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第29卷第4期2016年12月聊城大学学报（自然科学版）Journal of Liaocheng University(Nat. S ci.)Vol. 29 No. 4Dec. 2016甲基亚砜(DMSO)对泥鳅精子运动的影响°刘国翠胡家会(聊城大学生命科学学院，山东聊城252059)摘要泥紙(M i叹M rw wi awgMiZZicawiiaiM5 )的精子，在精装和等渗的电解质溶液中不运动，在 蒸馏水、低渗的电解质和非电解质溶液中与其它淡水鱼类精子运动没有明显区别.在高渗的二甲 基亚砜D M S0溶液中，泥鳅精子的运动表现为随着溶液浓度的升高，激活所需要的时间越来越长，最大运动率逐渐降低，运动时间相对延长.为此，提出渗透压调节精子运动的假说.关键词泥鳅，激活，精子运动，渗透压中图分类号 Q959 文献标识码 A文章编号 1672-6634(2016)04-0028-03泥嫩（MiigMrwMi awg"M iZZicaM<iaiM5)隶属于趣形目（C yfriw i/cirT O e5)、嫩科（Cotoiiiae)，具有生长快和 适应环境广等特点的淡水经济鱼类，肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富，经常食用还对多种疾病有显著的预防 和治疗作用，也是我国传统的外贸出口商品[1].由于国内外对泥鳅需求量的增加，自然繁殖远远不能满足 市场需求，为此不少学者对泥鳅的人工繁殖进行了研究[2].泥鳅精子运动能力是影响人工繁殖的重要因素 之一，只有少数学者对其进行了初步研究[3,4].鱼类是体外受精的典型水生动物，N aC K K C l等电解质对鱼类精子运动的影响有较多研究，而小分子 有机质对精子运动的影响研究较少.本文探讨二甲基亚砜（DMSO)对泥鳅精子运动的影响，以揭示泥鳅精 子运动的机理，为泥鳅人工受精及精子的冷冻保荐积累一些资料，并为提高种苗的繁育提供参考.1材料与方法1.1实验材料试验用泥鳅购于山东省聊城市交运农贸大市场，选购性腺丰满且发育成熟的个体.回到实验室后，先 在10 mg/L的KMn04溶液中浸泡10 m in杀菌消毒，饲养在曝气3 d以上自来水的玻璃缸内，每缸30尾 雄性泥鳅，连续充气，每天喂食两次、换水约1/5体积.1.2精液的获得与保存随机从玻璃缸中取健康、性成熟的泥鳅，在清水中冲洗，吸去体表的水，称重、测体长，解剖取精巢.按 1 : 10(W :V)将精巢放在保存液中，用眼科剪剪碎，让精子溢出，离心1mm(300转/mm)，弃去组织碎 块，制成精子悬液，保存在4S C冰箱内，在24 h内完成实验.1.3精子激活液的配制参照H u等（2009)[5[的配制方法并加以改进.用双蒸水配制泥鳅精子保存液(精子保持静止），其保存 液含 135 mM NaCl、10 mM K C1、1mM CaCl2 和 10 mM Tris-HCl (pH7_ 5)，渗透压约为 300 mOsm/kg.把一部分保存液用蒸馏水稀释，制成渗透压分别是50、150、250、270 mOsm/k g的泥鳅精子激活液（激活 精子运动）.①收稿日期：2016-07-21基金项目：国家自然科学基金项目（31270458)资助通讯作者：胡家会，E-mail:hujiahui@.第4期刘播攀等：二甲基亚砜(DMS .Q )对泥鳅精子运动的影_响29150 250渗透压/毫渗图1泥鳅精子4^蒸馏水中的运动 图2泥鳅精子在稀释的保存液中的运动泥鳅精子在£〇和150 m Osm /kg 的稀释液中，与在蒸馏水的运动没有显著区别.随着稀释濬液渗透压的升高，精子运动'率逐渐降低，运动时问相对增长（图2).泥鳅精子在不同浓度（渗透压）D M SO 濬液中的运动，与在稀释的保存液和蒸馏水中的运动不同，在1%的DMSO I 容液(渗透應为140 mOsm /kg )中，精运动被立即激活;在2%的D M SO 溶液(渗透压为280mOsm /kg )中，经过5 s 后，精子才逐渐被激活，随着时f间的延长，精子运动率不断升裔，激活60 s 左右时.精予运动达到最大值左右X 随着D M SO 溶液浓度的进一步升高，运动激活所需要的时间越来越长，最高激活率越来越低，但运动的时间相对延长.舎1DM SO 溶液的浓度最高达8 %时，激活所需要的时间最长，最大激活率只有35 %左右运动速度减慢，但泥鳅精子的运动时间最长（图3).