第三章细胞生物学研究方法习题及答案

《细胞生物学》习题及解答第一章绪论本章要点：本章重点阐述细胞生物学的形成、发展及目前的现状和前景展望。

要求重点掌握细胞生物学研究的主要内容和当前的研究热点或重点研究领域，重点掌握细胞生物学形成与发展过程中的主要重大事件及代表人物，了解细胞生物学发展过程的不同阶段及其特点。

二、填空题1、细胞生物学是研究细胞基本规律的科学，是在、和三个不同层次上，以研究细胞的、、、和等为主要内容的一门科学。

2、年英国学者第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是。

3、1838—1839年，和共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的。

4、19世纪自然科学的三大发现是、和。

5、1858年德国病理学家魏尔肖提出的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。

6、人们通常将1838—1839年和确立的；1859年确立的；1866年确立的，称为现代生物学的三大基石。

7、细胞生物学的发展历史大致可分为、、、和分子细胞生物学几个时期。

三、选择题1、第一个观察到活细胞有机体的是（）。

a、Robert Hookeb、Leeuwen Hoekc、Grewd、Virchow2、细胞学说是由（）提出来的。

a、Robert Hooke和Leeuwen Hoekb、Crick和Watsonc、Schleiden和Schwannd、Sichold和Virchow3、细胞学的经典时期是指（）。

a、1665年以后的25年b、1838—1858细胞学说的建立c、19世纪的最后25年d、20世纪50年代电子显微镜的发明4、（）技术为细胞生物学学科早期的形成奠定了良好的基础。

a、组织培养b、高速离心c、光学显微镜d、电子显微镜四、判断题1、细胞生物学是研究细胞基本结构的科学。

（）2、细胞的亚显微结构是指在光学显微镜下观察到的结构。

（）3、细胞是生命体的结构和生命活动的基本单位。

（）4、英国学者Robert Hooke第一次观察到活细胞有机体。

第三章 细胞生物学研究方法1、由小鼠骨髓瘤细胞与某一B细胞融合后形成的细胞克隆所产生的抗体称（ A ）。

A、单克隆抗体B、多克隆抗体C、单链抗体D、嵌合抗体2、使用免疫荧光显微镜观察细胞结构需要（ ACD）A、特异的抗体B、扫描电镜C、带有一定波长过虑镜片的光镜D、荧光试剂E、透射电镜3、提高普通光学显微镜的分辨能力，常用的方法有（ A ）A、利用高折射率的介质（如香柏油）B、调节聚光镜，加红色滤光片C、用荧光抗体示踪D、将标本染色4、适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是（ C ）A、荧光显微镜B、相差显微镜C、倒置显微镜D、扫描电镜5、能特异显示线粒体的显示剂是（ C）A、希夫试剂B、中性红试剂C、詹姆斯绿BD、苏丹黑试剂6、冰冻蚀刻技术主要用于（ A ）A、电子显微镜B、光学显微镜C、微分干涉显微镜D、扫描隧道显微镜7、分离细胞内不同细胞器的主要技术是（ A ）A、超速离心技术B、电泳技术C、层析技术D、光镜技术8、利用差速离心法可从动物组织匀浆中分离出下列哪种细胞器（ B ）A、溶酶体B、细胞核C、线粒体D、质膜9、Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内（C ）A、蛋白质的分布与定位B、脂肪的分布与定位C、DNA的分布与定位D、RNA的分布与定位10、要探知细胞内某一蛋白质的表达水平，可通过（ C ）实现。

A、Southern 杂交B、Northern 杂交C、Western杂交D、免疫荧光技术11、流式细胞术可用于测定（ D ）A、细胞的大小和特定细胞类群的数量B、分选出特定的细胞类群C、细胞中DNA、RNA或某种蛋白的含量D、以上三种功能都有12、能特异显示核酸分布的显示剂是（ A ）A、希夫试剂B、中性红试剂C、詹姆斯绿BD、苏丹黑试剂13、直接取材于机体组织的细胞培养称为（ B ）。

