病理组织切片裂隙补救方法的技术改良(一)
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病理石蜡切片中出现的问题及解决办法石蜡切片包括取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、染色、封固一系列环节。
一张好的切片应平展、无裂纹、无脆烂、厚薄均匀。
当然一张切片的好坏每一环节都很重要,如出现问题,都将影响切片的质量。
而最易出现,最难解决的问题是切片这一环节,下面是我多年工作中总结的经验,仅供参考。
1 切片弯曲不成直带1·1原因蜡块上下两边或左右两边不平行。
蜡块与刀片口不平行。
切片刀锋利程度不一致。
组织外形不整。
1·2解决办法将蜡快四边反复修平对称。
调节蜡块夹持器与切片刀平行。
移动切片刀,更换刀口位置。
在修整组织时,注意修切整齐。
2 切片上卷,不能形成蜡带2·1原因切片刀不锋利。
刀口斜度过大,或刀片过厚。
石蜡硬度过大。
蜡块四周留蜡边太少。
2·2解决办法暂停切片,重新磨刀,或更换刀片。
调整切片角度,12度一15度左右。
切片适宜厚度为4—6微米。
蜡块太硬,可更换熔点较低石蜡,重新包埋。
重新包埋,或将蜡块四周溶化,放入包埋框中补蜡。
3 切片皱褶甚多,不能张开成一平片3·1原因石蜡熔点太低或室温过高。
切片刀不够锋利。
切片刀上粘有残余石蜡,刀口不洁。
切片刀倾斜度太小。
组织渗蜡时间不够,或脱水透明不够。
3·2解决办法可将蜡块置于冰箱中冰冻后切片,并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或更换石蜡。
室温过高,可开动空调器降温。
将切片刀磨锐利再行切片。
调整切片到最适当的角度。
切片刀不洁,可用二甲苯将刀口拭干净,拭刀口最好用棉花。
组织浸蜡不够,可重复浸蜡过程。
4 切片上有裂缝,或出现裂纹4·1原因切片刀有小缺口,或刀口不平整。
蜡块中有沙尘、小气泡。
包埋中石蜡冻结太慢,或蜡块出现小白点。
4·2解决办法换刀或更换刀片。
过滤石蜡重包埋。
5 切片脆烂组织脱出与蜡分离5·1原因组织脱水透明不够。
浸蜡时间过长,蜡温过高。
透明时间不足,或组织中含有乙醇。
裂缝修补方案
目录:
1. 修复裂缝的重要性
1.1 保障建筑结构安全
1.2 防止水气渗透
2. 裂缝修补的方法
2.1 使用填缝剂
2.2 采用收缩补强技术
3. 定期检查维护
3.1 检查建筑结构
3.2 及时修复漏洞
裂缝修补是建筑维护中不可或缺的一环。
裂缝不仅会影响建筑外观美观,更会直接影响建筑结构的稳定和安全性。
因此,及时修补裂缝具有极其重要的意义。
在修补裂缝时,可以选择使用填缝剂进行修复。
填缝剂可根据裂缝不同位置和宽度选择不同种类,确保修复效果更加持久。
另外,也可以采用收缩补强技术,利用特殊材料填充裂缝,达到强化建筑结构的目的。
为了保证裂缝修补效果持久,建议定期检查建筑结构,及时发现裂缝并进行修复。
定期检查可以有效预防裂缝的产生,维护建筑结构的完整性。
总之,裂缝修补不仅仅是简单的外观修饰,更是对建筑结构安全的保障。
只有及时修复裂缝,保持建筑结构完好,才能确保建筑的长久使用和安全。
病理组织切片中常见问题及解决方法王华;周孝琼【摘要】组织切片方法是教学、科研、病理检验工作中广泛应用的一种实验技术.文章对整个实验过程中操作程序、可能出现的问题、相关的原因及具体的解决方法进行了归纳总结,对实验步骤和操作方法等细节进行了改进,使组织固定完全,脱水彻底,透明适度,浸蜡充分,切片较薄,染色良好,为广大同行提供了一种切实可行的技术方案,并得到满意的实验结果.【期刊名称】《实验科学与技术》【年(卷),期】2010(008)005【总页数】3页(P38-40)【关键词】动物组织;HE 染色;石蜡切片;常见问题;解决办法【作者】王华;周孝琼【作者单位】龙岩学院生命科学学院,福建,龙岩,364000;龙岩学院生命科学学院,福建,龙岩,364000【正文语种】中文【中图分类】S811.4病理组织切片技术是病理实验室最基本的方法,是病理学的一项极有使用价值的专业技能。
