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液。光镜下计阳性细胞数，每张切片随机选择５个
高倍镜下视野（×４００），取平均值。
四、统计学处理
用ＳＰＳＳｌｌ．５统计软件分析，所得数据以孟±５
表示，多组样本均数比较采用单因素方差分析（Ｏｎｅ－
ｗａｙ，ＡＮＯＶＡ），均数的两两比较采用ＬＳＤ检验。
Ｐ＜０．０５提示差异有统计学意义。
结果
一、各组幼年大鼠海马ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ的水平
ＮＳ组各时间点海马ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达随时间
无明显变化。ＳＣ组在惊厥后１２ｈ海马ＧＲＰ７８
ｍＲＮＡ明显升高，２４ｈ达峰值，于４８ｈ迅速下降，
７２ｈ已降至基线水平；与ＮＳ组比较，Ｓｃ组在１２ｈ
和２４ｈ时间点的ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ水平均显著增高
（Ｐ＜０．０５或０．０１）。ＥＤ组海马ＧＲＰ＇／８ｍＲＮＡ表达
趋势与Ｓｃ组相似，但其在１２、２４和４８ｈ时间点海
马ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达水平均显著高于ｓｃ组和ＮＳ
组（Ｐ＜０．０５或０．０１），在７２ｈ降低至ＮＳ组水平，
提示表达高峰上调，持续时间延长（表３，图ｌ、２）。
二、各组幼年大鼠海马区Ｃａｓｐａｓｅ一１２ｍＲＮＡ
水平
ＳＣ组海马１２—４８ｈ各时间点Ｃａｓｐａｓｅ一１２
ｍＲＮＡ表达均显著高于Ｎｓ组（Ｐ＜０．０５或０．０１），
其表达在ｓｃ后１２ｈ开始显著升高，２４ｈ达峰值，
４８ｈ开始下降，于７２ｈ迅速降至基线水平。ＥＤ组
大鼠海马Ｃａｓｐａｓｅ一１２ｍＲＮＡ时问表达趋势与ＳＣ组相似，在２４ｈ达峰，但其在２４和４８ｈ时间点Ｃａｓｐａｓｅ．１２ｍＲＮＡ表达均显著低于ＳＣ组（Ｐ均＜０．０５）。ＮＳ组大鼠海马Ｃａｓｐａｓｅ一１２ｍＲＮＡ表达平稳，各时间点比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）（表４，图３、４）。
三、各组幼年大鼠海马ＣＡ．区ＧＲＰ７８蛋白检测结果
在大鼠惊厥后海马ＣＡ，区被染成棕黄色的神经元细胞可见不同程度增加，并指示ＧＲＰ７８蛋白主要表达于神经元和神经胶质细胞的胞浆，以核膜周
围１ＳＣ组幼年大鼠不同时间点海马ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ的
电泳图图２ＥＤ组幼年大鼠小同时间点海马
ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ的电泳图表图３ｓｃ组幼年火鼠不同时
间点海马Ｃａｓｐａｓｅ一１２ｍＲＮＡ的电泳图围４Ｅ１）组
幼年大鼠不同时间点海码Ｃａｓｐａｓｅ－１２ｍＲＮＡ的电泳图
围为著。
ＳＣ组大鼠各时间点海马ＧＲＰ７８蛋白表达均显著高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５），其表达于惊厥后１２ｈ开始增加，２４ｈ达高峰，４８ｈ开始下降。ＥＤ组ＧＲＰ７８蛋白时间表达趋势与ｓｃ组相似，但１２—４８ｈ时间
表３各组大鼠不同时间点海马ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ灰度值的比较（ｎ＝８．Ｘ±ｓ）
注：与Ｎｓ组比较‘Ｐ＜Ｏ．０５，‘Ｐ＜ｏ．Ｏｌ；与ｓｃ组比较。Ｐ＜ｏ．０５；。Ｐ＜０．０ｌ，‘Ｐ＜０．０５
虫堡』Ｌ整盘查！Ｑ！！生！旦筮塑鲞箜！期垦！也』堕堕ｉ堕：地坠型！Ｑ！！：丛塑：型！：！
质网中错误折叠和未折叠蛋白结合，恢复蛋白质的正确构象，使蛋白质能够在细胞应激状态下继续正确合成，维持内环境的稳定。但过度的ＥＲＳ会导致Ｃａｓｐａｓｅ一１２激活、释放【８１；活化的Ｃａｓｐａｓｅ一１２作为ＥＲＳ反应性凋亡的始动因子剪切ｐｒｏＣａｓｐａｓｅ－９，启动凋亡级联反应，最终由Ｃａｓｐａｓｅ．３执行凋亡。但也有文献提示Ｃａｓｐａｓｅ一１２的作用与Ｃａｓｐａｓｅ－３一样，是一个独立的凋亡执行酶【９’１０｜。因此，ＧＲＰ７８是ＥＲＳ发生的最重要标志，而Ｃａｓｐａｓｅｓ－１２主要是ＥＲＳ介导凋亡的关键效应酶。
哺乳动物细胞的ＵＰＲ是一个完整的可调节的信号网络，它通过一系列机制途径持续活化ＵＰＲ而上调ＧＲＰ７８ｆ７Ｊ。有研究认为诱导ＧＲＰ７８基因表达的因素主要为：①ＥＲＳ诱导剂，包括内质网Ｃａ“拮抗剂、错误折叠蛋白、还原反应剂、情
图５
ＮＳｔｌｌ２４
ｈ海马ＣＡＩ区ＧＲＰ７８蛋白少量表达（ＤＡＢ?×４００）
图６ＳＣ组２４“
绪调节剂；②糖基化拮抗剂；③实体
海马ＣＡＩ区ＧＲＰ７８蛋白表达增加（ＤＡＢ，“４００）图７
ＥＤ组２４“海马ＣＡＩ区
肿瘤微环境变化（如葡萄糖耗尽、低
ｃＲＰ７８蛋白表达显著增加（ＤＡＢ，×４００）图８
Ｎｓ组２４“海马ＣＡＩ区ｃａｓｐａｓｅ－１２蛋
ｐＨ值、缺氧等）；④病理状态（如生
白少量表达‘ＤＡＢ，×加ｏ）
图９
ｓｃ组２４“海鸟ｃＡ－区ｃ∞ｐ“一１２蛋白表达显著增
化环境改变，细胞毒性免疫反应，肿
掣’＝’Ｎｓ：蒜篇恭：：＝焉耋端∽Ａ：三一一药物性秽１。研究发凳４８麓Ｎ篇哺黑焉鬻≯：一’组田１４８
２
７
现１ｔｔ惊／Ｉ．．９＂厥／Ｊ＆可’１）使ｈＳＣ４８ｈＣＡＴＵＮＥＬＤＡＢ４（１０１３
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４８ｈ
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组海马ｌ区阳性细胞显著增加（，×）
图组…………７’？……”…“
海马ＣＡＩ区ＴＵＮＥＬ阳性细胞增加（ＤＡＢ．ｘ４００）
加、神经元内Ｃａ２＋超载、内质网腔内Ｃａ２＋耗竭及未折叠蛋白聚集¨２‘；反
讨论
既往ＳＣ后脑损伤机制研究的重点主要集中在死亡受体活化和线粒体损伤这两条经典的细胞凋亡途径上。近年发现。ＥＲＳ反应性凋亡途径是一条新的凋亡途径；这条途径至少包括未折叠蛋白反应（ｕｎｆｏｌｄｅｄ
ｐｒｏｔｅｉｎ
ｌ＇ｅ￥ｐＯｌｌＳｅ，ＵＰＲ）和钙离子起始信号
（ｃａｌｃｉｕｍｓｉｇｎａｌｉｎｇ）两条信号通路旧“，而ＧＲＰ７８、Ｃａｓｐａｓｅ一１２在这条通路中扮演了重要的角色。
