荧光光谱法研究橙皮素与牛血清白蛋白的相互作用

变色酸与牛血清白蛋白的相互作用李咏玲;杜慧玲;程芳琴【摘要】采用荧光光谱法和紫外-可见分光光度法研究了变色酸与牛血清白蛋白之间的相互作用。

结果表明：变色酸对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用。

根据Stern-Volmer方程得到了荧光猝灭常数,并判断由于与变色酸反应而导致牛血清白蛋白的荧光猝灭属于静态猝灭。

采用Lang-muir单分子吸附模型计算了结合常数和结合位点数。

从计算得到的热力学参数ΔH和ΔS推断了变色酸与血清白蛋白反应的作用力为氢键和范德华力。

%Mechanism of the interaction between chromotropic acid （CMT） and bovine serum albumin （BSA） was studied by fluorospectrometry and UV-Vis spectrophotometry. It was found that significant quenching of fluorescence of BSA appeared due its reaction with CMT. As judged from the fluorescence quenching constants obtained by Stern-Volmer equation, fluorescence quenching of BSA by CMT was attributed to static quenching. The binding constants and number of binding sites were found by applying the model of Langmuir monolayer adsorption. Values of thermodynamic parameters AH and AS were calculated and based on these results, the binding force of the reaction was recognized to be hydrogen bond and Vander Waals force.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2012(048)004【总页数】4页(P396-399)【关键词】变色酸;牛血清白蛋白;相互作用;荧光光谱法;分光光度法【作者】李咏玲;杜慧玲;程芳琴【作者单位】山西农业大学文理学院,太谷030801 山西大学化学化工学院．太原030006;山西农业大学文理学院,太谷030801;山西大学资源与环境研究所,太原030006【正文语种】中文【中图分类】O657.31蛋白质是必不可少的生命物质，是生命活动的基础，也是生物体必需的营养成分。

光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用的开题报告一、研究背景随着中药学的发展，越来越多的中药被用于治疗不同种类的疾病。

中草药中的小分子化合物是其起作用的重要成分，这些化合物能够与蛋白质相互作用，从而影响生物体内相关的生物过程。

因此，研究小分子与蛋白质之间的相互作用对于深入了解中草药的作用机理具有重要意义。

牛血清蛋白是一种具有免疫调节和免疫调控功能的重要蛋白质，其在免疫学、药学等领域得到广泛应用。

研究小分子与牛血清蛋白的相互作用可以为新药物的研发提供有价值的信息。

光谱法是一种常用的研究小分子与蛋白质相互作用的方法。

光谱法既包括吸收光谱、荧光光谱，还包括紫外光谱、红外光谱等。

因此，通过光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用，可以为深入研究中草药的作用机理和新药物的研发提供有价值的信息。