这一歲与D M S O 对玫瑰无须鈀精子运动祕幡果-图3泥鳅擀乎在_ DM S .0瑢液中的运动在预实验的基础上…用双蒸馏水配制不同浓度D M S O 的精子激活液，确定D M S O 溶液的浓度为2%、4氣8^体积分数)四个禅度,其:渗透压分规是相_于140、280、560和112〇111(33131/1^.1.4精子运动的观察首先，观察精子在精浆、保存液和蒸馏水中的运动情况，再观察精子在不同渗透压的保存液稀释中的 运动状态.最后，观察精子在不同渗透压DMSO 溶液中的运动百分数和运动时间，实验均在:室温(_24 TO 下进行.观察精子运动时，取5 泥鳅精子悬浮液*董于干净的载玻片上，与45 不同种类、不同渗透压的激活液混合，快速混匀，在光镜（/ 200)下肉眼观察精子运动情况.混合5 s 时，第一次宏观计数精子运动 百分数，然后每隔60 S 连续记^录精子运动，直到精子停止运动（即运动率小f >5 %时，视为不运动并记录 精子运动的时间.2实验结果实验用泥鳅，.平.均体重为C :8:.58 ± 〇..553办事均体长为(.1_2...:&_9 ± «X =S 1) cm _在靈温（24 'C )下，泥鳅精子在精浆中不运动，在保存液中也不运动._蒸馏水中，泥鳅精子的运动率高达似.2 ± 4最长运动时间为min (图1)>/s o o o 528456 1 1 2时 ■ ■ ■■o o o o o o o 7654321%/标烛屮軀o o o 5 43 2%/#标烛30聊城大学学报（自然科学版)第29卷3分析与讨论影响鱼类精子运动的因素有多种，外界溶液的渗透压是影响其运动的最重要因素[5].—般来说，硬骨 鱼类的精子在精浆中和等渗的电解质与非电解质溶液中均不运动，当淡水鱼的精液稀释到低渗的淡水中 或海水鱼的精液稀释到高渗的海水中时，不运动的精子立即被激洗，产生运动，当与同种的成熟卵细胞相 遇时，完成受精作用[7'8].3.1泥鳅精子在电解质溶液中的运动实验结果表明，泥鳅精子在蒸馏水和低于250 mOsm /k g 稀释保存液中的运动情况非常相似.当与实验溶液混合时，泥鳅精子运动立即被激活，随着激活时间的延长，精子运动率逐渐减少，同其它淡水鱼精子 在低渗的电解质溶液中的运动有非常相似的表现，即外界溶液的渗透压低于细胞内的渗透压时，精子吸水 即产生运动，但作用机理还没有进行深人探讨[9—11].3.2精子在非电解质溶液中的运动D SM O 是一种含硫有机化合物，具有很强的渗透性，能迅速透人细胞，降低冰点，提高细胞膜对水的通透性，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结之前透出细胞外，在胞外形成冰晶，提高细胞内的电解质浓度，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞冻伤，在精子和卵细胞的冷冻保存过程中起到重要的作用[12as].泥鳅精子只能在低渗的电解质溶液中运动，为什么能在高渗的非电解质D M SO 溶液中运动呢？用现有的鱼类精子生物学知识还没法解释.为此，我们提出渗透压调节精子运动的机制假说（图4).在低渗透压的溶液中，泥鳅精子吸水，精子运动立刻被激活.当泥鳅精子稀释到高渗透压的D M SO 溶液 时，由于外界的渗透压高于细胞内的渗透压，所以精子细胞失水，D M SO 也不断进人精子细胞，这时精子 细胞保持不运动.由于水分子进人细胞的速度快，而D M SO 进人细胞的速度慢，当水分子达到细胞内外平 衡时，D M SO 分子还没有达到平衡.当D M SO 继续进人细胞时，水分子开始流出细胞(失水），这时精子运 动被激活.所以，在高浓度的D M SO 溶液时，精子运动启动的时间被延迟，D M SO 溶液浓度越高，延迟激 活的时间越长.当细胞内外D M SO 达到平衡时，水势也达到新的平衡，即精子运动停止.推测结论：细胞内外水势差的存在是精子运动启动的动力，当精子细胞内外存在水势且吸水时，水势 能直接或间接启动了细胞内A T P 的代谢途径，激活泥鳅精子产生运动.参考文献[1] 张继华.陆元康水中人参”—泥鳅[]].烹调知识.2006,4:14-15.[2] 李凤龙.谢宜涛.泥鳅养殖生物学及池塘养殖技术[]].吉林渔业.2G G 8.4:10-12.[3] 苏应兵.廖咏玲.杨代勤.等.3种单糖对大鱗副泥鳅精子活力的影响[]].长江大学学报：自然科学版.2011.12:242-244.[4] 阮国良.冯家斌.杨代勤.渗透压、p l l 和温度对泥鳅精子活力及受精率的影响[J ].