反射弧和反射时分析 神经干动作电位测定

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思考题
• 以实验结果为根据，以严密的逻辑推理 方式说明反射弧的几个组成部分。
中枢抑制和外周抑制 目的意义
• 1. 学习蛙类开颅方法 • 2. 观察中枢抑制现象 • 3. 观察外周抑制现象
基本原理
• 中枢神经系统的高级部位对低级部位的 反射活动不但有兴奋作用，而且有抑制 作用。这种抑制作用保证了中枢神经系 统的多样性和协调性。中枢抑制是谢切 诺夫首先发现的，所以又称谢切诺夫抑 制。
以下观察外周抑制
• 7. 在延脑和脊髓间切断，脊休克后测左 后肢最长趾反射时。 • 8. 测左后肢反射时的同时，镊子用力夹 右后肢脚趾，观察。 • 9. 待刺激时间超过反射时后，放松镊子， 观察左后肢的屈反射（反射时指步骤 7）。
思考题
中枢抑制实验中，含盐滤纸放在间脑断 面后反射时为何延长？试分析其原因。
反射弧的分析和反射时的测定
目的意义
• 1. 分析反射弧的结构 • 感受器、传入神经、神经中枢、传出神 经、效应器 • 2. 练习测定反射时 • 反射时：从皮肤接受刺激至机体出现反 应的时间为反射时。
基本原理
• 反射时是反射通过反射弧所用的时间，完整的 反射弧则是反射的结构基础。反射弧的任何一 部分缺损，原有的反射不再出现。由于脊髓的 机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物（如 脊蛙）为实验材料，以利于观察和分析。
动物与器材
• 蛙；0.5%及1%硫酸溶液、2%利多卡因、 水；常用手术器械、支架、蛙嘴夹或S 形钩、小玻璃皿（ 2个）、小滤纸片 （约1cm×1cm）、棉花、秒表、纱布。
方法步骤
1. 制备脊蛙，枕骨大孔处横断（脊休克）。 2. 暴露左后肢坐骨神经（穿线，蜡纸片， 任氏液棉球，休息数分钟） 3. 悬挂

（2）反射弧的组成：
1、感受器的分析：完全剥掉皮肤和没有剥掉皮肤的脚趾对刺激的反应的不同；反射的感受器存在于皮肤。取掉皮肤后没有了产生神经冲动的感受器，因而不会出现反射。
2、传入神经的分析：用普鲁卡因麻醉左后肢的坐骨神经后，左后肢受刺激无反应，说明坐骨神经中有反射弧的传入神经。
3、传出神经的分析：而后的刺激结果表明：传出神经被切断，神经冲动不能传出，但小腿以下部分不能出现反射。而分布到大腿部分的传出神经末端未被切断，所以大腿部分仍能出现运动。
两栖类的立体组织或器官生理条件易于控制，两栖类的坐骨神经-腓肠肌标本由于具有神经较粗易于观察，离体后活性好等特点而成为研究神经冲动和肌肉收缩的最佳材料。
【实验器材和试剂】
实验动物：
黑眶蟾蜍
实验器材：
蛙类手术器械一套，蛙板，铁支架，肌夹，玻棒，小滤纸片，纱布，培养皿，小烧杯，棉花，秒表，滴管，铜锌弓，纱布，医用缝合线，玻璃分针，眼科剪，解剖针
在制备标本时，避免过度牵拉神经，不可用手或金属器械触碰神经干；；避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染神经和肌肉，也不要用水冲洗，以免影响组织机能；；制备标本时，要随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥；；分离神经时，一定要把周围结缔组织剥离干净；；实验要迅速，以免时间过长影响标本活性（兴奋性）。
【实验结果及相关讨论】
（7）游离腓肠肌：用镊子夹住脊椎骨，将神经搭在腓肠肌上，用剪刀将膝关节周围的大腿肌肉完全剪除，用金冠剪将膝关节上方的股骨刮干净，暴露股骨并在距膝关节上1 cm处剪断，分离腓肠肌的跟腱，用线结扎，然后自跟腱的附着点剪断，提起跟腱，将腓肠肌分离至膝关节处，将小腿其余部分剪掉。这样就制备了一个附着在股骨上的腓肠肌并带有支配腓肠肌的坐骨神经的完整标本。
3、腓肠肌标本的制作