二、研究目的本研究旨在通过光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用，探究其相互作用机理。

三、研究内容及方法1. 研究内容本研究将选择几种中药中的小分子化合物，通过光谱法研究其与牛血清蛋白的相互作用，包括吸收光谱、荧光光谱、紫外光谱、红外光谱等。

2. 研究方法（1）实验药物的制备和检测：选择几种中药中的小分子化合物作为实验药物，制备不同浓度的药物溶液，并经过不同的检测方法鉴定纯度。

（2）蛋白质的制备和检测：采用牛血清蛋白作为研究对象，制备不同浓度的蛋白质溶液，并经过不同的检测方法鉴定纯度。

（3）光谱法研究：将实验药物和蛋白质混合后进行光谱法研究，包括吸收光谱、荧光光谱、紫外光谱、红外光谱等。

通过比较药物与蛋白质混合后的光谱和单独的药物和蛋白质的光谱，探究其相互作用机理。

四、研究意义本研究可以从光谱学的角度，对几种中草药中的小分子化合物与牛血清蛋白的相互作用进行研究，为深入了解中草药作用机理及新药物的研发提供有益的参考。

此外，本研究的结果也有助于推动中草药的现代化、产业化及国际化发展。

荧光、圆二色及共振光散射光谱研究熊果酸与牛血清白蛋白的相互作用丁兰;彭舒;柳志军;腾秀兰;令利军【摘要】利用荧光光谱(FS)、紫外吸收光谱(UV)、圆二色谱(CD)和共振光散射谱(RLS)研究熊果酸(UA)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用.荧光光谱显示,熊果酸能与BSA分子相结合,结合位点数为0.912 4,结合常数为0.693 4×103 L·m01-1,能量转移效率为0.036,结合距离为1.43 nm,并导致BSA荧光产生静态淬灭,其淬灭主要由色氨酸所贡献,并随熊果酸的浓度增高相应淬灭作用增强；紫外和圆二色光谱显示,熊果酸对BSA的紫外吸收峰具有增色效应,并减少BSA中α-螺旋含量,由56.72％减少至39.08％,使BSA的二级结构发生显著变化；共振光散射光谱显示,熊果酸使BSA分子聚集形成分子聚集体.【期刊名称】《西北师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(049)001【总页数】9页(P78-85,95)【关键词】熊果酸;牛血清白蛋白;荧光光谱;圆二色光谱;共振光散射【作者】丁兰;彭舒;柳志军;腾秀兰;令利军【作者单位】西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;西北师范大学化学化工学院,甘肃兰州 730070;西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州730070【正文语种】中文【中图分类】O657.3我国的香茶菜属植物（Radbosia）资源极为丰富，约有90余种，许多种类一直作为民间用药［1］，某些种类已经开发成为市售药［2］.迄今为止，已对约70多种香茶菜属植物进行了植物化学研究，研究表明，该属植物除了含有丰富的对映－贝壳杉烷类二萜化合物外，还含有大量的乌苏烷型和齐墩果烷型三萜类化合物，而熊果酸（UA）则是其中含量最为丰富的三萜酸之一［3］.熊果酸也大量存在于其它植物之中，如接骨木属、双蝴蝶属和桉属等，并且，从中分离得到的熊果酸被确定为这些植物保肝的有效成分［4］.此外，大量的研究证实熊果酸还具有抗炎［5］、抗HIV［6］、抑制细胞增殖［7］、诱导细胞凋亡［7］、抗癌［8］、抗氧化［9，19］和镇静［10］等药理活性.目前，含有丰富熊果酸的中草药在临床上大量使用［11］，但关于熊果酸的多种药理学机制还知之甚少.因此，在不同的研究层面以及利用不同的研究手段系统深入地研究熊果酸的相关作用机理，对于该化合物的深度开发和利用具有重要意义.蛋白质是最重要的生物大分子之一，在细胞内外有上千种之多，在生命活动中担负着众多功能.药物分子进入有机体后会与多种蛋白质分子相互作用，并通过特异性的靶蛋白发挥其药理学功能.牛血清白蛋白（BSA）是血浆中含量最丰富的载体蛋白，它具有结合及运输内源和外源性物质的作用［12］，牛血清白蛋白与其它蛋白具有相似的基本单元结构，如氨基酸组成及二级结构，同时其高级结构也已阐明，因而它是研究高分子蛋白质理化性质、生物学功能的理想蛋白质［13，14］.紫外吸收光谱（UV）、荧光光谱（FS）、圆二色谱（CD）和共振光散射谱（RLS）等方法被广泛应用于蛋白质与小分子药物分子相互作用的研究［15］，从分子层面解析了药物分子对蛋白质结构的影响，这对于阐明药物分子的作用机理有重要意义.本课题组一直从事香茶菜属植物的植物化学［16］、抗癌［7，17］和抗氧化研究［18］. 从甘肃产香茶菜属植物中分离得到大量的熊果酸［19，20］，进一步的药理学研究表明，该化合物具有良好的抗癌细胞增殖、诱导凋亡及抗氧化能力［7，17，18］，这表明该化合物对于香茶菜属植物的抗癌活性具有较大的贡献.关于熊果酸与BSA相互作用的光谱学研究报道极少，仅有张璐颖等［21］运用荧光光谱研究了BSA与熊果酸结合反应中蛋白质的折叠变化型态以及金属离子Ni （Ⅱ）存在下的反应机制.本课题组在此基础上应用紫外光谱、荧光光谱、圆二色谱、共振光散射谱及其二维光谱，进一步研究了熊果酸对牛血清白蛋白的一级结构、二级结构的影响，为最终阐明该化合物的抗癌和抗氧化等药理学机制提供相关的分子相互作用信息.1 材料与方法1.1 仪器与试剂LS－55荧光分光光度计（美国PE公司）；UV－1800紫外分光光度计（日本岛津公司）；J－810型圆二色光谱仪（日本JASCO公司）；pHS－3C型酸度计（上海雷磁仪器厂）.牛血清白蛋白（美国AMRESCO公司）用Tris－HCl缓冲溶液（10mmol·L－1，含有50mmol·L－1 NaCl以维持离子强度，pH＝7.4）分别配置成1×10－4 mol·L－1储备液和1×10－5 mol·L－1储备液，4℃保存.熊果酸由本实验室自甘肃产蓝萼香茶菜中分离得到［4］，分别用甲醇配置20mmol·L－1储备液，二甲基亚砜（DMSO）配置200mmol·L－1储备液，4℃保存，测试时用Tris－HCl缓冲溶液稀释使用；实验室用水为3次蒸馏水；其余试剂均为分析纯.1.2 实验方法1.2.1 紫外吸收光谱测定分别向10mL比色管中加入1mL BSA（1×10－4 mol·L－1）溶液及不同浓度熊果酸（甲醇溶解），用Tris－HCl缓冲溶液定容至10mL，比色管中熊果酸与BSA的摩尔比分别为5∶1，10∶1，15∶1，20∶1.每个测试组均含1%甲醇.20℃孵育1h后，移取至1.0cm石英比色皿，以含1%甲醇的Tris－HCl缓冲溶液为参比，扫描190～320nm波长范围内紫外吸收光谱.1.2.2 荧光光谱测定分别向10mL比色管中加入1mL BSA（1×10－4 mol·L－1）溶液及不同浓度熊果酸（因甲醇是荧光物质，对BSA荧光测定产生影响［20］，故选用DMSO作为熊果酸的助溶剂），用Tris－HCl缓冲溶液定容至10mL，比色管中熊果酸与BSA的摩尔比分别为2.5∶1，5∶1，10∶1，15∶1，20∶1.每个测试组含0.1%DMSO.20℃孵育1h后，移取至1.0cm石英比色皿，以λex＝282nm为激发波长，狭缝宽Em＝Ex＝5nm，扫描300～450nm波长范围内的荧光光谱.1.2.3 同步荧光测定分别向10mL比色管中加入200μL BSA（1×10－4 mol·L－1）溶液及不同浓度熊果酸（DMSO溶解），用Tris－HCl缓冲溶液定容至10mL，比色管中熊果酸与BSA的摩尔比分别为5∶1，10∶1，15∶1，20∶1，25∶1，30∶1.每个测试组含0.1%DMSO.20 ℃ 孵育1h后，移取至1.0cm石英比色皿，以狭缝宽Δλ＝15nm，Em＝Ex＝10nm，扫描速度100nm·min－1，扫描260～350nm波长范围内的同步荧光；Δλ＝60nm，以狭缝宽Em＝Ex＝3.5nm，扫描速度100nm·min－1，扫描260～350nm波长范围内的同步荧光光谱.1.2.4 圆二色谱测定分别向10mL比色管中加入200μL BSA（1×10－5 mol·L－1）溶液及不同浓度熊果酸（甲醇溶解），用Tris－HCl缓冲溶液定容至10mL，比色管中熊果酸与BSA的摩尔比分别为5∶1，10∶1，15∶1，20∶1.每个测试组含0.1%甲醇.20℃孵育1h后，移取至1.0cm石英比色皿，以含有0.1%甲醇的Tris－HCl缓冲溶液作为参照，在200～250nm波长范围内进行扫描.1.2.5 共振光散射谱测定分别向10mL比色管中加入200μL BSA（1×10－5mol·L－1）溶液及不同浓度熊果酸（DMSO溶解），用Tris－HCl缓冲溶液定容至10mL，比色管中熊果酸与BSA的摩尔比分别为5∶1，10∶1，15∶1，20∶1，25∶1，30∶1.每个测试组含0.03%DMSO.20℃孵育1h后，移取至1.0cm石英比色皿，以λex＝λem （Δλ＝0nm），狭缝宽度Ex＝10nm，Em＝20nm，扫描速度100nm扫描250～650nm波长范围的RLS谱.2 结果与讨论2.1 紫外吸光光谱蛋白质由20种常见氨基酸组成，在其紫外吸收光谱中，除芳香族氨基酸，如酪氨酸和苯丙氨酸以及含硫的氨基酸外，其余大部分氨基酸在230～310nm范围内没有吸收峰［22］.BSA在275nm处的特征吸收峰主要是由于BSA肽链中19个酪氨酸和2个色氨酸的芳杂环n－π＊和π－π＊跃迁引起的［23］.本实验以甲醇为助溶剂，各测试组均含1%甲醇，如图1所示，1%甲醇对BSA紫外吸光值有微弱影响.图2为BSA与熊果酸相互作用的吸收谱图，BSA在278nm处有紫外吸收峰.BSA溶液与不同浓度的熊果酸共同孵育1h后，BSA的紫外吸收峰均表现为明显的增色效应，并随着熊果酸浓度的提高其相应吸收峰的强度也增加.这可能是由于熊果酸使蛋白质肽链伸展，蛋白质内部氨基酸残基的芳杂环疏水基团裸露出来，疏水基团之间的疏水作用减弱，使得吸收峰强度增强［24］.图1 1%甲醇溶液与牛血清白蛋白相互作用的紫外吸收光谱Fig 1UV spectra of 1%methanol compounds－BSA solutions图2 熊果酸与牛血清白蛋白的紫外吸收光谱Fig 2Effect of ursolic acid on the absorption spectra of BSA2.2 荧光光谱2.2.1 荧光光谱色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸这3种芳香族氨基酸荧光强度差异很大（100∶9∶0.5），这主要是由于它们结构的不同造成的［25］.由于色氨酸和酪氨酸在蛋白质中比例最大，荧光强度最大.因此，本实验主要研究熊果酸对BSA中这2种氨基酸的影响.因助溶剂甲醇荧光峰对BSA干扰较大［26］，故用DMSO作为助溶剂.测试样品中均含有0.1%DMSO，如图3所示，0.1%DMSO对BSA的荧光强度无影响.