万方数据
万方数据
万方数据
万方数据
中药抗肿瘤作用及其作用机制研究进展
作者：黄自丽， 黄修燕， 郑起， HUANG Zi-li， HUANG Xiu-yan， ZHENG Qi
作者单位：黄自丽,HUANG Zi-li(上海交通大学附属第六人民医院普外科,上海,200233;皖南医学院附属弋矾山医院神经内科,安徽,芜湖,241001)， 黄修燕,郑起,HUANG Xiu-yan,ZHENG Qi(上海交
通大学附属第六人民医院普外科,上海,200233)
刊名：
医学综述
英文刊名：MEDICAL RECAPITULATE
年，卷(期)：2010，16(3)
被引用次数：1次
参考文献(26条)
1.范越.杨云柯.马骏松友饮联合化疗治疗60例胃癌患者的临床观察 2007(7)
2.黄修燕.黄自丽.晁愚.王鲁.周俭.叶胜龙.汤钊猷中药"松友饮"对高转移人肝癌侵袭性及小鼠免疫功能的影响[期刊论文]-肿瘤 2008(6)
3.Huang XY.Wang L.Huang ZL Herbal extract"Songyou Yin"inhibits tumor growth and prolongs survival in nude mice bearing human hepatocellular carcinoma xenograft with high metastatic potential 2009(9)
4.汪海英.李福安.魏全嘉抗肿瘤中药的研究现状[期刊论文]-青海医学院学报 2008(4)
5.钱彦方活血化瘀中药对肿瘤形成和转移的影响[期刊论文]-中医杂志 2008(10)
6.胡章.马润娣.于立坚土贝母皂苷对HL-60细胞周期作用的研究[期刊论文]-肿瘤防治杂志 2005(3)
7.叶新苗.唐峰消癥散对荷H22肝癌小鼠抑瘤作用的实验研究[期刊论文]-中华中医药杂志 2009(2)
8.马丽萍.赵培荣.田爱琴.张书红夏枯草对Eca109细胞的影响[期刊论文]-肿瘤基础与临床 2006(3)
9.石灵春.汪波.吴万垠.肖楚梅.何青莲莪术油对小鼠肝癌细胞抑制作用的分子机理[期刊论文]-中药药理与临床2002(1)
10.Lin J.Dong HF.Oppenheim JJ Effects of astragali radix on the growth of different cancer cell
lines 2003(4)
11.Xiao BH.Zhang CL.Wu X Experimental study on the theraputic effect of crescent euphorbia on Lewis lung cancer in mice 2006(12)
12.李洁.石俊英半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响[期刊论文]-中药药理与临床 2006(3)
13.Takara K.Sakaeda T.Okumura K An update on overcoming MDR1-mediated multidrug resistance in cancer chemotherapy 2006(3)
14.夏跃胜.王建华.吴永忠.王欢圣和散逆转胃癌SGC7901/VCR细胞多药耐药的研究[期刊论文]-中医杂志 2006(6)
15.石宇雄.黄永明.许少健.苏海涛.刘金文参麦注射液对人成骨肉瘤多药耐药细胞株R-OS-732逆转作用[期刊论文] -广东医学 2006(8)
16.王秀峰.苏式兵中药及其成分干预肿瘤转移实验研究进展[期刊论文]-中国中药杂志 2008(22)
