发酵豆粕（湿料）生产工艺
及相关指标
目录
目录 (2)
发酵豆粕生产手册 (3)
产品指标 (4)
混合及发酵设备 (5)
发酵车间设计 (6)
发酵豆粕湿料应用 (7)
发酵料储存时间 (9)
附件（部分检测方法）： (13)
发酵豆粕生产手册
原料：豆粕、酵源、水、糖蜜（非必选）
原料配比：酵源5kg +水500Kg+豆粕1000Kg（+糖蜜20Kg，非必选）工艺：上述原料混匀，转入发酵桶、盖严、室温48~120 小时。检测pH 值≤
5.5 即为合格。
发酵容器可选内膜袋、呼吸膜袋、发酵桶、发酵箱等，以能密闭不进气
为好。
添加顺序：酵源+水充分混匀，再加入豆粕中。
酵源与水混匀时间不小于2分钟，混合液添加至豆粕时间不超过
2分钟，混合液与豆粕搅拌混合不超过2分钟。
温度需求：水温30~40°C最宜，不能高于40°C，低于15°C考虑用热水；
环境温度20~40°C，低于15°C考虑保温或延长发酵时间。
水质要求：普通自来水及以上级别均可。
加工设备：材质要求不锈钢（防腐蚀）。
原料称量：确定电子秤准确后按配方要求顺序称取各种原料，最大误差：大宗原料保持在0.5Kg 以内、小料保持在100g 以内。
原料混合：非连续生产时，混合前后清理搅拌机，保证原料的混合均匀度。严禁出现结块，半干半湿现象。
产品指标
以46%蛋白豆粕计算，干料以60°C烘干计算
混合及发酵设备
混合设备：建议采用带投料斗垂直提升绞龙卧式混合机
接种混合系统在整个设计中比较关键，因此必须要满足一下几个条件：
1.对于水分较高的料具有较高的混合均匀度，不会出现成团或成球；
2.效率高，占地面面积小，运行费用低；
3.发酵前要尽量避免带入杂菌，因此菌种混合系统要易于清理。
发酵设备：建议采用呼吸袋或者厚一点普通密封塑料袋子，可以重复利用。混合完后装袋发酵，保证袋口密封，杜绝空气中的杂菌进入影响产品质量。
根据每个饲料厂的情况选择合理发酵方式，现在用的比较多的发酵模式有：槽式发酵，堆式发酵，箱式发酵，塔式发酵，罐式发酵，袋式发酵。由于我们这个方案是针对终端，发酵规模相对较小，操作需简单，投入小等特点，所以我们建议用袋式发酵，易于控制温度，夏天把袋子铺开来发酵，可以较好的散热，冬天把袋子堆起来发酵，可以较好提升发酵的保温，易于使用，每个袋子的发酵料都定量，用的时候不用称量，易于控制产品的质量，每个袋子都是独立的单元，互不影响，可以避免在使用过程中的二次发酵，没有用完的成品需密封储存，避免空气中的杂菌污染。
发酵车间设计
发酵车间可以建在建在尽量离投料口距离近，湿料发酵用空间为每3m2/吨湿料/批；车间尽量做到封闭，有利于控制发酵条件；发酵车间要保持清洁，必要时需定期消毒；须有保温设备，建议装地暖或暖气片，恒温发酵是决定发酵产品稳定的至关因素。具体可以由根源团队提供设计方案。
发酵豆粕湿料应用
全价料中使用方案
饲料配方中添加湿料，采用先预混合后粉碎→配料→制粒的方式，添加方法：预混合粉碎
发酵豆粕（湿料）与豆粕按1:3比例预混合（水分18%左右），发酵豆粕（湿料）与膨化玉米按1:2比例预混合（水分17%左右）.目的分散、降低水分，预混后用1.2mm 的筛片进行粉碎后，进入正常工序
制粒
混合粉碎后的发酵豆粕（湿）+豆粕、玉米直接进入配料混合、制粒工序。
二次制粒及先混合后粉碎工艺模式可以直接添加，省去上述步骤。
加料方式
小料口直接加到混合机与配方物料直接混合，因发酵后产品水份低，黏度小，流动性好,优点：可操作性强，节约成本。（预混合工艺、先配料后粉碎工艺、二次制粒工艺中在一次制粒时）
添加比例
配方保持不变，根据营养指标发酵豆粕湿料按照1.2：1替换配方中原豆粕含量。
如配方中原豆粕添加比例为5%，则发酵豆粕添加为=1.2×5%=6%，替代发酵豆粕干
料按照1.3:1添加。
实际生产中水分低于上表，但因各地气候环境不同，需做对比实验，来确定实际提升量
发酵料储存时间
发酵结束原料在原包装密闭条件下，储存大于6个月
混合后发酵湿料装在正常使用的饲料袋中保存（常温保存），15天
破包情况/开口保存（常温储存)，5天。
直接经济价值
1.促进畜禽健康：保障动物营养全面，增强动物体质，减少健康问题，降低死淘率，降低药物成本，降低养殖成本，使养殖动物食用更安全，。
2.提高饲料利用率：产品中富含的多种消化酶、有机酸等可提高动物对饲料蛋白、能量、矿物质的消化利用率，并在发酵过程中将发酵物料提前预消化，分解成小分子物质，更利于吸收利用，表现为粪便变少、变细、过料变少。在发酵过程中合成的中氨基酸、维生素、不饱和脂肪酸，可促进动物营养更均衡。
3.促进生长发育：补充功能性益生菌及代谢产物，维持菌群平衡，促进胃肠消化、吸收功能更强，提高生长速度，提高畜禽生产或繁殖性能，增加养殖效益。
4.改善内外环境：发酵过程中产生的益生菌对动物消化道产生益生保健作用，改善动物体内环境，减少消化道问题，同时减少粪便氨气、硫化氢等有害气体产生，改善圈舍环境，减少刺激气味，使养殖现场更环保。
5.抗应激：分泌抗氧化物质，减小免疫、转群、运输、惊吓、换料、天气剧烈变化等造成的应激反应，降低应激损失。
成本对比
根据目前的发酵豆粕生产成本进行成本对比（以规模化生产核算）：
根源生产技术服务
根源集团自有益生菌应用研发、生产体系，可保障产品的持续更新换代，保持行业的领先性，有持续改善能力，可提供发酵豆粕以外的发酵技术支持；
建立了一支由营销、生产和技术组成的团队，共同为合作伙伴服务；其中生产专家可以为合作伙伴提供流程优化和生产指导等一系列服务，技术专家可以给合作伙伴提供菌种配方优化、产品质量控制、发酵工艺指导等服务，分享经验；
对本项目工程负责终身跟踪服务。
附件（部分检测方法）：
固体pH 值测量
取半成品1g（分析天平），加入5ml 蒸馏水混匀，静置5min，取上清液测pH。
乳酸菌菌量检测方法
目的：检测产品中乳酸菌的菌量，以监测产品质量。
设备及仪器：1ml移液器及枪头，灭菌空平板，MRS培养基，超净工作台，无菌水，振荡器，无菌试管，10ml移液管，酒精灯，培养箱。
培养基（MRS）：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，K2HP04 2g，柠檬酸三铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，碳酸钙5g，琼脂粉18g，蒸馏水1L。116℃30min灭菌备用。
检测方法：
1、每只试管用10ml刻度吸管加入9ml无菌水，按所需梯度来定所需的试管数
2、用1ml移液器吸取菌液1ml（润洗3次)加入第一根试管中即得10-1稀释液
3、更换枪头，同样操作制成10倍梯度稀释的样品液，直至最后的稀释度
4、用1ml移液器吸取1ml菌液在酒精灯旁加到无菌空平板内（3块），倒入温度适宜的MRS培养基，约20ml左右，轻轻摇晃平皿混匀培养基和菌液。
注：如果样品为固体，先称取1g到含玻璃珠的三角瓶中，加灭菌水100ml，37℃震荡活化0.5h。然后再按上述方法稀释。
5、待培养基凝固后，倒置放入37℃培养箱内培养48h后即可计数（若有杂菌需要厌氧装置）。
6、以出现20～300个菌落数的稀释度的平板为计数标准，统计有效活菌数目。有效菌数（亿/ml)=有效菌落总数（3块板的平均数）×稀释倍数
芽孢杆菌检测方法
1 准备工作
1.1 培养皿：培养皿用洗洁精洗涤，然后清水反复冲洗干净，确保无洗洁精残留；晾干，用双层报纸包好121 °C/30min高压灭菌，冷却干燥后备用。
