山东大学分子生物学相关资料

•基因表达调控是分子生物学研究的前沿和核心内容。

•基因表达可在不同水平上进行调控。

1.4 .4 DNA重组技术•1972年，美国科学家Berg首次将不同的DNA片段连接起来，并将其插入到细菌细胞中，使重组的DNA进行繁殖。

•大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽，•如激素、抗生素、抗体等，如治疗HIV的白细胞介素•定向改造某些生物基因结构.以提高它们的特殊经济价值或功能，快速分解石油的超级细菌用于基础理论研究。

顺式作用元件和转录因子•基因工程(genetic engineering)有目的地把一个生物体中有用的基因转入另一个生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达所需要的产物。

•重组DNA技术是基因工程的核心技术，包括了一系列的分子生物学操作步骤。

其重大突破带动了现代生物技术的兴起，并很快产生了许多高技术产业。

•基因组和基因•DNA的复制•转录与加工•蛋白质的生物合成•原核生物基因的表达调控•真核生物基因的表达调控主要内容1基因组和基因1.1原核细胞和真核细胞的特点DNA中90%为重复序列，这样的一组基因称为基因家族DNA中，大约只有2%是用来编码蛋白质，其余大多数在基因表达调控中起作用1个拷贝。

2-10个拷贝，如组蛋白基因。

10bp的短序列，为不编码序列。

RNA )RNA聚合酶活性的作用。

mRNA ,从而扩大表达信息量。

dAMP ;如：人a■及B■珠蛋白基因簇1.4.2细胞器基因组•在真核细胞器中，有两种细胞器能够携带遗传物质，即线粒体(mitochondria )和叶绿体(chloroplast \•细胞器基因组大多是以环状双链DNA分子的形式存在，线粒体DNA以mtDNA表示，叶绿体DNA以ctDNA表示。

•细胞器基因组本身是单一序列，但是在每个细胞器中一般有数拷贝的基因组。

1.5基因组学研究进展•人类基因组计划•1988年，美国国家卫生院和能源部迄今为止在生命科学领域最宏大的研究计划一人类基因组计划•主要内容是完成人体23对染色体的全部基因的遗传作图和物理作图，完成23对染色体上30亿个碱基的序列测定•以美国为主、包括英国、法国、日本和中国多国科学家参加的国际合作计划，我国占据了1%的份额•2001年2月12日美、英、日、法、德、中六国科学家，以及Celera公司联合公布人类基因组图谱，及初步分析结果1.5.1后基因组时代人类基因组计划的完成标志着一个以基因组功能研究为主要内容的“后基因组时代”已经到来。

一、单选题1.下面关于组蛋白说法正确的是（）。

A.组蛋白含有较多的带正电的氨基酸B.组蛋白分子量很大C.H2A,H2B,H3,H4为核心组蛋白，形成组蛋白四聚体D.组蛋白H1与连接DNA结合，也是核心组蛋白的一种2.以下关于转录和RNA聚合酶说法正确的是（）A.体内DNA双链中两条链均作为转录的模板B.RNA聚合酶以脱氧核糖核苷三磷酸（NTP）为底物，合成RNAC.RNA聚合酶的结构像一只“手”，握住DNA模板和RNA产物D.RNA聚合酶中有允许DNA、RNA和核糖核苷酸进出酶活性中心裂隙的“通道”3.以下关于真核生物翻译延伸说法错误的是（）。

A.在原核和真核生物中，翻译延伸过程高度保守B.翻译延伸因子EF-Tu护送氨酰tRNAs到P位点C.核糖体是核酶，大亚基中的23SrRNA主要负责催化肽键的形成D.翻译延伸因子EF-G帮助2个tRNA分子和mRNA分子的转位4.以下关于端粒和端粒酶说法正确的是（）。

A.端粒位于线性染色体的两端B.端粒不具有重复序列C.端粒酶仅含有蛋白成分D.端粒酶是蛋白，不含RNA成分5.以下关于真核生物RNA加工说法错误的是（）。

A.真核生物的RNA转录完成后再进行加工B.真核生物RNA加工中的5’加帽是指在RNA的5’末端加入修饰的鸟嘌呤C.RNA转录和加帽同时进行，一般在25个核苷酸合成以后立即发生加帽D.真核生物RNA加工中的“加polyA尾”是指在RNA的3’末端加入多聚腺苷酸6.以下关于tRNA说法错误的是（）。

A.tRNA分子中常含有稀有碱基B.tRNA的3’末端都有CCA，CCA上连接氨基酸C.tRNAs具有类似三叶草的二级结构D.tRNA的接纳茎上含有反密码子二、多选题1.以下关于RNA剪接说法正确的是（）A.RNA内部的特征序列决定了剪接发生的位置B.RNA剪接主要由一个称为“剪接体”的巨大复合物完成C.胞内的剪接反应可以反向进行，即从成熟的mRNA可以转变为前体mRNAD.成熟的mRNA中仅存在蛋白质编码序列2.以下关于DNA说法正确的是（）A.细胞内DNA一般为双链，形成双螺旋结构B.DNA上腺嘌呤A和胸腺嘧啶T配对，形成2个氢键C.DNA双螺旋具有大沟和小沟，蛋白质容易插入大沟D.核苷酸以磷酸二酯键相连形成多聚核苷酸链3.以下关于复制叉说法正确的是（）A.亲代双链DNA分离后，每条单链DNA均作为新链合成的模板B.前导链是与复制叉移动的方向一致且连续合成的新DNA链C.冈崎片段是在前导链的不连续合成期间生成的片段D.子代双螺旋分子的两条链都是新合成的三、简答题1.举出5种以上的在DNA复制叉上参与DNA复制的蛋白2.简述DNA分子和RNA分子的不同。

