糖化血清蛋白测定试剂盒（酶法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中糖化血清蛋白（GSP）含量。 1.1包装规格 a) 试剂1：1×20ml，试剂2：1×5ml； b) 试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml； c) 试剂1：1×30ml，试剂2：1×10ml； d) 试剂1：2×40ml，试剂2：2×10ml； e) 试剂1：2×45mL，试剂2：2×15mL； f) 试剂1：2×50ml，试剂2：2×10ml。 1.2试剂主要组成成分 试剂1主要组成成分 试剂2主要组成成分
2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.1.2 试剂1应为无色或淡黄色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。 2.1.3 试剂2应为无色或淡黄色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。 2.2 净含量 液体试剂的净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 试剂空白吸光度，应≤0.3。 2.4 分析灵敏度 测试300μmol/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.03。 2.5 准确性 与比对试剂盒同时测试40例线性范围内的不同浓度的血清样本，样本浓度在(20,1500)μmol/L范围内，其相关系数（r）≥0.975；测试浓度在(0～200] μmol/L范围内绝对偏差不超过±30μmol/L；测试浓度在(200～1500) μmol/L范围内相对偏差不超过±15%。 2.6 重复性 采用两个浓度样品重复测定不少于10次，变异系数（CV）≤5%。 2.7 线性 2.7.1在(20,1500)μmol/L区间内，线性相关系数r应不低于0.990； 2.7.2 在（200,1500)μmol/L区间内，相对偏差不超过±10%；(20,200] μmol/L区间内，绝对偏差不超过±20μmol/L。
实验一血清蛋白电泳(醋酸纤维薄膜法) [目的] 了解电泳法分离蛋白质的原理、操作方法及临床意义。 [原理] 带电荷的蛋白质，在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同，但大都在pH7以下，若将血清置于pH8.6的缓冲液中，则这些蛋白质均带负电，在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同，所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋白质分子小而带电荷多者，泳动速度快；反之，则泳动速度慢。因此可将血清蛋白质依次分为清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五条区带，经染色可计算出各血清蛋白质含量的百分数。 醋酸纤维薄膜电泳具有微量、快速、简便及分辨率较高等优点，广泛应用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、同工酶的分离和测定。 [仪器与材料] 1．仪器：电泳仪、电泳槽、分光光度计或光密度仪。 2．材料：醋酸纤维薄膜、培养皿、滤纸、镊子、点样器、直尺、铅笔、剪刀等。 [试剂] 1．巴比妥—巴比妥钠缓冲液(pH8.6，m=0.06)。称取巴比妥2.21克和巴比妥钠12.36克，溶于500毫升蒸馏水中，加热溶解。待冷至室温后，再加蒸馏水稀释至1000毫升。 2．染色液。称取丽春红S0.4克及三氯醋酸6克；用蒸馏水溶解，并稀释至100毫升。 3．漂洗液。3%(V／V)醋酸溶液。 4．透明液。取无水乙醇75毫升和冰醋酸25毫升混匀备用。 5．0.4mol／L氢氧化钠溶液。 6．40%(V／V)醋酸溶液。 [操作] 1．薄膜的准备：取醋纤薄膜(2厘米*8厘米)在毛面的一端约1.5厘米处，用铅笔轻划一直线，表露点样位置并编号。然后将此薄膜置于巴比妥缓冲液中浸泡，待充分浸透(即膜条无白斑时)后取出，用洁净滤纸轻轻吸去表面的多余缓冲液。 2．点样。取少量血清置于普通玻璃板上，用点样器的钢口蘸取血清(约3~5ml)，随后将钢口垂直“印”在点样线上，待血清渗入膜后移开点样器。点样应注意，要适量、均匀和垂直，并避免弄破薄膜。 3．平衡与电泳。将已点样的薄膜加样面朝下，加样端置于阴极端，平整地贴于电泳槽的支架上拉直。支架上事先放置好两端浸入缓冲液的用四层滤纸条作的“滤纸桥”(如图2)。平衡数分
糖化血红蛋白的临床意义 HbA1c的临床意义1 1．糖尿病长期血糖的监测；观察饮食和药物治疗的效果，特别是怀疑口服药物失效而不得不用胰岛素治疗时HbA1c有较高价值。 2．有助于对糖尿病慢性并发症的发现和预防；临床研究显示：糖尿病慢性并发症、糖尿病肾病和视网膜病变的发生与HbA1c水平密切相关，并发现HbA1c＜7％时，糖尿病发生慢性并发症的危险性很小，而一旦HbA1c﹥7％时，则发生慢性并发症的危险性显着增高。 HbA1c的临床意义2 3．用于糖尿病的辅助诊断： 大多数血糖高于正常的糖尿病患者其HbA1c增高；对空腹血糖正常而糖耐量下降的病人HbA1c也可增高。有报导HbA1c对糖尿病的诊断敏感性为85％，特异性为91％。最近Peters 回顾性研究报告HbA1c的测定与WHO的糖尿病诊断标准密切相关，且检测方便。并认为HbA1c＞7％时，一般建议采用饮食和运动治疗处理。HbA1c的临床意义3 4．用于应激性高血糖的鉴别诊断 各种应激如心肌梗塞和脑血管意外可使血糖升高，但这种高血糖、HbA1c不一定升高，若为糖尿病、HbA1c则升高。两者的鉴别对指导治疗和判断预后有一定价值。 5．? 怀孕期间HbA1c是反映糖尿病控制的一个特别有用的指标。 怀孕期间血糖控制对母婴健康极为重要。糖尿病患者怀孕期间母亲的高血糖与
