分子的引导和识别实现对目标分子的高选择性富集和分离，减少其它干扰物质的干扰。

2.高灵敏度：由于分子印迹聚合物对目标分子具有特异性识别和富集能力，因此可以实现对目标分子的高灵敏度分析，提高检测的准确性和可靠性。

3.萃取效果稳定：由于分子印迹聚合物具有良好的耐化学性和热稳定性，因此可以在不同条件下保持良好的萃取效果，具有较好的重复性和稳定性。

分子印迹 - 固相萃取法选择性分离大黄酸的研究段玉清;张海晖;徐菲菲;闫永胜;李金凤;梁凯【期刊名称】《林产化学与工业》【年(卷),期】2009(29)5【摘要】以大黄酸(RH)为印迹分子,大孔壳聚糖为功能载体,甲基丙烯酸为功能单体,制备大黄酸的分子印迹聚合物(MIP).通过固相萃取和HPLC评价MIP对大黄酸的选择性分离.结果MIP与非印迹聚合物(NIP)相比,对大黄酸表现出较高的选择性和识别性.使大黄酸的质量分数由16.55%提高到95.12%.并利用Freundlich和Langmuir等温吸附模型描述MIP对大黄酸吸附的平衡等温线.%A molecularly imprinted polymer (MIP) was prepared using rhein (RH) as imprinted molecule,macroporous chitosan beads as functional matrix and methacrylic acid as functional monomer.The obtained molecularly imprinted polymers were evaluated by solid phase extraction and HPLC with respect to their selective recognition ability for rhein.MIP exhibited higher selectivity and recognition ability for rhein in a mixture of RH-MIP than non-imprinted polymer (NIP),and the content of rhein was increased from 16.55 % to 95.12 %.Langmuir and Freundlich adsorption models were applied to describe the equilibrium isotherms of rhein adsorbed by MIP.【总页数】6页(P35-40)【作者】段玉清;张海晖;徐菲菲;闫永胜;李金凤;梁凯【作者单位】江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013【正文语种】中文【中图分类】TQ351.0【相关文献】1.应用分子印迹-固相萃取法提取中药活性成分非瑟酮 [J], 李礼;胡树国;何锡文;李文友;陈朗星;张玉奎2.分子印迹磁固相萃取法测定饮料中咖啡因含量 [J], 李艳;石亚亭;李德蓉;蒋淑敏;张也;杜黎明3.分子印迹固相萃取法提取花生壳中木犀草素 [J], 肖淑娟;李红霞;于守武4.利用分子印迹固相萃取法进行竹红菌素精制的研究 [J], 史文玉;张同存5.左氧氟沙星分子印迹膜固相萃取选择性分离氧氟沙星 [J], 邴乃慈; 许振良; 王学军; 杨座国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

分子印迹聚合物固相萃取及其应用摘要：分子印迹作为制备对某一特定的分子（印迹分子或模板分子）具有特异性识别的聚合物的过程，在分离分析、仿生传感器和模拟酶催化等方面具有重要的应用前景。

关键词：分子印迹分子印迹聚合物固相萃取应用前景分子印迹聚合物（molecularly imprinted polymers ，mips）是一种人工合成的具有分子识别能力的新型高分子材料，合成此聚合物的技术是在pauling 的“抗原--抗体”作用学说以及dickey 的“专一性吸附”理论的启发下建立起来的。

此外，它具有稳定的物理化学特性和机械性能，能耐高温、高压；抵抗酸、碱、高浓度离子及有机溶剂的作用，并可以反复使用。

近十几年来，利用基于mips 的技术从环境样品（水和土壤）和生物样品（血液、尿液、动物肝脏、植物）中萃取分析物受到越来越多的关注，并取得了良好的效果，本文主要综述分子印迹聚合物的制备及其在固相萃取中的应用。

一、分子印迹聚合物的制备原理mips 制备的基本原理是，在适当的溶剂中，经交联剂作用，模板分子与一种或几种功能单体形成含有模板分子的聚合物母体，然后通过物理或化学途径除去母体中的模板分子，最终得到分子印迹聚合物（mips）。

二、分子印迹聚合物的制备方法按照单体与模板分子结合方式不同，分子印迹主要可以分为预组织法和自组装法两种基本方法（一）预组织法合成分子印迹聚合物预组织法（preorganization）又称共价法，在此方法中，印迹分子先通过共价键与功能单体相结合，形成单体- 模板分子复合物[1]，然后加入交联剂交联聚合，聚合后再通过化学方法使共价键断裂而去除印迹分子。

（二）自组装法合成分子印迹聚合物在制备分子印迹聚合物的过程中，印迹分子与功能单体首先通过一种或几种非共价键作用自组装成具有多点相互作用和确定关系的复合物[2]，再加入交联剂和引发剂，聚合后这种相互作用被固定下来，然后通过淋洗除去印迹分子，如此就可以得到分子印迹聚合物。

分子印迹聚合物论文：分子印迹聚合物芹菜素固相萃取吸附特性高效液相色谱【中文摘要】分子印迹技术是以目标分子为模板分子,加入交联剂,使得功能单体与模板分子进行聚合反应,反应完成后将模板分子洗脱除去,获得对模板分子具有高度选择性的一种交联高聚物,这种交联高聚物称为分子印迹聚合物(Molecular Imprinting Polymers,MIPs)。

因其卓越的识别性和选择性被广泛应用于环境、药物、化工、食品卫生等众多领域,近年来在天然产物活性成分分离中的应用也越来越受到人们的关注。

1.采用本体聚合法合成芹菜素(Apigenin,API)分子印迹聚合物,优化其制备工艺条件,发现以a-甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,四氢呋喃:丙酮(V/V, 8:2)为致孔剂制得的印迹聚合物对底物有很好的选择性,得到最佳的聚合配比为n(API):n(MAA):n(EDMA)=1:8:70,在此基础上研究了模板聚合物的结合动力学、吸附热力学和选择特性,Scatchard方程分析得在研究的浓度范围内形成了二类不同的结合位点,经计算其平衡离解常数分别为6.60×10-5和1.74×10-4mol/L,对模板分子的最大表观结合量分别12.90和28.30umol/g。