山东大学博士研究生入学考试分子生物学专业考题1999年名词解释（任选10个，共20分）逆转座子C值悖理半不连续DNA复制GT－AT规律魔斑RNA编辑反式作用因子顺式作用元件基因沉默副密码子拼接体调控密码基因放大简要回答以下问题（任选10题，共60分）组蛋白和非组蛋白的主要特点是什么？SOS修复为什么会导致倾向差错性突变？真核生物mRNA的帽子有几类？其名称和特点是什么?增强子有哪些特征？放线菌酮和氯霉素对蛋白质合成的抑制作用有何不同？各有何用途？真核生物结构基因5‘启动区上游远端顺式作用元件可以采用何种方式参与该基因的表达调控？杂交阻断翻译何杂交释放翻译的原理是什么?RFLP 和RAPD 的原理是什么？DDRT－PCR和phage display 的原理是什么？Tyl/copia因子在真核生物基因组中可能的作用是什么？什么叫核酶？从核酶入手，谈谈对生命进化过程中RNA世界假说的认识？大肠杆菌DNA复制所需RNA引物的合成及组织的起始过程如何？论述题选做其一（20分）试从淋巴细胞分化中DNA重排说明产生免疫球蛋白分子多样性的机理?从真核生物断裂基因mRNA的加工过程说明真核生物基因表达的复杂性？2000年名词解释（20分，12题中任选10题）D－loop 端粒酶GT－AG规律严谨反应RNA饱和杂交试验同型异位突变α－互补作用组织相容性复合体（MHC）Southern－Western blot 朊病毒Cot1/2 YAC载体二．简要回答以下问题（48分，10题中选做8题）1．信号肽与前导肽有何区别？2．何为顺式作用元件？试举例说明3．何为蛋白质剪辑？试举例说明4．原癌基因可通过哪些机制的活化而导致癌变？5．DNA复制与蛋白质合成各用什么机制维持其合成的忠实性？6．什么是基因打靶？其原理是什么？7．Lac＋大肠杆菌转入含Lac的培养基中，Lac操纵子如何开启？加入葡萄糖之后，情况又如何？8．何为生物孵化器？动物乳腺作为孵化器有何优点？9．欲研究一个反式蛋白因子（Trans－activator）与某基因5‘端启动子区接合部位的序列。

2024/2/29
运输功能
如载体蛋白，血红蛋白等 ，在生物体内运输各种物 质。
免疫功能
如抗体蛋白，参与生物体 的免疫应答。
18
蛋白质的功能与调控
调节功能
如激素，生长因子等，调节生物 体的生长发育和代谢过程。
2024/2/29
储存功能
如植物种子中的贮藏蛋白，动物体 内的肌红蛋白等，储存能量和营养 物质。
个性化医疗
根据患者的基因信息，制定个 性化的治疗方案。
药物基因组学
预测患者对药物的反应和副作 用，指导合理用药。
30
基因治疗的原理与应用
基因治疗的原理
通过导入正常基因或修复缺陷基因， 从而治疗由基因突变引起的疾病。
遗传性疾病的治疗
如视网膜色素变性、腺苷脱氨酶缺乏 症等。
2024/2/29
癌症治疗
利用基因编辑技术，修复或敲除癌症 相关基因，抑制肿瘤生长。
基因表达调控的层次
基因表达调控可分为转录前调控、转录水平调控、转录后调控和翻 译水平调控等多个层次。
基因表达调控的意义
基因表达调控对于生物体的生长发育、代谢、免疫应答等生理过程具 有重要意义，同时也是疾病发生发展的重要因素。
2024/2/29
22
原核生物的基因表达调控
1 2 3
原核生物基因表达调控的特点
26
DNA损伤的修复机制
直接修复
针对某些简单的DNA损伤，如碱 基错配，可通过特定的酶直接进行 修复。
碱基切除修复
通过识别并切除受损碱基，再合成 新的DNA片段进行修复。
2024/2/29
核苷酸切除修复
针对较严重的DNA损伤，如嘧啶 二聚体，通过切除一段包含受损部

大学分子生物学考试复习资料分子生物学复习思考题1．写出分子生物学广义的与狭义的定义，现代分子生物学研究的主要内容，以及5个分子生物学发展的主要大事纪（年代、发明者、简要内容）。

广义上:分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究、以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。

狭义概念:既将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。

其中也涉及到与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。

现代分子生物学研究的主要内容有：基因与基因组的结构与功能，DNA的复制、转录和翻译，基因表达调控的研究，DNA重组技术，结构分子生物学等。

5个分子生物学发展的主要大事纪（年代、发明者、简要内容）:1.1944年,著名微生物学家Avery 等人在对肺炎双球菌的转化实验中证实了DNA是生物的遗传物质。

这一重大发现打破了长期以来，许多生物学家认为的只有象蛋白质那样的大分子才能作为细胞遗传物质的观点，在遗传学上树立了DNA是遗传信息载体的理论。

2. 2.1953年，是开创生命科学新时代具有里程碑意义的一年，Watson和Crick发表了“脱氧核糖核酸的结构”的著名论文，他们在Franklin和Wilkins X-射线衍射研究结果的基础上，推导出DNA双螺旋结构模型，为人类充分揭示遗传信息的传递规律奠定了坚实的理论基础。

同年，Sanger历经8年，完成了第一个蛋白质——胰岛素的氨基酸全序列分析。

3. 1954年Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律, Crick 在前人研究工作基础上，提出了中心法则理论，对正在兴起的分子生物学研究起了重要的推动作用。

4. 1956年Volkin和Astrachan发现了mRNA(当时尚未用此名)。

5. 1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)；Sinsheimer首先提出人类基因组图谱制作计划设想；Smith等报导了DNA测序中应用荧光标记取代同位素标记的方法；Miller等发现DNA结合蛋白的锌指结构。

重组质粒的酶切以及PCR法鉴定1、判断各组的插入片段大小：各泳道的情况：1泳道为pUC19/HindⅢMarker，2、15、23泳道为λ-HindⅢMarker，16为DL5000 Marker。

结合上次实验对各组插入片段大小的初步判断、本次对重组质粒酶切电泳以及PCR的结果，对各组重组质粒插入片段大小的最终判断如下：（1）第1组、4组、5组第二轮、6组以及本组（3组）第二轮：插入片段大小为125bp。

在酶切电泳图上可以看到这几个组酶切产物有两条较明显的的条带，上面一条位置基本与第1泳道pUC19/HindⅢMarker条带相当，可以判断其为质粒载体，下面一条条带比较暗，与DL5000 Marker泳道相比，其位于100bp、250bp之间，可以判断其大小为125bp；另外，在PCR产物电泳图中可以看到这几个组重组质粒PCR产物最明亮的条带比DL5000中250bp 的条带稍微靠上一点，即其大小稍大于250bp，由于空载体上下引物之间距离约为150bp，因此判断为单拷贝插入125bp片段。

