《生物化学实验》教学大纲
课程名称：生物化学实验
课程编号：12030027
课程类别：专业基础课/必修课
学时/学分：32/1
开设学期：第三学期
说明
一、课程性质与说明
专业基础课/必修课
二、教学目标
1.使学生能掌握常规的生物化学实验的基本技术和方法；
2.培养学生的实际操作能力和分析解决问题的能力；
3.使学生能掌握生化常用仪器设备的操作和应用能力，为今后从事教学、科研及技术开发打下坚实的基础。
学时分配
序号实验项目实验
时数实验
类型内容与要求小计实验1氨基酸的分离鉴定—纸层析法3验证性以滤纸作为支持物，不同的氨基酸在同一推动剂中具有不同的分配系数，根据茚三酮与AA反应颜色反应，达到分离和鉴定混合氨基酸的目的。实验2考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 3验证性根据蛋白质-考马斯亮蓝G-250结合物在595nm 波长下有最大光吸收，其吸光值与蛋白质含量成正比的原理测定蛋白质的含量。实验3SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量7综合性根据蛋白质大分子所带电荷和分子形状的差异所引起的效应去掉或将其减少到可以忽略不计的程度，使蛋白质大分子的迁移率完全取决于它的相对分子质量的原理，根据凝胶条带判断蛋白质的纯度和分子量。实验4纤维素酶活的测定及酶学性质研究3验证性根据还原糖与DNS生成红棕色的氨基化合物，在540nm波长处有最大光吸收，在一定范围内还原糖的量与反应液的颜色强度呈比例关系，利用比色法测定其还原糖生成的量就可测定和计算纤维素酶的活力以及掌握环境条件对酶活性的影响。实验5纤维素酶米氏常数的测定6设计性在温度、pH及酶浓度恒定的条件下，底物浓度对酶促反应的速度有很大的影响。Km为酶的特征常数，对于每一个酶促反应，在一定条件下都有其特定的Km值，根据米氏方程，以酶活性单位（v）的倒数１／v为纵坐标，以底物浓度［S］的倒数１／［S］为横坐标，在坐标纸上描点并连成直线，可用作图法求出Km。实验6植物多糖的提取及含量的测定3验证性掌握水提醇沉法制备植物多糖的原理和方法以及苯酚--硫酸法测定多糖的原理和方法实验7常见果蔬中主要营养成分的比较9设计性掌握不同果蔬中多糖（蒽酮比色法），维生素C（DCPIP法）和蛋白含量测定（考马斯亮蓝G-250）的方法合计3236 四、实验方法与要求建议本课程实验教学主要采用传统的实验教学方法，结合多媒体、小组讨论与集体讨论、实验设计、教学录像、趣味实验等多种教学手段，并及时认真、准确和耐心地辅导学生操作，帮助学生通过本课程的学习全面地掌握生物化学的基本实验方法与技能以及实验设计的思路，以提高学生从事科学研究的综合素质。
要求学生认真预习，熟悉实验的内容，了解所用的仪器用具；实验中严格按操作规程进行，仔细观察，及时记录实验现象及结果，认真做好每一天的实验报告；实验结束后仔细分析和总结实验结果；使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，在操作过程中发现任何意外现象都要及时向任课教师报告；在实验过程中制造的任何垃圾都要丢到垃圾筐里（或先放
在自己的桌面废物缸内），严禁随地投弃！
五、考核方式及要求
1.考核方式：考试（√）
2.成绩评定：
记分制：百分制（√）
实验成绩（100分）=实验预习（10%）+实验态度、卫生、安全（10%）+实验操作（25%）+实验报告（25%）+实验考试（30%）。
重点考察学生对生物化学实验基本理论和实验技能的理解、掌握及其灵活应用的能力。
本文
实验一氨基酸的分离鉴定——纸层析法
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：验证性
计划学时：3学时
实验分组：1-2人/组
二、实验目的
1.学习氨基酸纸层析法的基本原理。
2.掌握氨基酸纸层析的操作技术。
三、实验的基本内容和要求
1.将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中；
2.取层析滤纸（长22cm.宽14cm）一张。在纸的一端距边缘2~3cm处用铅笔划一条直线，在此直线上第间隔2cm作一记号如右图；
3.点样用毛细管将各种氨基酸样品分别点在这6个位置上，干后再点一次。每点在纸上扩散的直径最大不超过3mm；
4.扩展用线将滤纸缝成筒状，纸的两边不能接触。将盛有约20mL扩展剂的培养皿建迅速置于密闭的层析缸中，并将滤纸直立于培养皿中（点样的一端在下，扩展剂的液面需你于点样线1cm）。待溶剂上升15~20cm时即取出滤纸，自然干燥或用吹风机热风吹干；
5.显色用喷雾器均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液，然后置烘箱中烘烤5分钟（100℃）或用热风吹干即可显出各层析斑点；
6.计算各种氨基酸的Rf值。
四、实验仪器设备及材料
层析缸，毛细管，喷雾器，培养皿，层析滤纸（新华一号）。
五、实验操作要点
1.在整个操作过程中，手只能接触滤纸边缘，否则手指上的氨基酸会造成滤纸上众多斑点；
2.在点样时，不要将毛细管插错了试剂瓶；
3.展层结束后，切勿忘记用铅笔描出溶剂前沿；
4.点样斑点不能太大（其直径应小于0.3cm），防止氨基酸斑点重复；吹风温度不宜过高，否则斑点变黄；
5.根据目的、要求，选择合适溶剂系统。
六、实验教学建议
(1).点样时扩散点不能太大，层析纸缝合时要直，展层剂量要合适。
(2).混合氨基酸的分离时间应该在2-3h，过短达不到分离效果。
实验二考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：验证性
计划学时：3学时
实验分组：2-4人/组
二、实验目的
1.学习考马斯亮兰G-250染色法测定蛋白质含量的基本原理和方法。
2.熟练掌握722s型等分光光度计的使用和操作方法。
3.学习运用标准曲线法测定样品中蛋白质含量的原理和方法。
4.初步学习在生物组织中提取蛋白质的方法。
三、实验的基本内容和要求
1.标准曲线制作
0~100μg/mL 标准曲线的制作：取6支10mL干净的具塞试管，按表1 取样。盖塞后，将各试管中溶液纵向倒转混合，放置2min后用1cm光经的比色杯在595nm 波长下比色，记录各管测定的光密度OD595nm，并做标准曲线。
2.绘制标准曲线
用723分光光度计在595nm处比色。记录1～6管所读吸光值，以蛋白质含量（μg）为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘出标准曲线。注意，由于考马斯亮兰染色能力强，比色杯一定要洗干净。不可用石英杯测定。
3.计算蛋白质含量
根据样品吸光值在标准曲线上查出对应蛋白质含量，根据公式计算出样品中蛋白质含量。
四、实验仪器设备及材料
1'植物材料；
2.可见分光光度计，紫外分光光度计，离心机，离心管，研钵，刻度移液管，微量滴定管，试管；
3.恒温水浴锅，牛血清蛋白，考马斯亮蓝G-250，乙醇。
五、实验操作要点
1.Bradford 法由于染色方法简单迅速，干扰物质少，灵敏度高，现已广泛应用于蛋白质含量的测定；
2.有些阳离子，如K+、Na+、Mg2+、(NH4)2SO4、乙醇等物质不干扰测定，但大量的去污剂如TritonX-100、SDS 等严重干扰测定；
3.蛋白质与考马斯亮蓝G-250 结合的反应十分迅速，在2min 左右反应达到平衡，其结合物在室温下1h 内保持稳定。因此测定时，不可放置太长时间，否则将使测定结果偏低。
六、实验教学建议
1.实验之前必须预习，做到对原理的理解，注意事项的把握。
2.实验报告步骤实际，结果准确并重点对结果进行分析。
3.教学要发挥学生主导地位，对有些简单的基础性实验老师可以不讲，主要解决疑难问题。
实验三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：综合性
计划学时：7学时
实验分组：4-6人/组
二、实验目的
1.学习SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法蛋白质纯度和分子量的鉴定的方法。
2.掌握制备不连续凝胶的技术和方法。
三、实验的基本内容和要求
1.制板
用酒精棉球擦拭制胶槽、玻璃板和盖板，并将其晾干；将制胶玻璃板按照平、凹、平、凹顺序放入制胶槽内，一共放4套，盖上有机玻璃盖板，用四只夹子夹紧，受力点在密封条位置，务必密封，以防漏胶。
2.制胶
(1).制备10%的分离胶；
(2).制备5%的浓缩胶；
(3).凝聚后，小心取出加样梳，防止把点样孔弄破，用洗瓶冲洗点样孔，除掉未凝聚的丙烯酰胺等杂物。彻底倒出点样孔中的水，在其中加入已稀释的电极缓冲液。
3.样品处理
(1).标准样品处理
先用电炉将烧杯中的自来水烧开，再取0.5mg/mL的marker标准蛋白质溶液0.1mL加入Eppendorf 管中，密闭，插到泡沫架上，用不锈钢镊子将泡沫架放到沸水浴中加热5min，取出，冷却至室温备用。
(2).待测样品处理