吸附动力学方程式可用Lagergren二级速率方程表示,并且吸附速率常数随着温度的升高而增大。

等温吸附规律可用Freundlich方程表示,适当地升高温度有利于吸附,吸附过程为熵驱动的吸热、熵增的自发过程,属物理吸附范畴。

2.西芹和本芹的叶片与叶柄经甲醇回流提取,高效液相色谱(HPLC)分析知西芹叶片、叶柄中芹菜素的含量分别为8.635mg/100g、1.348mg/100g,本芹叶片、叶柄中芹菜素的含量分别为1.734mg/100g、0.567mg/100g。

采用回流、索式、超声三种提取方法对西芹叶片中芹菜素进行提取,比较不同的提取方法对提取物中芹菜素含量的影响,结果发现,经超声提取的西芹叶片中芹菜素含量为9.316mg/100g,提取效率明显高于其它两种方法。

分子印迹技术基本原理及应用[摘要]：分子印迹是制备具有分子特异识别功能聚合物的一种技术.本文介绍了分子印迹技术的基本原理和特点，综述了该技术在色谱、固相萃取、药物分析、生化分离、生物传感器技术以及生物催化方面的研究与应用，具体介绍该技术的几个应用实例。

[关键词]分子印迹技术；基本原理；特点；综述；应用实例目录分子印迹技术基本原理及应用 (1)[摘要] (1)1.分子印迹技术的基本概念、基本原理和特点 (1)1.1分子印迹技术的基本概念 (1)1.2分子印迹技术的基本原理 (2)1.3分子印迹技术的特点 (2)2.分子印迹技术的应用范围和应用实例介绍 (4)2.1分子印迹在色谱分离技术中的应用 (5)2.2分子印迹技术在固相萃取中的应用 (8)2.3 分子印迹技术在药物分析中的应用 (9)2.4 分子印迹技术在模拟酶催化中的应用 (9)2.5 分子印迹技术在传感器中的应用 (10)3.总结 (11)参考文献 (12)1.分子印迹技术的基本概念、基本原理和特点1.1分子印迹技术的基本概念分子印迹，又称为分子烙印(molecular imprinting)，是源于高分子化学、材料化学、生物化学等学科的一门交叉学科技术。

分子印迹技术(molecular imprinting technique，MIT)也叫做分子模版技术，属于超分子化学研究范畴，是指某以特定的目标分子（模版分子、印迹分子或烙印分子）为模版，植被对该分子具有特异选择性的聚合物的过程，通常被描述为制备与识别“分子钥匙”的人工“锁”技术。

[1]1.2分子印迹技术的基本原理分子印迹技术原理如图1所示。

当印迹（模版）分子与聚合物单体接触时会形成多重作用点，通过聚合过程这种作用就会被记下来，当印迹分子去除后，聚合物就形成与印迹分子空间构型相匹配的、具有多重作用点的空穴，这样的空穴就对印迹分子极其类似物具有选择性特性。

图1 分子印迹技术原理MIPs的制备过程主要由以下三步构成：①在适当的介质中，具有适当功能基的功能单体通过与印迹分子间的相互作用聚集在印迹分子周围，形成主客体配合物；②通过功能单体与交联剂共聚，将主客配合物固定；③通过一定的物理或化学方法洗脱印迹分子，得到印迹聚合物，其中含有与印迹分子形状和功能基团排列相匹配的空穴。

分子印迹聚合物的制备及固相萃取性能研究的开题报告
一、研究背景
分子印迹技术是一种基于特异性分子识别的分析化学方法，在药物检测、环境监测、生化分析等领域有着广泛的应用。

近年来，随着生物医药、食品安全等领域的不
断发展，对于分子印迹聚合物合成方法和性能研究的需求也在逐渐增加。

固相萃取技术是一种常用的样品前处理方法，其主要原理是在固定的萃取相中提取分析物质，去除不必要的干扰物质，从而提高分析准确度和灵敏度。

分子印迹聚合
物材料具有选择性和特异性，可以作为固相萃取材料，用于样品前处理中的分离与富集。

本课题旨在探究分子印迹聚合物的制备方法及其在固相萃取中的性能，为分子印迹聚合物的应用提供实验数据和理论基础。

二、研究内容
1. 分子印迹聚合物的制备方法研究，包括合适的模板分子的选择、聚合物材料的选择、聚合模板方法的优化等方面。

2. 分子印迹聚合物固相萃取性能的研究，包括富集效果的测定、萃取速度的测定、特异性和选择性的评估等方面。

3. 样品前处理方法的建立，包括对比不同萃取材料的效果、优化样品处理流程等方面。

4. 实际样品的分析测试，主要针对生物医药、食品安全等领域的样品进行分析，评估分子印迹聚合物在实际分析应用中的效果。

三、研究意义
1. 对分子印迹聚合物的制备方法进行深入探究，为分子印迹技术在实际应用中提供更加完善的基础理论支持。

2. 通过分子印迹聚合物固相萃取性能的研究，为固相萃取技术的改进提供实验数据和理论基础。

3. 建立实际样品分析测试方法，为药物、环境、食品等领域的实际分析应用提供技术支持。

化妆品分析样品前处理方法的研究进展中科检测技术服务（广州）股份有限公司摘要：在我国进入21世纪快速发展的新时期，经济在迅猛发展，社会在不断进步，化妆品的广泛使用使其安全性问题受到关注。

作为发现安全性问题的首要选择，分析检测技术十分重要。

化妆品种类繁多、基质复杂，其样品前处理成为分析检测过程的关键所在。

传统样品前处理方法因试剂消耗大、耗时、步骤繁琐等缺点无法满足绿色高效的检测要求，因此发展新的样品前处理技术具有重要意义。

关键词：样品前处理；化妆品；分析检测；研究进展引言化妆品是人们生活中重要的消费品，其中包括部分禁用、限用成分，对化妆品样品成分进行分析检测，有助于监督化妆品产品质量，保证使用安全。