实验一生理学实验方法与生物机能实验系统操作【目的要求】1、了解生理学实验的基本操作技术；2、了解生理学常用实验器械，熟悉并掌握BL-420生物机能实验系统的使用。

3、学习解剖生理学实验报告的写作。

【实验内容】一、生理学实验方法1、实验动物的选择2、常用动物的捕捉方法3、常用动物的麻醉方法（1）常用的麻醉剂（2）常用麻醉给药途径4、用动物的固定方法5、常用手术的基本操作二、BL-420生物机能实验系统的操作BL-420生物机能实验系统是配置在微机上的4通道生物信号采集、放大、显示、记录与处理系统。

它具有记录仪+示波器+放大器+剌激器+心电图仪等传统的实验仪器的全部功能。

可记录动作电位、神经放电、肌电、脑电、心电、慢速电信号、压力、张力、呼吸、温度以及液滴计数等信号。

可输出电压、电流用于刺激。

由以下三部分构成：1．微型计算机。

2．BL-420生物信号采集、放大、A／D转换及刺激输出等多功能硬卡和前面板。

3．BL-420生物信号显示与处理软件。

实验二坐骨神经-腓肠肌标本与坐骨神经标本的制备【目的要求】学习两栖类的毁髓方法；掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。

【实验原理】两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物近似，但其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。

在生理实验中常用蟾蜍或蛙的离体组织或器官作为实验标本。

如用蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律及骨骼肌收缩特点等。

因此，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技能。

【材料与器械】蟾蜍或蛙、任氏液、蛙类手术器械（普通剪刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、金属探针）、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、小烧杯、锌铜弓等。

【实验步骤】1、破坏脑和脊髓（双毁髓）取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净（勿用手搓）。

左手握住蟾蜍，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。

右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管（图2-1）。

反射时测定和反射弧分析神经干动作电位的测定2013级生命科学3班张柏辉学号：201325010761.实验目的1.观察蛙坐骨神经干动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理；2.学习测定反射时的方法，了解反射弧的组成；3.了解脊髓反射的功能特性。

2.实验原理（一）反射时测定和反射弧分析反射是指对某一刺激无意识的应答。

反射活动的结构基础称为反射弧，包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器。

从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间称为反射时。

反射时是反射通过反射弧所用的时间。

反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不再出现。

中枢的兴奋和抑制同时存在又相互影响。

在脊髓反射的中枢之间或高位脑和脊髓对低位脊髓反射中枢均存在抑制作用，这些抑制作用保证了机体活动的协调性。

（二）神经干动作电位的测定神经干在受到有效刺激后可以产生复合动作电位，标志着兴奋的产生。

如果在立体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋冲动可以记录出双相动作电位，假如在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断其兴奋传导能力，此时可以记录到单相动作电位。

3.实验对象与实验材料（一）材料：虎纹蛙（二）器具：手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、毁髓针、玻璃分针、木质蛙板、固定针、锌铜弓、瓷盘、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、滤纸片、支架、蛙嘴夹、小烧杯、秒表、神经屏蔽盒、PowerLab、刺激线、USB线、电脑（三）试剂：任氏液、2%普鲁卡因、0.5%及1%硫酸溶液4.实验方法与步骤（一）反射时与反射弧的测定1. 屈反射取一只虎纹蛙，只毁脑髓制成脊蛙（只毁脑），用蛙嘴夹夹住蛙下颌悬挂在支架上，右后肢最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2~3mm(<10s),同时开始计时。

当出现屈反射时立即停止计时，并用清水冲洗受刺激皮肤，纱布擦干，重复测屈反射时3次。

同样方法测左后肢最长趾的屈反射时。

2.损毁感受器用手术剪自后肢最长趾基部环切皮肤，后用手术镊剥净长趾上的皮肤，用0.5%硫酸溶液刺激去皮皮肤，并记录侧时结果。

广州大学动物生理学实验报告开课学院及实验室：生科院生化楼6032019年4月01日学院生命科学学院年级、专业、班生技171姓名GDZ学号实验课程名称动物生理学实验成绩实验项目名称反射时的测定及反射弧的分析指导老师[实验目的]1.了解反射弧的组成；2.学习反射时的方法；[实验原理]从皮肤接受刺激到机体出现反应的时间为反射时。