湖北农学院学报.2004.1:22-25.[5] A lavi S M II,C o sso n J . 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A rts Department,Ningde Normal University»Ningde 352100 »China) Abstract Mechanism of effect of ecological compensation is to solve market failure caused by the ecological benefit of externalities,maintain social fairness development of ecological environment,and to maintain the ecosystem function to motivate people and to maintain economic means,so as to protect the environment and ecosystem balance.Article Xi?an Chanba biome necessity and urgency of the implementation of ecological compensation measures are studied and discussed,in the grasp of the current ecological environment benefit and effect of ecological compensation at home and abroad development model,according to the current existing theory achievement,field investigation,case analysis of a typical project,arrange biome ecological compensation effect of related theories and practical cases,draw lessons from successful experience,conclude that the Xi?an Chanba biota evolution and characteristics of landscape plants,and the Chanba biome probes into the mechanism of action of the surrounding environment and research,considering action Ba ecological system service value and the level of economic development,with ecological garden plant ecological externality and fairness as a starting point,discusses the area?s ecological construction,and the developed countries of the theory and practice of compensation for ecological benefits of experience are analyzed and summarized,finally combining Chanba biome own environmental characteristic,put forward the Chanba biome garden plant ecological compensation effect of research methods,hope to Chanba ecological construction,especially in garden plant will provide a scientific basis for ecological compensation effect.Key words Chanba ecological district,effect of ecological compensation,garden