【优化方案】2016年高中生物专题2.2.2 动物细胞融合与单克
隆抗体课时作业新人教版选修3
1．动物细胞融合和植物原生质体融合决定于( )
A．细胞膜的流动性
B．细胞膜的选择透过性
C．细胞质的流动性
D．细胞质中酶的活性
解析：选A。细胞融合的原理是细胞膜的流动性。
2．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几种不正确( )
C．2 D．3
解析：选D。受培养基pH影响，动物的组织块剪碎后只能用胰蛋白酶处理使细胞分散开，而不能用胃蛋白酶处理；植物细胞原生质体的促融方法可用物理法或化学法，而不用生物法；植物组织培养的培养基中的糖用的是蔗糖，而不是葡萄糖。
3．(2014·泉州高二检测)单克隆抗体(单抗)实质上是单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是( ) A．单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位
B．单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术
C．在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选
D．只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞
解析：选D。促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞除了可以用物理或化学方法的诱导外，还可以用灭活的动物病毒诱导其融合，故选项D错。借助单克隆抗体的导向作用，生物导弹能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。单抗制备的过程首先要用到细胞融合技术将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合为杂交瘤细胞，再通过动物细胞培养技术获得大量单克隆抗体。在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选：一要选出杂交瘤细胞，二要筛选出能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
4．在进行课题研究时，甲、乙、丙、丁四位同学所采用的方法中错误的是( )
A．甲用酶解法去除植物细胞的细胞壁
B．乙用青蛙的血清来配制小鼠细胞的培养液
C．丙用化学法诱导原生质体的融合
D．丁用体外培养法制备单克隆抗体
解析：选B。植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；由于青蛙和小鼠的代谢具有较大差异，所以应用小鼠血清来配制小鼠细胞的培养液；诱导原生质体的融合常用物理法和化学法；制备单克隆抗体既可在生物体内，也可用体外培养法。
5．如图是单克隆抗体制备过程示意图，其中①过程注射的物质和A细胞的名称分别是( )
A．抗体、T淋巴细胞B．抗原、T淋巴细胞
C．抗体、B淋巴细胞D．抗原、B淋巴细胞
解析：选D。①注射抗原后，在抗原刺激作用下，小鼠体内产生对应该抗原的B淋巴细胞(浆细胞)。
6．(2014·南京高二检测)正常细胞合成DNA有两条途径：a通路(主通路)和b通路(旁路)。用于进行单克隆抗体制备的骨髓瘤细胞是DNA合成的b通路缺陷型细胞株，让B淋巴细胞与这种缺陷型细胞融合，再在加入DNA合成的a通路阻断剂(氨基嘌呤)的培养液中培养，这种培养会产生哪些效果( )
①促进细胞融合②淘汰B淋巴细胞③淘汰骨髓瘤细胞④选择杂交瘤细胞⑤淘汰骨髓瘤细胞相互融合的细胞⑥淘汰B淋巴细胞相互融合的细胞
A．①②③④⑤⑥B．②③④⑤⑥
C．②③④ D．④⑤⑥
解析：选B。B淋巴细胞和B淋巴细胞—B淋巴细胞由于不能无限增殖会被淘汰；由于所用的骨髓瘤细胞的DNA合成的b通路缺陷，培养液中再加入DNA合成的a通路阻断剂，则骨髓瘤细胞及骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞由于不能合成DNA会被淘汰，只有杂交瘤细胞可被选择。
7．有人用间接免疫荧光测定细胞表面抗原的分布：以不同荧光染料标记抗体，被标记的抗体分别与小鼠细胞膜和人细胞膜的抗原结合分别产生绿色和红色荧光，然后做如图所示实验，对有关现象的解释，错误的是( )
A．抗体结合荧光物的部位与抗体结合抗原的部位不同，因而能介导荧光物标记膜抗原B．细胞膜都具有流动性，因而能用合适的诱导方法使两种细胞彼此融合
C．膜内分子能在膜上扩散移动，因而才会发生融合后膜抗原的分布变化
D．人和小鼠细胞具有相同的抗原，因而能借免疫系统制备标记抗体
解析：选D。人和小鼠细胞表面的抗原结构是不同的；两种生物的细胞能融合，其理论基础为细胞膜的流动性；抗体与荧光物的结合部位和抗体与抗原的结合部位不同，因此抗体能同时与荧光物及抗原结合；抗原是细胞膜上的一种成分，两种细胞融合后，由于膜内分子(抗原)的扩散移动而使得两种细胞上的抗原(带荧光标记)能均匀分布。
8．由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不．正确的是( )
A．“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成
B．“弹头”是由放射性同位素、化学药物和细胞毒素等物质构成
C．“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能