用自制的粗酶溶液作为待测样品，取待测液0.1mL，在Eppendorf 管中与2×样品稀释液等体积混匀，密闭，插到泡沫架上，用不锈钢镊子将泡沫架放到沸水浴中加热5min，取出，冷却至室温备用。
4.点样
松开制胶槽上的夹子，取出中间夹有凝胶的平、凹两块玻板（三者粘在一起的，切勿分开，称作凝胶板三联体），用自来水冲刷并用手抹去表面上的残余凝胶，选取两块做得比较好的凝胶板三联体，倾尽点样孔中的液体，以点样孔朝上，按凝胶板三联体（凹面玻璃朝外，平面玻璃朝内）、电泳槽芯、另一块凝胶板三联体（凹面玻璃朝外，平面玻璃朝内）、斜锲插板的排列顺序，装进电泳槽，并用斜锲插板插紧，牢牢固定。用100μL微量注射器取15μL 处理过的蛋白质溶液，点到点样孔中。marker标准蛋白质溶液点在正中央的点样孔中，待测蛋白质溶液分别点到左、右两边的点样孔中，注意要有间隔，每人记住自己的点样位置。5.电泳
向电泳槽的内槽加入电极缓冲液使其溢出而流到外槽，使外槽中的电极缓冲液液面高度约为5厘米左右。
对准电泳槽芯的正负电极，盖上电泳槽的盖子，将整个电泳槽置于盛有自来水的盆中（作冷凝用），某些型号的电泳槽自带冷凝装置，只要接上自来水就可起到冷凝作用。将盖子上的正、负电极插到电泳仪上的正、负极插孔中，将稳压旋钮调到最小，而稳流旋钮调到最大，插上电泳仪的电源插头。打开电源开关，调整稳压旋钮使电压处于150～300 V之间。设置电泳起始时间，即用快进和慢进按钮将时钟调整为0：00，再设置电泳结束时间，即在按住定时按钮的前提下用快进和慢进按钮将时钟调整为3：00，开始电泳，直至蓝色前沿迁移至离凝胶最下端约2cm时，关掉电泳仪开关，拔下插头，停止电泳。
6.固定
从水盆中取出电泳槽，打开电泳槽盖子，将电泳槽内的电极缓冲液回收，取出斜楔插板，拿出夹着凝胶的玻板，将其置于盛有自来水的盆中。在平、凹两块玻璃板间隙之间，用药勺
柄轻轻橇动，即可将胶面与平面玻璃板分开，再用刀片沿着凝胶与凹面玻璃板的结合部位划开，抖动玻璃板使凝胶脱离玻板而滑入水中，用手轻轻将凝胶托起放入透明塑料饭盒中。加入固定液使凝胶浸没，晃动盒子使反应均匀，加盖密闭，室温下固定30min，回收固定液。
7.染色
加入染色液使凝胶浸没，晃动盒子使反应均匀。加盖密闭，置于60℃恒温水浴锅中染色10min，回收染色液。
8.脱色
凝胶先用自来水洗去表面的残余染色液，加入脱色液使凝胶浸没，加盖密闭，置于60℃恒温水浴锅中加热10min，更换新的脱色液再处理2次，最后将凝胶浸泡于蒸馏水中，脱色后的凝胶背景应为无色。
四、实验仪器设备及材料
1.丙稀酰胺(Acr母液)，10％的SDS溶液，10％的过硫酸铵溶液，四甲基乙二胺（TEMED），分离胶缓冲液：1.5M Tris,PH8.8，浓缩胶缓冲液：1.0M Tris,PH6.8，电极缓冲液：10×30g Tris,125g 甘氨酸和5g SDS，加水溶解定容至1000ml,pH8.3，样品缓冲液：0.2M Tris,PH6.8,1%SDS,30%甘油，巯基乙醇及溴酚兰，染色液：0.15％考马斯亮蓝R250，溶于脱色液，脱色液：50％的甲醇，7％的冰醋酸的水溶液，标准分子量蛋白。
2.植物（动物血清）蛋白。
五、实验操作要点
1.SDS与蛋白质的结合按质量成比例（即：1.4gSDS/g蛋白质），如果比例不当，就不能得到准确的数据；
2.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时，必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用；
3.有些蛋白质由亚基（如血红蛋白）或两条以上肽链（α-胰凝乳蛋白酶）组成的，它们在巯基乙醇和SDS的作用下解离成亚基或多条单肽链。因此，对于这一类蛋白质，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定的只是它们的亚基或是单条肽链的相对分子量；
4.有的蛋白质（如：电荷异常或结构异常的蛋白质；带有较大辅基的蛋白质）不能采用该法测相对分子量；
5.如果该电泳中出现拖尾、染色带的背景不清晰等现象，可能是SDS不纯引起。
六、实验教学建议
1.此实验知识点较多，实验操作繁琐，时间长，步骤多，实验之前必须预习，熟记实验操作步骤，相互提问讨论做到对原理的理解。
2.实验报告步骤实际，结果准确并对结果进行分析。
3.教学要发挥学生主导地位，对有些简单的基础性实验老师可以不讲，主要解决疑难问题。
实验四纤维素酶活的测定及酶学性质研究
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：验证型
计划学时：3学时
实验分组：1-3人/组
二、实验目的
理解测定酶活力的原理，熟悉纤维素酶酶活测定常用方法,了解测定酶活力的意义。
三、实验的基本内容和要求
1.酶活力定义：1g固体酶在指定H条件下，1h水解底物，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活力单位，以u/g表示。
2.待测酶液的制备
称取固体酶液0.5g精确至0.1mg，用水溶解，磁力搅拌混匀，准确稀释定容至50mL（使试样液与空白液的吸光度之差恰好在0.3—0.4范围内），放置10min，待测。反应时将酶液做适当倍数稀释。
3.葡萄糖标准曲线的绘制
操作步骤
①分别取洁净干燥小试管20支，称取20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg的秸秆分别至于25 mL的刻度试管中（一支空白管，三支样品管），并做好标记。
②分别向以秸秆为底物的这四个支管中，准确加入相应的pH的柠檬酸缓冲液1.5mL。
③分别加入准确稀释好的待测酶液0.5mL于三支样品管中（空白管不加），使管内溶液浸没秸秆，混匀，盖塞。
④将这四支试管同时置于（50±0.1）℃振荡水浴中，准确计时，反应60min取出。
⑤立即准确向各管中加入DNS试剂3.0mL。再于空白管中准确加入稀释好的待测酶液0.5mL，摇匀。将着四支试管同时放入沸水浴中，加热10min，取出，迅速冷却至室温，加水定容至25mL，摇匀。
⑥以空白管（对照液）调仪器零点，在分光光度计波长540nm下，用10mm比色
皿，分别测量三支平行管中样液的吸光度，取平均值。以吸光度平均值用线性回归方程求出还原糖的含量。
4.纤维素酶活力测定；
5.在不同温度下，测定酶活力的大小；
6.在不同pH条件下，测定酶活力的大小；
7.测定向反应体系中加入不同激活剂或抑制剂对酶活力的影响。
四、实验仪器设备及材料
1.固体纤维素酶；
2.吸管，分光光度计，恒温水浴锅，电子分析天平（感量0.01mg），电炉，容量瓶，玻璃漏斗，量筒，研钵，三角烧瓶。
五、实验操作要点
1.在低温下操作；
2.研磨快速、充分；
3.水浴锅温度要恒定；
4.缓冲液pH的配制要准确。
六、实验教学建议
1.标准曲线制作至少重复三次，R2≥0.995，实验之前必须预习，相互提问讨论做到对原理的理解；
2.实验报告步骤实际，结果准确并对结果进行分析。
实验五纤维素酶米氏常数的测定
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：设计性
计划学时：6学时
实验分组：1-2人/组
二、实验目的
1.掌握米曼氏方程公式的推导和应用；
2.了解林贝氏作图法求米氏常数的意义。
三、实验的基本内容和要求
1.酶活力定义：1g固体酶在（50+0.1）℃、指定pH条件下（酸性纤维素酶pH=4.8），1h 水解底物，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活力单位，以u/g(或u/mL)表示。
2.待测酶液的制备
称取固体酶液0.5g精确至0.1mg，用水溶解，磁力搅拌混匀，准确稀释定容至50mL（使试样液与空白液的吸光度之差恰好在0.3—0.4范围内），放置10min，待测。反应时将酶液做适当倍数稀释。
3.葡萄糖标准曲线的绘制
4.操作步骤
①分别取洁净干燥小试管20支，称取20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg的秸秆分别至于25 mL的刻度试管中（一支空白管，三支样品管），并做好标记。
②分别向以秸秆为底物的这四个支管中，准确加入相应的pH的柠檬酸缓冲液1.5mL。
③分别加入准确稀释好的待测酶液0.50mL于三支样品管中（空白管不加），使管内溶液浸没秸秆，混匀，盖塞。
④将这四支试管同时置于（50±0.1）℃振荡水浴中，准确计时，反应60min取出。
⑤立即准确向各管中加入DNS试剂3.0mL。再于空白管中准确加入稀释好的待测酶液
0.5mL，摇匀。将着四支试管同时放入沸水浴中，加热10min，取出，迅速冷却至室温，加水定容至25mL，摇匀。
⑥以空白管（对照液）调仪器零点，在分光光度计波长540nm下，用10mm比色皿，分别测量三支平行管中样液的吸光度，取平均值。以吸光度平均值用线性回归方程求出还原糖的含量。
⑦酶活性的计算。