plants,planning and design(上接第30页）[9] Krasznai Z»Morisawa M，Krasznai Z T»et al. Gadolinium»a mechano-sensitive channel blocker»inhibits osmosis-initiated motility ofsea- and freshwater fish sperm, but does not affect human or ascidian sperm m otility[J]. Cell Motil Cytoskel, 2003，55: 232-243.[10] Morisawa M ,Suzuki K. Osmolality and potassium ion：their roles in initiation of sperm motility in teleosts[J]. Science,1980,210：1 145-1 147.[11]Morisawa M，Suzuki K，Morisawa S. Effects of potassium and osmolality on spermatozoa motility of salmonid Iishes[J]. J Exp Biol1983b, 107：105-113.[12] Cabrita E» Robles V» Alvarez R» et al. Cryopreservation of rainbow trout sperm in large volume straw s：application to large scalefertilization[J]. Aquaculture,2001, 201 ：301-314.[13] Cabrita E» Alvarez R» Anel L» et al. Sublethal damage during cryopreservation of rainbow trout sperm[J]. Cryobiology, 1998, 37：245-253.The Discussing on Loach Sperm Motility Affected in Two Kinds ofSmall Molecule Organic SolventsLIU Guo-cui HU Jia-hui(School of Life Sciences, Liaocheng University, Liaocheng 252059, China)Abstract Loach sperm was motionless in the seminal plasma and isotonic fluid,and sperm motility in hyponotic electrolyte and non electrolyte solutions were no significant differences comparison with in distilled water.Loach sperm motility in hypertonic dimethyl sulfoxide solution showed that the activation of sperm motility was more long time,and maximum rate of that was lower,and time of that was more long with the increases of the concentration of the solutions.To this end,the hypothetical mechanism that was osmotic pressure regulates sperm motility was proposed.Key words loach,activation,sperm motility,osmotic pressure。
硫酸铜对泥鳅的急性毒性实验何忠伟 09级水产养殖学摘要：采用改进寇氏法，分为预实验和正实验两部分。
用一定浓度梯度的硫酸铜溶液对泥鳅进行毒性实验，但并未得到预想的开始致死浓度、全部死亡时的最小浓度以及半致死浓度数据，实验以失败而告终。
但实验最后进行了讨论，希望能有借鉴之处。
实验目的：一、确定硫酸铜的毒性强度。
二、计算硫酸铜的治疗指数即安全浓度、全部死亡时的最小浓度和半致死浓度。