17.董德纲.张瑶.鲁艳明白藜芦醇对宫颈癌HeLa细胞MMPs及其组织抑制剂的影响 2007(7)
18.顾勤.徐建亚.程罗根.夏卫军当归对黑色素瘤细胞粘附、侵袭、运动和转移能力的影响[期刊论文]-中药材2007(3)
19.余桂芳.曾文铤.朱科伦.马佩球三氧化二砷与人参皂甙Rg3联合对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响[期刊论文]-疑难病杂志 2007(1)
20.Carmeliet P Angiogenesis in life,disease and medicine 2005(7070)
21.王中奇.徐振晔.邓海滨.张铭肺岩宁方抗C57小鼠Lewis肿瘤血管生成的实验研究[期刊论文]-上海中医药杂志
2006(7)
22.Lin TH.Kuo HC.Chou FP Berberine enhances inhibition of glioma tumor cell migration and invasiveness mediated by arsenic trioxide 2008(58)
23.张剑军.陈震.刘鲁明.罗建民清胰化积方联合IL-2对胰腺癌小鼠脾淋巴细胞功能的影响[期刊论文]-中华中医药杂志 2009(2)
24.姚宝泰.赵健雄.王学习.雷丰丰红芪总多糖体内抗肿瘤的实验研究[期刊论文]-中华中医药杂志 2008(7)
25.陈坚中药抗肺癌转移的实验研究进展[期刊论文]-医学综述 2008(1)
26.刘琼.叶秀峰中药抗血管生成机制研究进展[期刊论文]-医学综述 2008(13)
相似文献(10条)
1.学位论文刘广遐中药重楼和连翘的醇提物对恶性胸腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用2008
本文主要分以下几部分展开：
第一部分：理论研究
恶性胸腹腔积液是恶性肿瘤最常见的并发症之一，它的出现常提示恶性肿瘤已经发展到了晚期，治疗效果欠佳。在古代，中医对于恶性肿瘤和恶性胸腹腔积液就已经有了系统的认识，并且有中医自己独特的诊断和治疗方法，长期的临床实践表明，中医对于恶性胸腹腔积液的治疗是颇有成效的，并且较之现代医学有一定的优势所在，目前大量的现代医学的研究方法也证实，中医药治疗恶性胸腹腔积液有较好的效果，包括单味中药、中药提取物、中药单体、中药复方、中成药以及中药与化疗方案联合等，而且发现中医药在恶性胸腹腔积液中的应用，能提高恶性胸腹腔积液患者的症状，改善患者的生存质量。但是，目前关于中医药作用的分子机理研究较少，尤其是深入到基因水平上的相关报道很少.Survivin和Bcl-2是目前研究最多的凋亡抑制基因，几乎在每种恶性肿瘤中都有表达，与肿瘤的发生、发展密切相关，肿瘤的发生是细胞增殖与细胞凋亡失衡所致，凋亡抑制蛋白作为一类细胞凋亡抑制因子，具有独特的分子结构和作用机制，它们的过度表达可以引起肿瘤细胞的抗凋亡作用因而与肿瘤的发生和发展密切相关。Survivin和Bcl-2在恶性肿瘤的发生和进展过程中起着重要的作用，并且在肿瘤的诊断和治疗的研究中表现出了一定的潜力，成为当前肿瘤学研究的热点之一。当前的研究表明
，有些中药能够通过下调两个基因的表达而发挥抗肿瘤的作用。通过回顾中医对恶性肿瘤和恶性胸腹腔积液的认识及研究进展、Survivin和Bcl-2两个基因的研究以及中医药对两个基因的作用的研究进展，探讨中医药在恶性胸腹腔积液的治疗中可能发挥的作用及作用机制。
第二部分：四种中药对多西紫杉醇耐药胃癌细胞BGC-823/Doc的作用
