当前位置:文档之家› 实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项

实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项

实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项
实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项

实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项

一、酶与载体的分装

酶类与载体:T载体(50 ng/μl)用灭菌水稀释4倍(12.5 ng/μl)后分装成10 μl或20 μl;

连接酶(solutionΙ)按5 μl分装;

dNTP(10 mM)分装成50 μl;

无菌水分装成1 ml;

注意:(1)所有分装都必须用已灭菌的管。

(2)所有工具酶和载体的使用过程均在冰浴中进行。

(3)工具酶、载体以及试剂盒等实验室共用物品,用完后必须及时放回原处,以免耽误他人使用。

(4)当你发现你使用的是最后一管(盒)公用物品时,请马上告知负责人购买,以免耽误使用。

(5)感受态,氨苄青霉素和IPTG由研究生轮流负责制备。每人负责六个月。其他试剂则由第一位使用新包装的同学分装。由于分子实验工具酶比较容易失活,必须在冰上进行分装。

二、常见抗生素及IPTG的配置

以氨苄青霉素为例:

1.准备足够量的1.5 ml的EP管、两个100 ml的离心管、0.22 μm水系滤器、注射器、蒸馏水,以上用品均要进行高压灭菌。

2. 洁净工作台紫外灭菌,然后进行以下操作。

3.称取2 g的氨苄青霉素粉末于离心管中,加入灭菌水至总体积为20 ml,轻摇离心管,至氨苄青霉素粉末完全溶解,以免过滤时堵塞滤膜。

4.用注射器吸取配制好的溶液,然后把滤器安在注射器上,缓缓推动注射器活塞,把溶液经滤膜推至100 ml的离心管中。

注意:动作要缓和,使滤出液出口正对着离心管,还要防止染菌。

5.把100 ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到1.5 ml的EP管中,每管

0.5 ml。在EP管上做好标记,包括名称、浓度、日期等。

6.把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。

注意:当你发现你使用的是最后一管抗生素时,请马上告知有关人员及时配制,以免耽误使用。

表1.常见抗生素的储存浓度及工作浓度

名称储存浓度工作浓度

氨苄青霉素(ampicillin)100 mg/ml 50 μg/ml~100 μg/ml

卡那霉素(kanamycin)10 mg/ml 10 μg/ml~50 μg/ml

氯霉素(chloramphenicol)25 mg/ml 12.5 μg/ml~25 μg/ml

链霉素(streptomycin)50 mg/ml 10 μg/ml~50 μg/ml

四环素(tetracyyline)10 mg/ml10 μg/ml~50 μg/ml

IPTG 1 M 0.05-0.6 mM

三、分子生物学实验中各种试剂与溶液的配制

分子生物学实验中各种试剂与溶液的配制参见《分子克隆》。

四、总DNA的提取

具体步骤参考试剂盒说明书。注意:革兰氏阳性菌DNA提取时需要加溶菌酶。

五、基因扩增

1.引物与合成:设计引物序列,发至生工公司进行合成(jinan@https://www.doczj.com/doc/f017594513.html,)。2.引物配制:合成后的引物先离心至管底,然后按说明书用无菌水稀释至10-50μM,分装至无菌EP管中,做好标记(一定要标记浓度!)后,于-20度保存备用。

3.PCR反应体系配制:将所需各组分在冰浴中化开后,进行PCR反应体系配制。反应体系及反应参数按不同聚合酶的说明书进行,以transgen 的easyTaq酶扩增1kb基因序列为例,100 μl反应体系为:10×buffer 10 μl,dNTP (10 mM) 2 μl,引物各2 μl (10-50μM),模板1 μl(根据浓度加减体积),Taq酶1 μl,ddH2O 82 μl(注意:加入顺序为:水,buffer,dNTP,引物,模板,酶)。涡旋混匀,分装至四-五管,瞬时离心。

注意:若反应时间较长在反应混合液的上层加10-20 μl 的矿物油防止样品在PCR的过程中蒸发。

4.将管放入PCR仪中,在PCR仪上设置好PCR反应参数,例如:94 ℃5 min,94 ℃ 40 sec,Tm 55℃ 1 min,72 ℃ 2 min,72 ℃ 10 min,16 ℃ 1 h,一般设30个循环。待温度降至16 ℃后停止PCR仪,尽快取出样品,不允许过夜。

六、琼脂糖核酸电泳

1. 电泳缓冲液的配制:电泳缓冲液一般为TAE(或TBE),其配制方法参见

表2,先配制50×母液放于4度冰箱中,电泳时稀释100倍使用。

2. 将制胶模具和梳子冲洗干净,架好梳子;

3. 根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶(表

3):准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液;

4.放入到微波炉内加热至胶粒全部熔化(一般沸三次即好),冷却片刻,倒入制胶模具中,待其凝固;

a)室温下30-45分钟后凝胶完全凝结,小心拔出梳子,将凝胶安放在电

泳槽内;

b)向电泳槽中倒入电泳缓冲液,其量以没过胶面1 mm为宜,如样品孔

内有气泡,应设法除去;

c)在DNA样品中加入1/5-1/10体积的上样缓冲液(1% SDS, 50%甘油,

0.05%溴酚蓝),混匀后,用枪将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶

加样孔内;

5.接通电源,红色为正极,黑色为负极,切记DNA样品由负极往正极泳动(靠近加样孔的一端为负)。根据胶的长度设定电压,一般5-8 V/cm,电泳20-40 min, 溴酚蓝跑完胶板的3/4左右即可;

6.电泳完毕,关上电源,戴上手套,将胶放入0.5 μg/ml的溴化乙锭(EB)溶液中,室温下染色5-10 min。

7.蒸馏水中漂洗一下,置于紫外灯下或凝胶成像仪上观察电泳带及其位置,并与核酸分子量标准Marker比较被扩增产物的大小。如果要切胶回收,最好在观察台上铺上塑料片观察,防止污染以及紫外灯引起DNA突变。

注意:溴化乙锭(EB)有剧毒,操作时应注意安全,戴手套操作。但是要避免污染染色池和切胶板以外的区域。操作完后手套和胶分别放入垃圾桶和回收桶。

表2. 电泳缓冲液TAE配方

电泳缓冲液配方

表3.琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围

琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围

琼脂糖凝胶浓度线形DNA的最佳分辨范围(bp)

0.5% 1,000~30,000

0.7% 800~12,000

1.0% 500~10,000

1.2% 400~7,000

1.5% 200~3,000

2.0% 50~2,000

七、回收与连接

1.将切下的目的条带按照回收试剂盒说明书进行产物回收;

2.连接前先电泳确定待连接载体与片段的浓度。稀释好的T 载体浓度为12.5 ng/μl,不用再确定浓度,每次用量为1 μl。

3.连接反应体系的配制

(1)用Solution I连接时,取一只分装的Solution I离心管(含5 μl Solution I),加入待连接的两个DNA样品:载体与片段(载体与片段的mol比为1:

3-5),加水补足10 μl。

(2)用T4连接酶5 μl连接时,取一只灭菌PCR管,加入10×连接buffer 1 μl,待连接的两个DNA样品:载体与片段(载体与片段的mol比为1:3-5),

T4连接酶1 μl,加水补足10 μl。

(3)连接至T载体时反应体系一般为:回收的PCR产物 4 μl, solution I 5 μl,4倍稀释的pMD-18T克隆载体(12.5 ng/μl)1 μl。

注意:加入顺序为:水,buffer,DNA样品,酶

4.混匀样品并短暂离心使样品全部沉于管底。

5.将离心管置于16 ℃孵育4 h以上或过夜。

八、E. coli DH5α和Bl21感受态细胞的制备

采用CaCl2制备法制备E. coli DH5α感受态细胞,步骤如下:

1.准备实验:(1)准备LB固体培养基和分装于试管(2-5 ml)和三角瓶(100 ml)的液体培养基。(2)分别配制含15%甘油的和不含甘油的0.1 M CaCl2。

(3)准备干净培养皿、非常干净的100 ml离心管2只,1.5 ml EP管50只,1ml和200μl枪尖各一盒。(4)将以上培养基和物品高压灭菌。

2.在LB平板上活化E.col i DH5α。将活化的E.col i DH5α单菌落接种于成含LB 培养基的试管中,37 ℃摇床过夜培养。

3.第二天按1%接种量接种到含100 ml LB培养基的三角瓶中,37 ℃摇床培养至OD600=0.4-0.6 (约2 h)。

4.冰浴10 min,倒入灭过菌的100 ml离心管中离心,4000 rpm,10 min,4 ℃。5.去掉上清,加20 ml配制好的已灭菌的0.1 M CaCl2,将菌体打散后静置20 min,4000 rpm离心10 min,去掉上清。

6.加1-2 ml 灭菌的0.1 M CaCl2 (含15%甘油)制成感受态细胞。将制好的感受态细胞分装成50 μl 小份保存于-80 ℃冰箱。

7.E. coli Bl21和BL21(DE3)的制备方法同上。

注意:(1)所有操作均在冰上进行;(2)整个制备过程必须保证无菌操作;(3)E.coli Bl21,BL21(DE3),DH5α菌种每学期更换一次。

九、转化

1.取50 μl感受态细胞于冰浴上融化。

2.加入10 μl连接产物或3-5 μl纯质粒,轻轻吹打混匀,冰浴20 min。

3.放入42 ℃水浴中热激90秒,立即放入冰浴中2-10 min。

4.加入0.5 ml不含抗生素的LB 液体培养基,于37 ℃培养1 h。

5.将培养物4000 rpm离心3 min,保留约200 μl上清于管中,将菌体用无菌枪尖轻轻打散,均匀涂布于含100 μg/m l Amp+的平板表面,平板于37 ℃先正置1-2 h,后倒置培养12-16 h至菌落出现。

十、重组子的筛选和鉴定

从转化平板上挑取白色菌落,转接至含抗生素Amp+(100 μg/ml)的LB液体培养基,37 ℃振荡培养过夜。菌液可以用以下三种方法验证是否是阳性转化子。注意:同时培养阴性菌落作为对照!

(一)酚抽验证

取1 ml菌液12,000 rpm 离心1 min收集菌体,尽量倒干净上清后加入50 μl Tris 饱和酚和50 μl 水,漩涡震荡5 min充分混匀。12,000 rpm离心10 min后迅速取上清进行琼脂糖凝胶电泳。

(二)质粒酶切验证

1.按照质粒提取试剂盒说明书进行质粒提取,用未插入片段的质粒作为阴

性对照,进行琼脂糖凝胶电泳。电泳后可根据质粒的大小初步判断质粒中是否有插入片段,并推测质粒的浓度。

2.利用引物中设计的酶切位点或质粒上的酶切位点,对质粒进行酶切。根

据待切质粒的浓度确定要加的体积, 选择合适的限制性内切酶和配套Buffer。

3.在离心管中加入如下成分:

10×Buffer 2 μl

待切样品x μl(一般为 5μl左右)

酶 1 μl 10U/u l

加灭菌水补足20 μl

酶的多少并不是一成不变的,关键要看待切DNA的浓度,如果浓度较低,

可以适当少加酶。不要在20 μl体系中加入超过2 μl 的酶,那样容易产生星号活性。

4、混匀样品并短暂离心使样品沉于管底。

5、将离心管置于37 ℃中温育2 h,若待切样品为PCR产物,则可将反应时间适当延长。最长酶切时间要取决于是否会产生星号活性。如果50μl体系加入1μl酶,则可过夜酶切一般不会出现星号活性。

6、用未酶切的质粒作为对照,琼脂糖电泳鉴定酶切结果。

注意:当酶切样品用于回收而不是鉴定时,可按比例适当扩大反应体积。不同内切酶最适酶活温度不同,如BamH I最适酶活温度为30 ℃。双酶切可选用二者活性都较高的Buffer或者通用Buffer,但要注意不能有星反应。

(三)菌落PCR

挑取培养皿上的部分菌落或取0.5-1.0 μl菌液作为模板进行PCR扩增,每管反应体系最低可少至10 μl,琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增结果。若为阳性转化子,可检测到插入的目的条带。

将鉴定好的阳性转化子菌液500 μl 送上海博尚生物技术有限公司进行序列测定。注意:冬天温度很低时需做成甘油管样品送测!

实验室基本技能培训要点

实验室基本技能培训要点 4.2 仪器的较准 1、电子天平校准 因存放时间较长,位置移动,环境变化或为获得精确测量,天平在使用前,一般都应进行校准操作。 轻按CAL显示器出现CAL-100,闪烁,此时,把100g校准砝码放上称盘,显示器出现--------等待状态,经几秒名钟后显示器出现100.0000g,拿去校准砝码,显示器应出现0.0000g,如若显示不为零,则再清零,再重复以上校准操作(注意,为了得到准确的校准结果最好反复以上校准操作二次)。 2、容量仪器的较准 (1)、新到容量仪器使用前进行校准(容量瓶、量筒、刻度吸管、大肚吸管) (2)、容量仪器可分为“量入”和“量出”二大类。 (3)、先较准天平,再将容量仪器洗净、凉干后进行较准。 (4)、较准作业在20℃的室内进行,用蒸馏水或其它纯水进行。 3、酸度计校准 ?1 将“选择”钮拨至pH档,“斜率”旋钮顺时针旋到底;“温度” 旋钮旋至溶液的温度值。 ?2 把用蒸馏水清洗过的电极插入pH=6.86pH(25℃时的值)的标 准缓冲溶液中,待读数稳定后调节“定位”旋钮至该溶液在当时 温度下的pH值(当时温度下的pH值可查附录)。

?3 用蒸馏水清洗电极然后将电极插入pH=4.00或pH=9.18的标 准缓冲溶液中(根据被测溶液的酸碱性确定选择那一种缓冲溶 液,如果被测溶液呈酸性则选pH=4.00缓冲溶液;如果被测溶 液呈碱性则选pH=9.18的缓冲溶液),待读数稳定后调节“斜率” 旋钮至该溶液在当时温度下的pH值(当时温度下的pH值可 查附录)。 ?4 重复步骤2和3直到不需要再调节二旋钮为止。 ?5 标定结束(一般情况下,在24h内仪器不需要再标定)。 4.3基本仪器的使用方法 4.3.1滴定管的使用 ?使用时应先用欲滴定溶液润洗2-3次; ?注入溶液或放出溶液后,需等待30s-1min后才能读数(使附着 在内壁上的溶液留下); ?滴定管应用拇指和食指拿住滴定管的上端(无刻度处)使管身 保持垂直后读数; ?对于无色溶液或浅色溶液,应读弯月面下缘实线的最低点(视 线应与弯月面下缘实线的最低点相切); ?滴定时,最好每次都从0.00mL开始,或从接近零的任一刻度 开始,这样可固定在某一段体积范围内滴定,减少测量误差。 读数必须准确到0.01mL。 ?旋塞要保护润滑,适量使用凡士林,外套胶管固定,防止漏液。 4.3.2移液管的使用

实验室安全防护知识注意事项(正式)

编订:__________________ 单位:__________________ 时间:__________________ 实验室安全防护知识注意 事项(正式) Standardize The Management Mechanism To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level. Word格式 / 完整 / 可编辑