A、细胞培养B、原代培养C、传代培养D、细胞克隆14、扫描电子显微镜可用于（D ）。

一、填空题1.透射电子显微镜由、、三部分所组成。

2.在酵母人工染色体制备过程中，要使用酶脱去酵母的细胞壁，使之成为，并且进行观察和计数。

3.观察贴壁生长的培养动物细胞可用。

4.电子显微镜使用的是透镜，而光学显微镜使用的是透镜。

5.物质在紫外光照射下发出的荧光可分为和两种，其中需要将被照射的物质进行染色。

6.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为。

7.相差显微镜与普通显微镜的区别是用替代可变光阑，用代替普通物镜。

8.倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其。

9.显微镜的分辨本领是指能够能力，用来表示。

10.电子染色是用来增强电子的散射能力。

11.在光学显微镜下见到的结构称为，在电子显微镜下见到的结构称为。

12.细菌质膜的多功能性主要表现在:具有的呼吸作用，具有的分泌作用，具有的信号传导作用。

13.显微镜的分辨率约等于光波长的，通常把这一数值看成是光学显微镜分辩力的。

14.在同位素追踪技术中，用于研究DNA的同位素标记的前体物是。

15.单克隆抗体技术是将与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。

16.可用技术来研究质膜结构的不对称性。

17.乙醇沉淀DNA的主要原理是。

18.动物细胞培养所用的合成培养基中除含多种、和外，一般还需加入。

19.用荧光显微镜观察细胞时，经吖啶橙染色的细胞中的DNA发荧光，而RNA发荧光。

20.适于观察活细胞的光学显微镜有、和等。

21.分辨率是指人的肉眼或显微镜在25cm处能够分辨到的相邻两个物体间最近距离的能力。

人眼为，普通光学显微镜为，透射电子显微镜为，扫描隧道显微镜为，以紫外光为光源的光学显微镜为。

22.光学显微镜的组成主要分为、和三大部分，光学显微镜的分辩率由、和三种因素决定。

23.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为。

24.荧光显微镜是以为光源，而电子显微镜则以作为光源。

25.电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为和。

26.利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有和。

第一章：绪论1、填空题：1、细胞生物学是细胞整体、超微结构和分子水平上研究及其规律的科学。

、2、名词解释：1、细胞学说（cell theory）3、选择题：1、现今世界上最有影响的学术期刊是。

a：Natune b: Cell c: PNAS d: Science2、自然界最小的细胞是（a）病毒（b）支原体（c）血小板（d）细菌4、是非题：1、现代细胞生物学的基本特征是把细胞的生命活动和亚细胞的分子结构变化联系起来。

…………………………………（）5、问答题：1. 当前细胞生物学研究的热点课题哪些？2. 细胞学说的基本要点是什么？细胞学说在细胞学发展中有什么重大意义？3. 细胞生物学的发展可划分为哪几个阶段？各阶段的主要特点是什么？第二章：细胞基本知识概要1、名词解释：1. 血影（Ghost）2. 通道形成蛋白（Porin）3. 纤维冠（fibrous corona）2、选择题：1、立克次氏体是（a）一类病毒（b）一种细胞器（c）原核生物（d）真核生物2、原核细胞的呼吸酶定位在（a）细胞质中（b）质膜上（c）线粒体内膜上（d）类核区内3、最小的细胞是（a）细菌（b）类病毒（c）支原体（d）病毒4、在英国引起疯牛病的病原体是：（a）朊病毒（prion）（b）病毒（Virus）（c）立克次体（rickettsia）（d）支原体（mycoplast）5、逆转病毒（retro virus）是一种（a）双链DNA病毒（b）单链DNA病毒（c）双链RNA病毒（d）单链RNA病毒6、英国疯牛病病原体是（a） DNA病毒（b） RNA病毒（c）类病毒（d）朊病毒7、线虫基因组的全序列测定目前已接近尾声，发现其一共约有（）种的编码基因（a） 6000（b） 10000（c） 20000（d） 500008、原核细胞与真核细胞虽有许多不同，但都是（a）核仁（b）核糖体（c）线粒体（d）内质网9、前病毒是（a） RNA病毒（b）逆转录RNA病毒RNA病毒（c）整合到宿主DNA中的逆转录DNA（d）整合到宿主DNA中的DNA病毒3、是非题：1.类病毒仅由裸露的DNA所构成，不能制造衣壳蛋白。