反射时是反射通过反射弧所用的时间，完整的反射弧则是反射的结构基础。

反射弧的组成包括感受器、传入神经、反射中枢、传出神经和效应器，反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不再出现。

由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物为实验材料，以利于观察和分析。

[实验对象]蛙[实验药品]任氏液、2%普鲁卡因、硫酸溶液（1%、2%、5%）[仪器与器械]器械：毁髓针、手术镊、手术剪、玻璃分针、铁支架、蛙嘴夹其他：蛙板、小烧杯、小培养皿、小滤纸、棉花、秒表[实验方法与步骤]1取蛙，毁脑髓2蛙嘴夹夹下颌，悬挂蛙体3进行实验项目3.1屈反射的反射时长测定及屈反射感受器的分析测定3.2抓反射的反射时长测定5分离左后肢坐骨神经，穿入棉条备用6进行后续的实验项目6.1屈反射的传入神经的分析测定6.2屈反射的传出神经的分析测定6.3屈反射的神经中枢的分析测定7实验结果记录与分析[实验结果与分析]1.屈反射的反射时长测定（抓反射）及屈反射感受器的分析测定（2%硫酸溶液刺激）结果：（1）如表1，表2所示，右后肢最长指屈反射时长的平均值为3.16s，抓反射时长均值3.36s；（2）剥离右后肢最长指的皮肤后，刺激，未发生屈反射活动；表1右后肢最长指屈反射时长测定第一次测第二次测第三次测平均值1.30s 3.28s 4.90s 3.16s表2右后肢抓反射时长测定第一次测第二次测平均值4.12s 2.6s 3.36s分析：（1）上述两步操作的结果表明蛙的屈反射的感受器为皮肤，2%的硫酸溶液刺激含皮肤的最长指能够发生反射活动，而刺激同样的位置，但肌肉裸露，无皮肤，发现未出现屈反射，结果对比，证明了屈反射的感受器是皮肤，故失去皮肤后，没有了产生神经冲动的感受器，反射不出现。

神经生物学实验实验一反射时的测定及反射弧的分析[目的]1．学习测定反射时的方法。

2．了解反射弧的组成。

通过实验证明任何一个反射，只有当实现该反射的反射弧存在，并保证其完整的情况下才能出现。

[原理]机体在中枢神经系统参与之下，对刺激所发生的反应叫做反射；反射弧是反射的解剖学基础(反射弧一般包括感受器、传入神经、中枢、传出神经、效应器等五个部分)。

要引起反射，首要条件是反射弧必须完整。

反射弧的任何一部分受到破坏，反射即不出现。

[实验动物]蛙或蟾蜍[器材及药品]蛙类常用手术器械、支柱台、蛙嘴夹、蛙板、蛙腿夹、小烧杯、大烧杯、培养皿玻璃 (2个)、小滤纸片、棉花、秒表、纱布、0.5％及1％硫酸溶液、水。

[方法与步骤]一、脊蟾蜍的反射1．制备脊蛙（或脊蟾蜍）：利用毁髓针从枕骨大孔处捣毁脑，保留脊髓制备脊蛙，用蛙嘴夹夹住蛙的下颌，挂在支柱台上2. 屈曲反射正常反射活动的观察及反射时的测定：用培养皿盛0. 5％硫酸溶液，将蛙右后肢的最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2～3mm ( 浸入时间最长不超过10s )，立即记下时间（以秒计算）。

当出现屈腿反射时，则停止计时，此为屈腿反射时（即从浸入时起至后肢发生屈曲时所需要的时间）。

立即用清水冲洗受刺激的皮肤，并用纱布擦干。

重复三次，求出平均值作为右后肢最长趾的反射时。

用同样方法测定左后肢最长趾的反射时。

3. 搔扒反射用浸有1%硫酸的滤纸片刺激脊蟾蜍一侧胸腹部或背部皮肤，引起同侧或双侧后肢运动，扒掉滤纸片。

二、反射弧1、反射弧模式图2、屈曲反射的反射弧最长趾感受器→传入神经纤维→脊髓→传出神经纤维→下肢屈肌3、搔扒反射的反射弧腹部感受器→传入神经纤维→脊髓→传出神经纤维→下肢肌三、反射弧完整才能发生反射1、破坏感受器手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。