1.2 蒸馏水、刻度吸管（10 ml )、eppendorf移液枪（1000ul、100ul）、15×180试管、涂布器等所需物品报纸包好后121 ℃/30min 灭菌备用。
1.3 培养基配制(北京陆桥营养琼脂)
1.3.1 确保配制时容器清洗干净
1.3.2 培养基各组分称量准确无误
1.3.3 培养基配置日期、名称，配制人员等标示清楚
1.3.4 121 ℃/30min 灭菌
1.4 倒平板
1.4.1 超净工作台，火焰保护，确保无菌操作
1.4.2 每个平皿中培养基的量约为20ml（即一升培养基倒约50个）
1.4.3平板倒完后置于超净台上，开风机30min（禁止开启紫外灯），待平板凝固后用灭菌报纸包好倒置于恒温培养箱中37°C空培24小时
1.4.4 空培结束后，将平板置于冰箱内保存，待用
2 平板计数
2.1 样品制备：
2.1.1 发酵液样品制备：取100ml发酵液于250ml 三角瓶中，置于磁力搅拌器上搅拌2min, 搅拌状态下，取专用的10ml刻度吸管沿三角瓶壁插入，润洗3遍后
吸取发酵液10ml置于盛有90ml无菌水的500ml三角瓶中（含玻璃珠100粒），自然流下，旋转式摇床上200r/min室温振荡30min即得10-1稀释液
2.1.2 固体菌剂样品制备：按照统计学要求，多点采样，采样量不少于500g。准确称取待测样品1g，放入装有100ml无菌水的500ml三角瓶中（含玻璃珠100粒），在旋转式摇床上200r/min室温振荡60min即得10-2稀释液
2.2 操作步骤
2.2.1 根据样品浓度选择合适的稀释度，确定稀释用试管数量。
2.2.2 每只试管用10ml刻度吸管加入9ml无菌水
2.2.3 将制备好的样品置于漩涡震荡器震荡2min（准确计时），振荡完成后立即将1ml移液器（带枪头）插入试管底部，润洗3次后吸取稀释液1ml 于9ml 无菌水试管中，即得10-2稀释液（固体菌剂样品为10-3稀释液）
2.2.4 更换枪头，同样操作制成10倍梯度稀释的样品液，直至最后的稀释度2.2.5 涂布：取最后稀释度样品开始涂布，样品重新震荡1min（准确计时）立即用0.1ml移液器（带枪头）插入试管底部，润洗3次后吸取稀释液0.1ml，在火焰保护下将枪头尖部靠于打开的培养基上打出菌液，取涂布器均匀涂布30秒左右，至样品完全渗透入培养基（涂布过程中培养基有涩感），连续做3个平行。
2.2.6 同样操作共做3个连续的稀释度（稀释度由高到低），不同稀释度更换枪头和涂布器
2.2.7 涂布完的培养皿做好标示（样品名称、稀释度、操作人）
3 样品培养
将上述培养皿用报纸包好（减少水分蒸发，并防止污染），倒置于37℃恒温培养箱中培养24h可以计数（不同芽孢杆菌样品所需的培养温度和时间会有差
异）。
4 菌落计数
4.1 通过菌落识别结合镜检，确定有效菌。
4.2以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准，统计有效活菌数目。当只有一个稀释度，其有效菌平均菌落数在20~300之间时，则以该菌落数计算。若有两个稀释度，其有效菌平均菌落数均在20~300之间时，应按两者菌落总数之比值（稀释度大的菌落总数×10与稀释度小的菌落总数之比）决定，若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。准确计数有效菌落数和杂菌总数，每个稀释度3个培养皿菌落数之和的平均数为该稀释度有效菌落总数
4.3 计算
有效菌数（亿/ml,克）=有效菌落总数×10×稀释倍数
酵母活菌总数的检测
1 仪器、设备、试剂和培养基
1.1温箱：30±1℃。
1.2超净工作台
1.3分析天平，感量为0.01g。
1.4灭菌吸管：1ml（具0.01刻度）、10ml（具0.1刻度）。
1.5湿热灭菌锅。
1.6灭菌平皿：直径为90mm。
1.70.85%的无菌生理盐水。
1.8 震荡器
1.9培养基配方
YPD培养基：蛋白胨2%，酵母膏1%，葡萄糖2%，氯霉素0.1‰，琼脂1.8-2%，116℃，
20min蒸汽灭菌后备用。
孟加拉红培养基，成品，121℃，15min灭菌备用。
YPD培养基和孟加拉红培养基任选其一均可。
在超净工作台上将灭好菌的培养基倒平皿，每个大约20ml，放在紫外灯下吹风1小时，然后放在工作台面过夜，第二天备用（倒好的平板一次用不完的，可放入冰箱冷藏，保藏时间不得超过一周）。
2 操作步骤
2.1 以无菌操作方法称取1.00克待检样品，注入盛有99ml生理盐水的带有玻璃
珠的三角瓶中，30℃充分振荡30min。
2.2 吸取1：100的稀释液1ml注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀成1：1000的稀释液，按同法依次10倍递增稀释成1：10000、1：100000稀释液等备用，吸取不同浓度的稀释液时必须更换吸管。
2.3 根据待检样中酵母情况的估计，选择2～3个适宜稀释液，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移0.1ml于已经倒好的平板，用涂布棒均匀涂布。每个稀释度做三个平皿。
2.4 涂布好后，静置半小时，翻转平皿，置30℃温箱内培养约48小时后取出，计算平板内菌落数目，乘以10再乘以稀释倍数，即为每克样品中的酵母活菌的总数。
发酵豆粕各项指标检测方法与标准 发酵工艺2010-12-31 15:16:17 阅读86 评论0 字号：大中小订阅 1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。 2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。 3、pH的测定采用玻璃电极pHS-3C型pH计测定。 4、可溶蛋白的测定方法 5、小肽含量的测定 水份的测定 水份测定直接参见国标 测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量，其数值为A，并计算有机酸的挥发量。 水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量，否则会出现水分超标现象。 总有机酸检测 试剂：NaOH标准溶液（邻苯二甲酸氢钾标定），酚酞指示剂 仪器:磁力搅拌器离心机 方法： （1）取发酵后鲜样品15g 置于150ml烧杯中加入溶于100ml去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min。（2）取部分浸提样离心10min(3000r/min)。 （3）取上清液15ml, 加30ml去离子水稀释（以消除底色的影响），加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH 标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH体积。（终点到溶液呈现粉红） 计算 乳酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度； V(NaOH) ：消耗NaOH标准溶液体积； 0.09008：乳酸的毫克当量。 0.1mol氢氧化钠的配制与标定 1、配制：称取9.6g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液，注入2000ml无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却)，摇匀。 