ＧＲＰ７８是热休克蛋白７０家族成员之一，主要分布于哺乳动物细胞内质网膜上，参与ＥＲＳ。正常状态下ＧＲＰ７８与Ｃａｓｐａｓｅ－７和Ｃａｓｐａｓｅ一１２以复合物形式存在，组织器官在缺血、缺氧、钙平衡紊乱等应激情况下而出现ＥｌｌＳ，通过内质网ＵＰＲ可使ＧＲＰ７８大量表达一］，ＥＲＳ后ＧＲＰ７８从复合物上分离并与内
复多次惊厥又可使大脑处于缺氧及相对性缺血状态，并大量生成自由基，为诱发ＧＲＰ７８提供前提。Ｙａｍａｍｏｔｏ等【３１在颢叶癫痫患者海马组织中发现，ＧＲＰ７８蛋白表达相对正常人群要高，认为这是体内为缓解慢性癫瘌性脑损伤的一种自身调节。Ｊａｎｇ等¨引利用大鼠海人藻酸惊厥模型亦发现，惊厥后６
ｈ
ＧＲＰ７８在海马及皮层表达增加，１２ｈ达高峰。但
本研究在幼年ＳＤ大鼠ｓｃ模型中发现，ＳＣ组海马
ＧＲＰ＇／８
ｍＲＮＡ及蛋白于惊厥后４ｈ即开始少量增
加，１２ｈ继续上升，２４ｈ达到高峰，提示幼年大鼠ｓｃ后早期海马神经元内质网自稳系统即出现调节反应；而惊厥４８ｈ以后开始下降，提示惊厥后海马神经元可能出现了内质网功能障碍。本研究ＧＲＰ７８
表达的高峰时间较Ｊａｎｇ等¨孔研究结果延后，这种
创新机制–肾脏钠葡萄糖共转运蛋白2 SGLT-2抑制剂-达格列净...考试 返回上一级 单选题（共10 题，每题10 分） 1 . 最近统计中国糖尿病患病率在成人中达到（） ? A.11.6% ? B.9.8% ? C.6.6% ? D.4.5% 我的答案： A 参考答案：A 答案解析：暂无 2 . 由于人口的原因世界上患糖尿病人数最多的国家是（） ? A.美国 ? B.中国 ? C.印度 ? D.日本 我的答案： B 参考答案：B 答案解析：暂无 3 . 肾脏葡萄糖转运：SGLT2负责（）肾脏葡萄糖的重吸收 ? A.90% ? B.80% ? C.70% ? D.60% 我的答案： A 参考答案：A 答案解析：暂无 4 . 糖尿病是代谢综合征的一部分表现，型糖尿病患者合并高血压和（或）脂代谢紊乱的达到（） ? A.70% ? B.68% ? C.60% ? D.55% 我的答案： C 参考答案：C 答案解析：暂无 5 . 第一个SGLT-2抑制剂来源于（） ? A.草根 ? B.苹果树皮 ? C.苹果树叶 ? D.以上都是
我的答案： B 参考答案：B 答案解析：暂无 6 . SGLT2抑制剂肾脏保护的间接获益包括（） ? A.改善血糖控制 ? B.降低血压 ? C.降低体重 ? D.以上都是 我的答案： D 参考答案：D 答案解析：暂无 7 . 与二甲双胍联合用药长期控制血糖非常好的药物是（） ? A.安慰剂 ? B.二甲双胍 ? C.达格列净 ? D.都可以 我的答案： C 参考答案：C 答案解析：暂无 8 . 达格列净减重作用主要源于（） ? A.体内脂肪减少 ? B.体内肌肉的减少 ? C.体内脂肪增加 ? D.体内脂肪增加 我的答案： A 参考答案：A 答案解析：暂无 9 . 达格列净初始单药治疗低血糖风险与安慰剂相比（） ? A.相当 ? B.略高 ? C.高出很多 ? D.以上都对 我的答案： A 参考答案：A 答案解析：暂无 10 . 达格列净多重获益优势为糖尿病综合管理带来新的希望包括（）? A.不增加心血管事件风险 ? B.减少肾病风险 ? C.快速、强效、持久的血糖控制，低血糖风险低 ? D.以上都是 我的答案： D 参考答案：D 答案解析：暂无
神经系统由大量的神经元构成。这些神经元之间在结构上并没有原生质相连，仅互相接触， 其接触的部位称为突触 细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分，又可分为树突和轴突。 树突棘是树突表面的棘状突起，也就是形成突触的部位 一般认为，NMDA受体主要分布在神经细胞的突触后膜。在兴奋性神经元，NMDA受体主要 分布在树突棘头的突触后膜，且主要分布在突触后致密区（postsynaptic density, PSD） 突触可塑性：突触在形态和传递效能上的改变 突触后致密区（PSD）：在电镜下所见的突触后膜胞质面聚集的一层均匀而致密的物质，见 于cns中所有树突棘突触的突触后膜上。主要功能是细胞粘附性的调节，受体集聚的控制和 受体功能的调节。 旷场试验：用来观察小鼠自发性探索运动活性和焦虑行为 反应实验动物在陌生环境中的自主行为与探究行为，以尿便次数反应其紧张度。 开场实验，open field test，这个测的是5min内，动物在一个开阔环境中的行为学变化，我 们用一个强光打在开场中央，开场有方形和圆形两种。圆形是一个大缸，白色的，具体尺寸 我忘记了。需要用的指标是：跨格数、站立数、排便数和梳理数（也就是理毛次数），前两 个指标为主。这个实验可以用中央场次数作为焦虑样行为的观察指标。 运动能力(locomotion， open field test 主要是评价动物的焦虑状态，它主要以动物进入中央区的时间百分率来评价焦虑状态，它也可以度等。 物在一个开放的新的地方会很小心，rodent动物喜暗而避明的特性会让自己躲在暗处，也会 对开阔地方有探索行为（好奇心），同时又有害怕紧张担心和焦虑心理，具有一定的新奇性 同时又具有一定的害怕。如果动物焦虑少，停留在中间等位置时间长久一些，不然反之。比 较这些特性可以比较动物的焦虑程度。具有抗焦虑作用的药物会让动物有更多的对开阔地方 有探索行为，焦虑紧张的动物更喜欢停留在开场的边缘和暗处。 LTP定义：给突触前纤维一个短暂的高频刺激后，突触传递效率和强度增加几倍且能持续数 小时至几天保持这种增强的现象。按LTP的时程分①PTP，强直后增强，一般5分钟后衰减； ②STP，短时程增强，持续半小时左右；③，LTP长时程增强，持续一小时以上 CaMKII这个蛋白是个很特殊的蛋白，在脑内含量非常高，大约占总蛋白量的1-2%。在突触 部位的含量很高，并且是PSD（postsynaptic density）主要蛋白。但这个蛋白最特殊之处是 其具有自身调节能力，仿佛自己本身就是一个具有学习记忆的功能。 因为把随着神经等器官、组织的兴奋所产生的动作电位作为其活动指标是最容易记录的现 象，所以常常用记录动作电位来深入研究神经系统等的机能。 高频刺激可引发突触后细胞的持久增强反应——最初被称为“持久增强作用”（
DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.01.011· 综述·胰岛素调控葡萄糖转运蛋白4转位的 研究进展 于海佳 胰岛素抵抗和糖代谢异常是 II 型糖尿病的主要病理特征。机体在正常情况下通过胰岛素等相关激素能够非常精准地调控血液中的葡萄糖。伴随着能量摄入，升高的血糖水平会刺激胰岛β细胞分泌胰岛素。血液中过量的葡萄糖被快速地转运至细胞内，从而使机体维持正常的血糖水平。胰岛素调控葡萄糖摄取主要是通过葡萄糖转运蛋白4（glucose transporter 4，GLUT4）从细胞内转位到质膜上来实现的。有关胰岛素是如何介导 GLUT4 转位和葡萄糖摄取的研究对于治疗糖尿病和发展疾病早期诊断方法具有重要的意义。本文综述了近年来在胰岛素信号调控下 GLUT4 转位方面的相关研究进展。 1 GLUT4 与糖稳态调控 GLUT4 是由 SLC2A4 基因编码的糖转运蛋白，能够以不依赖于 ATP、协助运输的方式运送葡萄糖穿过细胞质膜。GLUT4 具有 12 次跨膜蛋白结构域，广泛分布于骨骼肌和脂肪组织等胰岛素响应性组织中[1-2]。除了 GLUT4 外，这些组织还表达其他的一些糖转运蛋白，例如 GLUT1。与其他糖转运蛋白不同的是，GLUT4 在细胞内的分布受到胰岛素的调控。GLUT1 等其他糖转运蛋白主要在基础状态（血糖水平低）下介导细胞对葡萄糖的摄取，而 GLUT4 在基础状态主要存在于胞内的各种膜结构中，只有少于 5% 的 GLUT4 位于细胞膜上。当机体进食后血糖水平快速升高，葡萄糖会促进胰岛素分泌增加。胰岛素促使 GLUT4 从胞内膜结构转移到细胞膜表面上，细胞表面上的 GLUT4 浓度在胰岛素的刺激下可以增加到其在基础状态时的 5 ~ 30 倍[3]。GLUT4 通过摄取和清除血液中的葡萄糖来维持血糖平衡。当胰岛素浓度降低时，GLUT4 通过胞吞作用回到细胞内，细胞表面的 GLUT4 重新恢复到基础状态时的水平。 GLUT4 在机体糖稳态调控过程中发挥着重要作用，在II 型糖尿病患者的脂肪组织中，GLUT4 在 mRNA 和蛋白质表达水平上都有明显减少[4]。在小鼠模型中，GLUT4 蛋白表达水平降低使小鼠产生胰岛素抵抗和糖尿病[5]。GLUT4 在肌肉组织和脂肪组织中过量表达可以改善小鼠的血糖控制和糖耐受不良[6-7]。在细胞水平上，肌肉组织和脂肪组织中减少 GLUT4 的表达会引起肌肉细胞和脂肪细胞对葡萄糖的摄取减少并产生胰岛素抵抗[8]。2 胰岛素调控 GLUT4 转位的信号通路 对于胰岛素调控骨骼肌和脂肪组织的葡萄糖摄取，目前研究者们认为主要是通过磷酸肌醇 3 激酶（PI3K）信号通路来实现的（图1）。胰岛素从胰岛β细胞分泌后，首先结合细胞表面上的跨膜胰岛素受体（IR）并激活胰岛素受体酪氨酸激酶。这会促使胰岛素受体底物蛋白（IRS）酪氨酸磷酸化，激活 PI3K。PI3K 与二磷酸肌醇（PIP2）发生作用，使 PIP2 转化为三磷酸肌醇（PIP3）[9]。PIP3 的水平升高激活了含有 PH 结构域的丝氨酸/苏氨酸激酶 PDK1 和mTORC2，并随后激活蛋白激酶 AKT。 AKT 有 3 个异构体，但是只有 AKT2 在胰岛素刺激GLUT4 转运过程中起关键作用。George 等[10]报道在胰岛素抵抗和糖尿病中发现了 AKT2 突变。AS160（又称为TBC1D4，分子量 160 kD）是 AKT2 的一个重要底物，在脂肪和肌肉组织中过量表达 AS160 磷酸化位点突变体能抑制胰岛素依赖的 GLUT4 转位和葡萄糖摄取，敲除 AS160 和其类似功能蛋白 TBC1D1，可显著减少胰岛素刺激的葡萄糖运输[11]。一份最新的报道发现格陵兰人近年来持续升高的 II 型糖尿病发生率正是由于 AS160 发生了突变。研究人员证实了在 2575 个调查个体中有 17% 的 AS160 等位基因存在 p.Arg684Ter 突变，同时伴随有胰岛素抵抗和血糖升高[12]。AS160 含有一个 GTP 酶激活蛋白（GAP）结构域，其能特异地作用于 G 蛋白 Rab。Rab 是一类能促进囊泡运输的 GTP 结合蛋白，通过与 GDP 结合的失活状态向其活化状态转化来催化膜运输。作为一个负调控因子，AS160 在基础状态下处于去磷酸化状态，能通过 GTP 酶将 GTP 转化成 GDP。这使 Rab 蛋白处于失活状态，从而抑制了 GLUT4 囊泡在细胞内的运输。在胰岛素刺激下，AS160 的五个氨基酸残基 Ser318、Ser570、Ser588、Thr642 和 Ser751 被 AKT2 磷酸化而丧失了 GAP 活性[13]，使Rab 蛋白可以与 GTP 结合，促进 GLUT4 囊泡运输和GLUT4 的膜转位。在基础状态下的脂肪细胞中敲低 AS160 的表达，会使部分 GLUT4 囊泡运输至细胞表面，从而增加了细胞表面的 GLUT4 水平[14]。Rab10 是 AS160 一个重要下游结合 Rab 蛋白。在脂肪细胞中敲低 Rab10 的表达会抑制胰岛素引起的 GLUT4 转位。在敲低 AS160 的同 作者单位：80309 美国，科罗拉多大学博尔德分校分子细胞发育生物学系，Email：haijia@https://www.doczj.com/doc/ef16503118.html, 收稿日期：2014-08-18
电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的 研究进展 （作者： _________单位：____________ 邮编：___________ ） 【摘要】目前，电针对脑缺血模型大鼠海马细胞影响的研究报道很多，对海马与学习记忆关系的研究已成为国内研究的重 点。本文就电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的研究作简要综述。 【关键词】电针海马物质 海马的生理功能目前仍在探讨之中.大量的动物模型研究表明，海马与学习记忆有关。当脑缺血等致海马受损时，可引起学习记忆功能的严重障碍。电针刺特定穴位可影响脑功能障碍大鼠海马物质的表达。现就目前电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的研究作一综述。 1电针对海马细胞凋亡相关蛋白表达的影响 1.1 Bel ]2是功能最为明确的细胞凋亡拮抗基因Bcl[2蛋白基本生物学功能为延长细胞的生命期限、增加细胞对多种凋亡刺激因素的抗性。Bax与Bcl]2作用相反，能够促进凋亡，Bcl〕2表达水平较高时，形成Bcl[2/Bcl[2同源二聚体，抑制细胞凋亡；Bax表达水平较高时，形成