用硫酸刺激去皮的长趾，记录结果。

2、麻醉传入和传出神经纤维沿右后肢的股二头肌沟剪开皮肤，分离出坐骨神经。

姓名*** 系年级********* 学号***********科目动物生理学实验同组者***、*** 日期***********反射时测定与反射弧分析【实验目的】学习测定反射时（reflex time）的方法，了解反射弧（reflex arc）的组成。

【实验原理】反射是指对某一刺激无意识的应答。

反射活动的结构基础称为反射弧，包括感受器（receptor）、传入神经（efferent nerve）、神经中枢（nerve center）、传出神经（afferent nerve）、效应器（effector）。

从皮肤接受刺激至机体出现反映的时间为反射时。

反射时是反射通过反射弧所用的时间。

反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不会再出现。

由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物（如脊蛙或脊蟾蜍）为实验材料，以利于观察和分析。

【实验材料】1.试剂：0.2﹪、0.5﹪及1﹪硫酸溶液、自来水、2﹪普鲁卡因。

2.器具：解剖盘，蛙板（木质），毁髓针，铁架台，试管夹，手术剪，手术镊，玻璃分针，烧杯，注射器，棉花，滤纸，烧杯，点滴板，吸水纸。

3.材料：蟾蜍。

【实验步骤】1.蟾蜍的单毁髓将毁髓针由枕骨大孔处垂直刺入，横向搅动，切断脑与脊髓之间的联系。

然后将针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，捣毁脑组织。

2.反射时的测定用夹子夹住脊蟾蜍下颌，悬挂于支架上。

将蟾蜍左后肢的最长趾浸入0.2﹪硫酸溶液中2-3mm，从插入硫酸溶液中开始计时，当出现屈反射时，停止计时，此为反射时。

立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用吸水纸吸干趾端的水，3-5min后，在进行下一次刺激。

重复测定反射时3次，求出平均值作为左后肢最长趾的反射时。

换用0.5﹪及1﹪硫酸溶液，分别测定左后肢最长趾在0.5﹪及1﹪硫酸溶液刺激下的反射时。

测定右后肢最长趾在0.5﹪硫酸溶液刺激下的反射时，与左后肢最长趾在0.5﹪硫酸溶液刺激下的反射时之间作比较。

3.反射弧的分析用手术剪在左后肢脚与小腿的连接处环切皮肤，剥净脚上的皮肤。

反射时测定和反射弧分析、神经干动作电位的测定一、实验对象与仪器1. 实验对象：蛙（frog）2. 实验工具：常用手术器械（手术剪、手术镊、金冠剪、眼科剪、毁髓针、玻璃分针）、培养皿、滴管、纱布、粗棉线、任氏液、2%普鲁卡因、0.5%-1%硫酸溶液、滤纸片、棉花条、蜡纸片、烧杯、支架、蛙嘴夹、手机秒表、神经屏蔽盒3. 实验仪器：PowerLab 15T、生物电输入线、刺激线、USB线、电脑二、实验方法（一）反射时测定和反射弧分析1. 制备脊蛙，单毁髓（只毁脑）2. 剪开大腿右侧中线皮肤和肌肉裂缝之间的膜，分离挑出右侧股部坐骨神经穿线备用3. 将蛙夹在架子上，将右肢最长趾尖端2-3mm浸在0.5%硫酸溶液内，测屈反射时三次，同样测下左后肢最长趾的。

