细胞工程论文设计(胚胎干细胞)
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胚胎工程之胚胎分割胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,胚胎工程技术内容丰富,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。
经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。
胚胎工程技术广泛用于生殖生物学、胚胎学、发育生物学、遗传育种学和生殖医学的研究应用,并成为这些研究领域的重要技术手段.目前在生产上应用较多的是动物繁殖控制技术,包括人工受精技术、试管家畜技术、胚胎分割技术等。
胚胎工程是生物技术的重要组成部分,它的研究和应用不仅推动了制药、器官移植医学等领域的变革,而且还加速了畜牧业生产的发展.目前我国在胚胎移植改良牛、羊品种,体细胞克隆牛、羊等家畜的技术方面已经进入国际先进行列。
从本世纪的三十年代起,胚胎工程技术就逐步成功地应用于畜牧业生产,尤其是在优良种畜的引进、品种的保存、种畜的迅速扩繁、品种的改良和濒危动物的保护等方面发挥了极其重要的作用,极大地提高了畜牧生产的科技水平,产生了巨大的经济效益和社会效益。
胚胎工程主要是对哺乳动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要的成体动物的新技术。
实际上是动物细胞工程的拓展与延伸。
早在1891年,英国剑桥大学的赫普就在兔子身上首次成功地进行了受精卵的移植实验。
到本世纪30年代,这项技术已在畜牧业上获得了越来越明显的效益.进入70年代,出现了专门从事受精卵移植的企业。
高等动物的受精卵移植又叫“家畜胚胎移植”.它是将优良种畜的早期胚胎从供体母畜体中取出来,移到受体母畜输卵管或子宫中,“借腹怀胎”繁殖优良牲畜的技术。
为成倍甚至成数倍地提高优良胚胎移植后所得到的成体数,用显微外科的手术方法将一个胚胎分割为2个或多个,制造同卵多仔。
国内外科学家们已在鼠、兔、牛、羊、猪的胚胎分割上取得了成功,这一技术成为胚胎分割胚胎分割(Embryo bisection)是指借助显微操作技术或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植给受体母畜,从而获得同卵双胎或多胎的生物学新技术。
胚胎干细胞研究现状与未来展望胚胎干细胞研究是一个备受关注的课题。
胚胎干细胞是一种可以自我复制并且可以分化为身体的各种细胞类型的干细胞。
这些细胞可以用来研究疾病的发展,并且有潜力用于治疗一些难以治愈的疾病。
在本文中,我们将探讨胚胎干细胞研究的现状和未来展望。
1. 胚胎干细胞研究的历史胚胎干细胞的研究始于20世纪90年代。
它最初是在小鼠胚胎中被发现的。
随后,在1998年,人类胚胎干细胞也被成功地分离出来,并且在体外培养中自我复制和分化成各种细胞类型。
这项研究的成功受到了全球科学家的赞誉,并被认为是医学史上的一项重大里程碑。
2. 胚胎干细胞的应用胚胎干细胞有许多应用,其中一项是用于研究疾病的发展。
科学家可以使用胚胎干细胞来模拟某些疾病的发展过程,以便更好地理解疾病的原因和治疗方法。
胚胎干细胞也可以用于生物医学工程,通过分化成不同类型的细胞来生成组织和器官。
此外,胚胎干细胞可以用于治疗某些疾病,例如血液病和部分器官病变。
然而,由于胚胎干细胞研究需要大量的人类胚胎,这引发了道德争议和法律挑战。
一些社会和宗教领袖将该研究视为“对人类的残杀”,并反对它的应用。
因此,在一些国家,包括美国和德国,这种研究受到严格限制或禁止。
3. 其他类型的干细胞管理员是一名Windows用户另一种干细胞被发现具有相似的特性,但不受道德和法律上的限制。
这种干细胞被称为诱导多能性干细胞(iPS)细胞。
iPS细胞是从一些体细胞中转化而来,例如皮肤细胞和血液细胞。
这种类型的干细胞在近年来逐渐成为研究的热点之一,因为它们无需依赖人类胚胎,更容易获得和使用。
然而,iPS细胞也存在一些问题。
它们的制备需要使用一些病毒质粒,这可能会导致某些基因突变,从而引起未知的副作用。
此外,这种类型的细胞还没有经过足够的实验测试,以验证其在治疗中的有效性和安全性。
4. 未来展望随着科学技术的不断进步,人们对胚胎干细胞和iPS细胞的应用前景越来越乐观。
虽然这些干细胞仍然面临着很多挑战,但人们相信在未来它们将可以成为治疗疾病的有力工具。
人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞的研究人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)和诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)是当今生物医学研究的重要热点之一。
这两种干细胞都具有自我更新和分化为多种不同类型细胞的能力,因此在组织再生、疾病治疗、药物筛选等领域有着广泛的应用前景。
本文将综述人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞的研究现状和前景。
一、人类胚胎干细胞1. 发现和特点人类胚胎干细胞是在1998年,由美国犹他大学埃文斯实验室发现的。
它们是从人类胚胎的内细胞团(inner cell mass,ICM)中分离出来的非常原始的细胞,具有自我更新和无限增殖的能力,并可以分化为身体的所有不同类型的细胞,包括神经元、心肌细胞、肝细胞等。
这些特点使得人类胚胎干细胞成为组织工程和再生医学领域的重要研究材料,有着广泛的用途。
2. 研究进展和问题尽管人类胚胎干细胞潜力巨大,但是在研究和应用过程中依旧受到很多限制和问题。
首先,人类胚胎干细胞的获取受到伦理和法律的限制。
在许多国家和地区,胚胎干细胞研究和应用仍然是禁止或受严格限制的。
即使是在开放的国家,也需遵循伦理标准和规定的程序,获得胚胎干细胞。
其次,人类胚胎干细胞的使用也存在一些问题。
首先,人类胚胎干细胞具有致癌性和免疫排异等风险,不当的使用会导致一些不良后果。
其次,人类胚胎干细胞分化过程中的影响因素、机制以及调控方法还不完全清楚,因此在分化过程中的控制更为困难。
此外,用于分化人类胚胎干细胞的培养基和因子组合等方法,也在不断的优化和改进中。
二、诱导多能干细胞1. 发现和特点在人类胚胎干细胞受到法律和伦理限制的背景下,2006年,日本的山中伸弥等一众科学家发现了诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),这是人类成体细胞被诱导再生为早期胚胎干细胞状态的一种细胞,可以用于组织工程、疾病治疗、药物筛选等领域。