第三章细胞生物学的研究方法名词解释1.分辨率( resolution)2.细胞培养( cell culture)3.原代培养( primary cult)4.传代培养( secondary culture)5.细胞系( cell lin)6.等电聚焦电泳( isoelectric focusing)7.cDNA克隆( CDNA cloning)8.非细胞体系( cell free system)9.蛋白质组学( proteomics)10.核酸原位杂交技术( in situ hybridization,ISH)11.放射性自显影技术( autoradiography)12.显微结构( microscopic structure)13.超微结构( ultramicroscopic structure)14.单细胞测序技术( single cell sequencing)15.转基因小鼠( (transgenic mouse)二、单项选择题1.离心法是分离细胞器及细胞组分的重要手段,下面描述错误的是A.差速离心法只能将大小显著不同的成分分开B.平衡沉降法分离取决于细胞成分的大小和形状C.利用免疫磁珠,无需高速离心,即可将膜性细胞器分离出来D.速度沉降可以使tRNA与其他成分分开E.超速离心法可以根据生物大分子的沉降系数较精确的测定其分子量2.检测特异DNA分子的方法是A.噬菌体展示B.ISHC. Western blotD. Southern blotE. ChlP3.苏丹染料可以显示的细胞中成分是A.蛋白质B. DNAC. RNAD.糖E.脂肪4.扫描隧道显微镜的侧分辨率约为A.2μmB.0.2μmC. 0.2nmD.2nmE.2Å5.目前广泛应用的高效基因敲除技术是A.cDNA克隆B. RNAiC.CRISPR/Cas9D. ChIPE.转基因6.可得到完整的细胞三维结构图像的显微镜是A.透射电子显微镜B.荧光显微镜C.暗视野显微镜D.相差显微镜E.共聚焦激光扫描显微镜7.关于免疫沉淀技术的错误描述是A.用耦联在磁珠上的目的蛋白抗体将目的蛋白及其相互作用的蛋白沉淀出来B.可通过SDS=PAGE或生物质谱对沉淀出来的蛋白进行鉴定C.属于体内实验方法,能得到细胞内蛋白相互作用的动态结果D.细胞内本来没有相互作用的蛋白质在破碎细胞时可能发生凝聚,产生假阳性E.简便易行8.无需染色、标记,即可直接用于观察活细胞状态的显微镜是A.扫描电子显微镜B.透射电子显微镜C.普通光学显微镜D.倒置相差显微镜E.荧光显微镜9.关于RNAi的基本原理,错误的描述是A. Dicer酶将外源性双链RNA切割成短 SIRNAB. SIRNA参与形成RNA诱导沉默复合物C.每个RISC都包含一个 SIRNA和一个 DicerD.激活RISC需要依赖ATP将小分子RNA解双链E.激活的RISC通过碱基配对定位到同源mRNA转录本上10.制作透射电子显微镜超薄切片时,下列不必要的是A.固定B.包埋C.切片D.金属投影E.染色11.能够在溶液中对生物大分子进行高分辨率结构测定的技术是A.X射线晶体衍射技术B.核磁共振技术C.扫描电子显微镜D.冷冻电镜E.共聚焦激光扫描显微镜12.透射电子显微镜借助一定的技术手段可获取细胞亚显微结构的三维图像,下面手段不可行的是A.金属投影B.金属复型C.金属染色D.冰冻断裂E.冰冻蚀刻技术高13.与化学合成的 SIRNA相比,利用慢病毒构建的短发卡 shrna载体所具有的显著优势是A.更特异地阻断特定基因表达B.效率更高C.可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达D.操作更简便E.有正反互补的短干扰RNA序列14.关于冷冻电子显微镜技术的错误描述是A.对溶液中生物分子进行高分辨率结构测定B.