胎儿的发病率、死亡率上升都有关。保持严格的血糖控制，尤其是在胚胎发生的头3个月，母亲HbA1c结果对健康胎儿的孕育极大促进作用。 总之，HbA1c数据客观，稳定性好，能反映糖尿病患者2－3月左右的糖代谢情况，同时对糖尿病并发症，尤其是早期肾病和视网膜等微血管病变有很好的临床参考价值。
一、电解质临床意义 1、血清钾测定临床意义： ⑴血清K+增高：血清K+高于5.5mmol/L为高钾血症。血清K+高于7.5mmol/L 将引起心律失常甚至心脏骤停，必须给予治疗。K+增高见于：①输入过多，如静脉输入含K+溶液浓度过高、速度过快或输入大量库存血；②K+排泄障碍，如急性或慢性肾功能衰竭、肾上腺皮质功能减退、低醛固酮症；③细胞内K+移至细胞外液，如大面积烧伤、创伤、血管内溶血、酸中毒等。 ⑵血清K+降低：血清K+低于3.5mmol/L为低钾血症。血清K+低于3.0mmol/L，可出现心脏骤停。K+降低见于：①K+摄入不足，如大手术后，不能进食又未补钾；②K+丢失过多，如严重呕吐、腹泻、大量出汗、长期应用糖皮质激素、服用排钾利尿剂及肾上腺皮质功能亢进；③钾的分布异常，如肾性水肿或输入无钾液体，细胞外液稀释，血钾降低；④大量输入胰岛素使葡萄糖被利用或形成糖尿，伴细胞外钾大量进入细胞内，致血钾降低；⑤原因不明的低血K+性麻痹症。 2、血清钠测定临床意义： ⑴血清Na+增高：见于①输入含Na+溶液过多；②肾排Na+减少，如肾上腺皮质功能亢进、原发性醛固酮增多症、脑血管病或脑外伤等。Na+增高常与脱水及其他代谢紊乱并存。 ⑵血清Na+降低；见于：①丢失过多，如严重呕吐和腹泻；②慢性肾炎并发尿毒症或糖尿病酸中毒尿钠排出过多；③慢性肾上腺皮质功能不全时，钠经尿排出过多；④大量使用利尿剂时钠随尿排出，特别是长期限制钠摄入的心功能不全或肾病病人易出现低血钠；⑤大面积烧伤或出现大量肺泡渗出物，大量抽取胸水和（或）腹水。 当血清Na+浓度低于或等于115mmol/L时，可发生精神错乱、疲劳、厌食、恶心、呕吐和头痛，当低于110mmol/L时，病人处于半昏迷和昏迷状态，极易发生抽搐，鼓测定值降至115mmol/L时，应尽快采取治疗措施。 当血清Na+测定值低于133mmol/L时，应考虑引起低钠的原因，并加作其他辅助试验，如血清渗透压、钾浓度及尿液检查。 3、血清氯测定临床意义： 血清Cl –浓度低于90mmol/L为低氯血症，高于120mmol/L为高氯血症。血清Cl –变化与Na+呈平行关系，低氯血症常伴有低钠血症，但大量丧失胃液时失Cl –多于失Na+，若大量丧失肠液，则失Na+多于失Cl -。 4、血清钙测定临床意义： ⑴血Ca2+增高：当血Ca2+超过3.37mmol/L，可出现高血Ca2+性昏迷，应立即采取治疗措施。血Ca2+增高见于：甲状腺功能亢进，因甲状腺素可使骨钙溶解释放入血，并促进肾小管对钙的重吸收；亦可见于维生素D过多症、多发性骨髓瘤及恶性肿瘤骨转移。 ⑵血Ca2+降低：见于：①甲状旁腺功能减低，此时出现低Ca2+、高磷现象； ②维生素D缺乏；③婴儿手足搐搦症及骨质软化症；④Ca2+吸收障碍，如长期腹泻及不合理饮食搭配；⑤肾脏疾病；⑥大量输入柠檬酸钠抗凝血。 5、血清磷测定临床意义： ⑴血清磷增高见于：甲状旁腺功能减低、维生素D过量、肾功能不全、多发性骨髓瘤（MM）及骨折愈合等。 ⑵血清磷降低监狱：甲状旁腺功能亢进、佝偻病、重症糖尿病、长期腹泻引
糖化血清蛋白(GSP)检测试剂盒(果糖胺比色法) 简介： 总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。 Leagene 糖化血清蛋白(GSP)检测试剂盒(果糖胺比色法)其检测原理是血清葡萄糖能与白蛋白及其他血清蛋白分子N 末端的氨基发生非酶促糖化反应，形成高分子酮胺结构。该同胺与NBT 发生还原反应生成复合物，与同样处理的标准液比较，测得样本中蛋白质的含量。本试剂盒专门用于人或动物血清样本中的糖化蛋白含量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 分光光度计或酶标仪 2、 离心管、小试管或96孔板 3、 水浴锅 操作步骤(仅供参考)： 1、 配制NBT 工作液：按NBT solution(100×)：Alkaline buffer 混匀，即为NBT 工作液。 2、 配制DMF 标准：取DMF 标准配制液或稀释液加入到DMF 标准中，充分溶解后配制 成DMF 标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的DMF 标准溶液应保存。取适量DMF 标准溶液用DMF 标准配制液或稀释液继续进行稀释，在此基础上依次稀释。特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，DMF 标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取DMF 标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl 或PBS 作为 编号 名称 TC060950T Storage 试剂(A): NBT solution(100×) 2ml 4℃ 避光 试剂(B): Alkaline buffer 200ml RT 试剂(C): DMF 标准 19.92mg RT 试剂(D): DMF 标准配制液 10ml -20℃ 试剂(E): ddH 2O 1ml RT 使用说明书 1份