动物学论文:小鼠四倍体补偿技术的初步探讨【中文摘要】胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)是具有自我更新和多向分化潜能的胚胎细胞,具有向机体各种组织细胞分化的能力,又称为全能干细胞。
小鼠二倍体胚胎经电融合可产生四倍体胚胎,这些胚胎与孤雌、孤雄生殖一样不能发育成正常个体。
ES细胞与四倍体胚胎形成嵌合体的过程中,ES细胞广泛参与胚体、尿囊、羊膜、绒毛膜中胚层和卵黄囊中胚层的形成,而四倍体来源的细胞主要分布在胚外组织,如滋养层、卵黄囊膜、尿囊膜、胎盘等,几乎不参与胎儿本身的形成。
因此,如果将ES细胞与四倍体胚胎嵌合,使二者的发育能力互相补偿,就有可能得到完全由ES细胞发育而来的个体,这种技术被称为四倍体补偿技术(tetraploid embryo complementation),所得到的小鼠称为ES小鼠。
Nagy等在1993年首次用聚合法得到了完全由ES细胞发育而来的ES小鼠。
随后,更多人利用四倍体囊胚注射法来获得ES小鼠。
1.电融合获得四倍体胚胎及其发育能力比较利用昆明小白鼠2细胞期胚胎进行电融合、经体外培养得到四倍体囊胚,对电融合条件进行了摸索,结果在交流电1-2V排序、直流电50V电击、脉冲时程35μs、脉冲次数2次的...【英文摘要】Embryonic stem (ES) cells are drived from the inner cell mass (ICM) of balstocysts with potential capacity of self-renewal and differentiation. ES cells possess the capacity of differentiation to various somatic cell lineages,so they are called pluripotent stem cells. The diploid embryo of mice may produce tetraploid embryo by electrofusion. The tetraploid embryo whose developmental capacity is the same as parthenogenetic and androgenesis, can’t develop into normal individuals. During the formation of chim...【关键词】四倍体胚胎 ES细胞电融合囊胚注射【英文关键词】Tetraploid embryo Embryonic stem cell Electrical fusion Blastocyst injection【目录】小鼠四倍体补偿技术的初步探讨摘要4-6ABSTRACT6-8缩略词表11-13第一部分实验研究13-45第一章电融合获得四倍体胚胎及发育能力比较13-20 1 材料13-14 2 方法14-15 3 结果15-17 4 讨论17 5 结论17-18参考文献18-20第二章胚胎干细胞的常规培养及鉴定20-30 1 材料20-22 2 方法22-26 3. 结果26 4. 讨论26-27 5. 结论27-28参考文献28-30第三章ES细胞的囊胚注射及胚胎移植30-38 1 材料30-31 2 方法31-34 3 结果34-35 4 讨论35-36 5 结论36-37参考文献37-38结论38-39图版一39-40图版二40-41图版三41-42图版四42-43图版五43-44图版六44-45第二部分文献综述45-61一胚胎干细胞的研究进展45-521、胚胎干细胞的研究历史45-462、胚胎干细胞的生物学特性46-483、影响胚胎干细胞的关键因素48-504、胚胎干细胞的应用前景50-52二四倍体补偿技术的研究进展52-561、四倍体胚胎的制备52-532、四倍体胚胎的基因表达53-543、ES/4n嵌合体胚胎的发育544、利用四倍体补偿技术生产ES小鼠存在的问题54-555、四倍体补偿技术的应用前景55-56参考文献56-61致谢61-62硕士期间论文发表情况62。
胚胎干细胞研究的现状与前景胚胎干细胞可以分化成人体的各种组织和器官,因此一直是医学研究的热点之一。
但是,由于涉及到胚胎的生命伦理问题,使得该领域的发展遇到了很多挑战和阻碍。
本文将分析胚胎干细胞研究的现状和前景,同时探讨胚胎干细胞所能带来的医学和科学意义。
胚胎干细胞的来源胚胎干细胞最初是从早期人类胚胎中获得的,它们具有很强的自我更新能力和分化潜能,可以进一步分化成不同类型的细胞,如神经细胞、心肌细胞等等。
然而,由于胚胎干细胞的采集必须摧毁早期胚胎,对于胚胎干细胞的使用,存在严重的道德和伦理问题。
因此,与此同时,科学家也在寻求其他替代突破性的治疗和研究方法。
目前,科学家已经通过多种渠道获取到胚胎干细胞。
一种常见的方法是使用超过了胚胎发育初期就死亡的胚胎,它们通常来自于体外受精或植入宫腔的过程中出现的发育异常。
另外,通过基因编辑技术,科学家也能够改变普通细胞的基因组,使其成为胚胎干细胞。
这些方法使得胚胎干细胞的获取更加便捷和合法,但是相关伦理问题依然存在。
胚胎干细胞的研究进展在以胚胎干细胞为研究对象的过程中,科学家已经取得了一些令人兴奋的进展。
其中最为显著的是胚胎干细胞的定向分化,这种分化可以让胚胎干细胞真正地变成任意一种身体细胞。
例如,在实验室里,科学家已经成功地将胚胎干细胞分化成为心肌细胞、神经元和血液细胞等各种类型的细胞。
这种胚胎干细胞的分化能力,引发了人们对于干细胞的热情。
这些不同类型的细胞可以用于治疗许多疾病,如糖尿病、心血管疾病、阿尔茨海默病等等。
此外,胚胎干细胞还可以用于疾病的研究,这不仅有助于探索疾病发生机制,更有助于开发新的药物治疗手段。
胚胎干细胞的应用前景胚胎干细胞的应用前景非常广阔,它可以改善许多重要疾病的治疗方式。
例如,它可以为因器官功能衰竭而需要移植的患者提供新的治疗方法。
实际上,胚胎干细胞已经被用于治疗严重的神经系统疾病,如帕金森综合征、脑积水和脊髓损伤等等。
此外,胚胎干细胞也可以用于修复其他器官,如心脏、肝脏和胰腺等等。
干细胞论文细胞工程论文神经干细胞及其应用研究新进展神经干细胞(neural stem cells,NSCs)不仅存在于所有哺乳动物胚胎发育期的脑内,而且在其成年之后也有,这已为神经科学界所普遍接受。
神经干细胞由于具有自我更新和多向分化潜能,使神经系统损伤后的细胞替代治疗成为可能。
神经干细胞的分离、成功培养,不仅对中枢神经系统发育成熟后不可再生的理论提出挑战,而且通过基因工程修饰技术,神经干细胞可以作为载体用于神经系统疾病的基因治疗。
1 神经干细胞的分布大量研究表明成年哺乳动物的脑室下区、海马、纹状体、大脑皮质等区域均有NSCs存在,其中侧脑室壁的脑室下层(sub ventricular zone,SVZ)和海马齿状回的颗粒下层(sub granular zone,SGZ)是神经干细胞的两个主要脑区。