三、观察毒性症状，为临床检测硫酸铜的毒性提供参考和依据。
四、为亚急性、慢性毒性的实验设计提供参考资料。
1.材料与方法1.1 实验药物硫酸铜固体分析纯河北省保定化学试剂厂生产批号xk 13-001-0208-0126 1.2实验器具500ml、100ml、80ml烧杯各一个，2ml、5ml各一个，塑料盆7个，塑料桶1个。
1.3实验泥鳅及环境挑选健康、无病、无外伤的泥鳅作为实验用鱼,体重平均3.52g，平均体长8.8cm。
使用实验室的自来水。
1.3 实验方法首先进行预实验:先根据老师提供的以往实验浓度适当的扩大和缩小几个跨度很大浓度以及对照组进行实验。
找出2h内刚开始死亡和全部死亡时的浓度,得出ILL 和LC100。
再根据得出的ILL和LC100按等间距设置五个梯度浓度组和一个对照组，进行正实验。
实验所用药液采用先配制母液1/25(40.0ppm)。
根据所需要的浓度将母液稀释成所需要的浓度, 将实验泥鳅按低浓度到高浓度逐次放入, 实验开始时进行连续观察, 然后纪录各浓度的泥鳅活动状况、死亡数及存活数。
泥鳅死亡的标准以镊子夹住其口裂、腮盖、鳍条, 身体完全不动, 将其放入清水中, 5 min仍不动为死亡。
1.4 半致死浓度的计算LC50=lg-1[x m-i(∑p-0.5)]x m-最大剂量的对数i-相邻量计量的比值p-各组的死亡率，用小数表示2 结果与讨论2.1实验结果预实验数据分组 1 2 3 4 5 6 7泥鳅数量（条）10 10 10 10 10 10 10 加水容量（L） 4 4 4 4 4 4 4加母液量（ml）0.0 8.0 10.0 12.0 19.0 21.0 23.0 药品浓度（ppm）0 80 100 120 190 210 230泥鳅的活动状况活动正常，时而上游，时而静伏盆底，呼吸均匀。
Cu2+对泥鳅红细胞微核的影响张晋，王馨【摘要】采用硫酸铜对泥鳅进行染毒试验，用常规方法制备血涂片，以研究其不同浓度范围（0.05mg/L—0.4mg/L）对泥鳅红细胞核异常和微核的诱导效应。
结果表明：硫酸铜能不同程度地引起泥鳅红细胞核异常率的升高，各处理组泥鳅红细胞微核的出现率随铜离子浓的增加先增加后减少再增加的趋势，不具有一定的剂量－效应关系。
【关键词】Cu2+；泥鳅；红细胞微核；核异常近年来，大量工农业生产的废弃物被排到江河湖泊，其中的重金属在水体中不易被降解，重金属通过食物链在鱼体中积累，会对鱼类产生毒害作用。
微核试验是20世纪70年代由Heddle（1973）和Schmid（1975）分别独自创立的，是检测细胞遗传损伤的指标和检测化学物质毒性的一种常规方法。
该方法已经被广泛应用于检测和监察各种理化因子对机体的致癌、致突变效应。
泥鳅的血红细胞具核，在外来诱变剂的作用下会出现微核和各种核畸变现象。
近年来学者将泥鳅作为研究水体污染的材料，取得较好效果。
泥鳅在实验室易于饲养，分布广泛，取材容易，易于涂片，且具有较高的敏感性等优点，因而常被用于检测水体的污染情况。
因此，可用泥鳅作为评价水体污染和化学物质对水生生物遗传损害及毒理效应的指示生物。
泥鳅对环境中低浓度的污染物较为敏感，微核试验已广泛应用于化学物质、重金属、除草剂及食品添加剂等对泥鳅遗传毒性的影响的研究。
实验以泥鳅为研究对象，探讨Cu2+对泥鳅红细胞微核、核异常等遗传指标的影响，为环境监测提供参考和数据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物泥鳅30条（泥鳅购大学城永辉超市，体长10±2．0）cm，在曝气的自来水中暂养3 d，实验时选用体重相近、体表无损、健康活泼的个体作为试验材料。
1.1.2 主要试剂分析纯CuSO4·5H2O用蒸馏水配置成10 mg/L母液，再稀释成所需的浓度；吉姆瑞氏混合染液，使用前用0.2 mol/L 磷酸缓冲液（pH值6.8）稀释10倍。
Fe2+对雄性泥鳅生殖毒性的研究摘要：以泥鳅（Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ）精子为受试材料，应用计算机辅助精子分析（ＣＡＳＡ）系统，研究了亚铁离子（Ｆｅ２＋）对雄性泥鳅的生殖毒性。
在预实验的基础上，设置３０、６０和３００μｍｏｌ／Ｌ３个Ｆｅ２＋浓度梯度。
泥鳅精子暴露０、０．５、１.0、２.0和４.0 ｈ后激活，测定运动百分数、时间和速度等精子运动参数。
结果表明，６０ｍｏｌ／Ｌ的Ｆｅ２＋溶液明显影响泥鳅的精子运动时间和相对速度（Ｐ＜０．０５）。