它包括组织固定、脱水、透明、包埋、切片、漂片、烤片、脱蜡、染色、脱水、透明和封固等程序。
HE染色是既基本又十分重要的工作,HE染色的好坏直接影响病理医生的正确诊断,而HE染色质量的好坏与HE制片的每一步骤关系都十分密切。
只要某一步骤出了问题都直接影响下一步工作,时常会出现个别片子色调不正、颜色对比不协调、染色不匀、模糊不清等现象,使切片的质量和诊断准确性受到影响。
要制作优良动物病理切片应该注意以下问题。
1)要取最新鲜的材料。
由于各器官组织坏死变化很快,所以取材要求迅速。
取材时要用锋利的刀片或剪刀,勿用镊子对组织加以压迫,以免组织破裂和变形。
2)所选取组织块的大小、厚薄应力求适度。
过大、过厚的组织,固定液不易渗透,亦可造成固定不佳,过小、过薄的组织又可能在固定或脱水的过程中发生扭曲变形等情况[1]。
3)应有代表性,能够反映出组织的基本结构,如肝要有肝小叶;肾要有皮质和髓质;肺要有支气管等。
另外,要采取病变部位和健康部位交叉处的组织,这样才可以通过健康部位的对照,清楚地看到各种病理变化。
病理标本修复技术及质量控制方法病理标本修复技术是病理学中的重要环节,它对于病理诊断和治疗具有重要的指导意义。
本文将介绍病理标本修复技术的基本原则和质量控制方法。
1. 病理标本修复技术的基本原则病理标本修复技术是指对组织标本进行修复、加工和嵌片的过程。
其基本原则如下:(1)标本固定:标本取出后,应立即放入适当的固定液中,以保持标本的原始结构和形态。
常用的固定液包括10%中性缓冲福尔马林溶液和4%多聚甲醛溶液。
(2)去水:去水是将固定的标本中的水分逐渐脱去的过程。
可用不同浓度的乙醇逐渐浸透,最后用绝对乙醇脱水。
(3)清洁:清洁是将标本表面的杂质、油脂和其他污物去除的过程。
可用80%乙醇浸泡一段时间,再用洗涤液加水进行清洗,最后用去离子水冲洗。
(4)渗透:渗透是将标本浸透到工作液中的过程,目的是使标本逐渐转化为透明,以便后续的包埋和切片。
常用的工作液有苯酚、苯酚-甘油、氯仿等。
(5)嵌制:嵌制是将渗透后的标本进行包埋的过程。
常用的包埋材料有石蜡和聚乙二醇。
2. 病理标本修复技术的质量控制方法为了确保病理标本修复的质量和准确性,以下是一些常用的质量控制方法:(1)标本采集:标本采集是病理修复的基础。
在标本采集过程中,应注意正确的采集位置和方式,采集足够的组织量,尽量避免标本变形和破坏。
(2)固定时间:标本的固定时间是影响修复质量的重要因素。
固定时间过短会导致组织结构不完整,固定时间过长则会导致组织结构破坏。
因此,应根据标本的性质和大小来确定合适的固定时间。
(3)标本编号:在修复过程中,应标注好每个标本的编号,以免混淆和丢失。
(4)修复设备:修复设备的选择和维护也是质量控制的重要环节。
修复设备应保持清洁和良好的工作状态,定期进行维护和保养。
(5)操作规范:修复过程中的操作规范也是确保质量的关键。
操作人员应熟悉修复流程,遵循操作规范,避免人为误操作。
综上所述,病理标本修复技术在病理学中具有重要作用,通过正确的修复技术和质量控制方法,能够保证标本的完整性和准确性,为临床诊断和治疗提供可靠的依据。