文读懂 免疫组化步骤、结果分析及注意事项 导语实验室花花师姐正在教导新来的师弟：想拿高分 文章，不学免疫组化怎么行？” 免疫组化王子毛博旁边插话： 是这个理，今天我就豁出去，将我十多年的心得和经验奉献给小师弟你了。”小师弟感激涕零，唯诺细听两位前辈的教诲免疫组化，免疫组织化学技术（immunohistochemistry ），是 项利用抗原抗体反应，通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原，对蛋白定位，定性的实验技术。免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类，组织标本包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片。石蜡切片，对组织形态保存好，保存时间也长，虽然对组织抗原暴露有影响，但可以抗原修复，所以石蜡切片仍然是首选的标本制作方法。免疫组化步骤详解免疫组化结果分析很多时候，我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析，得出理想的结果。这实在是一件憾事。 如下图，正常的结果应该是这样的：镜下细胞核呈蓝色，阳性结果呈深浅不一的棕色。结果分析主要有两种方法，阳性着色细胞计数法和评分法。前者是在40*光镜下，随机10 个视野下计数阳性着色细胞；后者则是在光学显微镜下按染色程度（0 分阴性着色，1 分淡黄色，2 分浅褐色，3 分深褐色）
和阳性范围（1分0-25%，2分26-50%，3分51-75%，4分76-100%）评分，最终分数相加。 免疫组化结果分析是毛博的特长，以下是他传授的独门绝技。 1.对照染色 和做实验的时候必须设立对照组一样，免疫组化也必须设立对照染色。没有对照染色的免疫组化结果是不可信的。对照 般有阳性组织对照，阴性组织对照，阴性试剂对照，自身 对照。般来说，有一个阳性组织对照和一个阴性组织对照 就足够了。 2.定位 抗原表达必须在特定部位。如LCA 应定位在细胞膜上；CK 应定位在细胞浆内；PCNA 及p53 蛋白应定位在细胞核内等等。不在抗原所在部位的阳性着色，不能视为确切的阳性结果。有可能是非特异性染色或者假阳性。不能确定怎么办？这就要用到上一段提到的对照染色了。 3.半定位 现在一般用图像分析系统进行定量。如果你的实验室不幸没有那么高大上的话，就只好赶鸭子上架，用肉眼定一下量了。 因为人为主观性比较强，所以只能称作半定量。免疫组化的 半定量一般就分为三级：弱（+ ），中++ ），强（+++ ）。以绿色免疫荧光为例，则表现为浅绿色荧光、明显绿色荧光和
早期胃癌患者实施规范化内镜诊断及治疗分析 发表时间：2016-11-28T13:54:48.857Z 来源：《健康世界》2016年第21期作者：王朵朵 [导读] 分析早起胃癌患者实施规范化内镜诊断及治疗的临床疗效。 平煤神马医疗集团总医院河南平顶山 467000 摘要：目的：分析早起胃癌患者实施规范化内镜诊断及治疗的临床疗效。方法：通过对2015年12月-2016年6月前来我院治疗早期胃癌的64例患者病例分析统计，随机将患者分为对照组和观察组各32例，给予对照组常规开腹治疗，同时给予观察组内镜诊断并行内镜黏膜剥离术，并对比两组临床疗效。结果：通过观察两组手术时间、术中出血量、住院时间以及开始活动时间发现观察组明显优于对照组，有明显差距，具有统计学意义（P<0.05），并且对比患者病例检出结果发现观察组准确率高达92.3%，与对照组有明显差距，具有统计学意义（P<0.05），以及对照组术后并发症发生率为15.63%，而观察组术后并发症发生率为6.25%，有明显差距，具有统计学意义（P<0.05）。结论：实施规范化超声内镜可有效提高对早起胃癌的诊断，并且对黏膜剥离术准确，值得临床大力推广。 关键词：早期胃癌；超声内镜；临床诊断；治疗效果 由于近些年人们生活规律和生活方式的改变，导致患胃癌的患者逐年攀升，且发现时较晚，就诊时往往已错过最佳治疗时机，严重者可危及患者生命安全，临床对胃癌的诊断和治疗尤为重要[1]，目前我国已有部分医院采用超声内镜诊断早起胃癌和治疗，但对于治疗后的相关并发症以及不良反应仍有空缺，本文就实施规范化内镜诊断早期胃癌和治疗的临床疗效、不良反应以及并发症展开分析，现将报告阐述如下： 1 资料与方法 1.1基本资料 资料来源于2015年12月-2016年6月前来我院治疗早起胃癌的64例患者临床治疗病例，随机将患者分为对照组和观察组各32例，其中对照组男性患者18例，女性患者14例，年龄在36-74岁之间，平均年龄为（58.28±8.49）岁，通过病例检测分为：Ⅰ型8例，Ⅱ型19例，Ⅲ型7例；观察组中男性患者15例，女性患者19例，年龄在37-72岁之间，平均年龄为（57.92±8.27）岁，通过病例检测分为：Ⅰ型10例，Ⅱ型18例，Ⅲ型6例。排除两组患者中存在肝肾衰竭、心肺衰竭以及凝血功能系统障碍等疾病，以免由于调查需要使用药物或治疗延误其他病情的治疗或导致其病情严重化，同时与患者和家属沟通，告知参与调查的注意事项并签署知情同意书。对比两组患者性别、年龄、病例分型等基础资料发现无明显差距，具有对比性（P>0.05）。 