高浓度的Ｆｅ２＋能够抑制泥鳅精子运动，对泥鳅具有潜在生殖毒性作用。
关键词：亚铁离子（Ｆｅ２＋）；泥鳅；精子运动；生殖毒性Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆＦｅ２＋ｏｎｔｈｅｓｐｅｒｍｏｆｌｏａｃｈ（Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ）ｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙａCｏｍｐｕｔｅｒ－AｓｓｉｓｔｅｄSｅｍｅｎAｎａｌｙｚｅｒ（ＣＡＳＡ）．Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅｌｏａｃｈｓｐｅｒｍｗａｓｉｎｃｕｂａｔｅｄｉｎｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＦｅ２＋（３０，６０，ａｎｄ３００μｍｏｌ／Ｌ）ｆｏｒ０，０．５，１.0，２.0 ａｎｄ４.0 ｈ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ，ｄｕｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｉｎａｃｔｉｖａｔｏｒｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｔｈｅｓａｍｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｉｒｏｎｉｏｎｏｆｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｄｕｒａｔｉｏｎａｎｄｒｅｌａｔｉｖｅｖｅｌｏｃｉｔｙｒｅｄｕｃｅｄsignificantly ａｔ６０ｍｏｌ／ＬｏｆＦｅ２＋（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｆｅｒｒｏｕｓｉｏｎｓｗｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄａｍａｇｅｔｈｅｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｌｏａｃｈ，ａｎｄｍｉｇｈｔｈａｖｅｈａｒｍｆｕｌｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｌｏａｃｈｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｆｅｒｒｏｕｓｉｏｎ；ｌｏａｃｈ；ｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙ；ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｔｏｘｉｃｉｔｙ铁是动物体内必需的微量元素，是血红素、细胞色素的重要组成部分，可参与多种生命活动过程，机体内的铁代谢平衡是保证生命活动正常进行的基础［１］。
几种化学物质对蟾蜍蝌蚪生存及生长发育的影响摘要：在室内条件下，采用单因子急性和慢性毒性实验法，分别研究了水环境中的pH、洗涤剂、除草剂、重金属离子(Pb2+、Cu2+、Hg+)对黑眶蟾蜍蝌蚪的毒性效应。
结果表明，这些水体污染物不但对蝌蚪的生存造成危害，还对蝌蚪的红细胞有致畸作用；而其慢性毒害表现为蝌蚪身体畸形，肤色变浅，生长发育迟缓等．据此，可以利用黑眶蟾蜍蝌蚪对水污染进行监测。
关键词：化学物质；生长发育；蝌蚪；黑眶蟾蜍水体污染对水生生物造成极大的危害。
消除或减轻污染，关键问题在于对环境进行有效的监测。
两栖动物具有水陆两栖独特的生活周期，依赖水环境而生存，所以水体的质量将会对蝌蚪的生长发育产生巨大的影响，通过观察蝌蚪的形态行为特征，可以对水体进行质量评价。
蝌蚪是两栖动物变态前的幼体阶段，因其细胞分裂旺盛，对环境的变化极为敏感，因此是监测环境的适宜指示物种。
国外学者较早利用蛙类及蝌蚪对农药污染进行监测。
美国在1989年就明确提出将两栖动物作为环境质量监测的指示生物。
国内此类研究起步较晚，直到20世纪90年代初才见报道，并且已有的研究主要是对水体中的某一重金属及除草剂等有害物质的监测，贺维顺等用国产洗衣粉进行了对蝌蚪红细胞微核率影响的致突变研究，发现其有一定的剂量效应关系，且能诱发染色体损伤，而对水体的酸碱度的监测报道则很少。