在浓度为1×10－5 mol·L－1的BSA溶液中加入不同量的熊果酸，测试BSA的荧光发射光谱，结果如图4所示.随着熊果酸浓度的增加，BSA的荧光发射强度逐渐下降，这表明BSA的荧光逐渐淬灭，且荧光的最大发生峰在342nm 附近，没有发生明显位移，该现象表明BSA与熊果酸发生了相互作用［27］.究其原因，极可能是BSA的空间构象发生变化导致氨基酸残基的疏水性降低而引起［28］.图3 0.1%二甲基亚砜与牛血清白蛋白的荧光光谱Fig 3Fluorsence spectra of0.1%DMSO compounds－BSA solutions图4 熊果酸与牛血清和白蛋白的荧光光谱Fig 4Effect of Ursolic acid on fluorescence spectra of BSA2.2.2 荧光淬灭方式溶液荧光的淬灭，是指荧光物质分子与溶剂或溶质分子之间所发生的导致荧光强度下降的物理或化学的作用过程.荧光物质分子同淬灭剂相互作用方式的差异，导致了不同的淬灭方式，如动态淬灭、静态淬灭和电荷转移淬灭等多种形式.静态淬灭是淬灭剂和荧光物质分子在基态时发生配合反应所引起的一种淬灭过程；动态淬灭是淬灭剂和荧光物质的激发分子之间发生相互作用而引起的一种淬灭过程［29］.动态淬灭过程符合Stern－Volmer方程其中，F0是未加入淬灭剂时的荧光强度；F是加入淬灭剂后的荧光强度；Kq是双分子淬灭过程速率常数；KSV是Stern－Volmer动态淬灭常数；CQ是淬灭剂的浓度；τ0是淬灭剂不存在条件下生物大分子的平均荧光寿命（约为10－8 s）［30］.为确定熊果酸与BSA的淬灭机理，首先用Stern－Volmer方程处理，熊果酸与BSA荧光淬灭的F0／F与CQ的关系如图5所示.图5 熊果酸对牛血清白蛋白荧光淬灭的Stern－Volmer曲线Fig 5Stern－Volmer plots for fluorescene quenching of BSA由Stern－Volmer曲线计算得到，BSA的KSV＝0.135×104 L·mol－1（R＝0.983 8）.双分子淬灭过程速率常数Kq＝KSV／τ0，且无淬灭剂时生物大分子的平均荧光寿命τ0＝10－8 s［29］，＝0.135×1012 L·mol－1·s－1.由于生物大分子的最大动态淬灭常数为2.0×1010 L·mol－1·s－1［30］，本实验体系中双分子淬灭过程常数大于最大动态淬灭常数，说明熊果酸对BSA的淬灭是由于形成复合物而引起的静态淬灭［31］，这个结果同已报道的结果一致［21］.本实验得到的Kq值小于张璐颖等［21］报道的结果（K＝0.189 3×1013 L·mol－1·s－1），这可能主要归q咎于两者所选用测试缓冲溶液、助溶剂以及熊果酸的浓度存在差异.即本实验所用Tris－HCl缓冲溶液的浓度较之报道中的浓度小5倍，其中所含NaCl浓度也较之小2倍.2.2.3 熊果酸和牛血清白蛋白相互作用的结合位点数在静态淬灭过程中，荧光物质与淬灭剂分子之间的结合常数可以通过静态淬灭公式（2）计算：其中，F0是未加入淬灭剂时的荧光强度；F是加入淬灭剂后的荧光强度；K是结合常数；CQ是配合物的浓度；n是结合位点数.得到lg（F0／F－1）与lgCQ 的关系（图6）和相关方程：lg［（F0－F）／F］＝2.841＋0.912 4lgCQ（R＝0.981 07）.图6中曲线的斜率代表化合物与BSA的结合位点数n值，n＝0.912 4.而曲线的截距代表化合物与BSA的结合常数K 值，K＝0.693 4×103 L·mol－1.这个结果远小于已报道的结果［21］，本实验所使用的Tris－HCl缓冲溶液浓度较小，里面含有的NaCl浓度也较小，选用测试温度20℃，以上实验体系存在的差异，可能导致熊果酸与BSA相互作用结果存在较大差异.图6 lg（F0／F－1）与lgCQ 的关系Fig 6Plot of lg（F0／F－1）versus lg CQ 2.2.4 熊果酸－牛血清白蛋白的结合距离为了确定蛋白质与药物分子间的荧光发射残基的距离和能量转移效率，依据Fōster的非辐射能量转移机理［32，33］，对实验进行进一步分析.根据Fōster的理论，荧光发射体和荧光淬灭体之间的距离、临界能量转移距离和能量转移效率符合方程其中，E为能量转移效率；R0为临界能量转移距离；r为荧光发射体和荧光淬灭体之间的距离.R0－E＝50%时的临界能量距离.其中，K为偶极空间取向因子；N为介质的折射指数；φ为受体的光量子效率；J为授体荧光发射光谱与受体吸收光谱间的光谱重叠积分（cm3·L·mol－1）其中，F（λ）为荧光授体在波长λ处的荧光强度；ε（λ）为受体在波长λ处物质的能量吸收系数（L·（mol·cm）－1）.由公式（5）计算光谱重叠积分，JBSA＝1.46×10－18 cm3·L·mol－1.在本实验中，取偶极空间取向因子（K）为两结合物各向随机分布的平均值，即K2＝2／3［32］，光量子效率（φ）取色氨酸标准值，即φ＝0.13［34，35］，折射指数（N）分别取 N水＝1.33和N有机物＝1.39的平均值 N＝1.36［32］.将上述各数值带入（4）式可求得BSA临界能量距离R0＝0.56nm.由得到EUA－BSA＝0.036.由（3）式求得BSA中色氨酸残基与熊果酸之间的距离为rUA－BSA＝1.43nm.2.3 同步荧光光谱图7 牛血清白蛋白和熊果酸相互作用的同步荧光光谱Fig 7Synchronous fluorescence spectra with ursolic acid－BSA同步荧光光谱因其图谱简单、谱带窄、能够减少光谱重叠等优点，可用来研究小分子与蛋白质相互作用对蛋白质构象产生的影响［36］.Δλ＝15nm是酪氨酸残基的荧光，Δλ＝60nm是色氨酸残基的荧光.由图7可知，在Δλ＝60nm时（图7：A），BSA的同步荧光强度随着熊果酸浓度的逐渐增加而减小，而在Δλ＝15nm 时（图7：B），BSA的同步荧光强度随着熊果酸浓度的增加而增加，说明BSA 与熊果酸发生淬灭主要是色氨酸残基的贡献.2.4 圆二色谱BSA因其结构的不对称性而具有光学活性，圆二色谱（CD）是研究稀溶液条件下生物大分子二级结构的重要手段.蛋白质的CD光谱通常分为250～320nm的近紫外区CD光谱和178～250nm的远紫外区CD光谱.具有典型α－螺旋构象的分子其CD光谱在195nm处有正特征峰，在222nm和208nm处分别有负特征峰［37］（图8）.本实验主要通过对CD谱208nm处的特征峰强度进行计算，分析BSA与熊果酸相互作用时BSAα－螺旋的变化，进而推证熊果酸对BSA构象的影响.实验中使用含有0.5%甲醇作为助溶剂，该浓度的甲醇对BSA的CD光谱没有影响（图8）.由图9可知，伴随熊果酸浓度逐渐增加，BSA在208nm和222nm 处负峰的强度逐渐减小，说明BSA中α－螺旋发生了变化.由图8 0.5%甲醇溶液与BSA相互作用的圆二色谱Fig 8CD spectra of0.5%methanol compounds－BSA solutions图9 不同浓度的熊果酸与牛血清白蛋白相互作用的CD谱Fig 9Effect of ursolic acid on the CD of BSA计算出BSA二级结构中α－螺旋含量（表1）.表明随着熊果酸浓度逐渐增加，BSA的α－螺旋逐渐减少，BSA的构象变得疏松.表1 不同浓度熊果酸对牛血清白蛋白二级结构α－螺旋含量的影响Tab 1Affectof various concentrations of the ursolic acid on α－helix content of BSA’s secondary structure56.72 53.40 50.66 43.95 39.08 5∶1 10∶1 15∶1 20∶1 α－螺旋α－helix／%测试溶液Solutions n（Ursolic acid）∶n（BSA）BSA（2×10－7 mol·L－1）2.5 共振光散射谱共振光散射强度与体系电子密度起伏有关，通过共振散射强度可以表征聚合物体系的微观结构信息.这种方法常用于生物大分子的生化研究［38－41］.RLS光谱通常位于或是靠近分子吸收带，RLS信号的产生与溶液中形成聚集有关，其程度决定于溶液中粒子的直径［42］.本实验体系中含有0.03%DMSO，该浓度的DMSO对BSA的RLS强度有轻微影响.如图10所示，a谱线是BSA（2.0×10－7 mol·L－1）的RLS强度，b谱线是熊果酸（2.0×10－7 mol·L－1）的RLS强度，c到h谱线是BSA与不同浓度熊果酸相互作用的RLS强度.由图11可知450nm处有最大散射峰，随着熊果酸浓度逐渐增大，体系的RLS的强度也逐渐增大.可以说明，由于复合物的生成，BSA／熊果酸体系的RLS强度增大，并且随着熊果酸浓度的增大，BSA与熊果酸之间的结合越来越多.图10 0.03%二甲基亚砜与牛血清白蛋白的共振光散射谱Fig 10RLS spectra of 0.03%DMSO compounds－BSA solutions为了更进一步探究复合物大分子在外扰下，分子内各个官能团、结构单元发生变化的先后关系［42］，将光谱信号扩展到二维上分析.数据导入2Dshige 软件（2Dshige（C）Shigeaki Morita，Kwansei－Gakuin University，2004—2005）进行处理，分别计算得到二维同步和异步光谱（图12）.根据Noda的理论［44］，由同步二维光谱（图12（a））可知，在127nm，282nm，366nm处有自相关峰.结合RLS谱分析，外界扰动在366nm处有明显的变化.异步二维光谱（图12（b））中没有观察到明显的相关峰，可能是由于淬灭速率没有发生明显差别所造成的.二维谱分析说明，越靠近分子最大吸收处（366nm），RLS谱变化越快，分子间相互作用越强.图11 熊果酸与牛血清白蛋白的共振光散射谱Fig 11Effect of ursolic acid on the RLS of BSA图12 熊果酸与BSA相互作用的二维共振光散射光谱Fig 12 2DRLS correlation spectroscopy of the interaction of BSA and ursolic acid in different concentration3 结论利用紫外吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱、共振光散射谱对从甘肃产蓝萼香茶菜中分离得到熊果酸与BSA相互作用进行了较为系统的分析.实验结果表明，熊果酸与BSA之间生成不发荧光的复合物而导致了静态淬灭，熊果酸与BSA之间的结合位点数为0.912 4，结合常数K值为0.693 4×103 L·mol－1，能量转移效率为0.036，结合距离为1.43nm.这些数据说明熊果酸与BSA相互作用结合距离较长，结合强度较弱，BSA与熊果酸相互作用主要是色氨酸的贡献.