D．“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的
解析：选C。“弹头”中的药物既能杀伤肿瘤细胞，也能杀死正常细胞，不具有选择性。“生物导弹”中的“瞄准装置”是由专一识别特定肿瘤细胞的单克隆抗体构成；“弹头”是由杀死肿瘤细胞的放射性同位素、化学药物和细胞毒素等物质构成；“生物导弹”是利用动物细胞融合、动物细胞培养等细胞工程技术制备出来的。
9．关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是( )
A．对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞
B．融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养C．特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染
D．治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞
解析：选B。单克隆抗体的制备是用骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合后得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，又具有B淋巴细胞产生抗体的特点，所以不需经过遗传物质的改变便能无限增殖；单克隆抗体最广泛的应用是作为诊断试剂；如果把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞所在位置，将癌细胞杀死。
10．利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )
A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者解析：选D。单克隆抗体是效应B细胞和骨髓瘤细胞诱导融合后形成的杂交瘤细胞大量增殖后产生的，A项方法获得的抗体纯度低，不能称为单克隆抗体。B项中效应B细胞无法实现大量增殖。C项中形成的杂交细胞有三类，既有效应B细胞和瘤细胞融合在一起的，又有两个效应B细胞融合在一起的，还有两个瘤细胞融合在一起的。
11．如图所示为细胞融合技术的一些过程：
(1)从A、B细胞到C细胞的过程中，必须用________处理。
(2)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为________细胞，由D 细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为________过程。
(3)若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在形成C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，请解释原因。________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
解析：让不同植物体细胞的原生质体融合，融合必须通过一定的技术手段进行人工诱导。单克隆抗体制备过程需得到化学性质单一、特异性强的抗体。科学家发现，在动物发生免疫过程中，每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，要想获得大量的单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行克隆，形成细胞群。但在体外培养条件下，一个B淋巴细胞不可能无限增殖，这就需要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再筛选出杂交瘤细胞。最后考查了细胞膜的结构特点：具有一定的流动性。
答案：(1)诱导剂(2)杂交瘤克隆(3)细胞膜上的蛋白质是可以运动的(或细胞膜具有流动性)
12．如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1)________________技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于________培养基。
(3)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用________________。
(4)选用的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的________________的特点，又具备淋巴细胞的________________特点。
(5)淋巴细胞是由动物体________中的________细胞分化、发育而来。
(6)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是________________。
解析：抗体是由B淋巴细胞分泌的，每一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体。要想获得大量单一抗体，需要将某一种B淋巴细胞大量克隆，但在体外培养的条件下，B淋巴细胞不能无限增殖，而骨髓瘤细胞可以在体外无限增殖。科学家将这两种细胞通过灭活的病毒诱导融合，在特定的选择培养基中筛选出杂交瘤细胞，再将杂交瘤细胞分开培养，从中选育出产生高特异性抗体的细胞进行体外大规模培养，从而获得大量的单克隆抗体。淋巴细胞是由动物骨髓中的造血干细胞分化发育来的。杂交瘤细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质，是通过主动运输进入细胞内的。