Bax/Bax同源二聚体，加速细胞凋亡；BcL2和Bax水平相当 时，则形成Bcl[2/Bax异源二聚体，终止细胞凋亡。近年的研究提示 Bcl[2与Bax调节细胞凋亡，不仅取决于自身表达的高低，还与 Bax/Bcl_2比率有关，当比率增大时，细胞趋于凋亡[1 ]o caspase ]3 激活是触发凋亡的关键（有“分子开关”之称是凋亡的最终执行蛋白。Bcl]2家族基因在调节线粒体通透性上发挥重要作用，Bcl]2或其他 抗凋亡Bcl_2家族成员下调，或促凋亡Bcl_2家族成员如Bax在线粒体膜上过度表达和移位，均导致线粒体通透性增加，使细胞色素C 从线粒体释放入胞浆，与Apaf”、dADP形成复合体，再与胞浆中的caspase ]9前体形成凋亡小体，导致caspase[9被裂解激活，随后再裂解caspase家族其他成员包括caspase[3,引发凋亡。赵建新等[2] 报告电针刺激脑缺血小鼠“肾俞”膈腧”百会；各观察时点均可上调小鼠海马细胞Bcl[2表达，下调Bax表达，降低凋亡率。故电针可起到抑制凋亡、保护神经元的作用电针可显著上调内源性海马Bcl[2表达，降低Bax表达，有可能进一步抑制caspase [3的激活，或影响神经生长因子、过氧化物歧化酶、CHAT等促神经细胞存活相关基因的表达而发挥抗凋亡作用，有待今后动物实验验证。Noxa为BH3only 亚家族成员]3]，脑缺血研究发现，Noxa在脑缺血引起的细胞凋亡中起重要作用[4 ]。朱燕珍等]5]报告，电针刺激血管性痴呆模型大鼠“大椎百会：海马CA1区的Noxa阳性细胞数增加，Caspase ]3 阳性细胞数增加，提示Noxa调节的线粒体凋亡途径促进血管性痴呆的发展；电针治疗抑制
!!作者单位" #,"""#杭州#浙江大学医学院附属第一医院呼吸科葡萄糖转运蛋白与肺癌 钟秀君!周建英 !!肿瘤细胞无法调控的增殖是肿瘤细胞最主要特征#而细胞数的增多导致细胞耗氧量不断增加#造成肿瘤缺氧#这在人实体瘤中表现尤其明显’肿瘤在适应缺氧时#葡萄糖摄入增多以提供所需的能量#此方式通过葡萄糖转运蛋白%@?I 9<;237/:;T <7327#[?I 3&合成增加来实现’[?I 3是介导细胞葡萄糖摄取的主要载体#与正常细胞$组织及良性病变相比#恶性肿瘤细胞对葡萄糖的代谢率增加’而糖代谢的增高与[?I 3及基因的异常表达有关’本文就[?I 3及其同肿瘤的关系作一综述’ !!H ;<9的分类和在组织中的分布细胞不能通过简单的弥散方式吸收葡萄糖#它必须借助一种特殊蛋白质#即葡萄糖转运蛋白’由于不同组织对葡萄糖需求不同#故可能有不同的葡萄糖转运蛋白’目前用基因探针方法# 已发现了’种不同的葡萄糖转运蛋白%[?I 3,\-$[?I 3*\0& ’[?I 3,在人类所有组织中均存在#它对葡萄糖具有很高的亲和力#可调节葡萄糖摄取’[?I 3!出现在能释放葡萄糖入血的器官中#如肠$肝$肾$及胰腺的/细胞#对葡萄糖亲和力极低#似乎仅在血浆葡萄糖水平相对较高时才作为转运体发挥载体功能’[?I 3#在脑神经元中被发现# 存在于人类所有组织中’对葡萄糖分子也有高亲和性’[?I 3(是肌肉和脂肪细胞主要的转运蛋白# 一般情况下#不能起转运葡萄糖的作用#仅在胰岛素的信号刺激下#能促进饭后葡萄糖进入上述组织中储存起来’[?I 3-主要存在于小肠及肾脏#主要作为果糖转运体’[?I 3.基因是一个假基因#不在蛋白水平表达’[?I 3*是肝微粒体[?I 3#与[?I 3!有.’)序列一致性’[?I 3’是主要表达于睾丸及受胰岛素调控的组织中’[?I 30在脾$外周白细胞$脑组织中表达’这’种葡萄糖转运蛋白转运葡萄糖都是按浓度梯度进行的’还有一种是钠离子依赖的协同转运蛋白%$[&H &#它逆浓度主动转运葡萄糖#是耗能过程#有$[&H ,%在小肠中表达明显#肾$肝$肺中少量表达&和$[&H !%肾中表达高#小肠中少&两种’ -!H ;<9与肿瘤 -"!![?I 3表达与肿瘤的生物学行为!各种葡萄糖转运蛋白在不同类型肿瘤中作用可能各不相同#[?I 3,可能是大多数肿瘤中表达的主要角色’其在 各部位肿瘤中表达(, )大致如下’头颈部"见于基底上皮细胞癌和口腔癌*胰腺"和G Q [%!\脱氧氟代\Q \葡萄糖&表达正相关*结肠"增强的表达与不良的预后有关*阴茎"在增生的病变处表达增强*胃食道"胃中高度表达#与M /77233食管有关*肾$膀胱"高度表达但与肿瘤分级无关*甲状腺"仅在恶性肿瘤中表达*肺"仅在恶性肿瘤中表达#在肿瘤中心表达更高#是非小细胞肺癌的预兆*乳腺"过度表达但与肿瘤大小$受体$淋巴结状态无关*脑"[?I 3,比[?I 3#表达低#且与星形细胞瘤分级相关*卵巢"过度表达#且与 肿瘤分级有关*皮肤"表达提示增生性病变’国外( !)亦有报道[?I 3,在肺癌$结直肠癌$乳腺癌等多种肿瘤中均有过度表达#而且其表达水平与肺癌及结直肠癌的临床分期$ 转移和预后密切相关’-"!"!![?I 3表达与癌发生的关系!在一些恶性肿 瘤中[?I 3表达与癌的形成无关#如在胃癌(# )中用免疫组织化学方法检测发现胃腺瘤$ 癌前病变$早期胃癌中检测不到[?I 3,表达#而只在易浸润$发生转移的胃癌中检测到#[?I 3,表达并不随着胃癌的发展而 逐渐增高’而对胆囊癌(()的免疫组织化学实验发 现#[?I 3,的表达与胆囊癌的形成及进展高度相关’-"!"-![?I 3异常表达与癌分化程度的关系! Y 大脑地解剖结构和功能——布鲁德曼分区
大脑的解剖结构和功能——布罗德曼分区系统 布罗德曼分区是一个根据细胞结构将大脑皮层划分为一系列解剖区域的系统。神经解剖学中所谓细胞结构（Cytoarchitecture），是指在染色的脑组织中观察到的神经元的组织方式。 布罗德曼分区1909年由德国神经科医生科比尼安·布洛德曼（Korbinian Brodmann）提出。根据皮质细胞的类型及纤维的疏密把大脑皮质分为52个区，并用数字给予表示。Brodmann Area 1, BA1 Brodmann Area 2, BA2 Brodmann Area 3, BA3 位置：位于中央后回 (postcentral gyrus) 和前顶叶区。 功能：分别为体感皮层内侧、末尾和前端区,BA1、BA2、BA3共同组成体感皮层； 具备基本体感功能（first somatic sensory area）接受对侧肢体的感觉传入。Brodmann Area 4, BA4 位置：位于中央前回(precentral gyrus)，中央沟(central sulcus)的内侧面 功能：初级运动皮层（first somatic motor area)，包含“运动小人”（motor homunculus ）。 