紫外和圆二色谱显示，熊果酸使BSA二级结构发生变化，α－螺旋显著减少，肽链伸展，疏水基团裸露，疏水作用减弱；同时，共振光散射实验证实，熊果酸还导致BSA分子间的聚集，在溶液中形成了较大的分子聚集体，RLS二维分析说明，越靠近366nm分子最大吸收处，分子间相互作用越强.这些实验结论在分子层面解释了熊果酸和BSA的相互作用规律，为最终阐明熊果酸的药理学机理提供了科学依据.参考文献：［1］孙汉董，许云龙，姜北.香茶菜属植物二萜化合物［M］.北京：科学出版社，2001.［2］冀春茹，袁珂，胡润淮，等.复方冬凌草含片的质量标准研究［J］.中国实验方剂学杂志，1997，3（6）：7－10.［3］桂明玉，金永日，王宝珍.蓝萼香茶菜化学成分研究［J］.中国药学杂志，1999，34（8）：12－14.［4］LIU Jie.Pharmacology of oleanolic acid and ursolic acid［J］.Journalof Ethnopharmacology，1995，49（2）：57－68.［5］CARLO F，MARIO P，GIORGIO P.Synthesis and anti－ul－cer activityof new derivarives of glyeyrrhetic，oleanolic and ursolic acids［J］.IL Farrnac，1998，53（1）：22－32.［6］刘丹，孟艳秋，陈立功.3种五环三萜类化合物及其衍生物抗艾滋的研究进展［J］.中草药，2008，39（9）：1434.［7］杨邵华，侯茜，张琼，等.熊果酸对人早幼粒白血病细胞的增殖抑制、周期阻滞及凋亡诱导作用［J］.甘肃科学学报，2011，23（1）：67－71.［8］王颖，耿伟，谭洁，等.熊果酸对结肠癌细胞作用机制的初步研究［J］.武汉大学学报：医学版，2007，26（4）：487－490.［9］王筠，戈士文，王毅，等.几种香茶菜属二萜类化合物的抗氧化作用［J］.中国药理学通报，2003，19（9）：1009－1012.［10］金永日，桂明玉，王宝珍.蓝萼香茶菜根化学成分研究［J］.中国中药杂志，2000，25（11）：38－39.［11］李宏杨，刘国民，刘飞，等.熊果酸及五环三萜同类物的研究进展［J］.湖南工业大学学报，2009，23（5）：18－21.［12］金瑞祥，张贵珠，冯喜增，等.氟喹喏酮类药物与牛血清白蛋白作用的研究［J］.分子科学学报，1997，13（2）：108－112.［13］MCMENAMY R H，Ablumin Structure，Function and Uses［M］.Oxford：Dergamon Press，1977.［14］ULRICH K H.Molecular aspects of ligand binding to serum albumin ［J］.Pharmacol Rev March，1981，33（1）：17－53.［15］张雅珩.研究小分子与蛋白质作用的光谱集成分析技术［D］.兰州：兰州大学，2009.［16］丁兰，景宏伟，王涛，等.甘肃产毛叶香茶菜二萜成分及其化感潜能评估［J］.西北师范大学学报：自然科学版，2010，46（2）：88－93.［17］丁兰，侯茜，徐福春，等.异叶败酱中三萜化合物常春藤皂苷元对人早幼粒白血病细胞HL－60的增殖抑制、周期阻滞及凋亡诱导作用［J］.西北师范大学学报：自然科学版，2009，45（1）：88－93.［18］刘国安，闵建平，张佳佳，等.香茶菜属植物中的三萜化合物对脂质过氧化和DNA损伤的保护作用［J］.华中师范大学学报：自然科学版，2010，46（4）：629－632.［19］王福东，丁兰，汪汉卿.蓝萼香茶菜三萜成分的研究［J］.中国中药杂志，2005，30（24）：1929－1932.［20］王瀚.拟缺香茶菜化学成分及其抗癌活性的研究［D］.兰州：西北师范大学，2006.［21］张璐颖，郭明，陈建议，等.熊果酸与血清白蛋白的结合反应机制研究［J］.林产化学与工业，2010，30（3）：41－48.［22］赵南明，周海梦主编.生物物理学［M］.北京：高等教育出版社，施普林格出版社，2000.［23］CHENG Zheng－jun， ZHANG Yun－tao.Fluorometric investigation on the interaction of oleanolic acid with bovine serum albumin［J］.Science Direct，2008，879（3）：81－87.［24］SHAHID F，GOMEZ J E，BIRNBQRAM E R et al.The lanthanide－induced N →Ftransition and acid expansion of serum Albumin［J］.J Biol Chem，1982，257（10）：5618－5625.［25］朱拓，陈国庆，虞锐鹏.甲醇分子荧光光谱的研究［J］.光学技术，2006，32（1）：11－13.［26］LAKOWICA J R， WEBER J G.Quenching of fluorescence by oxygen－probe for structural fluctuations in macromolecules［J］.Biochem，1973，12（21）：4161－4170.［27］TERAMOTO A，TAKAGI Y，HACHMORI A，et al.Interaction of albumin with polysaccharides containing ionic groups ［J］.Polym Adv Technol，1999，10（2）：681－686.［28］冯素玲，袁道琴.阿魏酸哌嗪与牛血清白蛋白相互作用的研究［J］. 分析试验室，2009，28（7）：78－82.［29］许金钩，王尊本.荧光分析法［M］（3版）.北京：科学出版社，2006. ［30］XIE Meng－xia，XU Xiao－yun， WANG Ying－dian，et al.Studieson amide Ⅲ infrared bands for the secondary structure determination of proteins ［J］.Chemical Research In Chinese Universities，2005，63（22）：2055－2062.［31］ROSS P D，SUBMMANIAN S.Thermodynamics of protein association reactions：forces contributing to stability［J］.Biochemistry，1981，20（11）：3096－3102.［32］LAKOWICZ J R.PrinciplesofFluorescence Spectroscopy［M］.3rd ed.New York ：Plemun Press，2008.［33］杨颖，高飞.生物无机化学原理［M］.北京：科学出版社，2002.［34］ZHANG Y H，DONG L J Z.Studies on the interaction of gallic acid with human serum albumin in membrane mimetic environments［J］.Talanta，2008，76（2）：246－253.［35］KHAN S N，ISLAM B，YENNAMALLI R，et，al.Interaction of mitoxantrone with human serum albumin：spectroscopic and molecular modeling studies［J］.Eur J Pharm Sci，2008，35（5）：1－12.［36］MILLER J N.REOC A D.Recent advances in molecular luminescence analysis ［J］.Chem Soc，1979，16（7）：203－208.［37］沈星灿，梁宏，何锡文，等.圆二色光谱分析蛋白质构想的方法及研究进展［J］.分析化学，2004，32（3）：5－8.［38］PASTERNACK R F，COLLINGS P J.Resonance light scattering：a new technique for studying chromophore aggregation ［J］.Science，1995，269（5226）：935－939.［39］LUO Hong－qun，LIU Shao－Pu，LI Nian－bin，et al.Resonance rayleigh scattering，frequency doubling scattering and second－order scattering spectra of the heparin－crystal violet system and their analytical application ［J］.Analytica Chimica Acta，2002，468（2）：275－286. ［40］CHEN Xu－dong， DONG Ye－ping. Resonance scattering method for the ultrasensitive determination of peptides using semiconductor nanocrystals ［J］.Anal Chim Acta，2007，597（2）：597.［41］HUANG Cheng－zhi，LU Wei，LI Yuan－fang，et al.On the factors affecting the enhanced resonance light scattering signals of the interactions between proteins and multiply negatively charged chromophores using water blue as an example ［J］.Anal Chim Acta，2006，556（2）：469－475.［42］BORISSEVITCH I E， TOMINAGA T T，IMASATO H，etal.Photophysical studies on the interaction of two water－soluble porphyrins with bovine serum albumin：effects upon the porphyrin triplet state characteristics ［J］.J Photochem Photobiol A，1998，114（3）：201－207.［43］沈怡，彭云，武培怡，等.二维相关振动光谱技术［J］.化学进展，2005，12（3）：499－513.［44］NODA I.App Ⅰ ［J］.Spectrose，1993，47（9）：1329－1336.。