需要比较大量的样品C.结构解析主要是指单颗粒三维重构技术D.不需要样品结晶E.快速冷冻可以使蛋白质保持其天然结构状态15.能够从组织切片中精确分离单一细胞的方法是A.免疫磁珠法B.荧光激活细胞分选仪C. Percoll精细密度梯度离心D.细胞克隆E.激光捕获显微切割技术16.有关原子力显微镜的错误描述是A.在扫描隧道显微镜基础之上发展起来的B.不需要所检测的样品具有导电性C.可对单个分子进行操控D.分辨率比扫描隧道显微镜高E.显示样品表面微细结构的三维特征17.用物理的方法裂解细胞产生的微粒体,主要来自的细胞器是A.过氧化物酶体B.高尔基复合体C.线粒体D.溶酶体E.内质网18.一般情况下,细胞裂解液中不能含有的成分是A.渗透压维持剂B.蛋白酶C.阴离子去垢剂SDSD.非离子型去垢剂 Triton X-100E.兼性离子型去垢剂 CHAPS19.生物医学研究中,最常用于个体水平基因操作特别是基因敲除的模式动物是A.小鼠B.果蝇C.秀丽隐杆线虫D.斑马鱼E.爪蟾20.操作简单、特异性强,能够在多细胞悬液中分离特定细胞的方法是A.免疫磁珠法B.荧光激活细胞分选仪C. Percoll精细密度梯度离心D.利用细胞贴壁生长和悬浮生长的特性进行细胞培养E.激光捕获显微切割技术21.细胞培养时所用的培养基中不包含A.血清B.氨基酸C.二氧化碳D.维生素E.微量元素22.考察细胞侵袭和转移能力变化的方法是A.嵌套小室( transwell法)B.软琼脂集落形成实验C.细胞生长曲线绘制D.流式细胞仪的DNA倍体分析E.细胞活力检测(MTT法)23.常用于细胞DNA和RNA抽提的试剂是A.渗透压维持剂B.蛋白酶抑制剂C.异硫氰酸胍D.阴离子去垢剂E.兼性离子型去垢剂24.将细胞匀浆以100000g超速离心,上清液部分含有A.线粒体B.溶酶体C.细胞核D. RNAE.微粒体25.超分辨显微技术可使光学显微镜的分辨率达到A.2μmB.50nmC.0.2nmD.2nmE.2Å26.对体外非细胞体系进行蛋白翻译,不需要的成分或结构是A.已知序列的mRNAB. IRNAC.核糖体D. ATPE.RNA聚合酶I(PolⅡ)27.一般来说,分离纯化蛋白质最有效的方法是A.亲和层析B.阴离子交换层析C.阳离子交换D.凝胶滤过层析E.疏水性层析28.能揭示蛋白质精确三维结构的方法是A.扫描电子显微镜B.柱层析C.X射线晶体衍射技术D. SDS-PAGEE.共聚焦激光扫描显微镜29.用凝胶滤过层析分离蛋白,最先流出的蛋白的分子量为A 500kDa B.200k Da C.100kDaA.50kDa E.10kda030.从细胞中分离染色质,抽提液中不能含有A.DNA酶B.RNA酶C.异硫氰酸胍D.氯仿E.蛋白酶K31.二硫苏糖醇(DTT)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的作用是A.与蛋白质疏水区结合B.使蛋白质带负电荷C.使蛋白质中的二硫键断裂D.使蛋白质分子折叠E.控制凝胶孔的大小32.电子显微镜观察生物标本的分辨率约为A. 2μmB.0.2μmC.0.2nmD.2nmE.2Å33.SDS在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的作用是A.与蛋白质亲水区结合B.控制凝胶孔的大小C.使蛋白质中的二硫键断裂D.使蛋白质分子折叠E.使蛋白质带负电荷34.高通量测序技术可与其他基因组水平研究技术相联合,但不包括A.Protein-sepB. RNA-seqC. ChIP-seqD.CLIP-seqE.Methyl-seq35.关于核酸电泳的错误描述是A.是核酸分离鉴定的主要方法B.样品不需事先处理就可直接进行电泳C.核酸在碱性条件下向阳极移动D.可直接判定核酸的纯度、完整性及片段大小E.