化妆品有比较复杂的基质，存在严重的基体干扰，直接检测目标物存在难度，因此可以采用样品前处理检测技术，分离富集化妆品成分，可以解决有机溶剂大量耗损、检测通量不高、分析周期较长等问题，还能够满足绿色环保要求，是当前化妆品检测比较常用的技术。

1概述随着国民经济的持续发展和人民生活水平的不断提升，化妆品因其清洁、修饰、健护、美化等作用，逐渐成为生活中必不可少的一部分。

人们对化妆品需求量的与日俱增推动了化妆品行业的迅猛发展。

我国目前已是全球第三大化妆品消费国，仅次于欧盟和美国。

在化妆品市场蓬勃发展的进程中呈现了诸多典型变化：从天然提取到化学合成，原料逐渐多样化；从护理到美化，用途逐渐多元化。

化妆品安全性越来越受到广大消费者的高度关注，这也对化妆品质量安全检测技术提出了更高的要求。

传统的检测技术存在前处理过程有机试剂消耗量大、检测通量低、分析周期长等诸多弊端，随着人们环保意识的增强和绿色化学理念的兴起，开发环境友好的前处理技术和高通量快速检测技术逐渐成为科研人员关注的研究方向，相关报道也日益增多。

2化妆品分析样品前处理方法的研究进展2.1固相萃取固相萃取技术(Solidphaseextraction，SPE)是近年来发展较为成熟的样品前处理技术，克服了传统的液液萃取中有机溶剂消耗大、操作复杂的缺点，且无相分离操作过程，大大减少了对环境的污染，具有操作简便、选择性好等优点，是化妆品前处理领域应用较为广泛的一种前处理方法。