⑧以酶活性单位（v）的倒数1/v为纵坐标，以底物浓度［S］的倒数1/［S］为横坐标，在坐标轴上描点并连成直线，求该酶的Km值。
四、实验仪器设备及材料
1.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，0.05mol/L pH=4.8 (适用于酸性纤维素钠)
称取一水柠檬酸4.83g，溶于约750ml水中，在搅拌情况下加入柠檬酸三钠9.74g，用水定容至1000ml，调节溶液的pH到（4.8±0.05）备用。
2.DNS试剂
称取3，5-二硝基水杨酸（10±0.1）g，置于约600mL水中，逐渐加入氢氧化钠10g，在50℃水浴中（磁力）搅拌溶解后，再依次加入酒石酸钾钠200g，苯酚（重蒸）2g和无水亚硫酸钠5g，待全部溶解澄清后，冷却至室温，用水定容至1000ml，过滤。贮存于棕色试剂瓶中，于暗处放置7d后使用。
3.吸管，分光光度计，恒温水浴锅，电子分析天平（感量0.01mg），电炉，容量
瓶，玻璃漏斗，量筒，研钵，三角烧瓶。
五、实验操作要点
1.电子天平称量药品时，每位学生要带纸和笔，方便记录数据；
2.水浴锅温度要恒定；
3.缓冲液pH的配制要准确，DNS配制好一周之后使用。
六、实验教学建议
1.标准曲线制作至少重复三次，R2≥0.999，
2.实验之前必须预习，相互提问讨论做到对原理的理解；
3.实验报告步骤实际，结果准确并对结果进行分析。
实验六植物多糖的提取及含量的测定
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：验证性
计划学时：3学时
实验分组：2-4人/组
二、实验目的
1.了解植物多糖的化学性质及用途
2.学习制备植物多糖的原理和方法
3.学习和掌握苯酚--硫酸测定多糖的原理和方法
三、实验的基本内容和要求
1.粗多糖的提取
1).称取黄芪根1 kg（0.5g），去掉杂质和泥土，粉碎成粉末；
2).黄芪根粉末中加以6-7倍的蒸馏水，煮沸1.5 h（1h），用4层纱布过滤；
3).滤渣用同样方法煮沸3次合并滤液，调pH值至6.5左右，加热浓缩至一定量；
4).将浓缩液以 2000 r/min离心 10 min，上清液用Sevag 法法脱蛋白两次；
5).2000 r/min离心 10 min，上清液中加 3 倍量95 %乙醇沉淀倾去上清液(过夜使多糖沉淀完全)，沉淀物中再加入 95 %的乙醇至浓度为80 %，静置20min；
6).倾出上清，滤渣用丙酮洗涤 2次，过滤将滤渣放入干燥器中；
7).- 20 冷冻真空干燥，即得到APS。
2.多糖含量的测定
1).葡萄糖标准曲线的制作；
2).将以上提取的粗多糖用热水溶解后定容于50ml容量瓶中，精密吸取1ml按标准曲线制作的方法操作，测490nm的吸光度值，从标准曲线计算多糖含量。
四、实验仪器设备及材料
1.6%的苯酚溶液；
2.标准葡萄糖溶液精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖100mg，溶解定容于100ml的容量瓶中，摇匀。用前稀释10倍，此溶液含葡萄糖0.1mg/ml；
3.浓硫酸、正丁醇、氯仿、乙醚、乙醇。
五、实验操作要点
1.实验材料（黄芪）一定要充分粉碎；
2..加入氯仿-正丁醇混合液，静置分层，取上层液离心；
3.本实验所用试剂浓硫酸添加时一定要小心，以防烧伤；
4.操作要规范，细心才能得到准确的结果；
5.苯酚容易氧化，使用完立即盖上盖子，以防氧化。
六、实验教学建议
1.在离心机使用过程中一定要配平；
2.仔细观察老师的示范，做到准确.小心和认真；
3.实验报告详细写出提取过程中的关键环节。
实验七常见果蔬中主要营养成分的比较
一、实验性质
实验类别：专业基础课/必修课
实验类型：设计性
计划学时：9学时
实验分组：1-3人/组
二、实验目的
掌握蒽酮比色法、2,6-二氯酚靛酚滴定法和考马斯亮蓝G-250法综合测定不同植物材料的总糖、维生素C和蛋白质含量。
三、实验的基本内容和要求
1.总糖的测定
①葡萄糖标准曲线的制作；
②植物样品中可溶性糖的提取：
将样品剪碎至2 mm以下，105 ?C烘干至恒重，精确称取1~5 g，置于50 ml三角瓶中，加沸水25 m1，加盖，超声提取10 min，冷却后过滤（抽滤），残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤（抽滤），滤液收集在50 m1容量瓶中，定容至刻度，得提取液；
③稀释：吸取提取液2 m1，置于另一50 m1容量瓶中，以蒸馏水稀释定容，摇匀；
④测定：吸取1 ml已稀释的提取液于试管中，加入4.0 ml蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水取代提取液。以下操作同标准曲线制作。根据A620平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量（?g）；
2.维生素C含量的测定(同实验五)；
3.蛋白质含量的测定（同实验二）；
四、验仪器设备及材料
1.仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等；
2.试剂：
(1).葡萄糖标准液：l00 ?g/ml
(2).浓硫酸
(3).蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 ml浓 H2SO4中。当日配制使用。
3.材料：水果和蔬菜
五、实验操作要点
1.电子天平称量时，每位学生要带纸和笔，方便记录数据；
2.某些水果.蔬菜（如橘子.西红柿等）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇；
3.Vc测定时如滤液颜色太深，滴定时不易辨别终点，可先用白陶土脱色；
4.每人单独操作，最后汇总结果。
六、实验教学建议
1.各样品滴定过程宜迅速，一般不超过2分钟。滴定所用的染料不应少于1ml或多于4ml，如果样品含抗坏血酸太高或太低时，可酌量增减样液。实验之前必须预习，做到对原理的理解，注意事项的把握；
2.不同样品的蛋白含量、总糖和Vc进行比较分析，解释现象。
参考资料
[1]陈钧辉等.生物化学实验（21世纪国家理科基地教材）,北京:科学出版社,2004
[2]李合生等.植物生理生化实验原理与技术(面向21世纪课程教材).北京:高教出版社,2003
[3]许激扬.生物化学实验与指导（第二版）,医药科技,2009
[4]张龙翔,张庭芳,李令媛等,生化实验方法和技术,高等教育出版社,1985
[5]赵永芳.生物化学技术原理及其应用,武汉大学出版社,1994
[6]蔡武城等.生物化学实验技术教程,复旦大学出版社,1983
高级动物生化试题 问答题： 1. 简述非编码RNA（non-coding RNA）的种类、结构特点及其主要功能。 非编码RNA的种类结构和功能 1tRNA转运RNA（transfer RNA，tRNA） 结构特征之一是含有较多的修饰成分，核酸中大部分修饰成分是在tRNA中发现的。修饰成分在tRNA分子中的分布是有规律的，但其功能不清楚。5’末端具有G（大部分）或C。3’末端都以ACC的顺序终结。有一个富有鸟嘌呤的环。有一个反密码子环，在这一环的顶端有三个暴露的碱基，称为反密码子（anticodon）.反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。有一个胸腺嘧啶环。tRNA具有三叶草型二级结构以及“L”型三级结构，tRNA 的不同种类及数量可对蛋白质合成效率进行调节。tRNA负责特异性读取mRNA中包含的遗传信息，并将信息转化成相应氨基酸后连接到多肽链中。 tRNA为每个密码子翻译成氨基酸提供了结合体，同时还准确地将所需氨基酸运送到核糖体上。鉴于tRNA在蛋白质合成中的关键作用，又把tRNA称作第二遗传密码。tRNA还具有其他一些特异功能，例如，在没有核糖体或其他核酸分子参与下，携带氨基酸转移至专一的受体分子，以合成细胞膜或细胞壁组分；作为反转录酶引物参与DNA合成；作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。 2rRNA核糖体RNA（ribosomal RNA, rRNA） 核糖体RNA是细胞中最为丰富的RNA，在活跃分裂的细菌细胞中占80%以上。