琼脂糖凝胶电泳分辨率高于丙烯酰胺凝胶电泳36.下列关于生物芯片技术的错误叙述是A.由生物学、微电子学、物理学和计算机科学等多学科交叉融合而成B.主要包括基因芯片和蛋白质芯片C.基因芯片中,荧光素直接标记待检测的mRNA分子D.可用于筛选候选基因E.可通过蛋白质-蛋白质间的相互作用对靶蛋白分子进行高通量检测37.关于免疫细胞化学技术,错误的描述是A.利用抗原抗体特异性结合的原理来研究细胞中生物大分子的定位B.利用荧光染料标记的抗体可以对细胞中的特定分子进行定位C.将荧光物质或酶类直接标记一级抗体可以提高检测灵敏度D.利用胶体金标记抗体,可在电镜下观察特定分子的分布情况E.可对器官、组织、细胞中的生物分子进行定性、定位研究38. Western blot不可以用于检测蛋白质的A.含量B.大小C.三维结构D.磷酸化E.泛素化39.放射性自显影技术是用放射性同位素标记生物样品中的大分子或其前体物质,下列属于强放射性同位素的是A.131IB.35SC.3HD.32PE.14C40.可用于观察细胞表面三维结构的显微镜是A.扫描电子显微镜B.透射电子显微镜C.暗视野显微镜D.相差显微镜E.荧光显微镜41.关于绿色荧光蛋白(GFP)的错误描述是A.是研究蛋白质亚细胞定位的报告分子B.是从水母中分离的一种构象很稳定的蛋白质C.在蓝色光源的激发下,可发射出绿色荧光D.GFP基因可以很容易地导入到多种类型的细胞中表达E.与目的基因融合后,所表达的融合蛋白的定位是由GFP决定的42.关于 Northern印迹分析的错误描述是A.可检测组织或细胞中特定的mRNAB.可使用放射性物质标记的寡核苷酸为探针C.不能有效地检测小 mirna分子D.能够定量检测mRNA的变化E.能够提供基因不同转录本的转录长度信息43.双向电泳显现的未知差异蛋白质条带或点,常常需要进一步鉴定,最精确的判定方法是A.免疫沉淀B.亲和层析C.质谱D.高压液相层析E.Western blot44.研究蛋白质与核酸相互作用的技术是A.酵母双杂交B.染色质免疫沉淀C.噬菌体展示D.基因芯片E.免疫沉淀45.使基因表达下调的常用技术是A.cDNA克隆B. RNAiC.同源重组D. ChlpE.转基因46.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的依据是A.疏水性B.分子量大小C.所带正电荷多少D.所带负电荷多少E.形状特点47.有关扫描电子显微镜的错误描述是A.可以直接观察标本表面的三维形态B.分辨率比透射电镜高C.通过电子束照射在标本后产生的二次电子成像D.样品需经固定、干燥并用重金属膜覆盖E.多用于细胞整体的观察48.将蛋白质进行分级分离并最终进行纯化,常需要综合运用多种分离手段才能够完成,但A.盐析B.有机溶剂沉淀C.亲和层析D.高压液相层析E.双向电泳49.能够将特定基因插入到基因组的技术是A.cDNA克隆B. RNAiC.酵母双杂交D.ChIPE.CRISPR/Cas950.最早制造出第一台显微镜并用它观察到细菌的科学家是A. L. HoekB.R. HookC. M. J SchleidenD.R.VirchowE.A.van Leeuwenhoek51.与普通PCR不同的是,荧光实时定量PCR在反应体系中需加入A.模板DNAB.耐热的DNA聚合酶C.dNTPD.荧光染料E.引物52.关于超分辨显微技术的错误叙述是A.利用380~740nm可见光B.具有非接触、无损伤的特点C.可观测细胞内部结构的特点D.难以进行内部深层三维结构成像E.可以观测活的组织或细胞53.以脂质体为载体,将外源性基因导入真核细胞的过程称A.转化B.转导C.转染D.感染E.转位54.