DOI :10.11895/j.issn.0253⁃3820.171175分子印迹聚合物固相萃取⁃超高效液相色谱⁃串联质谱法检测水产品中11种氨基糖苷类药物残留黄原飞1,2　娄晓祎1　周哲3　汪洋1,2　孔聪1黄冬梅1　蔡友琼1　于慧娟*11(中国水产科学研究院东海水产研究所农业部水产品风险评估实验室(上海),上海200090)2(上海海洋大学食品学院,上海201306) 3(赛默飞世尔科技(中国)有限公司,上海201206)摘　要　建立了水产品中巴龙霉素㊁壮观霉素㊁妥布霉素㊁庆大霉素㊁卡那霉素㊁潮霉素B㊁安普霉素㊁链霉素㊁双氢链霉素㊁丁胺卡那霉素和新霉素共11种氨基糖苷类药物(AGs)残留的超高效液相色谱⁃串联质谱(UPLC⁃MS /MS)检测方法㊂样品经磷酸盐缓冲液提取,分子印迹聚合物(MIP)固相萃取柱净化,Obelisc R 色谱柱分离,采用超高效液相色谱⁃串联质谱仪进行测定㊂方法检出限(LOD,S /N ≥3)为1.0~10.0μg /kg,定量限(LOQ,S /N ≥10)为2.0~20.0μg /kg㊂11种AGs 在1.0~1000μg /kg 范围内线性关系良好(R 2>0.994),在水产品中加标回收率为78.4%~109.6%,相对标准偏差(RSD,n =6)为2.3%~14.9%㊂本方法灵敏度高,且可实现11种AGs 同时检测㊂关键词　分子印迹聚合物固相萃取;超高效液相色谱⁃串联质谱;水产品;氨基糖苷类　2017⁃08⁃17收稿;2017⁃12⁃25接受本文系上海市农业委员会资助项目(农沪科推字(2016)第1⁃4⁃1号)资助*E⁃mail:xdyh⁃7@1　引言氨基糖苷类化合物(Aminoglycosides,AGs)是由氨基糖与氨基环醇通过氧桥连接而成的苷类碱性抗生素,广泛用于防治各种动物性疾病;也常作为饲料添加剂,用于促进动物生长发育[1,2]㊂研究表明,AGs 存在一定程度的耳毒性㊁肾毒性和神经肌肉阻滞作用[3,4]㊂因此,世界各国均建立了AGs 在动物源性食品中的相关限量标准㊂如欧盟[5]规定链霉素在猪肝脏㊁肌肉中的最高残留限量(MRL)为500μg /kg,在乳品中的MRL 为200μg /kg;我国农业部235号公告[6]规定牛㊁猪的肌肉中链霉素㊁双氢链霉素和新霉素的MRL 分别为600㊁600和500μg /kg㊂AGs 的测定方法主要有微生物法[7]㊁免疫分析法[8]㊁液相色谱法(LC)[9,10]和液相色谱⁃串联质谱法(LC⁃MS /MS)[11~14]等㊂其中LC⁃MS /MS 法由于抗背景干扰能力强㊁灵敏度高,应用最为广泛㊂目前对AGs 测定方法的研究主要集中在蜂蜜[11]㊁牛奶[12]㊁动物内脏和肌肉[13]等方面,针对水产品基质的研究较少,且存在同时测定的药物种类少㊁灵敏度不高㊁通用性不强等不足㊂高玲等[15]建立了水产品中5种AGs 的检测方法,方法定量限为10μg /kg㊂Kaufmann 等[16]建立了猪肉㊁牛肉和鱼肉中13种AGs 的测定方法,但未对虾㊁蟹基质进行相关研究㊂因此开发灵敏度高㊁适用于多种水产品基质的AGs 测定方法具有十分重要的意义㊂分子印迹聚合物(MIP)固相萃取技术是利用分子印迹聚合物和模板分子在空间结构的互补匹配对目标物质进行识别㊁富集的分离富集技术[17,18]㊂该技术对目标化合物选择性高,特异性结合能力强,能够很好地消除基质干扰,提高分析的准确度和灵敏度[18,20]㊂本研究以巴龙霉素㊁壮观霉素㊁妥布霉素㊁庆大霉素㊁卡那霉素㊁潮霉素B㊁安普霉素㊁链霉素㊁双氢链霉素㊁丁胺卡那霉素和新霉素等11种AGs 为研究对象,采用MIP 固相萃取柱净化,使用Obelisc R 色谱柱,以甲酸⁃乙酸铵溶液和乙腈为流动相,实现了11种AGs 的同时检测㊂本方法灵敏度高且适用于鱼㊁虾㊁蟹等多种水产品基质,为水产品中AGs 的残留监管提供了技术支撑㊂第46卷2018年3月分析化学(FENXI HUAXUE)　研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry第3期454~4612　实验部分2.1　仪器与试剂Ultimate 3000超高效液相色谱仪,配自动进样器和柱温箱(美国Thermo Fisher 公司);TSQ Quantiva三重四极杆质谱仪,配有电喷雾离子源(美国Thermo Fisher 公司);16RXII 高速冷冻离心机(日本HITACHI CF 公司);Milli⁃Q 超纯水机(美国Millipore 公司);固相萃取装置(美国Supelco 公司);PHS⁃3G pH 计(上海仪电科学仪器公司)㊂Supel MIP Aminolycosides 固相萃取柱(50mg /3mL,美国Supelco 公司);Obelisc R 色谱柱(100mm×2.1mm,5μm,美国SIELC 公司)㊂庆大霉素(94.4%)㊁壮观霉素(95.5%)㊁链霉素(99.0%)㊁卡那霉素(95.4%)㊁巴龙霉素(87.0%)㊁潮霉素B(79.3%)㊁安普霉素(81.5%)㊁妥布霉素(92.0%)㊁新霉素(90.0%)㊁丁胺卡那霉素(99.0%)㊁双氢链霉素(99.0%)均购自德国Dr.Ehenstorfer 公司㊂七氟丁酸(≥99.5%,美国Sigma 公司);乙腈㊁甲醇(色谱纯,J.T.Baker 公司);甲酸(色谱纯,FLUKA 公司);三氯乙酸(TCA)㊁乙二胺四乙酸二钠(Na 2EDTA)㊁磷酸二氢钾㊁乙酸铵㊁氨水㊁三氯甲烷均为分析纯;实验用水由超纯水仪(美国Millipore 公司)制备㊂2.2　溶液的配制称取11种AGs 标准品各10mg(精确至0.1mg),分别用水溶解并定容至10mL,获得1g /L 的单标储备液㊂混合标准溶液以单标储备液稀释配制而成,各组分浓度为:巴龙霉素㊁卡那霉素㊁双氢链霉素为0.4μg /mL,安普霉素㊁丁胺卡那㊁壮观霉素㊁妥布霉素㊁潮霉素B㊁庆大霉素㊁链霉素为1μg /mL,新霉素为4μg /mL㊂4℃避光储存㊂氨基糖苷类化合物容易与玻璃发生吸附,实验过程中应尽量使用塑料容器[21]㊂基质标准工作曲线的配制:取6份((2.00±0.01)g)空白样品于50mL 塑料离心管中,分别加入适量混合标准溶液,按2.3节操作,基质标准溶液浓度为:巴龙霉素㊁卡那霉素㊁双氢链霉素为1.0~100μg /kg,安普霉素㊁丁胺卡那㊁壮观霉素㊁妥布霉素㊁潮霉素B㊁庆大霉素㊁链霉素为2.5~250μg /kg,新霉素为10.0~1000μg /kg㊂2.3　样品前处理2.3.1　样品制备　在上海市农贸市场随机购买草鱼(Ctenopharyngodon idellus )㊁南美白对虾(Penaeus vannamei Boone )㊁河蟹(Eriocheir sinensis ),取可食部分,按照GB /T 30891⁃2014[22]的要求制样,-18℃保存,实验前解冻称样㊂2.3.2　提取　称取样品2.0g(精确到0.01g)于50mL 塑料离心管中,加入10mL 10mmol /L 磷酸盐提取液(含0.4mmol /L EDTA 和2%TCA),涡旋混匀后超声提取10min,10000r /min 离心10min,移取上清液至另一塑料离心管中,残渣按上述方法重复提取一次,合并两次上清液,用氨水调节至pH 7.0~7.5㊂取10mL 上清液,加入10mL 三氯甲烷,涡旋混匀后3000r /min 离心8min,取上清液待净化㊂2.3.3　净化　MIP 固相萃取柱依次用1mL 