文件编号:KG-AO-4600-41 实验室安全防护知识注意事项(正 式) 使用备注:本文档可用在日常工作场景,通过对管理机制、管理原则、管理方法以及管 理机构进行设置固定的规范,从而使得组织内人员按照既定标准、规范的要求进行操作,使日常工作或活动达到预期的水平。下载后就可自由编辑。 近日,合肥工业大学化学楼发生硫化氢泄漏事件。化学试剂在实验中随时充满了危险,因此需要特别注意!发点实验室安全防护方面的知识,一起学习。 化学实验中会经常使用各种化学药品和仪器设备,以及水、电、煤气,还会经常遇到高温、低温、高压、真空、高电压、高频和带有辐射源的实验条件和仪器。若缺乏必要的安全防护知识,会造成生命和财产的巨大损失。因此,对从事化学实验室工作人员的安全防护教育是非常重要的,必须引起本中心全体人员的重视。 危险化学品 易燃试剂 在处理易燃试剂时,都应严格检查在附近有无明

火。下列常用的有机溶剂都具有很大的易燃性:碳氢化合物如己烷、轻石油(即石油醚)、苯、甲苯;醇类如甲醇、乙醇;酯类如乙酸乙酯;酮类如丙酮;醚类化合物因其暴露在空气或见光会产生易爆炸的过氧化物,因此,使用时要特别注意。常用的乙醚和四氢呋喃就属于醚类,处理时要特别小心。 此外,乙醚还具有相当低的沸点和一定程度的麻醉作用,二硫化碳具有很高的易燃性,甚至用水浴加热都会导致它着火,因此在实验中应尽量避免使用。 氧化剂 硫酸、硝酸既有很强的腐蚀性,也有很强的氧化性。像漂白粉、过氧化氢、过酸、二氧化钴和高锰酸钾等都是很强的氧化剂。 腐蚀性药品 处理或使用腐蚀性试剂时一定要戴上防护手套。一旦溅到皮肤上,应立即用大量的水冲洗干净。无机酸当中的硫酸、盐酸、氢溴酸、磷酸和硝酸,有机酸中的羧酸、磺酸都是具有腐蚀性的。苯酚也是相当危

实验室安全管理规范

实验室安全管理规范公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

实验室安全管理规范 1、目的为了营造一个安全有效、秩序良好的实验室环境,达到“科学、规范、安全、高效”的目的,特制订本实验室管理规定。 2、适用范围规定适用于进入实验室内所有人员。 3、实验室管理人员职责负责公司新产品研发实验、调试、验证和测试等研发任务。 3.1实验室负责人 3.1.1负责实验室日常管理,组织安排测试任务顺利进行; 3.1.2负责管理实验室业务流程,指导分析人员及时、准确的完成各项分析工作; 3.1.3负责实验室质量控制,维护实验室质量体系,审核、监控测试数据和结果; 3.1.4负责实验室安全检查与突发事件处理; 3.1.5负责监督检查实验室日常卫生,有权安排本实验室所有相关人员严格执行实验室日常卫生制度。 3.1.6负责仪器设备的验收和台帐建档工作; 3.1.7负责仪器设备的使用、维护、期间核查和周期检定; 3.1.8负责仪器设备在检定周期内使用和检验标识的管理; 4、实验室管理办法 4.1实验室工作人员必须严格遵守国家安全法规和公司有关制度,确保安全文明从事研发工作。

4.2实验室出口、走廊是安全通道,任何时候应保持畅通。实验室配置的灭火器、消防砂、消防水带等供消防使用,任何部门或个人不能随便移动或挪作它用。 4.3实验室要保持整洁、安静,物品摆设要整齐、规范、科学,做好四防、五关、一查(防火、防盗、防破坏、防灾害事故;关门、窗,水、电、气;查仪器设备)。 4.4所有进入实验室的人员应服从实验室管理人员安排,采取必要安全措施,保证人身及仪器设备的安全。 4.5实验室的仪器设备,未经管理人员许可,任何人不得擅自开关、使用和移动实验室中的任何设备。 4.6对于有规定的预热时间的仪器设备,使用设备的人员必须提前预热登记。 4.7不得将与实验无关人员带入实验室。 4.8由于责任事故造成仪器设备的损坏,要追究使用人的责任。 5、实验室安全管理制度 5.1实验室应制定相应实验室规则及实验室安全制度。根据本实验室情况制定严格的操作规程及防火、防盗管理制度,实验室内部人员要严格执行。进入实验室的外来人员都必须遵守实验室有关的规章制度。 5.2实验室工作人员及参加实验的人员必须认真学习实验仪器的安全技术操作规程,熟悉各仪器使用方法及注意事项。 5.3所有药品、试剂都有指定位置,药品、试剂使用和购买后要放入指定位置,各种药品、试剂要有正确清晰的标签,包括名称、浓度、规格等,按正确方法取用。

生物实验室安全常识

生物实验室安全常识(废液处理篇) 2007-12-26 10:11:24 信息来源:生物谷 ?生物实验室安全常识(废液处理篇)生物谷编者按:我们的生物实验室存在多少危险?生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害?实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多?这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康,或者环境带来长远的影响,因此生物通联合《遗传》、《中国生物工程杂志》、《生命世界》杂志开展2 007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动,提出警示,珍惜生命!此次活动的现状调查报告将发于相关部门,提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染,如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物 .bioon. 生物谷网站 生物谷编者按: 我们的生物实验室存在多少危险? 生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害? 实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多? 这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康,或者环境带来长远的影响,因此生物通联合《遗传》、《中国生物工程杂志》、《生命世界》杂志开展2007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动,提出警示,珍惜生命!此次活动的现状调查报告将发于相关部门,提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。 实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染,如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物试剂等。而化学污染则包括有机物污染和无机物污染。除此以外,还有部分实验室存在放射性污染。 在此次赛默飞世尔中国生物实验室安全调查活动中,从现有调查结果中,我们惊讶的发现许多生物实验室存在严重的污染问题,而其中又以废液废品的处理为最,大部分实验室在进行

实验室安全防护知识注意事项

实验室安全防护知识注意事项 姓名:XXX 部门:XXX 日期:XXX

实验室安全防护知识注意事项 近日,合肥工业大学化学楼发生硫化氢泄漏事件。化学试剂在实验中随时充满了危险,因此需要特别注意!发点实验室安全防护方面的知识,一起学习。 化学实验中会经常使用各种化学药品和仪器设备,以及水、电、煤气,还会经常遇到高温、低温、高压、真空、高电压、高频和带有辐射源的实验条件和仪器。若缺乏必要的安全防护知识,会造成生命和财产的巨大损失。因此,对从事化学实验室工作人员的安全防护教育是非常重要的,必须引起本中心全体人员的重视。 危险化学品 易燃试剂 在处理易燃试剂时,都应严格检查在附近有无明火。下列常用的有机溶剂都具有很大的易燃性: 碳氢化合物如己烷、轻石油(即石油醚)、苯、甲苯;醇类如甲醇、乙醇;酯类如乙酸乙酯;酮类如丙酮;醚类化合物因其暴露在空气或见光会产生易爆炸的过氧化物,因此,使用时要特别注意。常用的乙醚和四氢呋喃就属于醚类,处理时要特别小心。 此外,乙醚还具有相当低的沸点和一定程度的麻醉作用,二硫化碳具有很高的易燃性,甚至用水浴加热都会导致它着火,因此在实验中应尽量避免使用。 氧化剂 硫酸、硝酸既有很强的腐蚀性,也有很强的氧化性。像漂白粉、过氧化氢、过酸、二氧化钴和高锰酸钾等都是很强的氧化剂。 第 2 页共 5 页