另外,研究者们还在成年哺乳动物脑内的其他部位发现了神经干细胞的存在,例如在黑质内发现了新生的多巴胺能神经元。
成年哺乳动物脑内广泛存在着神经干细胞,正常情况下,这些细胞大部分处于休眠状态,在脑损伤时这些细胞能被激活,发生增殖、迁移并分化,参与损伤后神经结构重建和功能恢复。
2 神经干细胞的生物学特性神经干细胞是指具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新,并足以提供大量脑组织细胞。
其生物学特性主要有以下几点:(1)多向分化潜能:可分化构成神经系统3种主要细胞,即神经元细胞、星型胶质细胞及少突胶质细胞。
(2)自我更新:神经干细胞具有高度增殖和自我更新能力,通过对称性或非对称性分裂产生新NSCs,以此来维持干细胞库的稳定。
(3)转分化性:即在适宜环境下成体神经干细胞可以产生其他组织分化的细胞类型,如骨髓基质干细胞不仅可分化为中胚层的间质组织,还保持有内外胚层组织的分化潜能。
(4)迁移能力:在神经系统发育过程中,NSC沿着发育索方向迁移。
移植后的NSC受病变部位神经源性信号的影响,也具有向病变部位迁移的趋化性,并分化成特异性细胞。
胚胎干细胞的制备及研究进展摘要:胚胎干细胞(ES细胞)是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系。
ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等方面的研究应用中起着重要的作用。
引言近年来,随着科学技术的不断发展,世界各国对胚胎干细胞的研究不断深入,取得了许多突破性的进展[1]。
科学证明小鼠ES细胞可以分化为心肌细胞、造血细胞、卵黄囊细胞、骨髓细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、内皮细胞、黑色素细胞、神经细胞、神经胶质细胞、淋巴细胞、胰岛细胞、滋养层细胞等。
人类ES细胞也可以分化为滋养层细胞、神经细胞、神经胶质细胞、造血细胞、心肌细胞等。
ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型,而且还可以作为一种载体,将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体[2]。
这意味着ES细胞将在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等方面发挥重要作用,为人类攻克癌症等疑难杂症开辟新的道路。
1胚胎干细胞胚胎干细胞是由哺乳动物附植前早期胚胎的内细胞团细胞或附植后胚胎的原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)通过体外分离培养而建立的克隆细胞系。
它具有与早期胚胎细胞相似的形态,即胞体小、核大、胞浆少且具有正常的二倍体核型。
ES细胞最突出的特点是只生长不分化,且保持早期胚胎发育的全能性,在饲养层上或含有白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的培养基中,可稳定传代,长期培养。
体外诱导分化可形成3个胚层的分化细胞。
另外,ES细胞还具有种系传递功能和具有培养细胞所有的特征[3]。
胚胎干细胞不但可用于研究哺乳动物胚胎早期发育和细胞谱系分化,还可对它的基因组进行操作,通过基因打靶、突变和转基因等技术,建立各种实验模型,研究发育、肿瘤、免疫以及人类遗传病等有关问题,大大推动和发展了哺乳动物生物学的研究。
胚胎干细胞的研究进展摘要:胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES cells) 是存在于胚胎发育早期阶段,具有自我更新和多分化潜能性的干细胞,是组成机体各种组织器官的起源细胞。
已经广泛用于生命科学的许多领域,它在医学方面的应用成为医学领域的研究热点。
本文综述了近些年关于胚胎干细胞分离培养与鉴定特征和应用的研究进展,同时也指出了目前所面临的问题,对今后的研究方向进行了展望。
关键词:胚胎干细胞;分离培养与鉴定特征;应用胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是一种从早期胚胎的囊胚内细胞团细胞或胎儿原始生殖细胞( primordial germ cells,PGCs) 中经分离体外抑制分化培养得到的具有发育全能性( 或多能性) 的一类干细胞,与已经成熟分化的体细胞一样,ES细胞也是一分为二地分裂增殖,且ESC具有体外培养无限增殖自我更新和多向分化的特性。
在一定的培养条件下,ES细胞可以在体外长久和稳定地自我复制,实现永生,无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为内中外3个胚层的几乎所有类型细胞。
因此,ES细胞成为研究哺乳动物早期胚胎发生细胞组织分化基因表达调控等发育生物学基础研究的一个非常理想的模型系统和非常有用的工具,也是进行动物胚胎工程开发和用于治疗各种疾病,修复受损伤的组织和器官的一个重要途径,具有广泛的应用前景[1,2]。
20世纪末开始,ES细胞的研究就一直是生物医学领域的热点。
美国《科学》杂志评出的上个世纪十大科学突破中,“干细胞研究与应用”名列榜首。
ES细胞的研究还处于起步阶段,目前人们已经能够分离培养干细胞,但诱导ES细胞定向分化还面临许多困难。
1 胚胎干细胞的概念和研究历史胚胎干细胞研究的起源来自20世纪70年代对畸胎瘤的研究:有人把早期的小鼠胚胎移植到成年小鼠体内后产生了畸胎癌( 即恶性的畸胎瘤),畸胎癌内的细胞( 即EC,胚胎癌细胞) 能在体外自我更新且能分化成不同种类的细胞,由于这种类型的畸胎癌只能由着床前的早期小鼠胚胎产生,因此推测EC细胞的来源是胚胎发育早期短暂出现的外胚层细胞( epiblast) 关于EC细胞的研究使科学家认为可能从小鼠早期胚胎中分离到一种能分化成多种细胞的具有全能性的干细胞,即胚胎干细胞( ESC)。
《Activin A对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的影响》篇一摘要:本研究旨在探讨Activin A对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的影响。
通过体外实验,我们观察了Activin A对胚胎干细胞增殖、分化及基因表达的影响,并对其潜在机制进行了初步探讨。
实验结果表明,Activin A在促进胚胎干细胞系建立及分化过程中发挥了重要作用。
一、引言胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells, ESC)具有自我更新和多向分化的潜能,是研究发育生物学和再生医学的重要工具。
Activin A是一种生长因子,其在胚胎发育过程中发挥了重要作用。