2、标定 称取0.67g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，溶于50ml的无二氧化碳水中，加4滴酚酞指示剂（0.1％），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。 3、计算 氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算 c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042 式中c（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度，mol/l； V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量，ml； V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量，ml； m——邻苯二甲氢钾之质量，g； ? 0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c（NaOH）=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。 0.1％酚酞指示剂的配制：称取1.000克酚酞，溶解与100ml95％的试剂酒精中，混匀即得。
发酵饲料生产工艺与 应用
灵璧县立腾同创农牧科技有限责任公司 二0一二年十一月
目录 安徽省立腾同创农牧科技有限公司简介 安徽省立腾同创农牧科技有限公司企业文化 安徽省立腾同创农牧科技有限公司的十年发展战略————— 安徽省立腾同创农牧科技有限公司的第一个发展五年发展计划第一章发酵饲料生产的菌种及发酵工艺 第二章发酵饲料生产技术
第一章发酵饲料生产的菌种及发酵工艺 第一节概述 一、发酵饲料的定义 发酵饲料的定义是：在人为可控制的条件下，以植物性农副产品为主要原料，通过微生物的代谢作用，降解部分多糖、蛋白质和脂肪等大分子物质，生成有机酸、可溶性多肽等小分子物质，形成营养丰富、适口性好、活菌含量高的生物饲料或饲料原料。 采用发酵技术生产的动物饲料或饲料原料，其特性主要是：（1）含有大量的活性微生物； （2）多数以厌氧发酵方式进行生产； （3）未经干燥的物料含水量通常在30%以上； （4）物料的酸性物质明显增加，营养组成更合理； （5）生产原料以植物性农副产品为主。 也有发酵成品是经过干燥处理的，比较典型的有发酵豆粕和发酵棉粕。在发酵过程中有大量的活性乳酸菌和酵母菌发生的代谢作用，经过干燥以后，乳酸菌基本都失活了，但是它们也属于发酵饲料。 二、发酵饲料的概述 发酵饲料的生产工艺基本都是以固态发酵的方式进行的，生产菌种以乳酸菌、芽孢杆菌和酵母菌为主，绝大多数采用厌氧或
兼性厌氧发酵。发酵物料的含水量为30%~50%，发酵时间和温度受环境影响很大，基本不进行人为控制和调节。 在实际生产中也有采用好氧发酵方式进行的，生产菌种以霉菌和假丝酵母为主，生产用的蛋白原料主要是一些乳酸菌和酵母菌难以降解的杂粕和胶质蛋白。但是生产设备复杂，物料温度和湿度变化很大，控制及其困难。成品主要是作为饲料蛋白原料的替代物，能降低饲料生产成本，但基本不具备生物学活性和功能。 本节主要论述厌氧固态发酵工艺，常规的发酵饲料生产流程如： 原料→消毒→冷却接种→培养→干燥→包装 工业化规模的微生物发酵过程基本上都是纯培养过程，原料需要消毒，空气需要过滤等。这些操作都是为了确保在发酵产品生产和储存过程中不受杂菌的侵袭和干扰，但也正是这些常规操作使产品的生产成本居高不下，影响了微生物发酵产品在动物饲养中的大剂量使用。 大量试验证明，在不考虑动物饲养成本的前提下，大剂量（在配合饲料中添加5.0%以上）使用高活菌含量的微生物发酵饲料可以明显改善动物的生产性能，提高动物的健康水平，甚至可以进行无抗生素饲养。但是采用传统的生产工艺获得的高活菌产品其生产成本通常都在10元/kg以上，如果以10%的比例使用在配合饲料中，每吨配合饲料的成本至少需要增加800元，这个增加值对传统的畜禽养殖业来说是难以接受的。降低发酵
豆粕营养成份及标准 [关键词]豆粕标准 植物蛋白类 植物性蛋白亦是提供饲料蛋白质的主要来源，其与鱼粉在饲料的关系中互为消长，而豆类及油实类等油脂含量丰富者，在采油后所得到的油粕类，通常蛋白质含量高，普通用来补给蛋白质，是极有用处的饲料来源。惟这些油粕类的饲料价值常视其成分、营养价，适口性、不良因子等而有差异。 豆粕 系指大豆采油过的残渣经过适度加热、干燥、粉碎者。大豆粕是鸡、猪、牛适口性良好的蛋白质源。黄豆粕之粗蛋白质含量约45％，其消化率高达 85-92％。黄豆内存在着非营养成分的urease等酵素，trypsin inhibiter，且活性很高，在生的情况下会阻碍消化率，雏鸡、子猪的发育。黄豆粕经过某种程度加热后，成长阻碍因子即失去活性，且饲料价值提高，但视其制造工程宫之加热条件面品质受到影响。其指标是使用水溶性氮素指数（NSI），ursease活性，trypsihn inhibiter含量，通常NSI 25％以下为一个指标。牛方面，加热不充分之urease活性高者不能使用于尿素配合饲料。 豆粕的自然属性 1、物理性质 颜色：浅黄色至浅褐色，颜色过深表示加热过度，太浅则表示加热不足。整批豆粕色泽应基本一致。 味道：具有烤大豆香味，没有酸败、霉败、焦化等异味，也没有生豆腥味。 质地：均匀流动性好，呈不规则碎片状、粉状或粒状，不含过量杂质。 比重：0.515?/FONT>0.65Kg/l 2、化学成份 豆粕中含蛋白质43％左右，赖氨酸2.5％～3.0％，色氨酸0.6％～0.7％，蛋氨酸0.5％～0.7％，胱氨酸 0.5％～0.8％；胡萝卜素较少，仅0.2～0.4mg/Kg，流胺素、核黄素各3～6mg/Kg，烟酸15～30mg/Kg，胆碱2200～2800mg/Kg。豆粕中较缺乏蛋氨酸，粗纤维 去皮与带皮豆粕组成比较 原蛋白 质Crude Protein Extract 以太纤 维Ether Fiber % 粗纤维 Crude % 能量 Energy (kcal/kg) 带皮豆 粕 44.0（8）0.5（10）7.0（7）2240（8）去皮豆 粕 48.5（10）1.0（7）3.0（10）2475（10） 带皮与去皮豆粕氨基酸组成比较 带皮豆粕去皮豆粕精氨酸 3.4 3.8 赖氨酸 2.9 3.2 蛋氨酸0.65 0.75 胱氨酸0.67 0.74 色氨酸0.6 0.7 组氨酸 1.1 1.3 亮氨酸 3.4 3.8 异亮氨酸 2.5 2.6 苯丙氨酸 2.2 2.7 苏氨酸 1.7 2 总价值 2.4 2.7