（2）第2组：插入片段大小为2322bp。

酶切电泳图中可以看到酶切产物有两条条带，上面一条位置与第一泳道酶切空载体位置相当，下面条带与λ-Hind Marker泳道的2322bp条带位置相当；并且上下两条带的亮度基本一致，再结合上次实验结果的判断，可以断定此组为单拷贝插入2322bp片段。

（3）第3、7、10、11组：插入片段大小为2027bp。

酶切电泳图中可以看到酶切产物有两条条带，上面一条位置与第一泳道酶切空载体位置相当，下面一条与λ-Hind Marker泳道的2027bp条带位置相当；同样的上下两条带的亮度基本一致，再结合上次实验结果的判断，可以断定此组为单拷贝插入2027bp片段。

（4）第8组：插入片段大小为6557bp。

酶切电泳图中可以看到酶切产物有两条条带，下面一条位置与第一泳道酶切空载体位置相当，可以判断其为质粒载体，上面一条与λ-Hind Marker泳道的6557bp条带位置相当；同样的上下两条带的亮度基本一致，再结合上次实验结果的判断，可以断定此组为单拷贝插入6557bp片段。

分子生物学(全套课件396P)pdf目录•分子生物学概述•DNA的结构与功能•RNA的结构与功能•蛋白质的结构与功能•基因表达的调控•分子生物学技术与应用PART01分子生物学概述分子生物学的定义与发展分子生物学的定义分子生物学是研究生物大分子，特别是蛋白质和核酸的结构、功能、相互作用及其在生命过程中的作用机制和调控规律的科学。

分子生物学的发展自20世纪50年代以来，随着DNA双螺旋结构的发现、遗传密码的破译、基因工程技术的建立等一系列重大科学事件的发生，分子生物学迅速崛起并渗透到生命科学的各个领域，推动了整个生物科学的飞速发展。

分子生物学的研究对象与任务分子生物学的研究对象主要包括蛋白质、核酸、糖类等生物大分子，以及由这些大分子所组成的各种亚细胞结构和细胞器。

分子生物学的研究任务揭示生物大分子的结构、功能及其相互作用机制；阐明生物大分子在生命过程中的作用机制和调控规律；探索生物大分子的进化与起源等问题。

分子生物学是在遗传学的基础上发展起来的，遗传学为分子生物学提供了研究对象和研究方法。

同时，分子生物学的发展也推动了遗传学的深入研究，使得遗传学从传统的表型遗传学向分子遗传学转变。

生物化学是研究生物体内化学过程的科学，而分子生物学则是研究生物大分子的结构和功能的科学。

两者在研究对象和研究方法上有一定的重叠和交叉，但侧重点不同。

生物化学更注重生物体内化学过程的动态变化，而分子生物学则更注重生物大分子的静态结构和功能。

细胞生物学是研究细胞结构和功能的科学，而分子生物学则是研究细胞内生物大分子的结构和功能的科学。

两者在研究对象和研究方法上相互补充，共同揭示细胞的生命活动规律。

细胞生物学为分子生物学提供了研究对象和研究背景，而分子生物学则为细胞生物学提供了更深入的研究手段和视角。

与遗传学的关系与生物化学的关系与细胞生物学的关系分子生物学与其他学科的关系PART02DNA的结构与功能1 2 3脱氧核糖核苷酸，由磷酸、脱氧核糖和含氮碱基组成。

分子生物学（全套课件557P）简介分子生物学是研究生物分子结构、功能和相互作用的学科。

它涉及到核酸、蛋白质和其他生物分子的研究，以及它们在细胞和生物体中的功能。

本文档是一套全面的分子生物学课件，共有557页。

本课件旨在帮助读者系统地了解分子生物学的各个方面，包括基本的分子生物学原理、实验技术、研究方法以及应用等。

目录1.第一章：分子生物学概述2.第二章：DNA结构与功能3.第三章：RNA结构与功能4.第四章：蛋白质结构与功能5.第五章：基因表达调控6.第六章：基因突变与遗传变异7.第七章：分子生物学实验技术8.第八章：分子生物学研究方法9.第九章：分子生物学的应用领域第一章：分子生物学概述1.1 什么是分子生物学分子生物学是研究生物体内分子的结构、功能以及相互作用的学科。

它涉及到DNA、RNA、蛋白质等生物分子的研究，以及它们在细胞和生物体中的功能。

1.2 分子生物学的历史与发展分子生物学起源于20世纪50年代，当时发现DNA是物质遗传信息的携带者后，科学家们开始研究DNA的结构和功能，从而奠定了现代分子生物学的基础。

1.3 分子生物学的重要性分子生物学的研究对于了解生命的本质和机理至关重要。

它不仅有助于解释遗传现象，还可以揭示细胞的结构、功能和调控机制，甚至为疾病的诊断和治疗提供理论基础。

2.1 DNA的组成与结构DNA是由基因序列组成的生物分子，它由核苷酸组成。

本节将介绍DNA的基本结构、双螺旋结构和碱基对的配对方式。

2.2 DNA复制与遗传信息传递DNA复制是细胞分裂过程中最重要的事件之一，它确保了遗传信息的传递和稳定性。

本节将介绍DNA复制的过程和机制。

2.3 DNA修复与突变DNA在生物体内容易受到各种外界因素的损伤，因此细胞拥有多种修复机制来修复DNA损伤。

本节将介绍DNA修复的方式和维护基因组稳定性的重要性。

3.1 RNA的种类与功能RNA是DNA转录的产物，它在细胞内发挥着多种功能，包括mRNA的编码信息传递、tRNA的氨基酸运载和rRNA的构建核糖体等。

可编辑修改精选全文完整版分子生物学复习资料名词解释：复制叉：复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，这个复制起点呈现叉子的形式，被称为复制叉。

复制子：单独复制的一个DNA单元被称为一个复制子，是一个可移动的单位。

一个复制子在任何一个细胞周期只复制一次。

Klenow片段：用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶而从全酶中除去5’-3’外切酶活性的肽段后的大片段肽段。

