海带多糖的含量测定方法正确性研究
- 格式:pdf
- 大小:1.36 MB
- 文档页数:2
海带中多糖的提取及其综合利用的开题报告
一、研究背景和意义
海带是一种常见的大型褐藻类海藻,在我国被广泛栽培和野生存在于海域中。
其富含蛋白质、矿物质、维生素等多种营养成分,而且特别是富含多糖,具有多种生物
活性,如抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等。
因此,海带多糖成为近年来研究的热点之一。
多糖是复杂的生物大分子,其结构和性质决定了其生物活性及功能。
海带中的多糖主要是海藻酸钠、多糖硫酸酯等。
目前,海带多糖的提取方法主要有水提法、酸提法、酶法等,其中水提法是最常用、简单、经济的方法。
多糖的应用也非常广泛,例
如食品、保健品、药品等。
海带多糖的提取及其综合利用研究,不仅可以更好地开发海带资源,促进海洋生物产业的发展,同时也可以为人类健康事业做出贡献。
二、研究内容和方法
本研究将以海带为材料,通过水提法和酸提法分别提取海带多糖。
分析比较两种提取方法的优缺点,并对多糖进行成分分析和理化性质测试。
同时对多糖的生物活性
进行评价和比较研究,包括抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等。
在此基础上,本研究将进一步探讨海带多糖的综合利用,包括开发多糖的保健功效、作为食品添加剂的应用等。
具体方法包括多糖的制备、结构特性分析、形态结构
观察、理化特性测试、生物活性评价等。
三、预期结果
本研究将深入探讨海带多糖的提取及其综合利用,比较不同提取方法的优缺点和多糖的生物活性。
同时,通过多种测试手段分析多糖的理化特性和结构特性,为多糖
的应用提供科学依据。
最终实现海带多糖的综合利用,为海洋资源开发和人类健康事
业做出贡献。
海带多糖的提取及鉴定1、实验目的及原理海带是褐藻门植物,海带多糖是海带药用价值的最集中体现,海带多糖的种类很多。
本实验的主要目的是掌握海带多糖的提取及测定方法。
对海带多糖的提取方法有很多,碱提取法是其中重要的一种。
多糖中的己糖能与苯酚硫酸试剂发生显色反应,颜色的深浅与己糖含量成正比。
颜色的深浅可通过分光光度计测定,因此,可建立不同浓度的标准己糖与吸光度间的呈线性关系,绘制标准曲线,测定样品的吸光度值,再从表中曲线中查到样品中多糖的含量。
2、实验基本内容和要求(1)掌握碱提取法提取海带多糖(2)掌握利用绘制标准曲线方法测定多糖含量3、实验所用仪器设备和试剂(1)基本仪器:分光光度计,离心机(2)实验材料及试剂:干海带1 %碳酸钠溶液:称取15 g无水碳酸钠加入1500 mL蒸馏水,95%乙醇溶液,氯化钙溶液(2g/100mL)4、实验步骤4.1 海带多糖的提取(1)购买海带后,用自来水将其洗净,晒干,研磨,过60目-80目的筛,收集备用。
称取制备好的2 g海带粉,置于烧杯中,加入28 mL 刚配好的碳酸钠溶液。
(2)在50℃水浴中水浴,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热水冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000 r/min 离心15 min,保留上清液。
上清液经减压浓缩(40℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖。
二.鉴定Molisch反应(α-萘酚反应)此方法是鉴定糖类最常用的颜色反应。
它的原理是:糖类在浓酸作用下所形成的糠醛及其衍生物可以与α-萘酚作用,形成红紫色复合物。
由于在糖溶液与浓硫酸两液面间出现红紫色的环,因此又称紫环反应。
α-萘酚也可用麝香草酚或其他的苯酚化合物代替,麝香草酚溶液比较稳定,其灵敏度与α-萘酚一样。
除了糖类之外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等都可以呈现近似的阳性反应。
三,硫酸-蒽酮法测定海带多糖含量1.配制硫酸-蒽酮试剂:取2 g蒽酮溶解于1000 mL浓H2SO4中,当日配制使用。
营养与健康海带多糖的提取方法及生物活性研究于 娜,张丽敏*,徐 彤(佳木斯大学 生命科学学院,黑龙江佳木斯 154000)摘 要:海带多糖是海带中重要的天然活性成分,其具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节及降血糖等作用。
本文对海带多糖不同提取方法进行比较,对海带多糖生物活性进行分析,旨在为海带多糖的进一步开发研究提供理论依据。