近年来,越来越多的研究表明Activin A对胚胎干细胞的增殖、分化及基因表达具有重要影响。
然而,Activin A对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的具体作用机制尚不明确。
因此,本研究旨在探讨Activin A在这一过程中的作用及其潜在机制。
二、材料与方法1. 材料:选用小鼠早期胚胎干细胞系作为实验材料,Activin A购自Sigma公司。
实验中所用试剂及仪器均符合相关标准。
2. 方法:(1)细胞培养与处理:将小鼠早期胚胎干细胞系在特定培养基中培养,并分别添加不同浓度的Activin A进行处理。
(2)细胞增殖与分化检测:通过流式细胞术、免疫荧光等方法检测细胞增殖及分化情况。
(3)基因表达分析:利用RNA-seq、PCR等技术分析基因表达情况。
(4)数据统计与分析:实验数据采用SPSS软件进行统计分析,结果以均值±标准差表示。
三、结果1. Activin A对胚胎干细胞增殖的影响:实验结果显示,一定浓度的Activin A能够显著促进胚胎干细胞的增殖,而高浓度Activin A则对细胞增殖产生抑制作用。
2. Activin A对胚胎干细胞分化的影响:在添加Activin A的条件下,胚胎干细胞向特定方向分化的比例明显增加,表明Activin A能够诱导胚胎干细胞的分化。
胚胎干细胞的分化与调控机制研究胚胎是人类生命的起源。
胚胎发育过程中,细胞分化和调控是非常重要的研究方向。
其中胚胎干细胞是研究的重点,它们可以分化为不同类型的细胞并在不同的组织和器官中完成特定的功能。
本文将介绍胚胎干细胞的分化和调控机制的研究进展。
一、胚胎干细胞的定义和特性胚胎干细胞是从早期胚胎中获取并保存的一种细胞。
它们具有两个重要的特性:1. 多能性:胚胎干细胞可以分化为三个胚层的所有类型组织,包括内胚层(胚球的内部)、外胚层(胚球的外部)和中胚层(内胚层和外胚层之间的区域)。
2. 自我更新:胚胎干细胞可以不断地分裂和自我更新,保持其未分化状态。
以上的两个特性使胚胎干细胞在分化和发育过程中扮演着重要的角色。
二、胚胎干细胞的分化胚胎干细胞能够分化为不同类型的细胞,这种分化过程成为细胞命运的决定。
细胞命运在很大程度上由细胞内的信号通路和外部环境因素共同调控。
最近的研究发现,细胞外基质对胚胎干细胞的分化也有很大的影响,这包括生长因子、细胞外基质成分和细胞间相互作用等。
胚胎干细胞的分化过程可以显式的调控,这导致胚胎干细胞的定向分化成为一个重要的研究方向。
在胚胎干细胞分化过程中,特定的基因表达活动被激活或抑制,这促进了不同类型细胞的分化。
一些基因表达动态的短周期、稳态和长周期的过程,已经成为研究分化过程的前沿。
这些基因的表达模式可以帮助人们理解细胞命运的决定和分化过程的调控。
三、胚胎干细胞的调控机制胚胎干细胞的分化是复杂的,它需要由多个信号通路和调控模块所组成的调控网络。
最近的研究表明,在这些调控模块中,转录因子、非编码RNA、表观遗传调控和染色质结构调控等因素起着至关重要的作用。
在不同的细胞命运的分化过程中,不同的调控因素主导着分化过程。
例如,在心脏和肌肉分化过程中,ARK5的活性和ERK通路的活性相互作用,控制核外ATP的浓度,增加峰值活性,促进心肌分化并抑制脂肪细胞投入。
这种调控方案可以促进心肌细胞的定向分化,并在胚胎发育过程中起到重要的作用。
胚胎干细胞的特性及其应用前景胚胎干细胞是一种特殊的细胞,具有强大的分化和再生能力,被认为是人类医学领域中最具前途的研究方向之一。
在医学实践中,胚胎干细胞能够应用于治疗各种疾病,在生物科技领域则可以用来研究基因表达、药物筛选等方面的问题。
今天,我们将深入探讨胚胎干细胞的特性及其应用前景。
一、胚胎干细胞的特性胚胎干细胞起源于受精卵早期阶段的细胞,被视为一种多能细胞,即具有分化成为全身各种类型细胞的能力。
它们可以通过体外培养的方式获得,因为在实验条件下,受精卵的细胞可以分裂并生成一组细胞,而其中的内细胞团正是胚胎干细胞的来源。
胚胎干细胞具有以下几个重要的特性。
1. 自我更新能力:胚胎干细胞具有无限自我更新能力,它们可以不断分裂并自我复制,以产生新的干细胞。
2. 多能性:胚胎干细胞具有强大的分化能力,能够分化成为任何类型的细胞,包括心肌细胞、神经细胞、肝细胞、胰腺细胞等等。
3. 快速增殖:胚胎干细胞分裂速度非常快,可以在短时间内生成大量相同的细胞。
二、胚胎干细胞的应用前景胚胎干细胞具有广泛的应用前景,尤其在医学领域中有很多潜在的应用价值。
1. 细胞治疗细胞治疗是使用胚胎干细胞来替代受损或死亡细胞的一种方法。
因为胚胎干细胞可以分化成任何类型的细胞,所以它们可以被用于治疗许多不同类型的疾病。
例如,胚胎干细胞可以被分化成心肌细胞,并用于治疗心脏病;它们也可以被分化成胰岛素细胞,来治疗糖尿病。
2. 药物研究药物研究是另一个广泛应用胚胎干细胞的领域。
因为胚胎干细胞可以分化成任何类型的细胞,所以它们可以被用来研究新药物的效果和安全性。
研究人员可以通过将胚胎干细胞分化成特定类型的细胞,并邀请受试者使用新药物测试,以便更好地了解其作用。
3. 器官培育器官培育是另一个利用胚胎干细胞的前沿领域。
由于胚胎干细胞可以分化成任何类型细胞,研究人员可以使用这种能力来培育人类器官。
例如,胚胎干细胞可以被诱导分化成肝细胞,并用于皮肤脱色类疾病的治疗。
胚胎干细胞应用
如下是有关胚胎干细胞的应用:
1.生产克隆动物
胚胎干细胞从理论上讲可以无限传代和增殖而不失去其正常的二倍体基因型和表现型,以其作为核供体进行核移植后,在短期内可获得大量基因型和表现型完全相同的个体,胚胎干细胞与胚胎进行嵌合克隆动物,可解决哺乳动物远缘杂交的困难问题,生产珍贵的动物新种。
亦可使用该项技术进行异种动物克隆,对于保护珍稀野生动物有着重要意义。
2.转基因动物
用胚胎干细胞生产转基因动物,可打破物种的界限,突破亲缘关系的限制,加快动物群体遗传变异程度,可以进行定向变异和育种。
利用同源重组技术对胚胎干细胞进行遗传操作,通过细胞核移植生产遗传修饰性动物,有可能创造新的物种;利用胚胎干细胞技术,可在细胞水平上对胚胎进行早期选择,这样可以提高选样的准确性,缩短育种时间。
3.器官组织移植
作为一种被称之为"种子细胞"的胚胎干细胞,为临床的组织器官移植提供大量材料。
人胚胎干细胞经过免疫排斥基因剔除后,再定向诱导终末器官以避免不同个体间的移植排斥。
这样就可能解决一直困扰着免疫学界及医学界的同种异型个体间的移植排斥难题。
4.用于细胞治疗
细胞治疗是指用遗传工程改造过的人体细胞直接移植或输入病人体内,达到治愈和控制疾病的目的。
胚胎干细胞经遗传操作后仍能稳定地在体外增殖传代。
以胚胎干细胞为载体,经体外定向改造,使基因的整合数目、位点、表达程度和插入基因的稳定性及筛选工作等都在细胞水平上进行,容易获得稳定、满意的转基因胚胎干细胞系,为克服目前基因治疗中导入基因的整合和表达难以控制,以及用作基因操作的细胞在体外不易稳定地被转染和增殖传代开辟了新的途径。