控制行为运动，与BA6 （前）和BA3 、BA2 、BA1、（后）相连，同时与丘脑腹外侧核相连。 体感小人（Somatosensory Homunculus ） 传入体感信息较多的身体区域获得的皮层代表区域较大。比如手部在初级体感皮层中的代表区域比背部的大。体感皮质定位可用“体感小人”（Somatosensory homunculus）来表示。 Brodmann Area 5, BA5 位置：位于顶叶前梨状皮质区（梨状皮质piriform cortex为下边缘皮质的组成部分）。功能：与BA7形成体感联合皮层。 Brodmann Area 7, BA7 位置：位于顶叶皮质顶部，体感皮层后方，视觉皮层（visual area)上方。 功能：将视觉和运动信息联合起来；与BA5形成体感联合皮层；视觉-运动协调功能。 Sensory Areas---------Somatosensory Association Area 位置：位于初级躯体感觉皮层后方（BA5、BA7）
对葡萄糖转运蛋白的讨论 关键词：葡萄糖转运蛋白糖尿病胰岛素释放障碍胰岛素抵抗 葡萄糖转运蛋白是细胞转运葡萄糖的 载体。研究发现，葡萄糖转运蛋白是一个蛋白家族，包括多种蛋白，它们在体内的公布以及与葡萄糖分子的亲合力差异显着。其中GLUT2和GLUT4尤为重要。GLUT2是胰岛B 细胞膜上的转运蛋白，在血糖浓度升高时，促进GLUT2对葡萄糖的转运功能，继而刺激胰岛素释放。GLUT4在脂肪细胞和肌细胞中表达，胰岛素刺激GLUT4在脂肪细胞和肌细胞或表达，胰岛素刺激GLUT4分子转移到细胞膜上，促进葡萄糖分子的转运过程。GLUT2和GLUT4分子的研究对于糖尿病的胰岛素释放障碍和胰岛素抵抗有重要意义。 1GLUT的分类 除了肾和肠道有能量依赖性的钠-葡萄糖协同转运外，其它大多数细胞都有非能量依赖的转运体存在。它们将葡萄糖分子从高
浓度向低浓度载过细胞膜。现已发现至少存在五种这样的转运蛋白，它们对葡萄糖的转运有各自不同的特点，分为GLUT1、GLUT2、GLUT3、GLUT4和GLUT5。 GLUT1分子在人类所有组织中均存在， 它调节葡萄糖摄取。它对葡萄糖分子有很高的亲合力，因此在相对低浓度葡萄糖的状态下也能转运葡萄糖分子。由于这个原因，GLUT1是一种重要的脑血管系统成分，保证 足够血浆葡萄糖分子转运进入中枢神经系统。 与GLUT1不同，GLUT2分子对葡萄糖亲合力极低，似乎仅在血浆葡萄糖水平相对较高时才作为转运体发挥载体功能。例如饭后，胰岛B细胞和肝细胞中起葡萄糖转运功能的分子就是GLUT2。这种生理功能抑制了正常状态或饥饿条件下肝脏对葡萄糖分子的摄 取和胰岛素不正常分泌。OgawaY等人研究发现，对于Ⅱ型、Ⅰ型早期糖尿病人和胰腺移植失败的病人，在血糖浓度升高时，普通B 细胞中GLUT2分子的表达有所下降。因此他们得出结论：对于上述病人，高血糖通过对
海马结构,希望有所帮助 海马结构(hippocampal formation，HF)属于脑的边缘系统(1imbic system)中的重要结构，与学习、记忆、认知功能有关，尤其是短期记忆与空间记忆。海马皮质从海马沟至侧脑室下角依次为分子层、锥体层和多形层。齿状回也分三层：分子层、颗粒细胞层和多形层。依据细胞形态、不同皮质区的发育差异以及纤维排列的不同，将海马分为4个区，即CAl、CA2、CA3、CA4区。海马结构是大脑边缘系统的重要组成部分．在进化上是大脑的古皮质，位于大脑内侧面颞叶的内侧深部，左右对称。一般认为海马结构由海马或称Ammon角、齿状回、下托及海马伞组成，结构比较复杂。在功能和纤维联系上，不仅与嗅觉有关，更与内脏活动．情绪反应和性活动有密切关系。细胞学研究表明，海马头部主要是由CAI区折叠而成，而CAI区对缺氧等损伤最为敏感，也被称为易损区，因此海马头部也是最易发生病变的部位。 海马结构由海马(hippoeampus)、齿状回(dentate gyrls)、下托(subiculum)和围绕胼胝体的海马残体(hippoeampal rudimerit)组成，其中海马为体积最大最主要的部分。 大脑海马（hippocampus）是位于脑颞叶内的一个部位的名称，人有两个海马，分别位于左右脑半球. 它是组成大脑边缘系统的一部分，担当着关于记忆以及空间定位的作用. 名字来源于这个部位的弯曲形状貌似海马(希腊语hippocampus). 在阿兹海默病中,海马是首先受到损伤的区域; 表现症状为记忆力衰退以及方向知觉的丧失。大脑缺氧(缺氧症)以及脑炎等也可导致海马损伤 . 在动物解剖中, 海马属于脑的演化过程中最古老的一部分。来源于旧皮质的海马在灵长类以及海洋生物中的鲸类中尤为明显。虽然如此, 与进化树上相对年轻的大脑皮层相比灵长类动物尤其是
关键词：葡萄糖转运蛋白糖尿病胰岛素释放障碍胰岛素抵抗葡萄糖转运蛋白是细胞转运葡萄糖的载体。研究发现，葡萄糖转运蛋白（后简称GLUT）是一个蛋白家族，包括多种蛋白，它们在体内的公布以及与葡萄糖分子的亲合力差异显著。其中GLUT2和GLUT4尤为重要。GLUT2是胰岛B细胞膜上的转运蛋白，在血糖浓度升高时，促进GLUT2对葡萄糖的转运功能，继而刺激胰岛素释放。GLUT4在脂肪细胞和肌细胞中表达，胰岛素刺激GLUT4在脂肪细胞和肌细胞或表达，胰岛素刺激GLUT4分子转移到细胞膜上，促进葡萄糖分子的转运过程。GLUT2和GLUT4分子的研究对于糖尿病的胰岛素释放障碍和胰岛素抵抗有重要意义。1GLUT的分类除了肾和肠道有能量依赖性的钠-葡萄糖协同转运外，其它大多数细胞都有非能量依赖的转运体存在。它们将葡萄糖分子从高浓度向低浓度载过细胞膜。现已发现至少存在五种这样的转运蛋白，它们对葡萄糖的转运有各自不同的特点，分为GLUT1、GLUT2、GLUT3、GLUT4和GLUT5。GLUT1分子在人类所有组织中均存在，它调节葡萄糖摄取。它对葡萄糖分子有很高的亲合力，因此在相对低浓度葡萄糖的状态下也能转运葡萄糖分子。由于这个原因，GLUT1是一种重要的脑血管系统成分，保证足够血浆葡萄糖分子转运进入中枢神经系统。与GLUT1不同，GLUT2分子对葡萄糖亲合力极低，似乎仅在血浆葡萄糖水平相对较高时才作为转运体发挥载体功能。例如饭后，胰岛B细胞和肝细胞中起葡萄糖转运功能的分子就是GLUT2。这种生理功能抑制了正常状态或饥饿条件下肝脏对葡萄糖分子的摄取和胰岛素不正常分泌。OgawaY等人研究发现，对于Ⅱ型、Ⅰ型早期糖尿病人和胰腺移植失败的病人，在血糖浓度升高时，普通B细胞中GLUT2分子的表达有所下降。