外切酶：是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。

内切酶：是一种能催化多核苷酸的链断裂的酶，只对脱氧核糖核酸内一定碱基序列中某一定位置发生作用，把这位置的链切开。

前导链：在DNA复制过程中，与复制叉运动方向相同，以5＇-3＇方向连续合成的链。

冈崎片段：在DNA复制过程中，前导链连续合成，而滞后链只能是断续的合成5’-3’的多个短片段，这些不连续的片段称为冈崎片段。

端粒：是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构，它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体。

端粒酶：是负责染色体末端(端粒)复制,是由 RNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白.其中的 RNA 成分是端粒复制的模板.(因此端粒是逆转录酶) 作用:维持端粒长度.DNA复制参与的酶和蛋白：拓扑异构酶，解链酶，单链结合蛋白（SSB蛋白）,引发酶，DNA聚合酶，DNA连接酶。

线性DNA末端复制方式：1）环化；2）末端形成发卡结构；3）某些蛋白质的启动。

DNA修复的方式：错配修复，切除修复，重组修复，DNA直接修复，SOS反应。

AP位点：所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上的N-β糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。

AP修复：DNA分子中一旦产生了AP位点，AP核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开，并移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA，由DNA聚合酶Ⅰ合成新的片段，最终由DNA连接酶把两者连成新的被修复的DNA链。

第四章 RNA的生物合成（转录）一、选择题1．关于DNA复制和转录的叙述，错误的是A．在体内只有一条DNA链转录B．两个过程新链合成方向都是5′→3′C．复制的产物通常大于转录的产物D．两过程均需RNA为引物E．聚合酶都需要Mg２＋2．Pribnow box 序列是指A．AATAAAB．AAUAAAC．TAAGGCD．TTGACAE．TATAAT3．原核生物的DNA指导的RNA聚合酶核心酶的组成是A．α２ββ′B．α２ββ′σC．ααβ′D．ααβE．αββ′4．能特异性抑制原核生物RNA聚合酶β亚基的是A．利福平B．鹅膏蕈碱C．假尿嘧啶D．亚硝酸盐E．氯霉素5．真核生物中, RNA聚合酶Ⅱ催化生成的直接转录产物是A．mRNAB．18SrRNAC．28S rRNAD．tRNA%@`���8@s=MsoPlainText style="TEXT-INDENT: 5.25pt; LINE-HEIGHT: 18pt">E．hnRNA6．真核生物的转录特点是A．在细胞质内进行B．需要σ因子辨认起始点C．需RNA聚合酶和多种蛋白质因子D．作模板的mRNA寿命最长，最稳定E．真核生物主要有5种RNA聚合酶7．Rho因子的功能是A．结合DNA模板链B．增加RNA合成速率C．参与转录的终止过程D．释放结合的RNA聚合酶E．允许特定转录的起始8．tRNA的转录后稀有碱基的生成不包括A．脱羧反应B．还原反应C．转位反应D．脱氨反应E．甲基化反应9．不属于转录后修饰的是A．腺苷酸聚合B．外显子切除C．5′端加帽子结构D．内含子切除E．甲基化10．snRNA的功能是A．参与DNA复制B．参与RNA的剪接C．激活RNA聚合酶D．形成核糖体E．是rRNA的前体11．转录启始前复合物的形成是指A．RNA聚合酶与TATAAT结合B．RNA聚合酶与TATA序列结合C．多种转录因子与RNA聚合酶、DNA模板结合D．α因子与RNA聚合酶结合E．阻遏物变构后脱离操纵基因的复合物12. 关于tRNA合成的叙述,正确的是A．RNA聚合酶I参与tRNA前体的生成B．tRNA前体需切除5'和3'末端多余的核苷酸C．tRNA前体中不含内含子D．tRNA3'-末端需加上ACC-OHE．tRNA前体不需化学修饰加工13. 真核生物mRNA剪接作用的叙述,错误的是A．将hnRNA中的内含子剪切掉,最终成为成熟mRNAB．内含子序列起始为GU,终止于AG C．mRNA前体的剪接过程需要进行三次转酯反应D．UsnRNP是构成剪接体的组分E．U2snRNP识别并与内含子的分支点结合14. 大肠杆菌RNA链合成的方向是A．3'→5'B．C→NC．N→CD．5'→3'E．3'→5'或5'→3'15. 哺乳动物经转录作用生成的mRNA是A．内含子B．单顺反子C．多顺反子D．间隔区序列E．插入序列16. 真核生物RNA合成受鹅膏蕈碱影响最大的是A．45S-rRNAB．hnRNAC．S-rRNAD．tRNAE．snRNA17.核酶是指A．DNA酶B．RNA酶C．催化作用在细胞核内的酶D．逆转录酶E．具催化作用的RNA18. 在生物界尚无充足证据过程的是A．DNA→RNAB．RNA→DNAC．DNA→DNAD．RNA→ RNAE．蛋白质→RNA19. DNA分子上可被RNA聚合酶特异识别的部位是A．弱化子B．操纵子C．启动子D．终止子E．沉默子二、名词解释1. 不对称转录(asymmetric transcription)2. 断裂基因(splite gene)3. 外显子和内含子(exon and intron)4. 剪接体(splicesome)三、问答题1．简述原核生物与真核生物中的启动子结构特点及功能。