腐蚀性药品 处理或使用腐蚀性试剂时一定要戴上防护手套。一旦溅到皮肤上,应立即用大量的水冲洗干净。无机酸当中的硫酸、盐酸、氢溴酸、磷酸和硝酸,有机酸中的羧酸、磺酸都是具有腐蚀性的。苯酚也是相当危险的,能导致皮肤灼伤,它的有毒蒸气能够被皮肤吸收。无机碱中的氢氧化钠、氢氧化钾这样的强碱,硫酸钠、硫酸钾这样的弱碱都具有腐蚀性,有机碱中的胺、羟胺、三乙胺、吡啶等都具有腐蚀性。 液溴是非常危险的药品,它能导致皮肤、眼睛的灼伤,因此一定要在通风橱里使用。此外,由于它的密度较大,当用滴管转移时,即使不挤乳胶头,都可能因其重力而滴下来,因此,使用时要特别小心。 氯化亚砜、酰氯、无水三氯化铝以及其他的一些试剂,因能与水反应放出氯化氢气体,也具有腐蚀性,并会对呼吸系统产生严重的刺激。 安全防护知识 眼睛的保护 在普通的眼镜外面再戴上护眼罩或护目镜,在实验室里禁止戴隐形眼镜。如果眼睛里溅上药品,一定要采取紧急处理。 防护眼镜 穿着、服装 在实验室里应穿上防化服。另外,也不要穿拖鞋、凉鞋。 仪器和设备 一般情况下,若不知道某个仪器或设备的功能,不要试图使用它们。象真空吸收泵、旋转蒸发仪、压缩气体钢瓶等,一旦错用都可能导致这些昂贵的仪器的损坏,或者使实验失败,更严重的是导致一些事故的发生。在安装实验仪器之前,要检查玻璃磨口是否沾有碎片或碎渣。在加 第 3 页共 5 页

实验一 实验基本操作规范

实验一实验基本操作规范 一、实验目的 1.了解实验室的基本要求、实验室安全及防护知识 2.熟悉常用玻璃仪器及洗涤与干燥 3.掌握称取、吸取和量取的操作规范 4.掌握移液管、容量瓶、滴定管的正确使用方法 二、实验器材 (此部分要求同学们自己写,挑主要的写即可) 三、常用玻璃仪器(此部分不用写在实验报告) 化学实验中的玻璃仪器分为普通玻璃仪器和标准磨口仪器。 1. 普通玻璃仪器 常见的普通玻璃仪器有试管、烧杯、烧瓶等,见图1-1所示。 图1-1 常用普通玻璃仪器 2. 标准磨口仪器 化学实验中常用的标准磨口仪器如图1-2所示。

短颈圆底烧瓶斜三颈烧瓶梨形烧瓶蒸馏头标准接头 克氏蒸馏头二口接管接受管真空接受管搅拌器套管 温度计套管直形冷凝管球形冷凝管蛇形冷凝管 图1-2 标准磨口仪器 四、玻璃仪器的洗涤与干燥 (实验报告此部分序号为“三”,抓自己认为重点的写,不需要全部照抄) 1. 玻璃仪器的洗涤 使用洁净的仪器是实验成功的重要条件,也是化学工作者应有的良好习惯。洗净的仪器在倒置时,器壁应不挂水珠,内壁应被水均匀润湿,形成一层薄而均匀的水膜。如果有水珠,说明仪器还未洗净,需要进一步进行清洗。 (1) 一般洗涤 仪器清洗的最简单的方法是用毛刷蘸上去污粉或洗衣粉擦洗,再用清水冲洗干净。洗刷时,不能用秃顶的毛刷,也不能用力过猛,否则会戳破仪器。有时去污粉的微小粒子粘服在器壁上不易洗去,可用少量稀盐酸摇洗一次,再用清水冲洗。如果对仪器的洁净程度要求较高时,可在用去离子水或蒸馏水进行淋洗 次,用蒸馏水淋洗仪器时,一般用洗瓶进行喷洗,这样可节约蒸馏水和提高洗涤效果。 (2) 铬酸洗液洗涤

化学实验室基本操作

化学实验室基本操作 化学实验室基本操作2010-07-24 11:54一、常用仪器的主要用途和使用 方法 反应容器:试管、燃烧匙、烧杯、锥形瓶、集气瓶 存放容器:集气瓶(气体)、细口瓶(液体)、广口瓶(固体)、滴瓶(少量液体) 计量仪器:托盘天平(称固体质量)、量筒(量液体体积) 取用仪器:镊子(块状或较大颗粒)、药匙或纸槽(粉末或小颗粒)、胶头滴 管(少量液体) 夹持容器:试管夹、坩埚钳、铁架台(带铁圈、铁夹) 其它仪器:漏斗、长颈漏斗、分液漏斗、石棉网、玻璃棒、水槽、试管刷 可直接加热的:试管、蒸发皿、燃烧匙 能间接加热的(需垫石棉网):烧杯、烧瓶、锥形瓶 加热仪器:酒精灯 1.烧杯圆柱状玻璃容器,杯口有便于倒出液体的嘴。 常用的有25mL、50mL、100 mL、250 mL、500 mL等 (1)用于大量物质的溶解和配制溶液或者进行化学反应的容器,也常用于接 过滤后的液体。 (2)实验时盛放液体的量不超过烧杯容积的1/2,以防搅拌时溅出。 (3)向烧杯中注入液体的时候,应沿烧杯内壁或玻璃棒引流。

(4)加热时要垫石棉网,也防受热不均而使其破裂。烧杯不能用作加热固体试剂。 2.试管 (1)用于少量物质的溶解或发生化学反应的仪器,也常用于制取或收集少量气体。 (2)振荡试管的方法:手持试管、手腕摆动。 3)实验时盛放液体量不能超过试管容积的1/3,以防振荡或加热时溅出。可直接加热。 (4)用试管夹或者铁夹固定时,要从试管底部向上套,夹持在试管的中上部(或离管口1/3的部位)。 3.蒸发皿 (1)用于溶液的蒸发、结晶 2)蒸发过程中需用玻璃棒不断搅拌,防止液体由于局部温度过高而飞溅 3)当溶液的量减少只有大量晶体析出时,停止加热并放至石棉网上,以防晶体飞溅 (4)取放蒸发皿,要用坩埚钳夹持 4.集气瓶 (1)用于收集气体、短时间贮存气体、用做物质在气体中的燃烧的反应器 (2)在收集气体或贮存气体时,要用毛玻璃片盖住瓶口。 5、试剂瓶 试剂瓶包括滴瓶、细口瓶、广口瓶等。分为无色和棕色两种。

实验室安全操作注意事项

. 实验室安全操作注意事项 每次做完实验,都要及时的分析实验数据,以便总结上次实验的经验与体会,为下一次实验方法的进一步完善提供理论依据。切勿等全部实验做完再来分析,此时才发现这样或那样的不足,造成人力与财力、时间的浪费,盲目地做实验是不足取的。 1 实验安全常识 在化学实验室里,安全是非常重要的,它常常潜藏着诸如发生爆炸、着火、中毒、灼伤、割伤、触电等事故的危险性,如何来防止这些事故的发生以及万一发生又如何来急救。 1.1 安全用电常识 违章用电常常可能造成人身伤亡,火灾,损坏仪器设备等严重事故。物理化学实验室使用电器较多,特别要注意安全用电。为了保障人身安全,一定要遵守实验室安全规则。 (1)防止触电 ①不用潮湿的手接触电器。 ②电源裸露部分应有绝缘装置(例如电线接头处应裹上绝缘胶布)。 ③所有电器的金属外壳都应保护接地。 ④实验时,应先连接好电路后才接通电源。实验结束时,先切断电源再拆线路。 ⑤修理或安装电器时,应先切断电源。 ⑥不能用试电笔去试高压电。使用高压电源应有专门的防护措施。 ⑦如有人触电,应迅速切断电源,然后进行抢救。 (2)防止引起火灾 ①使用的保险丝要与实验室允许的用电量相符。 ②电线的安全通电量应大于用电功率。 ③室内若有氢气、煤气等易燃易爆气体,应避免产生电火花。继电器工作和开关电闸时,易产生电火花,要特别小心。电器接触点(如电插头)接触不良时,应及时修理或更换。 ④如遇电线起火,立即切断电源,用沙或二氧化碳、四氯化碳灭火器灭火,禁止用水或泡沫灭火器等导电液体灭火。 (3)防止短路 ①线路中各接点应牢固,电路元件两端接头不要互相结触,以防短路。 ②电线、电器不要被水淋湿或浸在导电液体中,例如实验室加热用的灯泡接口不要浸在水中。 (4)电器仪表的安全使用 ①在使用前,先了解电器仪表要求使用的电源是交流电还是直流电;是三相电还是单相电以及电压的大小(380V、220V、110V或6V)。须弄清电器功率是否符合要求及直流电器仪表的正、负极。 ②仪表量程应大于待测量。若待测量大小不明时,应从最大量程开始测量。