1.2给予对照组常规开腹治疗，而观察组行超声内镜下型黏膜剥离术，术前经超声内镜检查诊断，医护人员应协助患者取左侧卧位，手术采取全身麻醉，术前嘱患者进食8小时，术中胃内抽尽空气并注水，缓慢插入探头，观察发病区域病灶并采用电刀电凝止血，切除部分病灶送病理科检验，术后给予患者消炎镇痛等支持性疗法，并嘱其家属术后给予患者流质食物，以免刺激分泌胃酸腐蚀胃黏膜。两组患者术中遵守无菌操作，防止由于操作不规范导致患者发生细菌感染，术中严密检测患者生命体征，若发生意外及时与主治医师联系，并及时抢救患者。同时记录两组患者的手术时间、术中出血量、开始活动时间、住院时间、不良反应以及术后并发症等临床疗效。 1.3统计学处理 所有数据采用SPSS18.0软件进行处理，采用（x±s）表示计数和计量差，当P<0.05时具有统计学意义。 2 结果 2.1对比两组患者平均手术时间、开始活动时间、住院时间通过对比两组患者平均手术时间、开始活动时间、住院时间发现观察组明显比对照组时间短，相比有明显差距，具有统计学意义（P<0.05）。详见表1. 2.2对比两组患者检查结果检出率以及并发症发生率观察组采用超声内镜进行早期胃癌检查，发现检出胃黏膜癌变12例，而胃窦癌15例，胃粘膜下癌7例，与临床病例检查对比发现准确率为92.3%，且有2例发生胃底部出血并发症，并发症发生率为6.25%，而对照组中胃底部出血3例，病灶切除处出血2例，并发症发生率为15.63%，相比有明显差距，具有统计学意义（P<0.05）。 3 讨论 通过对近些年的流行病进行统计发现，胃癌的发生率逐年上升，在我国胃癌发生率居恶性肿瘤首位，临床沟通了解患者日常生活发现，可能与患者日常生活习惯和规律有一定关系，早期胃癌临床表现可能并不明显，少数人可出现恶心、呕吐、胃底部灼烧感[2]，且患者可由于进食后疼痛感导致进食减少而体重逐渐减少，往往会与其他疾病混淆，以至于延误病情导致病情愈发严重。传统治疗早期胃癌主要采取开腹手术治疗，术中出血较多导致并发症多和恢复较慢，同时术后患者患处并不美观，而采用超声内镜进行规范化的诊断和治疗的临床疗效显著，诊断准确率高达92.3%以及发症较低，并且患者住院时间、手术时间、开始下地时间明显较常规开腹手术诊断和治疗明显缩短，同时术后患者患处伤口面积小，不影响患者日后穿着，超声内镜具有放大、镜内染色以及聚焦等功能[3]，可以更直观和立体的观察病灶，对手术中定位和定性有很大作用，不仅可以直观看见病灶表面，还可以超声病灶周围组织，判定其主要性质做出准确判断。综上所诉，超声内镜对早期胃癌的规范性诊断操作较为简单、创口下、出血少、并发症少以及术后恢复快等优势，同时对于内镜下进行胃黏膜剥离术更为精准，临床疗效显著，值得临床大力推广。 参考文献： [1]刘芳，郑勇，黎永军，等.26例早期胃癌的内镜下诊断及治疗分析[J].胃肠病学和肝病学杂志，2013，15（7）：653-656. [2]郑洪伟，薛会光，杨爱华，等.窄带成像技术联合放大内镜与胃镜活检诊断早期胃癌的价值比较[J].世界华人消化杂志，2015，24（8）：
糖化血红蛋白（HbA1c）测定的原理方法与仪器解析及临床意义 糖化血红蛋白（HbA1c）测定的原理方法与仪器解析及临床意义 糖尿病目前在世界上发病率很高，占免疫病的比率，在发达国家高达2-5%，而我国糖尿病的发病率亦达 2-3%，并且每年还以1‰的速度增长。糖尿病是一种终生性疾病，其并发症是至残至死的主要原因，所以人们希望能尽早发现和治疗糖尿病。临床上广泛采用血糖参数来判定糖尿病，而血糖参数只代表抽血时的血糖水平，对确诊有局限性。近年来的医学研究证明：血液中的糖化血红蛋白（HbA1c）浓度相对稳定，其浓度值能准确反映最近1-3个月期间的血糖水平，便于医生对糖尿病进行早期诊断；也可用于糖尿病人的血糖监控及慢性并发症的判断等，受到临床的广泛重视，目前我国各大、中型医院正逐渐开展糖化血红蛋白（HbA1c）占总血红蛋白（Hb）的百分含量的测定项目。有些发达国家已将HbA1c的测定列入中老年人的常规体检项目。测定HbA1c比较常用的方法，目前有乳胶凝集反应法和离子交换高压液相色谱法两种，分别用生化分析仪和糖化血红蛋白自动分析仪进行测定。 1HbA1c的临床意义 糖化血红蛋白是一项说服力较强、数据较客观、稳定性较好的生化检查，不受偶尔一次血糖升高或降低的影响。能反应糖尿病患者2-3个月以内的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切，在糖尿病学上有重要的临床参考价值。 1．1增高：测定HbA1c可以了解糖尿病人在2～3个月的血糖控制情况。此外，用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人，地中海贫血和白血病病人亦增高。 1．2降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性低血糖症等。 1．3作为糖尿病的病情监测指标 1．3．1作为轻症、Ⅱ型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。 1．3．2不是诊断糖尿病的敏感指标，不能取代现行的糖耐量试验。 1．3．3可以列为糖尿病的普查和健康检查的项目。 1．4当HbA1c＞9％时，说明患者存在着持续性高血糖，可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。临床经常以糖化血红蛋白作为监测指标来了解患者近阶段的血糖情况，以及估价糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。 1．5对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿、畸形胎、死胎，以及急、慢性并发症发生发展的监督具有重要意义。1．6对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖（测血糖当然增高）抢救者，急查糖化血红蛋白具有鉴别诊断的价值。 1．7对于糖化血红蛋白特别增高的糖尿病患者，应警惕如酮症酸中毒等急性合并症的发生。 2临床常用的测定糖化血红蛋白HbA1c的方法 2．1乳胶凝集反应法 乳胶凝集反应法是利用抗原抗体直接测定总血红蛋白Hb中的糖化血红蛋白HbA1c的百分含量。目前有国内外几家厂商可以提供HbA1c测定的试剂盒。这种免疫反应是由被测血样品中的总Hb和HbA1c与试剂中的抗体结合而形成凝集，凝集量随HbA1c浓度的大小而变化。使用生化分析仪器来进行比浊测定HbA1c的浓度，采用终点法，生化仪通过测定反应液的吸光度值，可直接反映出凝集量的多少；推算出