第九章癌基因、抑癌基因与生长因子一、选择题【A型题】1．关于癌基因的叙述，错误的是A．是细胞增殖的正调节基因B．可诱导细胞凋亡C．能在体外引起细胞转化D．能在体内诱发肿瘤E．包括病毒癌基因和细胞癌基因2．关于病毒癌基因的叙述，正确的是A．主要存在于DNA病毒基因组中B．最初在劳氏（Rous）肉瘤病毒中发现C．不能使培养细胞癌变D．又称原癌基因E．由病毒自身基因突变而来3．关于逆转录病毒的叙述，错误的是A．即RNA病毒B．可产生逆转录酶C．在宿主细胞中以前病毒形式代代传递D．所有逆转录病毒都有癌基因E．可用作基因治疗的载体4．癌基因的表达产物不包括A．生长因子类似物B．跨膜生长因子受体C．结合GTP的蛋白质D．反式作用因子E．顺式作用元件5．不属于癌基因激活结果的是A．过量的正常表达产物B．原来不表达的基因开始表达C．基因缺失D．蛋白产物氨基酸组成改变E．出现异常/截短的表达产物6．关于P53基因的叙述，错误的是A．突变后具有癌基因作用B．是一种抑癌基因C．基因定位于17P13D．编码胞浆磷酸化蛋白E．编码产物有转录因子作用7．关于抑癌基因的叙述，正确的是A．具有抑制细胞增殖的作用B．与癌基因的表达无关C．缺失与细胞的增殖和分化无关D．不存在于人类正常细胞中E．在所有肿瘤细胞正常表达8．关于癌基因的叙述，错误的是A．原癌基因存在于正常细胞基因组中B．癌基因对维持细胞正常功能有重要作用C．原癌基因一般处于静止或低表达状态D．病毒癌基因可引起肿瘤E．细胞癌基因来自原癌基因激活9．关于细胞凋亡的叙述，错误的是A．某种信号触发的过程B．细胞按一定程序缓慢死亡C．可诱导肿瘤发生D．某些癌基因具有抑制凋亡的作用E．生理病理条件下均可发生10．关于Rb蛋白的叙述，正确的是A．细胞进入S期，Rb蛋白磷酸化水平降低B．分裂增殖的细胞只含磷酸化型Rb蛋白C．G0、G1期，Rb蛋白磷酸化水平升高D．高磷酸化Rb蛋白可与E2F结合E．Rb基因失活只见于视网膜母细胞瘤11．关于原癌基因的叙述，错误的是A．只存在于脊椎动物细胞中B．进化中基因序列高度保守C．是正常细胞生长增殖所必需D．通过其蛋白表达产物起作用E．被某些因素激活可转变为癌性/癌基因12．P53蛋白的DNA结合区域是A．核心区B．N-端C．酸性区D．碱性区E．C-端13．P53蛋白半衰期短是由于A．细胞中P53蛋白含量很低B．核心区含有特异氨基酸序列C．酸性区易被蛋白酶水解D．酸性区含有特殊的磷酸化位点E．碱性区可被多种蛋白激酶识别14．关于Rb蛋白的叙述，错误的是A．定位于细胞核内B．是一种跨膜蛋白C．非磷酸化形式为活性型D．G0期淋巴细胞仅含非磷酸化Rb蛋白E．其磷酸化程度与细胞周期密切相关15．关于原癌基因ras的叙述，错误的是A．ras蛋白性质类似于G蛋白的α亚基B．ras蛋白即P21C．H-ras、K-ras、N-ras核苷酸序列相差很大D．ras蛋白为多种生长因子信息传递过程所共有E．ras蛋白参与NO水平的调节【X型题】16．原癌基因的特点包括A．广泛存在于生物界B．基因序列呈高度保守性C．通过其表达产物发挥作用D．激活后具细胞转化能力E．只存在于肿瘤细胞中17．原癌基因的激活机制有A．获得启动子B．基因易位C．基因扩增D．点突变E．增强子插入18．原癌基因激活的结果是出现A．新的表达产物B．过量的正常表达产物C．异常、截短的表达产物D．大量凋亡蛋白E．异常、延长的表达产物19．野生型P53基因A．是生长因子基因B．是抑癌基因C．与人类肿瘤相关性最高D．产物是一种核内磷酸化蛋白E．抑制细胞凋亡20．P53蛋白的作用是A．活化P21基因转录B．抑制解链酶活性C．参与DNA的复制与修复D．若修复失败，诱导细胞凋亡E．使细胞进入S期21．能抑制细胞凋亡的是A．野生型P53基因B．突变型P53基因C．P16基因D．NGFE．Rb蛋白二、名词解释1．Oncogene2．抑癌基因3．Apoptosis三、简答题1．简述原癌基因的特点。

第五章蛋白质的生物合成（翻译）一、选择题1．仅有一个密码子的氨基酸是A．色氨酸、赖氨酸B．苏氨酸、甘氨酸C．甲硫氨酸、甘氨酸D．亮氨酸、丙氨酸E．色氨酸、甲硫氨酸2．密码与反密码配对时，不遵从碱基配对规律，称为A．密码的简并性B．密码的偏爱性C．密码的连续性D．密码的摆动性E．密码的通用性3．真核生物核蛋白体中没有的rRNA是A．18SB．23SC．5SD．28SE．5.8S4．反密码存在于A．DNAB．tRNAC．mRNAD．rRNAE．cDNA5．不符合密码的通用性的细胞器是A．细胞核B．微粒体C．线粒体D．内质网E．高尔基体6．氨基酰-tRNA合成酶的校正活性是A．水解酯键B．水解3’，5’磷酸二酯键C．水解磷酸酯键D．形成酸酐键E．形成磷酸酯键7．关于核蛋白体，错误的是A．由rRNA和多种蛋白质组成B．分为大小亚基C．是翻译的场所D．在细胞核内起作用E．一个mRNA上可附着多个核蛋白体8．能促使大小亚基解离的因子是A．IF1B．IF2C．IF3D．EF-TsE．IF1与IF39．EF-Tu的功能是A．协助氨基酰-tRNA进入A位B．促进核糖体亚基聚合C．促进核糖体解聚D．促进mRNA与核糖体分离E．促进肽酰-tRNA移位10．延长因子EFG具有哪种酶的活性A．转肽酶B．酯酶C．转位酶D．转甲酰酶E．转氨酶11．肽链延长过程的叙述，错误的是A．又称为核蛋白体循环B．每循环一次延长一个氨基酸C．分为进位，成肽和转位三步D．需要EFT、EFGE．需要ATP供能12. 翻译终止时激活转肽酶为酯酶活性的是A．RF-1B．RF-2C．RF-3D．RF-4E．RR13. 蛋白质合成中不消耗能量的阶段是A．氨基酸活化B．翻译起始C．进位D．成肽E．转位14. 关于多肽链一级结构的翻译后修饰，描述错误的是A．蛋白质合成过程中N端总是甲酰甲硫氨酸B．天然蛋白质N端多数不是甲酰甲硫氨酸C．脱甲酰基酶可除去N端甲酰基D．氨基肽酶可除去N端氨基酸E．翻译终止才能除去N端甲酰基15. 鸦片促黑皮质素原水解加工生成的是A．胰岛素B．糖蛋白C．脂蛋白D．ACTHE．TSH16. 可被信号肽酶裂解的部位是A．加工区B．疏水核心区C．碱性氨基末端区D．酸性羧基末端区E．亲水区17.关于信号肽识别粒子（SRP）的描述，错误的是A．由蛋白质与RNA组成的复合体B．能特异识别结合信号肽C．具有暂停蛋白质合成的作用D．可将正在合成蛋白质的核蛋白体带至膜外E．SRP需与对接蛋白结合18. 白喉毒素可共价修饰的因子是A．EF3B．eEF1C．EF1D．eEF2E．EF219. 干扰素通过何种方式使eIF2失活A．甲基化B．ADP核糖基化C．羧化D．磷酸化E．乙酰化20. 可辨认结合分泌蛋白新生肽链N端的是A．转肽酶B．信号肽识别颗粒C．GTP酶D．RNA酶E．对接蛋白二、名词解释1. 多聚核蛋白体(polyribosome)2. 信号肽(signal peptide)3．开放阅读框架（open reading frame, ORF）三、问答题1．三种RNA在蛋白质合成中各起何作用?2．原核与真核生物翻译起始阶段各有何异同？3．细胞核蛋白合成后如何靶向输送到细胞核？4．举例说明抗生素在翻译水平抑菌的作用机理。

