山东大学分子生物学相关资料

•基因表达调控是分子生物学研究的前沿和核心内容。

•基因表达可在不同水平上进行调控。

1.4 .4 DNA重组技术•1972年，美国科学家Berg首次将不同的DNA片段连接起来，并将其插入到细菌细胞中，使重组的DNA进行繁殖。

•大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽，•如激素、抗生素、抗体等，如治疗HIV的白细胞介素•定向改造某些生物基因结构.以提高它们的特殊经济价值或功能，快速分解石油的超级细菌用于基础理论研究。

顺式作用元件和转录因子•基因工程(genetic engineering)有目的地把一个生物体中有用的基因转入另一个生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达所需要的产物。

•重组DNA技术是基因工程的核心技术，包括了一系列的分子生物学操作步骤。

其重大突破带动了现代生物技术的兴起，并很快产生了许多高技术产业。

•基因组和基因•DNA的复制•转录与加工•蛋白质的生物合成•原核生物基因的表达调控•真核生物基因的表达调控主要内容1基因组和基因1.1原核细胞和真核细胞的特点DNA中90%为重复序列，这样的一组基因称为基因家族DNA中，大约只有2%是用来编码蛋白质，其余大多数在基因表达调控中起作用1个拷贝。

2-10个拷贝，如组蛋白基因。

10bp的短序列，为不编码序列。

RNA )RNA聚合酶活性的作用。

mRNA ,从而扩大表达信息量。

dAMP ;如：人a■及B■珠蛋白基因簇1.4.2细胞器基因组•在真核细胞器中，有两种细胞器能够携带遗传物质，即线粒体(mitochondria )和叶绿体(chloroplast \•细胞器基因组大多是以环状双链DNA分子的形式存在，线粒体DNA以mtDNA表示，叶绿体DNA以ctDNA表示。

•细胞器基因组本身是单一序列，但是在每个细胞器中一般有数拷贝的基因组。

1.5基因组学研究进展•人类基因组计划•1988年，美国国家卫生院和能源部迄今为止在生命科学领域最宏大的研究计划一人类基因组计划•主要内容是完成人体23对染色体的全部基因的遗传作图和物理作图，完成23对染色体上30亿个碱基的序列测定•以美国为主、包括英国、法国、日本和中国多国科学家参加的国际合作计划，我国占据了1%的份额•2001年2月12日美、英、日、法、德、中六国科学家，以及Celera公司联合公布人类基因组图谱，及初步分析结果1.5.1后基因组时代人类基因组计划的完成标志着一个以基因组功能研究为主要内容的“后基因组时代”已经到来。

一、单选题1.下面关于组蛋白说法正确的是（）。

A.组蛋白含有较多的带正电的氨基酸B.组蛋白分子量很大C.H2A,H2B,H3,H4为核心组蛋白，形成组蛋白四聚体D.组蛋白H1与连接DNA结合，也是核心组蛋白的一种2.以下关于转录和RNA聚合酶说法正确的是（）A.体内DNA双链中两条链均作为转录的模板B.RNA聚合酶以脱氧核糖核苷三磷酸（NTP）为底物，合成RNAC.RNA聚合酶的结构像一只“手”，握住DNA模板和RNA产物D.RNA聚合酶中有允许DNA、RNA和核糖核苷酸进出酶活性中心裂隙的“通道”3.以下关于真核生物翻译延伸说法错误的是（）。

A.在原核和真核生物中，翻译延伸过程高度保守B.翻译延伸因子EF-Tu护送氨酰tRNAs到P位点C.核糖体是核酶，大亚基中的23SrRNA主要负责催化肽键的形成D.翻译延伸因子EF-G帮助2个tRNA分子和mRNA分子的转位4.以下关于端粒和端粒酶说法正确的是（）。

A.端粒位于线性染色体的两端B.端粒不具有重复序列C.端粒酶仅含有蛋白成分D.端粒酶是蛋白，不含RNA成分5.以下关于真核生物RNA加工说法错误的是（）。

A.真核生物的RNA转录完成后再进行加工B.真核生物RNA加工中的5’加帽是指在RNA的5’末端加入修饰的鸟嘌呤C.RNA转录和加帽同时进行，一般在25个核苷酸合成以后立即发生加帽D.真核生物RNA加工中的“加polyA尾”是指在RNA的3’末端加入多聚腺苷酸6.以下关于tRNA说法错误的是（）。