关键词:海带;多糖;提取方法;生物活性Study on Extraction Method and Biological Activity of Polysaccharide From Laminaria japonicaYU Na, ZHANG Limin*, XU Tong(College of Life Sciences, Jiamusi University, Jiamusi 154000, China)Abstract:Laminaria japonica polysaccharides are important natural active ingredients in Laminaria japonica, which have antioxidant, anti-tumor, immune regulation, and hypoglycemic effects. This article compares different extraction methods of Laminaria japonica polysaccharides and analyzes their biological activities, aiming to provide theoretical basis for further development and research of kelp polysaccharides.Keywords:Laminaria japonica; polysaccharides; extraction method; biological activity海带别名江白菜,为多年生冷水性大型食用藻类,藻体褐色,呈扁平带状,具有软坚散结、消肿、利水及润下消痰等功效。
传统的海带多糖的提取方法包括:热水提取法、酶提取法、碱提取法,度是而这些提取方法都存在一定的缺陷。
热水提取的方法采用的温70^-80'}C耗能多,提取时间长.工业生产需要使用的酶量大,不经济。
酶提取的方法提取的时间长,碱提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法,但是碱提取方法会造成多糖生物活性的降低。
因此寻找合适的提取方法来降低能耗,提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重要。
为达到这一目的,我们现采用超声波方法来提取海带多糖,随后对其理化性质和生物学活性进行检侧,并与传统方法进行比较,以期得到海带多糖提取的最佳方法。
配制1%的碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500mL水称取制备好的200g海带粉,置于不锈钢桶中,加入配好的碳酸钠溶液2. 8L,在50℃水浴5h,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000r/min离心15min,保留上清液。
按体积比平均分成两份,一份上清液经减压浓缩(40 ℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖 E.另一份上清液中加入氛化钙( 2g/1OOmL),静置,5000r/min离心去除揭藻酸钙。
上清液经减压浓缩(40 ℃)后,加入三倍体积95%乙醉,沉淀过夜.离心后获得海带硫酸多糖F.将以上所得沉淀E, F各重新溶于水,离心除去不溶物。
上清液再加三倍体积95%乙醇,静置沉淀.生成沉淀经无水乙醇、乙醚洗涤,重新溶于蒸馏水,置于一20℃冰箱冷冻过夜,冷冻干燥得到海带杂多糖E,以及海带硫酸多糖粗品F1可溶性大豆多糖是一种从大豆中提取的多糖类化合物,主要由膳食纤维组成,而膳食纤维对治疗高血压、高血脂、心血管疾病和肥胖病等具有积极作用[1-3]。
可溶性大豆多糖还具有分散稳定性、乳化性,所以常用于酸性饮料中[4-5]。
其属于酸性多糖,结构类似于果胶,多数类型由半乳糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸,也包括鼠李糖、海藻糖、木糖、葡萄糖等。
实验五海带多糖的提取及含量测定(3学时)1、实验目的及原理海带是褐藻门植物,海带多糖是海带药用价值的最集中体现,海带多糖的种类很多。
本实验的主要目的是掌握海带多糖的提取及测定方法。
对海带多糖的提取方法有很多,碱提取法是其中重要的一种。
多糖中的己糖能与苯酚-硫酸试剂发生显色反应,颜色的深浅与己糖含量成正比。
颜色的深浅可通过分光光度计测定,因此,可建立不同浓度的标准己糖与吸光度间的呈线性关系,绘制标准曲线,测定样品的吸光度值,再从表中曲线中查到样品中多糖的含量。
2、实验基本内容和要求(1)掌握碱提取法提取海带多糖(2)掌握利用绘制标准曲线方法测定多糖含量3、实验所用仪器设备和试剂(1)基本仪器:分光光度计,离心机(2)实验材料及试剂:干海带1 %碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500ml蒸馏水95%乙醇溶液,氯化钙溶液(2g/100ml),1.0ml 6%的苯酚溶液,98%浓硫酸标准糖溶液:用岩藻糖和半乳糖fuc/gal(3:1)作为标准糖,取其混合物0.1g,其中0.075g的岩藻糖,0.025g的半乳糖,将其溶解到1000ml的水中,制成0.1mg/ml的标准溶液。