4. 环切去右长趾尖皮肤，进行损毁感受器实验5. 对照未被损毁的同侧长趾感受器实验6. 测试搔扒反射，将蘸有1%硫酸溶液的滤纸片刺激右侧的背/腹7. 麻醉坐骨神经，每隔0.5-2分钟分钟测试同侧未被损毁感受器的长趾屈反射，并记录加药时间8. 当屈反射消失后，每隔0.5-2分钟测试右侧搔扒反射，直至搔扒反射消失，记录相应加药时间9. 测试左侧后肢最长趾的屈反射，后毁坏脊髓重复测其屈反射，观察现象（二）神经干动作电位的测定1. 坐骨神经干标本的制备：对蛙进行双毁髓，剥制后肢，后分离两后肢，分离坐骨神经到蛙的踝关节附近2. 连接动作电位记录的实验装置：将神经干标本放入神经屏蔽盒，连接USB 线、刺激线和通道二的生物电输入线3. 设置生物电放大器和刺激器：打开PowerLab电源和LabChart7软件，设置通道二放大器（量程20mV，低通500Hz或200Hz），设置刺激器（延时5s，重复一个，频率1Hz，脉冲高度1V，脉冲波宽100、200或1000μs，量程10V）4. 开始动作电位测定实验：测双相动作电位；将神经干表面的任氏液用吸水纸吸干，结扎后记录单相动作电位。

实验六反射时测定和反射弧分析一、实验目的1、学习测定反射时的方法；2、分析反射弧的组成，并探讨反射弧的完整性与反射活动的关系。

二、实验原理反射是指在中枢神经系统参与下的机体对内外环境刺激的规律性应答。

反射活动的结构基础是反射弧。

典型的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器5个部分组成。

一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏反射活动就无法实现。

在反射活动中由于神经元特别是中间神经元联系方式的不同使反射活动表现出种种特征。

反射时是指从机体接受刺激到机体出现反应的时间。

下面是几个常见的概念：①屈反射：后肢、足的皮肤受到刺激同侧的肢会产生屈曲反射。

对应的反射弧：趾部皮肤（感受器）→坐骨神经（传入神经）→脊髓（神经中枢）→坐骨神经（传出神经）→后肢肌肉（效应器）②抓反射：背、腹部的皮肤受到刺激时可引起后肢举起而对受刺激部位挠抓的动作。

对应的反射弧：背或腹部皮肤（感受器）→脊神经（传入神经）→脊髓（神经中枢）→坐骨神经（传出神经）→后肢肌肉（效应器）③脊休克：脊髓失去上位中枢的控制，在刚开始的一段时间内对外界的刺激不能产生反应。

越高级的动物脊休克时间越长。

如蛙脊休克的时间一般是5—10分钟。

三、动物与主要器材1、实验动物：青蛙2、实验器材：常用手术器械、支架、蛙嘴夹、蛙板、烧杯、培养皿、小滤纸片、棉花、蜡纸片、吸水纸、秒表、0.5％及1％硫酸溶液、2％普鲁卡因、任氏液四、步骤与方法（一）反射时的测定1、取一只青蛙，毁脑，制备成脊蛙；2、用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌，悬挂于支架上。

测定后肢最长趾的屈反射时：将蛙后肢的最长趾浸入0.5％硫酸溶液中2～3mm，开始计时。

当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。

（浸入时间最长不超过10秒！）停止计时后，立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用纱布擦干。

重复测定屈反射时3次，求均值。

（相邻两次刺激至少要间隔2～3分钟）3、取一浸有1％硫酸溶液的滤纸片，贴于青蛙右侧背部或腹部，记录抓反射的反射时。

反射时的测定与反射弧的分析、神经干动作电位1 实验目的1.1 学习测定反射时的方法．1.2 分析反射弧的组成，并探讨反射弧的完整性与反射活动的关系．1.3 学习记录神经干动作电位．2 实验原理反射是指对某一刺激无意识的应答。

反射活动的结构基础称为反射弧，包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器．从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间称为反射时．反射时是反射通过反射弧所用的时间．反射弧的任何一部分缺损，原有的反射将不再出现．3 实验材料及器具3.1 实验材料青蛙3.2 实验器具常用手术器械、支架、蛙嘴夹、蛙板、烧杯、培养皿（2个）、小滤纸片、棉花、蜡纸片、吸水纸、秒表、0．5％及1％硫酸溶液、2％普鲁卡因、任氏液4 实验方法4.1 反射时测定1、取一只青蛙，毁脑，制备成脊蛙．2、用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌，悬挂于支架上。