[背景]胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，而我国为胃癌的高发地区之一。胃癌的综合治疗可根据病情均可选择手术和化疗，以减轻肿瘤负荷，改善病情，各种化疗药可抑制肿瘤细胞的生长周期，但是对正常细胞也有抑制，表现出毒副作用，所以包括生物治疗、中医药治疗尤其重要.胃癌传统的化疗以5-Fu和铂类为基础，近五年来研究发现加用紫杉类药物可以显著提高疗效，但客观有效率仍然不超过50％。在我国，单味中药、中药单体、中药提取物、中医方剂、中成药以及中药和化疗方案联合等多方面关于恶性肿瘤的研究很多，它们对胃癌尤其是对紫杉类敏感性不同的胃癌细胞效果如何，是目前急需要明确的重要问题。
[目的]研究重楼醇提物、连翘醇提物、汉防己甲素、藤黄酸四种中药对多西紫杉醇耐药胃癌细胞BGC-823/Doc的作用，并进一步探讨中药的作用机理。[方法]体外建立多西紫杉醇耐药的胃癌BGC-823/Doc细胞株，重楼醇提物、连翘醇提物、汉防己甲素、藤黄酸四种中药分别作用于BGC-823/Doc细胞
，MTT法分别检测四种中药对亲本和耐药细胞的细胞毒作用，观察四种中药对多西紫杉醇耐药胃癌细胞BGC-823/Doc的耐药指数以及是否存在交叉耐药。
[结果]多西紫杉醇对BGC-823及BGC-823/Doc的IC50分别是0.03μg/mL、1.37μg/mL；紫杉醇对BGC-823及BGC-823/Doc的IC50分别是0.04μg/mL、
1.34μg/mL；汉防己甲素对BGC-823及BGC-823/Doc的IC50分别是5.60μg/mL、5.18μg/mL；重楼对BGC-823及BGC-823/Doc的IC50分别是199.60μg/mL、205.60μg/mL；连翘对BGC-823及BGC-823/Doc的IC50分别是217.87μg/mL、26
2.99μg/mL；藤黄酸对BGC-823及BGC-823/Doc的IC50分别是0.88μg/mL、0.84μg/mL。经过体外诱导建立的BGC-823/Doc耐药细胞株，对多西紫杉醇耐药指数45.7，对紫杉醇耐药指数为3
3.5，二者有部分交叉耐药，对汉防己甲素的耐药指数为0.93，对重楼的耐药指数为1.03，对连翘的耐药指数为1.20，对藤黄酸的耐药指数为0.95。BGC-823/Doc对紫杉醇、连翘有部分交叉耐药(P<0.05)，对汉防己甲素、重楼、藤黄酸无交叉耐药。汉防己甲素、重楼、藤黄酸的对BGC-823及BGC-823/Doc的细胞毒作用无统计学差异。
[结论］研究发现汉防己甲素、重楼醇提物、连翘醇提物，藤黄酸对BGC-823/Doc耐药细胞株有细胞毒作用，为中药在多西紫杉醇耐药患者中的应用提供了科学依据。
第三部分：中药重楼和连翘醇提物对恶性胸腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用
[背景]恶性胸腹腔积液是恶性肿瘤最常见的并发症之一，它的出现常提示恶性肿瘤已经发展到了晚期，治疗效果欠佳.全身治疗为主的一般疗法效果欠佳，常需反复抽放胸腹腔积液以缓解症状，严重影响患者的生存质量，胸腹腔内局部治疗也有较明显的副作用.中医药治疗恶性胸腹腔积液表现出一定的效果，而且中医药能够减轻全身和局部的毒副反应，改善患者的生存质量。在中药抗肿瘤作用的研究中，已证实中药重楼、连翘醇提物有抗肿瘤、诱导凋亡等作用，但相关研究都局限于其对体外细胞株的作用，没有其对原代肿瘤细胞作用的报道。
[目的]研究中药重楼和连翘醇提物对恶性胸腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用。