检测特异蛋白质分子的方法是A. PCRB.FISHC. Southern blotD. Northern blotE. Western blot55.关于 CRISPR/Cas9基因编辑技术的错误描述是A.Cas有核酸酶活性B.Cas是 CRISPR连接蛋白C.CRISPR序列转录产生两个非编码RNA分子D.Cas蛋白能够将异二聚体RNA剪切加工成为成熟RNA分子E.Cas识别靶DNA位点的特异性完全由向导序列所决定56.细胞内离子有着重要的生理功能,其中能够起信号转导和促进膜融合作用的离子是A.钠B.钾C.钙D.铜E.铁57.高压液相层析的反向层析柱常常被用来分离小分子蛋白,其进行分离原理是根据蛋白的A.疏水性B.分子量大C.所带正电荷多少D.所带负电荷多少E.形状特点58.可用于研究DNA与蛋白质相互作用,并能捕捉基因表达调控的瞬时事件的方法是A. ChipB. EMSAC.酵母单杂交系统D. CLIPE.噬菌体展示59.单分子荧光成像是活细胞体系中单分子研究的核心技术,其在细胞生物学研究中的应用A.蛋白质结构的解析B.配体与受体的结合C.蛋白质的聚合和解聚D.mRNA的动力学行为E.病毒的示踪60.关于紫外交联免疫沉淀技术的错误叙述是A.能检测整个细胞内与特定RNA结合蛋白结合的RNA分子B.分辨率可达单个碱基水平C.常与高通量测序技术联合应用D.254nm紫外线照射交联对细胞没有损伤E.能够在全基因组水平揭示RNA与RNA结合蛋白相互作用多项选择题1.从实体组织中分离活细胞的第一步是制备游离的细胞悬液,关于常用的酶解方法的正确描述是A.EDTA和EGTA能够增加胰蛋白酶的活性B.胰蛋白酶、胶原酶消除细胞间的连接和细胞外基质C.分离体系所用的溶液必须是等渗的D.分离体系应保持低温,以降低细胞的代谢活动E.所用的试剂、器皿需要过滤除菌或高压灭菌2.关于染色质免疫沉淀技术的正确描述是A.是一种体内研究DNA与蛋白质相互作用的方法B.仅限于低通量的研究C.能够捕捉到发生在染色质上的基因表达调控的瞬时事件D.分离得到的DNA可直接测序获得基因序列信息E.比电泳迁移率变动分析更能反映基因表达调控的真实情况3.关于核酸抽提的正确叙述是A.异硫氰酸胍可使膜脂、蛋白变性B.氯仿可去除细胞内的脂类C.在纯化过程中加入对应的核酸酶可选择性地保留DNA或RNA分子D.通过离心沉淀的方式可获得保留在水相中的核酸分子E.蛋白酶K能使DNA酶和RNA酶失活,不能添加在抽提液中4.酶细胞化学反应的基本原理是将酶与其底物共同孵育,使产物与显色剂反应,生成物一般包括A.荧光分子B.细胞色素C.有色沉淀D.高电子密度沉淀E.有色可溶性化合物5.单细胞测序技术取得突破的主要原因包括A.全基因组及转录组扩增的效率大幅度提高B.高通量测序技术的使用C.高效微流体技术分离单细胞技术的应用D.高精密的荧光活化细胞分选技术的应用E.激光显微切割技术的应用6.可用于活细胞内分子示踪的技术是A.离子探针技术B.绿色荧光蛋白示踪C.荧光共振能量转移D.单分子示踪E.印迹杂交7.基因芯片技术可应用于A.细胞的基因表达谱测定B.筛选与基因相互作用的蛋白质C.基因多态性分析D.基因突变分析E.筛选候选基因8.基因表达定量分析技术包括A.印迹杂交技术B.原位杂交技术C.嵌套小室( transwell法)D.荧光实时定量PCR技术E.基因克隆技术9.关于蛋白质组学的正确描述是A.是基因组学研究进入功能基因组时代的主要标志B.双向电泳和质谱技术是蛋白质组学研究的基本技术C.双向电泳能有效分离高分子量及微量蛋白D.质谱法能够实现高通量分析E.蛋白质的质谱测序通常借助串联质谱10.研究或利用蛋白质与蛋白质相互作用的技术包括A.酵母双杂交B.蛋白质芯C.噬菌体展示D.紫外交联免疫沉淀技术E.免疫沉淀参考答案名词解释1.分辨率(resolution):指显微镜或人眼能够区分相近两点的最小距离。