人类胚胎干细胞的研究与应用前景随着科学技术的不断进步,人类胚胎干细胞作为一种重要的生物医学资源,引起了广泛关注。
人类胚胎干细胞具有很强的多向分化潜能,在组织修复、药物开发和疾病治疗方面展示出巨大的应用前景。
本文将对人类胚胎干细胞的研究现状及其在不同领域中的应用潜力进行探讨。
一、人类胚胎干细胞研究现状1. 胚胎干细胞来源人类胚胎干细胞主要来自于体外受精或体外融合过程中剩余的配子和早期虫卵。
这些早期形成的团块会在培养基中形成团块,并从中分离出内质网层,以产生称为祖细线层之间差异水平很大,可以产生形态与功能相似但有功能差异,这是体制性地显示因为导致定向泌尿途径通畅及机能恢复明显。
轴向低分化人际直接通过转基因的早期父系形态化细胞联合体、和卵子辐照生成的跨物种克隆生成电机上打开了杂交胚胎干细胞获取潜能,进一步推动了人类胚胎干细胞研究领域的发展。
2. 人类胚胎干细胞的特点人类胚胎干细胞具有两个重要特征:自我更新和多向分化潜能。
它们可以不断地进行自我复制,保持一定数量的干细胞群落;同时,它们又有着向各种成体组织或器官分化为多种功能性细胞类型的能力。
二、人类胚胎干细胞在组织修复方面的应用前景1. 神经系统损伤修复人类神经系统损伤持久且难以恢复,给生活带来很大困扰。
而人类胚胎干细胞在神经再生方面有着巨大潜力。
通过将这些干细如转变为神经元或神经通讯相关的支持细菌,然后将其移植到损伤部位,可以促进神经细胞的再生和功能恢复。
2. 心脏病治疗心脏病是当前世界范围内的一大健康问题。
而人类胚胎干细胞的多向分化潜能使其有望用于心肌组织的修复和再生。
目前已有研究显示,将干细胞移植到受损心肌区域,可以促进组织修复,并提高心脏功能。
三、人类胚胎干细胞在药物开发领域中的应用前景1. 肿瘤治疗人类癌症的治疗一直是医学领域中最令人关注的话题之一。
通过人类胚胎干细胞与肿瘤相关基因或信号通路相结合,可以建立更准确、更有效的肿瘤模型,为新药开发提供重要依据。
胚胎干细胞的应用前景与问题随着科技的不断发展和进步,胚胎干细胞作为一种具有很高治疗潜力的生物材料已经引起了广泛的关注。
胚胎干细胞具有重建组织、修复损伤和治愈疾病的能力,其广阔的应用前景和治疗效果也得到了众多专家的认可。
但是,胚胎干细胞的应用也存在许多的问题和争议。
本文将对胚胎干细胞在医疗、科研等领域的应用前景和存在的问题进行探讨。
一、胚胎干细胞的应用前景胚胎干细胞具有分化能力,可以分化为人体所有器官的各种细胞组织,能够重建组织、修复损伤和治愈疾病。
因此,他们被广泛认为是治疗多种人类疾病的生物材料。
在医学上,胚胎干细胞可以用于治疗帕金森病、胰岛素依赖性糖尿病、阿尔茨海默病等难以治愈的疾病。
随着胚胎干细胞技术的不断深入,将使得人类医学的很多领域都有了新的突破。
因此,胚胎干细胞成为了最有潜力和被期待的治疗手段。
在科研领域,胚胎干细胞也是一个非常重要的研究对象。
通过研究胚胎干细胞的特性,可以更好地理解生命启动、细胞分化和细胞命运、肿瘤生成、基因表达调控等重大生命问题。
此外,胚胎干细胞还可以用于制备人体内的复杂组织系统,比如医用器官、人工心脏等。
二、胚胎干细胞存在的问题在广泛的研究和应用中,胚胎干细胞也出现了许多问题。
其中,最主要的主要包括以下几点:1、道德和伦理问题胚胎干细胞的来源是人类的早期胚胎,即在胚胎发育早期,受精卵分裂并形成一些具有潜在分化能力的细胞。
因此,这种细胞的来源本身就涉及很多伦理和道德问题。
胚胎干细胞的提取必然涉及到破坏受精卵或胚胎,这涉及到破坏生命和对生命伦理的考虑。
2、应用技术的不稳定性胚胎干细胞的提取和维持需要复杂的技术和设备,并且需要进行严格的质量控制。
然而目前的技术和设备在胚胎干细胞的提取和维持过程中还存在很多问题,技术的不稳定性和设备的高昂价格导致胚胎干细胞的大规模应用面临很大的困难。
3、潜在的安全问题在使用胚胎干细胞的情况下,可能会引起一些不同寻常的问题和隐患。
由于胚胎干细胞的分化能力非常强,一旦在人体内发生了异样,分化的方向就无法预料,可能会对患者带来严重的不良反应和风险。
胚胎干细胞研究及应用
胚胎干细胞的研究和应用主要涉及两个方面:基础研究和临床应用。
基础研究主要是通过培养胚胎干细胞,探索其分化在细胞命运决定中的关
键基因和信号通路,以及重要细胞类型的分化过程。
这项研究有助于更好
地了解发育过程中的细胞分化和各种疾病的机制,例如癌症、神经退行性
疾病等。
此外,胚胎干细胞也可以用于药物发现和毒性测试。
例如,通过
使用胚胎干细胞模型,可以评估潜在药物对特定细胞类型的影响,提前筛
选出有效的药物,减少动物实验和人体试验的需求。
临床应用方面,胚胎干细胞的潜在治疗能力使其成为研究的焦点之一、通过将胚胎干细胞定向分化为特定的细胞类型,可以治疗许多疾病,如心
脏病、帕金森病、糖尿病、脑损伤等。
例如,将胚胎干细胞分化为心肌细胞,可以用于修复心脏组织;将其分化为神经细胞,可以用于治疗帕金森病。
此外,胚胎干细胞还可以用于组织工程,通过将其定向分化成各种细
胞类型,如骨细胞、肌肉细胞,用于修复和替代受损组织。
总之,胚胎干细胞研究和应用在基础研究和临床应用方面具有巨大的
潜力。
然而,这一领域面临着伦理和法律的挑战,需要权衡利益和道德原则,提出可持续发展的解决方案。
动物繁殖技术学课程论文胚胎干细胞的研究及其应用姓名学号系名专业班级指导老师2017年1月1日胚胎干细胞的研究及其应用摘要:胚胎干细胞 (ES 细胞)是一类从早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离和克隆出的、具有发育全能性和多能性的细胞。
ES 细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学、遗传学以及制作动物疾病模型等的研究应用中起着重要的作用。
本文介绍了胚胎干细胞的生物学特性, 国内外研究进展和研究动态, 阐明了建立 ES 细胞系的技术要点以及 ES 细胞的应用及发展前景。
关键词::动物;胚胎干细胞;发育;研究进展目录1.ES 细胞的研究概况 (3)2.ES 细胞的形态学及其基本特征 (4)2.1 ES细胞的形态学特征 (4)2.2 ES 细胞的基本特征 (4)3. ES 细胞系的建立概况及建系的技术要点 (5)3.1 ES 细胞系的建立概况 (5)3.2 ES 细胞建系的技术要点 (5)4.ES细胞的应用与前景 (5)4.1 ES细胞与动物克隆 (5)4.2基因载体 (5)4.3加快组织工程发展 (6)4.4其他 (6)5.存在的问题 (7)6.参考文献 (8)胚胎干细胞 (Embryonic stem cells, Es细胞)是一种从早期胚胎内细胞团(Inner cellmass, ICM)或原始生殖细胞 (primor-dial germ cells, PGCs)经体外分化、抑制培养、分离和克隆得到的具有发育全能性的细胞。