山东大学博士研究生入学考试分子生物学专业考题1999年名词说明〔任选10个，共20分〕逆转座子 C值悖理半不持续DNA复制 GT－AT规律魔斑 RNA编辑反式作用因子顺式作用元件基因沉默副密码子拼接体调控密码基因放大简要回答以下问题〔任选10题，共60分〕组蛋白和非组蛋白的要紧特点是什么？SOS修复什么缘故会致使偏向过失性突变？真核生物mRNA的帽子有几类？其名称和特点是什么?增强子有哪些特点？放线菌酮和氯霉素对蛋白质合成的抑制作用有何不同？各有何用途？真核生物构造基因5‘启动区上游远端顺式作用元件能够采纳何种方式参与该基因的表达调控？杂交阻断翻译何杂交释放翻译的原理是什么?RFLP 和RAPD 的原理是什么？DDRT－PCR和phage display 的原理是什么？Tyl/copia因子在真核生物基因组中可能的作用是什么？什么叫核酶？从核酶入手，谈谈对生命进化进程中RNA世界假说的熟悉？大肠杆菌DNA复制所需RNA引物的合成及组织的起始进程如何？论述题选做其一〔20分〕试从淋巴细胞分化中DNA重排说明产生免疫球蛋白分子多样性的机理?从真核生物断裂基因mRNA的加工进程说明真核生物基因表达的复杂性？2000年名词说明〔20分，12题中任选10题〕D－loop 端粒酶 GT－AG规律严谨反应 RNA饱和杂交实验同型异位突变α－互补作用组织相容性复合体〔MHC〕 Southern－Western blot 朊病毒 Cot1/2 YAC载体二．简要回答以下问题〔48分，10题当选做8题〕1．信号肽与前导肽有何区别？2．何为顺式作用元件？试举例说明3．何为蛋白质剪辑？试举例说明4．原癌基因可通过哪些机制的活化而致使癌变？5．DNA复制与蛋白质合成各用什么机制维持其合成的忠实性？6．什么是基因打靶？其原理是什么？7．Lac＋大肠杆菌转入含Lac的培育基中，Lac操纵子如何开启？参加葡萄糖以后，情形又如何？8．何为生物孵化器？动物乳腺作为孵化器有何优势？9．欲研究一个反式蛋白因子〔Trans－activator〕与某基因5‘端启动子区接合部位的序列。

第十章基因诊断与基因治疗一．选择题【A型题】1．关于基因变异致病的叙述，错误的是A．绝大多数疾病与基因异常密切相关B．基因表达的各个环节异常都可致病C．基因结构异常可致病D．基因变异致病包括内源基因变异和外源基因入侵E．人类的疾病都是由基因变异引起的2．内源基因变异不包括A．点突变B．缺失或插入突变C．外源基因入侵D．表达异常E．基因结构变异3．结构突变不包括A．基因失活B．基因重排C．染色体易位D．基因扩增E．插入突变4．关于镰状细胞贫血的叙述，正确的是A．β-珠蛋白基因第6位密码子点突变B．α-珠蛋白基因第6位密码子点突变C．β-珠蛋白基因的T变为AD．β-珠蛋白的Glu取代ValE．α-珠蛋白的Val取代Glu5．关于RFLP分析，错误的是A．可诊断甲型血友病B．可诊断苯丙酮尿症C．用特异限制性片段长度多态性作为遗传标志D．判断是否为致病基因的携带者E．基本原理是根据DNA杂交6．关于ASO杂交法的叙述，正确的是A．该方法仅用于诊断已知突变B．该方法可发现新的突变基因类型C．仅能检测纯合子D．原理是依据DNA片段长度多态性E．原理是利用限制性内切酶位点的改变7．与PCR联合进行基因诊断的方法，不包括A．PCR / ASOB．PCR / SSCPC．PCR / WesternD．PCR / RFLPE．PCR / 限制酶谱法8．常用于基因诊断的核酸杂交方法不包括A．基因序列测定B．限制性内切酶酶谱分析法C．RFLP分析法D．ASO杂交法E．DNA限制性片段长度多态性分析9．基因诊断的常用方法不包括A．核酸分子杂交B．PCRC．ASO法D．基因测序E．Western blotting10．RNA诊断的常用方法,不包括A．RNA点杂交B．Northern blottingC．定量逆转录PCRD．Southern blottingE．mRNA差异显示PCR11．关于RNA的诊断,错误的是A．对基因转录产物进行定性分析B．对基因转录产物进行定量分析C．以mRNA、rRNA、tRNA为检测对象D．可检测外显子的变异E．可检测剪接、加工的缺陷12．关于基因诊断的应用，错误的是A．预防癌症B．遗传病检测C．传染病检测D．优生E．流行性疾病检测13．关于基因治疗，错误的是A．正常基因整合到细胞基因组校正致病基因B．正常基因整合到细胞基因组置换致病基因C．某些目的基因不与宿主细胞整合，也可短暂发挥作用D．目的基因只有整合与宿主基因重组才能发挥作用E．将某些遗传物质移入患者细胞内，达到治疗作用14．基因治疗的方法，不包括A．基因失活B．基因置换C．染色体易位D．基因增补E．基因矫正15．与基因失活无关的是A．肽核酸B．基因敲除C．核酶D．基因矫正E．反义核酸16．关于自杀基因的叙述，错误的是A．细菌产生的酶催化无毒性药物转变为细胞毒性物B．常用的有HSV-TK、EC-CD等C．可用于肿瘤的治疗D．携带该基因的受体细胞被杀死E．可用于遗传病的基因治疗17．关于治疗性基因的选择，错误的是A．野生型基因可用于单基因缺陷的治疗B．ADA可用于治疗SCIDC．VEGF基因可用于血管栓塞性疾病治疗D．ADA用于治疗心血管病E 反义核酸能抑制肿瘤生长18．基因治疗中常用的载体，不包括A．病毒载体B．质粒C．腺病毒载体D．逆转录病毒载体E．腺相关病毒载体19．内源基因结构突变发生在生殖细胞可引起的疾病是A．肿瘤B．感染性疾病C．遗传性疾病D．心血管疾病E．肝病20．非病毒介导基因转移的物理方法，不包括A．基因枪技术B．脂质体介导C．电穿孔D．DNA直接注射E．显微注射【X型题】21．关于基因诊断方法的叙述，正确的是A．Mst Ⅱ酶切图谱诊断镰状贫血B．ASO杂交可检测基因突变C．DMD的诊断可用多重PCR技术D．对基因转录产物进行定性、定量分析22．基因治疗所采用的方法包括A．基因矫正B．基因置换C．基因增补D．基因重组23．基因治疗的载体包括A．腺病毒B．质粒C．腺相关病毒D．逆转录病毒24．关于基因治疗载体的叙述，正确的是A．有病毒和非病毒载体两类B．临床治疗中多选用病毒载体C．腺病毒载体可插入9kb外源基因D．腺病毒载体是RNA病毒25．基因治疗的基本过程包括A．治疗性基因的选择B．基因载体的选择C．靶细胞的选择D．基因转移E．回输体内26．内源基因变异包括A．点突变B．表达异常C．基因重排D．基因置换27．结构突变包括A．点突变B．缺失C．插入D．基因重排二、名词解释1. 基因诊断2. gene therapy三、简答题1．基因诊断的特点是什么。