答案：(1)动物细胞培养(2)选择(3)灭活的病毒(4)在体外大量增殖分泌特异性抗体(5)骨髓造血干(6)主动运输
13．甲流(H7N9)在世界各地大面积蔓延并出现了死亡病例。科学家已分离出甲型H7N9病毒(一种RNA病毒)。某制药厂根据下面流程图生产预防和治疗甲流的抗体，请据图回答下列有关问题。
(1)生产单克隆抗体一般选用[A]________细胞和[B]________细胞，在某诱导剂的作用下融合。
(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成________种类型的C细胞。
(3)理论上，注射了该抗体的人群不能长期对甲流有防疫作用，试分析原因________________________________________________________________________。
(4)不同种动物的体细胞融合，相比诱变育种和杂交育种方法，具有________________________________________________________________________等突出的优点。
(5)请说明单克隆抗体的主要作用________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
解析：A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，B细胞是取自感染病毒的人体内的B淋巴细胞，二者在聚乙二醇诱导剂的作用下融合。在细胞融合的过程中，可能有的能融合，有的不能融合。如果仅考虑两个细胞的融合，则可能有A细胞与A细胞、A细胞与B细胞、B细胞与B细胞三种融合方式，所以需要筛选出既能无限增殖又能产生特异性抗体(即A细胞与B细胞融合)的D细胞(杂交瘤细胞)。注射了该抗体的人群不能长期对甲流有防疫作用的原因可能是甲流病毒不断产生变异，因而原抗体对变异的甲流病毒不起作用，或者是抗体已经消失等。诱变育种和杂交育种只能发生在同种生物之间，而动物体细胞融合可以发生在不同种生物之间，因而可克服远缘杂交不亲和的障碍。单克隆抗体作为诊断试剂，用于治疗疾病和运载药物等。
答案：(1)骨髓瘤B淋巴
(2)3
(3)引起甲流的病毒不断发生变异(意思相同则可)
(4)目的性强、克服远缘杂交不亲和性(能有效地打破物种的生殖隔离界限；意思相同即可)
(5)作为诊断试剂，用于治疗疾病和运载药物(意思相同即可)
14．有性生殖的生物产生后代时需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合。如图为细胞融合的简略过程，请回答下列问题。
(1)若a、b表示两种植物体细胞，则杂种细胞d会再生出________，分裂形成愈伤组织
并逐步发育成杂种植株。这项技术克服了________________________________________________________________________。
(2)若a、b分别为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则经融合并筛选得到的d细胞的特点是____________________________________，由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比，具有________________________________的特点。下列是单克隆抗体制备过程的部分图解，请把代表各步骤的字母填写在流程示意图中。
解析：(1)若a、b表示两种植物体细胞，杂种细胞d再生出细胞壁，后才能成为杂交细胞，最后分化形成杂种植株，克服了远缘杂交不亲和的障碍。(2)若a、b表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，筛选出的d细胞是既能迅速大量繁殖，又能产生专一性抗体的杂交瘤细胞，它产生的抗体具有特异性强、灵敏度高，并能大量制备的特点。
答案：(1)细胞壁远缘杂交不亲和的障碍(2)既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体特异性强、灵敏度高，并可能大量制备
《动物体细胞核移植技术和克隆动物》课后练习 1、下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。 回答下列问题： （1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_______的方法。②代表的过程是__________。 （2）经过多次传代后，供体细胞中______的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是 ______ 。 （4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________。 2、2018年《细胞》期刊报道，中国科学2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题： （1）“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指 _____________ 。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目____（填“减半”“加倍”或“不变”） （2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度_________（填“大于”或“小于”）体细胞核移植，其原因是 ________________________________。 （3）在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目____________（填“相同”或“不相同”），性染色体组合____________（填“相同”或“不相同”）。