第三章细胞生物学研究方法和技术一、名词解释荧光漂白恢复技术：即fluorescence photobleaching recovery，FPR或fluorescence recovery after photobleaching，FRAP。

首先利用亲脂性或亲水性的荧光分子，如荧光素、绿色荧光蛋白等与蛋白或脂质耦联，然后利用高能量的激光束照射被被标记的特定区域，使该区域标记分子的荧光发生不可逆淬灭而被漂白。

因非照射区域荧光标记分子的移动，使得漂白区域逐渐恢复荧光。

该技术可用于研究蛋白质的运动。

酵母双杂交技术：该技术用于研究蛋白质之间的相互作用。

放射自显影技术：利用放射性同位素（如3H、14C等）的电离辐射对乳胶（含AgBr 活AgCl）的感光作用，研究样本中放射性化合物在机体、组织和器官、细胞中的分布、定位、运动等生物学活动。

二、选择题1. 正常细胞培养的培养基中常需要加入血清，主要是因为血清中含有（）。

A 氨基酸；B 核酸；C 生长因子；D 维生素。

【答案及解析】C。

加入血清主要是为培养基增加生长因子。

2. 冰冻蚀刻技术主要用于（）。

A 电子显微镜；B 光学显微镜；C 原子力显微镜；D 激光共聚焦显微镜。

【答案及解析】A。

冰冻蚀刻技术属于电镜制样技术之一，另外还有超薄切片技术、负染色技术、电镜三维重构与低温电镜技术、扫描电镜技术等。

3. 建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是通过下列哪种技术构建的？（）A 细胞融合；B 核移植；C 病毒转化；D 基因转移。

【答案及解析】A。

4. 关于光镜的使用下列哪项有误？（）A 观察标本时，应双眼同时睁开，双手并用；B 按照从低倍镜到高倍镜到油镜的顺序进行操作；C 使用油镜时，需要在标本上滴香柏油，将聚光器降至最低，光圈关至最小；D 使用油镜时，不可一边在目镜中观察，一边下降镜筒或上升载物台。

【答案及解析】C。

三、填空题1. 体外培养的细胞，不论原代还是传代细胞一般不保持体内原有的细胞形态。

第一章：绪论1．细胞生物学的任务是什么？它的范围都包括哪些？1) 任务：细胞生物学的任务是以细胞为着眼点，与其他学科的重要概念兼容并蓄，来阐明生物各级结构层次生命现象的本质。

2) 范围：(1) 细胞的细微结构；(2) 细胞分子水平上的结构；(3) 大分子结构变化与细胞生理活动的关系及分子解剖。

2. 细胞生物学在生命科学中所处的地位，以及它与其他学科的关系1）地位：以细胞作为生命活动的基本单位，探索生命活动规律，核心问题是将遗传与发育在细胞水平上的结合。

2）关系：应用现代物理学与化学的技术成就和分子生物学的概念与方法，研究生命现象及其规律。

3. 如何理解所说的“一切生物学问题的答案最终要到细胞中去寻找”。

1) 细胞是一切生物体的最基本的结构和功能单位。

2) 所谓生命实质上即是细胞属性的体现。

生物体的一切生命现象，如生长、发育、繁殖、遗传、分化、代谢和激应等都是细胞这个基本单位的活动体现。

3) 生物科学，如生理学、解剖学、遗传学、免疫学、胚胎学、组织学、发育生物学、分子生物学等，其研究的最终目的都是要从细胞水平上来阐明各自研究领域中生命现象的机理。

4) 现代生物学各个分支学科的交叉汇合是21世纪生命科学的发展趋势，也要求各个学科都要到细胞中去探索生命现象的奥秘。

5) 鉴于细胞在生命界中所具有的独特属性，生物科学各分支学科若要研究各种生命现象的机理，都必须以细胞这个生物体的基本结构和功能单位为研究目标，从细胞中研究各自研究领域中生命现象的机理。

4. 细胞生物学主要研究内容是什么？1）细胞核、染色体以及基因表达2）生物膜与细胞器3）细胞骨架体系4）细胞增殖及其调控5）细胞分化及其调控6）细胞的衰老与凋亡7）细胞起源与进化8）细胞工程5. 当前细胞生物学研究中的基本问题以及细胞基本生命活动研究的重大课题是什么？研究的三个根本性问题：1）细胞内的基因是如何在时间与空间上有序表达的问题2）基因表达的产物――结构蛋白与核酸、脂质、多糖及其复合物，如何逐级装配行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器的问题3）基因表达的产物――大量活性因子与信号分子，如何调节细胞最重要的生命活动的问题生命活动研究的重大课题：1）染色体DNA与蛋白质相互作用关系――非组蛋白对基因组的作用2）细胞增殖、分化、凋亡（程序性死亡）的相互关系及其调控3）细胞信号转导――细胞间信号传递；受体与信号跨膜转导；细胞内信号传递4）细胞结构体系的装配6．你认为是谁首先发现了细胞？1) 荷兰学者 Leeuwenhoek，而不是。

细胞生物学第一章细胞概述1 举例说明细胞的形态与功能相适应。

细胞形态结构与功能的相关性与一致性是很多细胞的共同特点。

如红细胞呈扁圆形的结构，有利于O 2 和CO 2 的交换。

高等动物的卵细胞和精细胞不仅在形态、而且在大小方面都是截然不同的。

2 真核细胞的体积一般都是原核细胞的1000 倍，真核细胞如何解决细胞内重要分子的浓度问题？真核细胞为了解决细胞内重要分子的浓度问题，出现了特化的内膜系统，使一些反应局限于特定的膜结合的细胞器，这样，一些重要反应的分子浓度并没有被稀释。