胃癌诊疗规范（2011年版） 一、概述 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，2010年卫生统计年鉴显示，2005年，胃癌死亡率占我国恶性肿瘤死亡率的第3位。胃癌的发生是多因素长期作用的结果。我国胃癌发病率存在明显地区差异，环境因素在胃癌的发生中居支配地位，而宿主因素则居从属地位。有研究显示，幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori, H.pylori）感染、饮食、吸烟及宿主的遗传易感性是影响胃癌发生的重要因素。 为进一步规范我国胃癌诊疗行为，提高医疗机构胃癌诊疗水平，改善胃癌患者预后，保障医疗质量和医疗安全，特制定本规范。本规范所称的胃癌是指胃腺癌（以下简称胃癌），包括胃食管结合部癌。 二、诊断 应当结合患者的临床表现、内镜及组织病理学、影像学
检查等进行胃癌的诊断和鉴别诊断。 （一）临床表现。胃癌缺少特异性临床症状，早期胃癌常无症状。常见的临床症状有上腹部不适或疼痛、食欲减退、消瘦、乏力、恶心、呕吐、呕血或黑便、腹泻、便秘、发热等。 （二）体征。早期或部分局部进展期胃癌常无明显体征。晚期胃癌患者可扪及上腹部包块，发生远处转移时，根据转移部位，可出现相应的体征。出现上消化道穿孔、出血或消化道梗阻等情况时，可出现相应体征。 （三）辅助检查。 １.内镜检查。 （１）胃镜检查：确诊胃癌的必须检查手段，可确定肿瘤位置，获得组织标本以行病理检查。必要时可酌情选用色素内镜或放大内镜。 （２）超声胃镜检查：有助于评价胃癌浸润深度、判断胃周淋巴结转移状况，推荐用于胃癌的术前分期。对拟施行内镜下粘膜切除（EMR）、内镜下粘膜下层切除（ESD）等
微创手术者必须进行此项检查。 （３）腹腔镜：对怀疑腹膜转移或腹腔内播散者，可考虑腹腔镜检查。 ２.组织病理学诊断。 组织病理学诊断是胃癌的确诊和治疗依据。活检确诊为浸润性癌的患者进行规范化治疗。如因活检取材的限制，活检病理不能确定浸润深度，报告为癌前病变或可疑性浸润的患者，建议重复活检或结合影像学检查结果，进一步确诊后选择治疗方案。 （１）胃镜活检标本处理。 ①标本前期处置：活检标本离体后，立即将标本展平，使粘膜的基底层面贴附在滤纸上。 ②标本固定：置于10%-13%福尔马林缓冲液中。包埋前固定时间须大于6小时，小于48小时。 ③石蜡包埋：去除滤纸，将组织垂直定向包埋。 ④HE制片标准：修整蜡块，要求连续切6～8个组织面，捞取在同一张载玻片上。常规HE染色，封片。
糖化血红蛋白（HbA1c）测定的原理方法与 仪器解析及临床意义 糖尿病目前在世界上发病率很高，占免疫病的比率，在发达国家高达2-5%，而我国糖尿病的发病率亦达2-3%，并且每年还以1‰的速度增长。糖尿病是一种终生性疾病，其并发症是至残至死的主要原因，所以人们希望能尽早发现和治疗糖尿病。临床上广泛采用血糖参数来判定糖尿病，而血糖参数只代表抽血时的血糖水平，对确诊有局限性。近年来的医学研究证明：血液中的糖化血红蛋白（HbA1c）浓度相对稳定，其浓度值能准确反映最近1-3个月期间的血糖水平，便于医生对糖尿病进行早期诊断；也可用于糖尿病人的血糖监控及慢性并发症的判断等，受到临床的广泛重视，目前我国各大、中型医院正逐渐开展糖化血红蛋白（HbA1c）占总血红蛋白（Hb）的百分含量的测定项目。有些发达国家已将HbA1c的测定列入中老年人的常规体检项目。测定HbA1c比较常用的方法，目前有乳胶凝集反应法和离子交换高压液相色谱法两种，分别用生化分析仪和糖化血红蛋白自动分析仪进行测定。 1 HbA1c的临床意义 糖化血红蛋白是一项说服力较强、数据较客观、稳定性较好的生化检查，不受偶尔一次血糖升高或降低的影响。能反应糖尿病患者2-3个月以内的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切，在糖尿病学上有重要的临床参考价值。 1．1 增高：测定HbA1c可以了解糖尿病人在2～3个月的血糖控制情况。此外，用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人，地中海贫血和白血病病人亦增高。 1．2 降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性低血糖症等。 1．3 作为糖尿病的病情监测指标 1．3．1 作为轻症、Ⅱ型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。 1．3．2 不是诊断糖尿病的敏感指标，不能取代现行的糖耐量试验。 1．3．3 可以列为糖尿病的普查和健康检查的项目。 1．4 当HbA1c＞9％时，说明患者存在着持续性高血糖，可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。临床经常以糖化血红蛋白作为监测指标来了解患者近阶段的血糖情况，以及估价糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。