裂缝的修补措施国内外修补裂缝的方法很多,归纳起来主要有以下三大类:(一)开槽法修补裂缝该法适合于修补较宽裂缝大于0.5mm,材料的配合比为:采用环氧树脂:聚硫橡胶:水泥:砂=10:3:12.5:28.首先用人工将晒干筛后的砂、水泥按比例配好搅拌均匀后,将环氧树脂聚硫橡胶也按配比拌匀。
然后掺入已拌好的砂、水泥当中,再用人工继续搅拌。
最后用少量的丙酮将已拌好的砂浆稀释到适中稠度(约0.4斤丙酮就可以了)。
及时将已拌好的改性环氧树脂砂浆用橡胶桶装到已凿好洗净吹干后的混凝土凿槽内进行嵌入。
从砂浆开始拌和到嵌入混凝土缝内,一组砂浆的整个施工过程需要30分钟左右完成。
嵌入后的砂浆养护即砂浆嵌入缝槽内处理好后两小时以内及时用毛毡、麻袋将聚硫橡胶改性环氧树脂砂浆进行覆盖,待完全初凝后,开始用水养护。
(二)低压注浆法修补裂缝低压注浆法适用于裂缝宽度为0.2mm~0.3mm的混凝土裂缝修补。
修补工序如下:裂缝清理—试漏—配制注浆液—压力注浆—二次注浆—清理表面。
当裂缝数量较多时,先要在裂缝位置上贴医用白胶布,再用窄毛刷沾浆沿裂缝来回涂刷封缝,使裂缝封闭,大约10分钟后,揭去胶布条,露出小缝,粘贴注浆嘴用键包严。
固化后周边可能有裂口,必须反复用浆补上,以避免注浆漏浆。
注浆操作一般在粘嘴的第二天进行,若气温高的话,半天就可注浆。
操作时先用补缝器吸取注浆液,插入注浆嘴,用手推动补缝器活塞,使浆液通过注浆嘴压入裂缝,当相邻的嘴中流出浆液时,就可拔出补缝器,堵上铝铆钉。
一般由上往下注浆,水平缝一般从一端到另一端逐个注浆。
为了保证浆液充满,在注浆后约半小时可以对每个注浆嘴再次补浆。
(三)表面覆盖法修补裂缝这是一种在微细裂缝(一般宽度小于0.2mm)的表面上涂膜,以达到修补混凝土微细裂缝的目的。
分涂覆裂缝部分及全部涂覆两种方法,这种方法的缺点是修补工作无法深入到裂缝内部,对延伸裂缝难以追踪其变化。
表面覆盖法所用材料视修补目的及建筑物所处环境不同而异,通常采用弹性涂膜防水材料,聚合物水泥膏、聚合物薄膜(粘贴)等。
切片上出现裂纹的可能原因包括:
1.切片刀上有小缺口或刀口不平整,这会导致在切片过程中出现不均匀的受
力,从而产生裂纹。
2.组织中可能含有较硬之物,如固定液之结晶石灰质等,这会使得切片时受
到阻碍,增加切片的难度,也容易产生裂纹。
3.包埋时石蜡冻结太慢,这会导致切片时的温度和压力控制不当,进而产生
裂纹。
4.在切片时,由于静电作用,切片可能会粘在切片刀上不易取下,这也会导
致裂纹的产生。
为了解决这些问题,可以尝试以下方法:
1.对于切片刀的问题,可以尝试调换刀口部位或重新磨刀,特别是在刀锋垂
直在磨刀石上轻轻磨数次后,按常规磨刀进行操作。
2.对于组织中硬性物质过多的问题,不宜使用该组织进行切片。
3.对于包埋时的问题,可以待蜡块周围凝结一层后再放入冷水中,以避免因
温度变化导致的裂纹。
4.对于静电问题,可以使用加湿器增加空气中的水分,以减少静电作用。
常规病理技术工作中遇到的问题及相应的解决办法探讨目的研究常规病理技术工作中遇到的问题及相应的解决办法。
方法对常规病理技术工作中遇到的脱片、切片不完整或漏切、切片困难、切片起皱、染色不均、切片模糊不清的问题,分别进行分析、找原因,根据每个问题产生的原因不同,提出相应的解决办法。
结果提高了病理切片质量。
结论优良的病理切片是保证病理诊断正确的关键。
标签::常规病理技术问题解决办法病理技术中的常规石蜡切片是病理科的重要工作,只有优良的石蜡切片才能为正确病理诊断提供可靠的依据。
在常规石蜡切片的操作过程中常会遇见许多的问题,造成石蜡切片优良率降低,甚至出现劣等片。
把这些常见的问题归纳和对其产生的原因进行分析,并采取相应的解决方法,可以有效地提高常规石蜡切片的优良率,改进以后的病理工作。
1资料与方法1.1 材料材料取自浙江省台州市立医院病理科工作中的活体组织标本。