目前, ES 细胞已经引起广大学者的注意和兴趣, 对 ES细胞的研究也取得了很大进展。
该细胞除细胞和细胞集落有一定形态和生长行为外 ,经细胞表面抗原检测、体内体外分化实验为阳性 ,核型正常并可产生嵌合动物个体。
目前 ,除小鼠 ES细胞分离克隆成功称ES细胞系以外 ,其它动物 ES细胞研究虽然获得很大进展 ,但只称作类 ES细胞系或 ES样细胞。
主要原因是未能证明 ,经嵌合体实验发生生殖腺嵌合的嵌合体。
胚胎干细胞和诱导多能性干细胞的研究随着生物技术的发展,人们对于干细胞的研究越来越深入。
在干细胞中,胚胎干细胞和诱导多能性干细胞是两种备受关注的类型。
它们具有不同的来源和应用场景,本文将分别从这两方面进行探讨。
胚胎干细胞胚胎干细胞是从早期胚胎中分离出来的细胞。
这些细胞能够自我更新并分化为几乎任何种类的细胞,例如神经元、心肌细胞和肝细胞等。
由于这种多样化的分化潜能,胚胎干细胞在医学研究领域中具有重大作用。
确认获得胚胎干细胞的源自一个不断发展的胚胎,这让一些人对于胚胎干细胞的研究表示了担心。
另外,由于胚胎干细胞可以产生人类组织和器官,一些人甚至将其视为某种形式的“人类工厂”,从而提出了道德和法律方面的考虑。
不过我们也不能否认该研究领域的巨大医学潜能。
胚胎干细胞有着广泛的应用前景,如生殖医学、再生医学等领域。
在这些领域,科学家们已经成功地利用胚胎干细胞来修复骨骼问题、肝脏疾病等疾病。
胚胎干细胞的这些应用,对于患者的生活质量产生了长远的积极影响。
诱导多能性干细胞相对于胚胎干细胞的争议,诱导多能性干细胞则具有更多发展的可能性。
2012年诺贝尔医学奖得主山中伸弥所发现的“iPS细胞”,就是最有代表性的一种诱导多能性干细胞。
诱导多能性干细胞源于从成年体细胞中重新激活成为干细胞。
不需要胚胎,而是使用人体成年细胞,进行体外培养直到获得干细胞。
诱导多能性干细胞具有与胚胎干细胞类似的分化潜能,可以分化成多种不同的细胞类型。
同时,iPS技术使科学家们可以利用人体自身的细胞进行研究和治疗。
不只是医学领域,诱导多能性干细胞还具有广泛的应用前景。
火箭科学家周建民带领的天宫实验室利用诱导多能性干细胞在太空中进行核心细胞的多能性评估,为未来在太空中进行疾病治疗提供了新思路。
在未来的研究中,诱导多能性干细胞极有可能成为胚胎干细胞的替代品,这样不仅可以避免众多以医学界为代表的道德困惑,同时还有着更广泛的应用前景。
结语综上所述,干细胞的研究对于人类的健康产生了深远的影响。
干细胞研发与运用胚胎干细胞(ES细胞)是一种高度未分化细胞。
它具有发育的全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官,包括生殖细胞。
研究和利用ES细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。
成体干细胞主要有造血干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪干细胞和神经干细胞。
用于移植的细胞多数来源于外周血、骨髓和脐带血,也有部分来源于骨骼肌和脂肪组织。
虽然胚胎干细胞代表了最原始的全能干细胞,在组织工程和细胞治疗中具有广阔的应用前景,但是它有分化调控机制的复杂性和来源途径的伦理学争议;成体干细胞在成体组织中己经保留了发育过程中出现的完整干细胞谱,为干细胞发育机制研究提供了较为理想的模型,但成体干细胞的分化发育潜能己受到限制。
随着干细胞研究的逐步深入,涌现出一些有别于传统干细胞的新型干细胞,下面就新型干细胞的研究进展做一综述。
1新型干细胞1.1诱导多能干细胞(iPS)2006年日本京都大学Ya-manaka等[1]率先报道了iPS细胞的研究。
他把Oct3/4,Sox2、c-Myc和Klf4这4种转录因子基因克隆入病毒载体,然后引入小鼠成纤维细胞,发现可诱导其发生转化,产生的iPS细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等方面都与胚胎干细胞相似[2]。
2007年体细胞转变成“iPS细胞”的成果发表。
Hanna等[3]用来自患病小鼠尾巴的皮肤细胞产生了iPS细胞,然后用健康的基因取代了涉及镰刀形红细胞贫血症的基因,研究人员将它们输给供体小鼠,这些细胞在小鼠身上开始产生健康的血细胞,这些小鼠的疾病症状因此有了改善。
将实验鼠皮肤细胞改造成iPS细胞,然后成功使其分化成心肌细胞、血管平滑肌细胞及造血细胞[4]。
2009年,中国科学家利用iPS 细胞克隆出活体实验鼠,首次证明iPS细胞与胚胎干细胞一样具有全能性[5]。
因干细胞技术和体细胞核移植技术不同,iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞,因此没有伦理学的问题。
人类发育中的胚胎干细胞和诱导多能干细胞随着生物学和医学的不断发展,人类生命的谜团也逐渐被揭开。
有关胚胎干细胞和诱导多能干细胞的研究成果引起了极大的关注,其在医学领域的应用潜力也备受瞩目。
本文将对人类发育中的胚胎干细胞和诱导多能干细胞进行介绍。
一、胚胎干细胞胚胎干细胞是由受精卵发育而来的初生干细胞,可以分化为各种类型的细胞。
胚胎干细胞存在于早期胚胎的内细胞团中,即形成胎盘和胎儿的部分。
这些细胞可以通过体外培养来增殖,同时保持其干细胞特性。
利用胚胎干细胞进行组织工程和治疗方面的研究已经引起了广泛的关注。
例如,胚胎干细胞可以分化为心脏、肝脏、肌肉等细胞类型,用于组建组织和器官,实现器官移植等。
此外,胚胎干细胞也可以用于研究人类发育过程中的分子机制,以及疾病的发生和发展过程,以期提高治疗的效果。
然而,胚胎干细胞的使用也受到了道德伦理上的质疑,因为其获取需要破坏胚胎,可能造成生命上的伤害。
因此,其在临床实践中也面临着很多限制。
二、诱导多能干细胞为了克服胚胎干细胞存在的问题,科研人员也开始研究通过诱导细胞转化的方式来获得多能干细胞。
诱导多能干细胞又称为人工多能干细胞或iPS细胞,是在体细胞等成熟细胞中,通过转录因子等方式,使其获得干细胞特性的细胞。
诱导多能干细胞具有与胚胎干细胞相似的特性,而且其来源于成年体细胞,因此更容易在临床实践中使用。
通过利用诱导多能干细胞进行再生医学和组织工程等研究,可以减少对胚胎使用的依赖,同时也为临床带来了更加广阔的应用前景。
尽管诱导多能干细胞面临的科学和技术挑战依然存在,但是相比于胚胎干细胞,其更容易获取和使用。
随着技术的不断发展,诱导多能干细胞的应用前景将会越来越广阔。
结论总的来说,胚胎干细胞和诱导多能干细胞都是人类发育过程中的关键细胞类型,在医学领域的应用潜力也相当广阔。
不过,它们各自存在着优缺点,需要根据具体情况来进行选择和使用。
未来,关于这两种细胞的研究将会得到更加广泛的关注和深入的探究。
干细胞的研究进展与思考摘要:干细胞是最具代表性的具有分化潜能的细胞。
干细胞的研究是21世纪的热点之一。