光谱法研究炎琥宁与牛血清白蛋白的相互作用＊刘里;杨晓丽;成飞翔【摘要】The interaction betweenYan-Hu-Ning (YHN) and bovine serum albumin (BSA) was investigated in order to provide further theoretical evidences on action mechanism study between YHN and proteins within the organism. Under optimal conditions, the interaction between YHN and BSA was studied by fluorescence quenching, ultraviolet absorption spectrometry and synchronous fluorescence spectroscopy. At the temperature of 283.15 K, 298.15 K and 313.15 K, quenching constant (KSV) and speed constant (Kq) were calculated by S-V curves. Static quenching constant (KLB) was obtained by L-B double reciprocal equation. Double logarithmic equation was used to calculate the binding constants (Kb) and the number of binding site (n). Thermodynamic equation was used to obtainΔH,ΔS,ΔG. Hill’s coefficients (nH) was obtained by Hill equation. The results showed that at three different temperatures, along with the increasing of YHN concentration, the fluorescence intensity of BSA decreased regularly. The value of KSV, Kq, KLB, Kb, n and nH decreased with the increasing of temperature;ΔG < 0,ΔH < 0,ΔS < 0; nwas&nbsp;approximately equal to 1; nH > 1. It was concluded that YHN-BSA complex quenched the intrinsic fluorescence of BSA. The mechanism of fluorescence quenching was static quenching. The main binding forces were deduced as hydrogen bonds and Van der Waals forces from calculated values of thermodynamic parameters. YHN and BSA can form abinding site, which indicated certain binding interaction between YHN and BSA. YHN can be stored and transported by protein within the body. Free energy was produced to transformΔG into negative value. It showed that the process of binding between YHN and BSA was spontaneous. The nH was more than 1. It indicated that YHN had positive cooperative effect. The primary binding site was located at subdomainⅡA. The synchronous fluorescence spectra showed certain influence on the conformation of BSA by YHN. It led to the weakening of polarity within BSA and the binding site to be closer to the tyrosine.%目的：研究炎琥宁（YHN）与牛血清白蛋白（BSA）之间的相互作用，为后续琥宁类药物的研发和进一步探讨炎琥宁在生物体内与蛋白质的作用机制提供理论依据。