血糖控制指标—糖化血清白蛋白（Glycated Albumin，GA） 人体中的葡萄糖与血清蛋白的N-末端发生非酶促的糖基化反应, 其中90%与血清蛋白链内第189 位赖氨酸结合, 形成高分子的酮胺结构, 总称为糖化血清蛋白，其中90％以上为糖化血清白蛋白。因此糖化 血清白蛋白（Glycated Albumin，GA）可以反映糖化血清蛋白的总体水平。 临床意义 1、糖化白蛋白（glycated albumin, GA）则反映了自采血日期起过去 2 周～1 个月的血糖控制情况， GA适合于观察血糖短期、中期变化情况。在一些特殊情况下，如透析性的贫血、急性全身性疾病期、 肝病、糖尿病合并妊娠、降糖药物调整期等，糖化白蛋白更准确反映短期内的平均血糖变化。 2、糖尿病患者长期不良的血糖控制表现为血糖水平过高或血糖水平波动过大是导致慢性并发症（如视 网膜炎、肾病变、神经病等、晚期导致失明及需要透析治疗）的主要原因。GA 是一个可反映血糖近期 变化的优良且检测方便的指标，采用酶法测定的GA 与各项血糖指标及HbA1 c 有较好的相关性，在初 次诊断的糖尿病患者中更为显著。 3、GA 测定在体检人群中糖尿病患者可反映血糖 2 周～1 个月的控制情况，对血糖异常的通过测定GA 可以初步判断是否可能为糖尿病以及是否就医提供参考。 测定原理 第一步：糖化氨基酸消除反应 酮胺氧化酶 糖化氨基酸葡萄糖酮醛+ 氨基酸 第二步：糖化白蛋白的糖化氨基酸分析 蛋白水解酶 糖化白蛋白糖化氨基酸 酮胺氧化酶 糖化氨基酸+ 水葡萄糖酮醛+ 氨基酸 过氧化物酶 + 色源颜色+ 水 第三步：白蛋白分析 白蛋白+ 溴甲酚紫颜色 第 4 步：计算糖化白蛋白占总蛋白的比率 GA 浓度 糖化白蛋白（GA）=（╳100%）/1.14 + 2.9 白蛋白浓度 参考范围 11%-16%。 血糖控制的评估目标 以上
如对您有帮助，请购买打赏，谢谢您！ 糖化血红蛋白检测的临床意义 血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。 糖化血红蛋白是指血液中和葡萄糖结合了的那一部分血红蛋白。 当血液中葡萄糖浓度较高时，人体所形成的糖化血红蛋白含量也会相对较高。人体内红细胞的寿命一般为120天，在细胞死亡前，血液中糖化血红蛋白含量也会保持相对不变。因些糖化因红蛋白水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关。是判定糖尿病长期控制的良好指标。 糖化血红蛋白的测定结果以百分率表示，指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4-6%；许多研究发现糖尿病患者如查能将糖化血红蛋白水平降低至8%以下，糖尿病的并发症将大大降低，如果糖化血红蛋白>9%，说明患者待续性高血糖，会发生糖尿病性肾病,动脉硬化,白内障等并发症，并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。因此，有关专家建议,如果糖尿病患者血糖控制已达标准，并且血糖控制状态较为了平稳，每年至少应该接受2次糖化血红蛋白检测；对于那些需要改变资料方案，或者血糖控制状态不稳定的患者，及正在进行胰岛素治疗的患者，应该每三个月进行一次糖化血红蛋白测定。 糖化血红蛋白的检测可以指导临床更好地制定糖尿病例患者的诊疗方案。如果某位患者每天仅在早餐前测定空腹血糖，发现这个值为130mg/ml,处于政党范围内;但再检测糖化血红蛋白却发现为11%，这意味着该患者在过去的3个月内平均血糖水平已接近270mg/ml，暗示其将来发生糖尿病并发症的危险性非常高,。尽管早餐前血糖结果尚满意，但是一天其它时间的血糖水平却严重超标，需要对患者饮食，运动及药物治疗作出重新评估，并作出相应调整,此外患者还需较现在更为频繁地测定血糖。 综上所述，糖化血红蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一项良好的指标，糖尿病患者应定期检测糖化血红蛋白，并据此制定，修正相关治疗方案。 对于糖尿病患者来说，糖化血红蛋白（hba1c）是一个非常重要的检测指标。通过检测糖化血红蛋白可以了解糖尿病患者过去2～3个月内血糖控制的平均水平，它不受患者偶尔一次的血糖升高或降低的影响。英国糖尿病前瞻性研究证实，糖化血红蛋白每下降1%，糖尿病患者发生死亡的几率就会降低21%，发生心肌梗死的几率就会下降14%，发生中风的几率就会下降12%，发生微血管病变的几率就会下降37%，需要做白内障摘除手术的几率就会下降19%，因周围血管疾病而导致截肢或死亡的几率就会下降43%，发生心力衰竭的几率就会下降16%。 1、作为糖尿病患者长期血糖控制的评价指标；糖化血红蛋白（HbA1c）的测定目的在于消除波动的血糖对病情的控制观察的影响，因而对血糖波动较大的Ⅰ型糖尿病患者，测定糖化血红蛋白（HbA1c）是一个有价值的血糖控制指标。对于2型糖尿病患者，血糖和尿糖测定较简单和经济，且能较可靠地反映病情的控制，故测定糖化血红蛋白（HbA1c）的意义低于1型患者，但可作为辅助检查，用于判定口服药是否失效而须用胰岛素治疗。 2、有助于对糖尿病慢性并发症的认识；血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。 3、用于糖尿病的诊断；健康人HbA1c为4.0%-7.7%(6.5±1.5%), 未控制的DM病人HbA1c 可高达10%-20%；随机检测HbA1c，若＜8%，多不考虑糖尿病。HbA1c＞9%，预报糖尿病的标准度约为78%，灵敏度为68%，特异性94%；HbA1c＞10%，则有80%以上为糖尿病，灵敏度43%，特异性99%，有效率86%。所以，目前并不主张单独用HbA1c来诊断糖尿病，原因是精确度不高，有时造成临床解释困难。