3 组成蛋白质的基本构件只是20 种氨基酸，为什么蛋白质却具有如此广泛的功能？根本原因是蛋白质具有几乎无限的形态结构，因此蛋白质仅仅是一类分子的总称。

换句话说，蛋白质之所以有如此广泛的作用，是因为蛋白质具有各种不同的结构，特别是在蛋白质高级结构中具有不同的结构域，而这种不同的空间构型使得蛋白质能够有选择地同其他分子进行相互作用，这就是蛋白质结构决定功能放入特异性。

正是由于蛋白质具有如此广泛特异性才维持了生命的高度有序性和复杂性。

4 为什么解决生命科学的问题不能不仅靠分子生物学而要靠细胞生物学？第二章细胞生物学研究方法第三章细胞质膜和跨膜运输1 有人说红细胞是研究膜细胞结构的最好材料，你能说说理由吗？①首先是红细胞数量大，取材容易（体内的血库），极少有其他类型的细胞污染。

②其次，成熟的哺乳动物的红细胞中没有细胞核和线粒体等膜相细胞器，细胞质膜是它唯一的膜结构，所以在分离后不存在其他膜污染问题。

2 十二烷基磺酸钠（SDS）和TritonX-100 都是去垢剂，哪一种可用于分离分离有生物功能的膜蛋白？SDS 是离子型的去垢剂，不仅可使细胞膜崩溃，并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离，而且还破坏膜蛋白内部的非共价键，使蛋白质变性，故不宜用于分离膜蛋白。

TritonX-100 是非离子型的去垢剂，它可以使膜脂溶解，又不会使蛋白质变性。

故用于分离膜蛋白。

第三章细胞生物学研究方法1.细胞形态结构的观察方法：光学显微镜技术、电子显微镜技术、扫描隧道显微镜2.细胞组分的分析方法：○1离心分离技术○2细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法○3特异蛋白抗原的定位与定性○4细胞内特异核酸的定位于定性○5反射自显影技术○6定量细胞化学分析技术第四章细胞质膜（重点：1、3题，2题可不看）1、膜脂有哪几种基本类型？它们各自的功能？（1）基本类型：甘油磷脂、糖脂、胆固醇（2）功能：甘油磷脂不仅是生物膜的基本成分，其中的某些成分如PI等在细胞信号转导中起重要作用鞘脂：其分子结构与甘油磷脂非常相似，可以与甘油磷脂共同组成生物膜。

胆固醇：除了作为生物膜的主要结构成分外，还是很多重要的生物活性分子的前体化合物，它还可以与发育调控的重要信号分子Hedgehog共价结合。

3、细胞表面有哪几种常见的特化结构？细胞红细胞膜骨架的基本结构与功能是什么？细胞表面特化结构主要包括：膜骨架、鞭毛、纤毛、变形足和微绒毛，都是细胞膜与膜内的细胞骨架纤维形成的复合结构，分别于维持细胞的形态、细胞的运动、细胞与环境的物质交换等功能有关。

第五章物质的跨膜运输1、比较载体蛋白与通道蛋白的特点。

载体蛋白相当于结合在细胞质膜上的酶，有特异性结合位点，可同特异性底物结合，一种特异性载体只转运一种类型的分子或离子；转运过程类似于酶酶与底物作用的饱和动力学特征；既可被底物类似物竞争性地抑制，又可被某种抑制剂非竞争性抑制以及对pH有依赖性等，因此有人将载体蛋白称为通透酶。

与酶不同的是，载体蛋白对转运的溶质不进行任何共价修饰。

通道蛋白所介导的被动运输不需与溶质分子结合，允许大小和带电荷适宜的离子通过。

绝大多数的通道蛋白形成有离子选择性的、门控的跨膜通道。

因为这些通道蛋白几乎都与离子的转运有关，所以又称离子通道。

与载体蛋白相比，三个显著特征：具有极高的转运速率，离子通道没有饱和值，离子通道是门控的。

2、试述胞吞作用的类型和功能。