橙皮素铜(II)配合物与牛血清白蛋白作用的研究*邹淑君a ，张蕾a ，郭迎喜b ，徐暘a ，许树军b*（黑龙江中医药大学a.药学院；b.实验中心，黑龙江哈尔滨150040）摘要：本研究应用荧光光谱测试了橙皮素铜（II ）配合物与牛血清白蛋白（BSA ）之间的相互作用，并与橙皮素对比。

结果显示橙皮素铜配合物对BSA 的荧光猝灭以静态猝灭为主，但静态猝灭常数比橙皮素小；对BSA 的荧光猝灭效率明显弱于橙皮素；橙皮素配合物与BSA 的结合常数和结合位点数都小于橙皮素；与BSA 之间的主要作用力与橙皮素相似，以氢键和范德华力为主。

说明橙皮素铜配合物与BSA 的结合能力弱于橙皮素。

橙皮素在血液运输过程若遇到Cu 2+，可能会因为发生配位作用而减弱橙皮素与血清蛋白的结合能力。

关键词：橙皮素铜配合物；牛血清白蛋白；相互作用；荧光光谱中图分类号：O62文献标识码：AStudy on the interaction of hesperetin copper （II ）complex with bovine serum albumin *ZOU Shu-jun a ，ZHANG Lei a ，GUO Ying-xi b ，XU Yang a ，XU Shu-jun b*（a.Medicine Collegep;b.Experiment Center,Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin 150040，China ）Abstract ：Fluorescence spectroscopy were applied to study the interaction of hesperetin copper complex with BSA.And be compared with hesperetin.Result showed that the quenching fluorescence efficiency of BSA by hes －peretin copper complex was stronger than that of hesperetin.The fluorescence quenching of hesperetin copper complex on BSA is mainly a static quenching,which is similar to hesperetin.The binding constant （Ka ）of hes －peretin copper complex with BSA is smaller than that of hesperetin.As same as the hesperetin,the binding force of hesperetin copper complex to BSA is mainly the hydrogen bond and van der Waals force.The conclusion prove that the binding ability to BSA of hesperetin copper complex is weaker than that of hesperetin.It showed that Cu 2+can increase the concentration of hesperetin in the blood because they formed the complex,which lead to weaken the interaction of hesperetin with BSA.Key words ：hesperetin-copper （II ）complex ；bovine serum albumin ；interaction ；fluorescence spectroscopy收稿日期：2015-05-04基金项目：黑龙江省教育厅资助项目（No.12531648）作者简介：邹淑君（1974-），女，副教授，黑龙江中医药大学在站博士后工作人员，研究方向：药物活性及谱学分析。

荧光光谱法研究甜蜜素与牛血清白蛋白的相互作用潘军辉;万宇俊;张萌;蒲超群;王亚萍;张国文【摘要】In the current study,the interaction of sodium cyclamate with bovine serum albumin (BSA)under simulative physiological conditions (pH 7.4)was investigated by fluorescence spectroscopy technique.The observed result of fluorescence quenching indicated that a ground state complex was formed between sodi-um cyclamate and BSA,resulting in the intrinsic fluorescence quenching of BSA.The binding constant K at 25°C was calculated to be 3.05×103 L mol-1 ,and the number of binding sites were approximately equal to 1.The calculated enthalpy change (ΔHθ)and entropy change (ΔSθ)values by Van't Hoff equation was -3.46 KJ·mol-1 and 48.23 J·mol-1 ·K-1 ,respectively.These findings suggested that hydrophobic inter-actions and hydrogen bonding were the main forces to maintain the stability of the BSA-sodium cyclamate complex.The site markers competitive experiments revealed the binding of sodium cyclamate to BSA pri-marily in the subdomain IIA (Site I)of BSA.Analysis of synchronous fluorescence spectra demonstrated that the hydrophobicity around tryptophan residues increased and the polarity weakened,but there was no obvious effect on the microenvironment of tyrosine residues ofBSA.Moreover,the effects of some metal i-ons on the binding constant of BSA-sodium cyclamate interaction revealed that the presence of Zn2+ and Mg2+ could increase the stability of the BSA-sodium cyclamate complex,while the stability of the complex decreased in the presence ofCa2+ ,Fe3+ and Cu2+ ,respectively.%在生理酸度（pH 7．4）条件下，利用荧光光谱法研究了甜蜜素与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。

荧光光谱法研究原花青素与牛血清白蛋白的相互作用
尚永辉;李华;孙家娟
【期刊名称】《分析科学学报》
【年(卷),期】2011(27)2
【摘要】在pH=7.40的Tris-HCl缓冲体系中,采用荧光光谱技术研究了原花青素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。

根据295K、303K、310K、315K温度下的猝灭常数,表明原花青素对BSA的荧光猝灭为静态猝灭过程,由热力学参数焓变(△r Hm)和熵变(△rSm)均大于零,推断出原花青素与BSA之间主要靠疏水作用力相结合,自由能变(△r Gm)为负值,表明原花青素与BSA的作用过程是一个自发过程;应用同步荧光光谱考察了原花青素对BSA构象的影响。