[方法]收集25例经病理确诊的恶性胸腹腔积液并分离原代肿瘤细胞，用CCK8法检测原代肿瘤细胞对重楼、连翘醇提物及化疗药的药物敏感性，提取细胞RNA并且用荧光定量RT-PCR法检测重楼、连翘对凋亡相关蛋白基因Survivin mRNA、Bcl-2 mRNA表达的作用.同时比较重楼、连翘醇提物对胃癌细胞株BGC-823、肝癌细胞株SMMC-7721、肺癌细胞株A549和大肠癌细胞株LOVO的作用。
[结果]重楼醇提物对四株细胞系的IC50平均值为164.52μg/ml，对25例恶性胸腹腔积液中原代肿瘤细胞IC50平均值为329.32μg/ml，两者无显著差异(P>0.05)。重楼醇提物对大肠癌来源的腹腔积液中原代肿瘤细胞的IC50值显著高于其它组(P<0.05)，对胃癌、肺癌及其它消化道肿瘤来源的胸腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用无明显差异(P>0.05)。重楼醇提物对年龄、性别、体腔积液类型及是否接受全身化疗组间IC50值均无统计学差异。8例对重楼耐药的原代肿瘤细胞对多西紫杉醇、氟尿嘧啶、顺铂存在交叉耐药，而对化疗药物耐药的原代肿瘤细胞对重楼无交叉耐药.重楼醇提物对肿瘤细胞系BGC-823、A549、Lovo和肺癌源性恶性胸腔积液P-LU18中凋亡相关蛋白Survivin mRNA有下调作用(P<0.05)，对肿瘤细胞系BGC-823、SMC-7721、A549、Lovo和肺癌源性恶性胸腔积液P-LU18中凋亡相关蛋白Bcl-2 mRNA有下调作用(P<0.05)。连翘醇提物对四株细胞系的IC50平均值为191.88μg/ml，对25例恶性胸腹腔积液中原代肿瘤细胞IC50平均值为385.24μg/ml，两者无显著差异(P>0.05)。连翘醇提物对大肠癌、胃癌、肺癌及其它消化道肿瘤来源的胸腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用无明显差异(P>0.05)。连翘醇提物对接受化疗患者的胸腹腔积液中原代肿瘤细胞的IC50值为543.13μg/ml显著高于未接受化疗患者，年龄、性别以及体腔积液类型组间IC50值均无统计学差异。7例对连翘耐药的原代肿瘤细胞对多西紫杉醇、氟尿嘧啶、顺铂存在交叉耐药，而对化疗药物耐药的原代肿瘤细胞对连翘无交叉耐药。连翘醇提物对肿瘤细胞系BGC-823、SMMC-7721、A549、Lovo和肺癌源性恶性胸腔积液P-
LU18、大肠癌源性腹腔积液A-Co20中凋亡相关蛋白Survivin mRNA有下调作用(P<0.05)，对肿瘤细胞系A549、Lovo和肺癌源性恶性胸腔积液P-LU18、大肠癌源性腹腔积液A-Co20中凋亡相关蛋白Bcl-2 mRNA有下调作用(P<0.05)。
[结论]中药重楼、连翘醇提物对恶性胸腹腔积液中原代肿瘤细胞，尤其是对化疗药物耐药的原代肿瘤细胞仍有一定的抗肿瘤作用。
2.期刊论文郭健.高福云.胡萍.陈旺.靳耀英.张蕴.GUO Jian.GAO Fu-yun.HU Ping.CHEN Wang.JIN Yao-ying.
ZHANG Yun硒化合物与抗癌中药配伍的抗肿瘤作用-实验动物科学2008,25(2)
目的 观察微量元素硒(se)与抗癌中药结合是否具有明显抗肿瘤活性.方法 将小鼠肝癌HepA或Ehrlich腹水癌细胞悬液,注射于BALB/C雄性小鼠,皮下或腹腔造成实体肝癌或腹水癌模型.观察肿瘤生长曲线、动物的生存曲线肿瘤的抑制率.结果 (1)给药动物肿瘤生长曲线明显低于对照动物;(2)动物生存曲线明显延长.给药荷瘤小鼠的生存期为43.2 d±2.8 d,对照组为25.5 d±12.1d;生命延长率明显提高,约为对照组的1.7倍;(3)对小鼠肝癌的抑制率达66%～78%(P<0.01),对小鼠艾氏瘤的抑制率达72%～81%(P<～.01).结论 微量元素硒与适当中药结合有明显抗癌活性.