本文报道了不同pH的水体、不同浓度的除草剂、洗涤剂以及重金属溶液对黑眶蟾蜍蝌蚪的存活与生长发育的情况以及对红细胞微核产生的影响，从宏观和微观不同层次上综合分析污染危害程度，为环境评价，污染预报和污染物危险性提供依据，也为保护两栖类和其它水生动物以及探寻更为有效的环境生物学监测方法提供科学依据。
1材料与方法1．1 实验材料春季在华南师范大学生物试验场捕捉成熟的雌雄黑眶蟾蜍(aufo melanostictus Schneider)，将其放于孵化池中产卵，以蝌蚪作为实验材料。
蝌蚪喂以混合性饲料(含面粉，鱼粉，大豆粉，维生素等)，每日早晚各一次。
上海实验动物科学19(4):236～238,1999·综 述·锌、铜、硒对动物生殖的影响沈志明1 富群华2(1上海第二医科大学实验动物科学部,上海200025;2上海实验动物研究中心) 生物机体约由30种元素组成。
动物必需元素包括常量元素和微量元素两大类。
习惯上,人们把含量低于0.01%的元素称为微量元素,高于0.01%的元素称为常量元素。
已知必需常量元素有钙、磷、钾、钠、氯、硫、镁等7种;必需微量元素有铁、碘、铜、锰、锌、硒、钴、钼、铬、氟、镍、钒、硅、锡等14种,其中锌、铜、硒是影响动物生殖的最重要的微量元素[1]。
1.锌、铜、硒对雄性动物生殖的影响(1)锌 人和动物的精液中含有大量的锌,浓度高至0.2%。
缺锌能影响精子的形成、精子的代谢和活动力[2]。
在精子成熟之前大量的锌进入精子内,不仅对精子生成是必要的,而且对维持精原上皮的健康也是必要的[3]。
成年个体睾丸中锌的含量较高,而前列腺中的锌含量是所有器官中最高的。
锌缺乏首先影响血管紧张肽转化酶(ACE)的活性,转而导致睾酮耗竭和精子发生的抑制。
锌缺乏常使大鼠的精子发生一些缺陷,足量的锌有助于延长精子排出体外后的功能寿命[1]。
缺锌后动物对睾丸酮的反应低下,因而使睾丸的类固醇生成也低下。
锌缺乏可延缓男性第二性征发育,在大鼠上的组织病理改变为曲细精管萎缩、睾丸发育减缓,此外,附睾及前列腺的发育也减慢,睾丸精原上皮萎缩,锌缺乏还使成年动物发生性腺萎缩及纤维化[3,4]。
但锌的过量摄入也会损害雄性生殖器官,如给鸡、鹌鹑、大鼠及仓鼠的睾丸内注射锌制剂(如ZnCl2,Zn(NO3)2或ZnSO4),可发生睾丸癌肿及畸胎瘤。
不过,在一般情况下,动物不易发生锌的过量摄入。
(2)铜 铜对受精、胎儿发育是必需的。
铜含量过低能抑制雄性动物发情,使繁殖力减退。
O'Dell等首先发现铜缺乏可使大鼠精子活力下降[5]。
各种动物中,绵羊和未成熟牛对过量铜特别敏感,易受过量铜的危害,影响精子形成[6]。
泥鳅人工授精的方法时间：2010-06-29 16:16:45 来源：新民养殖网作者：冬冬人工催产后的泥鳅，可以再网箱中让其自行产卵受精，也可进行人工授精。
人工授精的优点：可获得更多的受精卵，提高亲鳅的利用率。
泥鳅人工授精的方法：一、适时人工授精。
认真观察网箱中亲鳅的动静，若发现雌、雄亲鳅追逐渐频，特别是雌鳅呼吸急促，则说明发情高潮来临了，这时候挤压雌鳅腹部会流出金黄色的卵子，卵子游离。
亲鳅的授精时间到了，应马上做好准备，进行授精。
二、制备精液。
剖腹取出贴在背椎两侧的泥鳅精巢。
解剖后将2条乳白色的精巢用镊子轻轻取出。
然后将其放入研钵中研磨，并以1尾雄鳅精液加入15毫升林格氏液的比例将林格氏液立即冲入即可。
三、人工授精。
制备好精液后，人工授精可立即进行。
将雌泥鳅的体表水用干净毛巾擦干，一人用毛巾将成熟的雌泥鳅裹住，露出肚皮，用手轻轻挤压雌鳅腹部，将成熟卵子挤入干燥的白搪瓷盆；另一人将规格为20毫升的注射器（不用针头）吸取配好精液浇在卵上；第三人一手托住白瓷盆轻轻摇晃，另一手用羽毛轻轻搅拌，数秒钟后，加入少量清水，以增强精子的活力，使卵子与精子充分结合。
然后将完成授精操作的卵子漂洗几次，倾出血水，放入孵化设别中孵化。
泥鳅人工授精技术(图)来源：未知时间：2009-5-13 16:43:09 查看次数：1069次文章导读：人工授精，就是让人来给泥鳅注射催产激素，然后用人工授精的方法得到受精卵的过程。
如果让泥鳅自然产卵，每条雌鳅产卵的时间不同，有早有晚，有的从4月下旬就产卵了，而有的能拖到8、9月份才产卵，这样很不方便生产管理，费时费力费工。
人工繁殖可以使亲鳅集中产卵，使卵集中孵化，可以得到大量的、规格一致的鳅苗，有利于规模华生产。
所以，有技术、有经验的养殖户，最好实行泥鳅的人工繁殖。