我院检验科推广“血清蛋白电泳”检测项目及其临床意义血清蛋白电泳是了解血清蛋白中主要组分的一种技术方法，通过血清蛋白电泳来反映肝细胞损伤程度和病变范围。也可用于反映其他疾病如肾脏疾病，风湿免疫系统疾病等。 一、临床中何时需要病人的电泳结果？ 1.怀疑有多发性骨髓瘤病； 2.不明的外周神经病（糖尿病、毒素照射、化疗除外）； 3.根据其它实验室的数据，需要做蛋白电泳 3.1总蛋白异常或白蛋白异常 3.2尿蛋白升高 3.3由于恶变而引起的血钙过多（如临床相关的症状为失重，疲劳，骨痛，异常出血） 3.4 WBC、RBC升高 4.临床上出现如下症状时：炎症疾病、自身免疫性疾病、肾病、肝病、蛋白质丢失的相关疾病，均可进行血清蛋白电泳检测。 二、血清蛋白电泳（SPE）临床意义： 1.肝脏疾病：血清白蛋白减少与γ球蛋白增加是肝病患者血清蛋白电泳的共同特征，其减少与增加的程度与肝实质损伤程度相关。 ①肝炎：急性肝炎早期或病变较轻时，电泳结果可无异常或前白蛋白减少。但随病情加重和时间延长，电泳图形可改变，白蛋白、α及β球蛋白减少，γ-球蛋白增高。传染性肝炎患者血清白蛋白轻度下降，α2球蛋白增高并伴有γ球蛋白增高；因为受损肝细胞作为自身抗原刺激淋巴系统，使γ-球蛋白增生。急性肝坏死时，白蛋白明显下降，球蛋白显著升高，出现A/G比值的倒置，提示肝功能损伤到一定程度。 ②肝硬化：血清蛋白电泳可有明显的变化，白蛋白中度或高度减少，α1、α2和β球蛋白百分比也有降低倾向，γ-球蛋白明显增加。并可出现β-γ桥。 ③肝癌：此类患者血清蛋白电泳均有改变，α1、α2-球蛋白明显增高，有时可见于白蛋白和α1-球蛋白的区带之间出现一条甲胎蛋白区带，具有诊断意义。 2.肾脏疾病：如肾病综合征时，由于尿中排出大量白蛋白而使血清中自蛋白明显下降，α2及β-球蛋白升高，γ-球蛋白减少或正常；急性肾炎时α2球蛋白可增高，有时合并γ球蛋白轻度增高；慢性肾炎可见γ-球蛋白中度升高。
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策 良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题，但从染色的结果看，一般可分为两类：无色片（即无阳性信号）和“杂音”染色片（有阳性信号）。 一、无色片 染色结束后，切片中见不到任何阳性信号。这是常规工作中比较常见的现象，出现这种现象，有两种可能：1、真阴性结果：整个染色过程没有出现问题，组织或细胞确实不表达与抗体相关的抗原。2、假阴性结果：即此阴性结果不是真实的反映。假阴性结果又可分为两种情况：（1）、切片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。出现这种情况，要麽是病理医生选择错了切片或抗体选错了，要麽是技术员选错了蜡块。获得正确的切片进行染色是获得正确结果的前提。由此表明：制作出合格的免疫组化切片不仅仅是技术员的事，病理医生也起着不可缺少的作用。（2）、染色过程中的某一或某些环节出了问题。比如，组织未进行抗原修复，有的组织必须经过抗原修复才能检测抗原表达；或选用了只能用于冰冻组织而不能用于石蜡包埋组织的抗体；或一抗失效，虽然抗体失效在理论上是一个逐渐的过程，但偶尔也遇到突然失效的情况，抗体长期不用和/或已超过有效期是主要的原因。也可见于染色过程中漏掉了某一环节，如忘记加二抗或三抗，或用了两次二抗而缺少了三抗，或配制DAB时少了
过氧化氢。为了避免这种简单的错误，有一种简单的方法：在三抗孵育结束时，将切片上的三抗甩在一张白纸上，在将配制好的DAB滴一滴在白纸的三抗上，观察是否出现棕色。如果出现了，证明三抗和DAB的配制过程没有错误。如果这种DAB再滴到切片上没有出现任何阳性信号，问题一定是出在三抗以前。如果纸上不出现棕色反应，问题肯定在三抗DAB或DAB的配制过程。这种简单方法能迅速的帮助我们查找出现问题可能的原因。 解决阴性染色的问题非常简单，就是设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达，说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性，便是真实的阴性，说明组织或细胞没有相应的抗原表达。反之，如果阳性对照没有着色，表明染色过程中某个或某些步骤出了问题或试剂出了问题。应一一寻找原因。阳性对照包括两种，一种称为“自身对照”或“内部对照”，这是指在测试的切片中本身就存在已知的抗原，如正常淋巴结中存在T和B细胞抗原，CD20或CD3都应该有表达。自身对照是一种比较理想的对照，对照和测试组织或细胞都在同一张切片中，都处于相同的试验条件下，结果更可靠也更具有可比性。在选择自身对照片时最好选择既有病变组织同时又有正常组织的部分，这样有利于对比。另一种称为“外部对照”，有时在测试的切片中不存在已知的抗原，如在胃的标本中怀疑是恶性黑色素瘤，需要用HMB45或Mart-1来检测，在正常的胃组织中本身不存在相关的抗原，如果病变出现阳性反应结果，尚能提示是恶黑，但是如果出现阴性结果，就无法确定是本身组织中不含黑色素瘤抗原，还是技术问题。因此，应另外设立一个已知的阳性对照。这种在测试组织之外的阳性对照称为“外部对照”。在实际工作中需要设立外部对照的情况很多，如果每一种抗体都要选不同的阳性对照，工作量会很大。为了