实验室安全操作注意事项正式样本

文件编号:TP-AR-L5503 There Are Certain Management Mechanisms And Methods In The Management Of Organizations, And The Provisions Are Binding On The Personnel Within The Jurisdiction, Which Should Be Observed By Each Party. (示范文本) 编制:_______________ 审核:_______________ 单位:_______________ 实验室安全操作注意事 项正式样本

实验室安全操作注意事项正式样本 使用注意:该管理制度资料可用在组织/机构/单位管理上,形成一定的管理机制和管理原则、管理方法以及管理机构设置的规范,条款对管辖范围内人员具有约束力需各自遵守。材料内容可根据实际情况作相应修改,请在使用时认真阅读。 每次做完实验,都要及时的分析实验数据,以便总结上次实验的经验与体会,为下一次实验方法的进一步完善提供理论依据。切勿等全部实验做完再来分析,此时才发现这样或那样的不足,造成人力与财力、时间的浪费,盲目地做实验是不足取的。 1 实验安全常识 在化学实验室里,安全是非常重要的,它常常潜藏着诸如发生爆炸、着火、中毒、灼伤、割伤、触电等事故的危险性,如何来防止这些事故的发生以及万一发生又如何来急救。 1.1 安全用电常识

违章用电常常可能造成人身伤亡,火灾,损坏仪器设备等严重事故。物理化学实验室使用电器较多,特别要注意安全用电。为了保障人身安全,一定要遵守实验室安全规则。 (1)防止触电 ①不用潮湿的手接触电器。 ②电源裸露部分应有绝缘装置(例如电线接头处应裹上绝缘胶布)。 ③所有电器的金属外壳都应保护接地。 ④实验时,应先连接好电路后才接通电源。实验结束时,先切断电源再拆线路。 ⑤修理或安装电器时,应先切断电源。 ⑥不能用试电笔去试高压电。使用高压电源应有专门的防护措施。 ⑦如有人触电,应迅速切断电源,然后进行抢

PCR实验室标准操作规程SOP

目录 申报文件 一、临床基因扩增检验实验室技术验收申请表 二、《医疗机构执业许可证复印件》 三、拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况对临床基因扩增检验的需求情况以及实验室 运行的预测分析 四、拟设基因扩增检验实验室的设置平面图 五、实验室主要负责人简历表 六、实验室工作人员一览表 七、主要仪器设备表 八、拟开展的临床基因诊断项目 九、几点说明 质量手册 一、管理性程序: 程序文件的管理和维护 (1) PCR实验室管理制度 (2) 生物安全准则 (4) 实验室生物防护措施 (7) 实验室传染性废弃物管理制度 (9) PCR实验室的人员配置及管理制度 (12) PCR实验室的人员培训计划及措施 (14) PCR实验记录管理制度 (15) 惠安县医院PCR检验报告单保密制度 (17) 检验结果的传送管理制度 (19) 实验室的清洁制度 (20) 化学试剂的管理程序 (22) 实验室消耗品购买、验收和贮存程序 (23) 新项目审批程序 (25) 仪器设备的管理制度 (26) 仪器设备的使用制度 (28) 仪器设备的标准操作制度 (29) 仪器设备的维护保养程序和制度 (31) 仪器设备的校准制度 (34) 仪器设备发生故障的应急处理制度 (35) PCR检测的标本管理制度 (36) 二、检测项目操作程序: 标本、样本编号唯一性程序 (38) 临床标本的采集、运送和接收程序 (39) 临床标本的保存程序 (41) 临床标本的处理(核酸纯化)程序 (42) 核酸扩增及产物分析检测的标准操作程序 (43) I

消毒液的配制程序 (45) 室内质量控制操作程序 (46) 实验室室间质量评价的操作程序 (49) 试剂的质检操作程序 (50) 带滤塞吸头的质检操作程序 (52) 人员流动程序 (53) 抱怨处理程序 (54) 应急处理程序 (55) 生物污染废弃物处理标准操作程序 (57) 乙型肝炎病毒DNA-荧光定量PCR测定 (59) 沙眼衣原体DNA-荧光PCR测定 (61) 结核菌DNA-荧光定量PCR测定 (63) 三、仪器设备标准操作程序: GeneLight 9800实时跟踪荧光PCR仪操作程序 (66) Reactor4800加热仪标准操作程序 (67) FX 1200-Ⅱ- B2型生物安全柜操作程序 (68) SpanStar2418台式高速离心机标准操作程序 (70) 加样器的操作程序 (71) 医用低温冷冻冰箱标准操作程序 (73) 移动紫外灯操作程序 (74) 四、仪器设备维护保养程序 GeneLight 9800实时跟踪荧光PCR仪维护保养程序 (75) Reactor4800器加热仪维护保养程序 (76) FX 1200-Ⅱ- B2型生物安全柜维护保养程序 (77) SpanStar2418台式高速离心机的维护保养程序 (78) 医用低温冷冻冰箱保养程序 (79) XW-80A型旋涡混合器的保养程序 (80) 移动紫外灯维护保养程序 (81) 五、仪器设备校准程序: GeneLight 9800实时跟踪荧光PCR仪校准程序 (82) Reactor4800器加热仪校准程序 (83) FX 1200-Ⅱ- B2型生物安全柜校准操作程序 (84) 加样器的校准程序 (85) SpanStar2418台式高速离心机的校准程序 (87) 温湿度表的校准程序 (88) 六、附相关图表 附表001 送检标本接收记录表 附表002 送检标本拒收记录表 附表003 标本超低温保存及处置记录表 附表004 室内质量控制登记表 附表005 试剂验收记录表 附表006 试剂质检记录表 附表007 紫外灯强度监测表 附表008 消耗品验收记录表 附表009 消耗品质检记录表 II

实验室安全及防护知识及其常识

实验室安全及防护知识及其常识 (一)实验室安全知识 在生物化学实验室中,经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触,常常使用易碎的玻璃和瓷质器皿以及在煤气、水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作,因此,必须十分重视安全工作。 1.进入实验室开始工作前应了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。离开实验室时,一定要将室内检查一遍,应将水、电、煤气的开关关好,门窗锁好。 2、使用煤气灯时,应先将火柴点燃,一手执火柴紧靠近灯口,一手慢开煤气门。不能先开煤气门,后燃火柴。灯焰大小和火力强弱,应根据实验的需要来调节。用火时,应做到火着人在,人走火灭。 3.使用电器设备(如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等)时,严防触电;绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。应该用试电笔检查电器设备是否漏电,凡是漏电的,一律不能使用。 4.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作,防止溅出。用移液管量取这些试剂时,必须使用橡皮球,绝对不能用口吸取。若不慎溅在实验台上或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤应立即治疗。 5.使用可燃物,特别是易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金属钠等)时,应特别小心。不要大量放在桌上,更不要在靠近火焰处。只有在远离火源时,或将火焰熄灭后,才可大量倾倒易燃液体。低沸点的有机溶剂不准在火上直接加热,只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。 6.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则应按下法处理: (1)立即关闭室内所有的火源和电加热器。 (2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃瓶中。 7.用油浴操作时,应小心加热,不断用温度计测量,不要使温度超过油的燃烧温度。