分子生物学复习资料个人整理分子生物学复习（仅供参考）基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探针。

当溶液中带有荧光标记的核酸序列TA TGCAATCTAG，与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列。

据此可重组出靶核酸的序列。

假基因(pseudogene)具有与功能基因相似的序列，但由于有许多突变以致失去了原有的功能，所以假基因是没有功能的基因，常用ψ表示。

端粒是线状染色体末端的一种特殊结构，在正常人体细胞中，可随着细胞分裂而逐渐缩短。

细胞分裂一次，由于DNA复制时的方向必须从5'方向到3'方向，DNA每次复制端粒就缩短一点，所以端粒其长度反映细胞复制史及复制潜能，被称作细胞寿命的“有丝分裂钟”。

DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，双链变成单链，从而使核酸的天然构象和性质发生改变。

变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变。

凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等，均可引起核酸分子变性。

DNA的复性指变性DNA 在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。

热变性DNA 一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为" 退火"(annealing)。

简并密码子编码同一个氨基酸残基的两个或两个以上的密码子。

核酶（ribozyme）是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异的mRNA序列。

核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。

大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与RNA 自身剪切、加工过程。

核酸探针是指带有标记物的已知序列的核酸片段，它能和与其互补的核酸序列杂交，形成双链，所以可用于待测核酸样品中特定基因序列的检测。

第六章基因表达调控一、选择题【A型题】1．关于启动序列的叙述，正确的是A．mRNA分子上开始被翻译的序列B．开始转录生成mRNA的序列C．RNA聚合酶识别结合的序列D．阻遏蛋白结合的序列E．产生阻遏蛋白的序列A．O代表启动序列B．I是操纵序列C．I、P、O合称结构基因D．Z、Y、A是结构基因E．P产生阻遏蛋白3．关于各种类型操纵子的叙述，正确的是A．乳糖操纵子在无糖时开放B．乳糖直接诱导阻遏蛋白变构C．色氨酸操纵子在有色氨酸时开放D．乳糖操纵子的阻遏蛋白是一种变性蛋白E．阻遏蛋白是否结合于操纵序列，可以决定操纵子的关闭或开放4．直接诱导乳糖操纵子转录的物质是A．乳糖B．葡萄糖C．阿拉伯糖D．半乳糖E．cAMP5．阻遏蛋白识别操纵子的位点是A．启动子B．结构基因C．阻遏物基因D．操纵基因E．增强子6．在乳糖操纵子调节机制中,半乳糖的作用是A．作为辅阻遏物结合阻遏物B．作为阻遏物结合于操纵基因C．使阻遏物变构失去结合DNA的能力D．抑制阻遏基因的转录E．引物7．能与DNA结合并阻止转录的蛋白质称A．正调控蛋白B．反式作用因子C．诱导物D．阻遏物E．分解代谢基因活化蛋白8．原核生物启动序列-10区的共有序列称A．TATA盒B．CAAT盒C．Pribnow盒D．增强子E．GC盒9．DNA损伤修复的SOS反应A．是一种保真性很高的复制过程B．LexA蛋白是阻遏蛋白，使SOS基因处于阻遏状态C．RecA是一系列操纵子的阻遏蛋白D．LexA是一系列操纵子的正性调节蛋白E．RecA催化水解LexA使之激活10．RNA聚合酶Ⅱ各转录因子（TF Ⅱ）中，能与TATA盒直接结合的是A．TFⅡAB．TFⅡBC．TFⅡDD．TFⅡEE．TFⅡF11．关于“基因表达”的叙述，错误的是A．所有基因表达都经历转录及翻译过程B．某些基因表达经历转录及翻译过程C．某些基因表达产物是蛋白质分子D．某些基因表达产物不是蛋白质分子E．某些基因表达产物是RNA分子12．关于管家基因的叙述，错误的是A．在生物个体的几乎所有细胞中持续表达B．在生物个体的几乎各生长阶段持续表达C．在一个物种的几乎所有个体中持续表达D．在生物个体的某一生长阶段持续表达E．生物个体全生命过程的几乎所有细胞中表达13．基因表达调控的主要环节是A．基因扩增B．转录起始C．转录后加工D．翻译起始E．翻译后加工14．lac阻遏蛋白结合乳糖操纵子（元）的A．P序列B．O序列C．CAP结合位点D．I基因E．Z基因15．cAMP与CAP结合后介导的正性调节发生在A．有葡萄糖及cAMP较高时B．有葡萄糖及cAMP较低时C．没有葡萄糖及cAMP较高时D．没有葡萄糖及cAMP较低时E．