因此他们得出结论：对于上述病人，高血糖通过对GLUT2的下调作用减少葡萄糖诱导的胰岛分泌，加重病情。虽然，GLUT2分子是葡萄糖刺激胰岛素分泌的一个关键因子，但其他环节如糖激酶异常，ADP-核糖生成障碍等均与胰岛素分泌障碍有关，因此上述实验只能说明GLUT2分子在胰岛B细胞的葡萄糖转运中起着重要作用，其它结论还有待研究。GLUT3分子在所有组织中均已发现，主要作为神经元表面的葡萄糖转运体，它对葡萄糖分子也有高亲合性，负责将葡萄糖从脑脊液转运至神经元细胞。GLUT4主要存在于骨骼肌、脂肪细胞的胞浆中，一般情况下，不能起转运葡萄糖的作用，仅在胰岛素的信号刺激下，才能通过易位作用转运到细胞膜上，促进饭后葡萄进入上述组织中储存起来。GLUT5在人类小肠刷状缘上表达，主要作为果糖转运体，在肝脏也高度表达。2GLUT4分子是研究的一个热点糖尿病的发病机制归纳而言无外乎两个方面，一是胰岛素分泌不足，二是胰岛素抵抗。胰岛素抵抗的结果，血浆中胰岛素水平虽高，但血糖浓度还是比正常情况高。葡萄糖转运机制障碍是胰岛素抵抗的一个重要方面，也是现今研究的一个热点。在骨骼肌和脂肪细胞，胰岛素刺激葡萄糖转运过程如下：首先胰岛素与细胞膜上的受体结合，然后通过至今仍不明确的信号传递过程使含有GLUT4分子的囊泡从胞内池移动到细胞膜，然后与膜融合，将GLUT4分子固定在细胞膜上，从而发挥转运葡萄糖等C1-C3位置有相同结构的其它糖分子（如L-阿拉伯糖、D-木糖、半乳糖）的作用。 [!--empirenews.page--] 胰岛素抵抗虽然包括GLUT4转运活性的下降，但这种缺陷是否是GLUT4分子数量不足引起的呢？GarveywT等人研究证实，无论是在糖尿病人还是非糖尿病患者，只要存在胰岛素抵抗，GLUT4的数量并无明显减少，但GLUT4的易位作用发生了障碍，它们在高密度膜区异常积累，但不能转移到细胞膜上。这种现象在骨骼肌细胞和脂肪细胞中均已被发现。所以胰岛素抵抗的机制之一可能是GLUT4分子易位障碍，而不是合成、释放不足。既然GLUT4分子在葡萄糖转运过程中如此重要，它是如何发挥作用的呢？GLUT4分子镶嵌在细胞膜的脂质分子双层中，通过构象改变将葡萄糖分子运进细胞内，而不是借助蛋白本身的运动。即所谓的“ping pong”机制。这种构象改变可能与GLUT4分子的磷酸化、去磷酸化有关。JE-Reusch等人在脂肪细胞培养液中加入PTH，发现GLUT4磷酸化程度明显增加，而胰岛素刺激的去磷酸化作用显著降低。同时，PTH对GLUT4分子在细胞内分布没有影响。磷酸化的GLUT4分子在内在活性明显降低，可能与其构象改变障碍有
[15]TSUBAMOTO H ，KANAZAWA R ，INOUE K ，et al.Fertility ?sparing management for bulky cervical cancer using neoadjuvant transuterine arterialchemotherapy followed by vaginal trachelectomy[J].Int J Gynecol Cancer ，2012，22（6）：1057?1062. [16]TSUJI N ，BUTSUHARA Y ，YOSHIKAWA H ，et al.Pregnancy after neoadjuvant chemotherapy followed by abdominal radical trachelectomy in stage ⅠB2cervical cancer ：a case report[J].Gynecol Oncol Case Rep ，2012，4：13?15. [17]SATO S ，AOKI D ，KOBAYASHI H ，et al.Questionnaire survey of the current status of radical trachelectomy in Japan[J].Int J Clin Oncol ， 2011，16（2）：141?144. [18]ROBOVA H ，PLUTA M ，HREHORCAK M ，et al.High ?dose density chemotherapy followed by simple trachelectomy ：full?term pregnancy[J].Int J Gynecol Cancer ，2009，18（6）：1367?1371. [19]LANOWSKA M ，MANGLER M ，SPEISER D ，et al.Radical vaginal trachelectomy after laparoscopic staging and neoadjuvant chemotherapy in women with early?stage cervical cancer over 2cm ：oncologic ，fertility ，and neonatal outcome in a series of 20patients[J].Int J Gynecol Cancer ，2014，24（3）：586?593. [20]姚婷婷，陈勍，林仲秋．早期宫颈癌行经腹根治性宫颈切除后成功妊 娠2例报道[J]．现代妇产科进展，2011，20（10）：822?823． [21]DARGENT D ，FRANZOSI F ，ANSQUER Y ，et al.Extended trachelecto? my relapse ：plea for patient involvement in the medical decision[J].Bull Cancer ，2002，89（12）：1027?1030.[22]SCHLAERTH JB ，SPIRTOS NM.Radical trachelectomy and pelvic lymphadenectomy with uterine preservation in the treatment of cervical cancer[J].Am J Obstet Gynecol ，2003，188（1）：29?34. （收稿日期：2017?11?04） 钠?葡萄糖共转运蛋白2抑制剂对糖尿病肾病保护作用的 研究进展 雷明静综述，钟 玲△审校（重庆医科大学附属第二医院肾内科，重庆400010） 【关键词】糖尿病肾病；钠；葡萄糖；载体蛋白质类；肾；血流动力学；综述 DOI ：10.3969/j.issn.1009?5519.2018.12.022文献标识码：A 文章编号：1009?5519（2018）12?1839?03 钠?