【总页数】4页(P179-182)
【关键词】原花青素;牛血清白蛋白;荧光光谱
【作者】尚永辉;李华;孙家娟
【作者单位】咸阳师范学院化学与化工学院;西北大学分析科学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】O657.39
【相关文献】
1.荧光光谱法研究黄豆苷原与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 宋胜梅;罗小芹;徐茂田
2.牛血清白蛋白与荧光增白剂相互作用的荧光光谱法研究 [J], 潘可亮;李树伟
3.光谱法研究Fe^(3+)/Fe^(2+)离子对CS-Fe_3O_4@ZnS:Mn/ZnS磁性荧光复
合纳米粒子与牛血清白蛋白相互作用的影响（英文） [J], 彭茂民;夏虹;刘丽
4.荧光光谱法研究荧光桃红与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 郭彦青;李建晴;卫艳丽;董川
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

荧光猝灭法研究胆红素与牛血清白蛋白的相互作用
荧光猝灭法研究胆红素与牛血清白蛋白的相互作用
在模拟生理条件下,利用荧光猝灭法研究了胆红素(BR)和牛血清白蛋白(BSA) 的相互作用.结果表明胆红素对BSA有较强的荧光猝灭作用,两者形成了新的复合物,属于静态荧光猝灭,发生了分子内的非辐射能量转移.计算了不同温度下的结合位点数n,结合常数KA,以及对应的热力学参数ΔG,ΔH和ΔS.根据Foster非辐射能量转移理论确定了胆红素和BSA间的结合距离r.此外,利用同步荧光光谱,分析了胆红素对牛血清白蛋白构象的影响.
作者：郭兴家李晓舟徐淑坤孙秀丹刘婷婷GUO Xing-jia LI Xiao-zhou XU Shu-kun SUN Xiu-dan LIU Ting-ting 作者单位：郭兴家,GUO Xing-jia(东北大学化学系,沈阳,110004;辽宁大学化学科学与工程学院,沈阳,110036)
李晓舟,LI Xiao-zhou(沈阳理工大学光电子与激光生物医学研究中心,沈阳,110013)
徐淑坤,XU Shu-kun(东北大学化学系,沈阳,110004)
孙秀丹,刘婷婷,SUN Xiu-dan,LIU Ting-ting(辽宁大学化学科学与工程学院,沈阳,110036)
刊名：分析试验室ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF ANALYSIS LABORATORY 年，卷(期)：2007 26(4) 分类号：O657.3 关键词：胆红素牛血清白蛋白荧光猝灭光谱热力学参数能量转移。

荧光光谱法研究槲皮素与牛血清白蛋白的相互作用
廖卫平;司芝坤
【期刊名称】《烟台大学学报（自然科学与工程版）》
【年(卷),期】2006(019)001
【摘要】用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中中草药的有效成分槲皮素(Quercetin,QCT)与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的相互结合反应.实验表明,槲皮素与牛血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程.在水溶液中槲皮素与蛋白质牢固结合,其结合常数KB=1.12×106 L/mol.根据F rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(QCT)间距离r=3.69 nm和能量转移效率E=0.317,并根据热力学参数推测了槲皮素与牛血清白蛋白的作用力类型.
【总页数】5页(P20-24)
【作者】廖卫平;司芝坤
【作者单位】烟台大学,化学生物理工学院,山东,烟台,264005;山东大学,化学与化工学院,山东,济南,250100
【正文语种】中文
【中图分类】O644.17
【相关文献】
1.槲皮素钕配合物与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究 [J], 王文轩;蒋建宏;胡钞粟;肖碧源;邓媚莹;刘想丽;肖圣雄;叶丽娟
2.荧光法研究钙离子存在下槲皮素与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 吕鉴泉;舒韵;周
娟;唐春燕;徐明波
3.荧光猝灭法研究二氢槲皮素和二氢杨梅素与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 樊超;钟艺青;粟芸;李会娟;吴方评;金苹
4.牛血清白蛋白与荧光增白剂相互作用的荧光光谱法研究 [J], 潘可亮;李树伟
5.荧光光谱法研究荧光桃红与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 郭彦青;李建晴;卫艳丽;董川
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

荧光光谱研究牛血清白蛋白和核黄素的相互作用采用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱研究了核黄素与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的光谱行为。

结果发现，在温度为293K和310K时核黄素与BSA的结合常数(Kb)分别为4.879×105L•mol-1和1.880×105L•mol-1，结合热力学方程计算得到了对应温度下的热力学参数。

结果表明核黄素对BSA 有较强的荧光猝灭作用，其荧光猝灭过程属于动态猝灭机制，二者主要靠疏水作用力结合。

采用同步荧光光谱探讨了核黄素对BSA构象的影响。

通过对荧光光谱的研究，可以获得蛋白质分子中荧光生色基团的种类、结构和所处微环境及其分布情况等有用信息，同时还可以得到外源物质与生物大分子相互作用的有关数据。

目前已有多篇文献采用荧光光谱法研究药物分子如槲皮素[3]、甲基硫菌灵[4]等与血清白蛋白的相互作用。

核黄素(Riboflavin，RI)又称维生素B2，是人体必需的13种维生素之一，具有促进发育和细胞的再生；促使皮肤、指甲、毛发的正常生长；消除口腔内、唇、舌的炎症；减轻眼睛的疲劳增进视力，协助代谢碳水化合物、脂肪、蛋白质等多种功能。

同时还具有利尿消肿，防治肿瘤，降低心脑血管病的发生等保健功效。

本文采用荧光光谱法研究了核黄素与牛血清白蛋白(BSA)间的相互作用，探讨了核黄素与BSA作用机制，计算得到荧光猝灭常数，以及与BSA作用的结合常数和结合位点数等信息。

1实验部分1.1试剂与仪器RF25301型荧光分光光度计(日本，岛津公司)；UV28453型紫外分光光度计(日本，日立公司)；TB285型恒温水浴(日本，岛津公司)；pHSJ24ApH计(上海雷磁仪器厂)。

牛血清白蛋白(Amresco.0930，分子量:65000)；核黄素(中国药品生物制品检定所)；pH=7.40的Tris2HCl缓冲溶液；以Tris2HCl缓冲溶液为溶剂配制1.0×10-3mol•L-1的BSA标准溶液，1.0×10-3mol•L-1核黄素标准溶液，两种标准溶液均在0～4℃冰箱中保存。

橙皮素及橙皮苷与牛血清白蛋白作用的比较邹淑君;张蕾;郭迎喜;于子惠;许树军;马英丽【期刊名称】《中医药信息》【年(卷),期】2014(000)002【摘要】目的：比较橙皮素和橙皮苷与牛血清白蛋白（ BSA ）作用的异同，探讨黄酮类化合物A环7位羟基糖苷化与否对结合血清白蛋白的影响。

方法：荧光光谱、紫外-可见吸收光谱法测定橙皮素和橙皮苷与BSA的作用。

结果：橙皮素对BSA的荧光猝灭效率明显高于橙皮苷；橙皮素对BSA的荧光猝灭以静态猝灭为主，而橙皮苷对BSA的荧光猝灭既有静态猝灭作用，也有动态猝灭作用；橙皮素与BSA结合的Ka值明显大于橙皮苷；橙皮素结合BSA的位点与荧光发射基团的距离比橙皮苷的小；橙皮素与BSA之间的作用主要是氢键和范德华力，而橙皮苷与BSA的作用主要是疏水作用力。