实验室相关标准操作规程完整

实验室生物安全实施标准操作规程 1、目的:预防与控制院感管理工作达到预期目标,防止医务人员发生职业暴露。 2、适用范围:检验部门工作人员。 3、定义:无 4、管理要求: 4.1进入规定 4.1.1在实验室入口处应贴生物危害警告标志。注明病原微生物、实验室生物安全等级和负责人电话。 4.1.2未经许可,非授权人员不应进入实验室。 4.1.3. 实验室门应保持关闭状态。 4.1.4. 与实验室工作无关的动物、个人衣物不应带入实验室。 4.2.个人防护 4.2.1.工作服 4.2.1.1. 在实验室工作时,应穿着工作服。 4.2.1.2. 不应穿着实验室工作服离开实验室。 4.2.1.3. 实验室工作服不应与日常服装放在一起。 4.2.2.手套 在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性材料的操作时,应戴上合适的手套。脱手套后应洗手。用过的一次性手套应丢入感染性医疗废物袋内。 4.2.3.洗手 脱手套后以及离开实验室前,都应洗手。 4.2.4.其他防护 4.2.4.1. 当有可能受到喷溅物污染、碰撞或人工紫外线辐射伤害时,应戴合适的护目镜。 4.2.4.2. 不应再实验室内穿露脚趾的鞋子。 4.2.4.3. 不应在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理接触镜(隐形眼镜)。 4.2.4.4. 不应在实验室工作区域内储存食品和饮料。 4.3.实验室工作区 4.3.1. 实验室应保持清洁整齐,严禁摆放和实验无关的物品。 4.3.2. 每天工作结束后,应消毒工作台面和生物安全柜台面。活性物质溅出后要随时消毒。 4.3.3. 所有受到污染的材料、标本和培养物应废弃于医疗废物容器内,不得与普通垃圾混放。需要清洁再利用的材料,应先压力蒸汽灭菌处理。 4.3.4. 需要带出实验室的手写文件应保证在实验室内没有受到污染。 参考文献:[1] WHO. 实验室生物安全手册,第3版.2004. 5、标准无 6、流程(无) 7、表单(无) 8、相关文件 8.1参考文献:[1] 中华人民共和国卫生部. 公共场所集中空调通风系统卫生规范[S].2006. [2] 中华人民共和国卫生部.医院空气净化管理规范[WS/T 368-2012].

实验室安全及防护知识及其常识

实验室安全及防护知识及其常识 (一)实验室安全知识 在生物化学实验室中,经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触,常常使用易碎的玻璃和瓷质器皿以及在煤气、水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作,因此,必须十分重视安全工作。 1.进入实验室开始工作前应了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。离开实验室时,一定要将室内检查一遍,应将水、电、煤气的开关关好,门窗锁好。 2、使用煤气灯时,应先将火柴点燃,一手执火柴紧靠近灯口,一手慢开煤气门。不能先开煤气门,后燃火柴。灯焰大小和火力强弱,应根据实验的需要来调节。用火时,应做到火着人在,人走火灭。 3.使用电器设备(如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等)时,严防触电;绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。应该用试电笔检查电器设备是否漏电,凡是漏电的仪器,一律不能使用。 4.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作,防止溅出。用移液管量取这些试剂时,必须使用橡皮球,绝对不能用口吸取。若不慎溅在实验台上或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤应立即治疗。 5.使用可燃物,特别是易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金属钠等)时,应特别小心。不要大量放在桌上,更不要在靠近火焰处。只有在远离火源时,或将火焰熄灭后,才可大量倾倒易燃液体。低沸点的有机溶剂不准在火上直接加热,只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。 6.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则应按下法处理: (1)立即关闭室内所有的火源和电加热器。 (2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃瓶中。 7.用油浴操作时,应小心加热,不断用温度计测量,不要使温度超过油的燃烧温度。8.易燃和易爆炸物质的残渣(如金属钠、白磷、火柴头)不得倒入污物桶或水槽中,应收集在指定的容器内。 9.废液,特别是强酸和强碱不能直接倒在水槽中,应先稀释,然后倒入水槽,再用大量自来水冲洗水槽及下水道。 10.毒物应按实验室的规定办理审批手续后领取,使用时严格操作,用后妥善处理。(二)实验室灭火法 实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措,应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况正确地进行抢救和灭火。常用的方法有: 1.在可燃液体燃着时,应立即拿开着火区域内的一切可燃物质,关闭通风器,防止扩大燃烧。若着火面积较小,可用抹布、湿布、铁片或沙土覆盖,隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻,避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿,导致更多的溶剂流出而再着火。 2.酒精及他可溶于水的液体着火时,可用水灭火。

实验室常用的基本操作

实验室常用的基本操作 玻璃仪器的基本操作 1、认领仪器按照仪器单领取和认识基础化学实验中的常用仪器。

2、玻璃仪器的洗涤

(1)震荡水洗 (2)内壁附有不易洗掉的物质,可用毛刷刷洗 倒废液——注入一半水——选好毛刷,确定手拿部位刷洗——如是反复 (3)刷洗后,再用水连续振荡数次,必要时还应用蒸馏水淋洗三次洗净状态下,水均匀分布不挂水珠(如左图所示); 未洗净状态下,器壁挂着水珠(如右图所示)。玻璃仪器里如附有不溶于水的碱、碳酸盐、碱性氧化物等可先加盐酸溶解,再用水冲洗;附有油脂等污物可先用热的纯碱液洗,然后用毛刷刷洗,也可用毛刷蘸少量洗衣粉刷洗;对于口小、管细的仪器,不便用刷子洗,可用少量王水或重铬酸盐洗液涮洗;用以上方法清洗不掉的污物可用较多王水或洗液浸泡,然后用水涮洗。( (1)不要未倒废液就注水 (2)不要几支试管一起刷) 3、仪器的干燥 (1)晾干(左图)与烤干(右图)

(2)吹干(左图)与烘干(右图) (3)气流烘干(左图)与快干(右图) 4、常见玻璃仪器的使用 (1)量筒与量杯 (2)移液管 移液管使用注意事项: 应根据不同的需要选用大小合适的移液管,如取1.5ml的溶液,显然选用2ml移液管要比选用5ml移液管误差小;吸取溶液时要把移液管插入溶液,避免吸入空气而将溶液从上端

溢出;移液管从液体中移出后必须用滤纸将管的外壁擦干,再行放液;不可用移液管直接从瓶中移取溶剂或溶液,剩余溶剂或溶液不可倒回贮液瓶,应作废弃物处理。 (2)滴定管 操作步骤:洗涤——涂凡士林——检漏——装入操作液——滴定管排气——滴定操作 (3)容量瓶 容量瓶使用前应检查容量瓶的瓶塞是否漏水,合格的瓶塞应系在瓶颈上,不得任意更换。容量瓶刻度以上的内壁挂有水珠会影响准确度,所以应该洗得很干净。称量的任何固体物质必须先在小烧杯中溶解或加热溶解,冷却至室温后才能转移到容量瓶中。容量瓶绝不应加热或烘干。容量瓶定容完再翻转摇匀,若翻转摇匀后定容,会因加的水或溶剂过多,导致溶液浓度偏小。