通过研究干细胞分裂分化的调控机制,有助于我们对它进行人为的利用从而造福于人类。
目前由理论方面取得的突破正在逐渐向临床方面发展并已经取得一些成就,本文就是对干细胞﹙主要为胚胎干细胞﹚进行的一些基本介绍、研究进展、临床应用等方面的突破以及一些个人的思考。
关键词:干细胞分化热点调控机制利用理论临床进展思考一、干细胞及胚胎干细胞的介绍1、干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化为多种功能细胞。
根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。
根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞,多能干细胞和专能干细胞。
干细胞是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,尚具有再生各种组织、器官和人体的潜在功能。
医学界称为“万用细胞”。
2、胚胎干细胞具有发育的全能性体外分化在特定的体外培养条件下,胚胎干细胞也能分化形成各种细胞系,如造血细胞、肌肉细胞和神经胶质细胞等。
﹙参考文献:1生命科学导论宋思扬2 生命科学概论裘娟萍钱海丰﹚二、干细胞的研究新成果个人思考:根据对干细胞的理解不难看出通过对干细胞结构与功能的全面认识,掌握其调控的机制并人为地加以诱导与生成所需要的目标产物,对医学中的创伤修复,组织器官再生具有重要的意义。
面对当前很多束手无策的疾病﹙已知发病原理却尚未找到解决途径或未知发病原理﹚、为数稀少的器官和异体捐赠免疫排斥的反应,这一项突破性进展进展无疑将成为21世纪的史诗。
中心法则中DNA 与RNA都是至关重要的调控因素。
目前研究表明转录因子、酶、蛋白质、化合物、受体、基因等其他因素。
1.1 Nanog Nanog转录因子对胚胎干细胞自我更新能力和分化潜能的维持有着重要的意义。
Nanog转录因子的活化能够使得人ES细胞不断进行自我更新并同时抑制细胞表达促分化基因。
而在缺失Nanog正调控分子FoxD3的小鼠胚胎中,由于Nanog的低表达,小鼠的胚胎在植入后不久即由于缺失上胚层而死亡,若将内细胞团与ES细胞内0ct4和Nanog因子去除,则会导致其失去多能性以及分别向滋养外胚层及胚外内胚层分化Jose等研究结果证明,同源蛋白Nanog在细胞获得全能性的一系列复杂过程中发挥着非常关键的组织协调作用。
细胞工程课程论文题目:胚胎干细胞在生物医学方面的研究及用学号:20100412310035姓名:周文斌年级:2010级专业:生物工程(1)班指导教师:完成日期:2013 年11 月28 日成绩:胚胎干细胞在生物医学方面的研究及应用摘要:干细胞,在医学中被称为“万用细胞”,是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,在生命的生长与发育中其起主干作用的原始细胞。
本文即以干细胞为基础,从胚胎干细胞概念出发,介绍胚胎干细胞的生物学特性,对近年来国外胚胎干细胞的研究历程做出梳理与总结,并对其研究成果、应用前景及存在问题作出概述。
关键词:干细胞;胚胎干细胞;生物学特性;研究历程及成果;应用前景;存在问题一、干细胞干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。
根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。
根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞(pluripotent stem cell)和单能干细胞(unipotent stem cell)。
干细胞是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,医学界称为“万用细胞”。
二、胚胎干细胞(ESC)胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)是从着床前胚胎细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞[1]。
它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。
无论在体外还是体环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。
1981年,埃文斯(Evans)和考夫曼(Kaufman)从小鼠胚囊细胞团建立了未分化的小鼠胚胎干细胞[2,3]。
1998年,汤姆森(Thomson)在体外受精5 天的人囊胚中成功分离出hES细胞, 体外培养维持不分化状态均传代30 代以上,建立了人的胚胎干细胞系开创了胚胎干细胞的新纪元[4]。
三、生物学特性1、形态学特征ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构,细胞核大,有一个或几个核仁,胞核中多为常染色质,胞质胞浆少,结构简单。
体外培养时,细胞排列紧密,呈集落状生长。
用碱性磷酸酶染色,ES细胞呈棕红色,而周围的成纤维细胞呈淡黄色[5]。
2、全能性或多能性ES 细胞全能性或多能性的基础是其具有的高度的分化潜能。
细胞分化终究归结为在胚胎发育过程中基因组中的特定基因按一定顺序相继活化和表达, 所以,细胞全能性的实质是细胞基因组中决定蛋白质编码的所有基因按一定顺序表达。
细胞全能性或多能性与细胞分化状态的相对稳定性密切相关。
细胞分化具有相对的稳定性, 但在一定条件下, 细胞分化又是可逆的。
低等生物细胞和高等动物的早期胚胎细胞具有全能性, 但用成年绵羊的乳腺细胞和胎儿成纤维细胞为供体进行核移植生出了绵羊羔,这表明:不但未分化的胚胎细胞具有全能性, 已分化的体细胞在特定条件下经过脱分化( Dedifferent iation) 也具有全能性。
已分化的细胞具有全能性的前提条件是这种细胞在体外诱导进入休眠状态。
细胞全能性是细胞核基因在不断变化的胞质环境的作用下有次序、有系统地表达的结果,在分化的细胞存在有可逆性修饰的遗传物质。
但并非所有的体细胞均具有全能性,例如红细胞, 在成熟时失去细胞核, 丧失了可逆性分化的遗传物质。
四、研究历程及成果1、60年代,几个近亲种系的小鼠睾丸畸胎瘤的研究表明其来源于胚胎生殖细胞(embryonic germ cells, EG细胞),此工作确立了胚胎癌细胞(embryonic carcinoma cells, EC细胞)是一种干细胞[6]。
2、1981年,Evan, Kaufman 和Martin从小鼠胚泡细胞群分离出小鼠ES细胞。
他们建立了小鼠ES细胞体外培养条件。
由这些细胞产生的细胞系有正常的二倍型,像原生殖细胞一样产生三个胚层的衍生物。
将ES细胞注入上鼠,能诱导形成畸胎瘤[2,3]。