甲醇㊁1mL 50mmol /L KH 2PO 4溶液活化,取5mL 待净化液上样后,依次用3mL 水㊁3mL 乙腈淋洗并抽干㊂加入3mL 80%乙腈(含1%甲酸和5mmol /L 七氟丁酸)洗脱,收集洗脱液于45℃下氮气吹干,残渣用1mL 75%乙腈(含1%甲酸和10mmol /L 乙酸铵)复溶,涡旋混匀后过0.22μm 有机滤膜,装入带有塑料内衬管的进样瓶中,待测㊂2.4　仪器分析条件2.4.1　液相色谱分析条件　色谱柱:Obelisc R 柱(100mm×2.1mm,5μm);流动相:A 为1%甲酸(V /V ,含2mmol /L 乙酸铵),B 为1%甲酸⁃乙腈(V /V ,含2mmol /L 乙酸铵);梯度洗脱程序:0~3min,90%B;3~6min,90%~5%B;6~17min,5%B;17~17.1min,5%~90%B;17.1~26min,90%B㊂流速0.3mL /min;柱温30℃,进样量20μL㊂2.4.2　质谱分析条件　电喷雾离子源(ESI);选择反应监测(SRM);正离子扫描;喷雾电压:3500V;雾化温度:350℃;离子传输管温度:325℃;鞘气:40arb;辅气:5arb㊂11种AGs 的质谱分析参数见表1㊂554第3期黄原飞等:分子印迹固相萃取⁃超高效液相色谱⁃串联质谱法检测水产品中11种氨基糖苷类药物残留 表1　11种AGs 质谱分析参数Table 1　Mass spectrometry parameters for analysis of 11kinds of aminoglycosides (AGs)化合物Compound 母离子Precursor ion (m /z )子离子Product ions (m /z )碰撞能量Collision energy(eV)透镜电压RF Lens (V)巴龙霉素Paromomycin 308.296壮观霉素Spectinomycin 351.182妥布霉素Tobramycin 468.291庆大霉素Gentamycin 478.330卡那霉素Kanamycin 485.261潮霉素B Hygromycin B 528.261安普霉素Apramycin 540.300链霉素Streptomycin 582.270双氢链霉素Dihydrostreptomycin 584.300丁胺卡那霉素Amikacin 586.330新霉素Neomycin615.330161.04*162.97333.11*207.11163.11*324.11322.18*157.11163.11*324.11352.04*177.11217.11*378.11263.04*246.04263.11*246.04425.15*264.04293.07*455.2212461946197522752363146314632163256716672285288526781778321593815930114371141884268423882188*:定量离子(Quantitative ion)㊂3　结果与讨论3.1　液相色谱⁃质谱分析条件的研究3.1.1　色谱柱的选择　AGs 药物极性强,分子中含有多个氨基和羟基,在C 18柱上保留很弱㊂在流动相中添加离子对试剂(如七氟丁酸㊁五氟丙酸等),利用其与AGs 结合形成疏水型离子对,可延长AGs 在C 18柱上的保留时间㊂但离子对试剂极易残留在液相色谱⁃质谱仪内,造成离子源污染和信号抑制[23]㊂为避免使用离子对试剂,本研究根据AGs 的性质选择了氨基柱(Luna⁃NH 2和Thermo Amino)㊁亲水柱(Waters Hilic)和混合型离子柱(Obelisc R)4种色谱柱,对11种AGs 进行分离㊂实验结果表明,Luna⁃NH 2柱对壮观霉素㊁链霉素㊁双氢链霉素不保留;Thermo Amino 柱对壮观霉素不保留,且链霉素㊁双氢链霉素仅部分保留;在Waters Hilic 柱上壮观霉素不保留,且新霉素峰形不好;Obelisc R 柱上各组分均能保留,峰形较好,且灵敏度高于其它色谱柱㊂因此,本研究选取Obelisc R 柱作为AGs 检测的色谱柱㊂3.1.2　流动相的优化　分别采用甲酸含量为0.1%㊁0.5%㊁1.0%和1.5%的水溶液和乙腈为流动相,考察甲酸浓度对色谱峰形和灵敏度的影响㊂结果表明,甲酸浓度为1%时,除壮观霉素外,其余各组分响应值最高,且色谱峰形最佳㊂在流动相中分别添加2㊁5㊁10和20mmol /L 乙酸铵增强壮观霉素的保留性能㊂结果表明,2mmol /L 乙酸铵在增强壮观霉素保留的同时,巴龙霉素㊁卡那霉素等组分灵敏度有所增高;而随着乙酸铵浓度升高,巴龙霉素㊁妥布霉素㊁安普霉素存在拖尾情况,且灵敏度下降㊂故最终采用1%甲酸(含2mmol /L 乙酸铵)⁃乙腈作为流动相㊂图1为在最佳分析条件下11种AGs 的标准溶液提取离子流图㊂3.2　样品前处理方法的研究3.2.1　固相萃取柱的选择　本研究采用磷酸盐缓冲液(含0.4mmol /L EDTA 和2%TCA)提取水产品中残留的AGs [21,24,25],提取后溶液中含有大量水溶性杂质,常用固相萃取方法对目标物进行富集净化处理㊂本研究采用空白基质液过柱前加标的方法对4种固相萃取柱(Oasis PRiME HLB㊁WCX㊁C 18和MIP)654 分析化学第46卷100t （min ）A b u n d a n c e （%）510150500Paromomycin7.02100t （min）A b u n d a n c e （%）510150500Spectinomycir5.61100t （min ）A b u n d a n c e （%）51015500Tobramycin6.77100t （min）A b u n d a n c e （%）510150500Gentamycin6.82100t （min ）A b u n d a n c e （%）510150500Kanamycin 6.32100t （min）A b u n d a n c e （%）51015500Hygromycin B5.87100t （min ）A b u n d a n c e （%）510150500Apramycin6.60100t （min ）A b u n d a n c e （%）510150500Streptomycin5.84100t （min ）A b u n d a n c e （%）51015500Dihydrostreptomyc5.86100t （min）A b u n d a n c e （%）510150500Amikacin6.16100t （min ）A b u n d a n c e （%）51015500Neomycin7.01图1　11种AGs 标准溶液的提取离子流图Fig.1　Extracted ion chromatograms of 11AGs的吸附效率和净化效果进行评价㊂实验结果表明,MIP 柱对11种AGs 回收率在75%~95%之间且净化效果好;而Oasis Prime HLB㊁WCX㊁C 18柱对壮观霉素的回收率均低于50%,对潮霉素㊁新霉素回收率低于60%㊂因此选择MIP 柱对提取液进行净化㊂40 6.5pHOu t f l o w r a t e （%）5030201007.07.58.08.5Kanamycin Spectinomycin Hygromycin B Apramycin图2　不同pH 