2.2动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 课时训练7动物细胞培养和核移植技术 1.动物细胞工程常用的技术手段中,最基础的是()。 A.动物细胞培养 B.动物细胞融合 C.单克隆抗体 D.动物细胞核移植 解析:动物细胞工程常用的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 答案:A 2.动物体内的细胞不易受到外界细菌、病毒等微生物的感染,原代培养的细胞()。 A.对微生物有一定的防御能力 B.培养环境中可以有一定量的微生物 C.对微生物已失去了防御能力 D.必须生活在无菌条件下,以后的培养对无菌条件的要求不严格 解析:动物体具有一定免疫力,是因为动物体具有非特异性免疫系统和特异性免疫系统,对各种病原微生物有一定的防御能力,而离体的动物细胞失去了对各种微生物的防御能力,因此,动物细胞培养的环境中不能存在微生物,否则,动物细胞就会死亡。 答案:C 3.在克隆猪的培育过程中,将猪M(基因型为Aa)的体细胞核移入猪N(基因型为aa)的去核卵子中,然后在雌猪L(基因型为AA)体内发育成熟。产出的幼猪基因型为()。 A.AA B.Aa C.aa D.Aaa 答案:B 4.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下能够发育成完整的植株,离体的动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体,原因是()。 A.动物细胞内没有成套的遗传物质 B.动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而受到限制,分化潜能变弱 C.动物细胞的细胞核太小 D.动物细胞的全能性低于植物细胞 解析:动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而受到限制,分化潜能变弱,只能通过核移植实现克隆动物的目的。 答案:B 5.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于()。 A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株 解析:由于人们对动物细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分,而植物组织培养则不需要加上述物质。 答案:A
2.2 动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和核移植技术（第二课时） 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 教学目标： 知识目标：简述通过体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用 能力目标：运用动物细胞的基础知识，分析核移植技术的理论基础，搜集有关动物细胞核移植研究进展和应用方面的资料，进行整理、分析和交流情感目标：讨论动物细胞核移植的社会意义，关注动物细胞核移植的发展和应用前景。 旧课复习： 我们已经学习了植物的组织培养，植物体细胞杂交，知道植物细胞可以培养成一棵植株，这说明植物细胞具有全能性，而动物的体细胞离开了母体，却不能培养成一只动物个体难道是动物细胞没有全能性吗？不是。而是动物细胞高度分化，全能性比较低。 导入新课： 假如生活中我们碰到这样的问题,比如：（展示幻灯片，问题的提出） 1997年,美国威斯康星洲的一个奶牛场有一头高产奶牛叫“卢新达”,年产奶量为30.8吨,而我国奶牛年平均产奶量仅为3~4吨.用什么方法能得到更多的“卢新达”呢?学生回答克隆，其实克隆的研究从1938年就开始了。（幻灯片——克隆的历史，多利之后还有许多的动物被克隆，今天，我们要先从多利讲起） 听说过克隆羊多利吧，可以请一位同学来说说来多利的诞生过程。(学生上台讲述多利的培育过程)我们一起来看看多利的培育过程，请问多利像谁呢？母羊A，因为多利的核基因全部来自母羊A。100%象吗？，不，因为还有来自母羊B的细胞质基因。这里哪个细胞是供体细胞呢，乳腺细胞，它是高度分化的体细胞。