他们是核糖体的组分，并直接参与核糖体中蛋白质的合成。核糖体是rRNA 提供了一个核糖体内部的“脚手架”，蛋白质可附着在上面。这种解释很直接很形象，但是低估了rRNA在蛋白质合成中的主动作用。较后续的研究表明，rRNA并非仅仅起到物理支架作用，多种多样的rRNA可起到识别、选择tRNA以及催化肽键形成等多种主动作用。例如：核糖体的功能就是,按照mRNA的指令将氨基酸合成多肽链。而这主要依靠核糖体识别tRNA 并催化肽键形成而实现。可以说核糖体是一个大的核酶( ribozyme)。而核糖体的催化功能主要是由rRNA来完成的,蛋白质并没有直接参与。 3 tmRNA tmRNA主要包括12个螺旋结构和4个“假结”结构，同时还包括一 个可译框架序列的单链RNA结构。tmRNA中H1由5’端和3’端两个末端形成，与tRNA的氨基酸受体臂相似。H1和H2的5’部分之间有一个由10-13nt 形成的环，类似tRNA中的二氢尿嘧啶环，称为“D”环。H3和H4，H6和H7，H8和H9，H10和H11之间分别形成Pk1，pK2，pK3，pK4。H4和H5之间则由一段包含编码标记肽ORF的单链RNA连接。H12由5个碱基对和7nt 形成的环组成，类似tRNA中的TΨC臂和TΨC环，称为“T”环。tmRNA 结构按照功能进行划分可分为tRNA类似域（TLD）和mRNA类似域（MLD），TLD主要包括H1,H2,H12,“D”环和“T”环，MDL则包括ORF和H5，这两部分分别具有类似tRNA和mRNA的功能。tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器（如叶绿体，线粒体）中的稳定小分子RNA。它具有mRNA分子和tRNA分子的双重功能，它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式中发挥重要作用。同时，它与基因的表达调控以及细胞周期的调控等生命过程密切相关，是细菌体内蛋白质合成中起“质量控制”的重要分子之一。识别翻译或读码有误的核糖体，也识别那些延迟停转的核糖体，介导这些有问
生物化学实验报告 动物营养研究所 树润 2015.10.12 猪血中超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及活性测定一．实验目地 1.通过实验了解活性物质的分离提取。 2.了解超氧化物歧化酶的基本功能与应用。 二．实验原理 超氧化物歧化酶是一种酸性蛋白，是唯一以自由基为底物 的酶，具有清除自由基的功能酶，在酶分子上共价连接金属辅 基，因此它对热、PH、以及某些理化性质表现出异常的稳定性。 该酶首次从牛红细胞中分离得到，是一种蓝色含铜蛋白，之后， 研究发现该蛋白酶具有催化氧发生歧化反应的能力，因此将其 命名为超氧化物歧化酶1-2。超氧化物歧化酶是一种能专一地清 除超氧离子自由基（O2-）的金属酶，它具有抗衰老、抗辐射、 抗炎抗癌等作用，因而在医药（如关节炎、红斑狼疮等疾病的 治疗3）、化妆品(有防晒抗炎效果4)、食品工业（SOD灵芝菌5 等）等方面具有了广泛的应用前景。 超氧化物歧化酶是广泛存在于生物体的一种金属酶, 可催化超氧阴离子自由基(O2-)与H+发生歧化反应, 生成H2O2和 O2。SOD催化下述反应：2H++2O2-→H2O2+O2。
超氧化物歧化酶按照它所含金属离子的不同，可分为 Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD等三种。Cu-Zn-SOD为二聚体，呈 蓝绿色；Mn-SOD呈紫红色；Fe-SOD呈黄褐色。 SOD提取、纯化制备方法各异, 常用方法有经典的溶剂沉淀法、盐析法、超滤法和层析法等6-7。本实验采用有机溶剂沉淀法8以新鲜猪血为原料，从中提取SOD并进行纯化。酶活力测定可用以下方法：邻苯三酚自氧化法9、黄嘌呤氧化酶法、NBT光还原法、化学发光法、肾上腺素自氧化法、亚硝酸法等。 该实验SOD酶活性采用邻苯三酚自氧化法测定，酶活性单 位定义为：每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率 达50%的酶量定义为一个酶单位。 样品中蛋白质含量用考马斯亮蓝G-250法测定。考马斯亮 蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合呈现蓝色。在一 定围，溶液在595nm波长下的光密度与蛋白质含量成正比，可 用比色法测定，测定围1-1000μg。 三．实验试剂与器材 1.实验试剂 ACD抗凝剂、0.9%Nacl、丙酮、95%乙醇、氯仿、考马斯 亮蓝G-250、50mmol/L pH8.3磷酸缓冲液、10mmol/L EDTA钠盐 溶液、3mmol/L邻苯三酚溶液等 2.实验器材
生物化学实验 实验基本原理 1 有效数字计算（结合电子天平的应用等） 加减法： 进行数字加减时，最后结果所保留的小数点后的位数应与参与运算的各数中小数点后位数最少者相同，其尾数“四舍五入”。如：0.124+1.2345+12.34=13.6979，应取13.70。 乘除法： 进行数字乘除时，最后结果的有效数字应与参与运算的各数中有效数字位数最少者为准，而与小数点的位数无关，其尾数“四舍五入”。如：1.23×0.12=0.1476,应取0.15。 2 误差分析 误差为实验分析的测定值与真实值之间的差值。误差越小，测定值越准确，即准确度越高。误差可用绝对误差和相对误差表示。 绝对误差= 测定值- 真实值 相对误差= 绝对误差÷真实值×100% 一般用相对误差表示结果的准确度，但因真实值是并不知道的，因此实际工作中无法求出分析的准确度，只得用精确度来评价分析的结果。 3 偏差分析（结合“可溶性蛋白或赖氨酸实验”要求掌握） 精确度表示在相同条件下，进行多次实验的测定值相近的程度。一般用偏差来衡量分析结果的精确度。偏差也有绝对偏差和相对偏差两种表示方法。 绝对偏差= 单次测定值- 算术平均值（不计正负号） 相对偏差= 绝对偏差÷算术平均值×100%
例如：分析某一材料糖含量，共重复测定5次，其结果分别为：16.1%，15.8%，16.3%，16.2%，15.6%，用来表示精确度的偏差可计算如下： 分析结果算术平均值个别测定的绝对偏差（不计正负） 16.1% 0.1% 15.8% 0.2% 16.3% 16.0% 0.3% 16.2% 0.2% 15.6% 0.4% 平均绝对偏差=（0.1%+0.2%+0.3%+0.2%+0.4%）÷5 = 0.2% 平均相对偏差= 0.2÷16.0×100% = 1.25% 在实验中，有时只做两次平行测定，这时就应用下式表达结果的精确度： 两次分析结果的差值÷平均值×100% 4 实验结果的表述：实验结果可用列表法（“影响酶作用的因素”常用）和作图法（综合实验用）表示。 第1章分光光度技术 分光光度技术是光学（光谱）分析技术的一种，它是利用物质的特征吸收光谱来对不同物质进行定性和定量分析的一项技术。我们将重点介绍紫外光-可见光分光光度法。 一、紫外光-可见光分光光度法的基本原理 1、讨论的波长范围：200～400nm的紫外光区和400～760nm的可见光区。 人肉眼可见的光线称可见光，波长范围在400～760nm；
制作合同 合同编号: 甲方： 地址： 电话： 传真： 乙方：海口大帅文化传媒有限公司 地址：海口市南海大道海口国家保税区海归园212 电话：3 传真：3 ￥ 甲乙双方本着平等自愿的原则协商一致的原则，经协商达成如下条款： 一、工作内容及要求： （一）甲方委托乙方制作三维动画宣传短片（以下简称“动画片”）。完成的动画片总长度暂定为分钟。最终成品象素为：。 （二）制作要求： 1、动画片应清晰表现建筑结构及建筑特色。要求画面充实、清晰，色调统一、协调； 2、动画片具体制作内容以脚本为准，脚本由甲乙双方另行签字确定成为合同附件； 二、甲方的权利与义务： （一）甲方有权对整体制作提出明确的要求和想法，对脚本和样带提出修改意见。 （二）甲方应提供各阶段图纸和相关资料，并有义务为乙方解释图纸和设计内容。 · （三）甲方在乙方提供动画制作脚本后认真审阅并提出更改意见，脚本经甲方确认后对动画制作计划不再进行较大更改。
（四）由于非乙方原因造成工作量的增加，双方协商应乙方要求的追加相应的费用及制作时间。非乙方原因包括：①做为表现内容的原设计方案更改；②甲方未及时提供制作所必需的资料；③甲方未遵照合同约定，按时、按阶段付款；④甲方对乙方提供的脚本或样带未及时提出反馈意见等。（五）甲方有义务信守合同，维护双方利益。 （六）在合同期内，甲方有权根据需要增加合作内容，因此引起成本增加则应给予相应补偿。 三、乙方的权利与义务： （一）由于非乙方原因造成工作量的增加，双方可协商相应延长产品交付的时间而不视为乙方违约。（二）乙方在动画正式制作前编写动画制作脚本，动画制作脚本应经甲方确认。在制作过程中按阶段提供制作进程报告，供甲方了解制作情况。 （三）在完成作品交付之前通知甲方验看作品质量。 （四）乙方作品质量不得低于所提供样片。 （五）乙方在规定时间内按质、按量提交最终产品。 . （六）乙方应严格信守保密原则，图纸及相关资料不得泄露给无关人员和单位，尤其是其它设计单位和人员。 （七）乙方有义务信守合同，维护双方利益。 四、制作期限及付款方式： （一）动画于书面合同签定后，甲方向乙方支付预付款及提供制作所必需的有关资料，乙方以甲方款到及脚本确认时日为项目启动时日，制作周期总计30 个日历天。 （二）甲方将支付乙方人民币元整（￥元整）作为乙方制作费用。（三）甲方应于书面合同双方签定之日支付乙方总制作费的50％作为预付款，即人民币元整（￥元整）； （四）乙方提供粗剪片后3个工作日内，甲方支付总制作费的40 %即人民币元整（￥元整）；