值条件下AGs 的上样流出率Fig.2　Outflow rate of AGs at different pH value3.2.2　上样溶液pH 值的优化　AGs 分子中含有多个羟基和氨基,在不同pH 值条件下,AGs 以不同的离子态形式存在于溶液中,进而影响目标物在MIP 柱上的保留性能㊂本研究考察了MIP 柱对不同pH 值的上样溶液的吸附性能,其中上样溶液为100μg /L AGs 混合标准溶液㊂将上样溶液pH 值分别调整为6.5㊁7.0㊁7.5㊁8.0㊁8.5,过柱后收集其流出液,将流出液与同等浓度标准溶液对比,评价MIP 柱对11种AGs 的吸附效率(目标物流出率=流出液中目标物峰面积/同等浓度目标物标准溶液峰面积×100%)㊂结果表明,除壮观霉素㊁安普霉素㊁卡那霉素和潮霉素B 受pH 值影响较大外,其它组分所受影响很小,可以忽略不计㊂不同pH 值下壮观霉素㊁安普霉素㊁卡那霉素和潮霉素B 流出率见图2㊂由图2可见,pH 从6.5升至7.0时,AGs 的流出率逐渐降低;pH 从7.5升至8.5时,流出率显著增加;而在中性条件下,流出率最低㊂这可能是由于在酸性或碱性条件下,AGs 分子更易得质子或失质子,不利于754第3期黄原飞等:分子印迹固相萃取⁃超高效液相色谱⁃串联质谱法检测水产品中11种氨基糖苷类药物残留 其与MIP 吸附剂形成相互作用力,从而使AGs 在MIP 柱上的保留能力变弱[26]㊂因此应将上样溶液的pH 值严格控制在7.0~7.5,以避免上样损失㊂3.3　基质效应的研究由于样品基质复杂,含有大量的内源性化合物,易与待测物一同进入色谱柱,干扰目标化合物的检测,因此需要对基质效应进行评价[27]㊂基质效应计算公式[28,29]为:基质效应=(1-基质匹配标准曲线的斜率/标准曲线的斜率)×100%㊂结果表明,样品基质对壮观霉素㊁链霉素㊁双氢链霉素的抑制率>60%,对其余AGs 的抑制率为5%~40%㊂由于基质效应明显,本研究中采用空白基质液配制标准曲线所需溶液,或者采用标准添加法制备标准曲线所需溶液,以消除基质效应的影响,提高定量分析结果的准确性㊂3.4　方法分析性能以及评价3.4.1　线性范围及检出限　以南美白对虾为基质,各AGs 添加水平分别为0.5㊁1.0㊁2.0㊁2.5㊁5.0㊁10.0和20.0μg /kg,经提取净化后上机分析,以标准溶液质量浓度为横坐标(x ),各化合物定量离子的色谱峰面积为纵坐标(y ),绘制标准曲线㊂以S /N ≥3,回收率>50%,精密度<30%为评价依据,确定方法检出限为1.0~10.0μg /kg㊂以S /N ≥10,回收率>70%,精密度<20%为评价依据,确定方法定量限为2.0~20.0μg /kg㊂11种AGs 的回归方程㊁线性范围㊁方法检出限及定量限见表2㊂表2　11种AGs 回归方程㊁线性范围㊁方法检出限及定量限Table 2　Calibration equation,linear range,limit of detection (LOD)and limit of quantification (LOQ)of 11kinds of AGs化合物Compound 回归方程Calibration equation 线性范围Linear range (μg /kg)相关系数Correlation coefficients (R 2)方法检出限LOD (μg /kg)方法定量限LOQ (μg /kg)巴龙霉素Paromomycin y =1078.09+6648.47x 1.0~1000.9959 1.0 2.0壮观霉素Spectinomycin y =1671.53+907.582x 2.5~2500.9946 2.5 5.0妥布霉素Tobramycin y =561.998+1964.34x 2.5~2500.9965 2.5 5.0庆大霉素Gentamycin y =-793.045+3111.64x 2.5~2500.9984 2.5 5.0卡那霉素Kanamycin y =1016.76+3803.45x 1.0~1000.9985 1.0 2.0潮霉素B Hygromycin B y =854.262+750.419x 2.5~2500.9962 2.5 5.0安普霉素Apramycin y =3550.41+1257.34x 2.5~2500.9987 2.5 5.0链霉素Streptomycin y =4163.46+2256.6x 2.5~2500.9996 2.5 5.0双氢链霉素Dihydrostreptomyciny =3691.3+9127.29x 1.0~1000.9994 1.0 2.0丁胺卡那霉素Amikacin y =926.327+1198.91x 2.5~2500.9985 2.5 5.0新霉素Neomyciny =490.458+489.118x10.0~10000.997110.020.03.4.2　方法准确度和精密度　以阴性南美白对虾㊁草鱼和河蟹为检测对象,通过标准添加实验,考察方法的加标回收率和精密度㊂添加水平:巴龙霉素㊁卡那霉素㊁双氢链霉素分别为2.0㊁4.0和50.0μg /kg;安普霉素㊁丁胺卡那㊁壮观霉素㊁妥布霉素㊁潮霉素B㊁庆大霉素㊁链霉素分别为5.0㊁10.0和125.0μg /kg;新霉素分别为20.0㊁40.0和500.0μg /kg,每个加标浓度做6个平行实验,11种AGs 的平均加标回收率和精密度见表3㊂由表3可知,在不同的样品中11种化合物加标回收率在78.4%~109.6%之间,RSD(n =6)在2.3%~14.9%之间,方法准确度和精密度满足微量分析的要求㊂3.5　实际样品分析随机在上海农贸市场选取草鱼样品7个㊁南美白对虾样品7个㊁河蟹样品6个,采用本方法对样品中11种AGs 进行检测,20个样品中均未检出AGs㊂4　结论建立了水产品中11种氨基糖苷类药物残留的液相色谱⁃串联质谱检测方法㊂采用磷酸盐缓冲溶液作为提取剂,MIP 固相萃取柱富集净化,Obelisc R 柱进行分离,不使用离子对试剂的条件下实现了11种氨基糖苷化合物的同时检测㊂本方法具有灵敏度高㊁通用性强等优点㊂854 分析化学第46卷表3　空白南美白对虾㊁草鱼和河蟹样品中11种AGs 的加标回收率及相对标准偏差(n =6)Table 3　Recoveries and relative standard deviations (RSD)of 11AGs in shrimp,grass carp and carb blank samples (n =6)化合物Compound 加标量Spiked (μg /kg)南美白对虾White shrimp 回收率Recovery (%)相对标准偏差RSD (%)草鱼Grass carp回收率Recovery (%)相对标准偏差RSD (%)河蟹Carb回收率Recovery (%)相对标准偏差RSD (%)巴龙霉素Paromomycin 壮观霉素Spectinomycin 妥布霉素Tobramycin 庆大霉素Gentamycin 卡那霉素Kanamycin 潮霉素B Hygromycin B 安普霉素Apramycin 链霉素Streptomycin 双氢链霉素Dihydrostreptomycin 丁胺卡那霉素Amikacin 新霉素Neomycin2.088.210.691.412.7100.210.54.083.0 