1．准备人工催产工具进行泥鳅催产，应准备的常用工具有：小研钵2个，用来研磨脑垂体和精巢；1～2毫升注射器数个和4号注射针头数只，用来注射催产药物；剪子、手术刀、镊子各2把，用来摘取雄鳅精巢；家鹅的硬羽毛数支，用来搅拌精液和卵子；500毫升或1000毫升棕色玻璃瓶1个，用于存放格林氏液；10毫升或20毫升吸管2支，用于吸取格林式液；500毫升烧杯数只，用于存放卵和精液；数条毛巾，用于注射时包裹亲鳅；木桶或水盆数只，用于催产前存放亲鳅（图6）。
硫酸铜引起鱼类中毒的原因硫酸铜是治疗鱼病的常用药物，但因一些使用者不谙药性，常造成一些危害。
1病例例1：1987年3月，莲塘水产场用硫酸铜0.7g/m3杀灭亲鱼池青苔，三天后亲鱼全部死亡。
水质分析，氨含量0.35g/L。
例2：1999年8月30日至31日，南昌县八一乡养殖户所养的一口0.67hm2，水深1m的肥水鱼种池，因天气闷热，暴雨，连续两天死鱼，每天约10kg，主要是鲢鱼、草鱼种。
31日因检查有少量车轮虫而施硫酸铜4kg(合0.6g/m3)及晶体敌百虫3kg(合0.45g/m3)。
9月1日、2日大面积死鱼，共计约1000kg。
检查鱼体，未见其他症状。
例3：江西省农科院一口0.5hm2，水深0.9m，多年未清淤的鱼种池，1999年8月30日至9月3日死鱼共计145kg，主要为鲢鱼。
因水质较肥，3日中午施硫酸铜8kg(合1.5g/m3)杀藻类，4日～5日全池死鱼共计580kg。
死鱼先后依次为白鲢、鲤鱼、鲫鱼、草鱼，淡水白鲳死亡极少。
经检查除鳃部充血外，体表未见有其他异常病状。
例4：1999年9月1日，南昌县万湖水产场的两口面积共0.67hm2，水深3m的成鱼池，施硫酸铜11.5kg(合0.6g/m3)，治疗指环虫病，翌日造成死鱼达500kg。
我们在现场注意观察到濒临死亡的鱼，呼吸明显加快，有些鱼体尚伴有痉挛症状。
例5：1999年7月25日，南昌县富山乡三山村专业户官兵，在承包的一处水面6.67hm2，水深2m 的封闭式老河道使用硫酸铜100kg(合0.75g/m3)，当泼洒完硫酸铜后，即发现大批草鱼、鲤鱼、团头鲂、鲫鱼死亡，达1500kg，而未见鲢鳙鱼死亡。
翌日也再未发生死鱼现象。
以上几例所用硫酸铜，有效含量均为92～96%。
除一例外，其余均未超过常规用量。
2中毒原因2.1复合型中毒主要在高温、缺氧条件下引起。
例1、例2是典型例子。
国内有学者曾对白鲢作过试验，在水温16～30℃范围内，温度升高10℃，硫酸铜毒性增加1.7～1.8倍。
CuSO4对泥鳅胚胎发育的影响作者：邓万国来源：《农家科技下旬刊》2014年第09期摘要：本文研究了CuSO4对泥鳅胚胎发育的影响，结果表明：CuSO4对胚胎早期致畸作用不明显；对胚胎中后期（尾芽期）致畸作用明显，表现为尾芽变短，眼囊和头部发育不完全，身体弯曲，黑色素不明显；在相同的条件下，随着CuSO4浓度增大，泥鳅胚胎的成活率和孵化率降低，死亡率和畸形率上升；硫酸铜对泥鳅的24hLC50为1.362 mg/L，48hLC50 为1.132mg/L，安全浓度SC为0.2823mg/L。
关键词：泥鳅；CuSO4；胚胎发育泥鳅Misgurnus anguillicaudatus 属于鲤形目鳅科泥鳅属，味道鲜美，肉质细嫩，营养丰富。
如人们俗语所说：“天上的斑鸡，地上的泥鳅”，它是有名的美味佳品，素有“水中人参”之称。
目前CuSO4作为杀虫、灭藻、消毒药在水产养殖上广泛应用。
也有学者对泥鳅毒性试验有详细的报道，但CuSO4对泥鳅胚胎的影响没见详细研究报告。
为了进一步了解硫酸铜对泥鳅胚胎的毒性作用，我们做了硫酸铜对泥鳅胚胎发育的相关研究，提供有关基础数据。
一、材料与方法（一）材料试验用的泥鳅购自荣昌梅石坝养殖场，挑选体形端正，体质健壮，无病无伤，体色正常，性腺成熟，雄鳅在10～13cm体重达12g以上，雌鳅在15cm体重达18g 以上。
催产药物：绒毛膜促性腺激素（HCG），每尾注射600IU，雄性减半，CuSO4：其含量以CuSO4·5H2O计% ≥ 98.5%，9%的甲醛，曝气自来水，显微镜1台，培养皿18个，吸管1个，200mL量筒1个。
（二）方法于2014年5月人工催产、授精，获得受精卵。
受精卵在20±2℃室温条件下孵化，选择正常发育到原肠早期的胚胎进行试验。
1.试验分组：试验设5个药物浓度组和一个对照组，各浓度分别设3个重复，处理时间5 min；CuSO4浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/L，对照组为曝气自来水。