1.2 方法对送检标本按规范进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片。
要注意以下操作细节:①要充分固定组织。
只有对组织进行充分的固定,才能为下一步组织的处理打下良好的基础。
②调好切片刀与切片机,保持切片刀刀刃情况良好,才能切出完整地切片。
③在取材与制片过程中,避免组织碎屑、苏木素染液中的氧化膜污染切片。
④调节展片水温及烤片温度。
2结果组织切面完整、厚薄均匀、贴附端正、平坦无皱褶、无折叠、无刀痕、无颤痕、无裂隙、无污染、无松散、组织色彩鲜艳、细胞核与细胞质染色对比清晰。
树胶适当而无气泡、编号清楚。
3讨论3.1 组织切面不完整原因及解决方法①切片刀角度不适宜,切片刀和蜡块之间的夹角应在为8°-10°。
刀架及蜡块夹持器的螺旋要拧紧。
手摇手轮的转速要均匀,用力要均匀,保持切片机机身平稳。
应细心清除刀头刀架上蜡的碎屑及污物。
②刀片不锋利,缺口、卷刃等可造成切片不完整、厚薄不均、刀痕、裂隙、颤痕、皱褶。
可以用头发在刀锋上碰一下,如一碰即断说明刀锋锋利。
病理组织切片裂隙补救方法的技术改良(一)
【摘要】目的?:寻求病理组织切片易产生裂隙补救的新方法。
方法:对易产生裂隙的组织蜡块用氨水涂抹后重新切片。
结果:用此类方法处理组织,切片平整,结构完好,组织染色无明显差异。
结论:氨水对病理组织切片裂隙的补救有明显的效果。
【关键词】石蜡切片;裂隙;氨水;软化
在常规石蜡切片过程中,我们常常会把大小不等的标本进行混合固定脱水处理,由此难免会出现标本处理不均的现象:或大的组织处理不足,或小的组织处理过度,使得部分组织变脆、变硬。
组织切片常常表现为有边缘不齐的“龟壳状”(见图1)和“百叶窗样”裂隙。
究其原因往往与组织脆性增加有关,若将此蜡块再行低温冷冻后切片,此种裂隙则更为明显和严重。
为了补救这类问题蜡块,我们通过与兄弟单位的技术交流及自身的实践探索,发现适当使用氨水能有效软化组织,降低组织脆性,减少裂隙出现,且更有利于蜡块切出完好的蜡片。
现报告如下。
1材料、方法和结果
1.1材料选取我院2008年行常规石蜡制片中组织蜡片出现裂隙的蜡块358只,其中包括淋巴结、脾脏、肝脏、肾脏、子宫、乳腺等手术切取标本,同时含有内镜、穿刺活检标本。
试剂:纯氨水(上海三鹰化学试剂有限公司生产)500mL。
1.2方法①将此类容易产生裂隙的组织蜡块放入冷水中(水温0~5℃)约10min。
②将蜡块放上切片机小心粗修至暴露整个组织切面,然后细切蜡片10余张(此蜡片弃之不用),再将粗切把手逆时针转动1/4~1/2圈以退刀。
③用脱脂棉球蘸取足量的纯氨水,覆盖在细切后的组织面上约10s,再行细切,直至有组织蜡片顺利切出,取前面3~5张展于裱片机内。
④待蜡片充分展平后迅速裱于载玻片上。
⑤常规烤片,染色,封固。
1.3结果用此类方法处理组织,切片平整,结构完好,除“龟壳状”裂纹尚存外(但明显缩小)其余裂隙均消失,组织染色无明显差异(见图2)。
2讨论
常规制片中出现裂隙是我们常规技术工作中经常碰到的问题,此类问题切片不仅影响切片质量,有时还会导致病理诊断的困难,更有甚者连蜡片都很难切出。
马恒辉等1]提出导致切片裂隙有诸多原因,在实际操作中,组织处理因素是首要因素,由于甲醛、乙醇、二甲苯三者对组织均有不同程度的硬化作用,其过度处理必然导致组织弹性降低,表现为各种间质成分(特别是胶原、网状纤维)张力下降,脆性增加,发生断裂而呈“龟壳状”裂纹;或者尚未发生断裂,但组织过度冷冻后切片,切出的蜡片在室温中迅速膨胀,而呈“百叶窗样”裂隙。
当然诸如子宫、乳腺等组织纤维含量极为丰富,过硬的组织蜡块接触刀锋产生震动,也会出现波纹裂隙。