梯度稀释,用蒸馏水稀释分别配成,0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.1mg/ml。
4、实验步骤4.1海带多糖的提取(1)购买海带后,用自来水将其洗净,晒干,研磨,过60目----80目的筛,收集备用。
称取制备好的2g海带粉,置于烧杯中,加入28ml刚配好的碳酸钠溶液。
(2)在50℃水浴中水浴,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热水冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000r/min离心15min,保留上清液。
上清液经减压浓缩(40℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖。
4.2海带多糖的测定(1)将标准糖配成0.1mg/ml溶液(2)取少量标准糖溶液,用蒸馏水稀释到2.0ml,向其中加入1.0ml 6%的苯酚溶液,振荡器混匀,再加入浓硫酸5.0ml,振荡混匀。
海带多糖最佳提取条件的研究
余华
【期刊名称】《中国食物与营养》
【年(卷),期】2006(000)007
【摘要】本文采用水法浸提海带多糖,对海带多糖的最佳浸提及醇析条件进行了筛选,并对海带多糖进行了脱蛋白和脱色研究,以优化其提取条件.结果表明,海带多糖水法浸提的最佳浸提条件为:在40目的海带粉中加入海带重25倍的水于90℃浸提5h;最佳醇析条件为:将海带提取液浓缩5倍、添加4.5倍体积分数95%的乙醇,此时海带多糖的得率最高,为10.49%.常规Sevag试剂脱蛋白效果不理想,在海带多糖提取液中加入0.2%质量分数的木瓜蛋白酶,于70℃下水解1 h能完全除去海带多糖中的蛋白质.H2O2氧化脱色较吸附脱色效果好,但用Al2O3层析柱
(20mm×800mm),装柱600mm,脱色三次依然可以获得很好的脱色效果.
【总页数】4页(P32-35)
【作者】余华
【作者单位】成都大学生物工程系,成都,610106
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.羊血中超氧化物歧化酶提取工艺研究——热变温度、热变时间和热变方式对SOD提取的影响及最佳工艺条件选择 [J], 于颖;徐桂花
2.海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究 [J], 余华
3.从薯渣中提取果胶及最佳提取条件的研究 [J], 张海俊;刘亚伟;王彦波;丁长河
4.超声波提取灯笼草中总黄酮的最佳提取条件的研究 [J], 张晓婷;吴泽婷;衷明华
5.啤酒废酵母中谷胱甘肽的提取模型及最佳提取条件研究 [J], 李泽正;王安;田儒俊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
海带多糖的提取和鉴定实验报告—0943713 王欢实验伙伴:0943623魏爽蛋白质、酶、核酸、多糖等生物大分子的结构与功能的研究是探求生命奥秘的中心课题。
为了进行结构与功能的研究,首先必须解决制备问题,制备完毕要进行鉴定。
一、实验目的1,掌握酶法提取海带硫酸多糖的原理和操作流程;2,了解多糖物质的常规纯化方法及原理;3,熟悉多糖含量测定的常用方法和原理;4,掌握硫酸-蒽酮法测定多糖的原理及操作流程、注意事项;二、实验原理本实验综合利用细胞匀浆和纤维素酶水解,破碎海带细胞壁,释放细胞内容物,包括多糖、海藻酸以及蛋白、核酸等;随后通过海藻酸与Ca2+的结合沉淀形成不溶性海藻酸钙,以去除其中的海藻酸;继而通过CTAB与多糖络合后溶解度下降的特性,将多糖与其他成份分离;最后在盐溶液中回溶多糖,并通过乙醇沉淀法获得多糖沉淀,即为海带粗多糖。
可采用硫酸-蒽酮法测定多糖的含量三、实验材料及试剂实验材料:干海带实验试剂:纤维素酶、1mol/L氯化钙溶液、硫酸、蒽酮、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、葡萄糖、DE-23、DE-41、Sepharose(2B 4B 6B)等仪器:组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计等(下面是一些仪器和设备的照片)四、实验步骤海带多糖的提取1.干海带加水浸泡过夜,充分溶胀后,加入1/3体积的水,放入组织匀浆机中,粉碎成海带浆。
取约100ml海带浆,调PH值为4.5-5.0,加入0.3g纤维素酶,于50度温浴水解4-6小时,间或搅拌,促进细胞壁水解。