来看课本中对克隆的定义：请大家阅读，并划线。 教师板书：1、概念 克隆的定义：动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物. 分类:体细胞核移植和胚胎细胞核移植（根据提供细胞核的供体不同而区分）多利羊之所以轰动全世界，并非因为它是首只克隆动物，你知道为什么它能一夜成名呢？请一位同学回答：（首先，它选用的细胞是高度分化的体细胞，其次，它是哺乳动物，意味着人可以进行体细胞核移植。所以它的诞生标志着体细胞核移植成功。胚胎时期的细胞进行细胞核移植比体细胞核移植更容易成功，这是为什么呢？原来胚胎细胞分化程度低，所以全能性较高，而体细胞分化程度高,所以全能性也就比较低了。其实我国早在20世纪70年代，就在童第周教授的带领下，克隆出了鱼，但是，多利一夜成名，中国的克隆鱼却默默无闻20年，这是为什么呢？（因为我们的闭塞，导致中国科学的进展不为世界所知。所以要与世界进行交流，同享科技进步成果）。 那么刚才那只卢新达奶牛能用胚胎细胞克隆吗？（请一位同学回答）。不行，本身自己已经过了胚胎期，如果用它的下一代的胚胎细胞，那么已经加入了另一只公牛的基因。所以用体细胞核移植技术。因此，说体细胞核移植技术比较常用于优秀动物个体的克隆。 下面我们通过我国成功克隆高产奶牛的过程来学习动物体细胞核移植的过程。请大家结合课本，看以下的幻灯片
动物体细胞核移植技术和克隆动物 许昌实验中学万沛沛 一、教学目标： 1．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 2．培养理解分析、信息获取、归纳总结和交流合作能力。 3．体验科学发现、技术发明和社会发展之间的关系。 二、教学重点和难点： 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 三、教学方法： 讲解讲述、阅读指导、讨论引导、归纳总结等。 四、课时安排：1课时 五、教学过程： Ⅰ、课前准备： 1、搜集相关电子图片（西游记的孙悟空）和克隆动物的图片，并制作成教学课件。 2．制定学生课前预习的学案，并及时检查，了解学生情况，制定上课计划。 Ⅱ、新课讲授： （屏幕展示课前寄语）上课前先送给同学们5个词：博学，审问，明辨，慎思，笃行，希望同学们在学习过程中能广览知识，对问题多思，多问多辩，并切实力行，用我们的努力开启“成功基因”的表达。 好，言归正传，今天我们共同探究的课题是关于克隆动物的培育过程。【导入】 投影幻灯片1——西游记插图 我们每个同学几乎都看过《西游记》，其实唐僧师徒西天取经途中，最大的一个科学发现就是——无性繁殖。他们发现女儿国的女人生孩子不需要与男人结婚，只要喝一口子母河的水，就可以如愿以偿。同时也开了男人也可以怀孕生子的科学先河。 在西游记中，人们最崇拜的一位偶像，怕是要数孙悟空了。孙悟空不但有神出鬼没的七十二变，更神奇的是：他只要从自己身上拔出一根毫毛，放在嘴边一吹，就可以变出无数个跟自己一模一样的小猴子。复制自身，这不就是克隆技术吗？所以说孙悟空是当之无愧的克隆技术的鼻祖。 这个克隆猴的古代神话如今正逐渐变成现实：2000年，科学家第一次成
细胞工程 考点一植物细胞工程1.细胞工程 (1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。 (2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。 2.植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。 3.植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程： 4.植物体细胞杂交技术 (1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 (3)过程(4)意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。 5.植物细胞工程的实际应用 (1)植物繁殖的新途径 ①微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 ②作物脱毒技术：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。 ③人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 (2)作物新品种的培育 ①单倍体育种 a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。 b.流程：花药单倍体幼苗――――――――→ 秋水仙素诱导 染色体数目加倍 纯合子。 c.优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。 ②突变体的利用：筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。 (3)细胞产物的工厂化生产 1.植物组织培养的关键 (1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。
鸡西市第四中学2012—2013年度下学期初一生物导学案 第二单元第一章第二节植物细胞 编制人：姜秀英复核人：张宏使用日期：2012. 10 编号：07【授课模式】目标导航双主高效 【学习目标】通过自主学习能够认识并说出动物细胞的基本结构；通过合作探究能够说明动物细胞与植物细胞基本结构的异同点；会制作人口腔上皮细胞临时装片，使用显微镜观察。认同细胞学说是19世纪自然科学三大发现之一。【重点难点】制作人的口腔上皮细胞临时装片，并使用显微镜观察；动物细胞的基本结构。 【学习方法】自主学习合作交流展示提升 【学习导航】自主学习前，首先熟悉教材46本节课所要学习的知识要点；详读教材，了解掌握制作并观察植物细胞临时装片的方法步骤，能熟练规范操作使用显微镜。 【自主学习】： ㈠制作口腔上皮细胞临时装片。 1.阅读教材了解口腔上皮细胞的制作过程和步骤。 2.讨论: ①制作人的口腔上皮细胞临时装片时，为什么要用生理盐水，用清水行吗？为什么要漱口？ ②为什么要用稀碘液对人的口腔上皮细胞进行染色？ ③人的口腔上皮细胞的基本结构是怎样的？绘图加以说明。 3.请你归纳制作人的口腔上皮细胞临时装片的“动作”步骤：（每一步骤用一个字概括） 、、、、、、。 ㈡模拟制作动物细胞模型，思考讨论下列问题： ①塑料袋相当于______;果脯相当于______;琼脂相当于______. ②细胞的结构是立体的还是平面的？ ③总结动物细胞的基本结构。 ㈢说出动物细胞与植物细胞基本结构的异同点；