5.686.58.593.512.250.094.99.287.98.796.67.35.0102.88.692.313.893.511.610.093.87.689.6 6.699.3 6.8125.089.7 4.195.5 5.499.7 5.05.093.212.594.914.789.514.310.093.1 5.289.712.298.08.8125.089.59.384.49.799.27.85.078.412.783.910.686.514.110.090.014.587.212.787.014.9125.081.413.798.39.192.37.92.093.511.892.86.193.77.34.0100.811.0102.1 6.3101.8 6.650.095.012.297.3 3.1106.3 3.25.0109.611.695.514.795.79.510.093.912.0102.111.698.8 6.9125.090.011.098.48.094.5 4.75.0100.611.8105.68.993.9 6.710.0105.69.298.98.8100.67.5125.078.9 4.297.2 3.6100.57.15.095.910.288.414.694.710.510.092.8 5.5103.39.295.711.0125.093.3 2.7108.9 6.6102.57.22.090.0 6.294.07.798.99.24.094.411.890.810.095.98.750.096.8 2.390.9 4.2106.27.95.0108.711.396.08.8103.37.210.099.711.1102.1 6.3105.2 4.9125.092.67.489.1 4.697.2 3.120.0107.413.688.312.7100.113.840.0108.19.992.614.0104.910.9500.0102.7 6.789.313.496.68.1References1　LONG Zhao⁃Yang,XU Xiu⁃Min.Chinese Journal of Food Hygiene ,2006,18(2):148-152龙朝阳,许秀敏.中国食品卫生杂志,2006,18(2):148-1522　Farouk F,Azzazy H M,Niessen W M.Anal.Chim.Acta ,2015,890:21-433　XU Li⁃Jia,LIU Xiao,ZHANG Xiu⁃Qin,LIU Jing⁃Xian,MIAO Cui.Chinese Journal of Pharmaceutical 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Agriculture ,East China Sea Fisheries Research Institute ,Shanghai 200090,China )2(College of Food Science &Technology ,Shanghai Ocean University ,Shanghai 201306,China )3(Thermo Fisher Scientific Inc.,Shanghai 201206,China )Abstract An ultra performance liquid chromatography⁃tandem mass spectrometric (UPLC⁃MS /MS)method was developed for the determination of 11kinds of aminoglycosides (AGs ),including paromomycin,spectinomycin,tobramycin,gentamycin,kanamycin,hygromycinB,apramycin,streptomycin,dihydrostreptomycin,amikacin and neomycin in aquatic products.Samples were extracted by phosphate buffer solution,and purified on molecularly imprinted polymers (MIP )solid phase extraction column.After separated by Obelisc R chromatographic column,AGs were detected by UPLC⁃MS /MS.It showed a good linearity relationship in the AGs concentration range of 1.0-1000ng /mL with the correlation coefficient R 2>0.994.The limit of detection (LOD,S /N ≥3)was ranged from 1.0μg /kg to 10.0μg /kg,and the limit of quantitation (LOQ,S /N ≥10)was ranged from 2.0μg /kg to 20.0μg /kg.Besides,the average recoveries presented 78.4%-109.6%with the relative standard deviation (RSD,n =6)of 2.3%-14.9%.This method was successfully applied to the simultaneous determination of 11kinds of AGs with high sensitivity in aquatic products.Keywords Molecularly imprinted polymers solid phase extraction;Ultra performance liquid chromatography⁃tandem mass spectrometric;Aquatic products;Aminoglycosides(Received 17August 2017;accepted 25December 2017)This work was supported by the Shanghai Municipal Agricultural Commission (No.(2016)No.1⁃4⁃1).‘核磁共振二维谱“ 赵天增㊁秦海林㊁张海艳㊁屈凌波编著本书对核磁共振二维谱基础知识进行了较系统论述,对许多核磁共振二维脉冲序列的原理用磁化强度矢量模型作了简单的解释和说明,重点是各种核磁共振二维谱的解析和应用㊂本书分两部分,第一部分为核磁共振二维谱基础,第二部分为核磁共振二维谱应用举例㊂第二部分共收集整理了100个具体的例子,逐一讲解分析思路及至最终的结构确定,其中,合成有机化合物例子30个,包括各种特色化合物㊁结构异构体㊁顺反异构体㊁构象异构体等;天然有机化合物例子70个,包括萜类㊁各种含氧化合物㊁化物碱等㊂书号:9787122303875 定价:148.00元开本:16 出版日期:2018年1月 化学工业出版社出版164第3期黄原飞等:分子印迹固相萃取⁃超高效液相色谱⁃串联质谱法检测水产品中11种氨基糖苷类药物残留 。