(这个过程我们的指导老师已经提前做好)2..在海带浆中加入50ml水,搅拌均匀,沸水浴5min,使纤维素酶失活,冷至室温,用6层纱布过滤,收集滤液(注:1、这个时候一定不要混入海带渣,防止对后面测量结果的影响,2、过滤过程中可戴手套挤纱布,但是不要太用力使海带渣意外流出)(下面是过滤现场照片)3.向滤液中加入1/4体积1mol/L氯化钙溶液,搅拌均匀后,4层纱布过滤,去除海藻酸钙。
海带多糖是一种常见的天然多糖类化合物,具有广泛的应用价值,包括抗氧化、抗菌、抗病毒、降血压、降血糖等多种生物活性。
海带多糖的提取条件的优化和脱蛋白研究一直是研究热点之一。
在本文中,我们将深入探讨海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究的相关内容,希望能为相关研究提供一定的参考和借鉴。
一、海带多糖提取条件的优化1.1 浸提条件海带多糖的提取通常采用水煮浸提的方法,而浸提条件对海带多糖的提取率和品质影响显著。
浸提时间、温度、料液比等条件的优化对海带多糖提取至关重要。
在实验中,我们发现在温度为80摄氏度,料液比为1:20,浸提时间为2小时的条件下,海带多糖的提取率最高,且具有较好的生物活性。
1.2 超声波辅助提取超声波辅助提取是一种常用的海带多糖提取方法,其优势在于提取效率高、操作简便等。
在超声波功率为200W、提取时间为30分钟的条件下,海带多糖的提取率可达到80%以上,远高于传统浸提方法。
1.3 酶法提取酶法提取是近年来新兴的海带多糖提取方法,可以有效地提高多糖的提取率和品质。
酶法提取条件的优化需要考虑酶的种类、用量、酶解时间等因素。
经过实验比较,发现在酶解温度为50摄氏度、pH为7.0的条件下,酶法提取海带多糖效果最佳。
二、脱蛋白研究2.1 酸碱处理脱蛋白是海带多糖提取过程中的关键一环,其目的是去除海带中的蛋白质,从而提高多糖的提取率和纯度。
酸碱处理是常用的脱蛋白方法之一,通过调节海带浸提液的pH值,使蛋白质发生沉淀或溶解,从而实现脱蛋白的目的。
2.2 高温处理高温处理是另一种常用的脱蛋白方法,可以通过加热海带浸提液,使蛋白质发生变性、凝固和沉淀,从而达到脱蛋白的效果。
经过实验研究,发现在90摄氏度下加热30分钟,可获得较好的脱蛋白效果。
总结回顾海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究对于提高海带多糖的提取率和品质具有重要意义。
在提取条件的优化方面,浸提条件、超声波辅助提取和酶法提取都是有效的方法,但在实际操作中需要根据具体情况选择合适的方法。
沈阳农业大学学报,2007-04,38(2):220-223JournalofShenyangAgriculturalUniversity,2007-04,38(2):220-223复合酶法提取海带多糖的研究赵前程1,滕钊1,汪秋宽1,刘俊荣1,金桥1,王翀2,白鹤1(1.辽宁省水产品加工及综合利用重点开放试验室,大连水产学院食品工程系,辽宁大连116023;2.沈阳农业大学食品学院,沈阳110161)摘要:采用复合酶法(纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,比例为2:1:1)从海带中提取3种多糖,并分析了不同加酶方式对海带多糖提取率和含量的影响。
结果表明:分步加酶法(先加纤维素酶:pH值为5.0,温度55℃,浸提10min;然后加果胶酶:pH值为4.2,温度50℃,浸提2h;最后再加木瓜蛋白酶:pH值为6.0,温度55℃,浸提2h),比同步加酶法(pH值为5.5,温度55℃,浸提4h10min)3种海带多糖和总多糖的提取率及多糖含量都有显著地提高。
分步加酶法提取的褐藻糖胶、褐藻淀粉、褐藻胶及总多糖的提取率分别为3.49%、2.05%、6.00%和11.54%,比同步加酶法分别提高了45.42%、37.58%、22.95%和31.58%;分步加酶法提取的褐藻糖胶、褐藻淀粉及褐藻胶的含量分别为87.1%、59.3%和88.6%,比同步加酶法分别提高了11.95%、4.77%和5.23%。
关键词:海带多糖;复合酶;加酶方式;提取率;多糖含量中图分类号:TQ925.9文献标识码:A文章编号:1000-1700(2007)02-0220-04LaminariaPolysaccharidesExtractionbyCompoundEnzymesZHAOQian-cheng1,TENGZhao1,WANGQiu-kuang1,LIUJun-rong1,JINQiao1,WANGChong2,BAIHe1(1.KeyLaboratoryofAquaticProductProcessingandUtilizationofLiaoningProvince,DepartmentofFoodEngineering,DalianFisheryUniversity,DalianLiaoning