葡萄糖共转运蛋白2（SGLT2）抑制剂为一种新型降糖药，有降糖、降压、降尿蛋白、减轻体重、降尿酸、改善肾小球高滤过等作用。目前有研究提示，SGLT2抑制剂对糖尿病肾病（DN ）患者降糖与降尿白蛋白作用不平行，提示其可能通过非糖依赖途径发挥肾脏保护作用。本文对SGLT2抑制剂对DN 保护作用、肾血流动力学、尿钠排泄、降尿白蛋白肌酐比等机制做一综述。1SGLT2抑制剂与DN 的关系 DN 为糖尿病患者的微血管重要并发症之一，其发病机制复杂，涉及的因素繁多，主要危险因素有糖尿病病程长、血糖控制不佳、肥胖、系统性高血压、脂质代谢紊乱等，单独的血糖升高不能完全解释其发生、发展，尽管改善生活方式和药物的使用[（降糖、降脂、降压，尤其是肾素?血管紧张素?醛固酮系统阻断剂（RAASi ）]可以有效地控制这些危险因素，但DN 的发病率仍然居高不下，而且一旦出现肾功能异常，其进展速度要远快于非糖尿病性慢性肾脏病。在过去的20年里，一些新型的治疗策略，如双重或三重RASSi 用来减缓DN 患者肾功能进展，但是这些方案的效果有限，且其安全性受到质疑，迄今仍不推荐双重或三重RASSi 治疗DN [1]。因此，对于能够控制多种危险因素和可以保护肾脏结局的新疗法成为研究热点。 一种新型非胰岛素依赖途径的降糖药——SGLT2 抑制剂，其阻断近端小管中钠离子、葡萄糖重吸收，增加肾脏尿糖排泄并降低血糖[2]。研究发现，SGLT2抑制剂除降糖作用外，还有降低糖尿病患者血压、减轻体重、降低尿酸水平、改善肾小球高滤过、减少蛋白尿、增加尿钠离子排泄等作用。目前，美国食品和药品监督管理局（FDA ）和欧洲药物管理局（EMA ）批准了3种口服SGLT2抑制剂（坎格列净、达格列净、恩格列净），作为肾小球滤过率（eGFR ）>30mL/（min·1.73m 2）的2型糖尿病患者可选择的二线或三线降糖治疗药物。2SGLT2抑制剂的肾脏保护作用独立于降糖效应 近年来，已有多项研究表明，SGLT2抑制剂肾脏保护作用可能通过非糖依赖途径，独立于其降糖作用。HEERSPINK 等[3]对1450例2型糖尿病患者分别使用坎格列净100、300mg 并与格列美脲6~8mg 进行对照，1年后，患者糖化血红蛋白（HbA1c ）分别下降0.81%、0.82%、0.93%，2年后HbA1c 分别下降0.55%、0.65%、0.74%，而估计eGFR 分别降低3.3、0.5、0.9mL/（min×1.73m 2·年）（P <0.01）。对于尿白蛋白/肌酐（UACR ）≥30mg/g 的患者，坎格列净300、100mg 对UACR 下降作用均优于格列美脲，提示坎格列净能延缓2型糖尿病患者肾功能下降，其肾脏保护作用独立于降糖作用。 PETRYKIV 等[4]对超过4000例2型糖尿病患者参与的为期24周的11个3期临床试验进行总结，发现 △ 通信作者，E?mail ：536576113@https://www.doczj.com/doc/ef16503118.html, 现代医药卫生2018年6月第34卷第12期J Mod Med Health ，June 2018，Vol.34，No.12· ·1839
抑郁模型大鼠海马内环境的研究 发表时间：2011-07-13T16:28:59.267Z 来源：《中外健康文摘》2011年第16期供稿作者：郑晓霓1 单德红2 [导读] 海马神经元所处的细胞外液属于机体内环境，其成分和理化特性相对稳定是神经元发挥功能的前提。 郑晓霓1 单德红2 （1辽宁省沈阳市沈和区第二中医院110015；2辽宁省沈阳市中医药大学基础医学院110032）【中图分类号】R74【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2011)16-0144-02 【摘要】目的研究海马内环境稳态在抑郁症中的作用。方法20只雌性Wistar大鼠分为对照组、模型组。ELISA法检测血清皮质醇、雌二醇，光镜和电镜观察海马CA3区形态学变化，免疫组化法检测海马脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达。结果与对照组比较，模型组皮质醇水平显著升高，雌二醇水平明显下降，海马CA3区神经元损伤严重，脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达明显降低。结论抑郁状态下，海马内环境稳态被破坏。【关键词】抑郁症海马内环境稳态脑源性神经生长因子血管内皮生长因子【Abstract】 Objective: To study the action of hippocampal internal enviroment in deprssion. Methods: 20 femal wistar rats were divided into the control, model group. Serum cortisol and estradiol were measured with ELISA. Hippocampal CA3 morphology were observed by light and electron miroscope. BDNF and VEGF expressions were detected by immunohistochemistry. Results: compared with those in the control, in the model group, the serum cortisol level increased obviously, serum estradiol level decreased significantly, and the CA3 neurons had severious structure damage, and the expressions of BDNF and VEGF decreased markedly. Conclusion: The homeostasis of hippocampal internal enviroment is disrupted in depression. 【Key words】 depression hippocampal internal enviroment homeostasis brain-derived neurotrophtic factor vascular endothelial growth factor 海马内环境指海马神经元的细胞外液，其理化性质和各种成分应保持相对稳定的状态，即稳态。