A.tRNA分子中常含有稀有碱基B.tRNA的3’末端都有CCA，CCA上连接氨基酸C.tRNAs具有类似三叶草的二级结构D.tRNA的接纳茎上含有反密码子二、多选题1.以下关于RNA剪接说法正确的是（）A.RNA内部的特征序列决定了剪接发生的位置B.RNA剪接主要由一个称为“剪接体”的巨大复合物完成C.胞内的剪接反应可以反向进行，即从成熟的mRNA可以转变为前体mRNAD.成熟的mRNA中仅存在蛋白质编码序列2.以下关于DNA说法正确的是（）A.细胞内DNA一般为双链，形成双螺旋结构B.DNA上腺嘌呤A和胸腺嘧啶T配对，形成2个氢键C.DNA双螺旋具有大沟和小沟，蛋白质容易插入大沟D.核苷酸以磷酸二酯键相连形成多聚核苷酸链3.以下关于复制叉说法正确的是（）A.亲代双链DNA分离后，每条单链DNA均作为新链合成的模板B.前导链是与复制叉移动的方向一致且连续合成的新DNA链C.冈崎片段是在前导链的不连续合成期间生成的片段D.子代双螺旋分子的两条链都是新合成的三、简答题1.举出5种以上的在DNA复制叉上参与DNA复制的蛋白2.简述DNA分子和RNA分子的不同。

山东大学博士研究生入学考试分子生物学专业考题1999年名词解释（任选10个，共20分）逆转座子C值悖理半不连续DNA复制GT－AT规律魔斑RNA编辑反式作用因子顺式作用元件基因沉默副密码子拼接体调控密码基因放大简要回答以下问题（任选10题，共60分）组蛋白和非组蛋白的主要特点是什么？SOS修复为什么会导致倾向差错性突变？真核生物mRNA的帽子有几类？其名称和特点是什么?增强子有哪些特征？放线菌酮和氯霉素对蛋白质合成的抑制作用有何不同？各有何用途？真核生物结构基因5‘启动区上游远端顺式作用元件可以采用何种方式参与该基因的表达调控？杂交阻断翻译何杂交释放翻译的原理是什么?RFLP 和RAPD 的原理是什么？DDRT－PCR和phage display 的原理是什么？Tyl/copia因子在真核生物基因组中可能的作用是什么？什么叫核酶？从核酶入手，谈谈对生命进化过程中RNA世界假说的认识？大肠杆菌DNA复制所需RNA引物的合成及组织的起始过程如何？论述题选做其一（20分）试从淋巴细胞分化中DNA重排说明产生免疫球蛋白分子多样性的机理?从真核生物断裂基因mRNA的加工过程说明真核生物基因表达的复杂性？2000年名词解释（20分，12题中任选10题）D－loop 端粒酶GT－AG规律严谨反应RNA饱和杂交试验同型异位突变α－互补作用组织相容性复合体（MHC）Southern－Western blot 朊病毒Cot1/2 YAC载体二．简要回答以下问题（48分，10题中选做8题）1．信号肽与前导肽有何区别？2．何为顺式作用元件？试举例说明3．何为蛋白质剪辑？试举例说明4．原癌基因可通过哪些机制的活化而导致癌变？5．DNA复制与蛋白质合成各用什么机制维持其合成的忠实性？6．什么是基因打靶？其原理是什么？7．Lac＋大肠杆菌转入含Lac的培养基中，Lac操纵子如何开启？加入葡萄糖之后，情况又如何？8．何为生物孵化器？动物乳腺作为孵化器有何优点？9．欲研究一个反式蛋白因子（Trans－activator）与某基因5‘端启动子区接合部位的序列。

大学分子生物学考试复习资料分子生物学复习思考题1．写出分子生物学广义的与狭义的定义，现代分子生物学研究的主要内容，以及5个分子生物学发展的主要大事纪（年代、发明者、简要内容）。

广义上:分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究、以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。

狭义概念:既将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。

其中也涉及到与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。

现代分子生物学研究的主要内容有：基因与基因组的结构与功能，DNA的复制、转录和翻译，基因表达调控的研究，DNA重组技术，结构分子生物学等。

5个分子生物学发展的主要大事纪（年代、发明者、简要内容）:1.1944年,著名微生物学家Avery 等人在对肺炎双球菌的转化实验中证实了DNA是生物的遗传物质。

这一重大发现打破了长期以来，许多生物学家认为的只有象蛋白质那样的大分子才能作为细胞遗传物质的观点，在遗传学上树立了DNA是遗传信息载体的理论。

2. 2.1953年，是开创生命科学新时代具有里程碑意义的一年，Watson和Crick发表了“脱氧核糖核酸的结构”的著名论文，他们在Franklin和Wilkins X-射线衍射研究结果的基础上，推导出DNA双螺旋结构模型，为人类充分揭示遗传信息的传递规律奠定了坚实的理论基础。