《生物化学实验》内容 课程类型：制药工程专业必修 实验总学时：32课时 开设实验项目数：8个 适用对象：2017制药工程1、2班 实验教师：段志芳 一、实验目标及基本要求 生物化学实验是一门独立的实验课程，培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事求是的科学态度。 二、实验内容
三、成绩 包括实验时的表现（实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等，占50%）及实验报告的完成情况和完成质量（占50%），每个实验按总分为100分为满分进行打分，共8个实验，总评取平均值。 四、要求 （1）实验过程中同组人可以配合进行； （2）实验报告独立完成，同组人数据相同，不得抄袭他组数据；（3）实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做； （4）对实验结果进行简单的分析. 实验一植物组织中可溶性总糖的提取 一、实验目的 1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。 2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。
3．掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。 二、实验原理 可溶性糖是指易溶于水的糖，包括绝大部分的单糖、寡糖，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。可溶性总糖提取方法包括：热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。其溶于热水，不溶于60%以上乙醇，所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。本实验利用可溶性糖溶于水的特性，将植物磨碎，用热水将组织中的可溶性糖提取出来，结合实验二得到总糖浓度，已知溶液体积和原料重量，可以求出总糖含量。 三、实验用品 1.仪器设备：电子天平（精确到0.0g，配称量纸若干）；可控温电 加热板或电炉或电热套或水浴锅均可。可共用。 2.玻璃器皿：研钵1套；100mL锥形瓶1个；25mL量筒1个；玻 璃棒1根；100mL烧杯2个；胶头滴管1支；过滤装置1套（铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个）； 不锈钢刮勺1个；剪刀1把。此部分为每组所用，集中到小框里，放置各实验台上。 3.药品试剂：新鲜植物叶片；蒸馏水。 4.其他：9cm滤纸若干（与玻璃漏斗配套）；纸巾若干；标签纸若
制作合同 合同编号： 甲方： 地址： 电话： 传真： 乙方：海口大帅文化传媒有限公司 地址：海口市南海大道海口国家保税区海归园212 电话： 传真： 甲乙双方本着平等自愿的原则协商一致的原则，经协商达成如下条款： 一、工作内容及要求： （一）___________________________________ 甲方委托乙方制作三维动画宣传短片（以下简称“动画片” ______________________ ）。完成的动画片 总长度暂定为 _______ 分钟。最终成品象素为：_________ 。 （二）制作要求： 1、动画片应清晰表现建筑结构及建筑特色。要求画面充实、清晰，色调统一、协调； 2、动画片具体制作内容以脚本为准，脚本由甲乙双方另行签字确定成为合同附件； 二、甲方的权利与义务： （一）甲方有权对整体制作提出明确的要求和想法，对脚本和样带提出修改意见。 （二）甲方应提供各阶段图纸和相关资料，并有义务为乙方解释图纸和设计内容。 （三）甲方在乙方提供动画制作脚本后认真审阅并提出更改意见，脚本经甲方确认后对动画制作计 划不再进行较大更改。 （四）由于非乙方原因造成工作量的增加，双方协商应乙方要求的追加相应的费用及制作时间。非 乙方原因包括：①做为表现内容的原设计方案更改；②甲方未及时提供制作所必需的资料；③甲方
未遵照合同约定，按时、按阶段付款；④甲方对乙方提供的脚本或样带未及时提出反馈意见等。 （五）甲方有义务信守合同，维护双方利益。 （六）在合同期内，甲方有权根据需要增加合作内容，因此引起成本增加则应给予相应补偿。 三、乙方的权利与义务： （一）由于非乙方原因造成工作量的增加，双方可协商相应延长产品交付的时间而不视为乙方违约。 （二）乙方在动画正式制作前编写动画制作脚本，动画制作脚本应经甲方确认。在制作过程中按阶 段提供制作进程报告，供甲方了解制作情况。 （三）在完成作品交付之前通知甲方验看作品质量。 （四）乙方作品质量不得低于所提供样片。 （五）乙方在规定时间内按质、按量提交最终产品。 （六）乙方应严格信守保密原则，图纸及相关资料不得泄露给无关人员和单位，尤其是其它设计单 位和人员。 （七）乙方有义务信守合同，维护双方利益。 四、制作期限及付款方式： （一）动画于书面合同签定后，甲方向乙方支付预付款及提供制作所必需的有关资料，乙方以甲方 款到及脚本确认时日为项目启动时日，制作周期总计30 个日历天。 （二）甲方将支付乙方人民币______________ 元整（Y ___________ 元整）作为乙方制作费用。 （三）甲方应于书面合同双方签定之日支付乙方总制作费的_5_0_ %作为预付款，即人民币 元整（Y ______________ 元整）； （四）乙方提供粗剪片后丄个工作日内，甲方支付总制作费的40 %即人民币___________________ 元 整（Y ____________ 元整）; （五）乙方提供最终产品，经甲方验收合格后3个工作日内，甲方支付总制作费的尾款10 %即人
三维动画制作合同书 委托单位：湖北海山文化传媒有限公司（简称甲方） 受托单位：武汉武房网络科技有限公司（简称乙方） 甲方委托乙方为甲方的LED项目“海山传媒”提供三维动画的制作，经协商达成一致，签定本合同，双方共同遵守。 一、名称：“海山传媒”项目三维动画演示 二、内容： 项目三维动画制作（ 30 秒） 三、制作工期： 制作时间按合同正式签署后，首付款到账后开始计算，7个工作日之内。 2013年3月1日-2013年12月31日。 四、制作工作计划 阶段1：签定制作合同。乙方向甲方索取制作必须的资料。 阶段2：建模组完成建模，并由甲、乙双方汇审模型的准确性。 阶段3：完成场景的渲染。 阶段4：完成后期合成，添加特效、音乐、音效及剪接。 阶段5：完成文件压缩并提交成品。 五、制作费及费用支付方式： （一）总制作费用（人民币） 总价为小写￥: 元（大写￥:壹佰捌拾万元）。 （二）费用支付方式 第一阶段：双方签订合同后，甲方须立即支付总合同额之30%，人民币小写 ￥：555000 元（大写￥：伍拾伍万伍仟元）。 第二阶段：乙方完成作品，甲方在确认后，须在三日内支付总合同额之70%，人民币小
写￥：元（大写￥壹佰贰拾玖万伍仟元）。 六、双方责任： 1．乙方应按合同约定及双方确定并签字认可的合同附件（三维动画脚本，包括视频剪辑）制作，甲方如有修改意见，必须以书面方式通知乙方后方可进行。 2．建筑外观和周边环境的三维动画制作，要依据甲、乙双方确定的方案进行制作；为使工作顺利开展，制作中甲方如要求变更制作方案，应及时提出书面意见。若更改 范围较大，除按规定制作外，相应增加的制作费用，双方另外签署补充协议。 3．在项目进行过程中，甲方至少安排一次以上到乙方工作场地，视察项目制作的进度，根据实际情况，提出修改意见，甲方如有最终修改意见，必须在最终交稿前2日内提 出，乙方根据意见做出相应的调整, 如若甲方在此之前不提出意见，乙方有权按原 方案进行制作。 4．甲方需按照合同规定的时间及时提供资料给乙方, 如有延误，则合同时间作相应的顺延。乙方需保证甲方提供的所有资料仅用于甲方要求的动画制作，不得外泄或用 作其它用途。 七、乙方提交成品的格式： 1．三维动画DVD光盘一式2份，以数据母盘形式提交甲方。 八、双方违约责任： 1．若甲方未按合同要求的时间支付制作费，甲方应从付制作费的次日起计算，每延误一天，向乙方按应付设计费的1‰偿付违约金。乙方未按合同要求的制作工期完成制 作成果，乙方应从提交日期的次日起计算，每延误一天，向甲方赔偿经济损失为制 作费总额的1‰违约金。 2．若甲方未履行合同，则视同违约，乙方有权要求甲方支付制作总额的20%作为违约金。 3．乙方未履行合同或超出提交日期十天时，则视同违约，并按已收取的制作费的双倍赔付甲方违约金。
食品生物化学实验要求 1.学生做实验前必须写好实验预习报告，做好实验预习，无实验预习报告者不 许进入实验室。每大组实验人数28人，4人一小组。 2.实验试剂的配制，现场由教师指导，学生操作完成。学生在试剂配制过程中， 掌握试剂配置的基本步骤，基本方法和注意事项。 3.实验室所有设备都必须按说明书使用，器皿要小心使用，按规范要求操作， 如有损坏，照价赔偿。 4.卫生要求：每次试验完毕小组成员务必将本试验台及地面收拾整洁，器皿摆 放整齐有序，如哪组成员发现没有搞好自己组的环境卫生，这次试验的所有组员的实验报告都会扣分。 一、10食品科学食品生物化学实验项目表 1. 淀粉的显色、水解和老化（4学时） 2. 蛋白质的功能性质（4学时） 3. 牛奶中酪蛋白等电点测定和氨基酸的分离鉴定（4学时） 4. 或果胶的提取（4学时） 5. 酶的性质实验（4学时） 实验总课时：16学时