发酵豆粕中抗原蛋白的定性检测 ——SDS-PAGE法 1．适用范围 本标准适用于测定发酵豆粕中抗原蛋白的定性检测。 2．仪器设备 2.1蛋白电泳仪： 2.1.1 电泳仪；（建议使用：北京六一仪器DYY-2C型） 2.1.2 电泳槽；（建议使用：美国伯乐公司的mini型） 2.2 25μl微量进样器； 2.3 制胶装置；（与电泳槽配套出售，包括玻璃板(厚度分别为1.0 mm和 1.5mm各一套)，梳子，拨胶板） 2.4 移液枪(1000μl,200μl,10μl)以及其配套枪头；（属于常规实验耗材） 3．试剂 3.1 丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、过硫酸铵、TEMED；（建议购至上海申能博彩，Chemisonic 进口分装，必须要进口的产品！国产做出来的结果很差）；分析纯； 3.2 无水酒精，分析纯； 3.3 甘氨酸，分析纯； 3.4 Tris，分析纯； 3.5 考马斯亮兰R250，分析纯； 3.6甲醇，分析纯； 3.7 冰醋酸，分析纯； 3.8 甘油（丙三醇），分析纯； 3.9 β-巯基乙醇，分析纯； 3.10 溴酚蓝，分析纯； 3.11 HCl，分析纯； 4.试剂的配置 4.1 SDS-PAGE溶液的配制： 30%丙烯酰胺的配制：丙烯酰胺 30.0g N’N-甲叉双丙烯酰胺 0.8g
去离子水定容至100ml 4.2 10%过硫酸铵：将1g过硫酸铵溶于10.00ml去离子水中。 2.00mol/L Tris-HCl(pH=8.8)：称取Tris 121.14g溶于500mL蒸馏水中，用浓盐酸 调节pH至8.8(要求准确)。 1.00mol/L Tris-HCl(pH=6.8)：称取Tris 60.57g溶于500mL蒸馏水中，用浓盐酸 调节pH至6.8(要求准确)。 10%SDS：称取5gSDS溶于50ml蒸馏水中。 1.0% 溴酚兰：称取0.05g溴酚兰溶于5ml蒸馏水中。 4.3 染色液：考马斯亮兰R250 0.25g 甲醇 45.40ml 冰醋酸 9.20ml 水 45.40ml 4.4 脱色液：甲醇 456.0ml 冰醋酸 72.0ml 水 472.0ml 4.5 4×分离胶缓冲液：2.00mol/L Tris-HCl(pH=8.8) 75ml 10%SDS 4ml 蒸馏水 21ml 10%过硫酸铵 5ml 4.6 4×堆积胶缓冲液：1.00mol/L Tris-HCl(pH=6.8) 50ml 10%SDS 4ml 蒸馏水 46ml 10%过硫酸铵 5ml 4.7 电泳缓冲液： Tris 3.0g 甘氨酸 14.4g SDS 1.0g 定容至1L，用HCl调节pH为8.3。
目前制作豆粉的原材料主要有以下两种[1]： 第一种是以豆粕为原料，豆粕来源主要有两种，一种是经萃取出脂肪的豆子残渣（也就是市场上标明的浸出油），此类豆粕可称为一次豆粕，还有一种是在萃取出脂肪的豆粕基础上再次提取一些其他大豆提取物后的豆粕（如提取大豆异黄酮等，市场上欣靓、天雌素等产品就是采取这种方法），姑且称其为二次豆粕，二种豆粕在检验上不好区分，除非使用非常精密的仪器。 豆粕由于需要先萃取油脂的，因此其大多选取的是脂肪含量较高的转基因大豆，经过萃取工艺后，脂肪残留量大多≤0.5％，以此为原料制作的豆粉，细度可达80目、100目、120目甚至更多（有的厂家声称能提供200目豆粉），但这种豆粉有一种特点，由于其脂肪含量很低，所以在发酵生产中，必须辅以大量的消沫剂，否则泡沫无法控制。 此外此种豆粉的初始原料大多是脂肪含量较高的转基因大豆，因此其本身蛋白质含量相对偏低，相对以非转基因大豆为原料制成的豆粉蛋白质含量就更没有优势。但目前有些产品就专门使用这种豆粉，比如有的生产厂家的阿维菌素就采用此种豆粉。 第二种是采用豆子为原料（包括非转基因中国大豆和转基因大豆），这两者原料做成的豆粉在物理、化学性质，无法区别，可能在生物性质上有所区别。 先采取压榨方法压出油脂后（也就是市场上标明的压榨油），再进行炒饼，磨粉。这种豆粉相对豆粕豆粉价格要高一些，优点有以下几点： 1、此种豆粉由于压榨法取油，可以根据客户需要调整压力，从而控制最终豆粉中的残留脂肪含量，这种豆粉与上一种豆粉的最大区别，在发酵生产使用中可以减少消沫剂的用量，因为脂肪也具有消泡功能，而且由于脂肪自然均匀地分布在豆粉中，其消泡效果相应地好于同等效果消沫剂。 基础料中使用消沫剂一方面价格昂贵，另一方面对生产菌种也有一定的毒性；即使选用植物油也会因油脂漂浮在发酵液表层，影响发酵液的溶氧水平和菌丝的呼吸。 2、如果选用非转基因中国大豆，其蛋白质含量要高于转基因大豆及及以其为原料制成的豆粕。 此外还有一些其他类型的豆粉：有的是将前两种豆粉按比例混合，有的干脆是掺假（有的掺土、有的掺玉米粉），假货的检测方法也比较简单，只要检测蛋白质含量，即知道是否掺假；后一种检测比较麻烦，但如果您要求采购高脂肪残留的豆粉，哪么只要脂肪残留量检测合格，就基本可以断定其真实性或仅仅掺和了较少量的豆粕粉；但有些产品就要求使用按比例掺和豆粉，这就另当别论了。 制作工艺 这是豆粉制作的关键，决定着的豆粉的质量及外观、颜色 豆粕豆粉： 原料如果由豆粕的话，其颜色相对偏浅一些，因为大多数豆粕原料都是比较小的片状物体，由于脂肪含量极低，极易粉碎，以此原料做豆粉的厂家，大多不再炒豆粕，或仅进行简单地温度较低的炒制，这主要因为一方面豆粕在萃取出油的过程，为了提高出油速度和出油率，已经进行过适当加热，另外由于豆粕片比较小，含水量都非常低，比较干燥，相对表面
发酵豆粕的研究与应用 [提要] 豆粕是饲料工业中常用的一种优质植物蛋白原料，其营养丰富，蛋白质含量高，氨基酸组成比例合理，但是豆粕中存在多种抗营养因子，降低了畜禽对其营养的吸收和利用。用微生物发酵的方式处理豆粕，不仅可以有效去除豆粕中的抗营养因子，还能够将豆粕的蛋白质降解成小肽，更利于消化吸收，同时还能够产生有益的微生物代谢产物，大大提高了豆粕的营养价值。本文从豆粕营养价值、发酵豆粕特点、发酵豆粕的应用等方面进行阐述。 关键词：发酵豆粕；抗营养因子；营养价值 一、豆粕的营养特点 豆粕是大豆榨油之后的副产品，一般其粗蛋白含量在43%～48%之间，含有人体所必需的8种氨基酸，尤其是赖氨酸的含量比较高，其含量约为2.5%～2.8%。目前豆粕在饲料工业和畜牧养殖上有广泛的应用。与棉粕、菜粕、花生粕相比，豆粕具有氨基酸含量平衡、消化率高、适口性好等特点；与动物来源蛋白（如鱼粉、骨肉粉、血浆蛋白粉等）相比，豆粕具有货源充足、不易被病原菌污染或氧化腐败，含毒害物质概率低、安全系数高等特点。所以豆粕是一种优良的植物性蛋白饲料源。 （一）豆粕中的抗营养因子。豆粕虽然营养价值很高，但是豆粕中还存在着许多抗营养因子。这些抗营养因子会影响动物对豆粕营养成分的消化。在豆粕中主要有胰蛋白酶抑制剂、植酸、大豆凝血素、脲酶、低聚糖、脂肪氧化酶、大豆抗原蛋白及致甲状腺肿素等多种抗营养因子。它们的存在，一方面对动物体内某些消化酶起抑制作用或与营养物质络合成不易消化的成分等，使得豆粕的消化率和动物的吸收率下降；另一方面对动物体内的某些器官起到破坏作用，对动物的生理、生长、健康造成不良的影响。 豆粕中常见抗营养因子有以下几类： 1、胰蛋白酶抑制因子（TI）。这是大豆中的主要蛋白类抗营养因子。胰蛋白酶抑制剂会造成动物出现消化吸收功能紊乱，抑制鸡、猪等畜禽的生长、抑制动物体内胰蛋白酶活性，刺激胰腺大量分泌胰蛋白酶，引起胰腺的肿大。 2、植酸。能在肠胃中与多种二价阳离子结合，形成难溶性的植酸盐络合物，大大降低了动物对微量矿物质的吸收与消化，会使动物出现矿物质缺乏症状，如厌食、消瘦、生长迟缓和脱毛等。 3、脲酶。本身是没有毒性，但能将豆粕中部分含氮化合物分解成氨，降低氮的利用率，大量氨的存在会引起肌体氨代谢障碍，可引起动物中毒。 4、脂肪氧化酶。约占豆粕蛋白质的2%左右，能使大豆产生豆腥味和苦涩味，