同年，Sanger历经8年，完成了第一个蛋白质——胰岛素的氨基酸全序列分析。

3. 1954年Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律, Crick 在前人研究工作基础上，提出了中心法则理论，对正在兴起的分子生物学研究起了重要的推动作用。

4. 1956年Volkin和Astrachan发现了mRNA(当时尚未用此名)。

5. 1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)；Sinsheimer首先提出人类基因组图谱制作计划设想；Smith等报导了DNA测序中应用荧光标记取代同位素标记的方法；Miller等发现DNA结合蛋白的锌指结构。

重组质粒的酶切以及PCR法鉴定1、判断各组的插入片段大小：各泳道的情况：1泳道为pUC19/HindⅢMarker，2、15、23泳道为λ-HindⅢMarker，16为DL5000 Marker。

结合上次实验对各组插入片段大小的初步判断、本次对重组质粒酶切电泳以及PCR的结果，对各组重组质粒插入片段大小的最终判断如下：（1）第1组、4组、5组第二轮、6组以及本组（3组）第二轮：插入片段大小为125bp。

在酶切电泳图上可以看到这几个组酶切产物有两条较明显的的条带，上面一条位置基本与第1泳道pUC19/HindⅢMarker条带相当，可以判断其为质粒载体，下面一条条带比较暗，与DL5000 Marker泳道相比，其位于100bp、250bp之间，可以判断其大小为125bp；另外，在PCR产物电泳图中可以看到这几个组重组质粒PCR产物最明亮的条带比DL5000中250bp 的条带稍微靠上一点，即其大小稍大于250bp，由于空载体上下引物之间距离约为150bp，因此判断为单拷贝插入125bp片段。

（2）第2组：插入片段大小为2322bp。

酶切电泳图中可以看到酶切产物有两条条带，上面一条位置与第一泳道酶切空载体位置相当，下面条带与λ-Hind Marker泳道的2322bp条带位置相当；并且上下两条带的亮度基本一致，再结合上次实验结果的判断，可以断定此组为单拷贝插入2322bp片段。

（3）第3、7、10、11组：插入片段大小为2027bp。

酶切电泳图中可以看到酶切产物有两条条带，上面一条位置与第一泳道酶切空载体位置相当，下面一条与λ-Hind Marker泳道的2027bp条带位置相当；同样的上下两条带的亮度基本一致，再结合上次实验结果的判断，可以断定此组为单拷贝插入2027bp片段。

（4）第8组：插入片段大小为6557bp。

酶切电泳图中可以看到酶切产物有两条条带，下面一条位置与第一泳道酶切空载体位置相当，可以判断其为质粒载体，上面一条与λ-Hind Marker泳道的6557bp条带位置相当；同样的上下两条带的亮度基本一致，再结合上次实验结果的判断，可以断定此组为单拷贝插入6557bp片段。

分子生物学(全套课件396P)pdf目录•分子生物学概述•DNA的结构与功能•RNA的结构与功能•蛋白质的结构与功能•基因表达的调控•分子生物学技术与应用PART01分子生物学概述分子生物学的定义与发展分子生物学的定义分子生物学是研究生物大分子，特别是蛋白质和核酸的结构、功能、相互作用及其在生命过程中的作用机制和调控规律的科学。

分子生物学的发展自20世纪50年代以来，随着DNA双螺旋结构的发现、遗传密码的破译、基因工程技术的建立等一系列重大科学事件的发生，分子生物学迅速崛起并渗透到生命科学的各个领域，推动了整个生物科学的飞速发展。