测定后肢最长趾的屈反射时．3、取一浸有1％硫酸溶液的滤纸片，贴于蟾蜍右侧背部或腹部，记录擦或抓反射的反射时．4.2 反射弧分析1、毁脑，测左、右两后肢最长趾屈反射时．2、环剪右后肢最长趾基部，去趾上皮肤后测屈反射．3、测右后肢其他趾屈反射．4、测右侧背抓反射（1％硫酸）．5、右侧坐骨神经滴加滴普鲁卡因，加药时开始计时，每隔2min重复步骤3，记录每次重复反射时的变化．6、当屈反射刚刚不能出现时（记录时间），立即测抓反射．之后每隔2min重复一次步骤4，直到抓反射不再出现为止（记录时间）．7、测左后肢最长趾屈反射．8、毁坏脊髓，重复步骤7．4.3 神经干动作电位1、制作坐骨神经干标本．2、连接实验装置．3、调试仪器设置实验参数．4、记录并观察神经干的双相动作电位．5、损伤神经后记录并观察神经干的单相动作电位．5 实验结果5.1 反射时的测定和反射弧分析5.2 神经干动作电位的分析5.2.1 蛙坐骨神经干的双相动作电位untitled : Page 78-8-448m VV020*******80010001200ms S图1 蛙坐骨神经干的双相动作电位Delay ：275ms Dural ：15ms Ampl ：1.000V5.2.2 蛙坐骨神经干的单相动作电位untitled : Page 92-20-101020m VV020*******80010001200ms S图2 蛙坐骨神经干的单相动作电位Delay ：275ms Dural ：30ms Ampl ：1.000V6 分析与讨论6.1 反射时的测定从刺激开始至反射出现所需的时间，即反射通过反射弧的时间，称为反射时（或称潜伏期）． 随着刺激次数的增加，反射时也随着增加，可能原因有：1、进行0.5%H 2SO 4刺激时未立即或充分洗去H 2SO 4，导致刺激部位皮肤受损，对刺激敏感度下降．2、经过多次H 2SO 4刺激后，皮肤上的感受器已经对该刺激有了一定的适应性，故而敏感度也下降．在屈反射测定时，第一次的反射时比后两次的要大，可能原因有：1、进行0.5%H 2SO 4刺激前未将蛙的后肢最长趾基部擦干，残留的水分稀释了H 2SO 4的浓度，导致刺激强度降低．2、测定反射时时的计时不准确．6.2 反射弧的分析反射是指在中枢神经系统参与下的机体对内外环境刺激的规律性应答．反射活动的结构基础是反射弧．典型的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五个部分组成．一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏，反射活动就无法实现．当用0.5%H 2SO 4刺激蛙的完整右后肢最长趾时，有屈反射出现，而环剥蛙的右后肢最长趾基部后，用0.5%H 2SO 4刺激时，蛙无屈反射现象，表明皮肤相当于反射弧的感受器，剥离了皮肤后，反射弧中缺少感受器，反射弧不完整，屈反射无法进行．随后测右后肢其他趾的屈反射时，可看到屈反射现象也再次说明了，在蛙的屈反射中，皮肤相当于反射弧的感受器，缺少感受器，反射无法顺利完成．分离出右侧坐骨神经后用普鲁卡因对神经进行麻醉，而后用0.5%H 2SO 4刺激右侧有皮肤的脚趾，一开始仍有屈反射出现，加药4min 后屈反射才消失．由于传入神经是由多根神经组成的，在进行麻醉时，细的会先被麻醉，粗的后被麻醉，因而一段时间后屈反射才消失，这表明坐骨神经为蛙屈反射的传入神经，且此时坐骨神经已经已经被完全麻醉．而当屈反射消失时，搔扒反射还存在，直到加药12min 后才消失．这是因为屈反射的传入神经是坐骨神经，而搔扒反射的传入神经为脊神经，且其传出神经虽为坐骨神经，但其上有髓鞘，因而普鲁卡因的麻醉作用会晚于传入神经．这证明了反射弧中传入、传出神经完整性的重要．捣毁脊髓，即捣毁反射弧的神经中枢后，蛙对于0.5%H2SO4刺激没有反应．以上实验说明，完整的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器五部分组成，而反射弧的完整性是反射活动建立的基础，只有这五部分都完整才能保证反射活动的顺利进行，其中任何一个部分的生理结构遭到破坏都会使反射活动无法实现．6.3 神经干动作电位的分析6.3.1 神经干的双相动作电位神经组织属于可兴奋组织，用电刺激神经，在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化，当去极化达到阈电位，膜上产生一次可传导的快速电位反转，即动作电位．刺激强度增加不会增大动作电位幅度，这种现象为“全”或“无”现象．神经干是由许多粗细不同的神经纤维组成的．将较粗大的电极置于神经干的表面做记录，则所观察到的动作电位和单根纤维不同，是神经干内许多神经纤维电活动的总和，称为神经干复合电位．在受到刺激时，神经纤维表面的电位发生变化，由正电变为负电，并传导下去，由于两个电极间有一定距离，因而在传导时会出现双相动作电位，如图１．6.3.2 神经干的单相动作电位神经纤维兴奋传到要求保持胜利完整性，包括结构和功能两方面的完整性．在两电极间完全损伤神经纤维，兴奋只通过第一个引导电极，不能传到第二个引导电极，因而只能出现一个方向的波形，称为单相动作电位，如图2.。