豆粕的质量指标以及验收指标 1主题内容与适用范围 本标准规定了饲料用大豆粕的质量指标,适用山东省明发同茂饲料有限公司所用的大豆粕（注：经预压-浸提法或浸提法提取油后的饲料用大豆粕）。 2 感官性状 浅黄色不规则碎片状，色泽一致，新鲜，有豆粕的特殊香味。无发酵、霉变、结块、虫蛀及异味异臭。不得掺入饲料用大豆粕以外的物质，若加入抗氧化剂、防霉剂等添加物时，应做相应的说明。 3 质量指标（暂行标准） 水分≤14.5% ； 粗灰分≤7.0%; 粗蛋白质≥42.0%； 65%≤蛋白质溶解度≤85% 0.03 Nmg/分钟·克≤脲酶活性≤0.3% Nmg/分钟·克 4 验收指标 感官性状，水分，粗灰分，粗蛋白，蛋白溶解度，脲酶活性。 5 卫生指标 滴滴涕（mg/kg）≤0.02 ，其余卫生指标应符合中华人民共和国《饲料卫生标准》GB 13078有关的规定。 6 检验 水分、粗蛋白质、粗纤维、粗灰分等指标按《饲料工业标准汇编》2002版执行。对公司不能检测的项目或有争议的检测结果，根据需要可送相应的检测机构进行检测。
饲料用花生粕 1主题内容与适用范围 本标准规定了饲料用花生粕的质量指标，用于明发同茂饲料公司所用的花生粕。 2 感官性状 碎屑状，色泽呈新鲜一致的黄褐色或浅褐色，无发酵、霉变、虫蛀、结块及异味异臭。不得掺入饲料用花生粕以外物质，若加入抗氧化剂，防霉剂等添加剂时，应做相应的说明。 4 质量指标 水分≤12.0% 粗蛋白质≥45.0% 粗纤维< 6.5% 粗脂肪≤2.0% 粗灰分< 8.0% 5 卫生指标 黄曲霉毒素B1（mg/kg）≤0.05，其它卫生指标应符合中华人民共和国《饲料卫生标准》GB 13078的有关规定 6 检验 水分、粗蛋白质、粗纤维、粗灰分等指标按《饲料工业标准汇编》2002版执行。对公司不能检测的项目或有争议的检测结果，根据需要可送相应的检测机构进行检测。
发酵豆粕检测方法 （参考）
目录 1.检测用仪器简介 (2) 2.变性聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳 (3) 3.Elisa 大豆球蛋白（酶联免疫法） (6) 4.小肽的检测（酸溶蛋白） (10) 5.寡糖的检测——薄板层析法（TLC） (11) 6.乳酸的检测 (12) 7.蛋白溶解度的检测（PS） (13) 8.发酵豆粕蛋白溶解度的检测（改良） (14) 9.水溶性蛋白的检测 (15) 10.挥发性盐基氮（VBN） (17) 11.PH 值测定 (19) 12.水苏糖含量的测定 (20) 13.水分、粗蛋白、粗灰分、粗纤维、尿素酶活性的检测 (20)
1、检测用仪器简介
2、变性聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳 聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速而且可重复的方法。通过对电泳条带的观察和分析，可以很明显的看出发酵前后或不同产品的抗原蛋白含量。 一、原理 SDS—聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳主要依据蛋白质的分子量对豆粕中的抗原蛋白进行分离。SDS 与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折迭结构，并使其稳定地存在于一个广泛均一的溶液中。SDS—蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。由于在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，而电荷因素可以被忽略。SDS—PAGE 因易于操作和用途广泛，成为许多研究领域中一种重要的分析技术。 二、仪器 1、电泳仪及电泳槽 2、振荡器 3、离心机（10000 转） 4、移液枪（大、中、小） 5、离心管（7ml、5ml 或 1.5ml、1ml） 三、试剂： 1、单体母液：100ml 丙烯酰胺（ACR）30g 甲叉双丙烯酰胺0.8g 去离子水定容至100ml，棕色瓶4℃下存放。可保存 3 个月。 2、分离胶缓冲液（4×）（PH=8.8）100ml Tris-base（1.5mol/L）18.17g SDS 0.4g 浓 HCL 调节 PH 至 8.8，定容至 100ml，过滤，4℃存放。 3、浓缩胶缓冲液（4×）（PH=6.8）100ml Tris-base（0.50mol/L） 6.06g SDS 0.4g 浓 HCL 调节 PH 至 6.8，定容至 100ml，过滤，4℃存放。 4、10%（w/v）过硫酸铵1ml 过硫酸铵0.1g
豆粕发酵产业现状、存在问题及发展对策 陇东学院2013级农学石锁强 【摘要】：本文综述了发酵豆粕的生产现状及其生产工艺，分析了影响发酵豆粕品质的发酵菌种、水分、温度、批量大小、发酵设备等因素及传统发酵豆粕生产过程中存在的不足，如蛋白质含量低、抗营养因子去除不彻底、适口性差及成本高等问题，并对发酵豆粕的市场前景做了进一步展望。 【关键词】：豆粕固体发酵饲料抗营养因子 1.1 豆粕及发酵豆粕简介 1.1.1 豆粕简介 豆粕是大豆经提取豆油后得到的副产品。研究表明，其营养成分主要有蛋白质40%～44%，脂肪1%～2%、碳水化合物10%～15%，赖氨酸2.5%～3.5%，色氨酸0.6%～0.7%，蛋氨酸0.5%～0.7%，胱氨酸0.5%～0.8%，以及多种矿物质、维生素和必需氨基酸，营养成分比较齐全且均衡，还含有异黄酮、磷脂等生物活性物质[l]。 1.1.2 我国饼粕资源开发利用现状 因为饼粕在生产应用中的诸多优势，使得其在代替鱼粉制造发酵蛋白饲料方面的应用开始受到了越来越多的关注，虽然饼粕的发酵生产发展迅猛，但毕竟还处于发展的初期，还存在许多问题[2]，主要包括：①粗纤维含量高达14%以上，蛋白质含量20%-40%不等，有效能值不到豆粕的70%，由于残留皮壳，饼粕颜色发黑，严重影响其商品价值；②饼粕的蛋白质（氨基酸）消化利用率低，只有30%-60%，均明显低于鱼粉及豆粕等优质蛋白质饲料资源；③低质饼粕中有毒有害物质含量高。不仅严重影响畜禽生产性能，还会损害动物器官，影响动物的生长发育，甚至导致动物死亡。
1.1.3 发酵豆粕简介 (1) 发酵豆粕 发酵豆粕又名生物肽，生物豆粕，生物活性小肽，大豆肽[3]。是指利用有益 微生物发酵低质豆粕，去除多种抗营养因子，同时产生微生物蛋白质，丰富并平 衡豆粕中的蛋白质营养水平，最终改善豆粕的营养品质，提高饲料效率。发酵豆 粕含益生菌、酶、水溶性维生素、肽、氨基酸、大豆异黄酮等功能成分。这对动 物的生长十分有利。另外在发酵过程中产生的酸味物质，对于幼龄动物，具有明 显的诱食效果。并且，由于部分碳水化合物被降解，豆粕致密结构变得疏松，适 口性显著提高。 (2) 发酵豆粕的特点 豆粕经过发酵产生了一减一增的双重功效[4]：一减，是将豆粕中的抗营养因 子降解为动物可利用的营养素；一增，是较普通豆粕增加了活菌、肽、氨基酸、 活性酶、乳酸、维生素、大豆异黄酮等活性因子。相比于普通豆粕，发酵豆粕具 有以下优点。 ①能有效去除豆粕中的抗营养因子，其对动物的生理效应[5]见表1-1。通过 微生物发酵技术,可将豆粕中目前已知的多种抗原进行降解，有效去除豆粕中的 抗营养因子。微生物发酵法降解豆粕中抗营养因子主要通过微生物及其产生的代 谢产物对抗营养因子的降解来实现，部分对热敏感的抗营养因子，通过加热途径 即可将其去除。 表1-1 大豆中抗营养因子及其对动物的生理效应 抗营养因子名称生理效应 降低胰（糜）蛋白酶活性，生长迟缓，胰腺增生、肿大胰蛋白酶抑制因 子 大豆凝集素肠壁损伤，免疫反应，增加内源氮排出量，增加内源蛋白分泌 抗原蛋白免疫反应，影响肠壁完整性 单宁通过形成蛋白质－碳水化合物复合物，影响蛋白质和碳水化合物的 消化 皂甙溶血，影响肠道渗透性