【当堂检测】： 1．下列哪一项不是动、植物细胞共有的结构（） A、细胞膜和细胞质； B、细胞核和细胞膜； C、液泡和细胞壁； D、细胞质和细胞核。 2．制作口腔上皮细胞临时装片的正确顺序是（） ①滴一滴生理盐水；②染色；③盖盖玻片； ④用两开水漱口；⑤取口腔上皮细胞并涂抹。 A.①②③④⑤ B.⑤④③②① C.①④⑤③② D.④⑤①③② 3.制作人的口腔上皮细胞装片时，常用的染色剂是（） A、浓的碘液； B、红墨水； C、龙胆紫； D、稀碘液。 4.为了使临时装片内不产生气泡或少产生气泡，盖盖玻片时应（） A、把盖玻片平放在载玻片上； B、事先多滴几滴清水； C、让盖玻片的一边先接触载玻片上的水滴，重重的压平； D、让盖玻片的一边先接触载玻片上的水滴，轻轻放下。 5.制作口腔上皮细胞临时装片时，先在载玻片上加一滴0.9%的生理盐水，其原因是（） 6.动物细胞不具有，植物细胞具有的结构（） A、细胞壁、细胞膜、液泡 B、细胞壁、细胞膜、细胞核 C、细胞壁、线粒体、液泡 D、细胞壁、叶绿体、液泡 7. 制作口腔上皮细胞临时装片时，漱口的液体、载玻片上滴加的液体、染色用的液体分别是（） A、自来水、生理盐水、碘液 B、生理盐水、自来水、碘液 C、凉开水、生理盐水、碘液 D、碘液、生理盐水、凉开水 8.如图是某同学“用显微镜观察人口腔上皮细胞装片”时看到的图像，若使图像中人口腔上皮细胞移至视野中央，应将玻片标本（） A、向上移动 B、向下移动 C、向左移动 D、向右移动 【课后反思】
动物细胞培养时对培养基的要求： 培养基按其来源可分为天然培养基和合成培养基。天然培养基的营养成分与细胞在体内所需条件比较接近，但就细胞在体外生存的环境来说，合成培养液也有其独特之处，譬如成分便于控制和标准化。体外培养的细胞直接生活于培养基中，无论何种培养基都应该能满足细胞生长所需的营养与生理的基本要求。 (1)营养成分： 1）氨基酸合成培养液中的氨基酸以12种必需氨基酸为主，这些氨基酸不能由细胞自身合成，必需由培养液供给。在氨基酸的成分中谷氨酰胺的作用特别重要，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，在配制各种培养液中应补加一定量的谷氨酰胺。 2）单糖葡萄糖是最常用和最好的单糖 3）维生素维生素在细胞代谢过程中必不可少，主要可以提供辅酶和辅基。生物素、叶酸、泛酸、核黄素、维生素B12等等 4）其他成分：细胞生长过程中除需钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素外，还需要一些微量元素，如铁、锌、硒、铜、锰、钼等。此外，为优化细胞生存环境，合成培养基中有时还添加些其他成分，包括核酸降解物、抗氧化剂等。 （2）促生长因子及激素 各种激素、生长因子对于促进细胞生长、维持细胞功能、保持细胞的状态具有十分重要的作用。如胰岛素能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸，泌乳素可促进乳腺上皮细胞生长的作用。各种生长调节因子的作用更加明显并具有特异性。 （3）pH 大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围对细胞将产生有害影响。造成培养基pH 波动的主要物质是细胞代谢产生的二氧化碳。解决这一问题可采取两种方法：一是用具有一定缓冲能力的培养基，如使用NaHCO3-CO2缓冲系统，二是采用开放式培养的方法，使细胞代谢产生的二氧化碳及时逸出培养皿。 （4）渗透压 细胞必须生活在等渗的环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定的耐受性。 注：天然培养基主要指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。 合成培养基是人工配制的培养基，给细胞提供一个近似体内生存的环境，又便于控制和标准化的体外生存环境，但合成培养基尚未成为十分完全的培养基。只能维持细胞不死，不能促进细胞增殖生长，使用时还需要添加一定比例的天然培养基（如小牛血清） 早期胚胎的体外培养 体外受精的早期胚胎在体外发育的中，往往会停止在某一阶段不再发育，这种现象称为：发育阻滞。此外体外培养环境下不能及时清除有害物质（如细胞内H2O2），不断积累也会造成细胞中毒，使胚胎阻滞。 发育阻滞是体外培养中的一个主要障碍，通过改进培养液成分和建立体细胞共同培养体系，在不少动物中已克服，使胚胎顺利发育到囊胚阶段。 1.培养条件： （1）能量底物 胚胎培养液一般不含葡糖糖，代之以乳酸和丙酮酸为能量供应物。研究表明早期胚胎对葡萄糖的利用是有限的，而主要以乳酸和丙酮酸为能量代谢的底物，所以，培养液中低剂量葡萄糖的添加是必需的。