二、食品生物化学实验指导书 实验一淀粉的显色、水解和老化 一、实验目的和要求 1、了解淀粉的性质及淀粉水解的原理和方法。 2、掌握淀粉水解的条件和产物的实验方法。 3、淀粉的老化原理和方法 二、实验原理 1、淀粉与碘的反应直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫红色，糊精遇碘呈蓝紫、紫、橙等颜色。这些显色反应的灵敏度很高，可以用作鉴别淀粉的定量和定性的方法，也可以用它来分析碘的含量。纺织工业上用它来衡量布匹退浆的完全度，它还可以用来测定水果果实（如苹果等）的淀粉含量。 近年来用先进的分析技术（如X射线、红外光谱等）研究碘跟淀粉生成的蓝色物，证明碘和淀粉的显色除吸附原因外，主要是由于生成包合物的缘故。直链淀粉是由α-葡萄糖分子缩合而成螺旋状的长长的螺旋体，每个葡萄糖单元都仍有羟基暴露在螺旋外。碘分子跟这些羟基作用，使碘分子嵌入淀粉螺旋体的轴心部位。碘跟淀粉的这种作用叫做包合作用，生成物叫做包合物。 在淀粉跟碘生成的包合物中，每个碘分子跟6个葡萄糖单元配合，淀粉链以直径0.13 pm绕成螺旋状，碘分子处在螺旋的轴心部位。 淀粉跟碘生成的包合物的颜色，跟淀粉的聚合度或相对分子质量有关。在一定的聚合度或相对分子质量范围内，随聚合度或相对分子质量的增加，包合物的颜色的变化由无色、橙色、淡红、紫色到蓝色。例如，直链淀粉的聚合度是200～980或相对分子质量范围是32 000～160 000时，包合物的颜色是蓝色。分支很多的支链淀粉，在支链上的直链平均聚合度20～28，这样形成的包合物是紫色的。糊精的聚合度更低，显棕红色、红色、淡红色等。下表就是淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色。 表 2-1 淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色 淀粉跟碘生成的包合物在pH=4时最稳定，所以它的显色反应在微酸性溶液里最明显。 2、淀粉的水解淀粉是一种重要的多糖，是一种相对分子量很大的天然高分子化合物。虽属糖类，但本身没有甜味，是一种白色粉末，不溶于冷水。在热水里淀粉颗粒会膨胀，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊。淀粉进入人体后，一部分淀粉收唾液所和淀粉酶的催化作用，发生水解反应，生成麦芽糖；余下的淀粉在小肠里胰脏分泌出的淀粉酶的作用下，继续进行水解，生成麦芽糖。麦芽糖在肠液中麦芽糖酶的催化下，水解为人体可吸收的葡萄糖，供人体组织的营养需要。反应过程为：（C6H12O5）m→(C6H10O5)n→C12H22O11→C6H12O6 淀粉糊精麦芽糖葡萄糖
三维动画制作合同书 甲方：（以下简称：甲方） 乙方：（以下简称：乙方） 甲乙双方根据友好协商、互利互惠的原则，并遵照《中华人民共和国合同法》及有关法律、法规，就甲方委托乙方制作形象宣传片等有关事宜，经协商一致签订本协议，并共同遵守。 一、协议内容 1.甲方全权委托乙方制作分钟桥梁三维演示动画片（制作总费用为人民币：￥元 （大写：）（此价格为含税价）。 2.宣传片母版完成时间为预付款到账 30日内。 3.该项目制作时间为预期时间，制作的桥梁三维演示动画超出的时间按每秒￥元标准收 费。 4.若项目周期内乙方制作的三维动画没有达到项目制作的要求，乙方向甲方提供 2 次免费修改 的权利。超出2次数后若甲方需要继续修则乙方按每次￥元收费，直至甲方审核通过。 5.支付方式：甲方在协议签订一日内支付给乙方人民币：￥元（大写：__ _元整）， 作为制作项目的启动资金。节目完成经甲方审核通过后，交付母盘同时，甲方将剩余项目款：￥元（大写：__ _元整）支付给乙方。 6.在合作过程中，甲方须向乙方提供必要的文字、图片、视频素材资料，并在全过程专人全面配 合乙方进行策划、撰稿、拍摄、联络等工作，乙方在制作过程中也应派专门人员负责总体协调、联络、制作、包装等事宜，以提高效率。 7.甲方有义务向乙方提出节目制作基本创意，如甲方不能提供，创意由乙方负责提出，经过甲方 认定后进入制作过程。宣传片脚本定稿后原则上不应改动，如有改动，产生费用由改动方负责。 二、甲方的权利和义务 1．甲方有权要求乙方按照协议约定完成合作，并有权也有义务对合作进程进行了解、督促。2．甲方向乙方提供所有内容应保证符合国家法律规范，如甲方委托乙方制作的内容被指控有违法或侵权行为时，应由甲方承担相应的责任。 3．甲方须按协议约定期限及时向乙方支付各项制作费用。 三、乙方的权利和义务 1．乙方有权要求甲方按协议约定及时支付各项制作费用。 2．乙方有权要求甲方提供所有制作内容的真实性、合法性。 3．乙方严格按协议约定制作完成甲方的内容。 4．乙方有义务向甲方定期介绍制作进程。
实验一糖类的性质实验 （一）糖类的颜色反应 一、实验目的 1、了解糖类某些颜色反应的原理。 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、颜色反应 （一）α-萘酚反应 1、原理糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后 者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。 2、器材 试管及试管架，滴管 3、试剂 莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100 mL，贮于棕色瓶内。用前配制。 1％葡萄糖溶液100 mL 1％果糖溶液100 mL 1％蔗糖溶液100 mL 1％淀粉溶液100 mL ％糠醛溶液100 mL 浓硫酸 500 mL 4、实验操作 取5支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、％糠醛溶液各1 mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。倾斜试管，小心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL，慢慢立起试管，切勿摇动。 观察记录各管颜色。 （二）间苯二酚反应 1、原理 在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮醣的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。 2、器材 试管及试管架，滴管 3、试剂 塞氏试剂：％间苯二酚－盐酸溶液1000 mL，称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL 浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000 mL。 1％葡萄糖溶液100 mL 1％果糖溶液100 mL 1％蔗糖溶液100 mL 4、实验操作
本科生实验报告 实验课程 学院名称 专业名称 学生姓名 学生学号 指导教师 实验地点 实验成绩 二〇一五年月二〇一五年月
实验一氨基酸的分离鉴定----纸层析法一、实验目的 通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及实验方法。 二、实验原理 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，因此吸附一层水作为固定相，而通常把有机溶剂作为流动相。纸层析法是根据不同氨基酸在两相间的分配比不同而进行分离的：在固定相分配的比例大的氨基酸，随流动相移动的速度慢，而在流动相分配的比例大的则随流动相流动的速度快。层析溶剂由有机溶剂和谁组成。 物质被分离后用比移值（Rf值）来衡量各组分的分离情况，如图所示。 根据图得到： Rf=a\b 其中：a为原点到层析点中心的距离（cm），b为原点到溶剂前沿的距离（cm）。 在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值最大等于1，即该组分随溶剂一起上升，Rf值最小等于0，即该组分基本上留在原点不动。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。 三、实验药品、实验器材 1.扩展剂：将20mL正丁醇和5mL冰醋酸放入分液漏斗中，与15mL水混合，