反射时的测定及反射弧的分析实验反射时的测定及反射弧的分析【实验⽬的】1、学会测定反射时的⽅法。

2、了解反射弧的组成。

【实验原理】从⽪肤接受刺激到机体出现反应的时间为反射时。

反射时是反射通过反射弧所⽤的时间，完整的反射弧是反射的结构基础。

反射弧的任何⼀部分缺损，原有的反射不再出现。

由于脊髓的机能⽐较简单，所以常选⽤只毁脑的动物（如脊蛙或脊蟾蜍）为实验材料，以利于观察和分析。

【实验动物及器材】蟾蜍，常⽤⼿术器械，⽀架，蛙嘴夹，蛙板，蛙腿夹，⼩烧杯，⼩玻璃⽫，⼩滤纸⽚，棉花，秒表，纱布，0.5%和1%硫酸溶液，2%普卢卡因，⽔，任⽒液。

【实验步骤】1、蟾蜍⼀只，单毁髓只毁脑，称脊蛙。

剪开右侧股部⽪肤，分离出坐⾻神经穿线备⽤。

2、⽤蛙嘴夹夹住产处的下颌，悬挂于⽀架上。

将蟾蜍右后肢的最长脚趾浸⼊0.5%硫酸溶液中2—3mm（浸⼊时间不超过10s），⽴即记下时间（以秒计算）。

当出现屈反射时，则停⽌计时，此为屈反射时。

⽴即⽤清⽔冲洗受刺激的⽪肤病⽤纱布擦⼲。

重复测定屈反射时3此，求出平均值作为右后肢最长趾的反射时。

⽤同样的⽅法测定左后肢最长趾的反射时。

3、⽤⼿术剪剪开右后肢最长趾基部环切⽪肤，然后再⽤⼿术镊剥净长趾上的⽪肤。

⽤硫酸刺激去⽪的长趾，记录结果。

4、改换右后肢有⽪肤的趾，将其浸⼊硫酸溶液中，测定反射时，记录结果。

5、取⼀浸有1%硫酸溶液的滤纸⽚，贴于蟾蜍的右侧背部和腹部，记录擦或抓反射的反射时。

6、取⼀细棉条包住分离出的坐⾻神经，再细棉条上滴⼏滴2%普卢卡因溶液后，每隔2min重复步骤4（记录加药时间）。

7、当屈反射刚刚不能出现时（记录时间），⽴即重复步骤5。

每隔2min重复⼀次步骤5，直到擦或抓反射不再出现为⽌（记录时间）。

记录加药⾄屈反射消失的时间及加药⾄擦或抓反射消失的时间，并记录反射时的变化。

8、将左侧后肢最长趾再次浸⼊0.5%硫酸溶液中记录反射时有⽆变化。

毁坏脊髓后再重复实验，记录结果。

【注意事项】1、每次试验时，要使⽪肤接触硫酸的⾯积不变，以保持相同的刺激强度；2、刺激后要⽴即洗去硫酸，以免损伤⽪肤。

反射时的测定和反射弧的分析神经干复合动作电位的测定2012级生物科学2班第1组陈梦琴学号：201225010171实验目的1.1学习测定反射时的方法，了解反射弧的组成1.2神经干复合动作电位的测定方法1.3 学习Scope软件的使用2实验原理2.1 反射时指从皮肤接受刺激开始至机体出现反应的时间。

反射弧是反射活动的结构基础，包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器。

反射弧的任何一部分缺损，原有的反射都不能出现。

2.2 神经或肌肉发生兴奋时，兴奋部位发生电位变化，这种可扩布性的电位变化即为动作电位。

神经的动作电位是神经兴奋的客观指标。

2.3 如将两个引导电极分别置于正常完整的神经干表面，动作电位先后通过两个引导电极,可引导出两个方向相反的电位偏转，称为双相动作电位。

2.4 如将两引导电极之间的神经麻醉或损伤，动作电位只通过第一个电极引导出来，它只有一个方向的电位偏转，称为单相动作电位。

3实验材料虎纹蛙、常用手术器械、PC机、信号采集处理系统、电子刺激器、神经屏蔽盒、Ringer’s溶液、蛙嘴夹、蛙板、蛙腿夹、小烧杯、小玻璃皿、滴管、小滤纸片、0.5%及1%硫酸溶液、任氏液、2%普鲁卡因等。

4实验步骤4.1反射时的测定和反射弧的分析4.1.1取一只蛙，只毁脑称脊蛙,腹位固定于蛙板上。

剪开右侧股部皮肤，分离出坐骨神经穿线备用。

4.1.2 取下蛙腿夹，用蛙嘴夹夹住脊蛙下颌，悬挂于支架上。

将青蛙右后肢的最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2－3mm（浸入时间最长不超过10s），立即记下时间（以秒计算）。