2019-2020学年度浙科版高中生物选修3 现代生物科技专题第三节动物的克 隆复习巩固二十一 第1题【单选题】 下列生物技术操作过程不需要用到工具酶的是 A、聚合酶链式反应 B、基因表达载体的构建 C、动物细胞培养 D、动物细胞诱导融合 【答案】： 【解析】： 第2题【单选题】 下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 A、实验顺序应当是①②⑦⑤④③⑥ B、③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆 C、⑦过程获得的细胞均可无限增殖 D、利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选 【答案】： 【解析】： 第3题【单选题】
如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核一般不能来源于( ) A、乳腺细胞 B、卵细胞 C、胃腺细胞 D、囊胚时期的胚胎细胞 【答案】： 【解析】： 第4题【单选题】 下列关于细胞工程的叙述，错误的是( ) A、电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B、去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C、小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D、某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同【答案】： 【解析】： 第5题【单选题】 动物细胞融合技术最重要的用途是 A、克服远源杂交不亲和 B、制备单克隆抗体 C、培育新品种 D、生产杂种细胞 【答案】：
植物细胞工程和动物细胞工程默写 1、细胞工程是在或的操作 2、细胞工程按操作对象分为和 3、植物细胞工程通常采用的技术手段是：和 4、植物组织培养的理论基础是： 5、理论上每一个活细胞都应该具有。因为 6、受精卵的全能性最高，受精卵生殖细胞体细胞 7、为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 8、植物组织培养的外界条件：， 内在原理是： 9、植物组织培养的过程：经过形成 经由过程形成，最后移栽发育成。 10、是指已分化细胞经诱导，失去其特有的结构和功能而变为未分 化细胞的过程。 11、是指由外植体长出来高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成 的排列疏松无规则的组织。 12、植物体细胞杂交的意义（优势）：。 13、去除细胞壁的常用方法：（纤维素酶、果胶酶等） 14、人工诱导原生质体融合方法：物理法：等； 化学法： 15、融合完成的标志是： 16、植物体细胞杂交过程包括：和。 17、植物体细胞杂交的原理是：和 18、人工种子的特点是： 19、作物脱毒(1)材料: (2)脱毒苗: 20、单倍体育种：(1)方法: (2)优 点: ; 21、动物细胞工程常用的技术手段： (基础)、、 、
22、动物细胞培养的原理是：。 23、用处理，一段时 间后获得单个细胞。 24、细胞贴壁： 25、细胞的接触抑制： 26、原代培养：，培养的第1代细胞与传10代以 内的细胞称为原代细胞培养。 将原代细胞从培养瓶中取出，用处理后配制成，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为 27、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为 28、细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代 细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失 去接触抑制，容易传代培养。 29、动物细胞培养的条件：1. 2. 3. （培养 液的Ph为7.2-7.4）4. 30、细胞所需营养：等， 按种类和所需数量严格配制而成的合成培养基。培养基内还需加入、等天然成分 31、动物细胞培养所需的气体环境：95%的空气和5%的二氧化碳的混合气体。氧 气：；二氧化碳： 32、植物组织培养和动物细胞培养的比较：
课题:动物体细胞核移植技术和克隆动物 【学习目标】 1.理解核移植技术和克隆动物概念 2.掌握用动物体细胞核移植技术克隆动物过程 3.了解体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题 【核心素养】 1.科学思维：通过学习动物体细胞核移植技术克隆动物的过程，养成独立思考的习惯，培养自学能力。 2.社会责任：了解核移植技术应用及克隆动物存在问题，关注社会热点议题，并进行理性判断。 【重点】用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 【难点】用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 【学习过程】 任务一阅读课本47页，回答问题 1.什么是动物核移植？ 2.动物核移植技术的原理是什么？ 3.什么是克隆动物？ 4.哺乳动物核移植可分为哪两种类型？难易程度上有何区别，为什么？ 任务二阅读课本48页流程图，回答问题 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？ 3.核移植时受体应选择什么细胞？为什么？ 4.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 5.克隆动物的获得是有性繁殖吗？ 任务三绘制体细胞核移植流程图 任务四归纳体细胞核移植的应用前景和存在问题