充分震荡，静置数分层后，放出下层水相。取分液漏斗内的扩展剂约5mL 置于小烧杯中作为平衡溶剂，其余的倒入杯中备用。 2.氨基酸溶液：赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及它们 的混合液（各组分浓度均为0.5%），各5mL。 3.显色剂：0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。 4.层析缸：毛细管，喷雾剂，培养皿，层析滤纸，分液漏斗，针，线。 四、实验方法 1.将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中，使展开剂达到饱和。 2.取层析滤纸（长22cm，宽14cm）一张。在纸的一端距边缘2cm处用铅 笔画一条直线，在此直线上每间隔2cm作一记号。 3.点样：用毛细管将氨基酸样品分别点在这6个位置上，吹干后再点一次。 注意没点再纸上扩散的直径最大不超过3mm。 4.扩展：用线将滤纸沿长边缝成筒状，纸的两边不能接触。将盛有约20mL 扩展剂的培养皿迅速置于密闭的层析缸中，并将滤纸直立于培养皿中。 点样的一端在下，滤纸下端侵入扩展剂0.5cm为宜，并且注意扩展剂的 页面需低于点样线1cm。待溶剂上升15~20cm时即取出滤纸，用铅笔描 出溶剂前沿界限，自然干燥或用热风吹干。 5.显色：层析滤纸用喷雾器均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液；然后置烘箱 中烘烤5min（100）或用热风吹干即可先出各层析斑点。 6.计算各种氨基酸的Rf值。 7.注意事项：实验过程应带带胶手套，不可用手直接接触滤纸，以防止皮 肤分泌物的污染。 五、实验记录与数据处理
动画制作合同(模板)
委托内容合同 委托方：（以下简称“甲方”） 法定代表人： 地址： 受托方：（以下简称“乙方”） 法定代表人： 地址： 依据《中华人民共和国合同法》的有关规定，甲乙双方本着自愿、公平、诚实、信用、有偿的原则，经友好协商，就《开心超人联盟》系列动画片中的委托制作事宜达成以下协议： 一、委托内容 1、乙方根据甲方提供的剧本、人物基本模
型、动态分镜头本等进行Flash美术、Flash委托内容（以下简称“制作材料”）。 2、成片剪辑合成。 二、制作要求 1、乙方按甲方提供的工作日程执行委托内容。 2、完成时间： 三、甲方的权利与义务 1、甲方向乙方提供剧本、人物基本模型、动态分镜头本、每个场景的对话录音、导演的综合评价、每一步制作的评价。 2、甲方向乙方提供统一的、需要让其进行制作的必要创意和技术修复的清单。 3、甲方自收到乙方的委托内容次日起于5个工作日内提出创意性修复。超过期限视为接受乙方提供的委托内容。
4、甲方自收到乙方的委托内容次日起于2个工作日内提出技术性修复。技术性修复包括但不限于颜色及人物外表不当，动画和分镜头方面的技术问题。 5、创意性修复不超过动画时长的5%，超过部分由甲乙双方另行协商。 6、甲方自收到乙方的最终的委托内容的10个工作日内，认为乙方提供的委托内容不符合甲方要求的，有权单方解除合同。 7、甲方对乙方的制作的委托内容的各个方面，包括但不限于质量、画面、动作，均有最终确认验收的权利。 四、乙方的权利和义务 1、乙方根据甲方的委托制作《神奇实验室》的Flash美术、Flash委托内容，并且每日向甲方提供当日的工作报告。 2、乙方应当按时交付委托内容（包括原始
生化大实验 实验报告 姓名： 学号： 专业： 班级： 实验班级： 单位： 指导老师：
实验1 多酚氧化酶（PPO）的分离提取 一、实验原理： 多酚氧化酶(PPO)能够通过分子氧氧化酚或多酚形成对应的醌，它是植物组织广泛存在的一种含铜氧化酶，位于质体、微体，可参与植物生长、分化、种皮透性及植物抗性的调节，属于末端氧化酶的一种。 植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成为醌，使组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以受伤组织一般这种酶的活性就会提高。另外，多酚氧化酶也可以与细胞其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。 蛋白质在不同浓度的盐溶液中的的溶解度不同，通过向溶液中加入适量的固体硫酸铵来调节粗提液的盐浓度从而可以将PPO蛋白从体系中析出，且大分子蛋白质不能通过透析膜。 二、实验目的： 通过本项实验，学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法，掌握相关的仪器设备的正确使用的方法，以及蛋白质的提取分离的系统技术。 三、材料与试剂： 1.材料：马铃薯（两小组共称200g） 2.试剂：0.03M磷酸缓冲液pH 6.0（含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，5%甘油，1%的聚乙烯吡咯烷酮）配制是配x10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵；0.03M磷酸缓冲液pH 6.0（含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，0.005M MgCl2） 3.设备：试管与试管架；烧杯、玻璃棒；移液管、滴管等；试剂瓶；透析袋；过滤纱布；植物组织匀浆机；pH计和pH试纸；高速冷冻离心机； 四、操作步骤： 1.两小组共称取200g土豆削皮后切成小块，加入300ml缓冲液A，两者按1:1(W/V)比例匀浆1min； 2.用两层纱布将所得的浆液过滤； 3.将匀浆滤液装入200ml的离心管10000rpm离心5min； 4.上清液两组平分，每组150ml，加36.45g硫酸铵固体搅拌均匀后10000rpm离心5min； 5.取上清液定容至150ml，加入30.75g硫酸铵固体搅拌均匀后10000rpm离心8min，倒掉上清液得粗酶沉淀,用并加入10ml 0.03M磷酸缓冲液B复溶沉淀3-5min； 6.将所得溶液倒入透析袋中，用0.02M的KCl溶液透析至无硫酸铵根离子。 五、结果和分析： 实验所得的初酶液颜色为浅黄色，颜色浅，主要是实验过程中特别是匀浆以前速度较快酚类被氧化的少，从而最大程度的保留了PPO的活性；经过一个夜晚的透析，得到了澄清的略带黄色的液体，这样就为进一步的柱层析提供了优良材料。 六、讨论与结论： 1. 本实验在匀浆阶段应尽量快速，防止酚类充分暴露在空气中被氧化； 2．实验材料马铃薯在削皮前一定要清洗干净； 3.加入硫酸铵固体时一定要小心缓慢，同时伴有玻璃般的搅拌，在溶解蛋白的过程中避免溶液局部盐离子浓度过大，使蛋白变性，并注意用量的计算，第二步加入的时候起点浓度是40%而不是0，否则会加入过量，影响实验的结果； 4.透析时，提前检查透析袋是否完整，避免透析时出现孔洞导致样品丢失。
X x x x x 三维影视动画制作合同书
委托单位（甲方）： 地址： 法定代表人： 制作单位（乙方）：南昌浩瀚数字科技股份有限公司 地址：南昌市东湖区省政府大院北二路68号附二号楼 法定代表人：柯天水 甲乙双方遵循平等自愿的原则，协商一致，就甲方委托乙方制作三维动画事宜达成如下协议： 一、项目名称和工作内容： 1.项目名称：“”三维影视动画片制作 2.工作内容：秒三维影视动画片（分辨率1920*1080）。 3.项目合同三维影片单价元/秒，总价为元（大写：人民币 整）。后期如果甲方要延长或缩减时长，费用按元/秒增加或减少。 4.赠送：在300秒的基础上赠送30秒三维动画。 5.赠送：在本项目基础上剪辑短片两个（30秒，60秒各一个） 二、制作要求： 1.三维动画片应清晰表现建筑结构及建筑特色，要求画面充实、清晰，色 调统一、协调； 2.动画片具体内容以脚本为大纲； 3.乙方提供创意策划，在甲方确认后开始制作。乙方在收到附件所列全部 资料之日起 3 天内向甲方提供脚本设计方案的初稿，经双方协商确定 后，脚本终稿必须在甲乙双方确认该脚本初稿之日起 3天内完成，以确 保进度。如因甲方原因导致乙方未能如期完成上述稿件的，制作时间顺 延。 4.乙方按时向甲方提供阶段确认，甲方项目负责人在阶段确认（包括模型 确认、草路径确认、半成品确认及成品确认等），甲方在收到乙方制作 成果或确认单3日内，怠于确认或未提出书面修改意见的，视为验收合
格。 三、甲方的权利与义务： 1、甲方向乙方提供策划的总体构思，设计文件的总平面图，建筑单体的设计方案（包括相应的平、立、剖面图）等制作资料（具体资料内容详见附件），甲方于合同签订后 3天内提供全部资料，以确保动画制作时间和制作质量，如不能按时提交该制作资料，则制作时间顺延； 2. 甲方有权对整体制作提出明确的要求和想法，对脚本和样带提出修改意见并确认 3、甲方有义务信守合同，维护双方利益； 4、按本协议的约定时间支付制作费用； 5、乙方交给甲方成片后，甲方如果需要乙方提供成片的剪辑用来广告的播放，乙方要配合，及时的给甲方剪辑，剪辑的时长根据甲方的要求定。但是剪辑的内容不得超出三维影片内容。否则要加收一定的费用。 四、乙方的权利和义务： 1.乙方与甲方取得工作联系，以及取得工作所必须的制作文件； 2.乙方在动画正式制作前编写动画制作脚本，并经甲乙双方确定； 3.乙方在规定时间内按质、按量提交工作成果，并向甲方提供阶段（包括 成品）确认。 4.乙方应严格信守保密原则，图纸及相关资料不得泄漏给无关人员和单位； 5.乙方有义务信守合同，维护双方利益。 五、制作流程 提供资料策划方案分镜脚本建模预演样片成片 六、制作期限及付款方式： 1．制作期限和修改期限：合同签订、且脚本终稿经甲乙双方共同确认后20个工作日内，乙方应当完成本合同项下之动画制作工作（不包含修改工作），向甲方交付符合本合同约定的三维动画影视作品。 2、双方签字确认本协议书后以及脚本后，甲方须将整个项目费用的百分之