葡萄糖及cAMP浓度极高时16．增强子(enhancer)A．是特异性高的转录调控因子B．是真核生物细胞核内的组蛋白C．原核生物的启动子在真核生物中就称为增强子D．是一些较短的能增强转录的DNA序列E．是结构基因中5′端的DNA序列17．关于增强子的叙述，正确的是A．对启动子的作用有严格的专一性B．作用有方向性C．是近距离影响启动子的转录调控元件D．具有增强转录的作用E．具有抑制转录的作用18．关于真核生物转录前起始复合物（PIC）形成过程顺序，正确的是A．TATA，TFⅡD，TFⅡA，TFⅡB，RNApolⅡ/TFⅡF，TFⅡE B．TATA，TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，RNApolⅡ/TFⅡF，TFⅡE C．TATA，TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，RNApolⅡD．TATA，TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF ，RNApolⅡE．TATA，TFⅡA，TFⅡB，TFⅡE，RNApolⅡ，TFⅡF【X型题】19．真核生物启动子的特点有A．至少包括一个转录起始点B．TATA盒控制转录起始的准确性及频率C．GC盒位于转录起始点上游-25~-30bpD．富含GC的启动子一般含多个转录起始点E．有些启动子不含TATA盒及GC盒20．操纵子A．只在真核生物中存在B．启动子是操纵子的成分C．结构基因表达产物是一组执行相关功能的酶或蛋白质D．含有结构基因E．含有调节基因21．乳糖操纵子的作用方式是A．半乳糖与阻遏蛋白结合使操纵序列开放B．阻遏蛋白经变构后与启动序列结合C．结构基因的产物与阻遏蛋白结合D．诱导物使阻遏蛋白发生变构不再与DNA结合E．乳糖可直接与阻遏蛋白结合使其变构22．在lac操纵子（元）机制中起调控作用的DNA序列是A．Y基因B．Z基因C．CAP结合位点D．O序列E．P序列23．增强子A．是远离转录起始的DNA调节序列B．决定基因表达的时间、空间特异性C．可增强启动子转录活性D．作用方式与其方向、距离无关E．作用方式与其方向和距离关系密切24．顺式作用元件A．是DNA分子中的调节序列B．又称为分子内作用元件C．多数不和RNA聚合酶直接结合D．增强子是顺式作用元件E．发挥作用与方向、距离关系密切25．DNA和蛋白质的结合包括A．阻遏物和操纵序列的结合B．锌指结构和DNA双螺旋的结合C．DNA聚合酶和模板的结合D．密码子和反密码子的结合E．沉默子与特异蛋白的结合26．关于真核基因表达与原核基因表达调控的叙述,正确的有A．两者RNA聚合酶不同B．原核基因表达调控通常采用操纵子机制C．阻遏蛋白的负性调节在原核基因表达中具有普遍性D．原核基因的转录和翻译同时进行E．正性调节在真核基因表达调控中占主导地位二．名词解释1．操纵子（元）（operon）2．增强子（enhancer）3．管家基因（housekeeping gene）4．顺式作用元件（cis-acting element）。

山东大学继续（网络）教育一、单选题1.下列有关微量移液器的正确使用叙述，错误的是（）。

A.选择正确的量程B.不用太考虑量程，多吸取几次不影响体积C.微量操作规范D.使用完毕要量程复位2.细菌质粒与细胞中下面哪一种组成成分类似?（）A.染色体B.RNAC.蛋白质D.脂类3.说明用无水乙醇沉淀质粒的优缺点不对的是（）。

A.将DNA浓缩B.更换缓冲液系统C.操作简单D.能有效获得超螺旋质粒DNA4.以下凝胶支持介质中最常用于核酸样品检测的是（）。

A.滤纸B.醋酸纤维素膜C.琼脂糖D.聚丙烯酰胺二、多选题1.琼脂糖凝胶电泳上样缓冲液的主要作用包括以下哪些项？（）A.增加样品密度，使样品沉入胶孔B.使样品染色，便于分析检测C.使样品呈色，便于电泳加样D.电泳中形成可见指示带，可预测电泳的速度和样品的位置2.下列哪些是天然DNA的来源（）。

A.染色体DNAB.cDNAC.质粒DNA和病毒DNA （噬菌体DNA)D.线粒体DNA和叶绿体DNA3.下列哪些项属于原核生物操纵子的结构（）。

A.启动子B.中止字C.操纵基因D.内含子4.关于多酶联合酶解反应，描述正确的是（）。

A.所有盐浓度相同的两种酶都可使用同时酶切的策略B.盐浓度和温度不同时，可使用较贵酶的盐浓度，加大便宜酶用量同时酶切C.盐浓度不同时可低盐酶先切，补加盐，高盐酶再切D.可根据不同酶的反应条件选择同时或分步酶切的策略三、判断题1.用同一种酶切割载体和外源DNA片段得到的粘性末端的连接，为了防止它们的自身环化，一般用CIP酶将它们都脱磷酸。

（）2.用Hin d III单酶切，载体用磷酸酯酶脱去磷酸，可有效提高重组率。

（）3.接合质粒携带与接合功能有关的编码基因，虽然分子量大，但也可用作分子克隆的载体。

（）4.利用PCR法筛选鉴定的重组子不能获知重组质粒上插入片段大小的信息。

（）5.制作聚丙烯酰胺凝胶电泳胶板时验漏的作用是防止有毒的丙烯酰胺单体渗出不聚合造成污染。