3.学位论文刘菲中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究2008
目的：以中药壁虎为研究对象，首先进行急性毒性试验，了解其用药的安全性；观察含中药壁虎的血清体外对人食管癌EC9706、EC1细胞系生长抑制作用，中药壁虎体内对昆明种荷瘤小鼠（小鼠肉瘤 S180）实体瘤的抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫系统的影响，探讨壁虎抗肿瘤作用机制；进一步研究了中药壁虎对环磷酰胺（CTX）治疗小鼠S180实体瘤的增效减毒作用。
方法：急性毒性试验应用中药急性毒性试验研究方法，测定小鼠灌胃给药的半数致死量LD50及最大给药量。体外抑瘤实验应用中药血清药理学实验方法，含中药壁虎血清体外作用于细胞，MTT法测定含不同浓度中药壁虎血清对食管癌EC9706和EC1细胞系生长的抑制作用并按台盼蓝排染法计数活细胞数，绘制细胞生长曲线。体内抑瘤实验建立移植性小鼠肉瘤S180实体瘤模型，荷瘤小鼠随机分为 5 组，分别为实验组（高、中、低剂量壁虎粉）、空白对照组和阳性对照组。然后用不同剂量壁虎粉制成的混悬液对实验组荷瘤小鼠灌胃，空白对照组荷瘤小鼠给予等量生理盐水灌胃，阳性对照组腹腔注射环磷酰胺（CTX），用药14d后通过计算抑瘤率观察不同剂量的壁虎粉对小鼠肉瘤S180实体瘤的生长抑制作用。壁虎对免疫系统影响方面，在测瘤重的同时测胸腺重、脾脏重，计算胸腺指数、脾脏指数，并做腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞实验，计算吞噬率和吞噬指数。抗肿瘤机制方面以小鼠肉瘤组织为研究对象，用SABC免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达，TUNEL方法检测细胞凋亡率。增效减毒方面，建立移植性小鼠肉瘤S180实体瘤模型，随机分为对照组、CTX组及壁虎粉高、中、低剂量与CTX联合用药组。观察药物对肿瘤的抑制作用及对动物体重、免疫器官重量、白细胞数的影响。
结果：急性毒性试验无法测出壁虎粉的LD50，最大给药量实验小鼠未发现体重减轻及其它异常反应，结果显示小鼠的最大耐受量超过人临床用量的108倍。含中药壁虎的血清体外可抑制食管癌细胞的生长。体内中药壁虎可抑制小鼠肉瘤S180生长，高、中、低剂量组抑瘤率分别为49.8％、52.8％、43.1％；对免疫器官的影响不能提高荷瘤小鼠的胸腺指数及脾脏指数，对腹腔巨噬细胞不能增加其吞噬率及吞噬指数。机制研究方面可降低肿瘤组织VEGF、bFGF蛋白的表达，显著提高凋亡指数。增效减毒方面，单用CTX组的抑瘤率达到35.6％ , 同时小鼠增重减慢，胸腺、脾脏也受到显著抑制，白细胞数明显减少；高、中、低剂量壁虎粉与CTX合用3组的抑瘤率分别为63.9％( P<0.01)、60.2％( P<0.01)、53.3％，且各剂量组小鼠体重及免疫器官重量、白细胞数均未见明显改变。
结论：中药壁虎常规临床用量安全可靠；中药壁虎体内外均有抗肿瘤活性；其抗肿瘤的部分作用可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡及抑制肿瘤血管的生成而实现。中药壁虎对CTX治疗小鼠移植性肿瘤S180有减毒增效作用。
4.会议论文高建莉.石俊敏.杨丰庆.李铭源.张庆文.李绍平.何通川.王一涛中药药效的系统药理学评价延胡索散
抗肿瘤作用的系统分析和协同作用研究2008