分子生物学的研究对象与任务分子生物学的研究对象主要包括蛋白质、核酸、糖类等生物大分子，以及由这些大分子所组成的各种亚细胞结构和细胞器。

分子生物学的研究任务揭示生物大分子的结构、功能及其相互作用机制；阐明生物大分子在生命过程中的作用机制和调控规律；探索生物大分子的进化与起源等问题。

分子生物学是在遗传学的基础上发展起来的，遗传学为分子生物学提供了研究对象和研究方法。

同时，分子生物学的发展也推动了遗传学的深入研究，使得遗传学从传统的表型遗传学向分子遗传学转变。

生物化学是研究生物体内化学过程的科学，而分子生物学则是研究生物大分子的结构和功能的科学。

两者在研究对象和研究方法上有一定的重叠和交叉，但侧重点不同。

生物化学更注重生物体内化学过程的动态变化，而分子生物学则更注重生物大分子的静态结构和功能。

细胞生物学是研究细胞结构和功能的科学，而分子生物学则是研究细胞内生物大分子的结构和功能的科学。

两者在研究对象和研究方法上相互补充，共同揭示细胞的生命活动规律。

细胞生物学为分子生物学提供了研究对象和研究背景，而分子生物学则为细胞生物学提供了更深入的研究手段和视角。

与遗传学的关系与生物化学的关系与细胞生物学的关系分子生物学与其他学科的关系PART02DNA的结构与功能1 2 3脱氧核糖核苷酸，由磷酸、脱氧核糖和含氮碱基组成。

分子生物学（全套课件557P）简介分子生物学是研究生物分子结构、功能和相互作用的学科。

它涉及到核酸、蛋白质和其他生物分子的研究，以及它们在细胞和生物体中的功能。

本文档是一套全面的分子生物学课件，共有557页。

本课件旨在帮助读者系统地了解分子生物学的各个方面，包括基本的分子生物学原理、实验技术、研究方法以及应用等。

目录1.第一章：分子生物学概述2.第二章：DNA结构与功能3.第三章：RNA结构与功能4.第四章：蛋白质结构与功能5.第五章：基因表达调控6.第六章：基因突变与遗传变异7.第七章：分子生物学实验技术8.第八章：分子生物学研究方法9.第九章：分子生物学的应用领域第一章：分子生物学概述1.1 什么是分子生物学分子生物学是研究生物体内分子的结构、功能以及相互作用的学科。

它涉及到DNA、RNA、蛋白质等生物分子的研究，以及它们在细胞和生物体中的功能。

1.2 分子生物学的历史与发展分子生物学起源于20世纪50年代，当时发现DNA是物质遗传信息的携带者后，科学家们开始研究DNA的结构和功能，从而奠定了现代分子生物学的基础。

1.3 分子生物学的重要性分子生物学的研究对于了解生命的本质和机理至关重要。

它不仅有助于解释遗传现象，还可以揭示细胞的结构、功能和调控机制，甚至为疾病的诊断和治疗提供理论基础。

2.1 DNA的组成与结构DNA是由基因序列组成的生物分子，它由核苷酸组成。

本节将介绍DNA的基本结构、双螺旋结构和碱基对的配对方式。

2.2 DNA复制与遗传信息传递DNA复制是细胞分裂过程中最重要的事件之一，它确保了遗传信息的传递和稳定性。

本节将介绍DNA复制的过程和机制。

2.3 DNA修复与突变DNA在生物体内容易受到各种外界因素的损伤，因此细胞拥有多种修复机制来修复DNA损伤。

本节将介绍DNA修复的方式和维护基因组稳定性的重要性。

3.1 RNA的种类与功能RNA是DNA转录的产物，它在细胞内发挥着多种功能，包括mRNA的编码信息传递、tRNA的氨基酸运载和rRNA的构建核糖体等。

可编辑修改精选全文完整版分子生物学复习资料名词解释：复制叉：复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，这个复制起点呈现叉子的形式，被称为复制叉。

复制子：单独复制的一个DNA单元被称为一个复制子，是一个可移动的单位。

一个复制子在任何一个细胞周期只复制一次。

Klenow片段：用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶而从全酶中除去5’-3’外切酶活性的肽段后的大片段肽段。

外切酶：是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。

内切酶：是一种能催化多核苷酸的链断裂的酶，只对脱氧核糖核酸内一定碱基序列中某一定位置发生作用，把这位置的链切开。

前导链：在DNA复制过程中，与复制叉运动方向相同，以5＇-3＇方向连续合成的链。

冈崎片段：在DNA复制过程中，前导链连续合成，而滞后链只能是断续的合成5’-3’的多个短片段，这些不连续的片段称为冈崎片段。

端粒：是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构，它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体。

端粒酶：是负责染色体末端(端粒)复制,是由 RNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白.其中的 RNA 成分是端粒复制的模板.(因此端粒是逆转录酶) 作用:维持端粒长度.DNA复制参与的酶和蛋白：拓扑异构酶，解链酶，单链结合蛋白（SSB蛋白）,引发酶，DNA聚合酶，DNA连接酶。