3、1992 年, 两组科学家直接从受精后8~12 天的鼠胚中成功分离出mEG细胞【7,8】。
1994年,通过体外授精和病人捐献的人胚泡处于2-原核期。
胚泡细胞群在培养中得以保存其周边有滋养层细胞聚集,ES样细胞位于中央。
4、1998年美国有两个小组分别培养出了人的多能( pluripotent )干细胞:JamesA. Thomson在Wisconsin大学领导的研究小组从人胚胎组织中培养出了干细胞株[4]。
他们使用的方法是:人卵体外受精后,将胚胎培育到囊胚阶段,提取 inner cell mass细胞,建立细胞株。
经测试这些细胞株的细胞表面marker 和酶活性,证实他们就是全能干细胞。
用这种方法,每个胚胎可取得15-20干细胞用于培养。
John D. Gearhart在Johns Hopkins大学领导的另一个研究小组也从人胚胎组织中建立了干细胞株。
他们的方法是:从受精后5-9周人工流产的胚胎中提取生殖母细胞( primordial germ cell )。
由此培养的细胞株,证实具有全能干细胞的特征。
5、2000年,由Pera、Trounson 和Bongso 领导的新加坡和澳大利亚科学家从治疗不育症的夫妇捐赠的胚泡细胞群中分离得到人ES细胞,这些细胞体外增殖,保持正常的核型,自发分化形成来源于三个胚层的体细胞系。
将其注入免疫缺陷小鼠错开产生畸胎瘤。
6、2002年妇幼保健院生殖与遗传研究所完成了中国首例囊胚胎培养技术。
该技术不仅大提高了试管婴儿的妊娠成功率,还有效地降低多胞胎发生率。
美国哈佛大学医学院正与妇幼保健院生殖与遗传研究所合作,人工共同研究干细胞的分化,为“克隆”人体器官创造条件。
7、2003,建立了人类皮肤细胞与兔子卵细胞种间融合的方法,为人胚胎干细胞研究提供了新的途径。
8、2008年1月美国加利福尼亚州从事干细胞研究的Stemagen公司采用克隆多利的技术来建立人体晶胚,首次宣布由人体细胞成功克隆人体胚胎,虽然这些比针头还要小的晶胚细胞只存活了5天时间,它们却被视为治疗阿尔茨海默症、帕金森氏症等疾病的一个里程碑.9、2009年2月2日省干细胞工程技术研究中心宣布首次成功克隆人类囊胚,此研究选择了健康卵细胞志愿捐献者12人,经过促排卵共获得135枚卵细胞,其中77枚卵细胞进行了预实验,58枚卵细胞用于实验,最终成功获取囊胚5枚。
其中4枚囊胚的供体细胞来源于正常人皮肤纤维细胞,1枚来源于帕金森患者外周血淋巴细胞。
因而,揭示了在构建胚胎发育过程中的部分科学和技术问题,这使治疗性克隆研究向前迈进了一大步。
五、应用前景1、研究体外细胞分化的理想材料ES细胞在添加抑制因子的培养液中,能够维持不分化的状态。
在培养液中加入分化诱导因子,如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。
2、治疗疾病用神经细胞治疗神经变性疾病(帕金森综合症、脊髓损伤、阿尔兹海默病),肝细胞治疗肝炎、骨骼肌细胞治疗肌营养不良,胰岛细胞治疗糖尿病,心肌细胞修复坏死的心肌等[12]。
另外,目前,ES 细胞作为组织工程的种子细胞,已在体外培养膀胱组织、胰腺、皮肤和角膜等方面取得成功[11]。
3、畜牧业和制药实验研究表明,ES细胞可提高基因转移效率,因此,ES细胞系对于转基因动物与克隆动物生产(如稀有动物)、高效率产品的生产、药物制造等具有重要的利用价值【9,10】。
4、器官移植对胚胎干细胞进行体外培养,经过诱导分化,形成相应的组织和器官,可以用于组织器官的移植,使体病变的组织器官得以修复并恢复正常功能。
而且用自体的细胞进行培养后移植还可以避免异体移植所带来的免疫排斥问题。
目前,在动物实验方面,用ES细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功地治愈肝衰竭、心衰竭、成骨不良等疑难病症。
也许在不久的将来,当我们的身体某一类细胞功能出现异常或退化时,就可以通过诱导ES细胞定向分化来及时修补[13]。
5、克隆动物胚胎干细胞在理论上具有可以无限地传代增殖,而且不改变其基因型和表现型的特点。
如果以胚胎干细胞细胞作为核供体进行核移植,可以在短时间获得大量基因型和表现型完全相同的个体,这在保护珍稀野生动物方面有着重要意义。
还可对胚胎干细胞进行遗传操作,通过细胞核移植生产遗传修饰性动物,有可能创造新的物种。
6、转基因动物目前常用的生产转基因动物的方法是向受精卵中注射DNA。
外源基因的整合、表达和筛选工作是在个体水平上进行的,不仅工作繁琐、周期较长、成功率低,而且后代的遗传性状也常出现分离;而利用胚胎干细胞作为基因载体,得到基因整合的细胞,将载体胚胎干细胞直接进行核移植或者通过与胚胎嵌合获得嵌合动物, 胚胎干细胞在嵌合体中分化发育成全能性的生殖细胞,即可以得到携有目的基因的转基因动物。
一个优良的ES细胞系不仅可以用于各种目的基因转化,用各种方法将外源DNA导入细胞,而且外源基因的整合数目、位点、表达程序以及稳定性等都可以在细胞水平上进行加工、筛选,在很大程度上加快了动物遗传工程的进程。
7、胚胎干细胞在哺乳动物个体发育中的应用由于ES细胞可以分化为胚胎的胚层、中胚层和外胚层中任何一类细胞,于是可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔,通过组织化学染色,了解ES细胞的分化特点,这就为研究胚胎发育过程中的细胞分化及组织和器官形成的规律,进而研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素等提供了可能。
总之,ES细胞应用前景非常广阔,1999年,《Science》将人ES细胞研究成果评为当年世界十大科技进展之首,2000年《Time》周刊将其列为20世纪十大科技成就之首,并认为ES细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域[14]。
六、胚胎干细胞研究中存在的问题虽然作为十大科技之首,应用前景非常广阔,但胚胎干细胞(特别是人胚胎干细胞) 的研究与应用却面临着巨大的挑战。
主要有以下几方面的原因:1、ES细胞在体外定向诱导难度大ES细胞在治疗前必须事先在体外被诱导分化为某种特异的组织细胞,否则直接移植有发生畸胎瘤的危险。
2、免疫排斥免疫排斥仍是目前异体ES细胞移植的最大障碍。
尽管诱人设想提出对ES细胞的基因作某些修饰,从而创建适合所有个体的“万能供者细胞”,即通用的ES系。
但这种方法需要破坏和改变细胞中许多基因,安全性得不到保障[12]。
3、人ES细胞来源匮乏(1)伦理道德因为人ES细胞需要取自胚胎,而多数人认为杀死胚胎就是毁灭生命,侵犯人权,特别是对治疗性克隆的争议更大,不仅要杀死胚胎,还容易犯克隆人的错误[15]。
(2)成功率不高目前科学家对人ES细胞培养扩增时如何保持其不分化,即体外建系的最佳条件不清楚,因此人E细胞建系的成功率不高[12]。