糖化血红蛋白临床意义 血中葡萄糖与红细胞的血红蛋白相结合的产物，即红血球的血红蛋白中糖基化部分，称为糖化血红蛋白。正常人血红蛋白中的糖化血红蛋白约在7%以下。糖化血红蛋白亲和色谱测定手段已获公认，正常参考值为5.89±0.9%（4.99%～6.79%）。 糖化血红蛋白的多少与血中葡萄糖的含量高低成正比关系，可以间接反映血糖浓度的改变，同时也反映了机体糖代谢的状态。糖化血红蛋白的临床意义主要体现在以下几点： (1)长期以来，评价糖尿病长期控制水平一直是一个困难问题，对病情波动较大及注射胰岛素的患者尤其如此。一次血糖、尿糖的测定，只能反映抽血当时的血糖水平，并且血糖随进食和糖代谢的变化而有所改变，不能说明前一段较长时间病情的全貌。而糖化血红蛋白随血糖变化而变化，可以反映出病人在抽血化验前4～8周之内一段时间的血糖平均水平。 (2)糖化血红蛋白不仅可作为糖尿病的病情监测指标，亦可作为轻症、Ⅱ型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。但不是诊断糖尿病的敏感指标，不能取代现行的糖耐量试验，可列为糖尿病的普查和健康检查的项目。 (3)正常人的糖化血红蛋白＜6.79%。如果＞11.5%时，说明患者存在着持续性高血糖，可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。因此，临床经常以糖化血红蛋白作为监测指标来了解患者近阶段的血糖情况，以及估价糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。 (4)对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿、畸形胎、死胎，以及急、慢性并发症发生发展的监督具有重要意义。 (5)对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖（测血糖当然增高）抢救者，急查糖化血红蛋白具有鉴别诊断的价值。 (6)对于糖化血红蛋白特别增高的糖尿病患者，应警惕如酮症酸中毒等急性合并症的发生。 总之，糖化血红蛋白是一项说服力较强、数据较客观、稳定性较好的生化检查，能反应糖尿病患者2个月以内的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切，在糖尿病学上很有临床参考价值。 评价糖尿病长期控制水平一直是一个困难问题，对病情波动较大及注射胰岛素的患者尤其如此。国外目前已将糖化血红蛋白监测作为糖尿病疗效判定和调整治疗方法的“金指标”。研究表明[5]，糖化血红蛋白的测定与WHO 的糖尿病的诊断标准密切相关，可以不必考虑口服葡萄糖耐量试验（OGTT）的结果，仅根据检测结果即可作出治疗决定。HbAlc 大于7% 时，不管OGTT 的诊断是糖耐量减退还是糖尿病，均需要药物治疗；HbAlc 小于7% 时，一般可采用饮食和运动疗法。糖尿病患者如果能将糖化血红蛋白水平降低至8% 以下，糖尿病的并发症将大大降低。血糖严格控制的患者（HbAlc < 8%）可使视网膜病变下降76%，肾脏病变下降56%，神经系统病变下降60%，心血管病变下降41%，HbAlc 每下降1% 可使微血管并发症下降35%。如果糖化血红蛋白> 9%，
血清蛋白电泳：醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶是目前最常采用的两大介质。蛋白质在碱性条件下带不同量的负电荷，在电场中由阴极向阳极泳动。由于白蛋白等电点的差异，电泳后由正极到负极可分为，白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五个区带，血清蛋白电泳初步了解血清白蛋白中主要组分的一种技术方法，通过血清蛋白电泳来反映肝细胞损伤程度和病变范围。也可用于其他疾病时有关白蛋白代谢的观察。参考值：琼脂糖法：白蛋白48％～64％，α1-球蛋白2.5％～5.4％，α2-球蛋白8.3％～l4％，β-球蛋白8.7％～l5％，γ-球蛋白12％～l5％。临床意义：血清白蛋白减少与γ球蛋白增加是肝病患者血清蛋白电泳的共同特征，其减少与增加的程度与肝实质损伤程度相关。①肝炎：急性肝炎早期或病变较轻时，电泳结果可无异常或前白蛋白减少。但随病情加重和时间延长，电泳图形可改变，白蛋白、α及β球蛋白减少，γ-球蛋白增高。因为受损肝细胞作为自身抗原刺激淋巴系统，使γ-球蛋白增生。A／G比值的倒置，提示肝功能损伤到一定程度。②肝硬化：血清蛋白电泳可有明显的变化，白蛋白中度或高度减少，α1、α2和β球蛋白百分比也有降低倾向，γ-球蛋白明显增加。并可出现β-γ桥，即从β区到γ区连成一片难以分开，或两区间仅见一浅凹，如同时有α1、α2-球蛋白减少，首先要考虑肝硬化。β-γ桥出现的原因系由IgA、M、G同时增加，而IgA和IgM在电泳上位于β区和γ区之间所致，肝硬化时常有多克隆免疫球蛋白升高，特别当IgA明显升高时，便使0区与y区融合一片，出现了β－γ桥。③肝癌：此类患者血清蛋白电泳均有改变，α1、α2－球蛋白明显增高，有时可见于白蛋白和α1－球蛋白的区带之间出现一条甲胎蛋白区带，具有诊断意义。④肝外疾患：肾病综合征时，由于尿中排出大量白蛋白而使血清中自蛋白明显下降，α2及β－球蛋白升高；多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症、良性单克隆免疫球蛋白增生症时血清β、γ区带处出现一特殊单克隆区带，称为M蛋白质；系统性红斑狼疮、风湿性关节炎等自身免疫性患者可有不同程度的白蛋白下降及γ－球蛋白升高。