当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。

立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用纱布擦干。

重复测定屈反射时3次，求出均值作为右后肢最长趾的反射时。

用同样方法测定左后肢最长趾的反射时。

4.1.3 用手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。

用硫酸刺激去皮的长趾，记录结果。

4.1.4 改换右后肢有皮肤的趾，将其浸入硫酸溶液中，测定反射时，记录结果。

神经干复合动作电位以及其传导速度和兴奋不应期的测定一目的要求1.观察蛙坐骨神经复合动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理2.学习测定蛙离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理3.学习测定神经兴奋不应期的基本原理和方法二基本原理神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。

如果在离体神经干的一段施加刺激，从另一端引导传来的神兴奋冲动，可以记录出双相电位，加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相电位。

神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的。

但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。

如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。

即可按照公式v=m/s来计算出兴奋的传导速度。

蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为3-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维，传导速度在正常室温下为35-40 m/s。

神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性的变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。

为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激，用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度，以判定神经兴奋性的变化。

三实验材料蛙，常用手术器械，PC机，信号采集处理系统，电子刺激器，神经屏蔽盒，任氏液四实验步骤1反射时和反射弧的测定（1）制备脊蛙（2）悬挂支架测定反射时2神经干动作电位的测定（1）坐骨神经标本的制作（2）连接poewrlab通道，神经屏蔽盒（3）打开scope软件设置（4）刺激记录双相动作电位（5）损伤神经测定单相动作电位五实验结果与分析（一）反应时测定（单位：秒）（二）反射弧分析（三） 神经干动作电位记录图⑴双相电位untitled : Page 24m VV20040060080010001200msDelay:180ms Ch3Dural:20ms Range:2mv Ampl:6.00v Ch2 Range:2vTime Base 200HZ Sample:256 Time:1S ⑵单相电位untitled : Page 25mVV20040060080010001200msDelay:180ms Ch3Dural:20ms Range:2mvAmpl:6.00v Ch2Range:2vTime Base 200HZSample:256Time:1S神经干是由许多粗细不同的神经纤维组成。