实验室安全注意事项演示教学

实验室安全注意事项 一、重要规定: (一)穿著规定: 1. 进入实验室,必须按规定穿戴必要的工作服。 2. 进行危害物质、挥发性有机溶机、特定化学物质或其它环保署列管毒性化学物质等化学药品操作实验或研究,必须要穿戴防护具(防护口罩、防护手套、防护眼镜)。 3. 进行实验中,严禁戴隐形眼镜。(防止化学药剂溅入眼镜而腐蚀眼睛) 4. 需将长发及松散衣服妥善固定且在处理药品之所有过程中需穿著鞋子。 5. 操作高温之实验,必须戴防高温手套。 (二)饮食规定: 1. 避免在实验室吃喝食物且使用化学药品后需先洗净双手方能进食。 2. 严禁在实验室内吃口香糖。 3. 食物禁止储藏在储有化学药品之冰箱或储藏柜。 (三)药品领用、存储及操作相关规定: 1. 操作危险性化学药品请务必遵守操作守则或遵照老师操作流程或进行实验;勿自行更换实验流程。 2. 领取药品时,该确认容器上标示中文名称是否为需要的实验用药品。 3. 领取药品时,请看清楚药品危害标示和图样;是否有危害。 4. 使用挥发性有机溶剂、强酸强碱性、高腐蚀性、有毒性之药品请必定要在特殊排烟柜及桌上型抽烟管下进行操作。 5. 有机溶剂,固体化学药品,酸、碱化合物均需分开存放,挥发性之化学药品更必需放置于具抽气装置之药品柜。 6. 高挥发性或易于氧化之化学药品必需存放于冰箱或冰柜之中。

7. 避免独自一人在实验室做危险实验。 8. 若须进行无人监督之实验,其实验装置对于防火、防爆、防水灾都须有相当的考虑,且让实验室灯开着,并在门上留下紧急处理时联络人电话及可能造成之灾害。 9. 做危险性实验时必须经实验室主任批准,有两人以上在场方可进行,节假日和夜间严禁做危险性实验。 10. 做有危害性气体的实验必须在通风橱里进行。 11. 做放射性、激光等对人体危害较重的实验,应制定严格安全措施,做好个人防护。 12. 请将废弃药液或过期药液或废弃物必须依照分类标示清楚,药品使用后之废(液)弃物严禁倒入水槽或水沟,应例入专用收集容器中回收。 (四)用电安全相关规定: 1. 实验室内的电气设备的安装和使用管理,必须符合安全用电管理规定,大功率实验设备用电必须使用专线,严禁与照明线共用,谨防因超负荷用电着火。 2. 实验室用电容量的确定要兼顾事业发展的增容需要,留有一定余量。但不准乱拉乱接电线。 3. 实验室内的用电线路和配电盘、板、箱、柜等装置及线路系统中的各种开关、插座、插头等均应经常保持完好可用状态,熔断装置所用的熔丝必须与线路允许的容量相匹配,严禁用其他导线替代。室内照明器具都要经常保持稳固可用状态。 4. 可能散布易燃、易爆气体或粉体的建筑内,所用电器线路和用电装置均应按相关规定使用防爆电气线路和装置。 5. 对实验室内可能产生静电的部位、装置要心中有数,要有明确标记和警示,对其可能造成的危害要有妥善的预防措施。 6. 实验室内所用的高压、高频设备要定期检修,要有可靠的防护措施。凡设备本身要求安全接地的,必须接地;定期检查线路,测量接地电阻。自行设计、制做对已有电气装置进行自动控制的设备,在

实验室常用检验仪器操作规范

检验仪器操作规范 1. 仪器分类和作业规范 理化检验仪器(序号从4.1-4.30) 4.1原子吸收仪 4.2离子色谱仪 4.3 pH/电导率仪(或其他pH计及电导率仪) 4.4电光分析天平 4.5电子天平/电子分析天平 4.6浊度仪 4.7糖度计 4.8余氯测定仪 4.9分光光度计 4.10阿贝折射仪 4.11低速台式离心机 4.12定氮仪 4.13密度/比重/浓度计 4.14比色管 4.15电热恒温干燥箱 生化检验仪器(序号从4.31-4.40) 4.31自动立式压力蒸汽灭菌锅 4.32生物显微镜 4.33生化培养箱 4.34霉菌培养箱 其他(序号从4.61-4.70) 4.61激光粒子计数器

备注:以下仪器操作规范按仪器分类顺序编写 4.1原子吸收仪 4.1.1. 准备工作: a)接通仪器主机电源,再接通计算机及打印机电源。打开电脑,待 Win dows95 屏幕 左下角显示Start将箭头指向Start,并点击。联机正常后出示 Aawinlab,点击 打开。 b)将空白溶液置于自动进样器位置1上,标准溶液于2上,试样溶液 在其他编码位置上。 c)打开氩气钢瓶,并调节为300-450Kpa d)接通石墨炉冷却水系统电源。 4.1.2. 编制程序: 工作前将下列主要工作页的必要参数一一输入。分别为仪器页、校正页、石墨炉页。 4.1.3. 进行自动分析: 箭头指向Workspace并点击它,出现下图所示的对话框,然后点击 Calibrate 进行校正曲线,完毕点击An alyze Samples 进行试样的测 ^定。 备注:作结束后如需存储文件,点击File上的Save,显示Save Method As窗口,在Method Name^栏上打上方法名字,并点击0K 4.1.4. 关机: 工作结束后点击Automated Analysis Control 窗口的Flush Sampler ,冲洗 进样系统;退出软件,关掉主机就、计算机、打印机、冷却水系统和石墨炉电 源;关紧氩气钢瓶。 4.2离子色谱仪 4.2.1.仪器 离子色谱仪、移液管、滤纸(0.45 卩m、 4.2.2.试剂 阴离子淋洗液、阳离子淋洗液、甲烷磺酸 4.2.3.操作方法 a)洗液的配置: 1. 阴离子淋洗液的配置:

实验室试剂安全存放须知

提醒:实验室试剂安全存放须知 导读:化学物理实验室多数都会存在化学试剂,不仅日常需要使用外,还需要储存柜一些。大家都知道化学试剂一般都具有毒性,而且有的是易燃易爆的危险品。因此我们更要主要化学试剂的存放和保管的方法,时刻保持实验室人员的安全,不要因为一时的疏忽而造成了安全隐患,今天森拉普尔实验室人员为大家分享一下实验室试剂的存放须知。 隔离存放:易燃类、剧毒类、强腐蚀性类、低温贮存的等分类放置;要求化验及仓库管理人员有一定的相关知识。存放于通风、阴凉、温度低于30℃的药品柜中。有些药品遇光容易分解,避光保存。固体、液体;酸、碱分别放置。 一、保存试剂的一般要求 ①.实验室里应尽量不存放或少存放化学试剂,这样既可防止试剂挥发物对实验室的污染,也可避免化学实验产生的物质对化学试剂的影响。若条件允许,应有室存放化学试剂。 ②. 室内要保持一定的温度和湿度。要避免强光照射,要有良好的排风设备。 ③. 化学试剂要放置在能防尘、防止各种蒸气或气体玷污和侵蚀的专用玻璃试剂柜里。要按试剂的性质分类存放。 ④.对存放的试剂要经常检查瓶上的标签是否完好,字迹是否清楚。如有脱落或模糊,应及时更换。 ⑤.室内应备齐防火器材和沙箱。 二、各种特殊试剂的存放要求及注意事项 1、易与空气中成分作用的物质 ①易与氧气作用的物质:钠、钾、钙等活泼金属的单质,需隔绝空气保存,一般保存在煤油或石蜡中。锂应保存在石蜡油里。白磷需保存在水中。铁粉、亚铁盐、亚锡盐、亚硫酸及其盐、氢硫酸及其盐、硫代硫酸钠、苯酚等应密闭保存。 ②易与水作用的物质:钠、钾、钙应保存在煤油中。电石、生石灰、无水硫酸铜、氧化钠、过氧化钠、氮化镁、硫化铝等物质能与水发生反应,应密封保存。浓硫酸、氢氧化钠固体、氯化钙、氯化镁、四氯化锡、五氧化二磷、碱石灰、硅胶、浓磷酸等物质易于吸水或发生潮解,应密封保存。 ③易与二氧化碳作用的物质:碱类物质(如氢氧化钠、氢氧化钙等)、弱酸盐类物质(如硅酸钠、漂白粉等)、过氧化钠、碱石灰等物质应密封保存。 2、易分解的物质 浓硝酸、硝酸银、溴化银、碘化银、氯水、溴水、高锰酸钾、过氧化氢等见光易分解的物质,应保存在棕色瓶中,放于阴暗处。其中溴化银、碘化银应放在暗室中密封保存。