发酵豆粕品质的评价与应用体系 技术部整理 用现代生物技术处理豆粕，在我国还处于大规模产业化初期，迄今为止国内生产发酵豆粕的企业只有几十家，且品质参差不齐，主要是因为对饲用发酵豆粕的功能、特性认识不足而无法制定统一的国家标准或行业标准，以至监管部门对鱼龙混杂的发酵豆粕市场无法进行有效监管，而饲料生产企业在选择产品上也无据可依。现就发酵豆粕的营养特性及其品质评定等做一些介绍。 1.发酵豆粕的营养特点及其功能 应用多菌种组合固态发酵技术处理豆粕所生产的功能大豆寡肽蛋白饲料，较之普通豆粕，具有“安全+营养”的双重功能。 豆粕中的抗营养因子已基本破坏 豆粕中主要的抗营养因子如胰蛋白酶抑制因子、低聚糖、凝集素、植酸与尿酶等，通过微生物、酶及发酵产生的有机酸作用，使得抗营养因子被降解（90%以上）或被钝化，从而得到破坏。 豆粕蛋白的抗原性基本消除 豆粕中含有的11S和7S蛋白（约5%左右）具有很强的抗原性，幼龄动物对其尤其敏感，通过发酵降解而使其失去抗原性，至大豆肽蛋白饲料中抗原蛋白含量约0.5%。 大分子蛋白质被降解为氨基酸及各种肽 豆粕中大分子蛋白质主要是11S和7S抗原蛋白，分子量分别为350KD和180KD，通过发酵酶解，分子量小于10000Da，蛋白质的KOH溶解度为95%以上，大分子蛋白质被降解为氨基酸及各种肽，氨基酸的平衡更好，有利于动物吸收，从而提升大豆肽蛋白的营养功能。 含有丰富的各种有益发酵产物 用现代生物技术处理豆粕生产功能大豆寡肽蛋白饲料所采用的菌株为复合菌株，其组成为乳酸菌、枯草芽孢杆菌、粪链球菌、黑曲霉与酵母菌等安全菌株，固态发酵豆粕制备的功能大豆寡肽蛋白饲料，含有益生菌、有机酸、蛋白酶等代谢产物这类“多功能添加剂”，从而实现功能大豆寡肽蛋白饲料“安全+营养”的双重功能。功能大豆寡肽蛋白饲料生产过程中生成的这类“多功能添加剂‘的主要成分为：益生菌、包括蛋白酶在内的复合酶、未知生长因子、有机酸、抗氧化成分、酵母培养物与发酵混合物等代谢产物。
豆粕加工工艺
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大 豆 加 工 工 艺 流 程 图 备注： 为关键工序 为质控点 1大 7风选去皮 13浸 出 19浸出粕 20脱 溶 20干燥冷却 22去皮豆粕 22过筛 22混 合 22打 包 4风 6一次破碎 8二次破碎 9风选去皮 10豆仁 10豆 皮 11轧 胚 10豆皮仓 10皮仁 10粉 碎 20 DT 粕(100℃，30分) 22粉 碎 22成品豆粕 17二 蒸 15混合油 16一 蒸 18汽 提 18大豆毛油 10豆皮筛 10二次风选 14正己烷 21分 水 21混合汽 21冷 凝 5加热（60-70℃，20-30分钟） 12膨 化 12冷 却 2计 3筛
大豆加工工艺描述： 1、原料大豆： 榨油二厂原料豆从储存筒仓7号仓、8号仓和9号仓（通常称呼为榨油二厂工作仓）经过RE100A、RE100B、RE100C进入EL100后经过RE101运输到车间准备生产(RE为刮板、EL为斗提）。 2、计量 大豆经输送刮板RE101进入车间后，先进入计量秤WE101计量。 3、筛选 大豆出计量秤进斗提机EL101送至车间顶楼依靠重力进入大豆筛SI101。大豆筛（平面回转筛）为震动、半封闭有一定坡度的设备。当原料豆进入时大豆可以从筛子孔中穿过进入风选器AS101，而大豆中秸秆豆荚等大块杂质由大豆筛尾部滑出，使之与大豆分离。 4、风选 AS101为大豆风选设备，大豆进入AS101后其中的微小杂质如粉尘碎豆皮等吸入布袋除尘器FI101，由除尘器汇总后通过下料溜槽进入豆皮绞龙SC161，FI101同时还吸收EL101，SI101中的灰尘杂质。 经过这样几步的预处理原料豆就变的比较干净了，然后进入下一个环节原料加热过程。 5、大豆加热器 大豆加热器DR105内部通有密集的蒸汽加热管道，DR105共12层，层与层之间有通风管道与刹克龙CY105相连通，能够吸走大豆所散发出的水汽及部分脱落的豆皮，能够在短时间内将大豆加热到60-70度左右，起到软化降低水分及调质的作用。 加热后大豆主要控制水分指标，其水分比原料豆低1%左右。 6、一次破碎（自带除铁器） 热豆由计量绞龙SC105输出，经过斗提机EL107提到车间高处后经过溜槽进入第一道破碎机DE111—114 ，将大豆破碎至2瓣左右，然后进入风选器AS111—114。破碎机自身带有除铁器，可以去除物料中的金属杂质。 7、风选去皮 风选器利用豆瓣与豆皮重量不同的原理，将大豆破碎后散落的豆皮吸入刹克龙CY115、CY116，豆皮进豆皮筛。经过破碎之后的原料豆变为带有少量豆皮2瓣左右的碎豆瓣，进入下一环节二次破碎。 8、二次破碎 碎豆瓣进二次破碎机CR11-114, 将大豆破碎至4到8瓣左右，然后进入风选器CN111—114。 9、风选去皮 风选器利用豆瓣与豆皮重量不同的原理，将大豆破碎后散落的豆皮吸入刹克龙CY117，豆皮进豆皮筛。经过破碎之后的原料豆变为无豆皮4到8的碎豆瓣，可进行下一环节的扎胚。 热豆经过破碎风选之后水分也有所下降，由于此步将豆皮与豆瓣分离，大大提高了浸出效率，同时为生产高蛋白豆粕创造了条件。 10、豆皮系统（皮仁、豆皮筛选、二次风选、豆仁、豆皮粉碎、豆皮仓） 风选后的皮仁进入CY115、CY116、CY117之后通过下料溜槽进入豆皮筛SI160和SI161，豆皮筛内筛网孔径约4毫米左右，部分豆皮通过筛孔进入风选AS160，通过风选将豆皮分离，豆皮进入CY160后由一条下料溜管进入SC161豆皮绞龙，而很小的豆仁（豆皮碎豆瓣）直接进入RE120.通不过豆皮筛筛网的大块豆皮经溜管进入SC161。同时大豆除尘器FI101内灰尘等杂质也通过一条溜管进入SC161。 以上三条溜管的物料进入SC161后再进入豆皮粉碎机HG161、HG162。豆皮经过粉碎
微生物发酵提高玉米－豆粕型日粮营养价值的初步研究 摘要: 对玉米－豆粕型日粮进行混菌固态发酵，以去除其中的抗营养因子。研究结果表明，发酵饲料的抗原蛋白发生了大幅的降解，发酵后蛋白质相对分子质量主要集中在 18 kDa 以下，小于5 kDa的小分子肽含量从发酵前的 1． 35%提高到了 3． 60%，蛋白质的体外消化率提高了 4． 0 个百分点。发酵饲料的棉子糖家族寡糖被彻底降解，其淀粉含量降低了 3． 5 个百分点，直链淀粉含量提高了4． 13 个百分点，有益的代谢产物乳酸等有机酸的含量达到 2． 78% ，pH 下降至 4． 43。 关键词: 玉米; 豆粕; 微生物; 发酵 Abstract: Corn － soybean meal diet was fermented by mixed strains via solid state fermentation to remove the anti － nutrient factor． The results showed that antigen proteins in fermented feed were degraded sharp- ly． The relative molecular weight of proteins after fermentation were gathered below 18 kDa，and peptides below 5 kDa were increased from 1． 