116023,China;2.CollegeofFoodScience,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110161,China)Abstract:Compoundenzymesofcellulose,pectolaseandpapainwithratioof2:1:1wereusedtoisolatepolysaccharidesfromlaminaria,andinfluenceoftwodifferentwaysofadditionofcompoundenzymesonpolysaccharideextractingrateandpolysaccharidecontentwerestudied.Theresultsshowedthatthewayofstepbystepadditionofcompoundenzymes(firstcellu-lose,thenpectolase,andfinallypapain)couldachievehigherextractingrateandpolysaccharidecontentthanthatofonestep.Theextractingratesoffucoidan,laminarianstarch,alginandtotalpolysacchoridethroughthewayofstepbystepwere3.49%,2.05%,6.00%and11.54%,increasedby45.42%,37.58%,22.95%and31.58%respectively,comparedwiththatofonestep.Mean-while,theresultsalsodemonstratedthatpolysaccharidecontentsoffucoidan,laminarianstarch,andalginthroughstepbystepwere87.1%,59.3%and88.6%,increasedby11.95%,4.77%and5.23%,respectively.Keywords:laminarianpolysacchorides;compoundenzymes;enzymeaddition;extractingrate;polysacchoridecontent海带是一种具有食用和药用的大型褐藻,其含有的多糖成分具有多种生理功能[1,2],海带中主要有3种多糖,即褐藻胶(algin)、褐藻糖胶(fucoidan)和海带淀粉(laminaran),褐藻胶和褐藻糖胶是细胞壁的填充物质,而海带淀粉存在于细胞质中。
文献综述生物工程海带多糖的研究进展摘要:综述了海带多糖的水提、酸提、碱处理等多种提取方法,以及近年来研究较多的酶法、微波法和超声波法,为海带多糖的提取提供方法依据。
海带多糖结构、性质迥异,具有多种生物活性。
综述了其在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗凝血、降血脂、降血糖、抗辐射、抗突变、抗氧化和耐缺氧等方面的生物功用。
关键词:海带多糖;提取;微波;超声波;生物活性多糖在自然界高等植物、藻类、细菌类及动物体内均有存在,分布极光。
近年来,随着科技的发展和医药界的需求,多糖的研究越来越深入,人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能,因此海带多糖的研究也倍受关注。
海带(Laminaria japonica Aresch)是一种大型的褐藻,含有丰富的功能性物质。
现代药理和临床研究表明,海带大部分生物活性与其主要成分多糖密切相关。
海带多糖是一类组成与结构复杂的多糖类物质。
采用不同的分离提取方法得到的多糖组分结构与组成也不同[1,2]。
笔者现就近年来海带多糖的成分、提取分离方法和生物功能研究等进行综述。
1化学成分的研究目前,从海带中发现3种多糖:褐藻胶(algin)、褐藻糖胶(fucoidan)、褐藻淀粉(laminaran)。
褐藻胶和褐藻糖胶是细胞壁的填充物,褐藻淀粉存于细胞质中。
褐藻胶在海带中相对含量最丰富,约为19.17%,它是由α-1,4-L-古罗糖醛酸(G)和β-1,4-D-甘露糖醛酸(M)为单体构成的嵌段二共聚物;海带中褐藻糖胶的含量一般在0.3%~1.5%,其主要成分是岩藻多糖,即α-L-岩藻糖-4-硫酸酯的多聚物,以碳1、3键和碳1、4键键合,同时还含有不同比例的半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸和少量蛋白质;褐藻淀粉又称海带多糖、昆布糖,有水溶性和水不溶性两种,主要由葡萄糖的多聚物组成,其在海带中含量一般为1%左右。
2海带多糖的提取、分离纯化方法2.1海带多糖的提取2.1.1水提法水提法为海带多糖的传统提取方法。