结论：橙皮素与BSA的结合能力明显强于橙皮苷，说明橙皮素比橙皮苷更容易被血清蛋白贮存和运输。

【总页数】5页(P8-12)【作者】邹淑君;张蕾;郭迎喜;于子惠;许树军;马英丽【作者单位】黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.橙皮素铜(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白作用的研究 [J], 邹淑君;张蕾;郭迎喜;徐晹;许树军2.荧光光谱法研究橙皮素与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 尚永辉3.橙皮苷及橙皮素对心血管系统保护作用及机制的研究进展 [J], 刘正兵4.新橙皮苷与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 刘蓉5.橙皮苷及其4种金属配合物与牛血清白蛋白结合作用的研究 [J], 陈建秋;梁佳然;钟文英;季荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

橙皮苷分光光度法测定牛血清白蛋白严志红;龙宁;唐睿;朱明芳【摘要】在pH 4.6的HAc-NaAc缓冲溶液中,对橙皮苷与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的吸收光谱进行了初步研究.结果表明,橙皮苷在236 nm处有一强的吸收峰,当加入BSA作用后该吸收峰的强度升高,峰位基本不变,且没有新的吸收峰出现.在此波长下测定其复合物的吸光度,其吸光度的增加值(ΔA)与BSA的浓度在16～260 μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.999 3),检出限为10 μg/mL,测定结果的相对标准偏差为3.2%(n=10).该方法具有简便、快速、选择性好、灵敏度高等特点,应用于鲜奶粉和液态纯牛奶样品中总蛋白的测定,回收率分别为87.5%、92.4%,结果与考马斯亮蓝G250法基本一致.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2009(018)006【总页数】3页(P25-27)【关键词】橙皮苷;分光光度法;牛血清白蛋白【作者】严志红;龙宁;唐睿;朱明芳【作者单位】广东药学院药科学院,广州,510006;广东药学院药科学院,广州,510006;广东药学院药科学院,广州,510006;广东药学院药科学院,广州,510006【正文语种】中文蛋白质可自我复制，其最基本的作用是参与生命的新陈代谢、高等动物的免疫反应和记忆活动等。

药物分子与蛋白质之间可通过分子间作用力形成复合物，这种复合物可称为超分子化合物，它是属于生命科学与化学之间的一个边缘性研究内容。

因此采用不同的方法研究以白蛋白为代表的蛋白质与药物分子的作用，有助于阐明大分子与小分子配体(药物与染料)间相互作用的化学本质。

目前该研究已成为十分活跃且成熟的研究课题[1-5]，其中因分光光度法简单、快速、重现性好等优点而受到人们的关注。

常用的光度法在反应时间、选择性、灵敏性及重现性等方面各有优缺点。

橙皮苷(Hesperidin，简称HES)是芸香科桔属植物果皮中常见的黄酮苷，广泛存在于陈皮、桔皮、枳壳、枳实等药材及制剂中，具有理气调中、燥湿化痰的作用，也是羟基自由基和超氧自由基等人体内有害自由基的清除剂[6]。

橙皮素铜(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白作用的研究邹淑君;张蕾;郭迎喜;徐晹;许树军【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2015(29)8【摘要】本研究应用荧光光谱测试了橙皮素铜(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用,并与橙皮素对比.结果显示橙皮素铜配合物对BSA的荧光猝灭以静态猝灭为主,但静态猝灭常数比橙皮素小;对BSA的荧光猝灭效率明显弱于橙皮素;橙皮素配合物与BSA的结合常数和结合位点数都小于橙皮素;与BSA之间的主要作用力与橙皮素相似,以氢键和范德华力为主.说明橙皮素铜配合物与BSA的结合能力弱于橙皮素.橙皮素在血液运输过程若遇到Cu2+,可能会因为发生配位作用而减弱橙皮素与血清蛋白的结合能力.【总页数】4页(P5-7,4)【作者】邹淑君;张蕾;郭迎喜;徐晹;许树军【作者单位】黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学实验中心,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学实验中心,黑龙江哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】O62【相关文献】1.7-肉桂酰橙皮素铜配合物的固相合成及清除自由基作用研究 [J], 武旭芳;段志芳;李充璧2.八羟基喹啉铜（II）配合物的DNA结合和切割活性及与牛血清白蛋白相互作用[J], 陈战芬;张书萍;张健3.大黄素铜锌配合物与牛血清白蛋白的相互作用研究 [J], 周能;周振;程海燕4.N-（2-亚甲基吡啶）脱氢枞胺希夫碱及其铜配合物与牛血清白蛋白的作用研究[J], 王平平;黄志向;高炜琳;张洁;徐武双;张瑜;刘庆波;龙剑英;费宝丽5.金属铜配合物的合成、晶体结构、抗癌活性及与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 张燕;孟祥高;蔡苹;程功臻;贾士芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

荧光光谱法研究黄藤素与牛血清白蛋白的相互作用王彦卿;张红梅;张根成【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2006(25)5【摘要】运用荧光光谱、紫外光谱法研究了中药黄藤素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.实验结果表明,黄藤素与BSA形成基态复合物导致BSA内源荧光猝灭,猝灭机理主要为静态猝灭和非辐射能量转移.测定该反应的表观结合常数KA为1.650×105L·mol-1、结合位点数n为1.502;根据F(o)rster能量转移理论,测得供体与受体间结合距离r为2.801 nm和能量转移效率E为0.190.【总页数】4页(P48-51)【作者】王彦卿;张红梅;张根成【作者单位】盐城师范学院,江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室,江苏,盐城,224002;盐城师范学院应用化学与环境工程研究所,江苏盐城 224002;盐城师范学院,江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室,江苏,盐城,224002;盐城师范学院应用化学与环境工程研究所,江苏盐城 224002;盐城师范学院,江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室,江苏,盐城,224002;盐城师范学院应用化学与环境工程研究所,江苏盐城 224002【正文语种】中文【中图分类】O657.32;R962【相关文献】1.荧光光谱法研究山姜素与牛血清白蛋白的相互作用机理 [J], 赵婷婷;毕淑云;王瑜;王天娇2.荧光光谱法研究木犀草素、芹菜素或葛根素与牛血清白蛋白的相互作用机理 [J], 尚永辉;李华;孙家娟3.荧光光谱法研究木犀草素及其苷与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 王勇;庆伟霞;朱金花;刘绣华4.荧光光谱法研究甜蜜素与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 潘军辉;万宇俊;张萌;蒲超群;王亚萍;张国文5.荧光光谱法研究香豆素-3-羧酸与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 郁有祝;王芳;郭玉华;牛永生;石蔚云;申艳红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。