实验室基本操作规范、规程、管理办法

实验室基本操作规范、规程 为保证化验工作质量,保证人身及设备安全,规范化验操作步骤,特制定本规程。 一操作安全 (一)化验室用电炉、酒精灯等热源设备,操作人员一定要注意严防火灾发生。 (二)化验室用高压灭菌设备等,操作人员一定要严格按规程操作,防止蒸汽灼伤。 (三)操作人员配制和使用强腐蚀性药品时,必须做好相应的防护,严防人身伤害的发生。 二环境和卫生 (一)基本要求 1 进入化验室前必须换上专用拖鞋。 2 化验室内不得有蚊蝇。 3 化验室要保持清洁、有序;各房间要定期打扫,消毒;物品要定点放置且摆放整齐。 4 活体微生物要及时处理,废弃的平板要先洗完再灭菌。 5 化验室人员要注意个人卫生,勤洗衣服,勤洗澡,勤剪指甲等。 (二)无菌室使用要求 1 无菌室使用前须先关闭紫外灯管,打开风机,半小时后即可进行无菌操作。操作前要先用75%酒精棉球消毒手

部、腕部等,对放在工作台上的物品也要用棉球擦拭,然后严格按无菌要求进行操作,要尽量缩短操作时间。 2 使用完毕后,要将台面清理干净,关闭风机,再次将台面用酒精棉球擦拭干净,然后打开紫光灯离开。 3 无菌室应每周清扫一次,用来苏水对地面及门窗进行擦拭,如必要时采用甲醛薰蒸法。 三基本操作 (一)器皿的洗涤与包扎 1 新器皿因含有游离碱,先用1%盐酸处理一夜,再用清水洗,也可用水煮0.5-1小时后,取出再用水清洗干净。 2 常用玻璃仪器如三角瓶、培养皿、试管、漏斗、烧杯等,先用毛刷沾洗衣粉或肥皂粉刷洗,然后用自来水冲洗干净,放入70-80烘箱中烘干或自然晾干,放入清洁柜内备用。检查器皿的内壁,若水均匀分布成一薄层而不出现水珠,说明油污已除净,即可烘干备用。 3 用来做油镜观察的玻片,可以先用滤纸先把油污轻轻地擦去,然后放入肥皂水或洗衣粉水中浸泡,然后用清水冲洗,晾干备用,用时浸泡在75%浓度洒精中。 4 移液管的使用一般先用水冲洗,再插入洗液中,浸泡数十分钟后取出,用自来水冲洗干净即可。 5 接种瓶使用时先用水冲洗,然后用洗衣粉刷洗干净,再用清水冲洗,然后晾干;接种瓶口和胶管口用棉塞塞住,然后盖以纱布、牛皮纸进行包扎,放入蒸柜中进行灭菌。(二)高压蒸汽锅的使用方法 1 往灭菌锅内加水至高水位处;

2016生物医学实验室安全知识

1、[判断题]实验室灭火的方法要针对起因选用合适的方法。一般小火可用湿布、石 棉布或沙子覆盖燃烧物即可灭火。(分值1.0) 你的答案:正确 2、[判断题]有“严禁烟火”警示牌的大楼和实验室,可不必配置必要的消防、冲淋、 洗眼、报警和逃生设施和有明显标志。(分值1.0) 你的答案:错误 3、[判断题]实验大楼因出现火情发生浓烟时应迅速离开,当浓烟已穿入实验室内时, 要沿地面匍匐前进,因地面层新鲜空气较多,不易中毒而窒息,有利于逃生。当逃到门口时,千万不要站立开门,以避免被大量浓烟熏倒。(分值1.0) 你的答案:正确 4、[判断题]消防队在扑救火灾时,有权根据灭火的需要,拆除或者破损临近火灾现 场的建筑。(分值1.0) 你的答案:正确 5、[判断题]在扑灭电气火灾的明火时,用气体灭火器扑灭。(分值1.0) 你的答案:正确 6、[判断题]发现火灾时,单位或个人应该先自救,当自救无效、火越着越大时,再 拨打火警电话119。(分值1.0) 你的答案:错误 7、[判断题]扑救气体火灾切忌盲目扑灭火势,首先应切断火势蔓延途径,然后疏散 火势中压力容器或受到火焰辐射热威胁的压力容器,不能疏散的部署水枪进行冷却保 护。(分值1.0) 你的答案:正确 8、[判断题]消防工作的方针是:“预防为主,防消结合”,实行消防安全责任制。(分 值1.0) 你的答案:正确 9、[判断题]所有的火灾刚开始时都是小火,随着火灾的发展输出的热量越大,火灾 蔓延的速度和范围也愈大,所以扑灭初起火灾最容易的。(分值1.0) 你的答案:正确

10、[判断题]万一发生了火灾,不管是否是电气方面引起的,首先要想办法迅速切断 火灾范围内的电源。(分值1.0) 你的答案:正确 11、[判断题]V类放射源的下限活度值为该种核素的豁免活度。(分值1.0) 你的答案:正确 12、[判断题]Ⅲ类放射源为危险源。在没有防护情况下,接触这类源几小时就可对人 造成永久性损伤,接触几天至几周也可致人死亡。(分值1.0) 你的答案:正确 13、[判断题]Ⅰ类放射源为极高危险源。在没有防护情况下,接触这类源几分钟到1 小时就可致人死亡。(分值1.0) 你的答案:正确 14、[判断题]使用手提灭火器时,拨掉保险销,握住胶管前端,对准燃烧物根部用 力压下压把,灭火剂喷出,左右扫射,就可灭火。(分值1.0) 你的答案:正确 15、[判断题]实验大楼出现火情时千万不要乘电梯,因为电梯可能因停电或失控,同 时又因“烟囱效应”,电梯井常常成为浓烟的流通道。(分值1.0) 你的答案:正确 16、[判断题]火灾对实验室构成的威胁最为严重,最为直接。应加强对火灾三要素(易 燃物、助燃物、点火源)的控制。(分值1.0) 你的答案:正确 17、[判断题]灭火器按其移动形式可分为:手提式和推车式。(分值1.0) 你的答案:正确 18、[判断题]不得堵塞实验室逃生通道。(分值1.0) 你的答案:正确 19、[判断题]液体着火时,应用灭火器灭火,不能用水扑救或其它物品扑打。(分 值1.0) 你的答案:正确 20、[判断题]岗位消防安全“四知四会”中的“四会”是指:会报警,会使用消防器 材,会扑救初期火灾,会逃生自救(分值1.0) 你的答案:正确 21、[判断题]身上着火被熄灭后,应马上把粘在皮肤上的衣物脱下来。(分值1.0)你的答案:正确标准答案:错误

相关主题
文本预览
相关文档 最新文档