延胡索散(YHSS，主要由延胡索和莪术组成)是一个古老的中药复方，最初收录于宋代的《鸡峰普济方》和《朱氏集验方》中，主要用于妇科活血行气止痛。结合该方的主治以及延胡索和莪术的临床应用，延胡索散在癌症的晚期治疗中应该存在极大的临床应用价值。
笔者结合了系统药理学研究的主要理念。通过研究药材提取物和部分单体对肿瘤细胞增殖，凋亡，转移和分化的影响，说明延胡索散对肿瘤转移和肿瘤血管新生的作用，并进一步揭示可能的作用机理。
MTT，NBT以及小室法分别用于评价药材提取物和单体对肿瘤细胞的增殖，分化和侵袭的作用。除此之外，笔者还利用联用指数法(combination index，CI)和等效线图法着重研究了延胡索和莪术这两个药材提取物的协同抗肿瘤作用。结果显示，延胡索和莪术均存在较强的抗肿瘤细胞增殖和抑制转移的作用，但是对于HL-60细胞的分化没有明显的促进作用。两者联合应用还能协同抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖和转移。
5.学位论文李巧霞中药五加皮抗肿瘤作用和单核细胞刺激作用的实验研究2003
目的:探讨中药五加皮的抗肿瘤作用及单核细胞的刺激作用,分离纯化五加皮抗肿瘤活性成分,为抗肿瘤新药开发、研制提供科学依据.方法:1.采用[<'3>H]-TdR掺入法研究五加皮提取物对肿瘤细胞株MT-2、HL-60、Raji、TMK-l和HSC-2体外增殖反应的抑制作用.2.采用皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,通过灌胃法投入五加皮提耿物治疗荷瘤小鼠,观察五加皮提取物的体内抗肿瘤作用.3.用凝胶层析法分离.纯化五加皮抗肿瘤有效成分;用SDS-PAGE电泳进步分离和确定有效成分的纯度和分于量;用蛋自酶E和NaIO<,4>处理分析有效成分的化学组成.4.用流式细胞技术和蛋白印迹技术进行五加皮抗肿瘤作用机制探讨.5.用[<'3>H]-TdR掺入法检测五加皮提取物对单核细胞吞噬功能的影响,分别用生物法和ELISA 法检测单核细胞因子TNF-α和IL-12的产生,并用RT-PCR方法检测单核细胞因子的mRNA表达.结论:中药五加皮提取液在体外对多种肿瘤细胞的增殖有较强的抑制作用,并有较好的量效关系;在体内能显著抑制荷瘤小鼠S 180肿瘤生长,延长荷瘤小鼠生存期.五加皮的抗肿瘤活性成分是一种分子量约64Kda的蛋白质.该蛋白质通过调节控制细胞周期酶类的活性使肿瘤细胞停止增殖,达到治疗肿瘤的作用.此外,中药五加皮提取物对单核细胞有较强的刺激作用,不但增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能,而且可以促进单核细胞因于TNF-α和IL-12等的产生和mRNA表达.
6.会议论文郭岳峰.吴细丕.李更生复方鲜中药自然汁合剂血得康抗肿瘤作用的实验研究2001
本文以小鼠P<,383>时淋巴细胞白血病,Lewis肺癌和S<,180>(腹水型)肉瘤为模型,以宿主生命延长率或瘤重抑制率为指标,研究中药复方制剂血得康的抗肿瘤作用.
7.期刊论文安鸿志.李杰.周丽莉.王玲中药姜黄的抗肿瘤作用-中国医院药学杂志2004,24(8)
目的:观察中药姜黄的抗肿瘤作用.方法:采用口服灌胃对小鼠S180肉瘤实体型、腹水型进行抑瘤实验.结果:小鼠S180肉瘤实体型实验组动物肿瘤明显缩小,在姜黄剂量为60 g·kg-1时,抑瘤率为43.05%;能显著延长小鼠S180肉瘤腹水型实验组小鼠生存期,在剂量为30 g·kg-1时,生命延长率达81.51%.结论:中药姜黄具有抗肿瘤作用.