35% to 3． 60% ，accordingly the protein digestibility in vitro was in- creased 4． 0% ． Besides，raffinose family oligosaccharides were degraded thoroughly，while the starch con- tent decreased 3． 5% ，the amylose increased 4． 13% ，organic acids content including lactic acid reached to 2． 78% ，and the pH decreased to 4． 43． Key words: corn; soybean meal; microbe; fermentation 目前，国内饲料主要以玉米－豆粕型为主，其中 玉米作为主要的能量饲料，常常占到日粮组成的 60% 左右，而豆粕是动物日粮中蛋白质的主要来源， 提供饲料工业 75% 的饲用蛋白 ［1］
发酵豆粕饲用品质的评定指标及其应用 摘要植物肽蛋白饲料发酵豆粕用品质的评定指标主要有感官指标、常规理化指标、非常规理化指标与尝试检测指标等，本方就这些指标的应用及应注意的问题进行了讨论，指出要正确认识植物肽蛋白饲料发酵豆粕的饲用品质，必须从感观、抗营养因子去除程度、小分子蛋白含量、挥发性盐基氮及有益菌、乳酸含量等方面对其饲用品质进行综合的整体评定。 关键词植物肽蛋白发酵豆粕饲用品质评定指标应用 植物肽蛋白饲料发酵豆粕的饲用品质评定指标主要有感官指标、常规理化指标、非常规理化指标与尝试检测指标等。 1.感官指标及其在植物肽蛋白饲料发酵豆粕饲用品质评定上的应用 1.1正常植物肽蛋白饲料发酵的色、香、味与粘度 色：植物肽蛋白饲料发酵皆为棕黄色，这是由于豆粕经过发酵干燥颜色变深所致。如果颜色较浅且不均匀，或与豆粕一致，有可能发酵程度不够或掺入生豆粕或其它浅色蛋白原料。此外，同一批产品颜色应一致，不同批的产品颜色也应一致或接近一致。 香：淡淡的酸香味，无异味与霉味。加适量的水煮开后有很强且愉快的发酵酸香气，无氨臭。掺入了载机酸的植物肽蛋白饲料发酵豆粕，酸味较刺激且不均匀。 味：品尝正常无异物感，略带酸涩味。 粘度：植物肽蛋白饲料发酵豆粕按1：1~2加水调和后可感觉其粘度。 水泡评定：将植物肽蛋白饲料发酵豆粕放置到透明烧杯中用水泡，如果溶液及固体植物颜色金黄或灰黄且均匀，又无发黑杂志和黒（硬颗粒则为未发酵或发酵不彻底的豆粕），表明烘干时加热均匀，没有烘干过度，对营养成分保存较好。闻之有酸香味但无刺鼻感。上浮的杂质中无赖皮及其它植物杂质，手捏揉觉柔软但无明显颗粒感。用水不断轻柔冲洗发现水溶物质较多，最后剩下较少渣滓，则质量较好。这样的豆粕发酵程度较深，经发酵的其高分子蛋白（﹥66.2ku）、中分子蛋白（25~66.2ku）减少，小分子蛋白（﹤25ku）提高，还有更小的物质如肽、氨基酸等，水解度提高，故手捏无硬物颗粒感。 1.2凭感官指标对植物肽蛋白饲料发酵饮用品质评定的局限性 常见的植物肽蛋白饲料发酵掺假是往豆粕中掺入其它非豆粕蛋白原料，常见的有玉米蛋白、大米蛋白、棉粕、菜粕与花生粕等植物源蛋白，或肉骨粉、氨基酸菌体蛋白、水解羽毛粉、水解皮革粉与劣质蛋白胨等以提高蛋白含量，但却降低了植物肽蛋白饮料发酵豆粕的饲用品质。 这类产品可以通过显微镜观察或全氨基酸检测进行判定。纯豆粕发酵产品其氨基酸比例类似豆粕原料，这是因为植物肽蛋白饲料发酵豆粕的氨基酸是豆粕氨基酸的浓缩，如果氨基酸组成比例出现较大差异，掺入杂粕等的可能性较大。由于植物肽蛋白饲料发酵豆粕产品一般都粉得很细（一般90%过80目筛），粒度过
单细胞蛋白及其发酵生产与工艺流程 一、单细胞蛋白 1、单细胞概述 单细胞生物产生的细胞蛋白质称为单细胞蛋白(single cell protein简称SCP)，这一词是1966年在美国麻省理工学院命名的。它所包含的产品有饲用酵母，食用酵母和药用酵母三大类。单细胞蛋白是解决世界蛋白质不足的一个重要途径。与用农牧业生产的蛋白质相比，它的生产占用土地甚少，投资较省。它的营养丰富．售价亦较适宜，是良好的饲用和食用蛋白资源。对于人多地少的我国来说，建立单细胞蛋白产业对改善人民食物构成和生物技术的开发，都具有重要的意义。 2、单细胞蛋白的含义及氨基酸组成 单细胞蛋白（Single—Cell—Protein，简称SCP）是从酵母或细菌等微生物菌体中获取的蛋白质。微生物细胞中含有丰富的蛋白质，例如酵母菌蛋白质含量占细胞干物质的45%～55%；细菌蛋白质占干物质的60%～80%；霉菌丝体蛋白质占干物质的30%～50%；单细胞 藻类如小球藻等蛋白质占干物质的55%～60%，而作物中含蛋白质最高的是大豆，其蛋白质含量也不过是35%～40%。单细胞蛋白的氨基酸组成不亚于动物蛋白质，如酵母菌体蛋白，其营养十分丰富，人体必需的8种氨基酸，除蛋氨酸外，它具备7 种，故有“人造肉”之称。一般成人每天吃干酵母10～15g，蛋白质的需要量就足够了。微生物细胞中除含有蛋白质外，还含有丰富的碳水化合物以及脂类、维生素、矿物质，因此单细胞蛋白营养价值很高。 3、生产单细胞蛋白的原料 生产单细胞蛋白的原料种类很多，大体分为3类。 （1）工业废液类 包括造纸废液、酒精废液、味精废液、淀粉废液、生产柠檬酸废液、糖蜜废液、木材水解废液、豆制品废液等。 （2）工农业糟渣类 包括白酒糟、啤酒糟、果酒渣、醋糟、酱油糟、豆渣、粉渣、玉米淀粉渣、药渣、甜菜渣、甘蔗渣、果渣、饴糖渣等。 （3）化工产品类 包括石油、石蜡、柴油、天然气、正烷烃、甲醇、乙醇、醋酸等。 除以上所介绍的外，农作物秸秆、批壳、饼粕类、畜禽粪便、有机垃圾、风化煤等也可作为原料生产单细胞蛋白。 4、单细胞蛋白的生产特点
豆粕营养成份及标准集团档案编码：[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]
豆粕营养成份及标准 植物蛋白类 植物性蛋白亦是提供饲料蛋白质的主要来源，其与鱼粉在饲料的关系中互为消长，而豆类及油实类等油脂含量丰富者，在采油后所得到的油粕类，通常蛋白质含量高，普通用来补给蛋白质，是极有用处的饲料来源。惟这些油粕类的饲料价值常视其成分、营养价，适口性、不良因子等而有差异。 系指大豆采油过的残渣经过适度加热、干燥、粉碎者。大豆粕是鸡、猪、牛适口性良好的蛋白质源。黄豆粕之粗蛋白质含量约45％，其消化率高达85-92％。黄豆内存在着非营养成分的urease等酵素，trypsininhibiter，且活性很高，在生的情况下会阻碍消化率，雏鸡、子猪的发育。黄豆粕经过某种程度加热后，成长阻碍因子即失去活性，且饲料价值提高，但视其制造工程宫之加热条件面品质受到影响。其指标是使用水溶性氮素指数（NSI），ursease活性，trypsihninhibiter含量，通常NSI25％以下为一个指标。牛方面，加热不充分之urease活性高者不能使用于尿素配合饲料。 豆粕的自然属性 1、物理性质 颜色：浅黄色至浅褐色，颜色过深表示加热过度，太浅则表示加热不足。整批豆粕色泽应基本一致。 味道：具有烤大豆香味，没有酸败、霉败、焦化等异味，也没有生豆腥味。 质地：均匀流动性好，呈不规则碎片状、粉状或粒状，不含过量杂质。 比重：0.515?