生化实验五大技术 一.分光光度技术 1.定义:根据物质对不同孩长的光线具有选择性吸收,每种物质都具有其特异的吸收光语。而建立起来的一种定t 、定性分析的技术。 2.基本原理:（图1-1光吸收示意） 透光度T=It/lo 吸光度A=lg(lo/ I1) 朗伯-比尔(lambert-Beeri)定律:A=KLc K 为吸光率，L 为溶液厚度(em), c 为溶液浓度 (mol/L)] 摩尔吸光系数日ε:1摩尔浓度的溶液在厚度为 I.cm 的吸光度。 c=A/ε 3. 定量分析: (1)标准曲线(工作曲线)法 (2) 对比法元-KCLCx (3)计算法: e=A/ε (4)差示分析法(适用于浓度过浓成过稀) (5) 多组分湖合物测定 4.技术分类 分子吸收法&原子吸收法:
可见光(400-760 nm) &紫外光(200~ 40m) &红外光(大于760 nm)分光光度法； 5.应用方向 有机物成分分析&结构分析红外分光光度法测定人体内的微量元囊原子吸收分光光度法 二电脉技术 1.定义:带电荷的供试品在情性支持介质中，在电场的作用下，向其对应的电 极方向按各自的速度进行脉动。使组分分离成族窄的区带，用透宜的检洲方法记录其电泳区带图请或计算其百分含量的方法。 2.基本原理: 球形质点的迁移率与所带电成正比，与其半径及介质粘度成反比。v=Q/6xrη 3.影响电泳迁移率的因素: 电场强度电场强度大，带电质点的迁移率加速 溶液的PH值: 溶液的pH离pl越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移幸越大 溶液的离子强度:电泳液中的高子浓度增加时会引起质点迁移率的降低 电渗:在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗 4:技术分类: 自由电泳(无支持体) 区带电泳(有支持体):法纸电泳(常压及高压)，博层电泳(薄膜及薄板).凝波电泳(琼脂，琼脂糖、淀粉胶、柔丙烁配胶凝胶)等 5. 电泳分析常用方法及其特点: 小分子物质滤纸、纤维素、硅胶薄膜电泳复杂大分子物质凝胶电泳 ⑴醋酸纤维素薄膜电泳 ①这种薄顺对蛋白质样品吸阴性小，消除纸电沫中出现的“拖尾”现象 ②分离理应快，电泳时间短 ③样品用最少: ④经过冰最酸乙醉溶液或其它看明液处理后可使膜透明化有利丁对电泳图潜的光吸收措测店和爱的长期保 ------别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测(胰岛素、游菌酶、胎儿甲种球
《生物化学实验》容 课程类型：制药工程专业必修 实验总学时：32课时 开设实验项目数：8个 适用对象：2017制药工程1、2班 实验教师：段志芳 一、实验目标及基本要求 生物化学实验是一门独立的实验课程，培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事的科学态度。 二、实验容
包括实验时的表现（实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等，占50%）及实验报告的完成情况和完成质量（占50%），每个实验按总分为100分为满分进行打分，共8个实验，总评取平均值。 四、要求 （1）实验过程中同组人可以配合进行； （2）实验报告独立完成，同组人数据相同，不得抄袭他组数据； （3）实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做； （4）对实验结果进行简单的分析. 实验一植物组织中可溶性总糖的提取 一、实验目的 1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。 2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。 3．掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。 二、实验原理 可溶性糖是指易溶于水的糖，包括绝大部分的单糖、寡糖，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。它们在植物体可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。可溶性总糖提取方法包括：热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。其溶于热水，不溶于60%以上乙醇，所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。本实验利用可溶性糖溶于水的特性，将植物磨碎，用热水将组织中的可溶性
糖提取出来，结合实验二得到总糖浓度，已知溶液体积和原料重量，可以求出总糖含量。 三、实验用品 1.仪器设备：电子天平（精确到0.0g，配称量纸若干）；可控温电加热板或电 炉或电热套或水浴锅均可。可共用。 2.玻璃器皿：研钵1套；100mL锥形瓶1个；25mL量筒1个；玻璃棒1根； 100mL烧杯2个；胶头滴管1支；过滤装置1套（铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个）；不锈钢刮勺1个；剪刀1把。此部分为每组所用，集中到小框里，放置各实验台上。 3.药品试剂：新鲜植物叶片；蒸馏水。 4.其他：9cm滤纸若干（与玻璃漏斗配套）；纸巾若干；标签纸若干。每个洗 手池常规配置烧杯刷、毛巾、洗手液。 四、实验操作 取新鲜植物叶片，洗净表面污物，用滤纸吸去表面水分。称取0.5g，剪碎，加入5～10ml蒸馏水，在研钵中磨成均浆，转入锥形瓶中，用蒸馏水少量多次冲洗研钵，洗出液也转入锥形瓶中，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min，提取液冷却后过滤到100ml容量瓶中，同法残渣再提取2~3次，将提取液合并至容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。贴好标签，保存至冰箱中，用于实验二。 五、实验结果与讨论 1、观察产品颜色是否与理论相符，若不符合，分析原因。 2、结合实验二结果计算含量 六、实验注意事项 （1）若有干扰，可滴加饱和中性醋酸铅以除去溶液中的蛋白质，乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质，若色素较多可脱脂。 （2）加热时应小心，避免灼伤皮肤。 七、思考题 1、可溶性糖在植物物质代中的作用。
三维动画制作合同示范文 本 In Order To Protect Their Legitimate Rights And Interests, The Cooperative Parties Reach A Consensus Through Consultation And Sign Into Documents, So As To Solve And Prevent Disputes And Achieve The Effect Of Common Interests 某某管理中心 XX年XX月
三维动画制作合同示范文本 使用指引：此合同资料应用在协作多方为保障各自的合法权益，经过共同商量最终得出一致意见，特意签订成为文书材料，从而达到解决和预防纠纷实现共同利益的效果，文档经过下载可进行自定义修改，请根据实际需求进行调整与使用。 委托单位：________文化传媒有限公司（简称甲方） 受托单位：_________有限公司（简称乙方） 甲方委托乙方为甲方的LED项目“______”提供三维 动画的制作，经协商达成一致，签定本合同，双方共同遵 守。 一、名称：“______”项目三维动画演示 二、内容： 项目三维动画制作（_____秒） 三、制作工期： 制作时间按合同正式签署后，首付款到账后开始计 算，7个工作日之内。 ____年____月____日-____年____月____日。
四、制作工作计划 阶段1：签定制作合同。乙方向甲方索取制作必须的资料。 阶段2：建模组完成建模，并由甲、乙双方汇审模型的准确性。 阶段3：完成场景的渲染。 阶段4：完成后期合成，添加特效、音乐、音效及剪接。 阶段5：完成文件压缩并提交成品。 五、制作费及费用支付方式： （一）总制作费用（人民币） 总价为小写￥：_____元（大写￥：________元）。 （二）费用支付方式 第一阶段：双方签订合同后，甲方须立即支付总合同额之____%，人民币小写