8.学位论文朱丽丽中药重楼中试提取工艺优选及抗肿瘤作用机制研究2006
目的：以传统抗癌中药重楼为研究对象，优选最佳中试提取工艺，分离、纯化、精制得到抗肿瘤活性单体PCB5-9与PCB4-5，探讨重楼皂苷诱导人低分化胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制，以期发现药物作用新靶点，为寻求治疗肿瘤的新方法奠定基础。
方法：（1）应用正交试验设计，以薯蓣皂苷元得率为考察指标，筛选重楼总皂苷的最佳提取工艺条件。以乙醇为提取溶剂提取得浸膏，浸膏水溶液依次经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得重楼总皂苷，然后分别经大孔吸附树脂柱层析、硅胶柱层析、反相ODS柱层析、RP-HPLC制备色谱制备得重楼皂苷单体成分。（2）采用MTT比色法研究中药重楼皂苷单体对肿瘤细胞株K562、SGC-7901体外增殖反应的抑制作用，确定其对体外培养的K562、SGC-7901细胞的作用剂量。（3）重楼皂苷单体经5（6）-TAMPA-5-maleimide荧光试剂标记后，MTI法观察重楼皂苷、荧光标记的重楼皂苷及游离荧光对SGC-7901细胞的抗肿瘤作用，并采用荧光显微镜评价该荧光标记药物的细胞染色情况。（4）琼脂糖凝胶电泳法观察重楼皂苷诱导肿瘤细胞SGC-7901凋亡的作用。（5）应用激光共聚焦显微术，以钙离子荧光探针Fluo-3/AM标记SGC-7901细胞内钙离子，观察不同浓度的PCB5-9（83-93）作用于癌细胞10min后
，药物对细胞内钙离子浓度动态变化的影响，并观察药物作用于细胞24h后，细胞内荧光强度的变化。
结果：（1）重楼皂苷的最佳提取工艺条件为乙醇浓度为70％，提取时间为5h，料液比为8倍，在此条件下从中提取，分离出重楼皂苷PCB5-9（83-93）与PCB4-5（39-48），经进一步的分离纯化，经HPLC归一化方法鉴定其纯度分别为97.63％和91.80％，结构有待进一步的鉴定。（2）体外实验结果表明PCB5-9、PCB4-5对肿瘤细胞株K562、SGC-7901均有抑制作用，其抑制率与时间、剂量呈依赖性关系。其中，PCB5-9对K562、SGC-7901细胞的最高抑制率分别为88.54％和75.08％；72h的IC50分别为6.55μg/mL与20.48μg/mL；PCB4-5最高抑制率为88.58％和75.68％；72h的IC50分别为5.69μg/mL和4.83μg/mL。（3）荧光标记的重楼皂苷体外实验结果表明，标记后的重楼皂苷对SGC-7901细胞也具有抑制作用，浓度为0.03mmol/l时，抑制率为
52.28％；游离荧光对肿瘤细胞没有抑制作用，荧光显微镜下观察标记的药物作用细胞2.5h后，细胞内出现红色荧光。（4）琼脂糖凝胶电泳结果显示从PCB5-9（83-93）处理24h的SGC-7901细胞中提取的DNA，出现较典型的梯状电泳条带，且随着药物浓度的升高，条带亮度增加，10μg/mL药物组和阳性药顺铂组条带亮度最高。（5）激光共聚焦显微观察结果表明不同浓度药物孵育SGC-7901细胞10min后，LSCM动态观察细胞内的钙离子，发现没有显著变化
，而药物作用24h后，细胞内钙离子浓度显著升高，且[Ca2+]i随着药物浓度的增加而升高。
结论：正交设计优化的重楼皂苷提取工艺条件可放大，适用于工业提取；重楼皂苷对体外培养的人白血病细胞K562和人低分化胃腺癌细胞株SGC-7901的生长有抑制作用，且呈明显的剂量与时间依赖性关系，并诱导SGC-7901细胞凋亡，细胞内Ca2+浓度升高，提示药物可能通过钙和钙调蛋白途径诱导细胞凋亡；标记的重楼皂苷对SGC-7901具有抑制作用，且能透过细胞膜进入活细胞。
9.期刊论文单保恩.李巧霞.梁文杰.许红.刘冀琴.张华.刘刚叁中药五加皮抗肿瘤作用体内外实验研究-中国中西
医结合杂志2004,24(1)
目的:分离中药五加皮抗肿瘤活性物质,研究五加皮提取物在体内外的抗肿瘤细胞作用,为五加皮抗肿瘤新药开发、研制提供依据.经皮下注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,通过灌胃给药检测五加皮提取物的体内抗肿瘤作用.方法:用3H-TdR掺入法测定了肿瘤细胞增殖反应;用凝胶层析法初步分离、纯化了五加皮抗肿瘤成分.结果:五加皮提取物对多种组织来源的肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用(P＜0.01),而且有较好的量效关系.五加皮提取物经口投入荷瘤小鼠后,实验组小鼠一般情况较对照组小鼠好,肿瘤生长较慢,生存期明显延长(P＜0.01).经凝胶层析分析,分离得到一种对肿瘤细胞增殖反应有抑制作用的蛋白质成分,分子量为64kda.结论:中药五加皮不仅在体外对多种肿瘤细胞增殖有抑制作用,在体内也有较好的抗肿瘤效果.其抗肿瘤活性与一种分子量为64kda的蛋白质成分有关,该成分的进一步分离、纯化和作用机理研究,对五加皮抗肿瘤作用的临床应用和新药开发提供科学依据.