海马内环境的理化特性包括温度、渗透压、酸碱度等，成分有各种离子、激素、递质、细胞因子等。海马内环境稳太破坏均会损伤海马功能和结构，进而影响行为、情绪和内脏功能。现代医学认为海马损伤在抑郁症发病中起重要作用[1-2]，但抑郁状态下，海马内环境出现何种变化目前尚没有系统研究，这就是本课题的研究目标，而本文主要对海马内环境中相关成分进行初步观察。 1 材料和方法 1.1实验动物的选取和分组健康Wistar雌性大鼠，清洁级，体重226±20g,中国医科大学动物实验中心提供，合格证号：医大动物合格证SCXK(辽)2008-0005。适应性饲养1周后，选择行为学得分相近的20只大鼠，随机分为对照组、抑郁症模型组（模型组），每组10只。室温20℃～25℃，湿度40%～50%。 1.2抑郁症模型的建立模型组大鼠建立慢性不可预见性应激模型，即在21d内随机施加电击足底（36V交流电，5min）、冰水游泳（4℃,5min）、摇晃（1min）、夹尾（1min）、禁水（24h）、禁食(24h)等刺激，每种刺激4次。 1.3血清雌二醇和皮质醇检测在实验的d22，2组大鼠均腹腔注射20%氨基甲酸乙酯（0.4mL/100g）麻醉后，腹主动脉取血，离心后取血清，低温冻存。采用ELISA方法检测皮质醇和雌二醇(Estradiol，E2)，此项工作由沈阳军区总医院内分泌实验室完成。 1.4海马组织学观察首先是HE染色：取完成1.3后2只大鼠，立即断头取双侧海马，置于10%甲醛中固定，石蜡切片，HE染色，观察海马CA3区神经元的形态学变化。其次电镜观察：取完成1.3后的2只大鼠，升主动脉插管，150ml生理盐水快速冲去血液，快速灌入4℃ 2.5%戊二醛固定液，取双侧海马，修块，再于戊二醛中固定2h，PBS反复清洗后，再经1%锇酸固定2h，双蒸水冲洗，梯度乙醇脱水，临界点干燥，离子溅射真空渡膜，扫描电镜下观察超微结构。 1.5脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达取完成1.3的6只大鼠开胸，升主动脉插管，生理盐水快速冲去血液，取双侧海马，4%多聚甲醛固定4～6h，30%蔗糖溶液沉底。做海马石蜡冠状切片，片厚25μm，隔4片取1片，采用免疫组化SABC法检测脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophtic factor，BDNF)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor ,VEGF)表达，相关抗体和试剂盒均购于武汉博±德试剂公司，阴性对照选用PBS。利用BI-2000医学图像分析系统，测定海马CA3区BDNF和VEGF表达的平均灰度值。 1.6数据处理数据以x-±s表示，采用SPSS13.0中ANOVA检验进行统计学处理。 2 实验结果 实验过程中没有实验动物死亡及脱失现象。 2.1海马形态学变化 光镜下，对照组CA3区有大量致密锥体细胞，排列整齐，细胞完整，边缘清晰；模型组细胞层次减少、稀疏、排列紊乱，大量细胞坏死。电镜下，对照组细胞器丰富，轮廓清晰，细胞核呈圆形，核膜清晰光滑完整，核染色质分布均匀；模型组细胞器减少，线粒体空泡化，细胞核变小，不规则，且核膜增厚，核周电子密度降低。 2.2海马内环境相关成分变化 与对照组比较，模型组皮质醇显著升高，E2明显下降。BDNF和VEGF免疫阳性反应产物呈棕黄色，前者分布神经元胞浆内，后者主要分布于血管内皮细胞内。对照组BDNF和VEGF表达较多，模型组较少，二者灰度值均升高。具体数据见表1。表1 各组海马内环境相关成分的变化 注：与对照组比较：a P<0.05, b P<0.01
人源葡萄糖转运蛋白GLUT1的晶体结构 摘要： 葡萄糖转运蛋白GLUT1主要促进葡萄糖扩散进入红细胞，并负责葡萄糖供应到大脑和其他器官。不正常的基因突变可能导致GLUT1缺陷综合症，其中GLUT1的过度表达是癌症的预示指标。尽管经过几十年的调查， GLUT1的结构尚不清楚。在这里，我们报告的人GLUT1的晶体结构在3.2 ?分辨率的状态。一种被捕获的具有典型的向内折叠构象的全长蛋白。这种结构可以实现对精确映射和疾病相关的基因突变中GLUT1的潜在机理的解释。这些突变基因结构提供了一个洞察GLUT1和糖搬运工亚家族的其他成员的交流访问机制的途径。在单向转运GLUT1与质子耦合木糖转运体XylE的结构比较中，可以检验被动推动者和积极转运的转运机制。 GLUT1 由SLC2A1编码，介导的细胞将基底水平葡萄糖的摄取到许多组织中。特别是，它负责通过促进葡萄糖的扩散，使成红细胞常数摄取保持在约5毫米的血液浓度。GLUT1在血液组织屏障的内皮细胞内具有使葡萄糖供应到大脑和其他器官中的核心作用。 GLUT1的失活突变，将导致血糖运输活动受损，而这是与疾病相关联的缺乏能源供应到大脑不足相关联的。 GLUT1缺陷综合征（又称德活体综合征）的特点是症状包括早发性癫痫，小头畸形和发育迟缓的频谱。癌细胞需要增强葡萄糖的供应，部分是通过无氧糖酵解（ Warburg效应）的效率较低的能源产生。确定GLUT1的水平将作为肿瘤预后的重要指标。因为它的基本生理和病理意义，GLUT1一直是功能研究及结构测定的重点。 GLUT1属于MFS ，其中规模最大最普遍存在的二次转运蛋白超家族之一的糖搬运工亚科。 MFS转运共享一个保守的核心，其包括由两个离散地折叠的结构，即在氨基和羧基末端结构域12个跨膜片段。在每个领域，连续六次跨膜段折叠成一对“3+3 ”反向重复的片段。已知的的实验证据表明，三螺旋束可以表示其基本结构和功能单位。所有MFS转运蛋白被认为是利用交流访问机制，其中由底物结合位点是从两侧通过转运蛋白的构象变化交替访问OFTHE膜运输衬底。 细菌GLUT1同系物，在D -木糖的结构：从大肠杆菌和葡萄糖H+转运体XylE （参28 ，29 ）或从表皮葡萄球菌获得的H+转运体GLCP（参见30 ）已有报道。值得注意的是， XylE的结构约束着GLUT1 （参见28 ）以托德 - 木糖ORD -葡萄糖启用同源性为基础的建模。然而，无论XylE和GLCP都是作为GLUT1一个催化葡萄糖向下穿过膜的浓度梯度单向转运质子驱动转运体。人类GLUT1的原子结构对理解它的运输和疾病机制至关重要。 GLUT1的结构测定