线性DNA末端复制方式：1）环化；2）末端形成发卡结构；3）某些蛋白质的启动。

DNA修复的方式：错配修复，切除修复，重组修复，DNA直接修复，SOS反应。

AP位点：所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上的N-β糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。

AP修复：DNA分子中一旦产生了AP位点，AP核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开，并移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA，由DNA聚合酶Ⅰ合成新的片段，最终由DNA连接酶把两者连成新的被修复的DNA链。

第四章 RNA的生物合成（转录）一、选择题1．关于DNA复制和转录的叙述，错误的是A．在体内只有一条DNA链转录B．两个过程新链合成方向都是5′→3′C．复制的产物通常大于转录的产物D．两过程均需RNA为引物E．聚合酶都需要Mg２＋2．Pribnow box 序列是指A．AATAAAB．AAUAAAC．TAAGGCD．TTGACAE．TATAAT3．原核生物的DNA指导的RNA聚合酶核心酶的组成是A．α２ββ′B．α２ββ′σC．ααβ′D．ααβE．αββ′4．能特异性抑制原核生物RNA聚合酶β亚基的是A．利福平B．鹅膏蕈碱C．假尿嘧啶D．亚硝酸盐E．氯霉素5．真核生物中, RNA聚合酶Ⅱ催化生成的直接转录产物是A．mRNAB．18SrRNAC．28S rRNAD．tRNA%@`���8@s=MsoPlainText style="TEXT-INDENT: 5.25pt; LINE-HEIGHT: 18pt">E．hnRNA6．真核生物的转录特点是A．在细胞质内进行B．需要σ因子辨认起始点C．需RNA聚合酶和多种蛋白质因子D．作模板的mRNA寿命最长，最稳定E．真核生物主要有5种RNA聚合酶7．Rho因子的功能是A．结合DNA模板链B．增加RNA合成速率C．参与转录的终止过程D．释放结合的RNA聚合酶E．允许特定转录的起始8．tRNA的转录后稀有碱基的生成不包括A．脱羧反应B．还原反应C．转位反应D．脱氨反应E．甲基化反应9．不属于转录后修饰的是A．腺苷酸聚合B．外显子切除C．5′端加帽子结构D．内含子切除E．甲基化10．snRNA的功能是A．参与DNA复制B．参与RNA的剪接C．激活RNA聚合酶D．形成核糖体E．是rRNA的前体11．转录启始前复合物的形成是指A．RNA聚合酶与TATAAT结合B．RNA聚合酶与TATA序列结合C．多种转录因子与RNA聚合酶、DNA模板结合D．α因子与RNA聚合酶结合E．阻遏物变构后脱离操纵基因的复合物12. 关于tRNA合成的叙述,正确的是A．RNA聚合酶I参与tRNA前体的生成B．tRNA前体需切除5'和3'末端多余的核苷酸C．tRNA前体中不含内含子D．tRNA3'-末端需加上ACC-OHE．tRNA前体不需化学修饰加工13. 真核生物mRNA剪接作用的叙述,错误的是A．将hnRNA中的内含子剪切掉,最终成为成熟mRNAB．内含子序列起始为GU,终止于AG C．mRNA前体的剪接过程需要进行三次转酯反应D．UsnRNP是构成剪接体的组分E．U2snRNP识别并与内含子的分支点结合14. 大肠杆菌RNA链合成的方向是A．3'→5'B．C→NC．N→CD．5'→3'E．3'→5'或5'→3'15. 哺乳动物经转录作用生成的mRNA是A．内含子B．单顺反子C．多顺反子D．间隔区序列E．插入序列16. 真核生物RNA合成受鹅膏蕈碱影响最大的是A．45S-rRNAB．hnRNAC．S-rRNAD．tRNAE．snRNA17.核酶是指A．DNA酶B．RNA酶C．催化作用在细胞核内的酶D．逆转录酶E．具催化作用的RNA18. 在生物界尚无充足证据过程的是A．DNA→RNAB．RNA→DNAC．DNA→DNAD．RNA→ RNAE．蛋白质→RNA19. DNA分子上可被RNA聚合酶特异识别的部位是A．弱化子B．操纵子C．启动子D．终止子E．沉默子二、名词解释1. 不对称转录(asymmetric transcription)2. 断裂基因(splite gene)3. 外显子和内含子(exon and intron)4. 剪接体(splicesome)三、问答题1．简述原核生物与真核生物中的启动子结构特点及功能。