10.学位论文徐晓琳中药蜈蚣抗肿瘤作用及其毒性研究2009
目的：
评价中药蜈蚣单独应用于肿瘤治疗的疗效并探寻其抗肿瘤的有效部位，为今后深入研究蜈蚣的抗肿瘤作用提供实验依据。
对有毒中药蜈蚣进行急性毒性及亚急性毒性试验评价其毒性，以期指导蜈蚣的临床用药。
方法：
1、比较蜈蚣不同提取组分对HeLa细胞增殖活性的影响
MTT法测定不同处理方式的蜈蚣提取部位对HeLa细胞的作用，并计算其IC50。比较了不同溶剂蜈蚣提取物对HeLa细胞的作用；蜈蚣不同浓度硫酸铵沉淀蛋白组分对HeLa细胞的作用；蜈蚣过Sephadex—G25柱各组分对HeLa细胞的作用；不同处理的水提液对HeLa细胞的作用。
2、比较蜈蚣水提物和蜈蚣醇提取物灌胃对H22和S180荷瘤小鼠的抑瘤作用
蜈蚣水提取物和乙醇提取物给H22和S180荷瘤小鼠灌胃，通过对治疗组和对照组小鼠体重变化、肿瘤重量及胸腺指数、脾指数的比较，进一步研究蜈蚣的抗肿瘤活性及其毒性。
3、蜈蚣水提取物和乙醇提取物对小鼠的急性毒性和亚急性毒性
采用最大给药量实验，测定蜈蚣水提物和乙醇提物对小鼠的急性毒性作用。连续灌胃蜈蚣水提物和乙醇提物，测定小鼠的蓄积中毒情况。
结果：
1、不同提取物实验显示，蜈蚣70％乙醇提取物是蜈蚣细胞毒药效最强部位，蜈蚣水提液对HeLa细胞的抑制作用也较强。各组分低浓度具有促进细胞增殖的作用，在高浓度具有抑制细胞增殖的作用。拟定硫酸铵沉淀区间为40％沉淀到80％沉淀组分。不同层析组分对HeLa细胞作用实验显示前4管具有抑制肿瘤细胞增殖的作用，5—14管具有促进肿瘤细胞增殖作用。不同处理的水提液显示蜈蚣细胞毒作用组分主要是大分子蛋白质。
2、体内实验显示蜈蚣水提物和乙醇提取物对H22和S180荷瘤小鼠的抑制率与阴性对照无统计学差异。且促进荷瘤小鼠的衰弱和死亡，表现出毒性。
3、蜈蚣提取物对小鼠的急性毒性研究发现，蜈蚣48g/kg给药，并不导致小鼠的死亡，急性毒性在1小时内可缓解。亚急性毒性不明显。
结论：
蜈蚣具有抑制HeLa细胞增殖的组分，亦具有促进肿瘤细胞增殖的成分。
蜈蚣细胞毒作用组分主要是大分子蛋白质。
蜈蚣提取物对H22和S180荷瘤小鼠没有抑瘤作用，反而导致小鼠的衰弱和死亡。
小鼠毒性试验显示蜈蚣有毒。
本文链接：https://www.doczj.com/doc/f613263810.html,/Periodical_yxzs201003023.aspx
授权使用：燕山大学(ysdx)，授权号：9a7fdca6-331f-4771-b42d-9e9600b17bc0
下载时间：2011年2月26日