甲基睾酮分子印迹聚合物及其固相萃取研究的开题报告开题报告一、选题背景和意义甲基睾酮（Methyltestosterone，MT）是一种合成的雄激素药物，具有睾丸激素的生物活性，能够促进生殖器官的发育和分化。

MT被广泛应用于医学和农业领域，如人类睾丸功能障碍、子宫内膜异位症、男性性腺发育不良等疾病的治疗，以及畜牧业中的性别控制和生长促进。

但是，MT也会对水生动物、哺乳动物和人类造成潜在的环境和健康风险。

因此，对MT进行快速、灵敏、准确的检测至关重要。

传统的MT检测方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、液相质谱法（LC-MS）、放射免疫测定法（RIA）等。

但是，这些方法仪器昂贵、分析周期长、对于样品预处理过程要求高、不适用于现场快速检测等问题。

近年来，分子印迹技术在生物、化学和环境分析领域得到了广泛的应用。

分子印迹聚合物（Molecularly Imprinted Polymers，MIPs）是一种可以通过特定药物分子自组装形成具有识别特异性的人工高分子材料，可用作分离、检测、传感、药物传递等方面的载体。

MIPs具有成本低、稳定性好、特异性高、重复使用等优点，逐渐成为替代传统方法的一种新型检测方法。

因此，本研究拟开发一种能够高效、准确、便捷检测MT的MIPs材料，并对其固相萃取效果进行评价。

二、研究内容和方法研究将分为以下几个阶段：1.合成MIPs材料根据MT的化学结构，选择合适的模板分子和功能单体，调节反应条件，制备出MT分子印迹聚合物。

2.表征MIPs材料采用扫描电子显微镜（SEM）、傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、热重分析（TGA）等技术表征MIPs材料的形貌、结构和热性质。

3.优化固相萃取条件通过改变萃取剂的种类、萃取时间和pH值等因素，优化MT在MIPs材料上的固相萃取效果。

4.对江河水样中MT的检测将优化条件的MIPs材料用于江河水样中MT的固相萃取，然后采用现有的分析方法（如HPLC）对检测样品进行分析。

绪论引言分子印迹技术（Molecular Imprinting Technique, MIT）是20世纪80年代迅速发展起来的一种化学分析分离技术，即制备在空间结构及结合位点上与目标分子完全匹配的聚合物的实验技术。

分子印迹技术涉及化学、高分子、生物、医药、材料等多学科交叉，在化学仿生传感器、模拟抗体、模拟酶催化、膜分离技术、对映体和位置异构体的分离、固相提取、临床药物分析等领域展现了良好的应用前景[1]。

固相萃取（solid phase extraction, SPE）是一种基于色谱分离的样品前处理方法，是指液体样品在正压、负压或重力作用下通过装有固体吸附剂的固相萃取装置，从而将特定的化合物吸附并保留在SPE柱上的实验方法。

主要应用于环境样品痕量检测、药物分析与分离、生物与临床样品分析及其他如食品工业等方面，是一个被非常看好的并具发展潜力的新型分离技术。

1.2分子印迹技术1.2.1分子印迹技术原理及方法分子印迹聚合物(Molecular Imprinted Polymers, MIPs) 是模板分子(Template)以共价键或非共价键形式与功能单体(Monomers) 结合，并在引发剂作用下与交联剂(Crosslinker) 发生聚合，洗去模板分子之后，形成在空间结构及结合位点上与目标分子完全匹配的几何空间空穴，该空穴在形貌和作用力方面对模板分子都有着记忆和识别特性。

印迹过程图示见图1。

1.2.1.1 分子印迹法-预组装法预组装法（Pre-organized approach ）也叫共价印迹法，是由德国的 Wulff 教授研究小组[2]于20世纪70年代初期创立。

共价印迹法是指在进行聚合反应以前，功能单体和模板分子之间是通过共价键相互联结的，该共价联结的产物在保持共价联结固定的情况下，进行聚合反应，聚合完成后，上述的共价联结则通过分解反应，使聚合物中的模板除去，即得到分子印迹聚合物。

当此印迹聚合物和客体分子相遇时，则又可形成相同的共价联结。

2013年7月Vol．31No．7July 2013Chinese Journal of Chromatography626 633庆祝欧庆瑜先生八十华诞专栏·专论与综述DOI :10．3724/SP．J．1123．2013．05026*通讯联系人．Tel ：（0931）4968208，E-mail ：shiyp@licp．cas．cn．基金项目：国家自然科学基金项目（21075127，20875095）．收稿日期：2013-05-17分子印迹固相萃取技术在天然产物有效成分分离分析中的应用进展陈方方1，2，师彦平1*（1．中国科学院兰州化学物理研究所，中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室/甘肃省天然药物重点实验室，甘肃兰州730000；2．中国科学院大学，北京100049）摘要：天然产物体系复杂，尤其是一些活性成分含量较低，采用一般的方法对其进行分离富集难度较大。

分子印迹聚合物具有良好的亲和性和专一的选择性，将分子印迹固相萃取技术应用于天然药物资源样品前处理过程，能够选择性地分离富集复杂基质中的目标成分。

本文对近几年分子印迹固相萃取技术在天然产物有效成分分离分析中的应用进行了总结，分析物包括黄酮类、多元酚类、生物碱类、有机酸类、苯丙素类、萜类以及其他一些类型的生物活性成分。

关键词：分子印迹固相萃取；天然药物资源；天然产物；分离分析；综述中图分类号：O658文献标识码：A文章编号：1000-8713（2013）07-0626-08Application of molecularly imprinted solid phase extractionin the separation and determination of activeconstituents from natural compoundsCHEN Fangfang 1，2，SHI Yanping 1*（1．Key Laboratory of Chemistry of Northwestern Plant Resources ，CAS /Key Laboratory for Natural Medicine ofGansu Province ，Lanzhou Institute of Chemical Physics ，Chinese Academy of Sciences ，Lanzhou 730000，China ；2．University of Chinese Academy of Sciences ，Beijing 100049，China ）Abstract ：The active constituents of natural medicine resources are complicated and in low content ，which are difficult to be extracted and separated by general methods．Molecularly imprinted polymers are func-tional porous materials with molecular-specific recognition sites to a particular target molecule．The mo-lecularly imprinted solid phase extraction has been used as a sample preparation technique for the separa-tion of active constituents from natural medicine resources．The target molecules in a mixture of chemical species can be recognized selectively．In this review ，the applications of the molecularly imprinted solid phase extraction for the determination and separation of active constituents （e．g．flavonoids ，polyphe-nols ，alkaloids ，organic acids ，phenylpropanoids ，terpenoids ，etc．）from natural compounds in recent years are summarized．Key words ：molecularly imprinted solid phase extraction ；natural medicine resources ；natural products ；separation and determination ；review分子印迹，又称为分子烙印，是源于高分子化学、材料化学、生物化学等学科的一门交叉学科技术。