/FONT>0.65Kg/l 2、化学成份 豆粕中含蛋白质43％左右，赖氨酸2.5％～3.0％，色氨酸 0.6％～0.7％，蛋氨酸0.5％～0.7％，胱氨酸0.5％～0.8％；胡萝卜素较少，仅0.2～0.4mg/Kg，流胺素、核黄素各3～ 6mg/Kg，烟酸15～30mg/Kg，胆碱2200～2800mg/Kg。豆粕中较缺乏蛋氨酸，粗纤维主要来自豆皮，无氮浸出物主要是二糖、三糖、四糖，淀粉含量低，矿物质含量低，钙少磷多，维生素A、B、B2较少。表2反映的是豆粕与其他各种油粕的组成比较。 去皮与带皮豆粕组成比较 原蛋白质 CrudeProteinExtract 以太纤维 EtherFiber% 粗纤维 Crude% 能量 Energy(kcal/kg)带 皮 豆 粕 44.0（8）0.5（10） 7.0 （7） 2240（8） 去 皮 豆 粕 48.5（10） 1.0（7） 3.0 （10） 2475（10） 带皮与去皮豆粕氨基酸组成比较 带皮豆粕去皮豆粕精氨酸 3.4 3.8 赖氨酸 2.9 3.2 蛋氨酸0.650.75 胱氨酸0.670.74 色氨酸0.60.7 组氨酸 1.1 1.3 亮氨酸 3.4 3.8 异亮氨酸 2.5 2.6 苯丙氨酸 2.2 2.7 苏氨酸 1.72 总价值 2.4 2.7 豆粕在饲养中的应用 大约85%的豆粕用于家禽和猪的饲养。豆粕中富含的多种氨基酸对家禽和猪摄入营养很有好处。实验表明，在不需额外加入动物性蛋白的情况下，仅豆粕中含有的氨基酸就足以平衡家禽和猪的食谱，从而促进它们的营养吸收。在生猪饲料中，有时也会加入动物性蛋白作为额外的蛋白质添加剂，但总体看来，豆粕得到了最大限度的利用。只有当其他粕类单位蛋白成本远低于豆粕时，人们才会考虑使用其他粕类作为替代品。 在奶牛的饲养中，味道鲜美、易于消化的豆粕能够提高出奶量。在肉用牛的饲养中，豆粕也是最重要的油籽粕之一。但是，在牛的饲养过程中，有些时候并不需要高质量的豆粕，用其他粕类可以达到同样的喂养效果，因此，豆粕在牛饲养的地位要略逊于生猪饲养中的地位。 最近几年来，豆粕也被广泛应用于水产养殖业中。豆粕中含有的多种氨基酸枣例如蛋胺酸和胱胺酸枣能够充分满足鱼类对氨基酸的特殊需要。由于鱼粉用鱼捕捞过度原因，造成世界鱼粉减产，供给的短缺使鱼粉价格居高不下，因此，具有高蛋白质的豆粕已经开始取代鱼粉。在水产养殖业中发挥越来越重要的作用。 此外，豆粕还被用于制成宠物食品。简单的玉米、豆粕混合食物同使用高动物蛋白制成的食品对宠物来说，具有相同的价值。美国依利诺斯大学进行的一次实验表明，豆粕具有同猪肉一样的高蛋白，却不含影响营养消化的低糖酸盐。
来源：百度文库 发酵豆粕评判标准、测定程序和鉴别方法-葛向阳，蛋白源饲料新研究[J] 利用现代生物技术将豆粕转化为优质蛋白质饲料原料，是国际研究开发热点，技术和产业化水平在国际上以丹麦最为突出。我国在这方面的研究始于上世纪九十年代末，目前国内已形成大规模产业化的布局，已有几十家企业生产发酵豆粕，但品质参差不齐，饲料企业在选择产品上缺乏科学的依据。 1 豆粕发酵的目的 明确豆粕发酵的目的，才能够确定评判发酵豆粕质量的主要指标。豆粕经过发酵其主要目的有以下四个方面： 1.1 破坏豆粕中抗营养因子 豆粕中含有胰蛋白酶抑制因子、低聚糖、凝集素、植酸、脲酶等抗营养因子，发酵过程中通过微生物、酶及发酵产生的有机酸的作用，使得抗营养因子被降解或者钝化，从而得到破坏。 1.2 消除豆粕蛋白的抗原性 豆粕中含有的7S 和11S 蛋白具有很强的抗原性，幼龄动物对其尤为敏感。在发酵过程中，主要是通过将其降解而使其失去抗原性。 1.3 降解大分子蛋白质 豆粕中11S 和7S 蛋白分子量分别为350KD 和180KD，通过发酵酶解，被降解为氨基酸及各种多肽，有利于动物的吸收利用。 1.4 形成各种有益发酵产物 目前豆粕发酵均采用枯草芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌等安全菌株，产品发酵后往往含有较高数量的有益菌和有机酸、蛋白酶等代谢产物。 2 发酵豆粕评判程序 对发酵豆粕的评判，可以按四个步骤进行，需要检测的指标如下： 2.1 感官评判 包括细度、色泽、粘度、气味。 2.2 常规理化分析 包括蛋白含量、水分、灰分、酸度、TCA-N。 2.3 非常规理化分析 包括SDS-PAGE 电泳、挥发性盐基氮、蛋白质溶解度、胰蛋白酶抑制因子、脲酶活性、有益活菌数。 2.4 深度分析
大 豆 加 工 工 艺 流 程 图 备注：为关键工序为质控点
大豆加工工艺描述： 1、原料大豆： 榨油二厂原料豆从储存筒仓7号仓、8号仓和9号仓（通常称呼为榨油二厂工作仓）经过RE100A、RE100B、RE100C进入EL100后经过RE101运输到车间准备生产(RE为刮板、EL为斗提）。 2、计量 大豆经输送刮板RE101进入车间后，先进入计量秤WE101计量。 3、筛选 大豆出计量秤进斗提机EL101送至车间顶楼依靠重力进入大豆筛SI101。大豆筛（平面回转筛）为震动、半封闭有一定坡度的设备。当原料豆进入时大豆可以从筛子孔中穿过进入风选器AS101，而大豆中秸秆豆荚等大块杂质由大豆筛尾部滑出，使之与大豆分离。 4、风选 AS101为大豆风选设备，大豆进入AS101后其中的微小杂质如粉尘碎豆皮等吸入布袋除尘器FI101，由除尘器汇总后通过下料溜槽进入豆皮绞龙SC161，FI101同时还吸收EL101，SI101中的灰尘杂质。 经过这样几步的预处理原料豆就变的比较干净了，然后进入下一个环节原料加热过程。 5、大豆加热器 大豆加热器DR105内部通有密集的蒸汽加热管道，DR105共12层，层与层之间有通风管道与刹克龙CY105相连通，能够吸走大豆所散发出的水汽及部分脱落的豆皮，能够在短时间内将大豆加热到60-70度左右，起到软化降低水分及调质的作用。 加热后大豆主要控制水分指标，其水分比原料豆低1%左右。 6、一次破碎（自带除铁器） 热豆由计量绞龙SC105输出，经过斗提机EL107提到车间高处后经过溜槽进入第一道破碎机DE111—114 ，将大豆破碎至2瓣左右，然后进入风选器AS111—114。破碎机自身带有除铁器，可以去除物料中的金属杂质。 7、风选去皮 风选器利用豆瓣与豆皮重量不同的原理，将大豆破碎后散落的豆皮吸入刹克龙CY115、CY116，豆皮进豆皮筛。经过破碎之后的原料豆变为带有少量豆皮2瓣左右的碎豆瓣，进入下一环节二次破碎。 8、二次破碎 碎豆瓣进二次破碎机CR11-114, 将大豆破碎至4到8瓣左右，然后进入风选器CN111—114。 9、风选去皮 风选器利用豆瓣与豆皮重量不同的原理，将大豆破碎后散落的豆皮吸入刹克龙CY117，豆皮进豆皮筛。经过破碎之后的原料豆变为无豆皮4到8的碎豆瓣，可进行下一环节的扎胚。 热豆经过破碎风选之后水分也有所下降，由于此步将豆皮与豆瓣分离，大大提高了浸出效率，同时为生产高蛋白豆粕创造了条件。 10、豆皮系统（皮仁、豆皮筛选、二次风选、豆仁、豆皮粉碎、豆皮仓） 风选后的皮仁进入CY115、CY116、CY117之后通过下料溜槽进入豆皮筛SI160和SI161，豆皮筛内筛网孔径约4毫米左右，部分豆皮通过筛孔进入风选AS160，通过风选将豆皮分离，豆皮进入CY160后由一条下料溜管进入SC161豆皮绞龙，而很小的豆仁（豆皮碎豆瓣）直接进入RE120.通不过豆皮筛筛网的大块豆皮经溜管进入SC161。同时大豆除尘器FI101内灰尘等杂质也通过一条溜管进入SC161。 以上三条溜管的物料进入SC161后再进入豆皮粉碎机HG161、HG162。豆皮经过粉碎