【反馈练习】 1.从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状 （ ） A ．难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙 2.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是 （ ） A.乳腺细胞的 B.卵细胞的 C.胃腺细胞的 D.囊胚时期的胚胎细胞的 3.一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（ ） A ．有选择的繁殖某一性别的家畜 B ．繁殖家畜中的优良个体 C ．用于保存物种 D ．改变动物的基因型 4.下列关于哺乳动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是( ) A.体细胞核移植过程中可以用任何细胞作为受体细胞 B.目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体 C.利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜 D.用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞 5.科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵母细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下表所示。据此分析不正确的是( ) A.早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高 B.克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同 C.体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植 D.重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质有关 6.核移植的受体细胞是M Ⅱ期卵母细胞，下列有关说法错误 的是( ) A. M Ⅱ期卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的 物质 B.M Ⅱ期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易 C.可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中 D.M Ⅱ期卵母细胞对克隆动物的遗传特性没有任何影响 7.下列有关体细胞核移植技术的说法，不正确的是( ) A.体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高 B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进 C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题 D.克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议 8.下图是某克隆羊的培育过程模式图，与获得该克隆羊接近的生殖方式和其发育成熟时所分泌的主要性激素分别是( ) A.无性生殖；雄性激素 B.无性生殖；雌性激素 C.有性生殖；雄性激素 D.有性生殖；雌性激素 9.下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。 回答下列问题： (1)图中A 表示正常细胞核，染色体数为2n ，则其性染色体的组成可为__________________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用________________的方法。 (2)经过多次传代后，供体细胞中________________的稳定性会降低。因此，选材时必须关注传代次数。 细胞核供体细胞的类型 妊娠数/受体母羊数 乳腺上皮细胞 1/13 胚胎成纤维细胞 4/10 早期胚胎细胞 14/27
新人教版七年级生物上册动物细胞知识点 人体或动物体的各种细胞虽然形态不同，基本结构却是一样的，都有细胞膜、细胞质和细胞核。因此精心准备了动物细胞知识点，以供大家参考。 知识点 ▲动物细胞的结构 (动物细胞图P48) 细胞膜：控制物质的进出 细胞核：贮存和传递遗传信息 细胞质：液态，可以流动 植物细胞与动物细胞的相同点：都有细胞膜、细胞质、细胞核 植物细胞与动物细胞的不同点：植物细胞有细胞壁和液泡，动物细胞没有。 ▲细胞的生活需要物质和能量 细胞是构成生物体的结构和功能基本单位。 细胞是物质、能量、和信息的统一体。细胞通过分裂产生新细胞。 ▲细胞中的物质 有机物(一般含碳，可烧)：糖类、脂类、蛋白质、核酸，这些都是大分子 无机物(一般不含碳)：水、无机物、氧等，这些都是小分子▲细胞膜控制物质的进出，对物质有选择性，有用物质进入，
废物排出。 课后习题 1.在生物的遗传中具有重要作用的细胞结构是 A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞质 D.细胞核 2.细胞结构中能进行能量转换的是 A.细胞膜 B.细胞核 C.内质网 D.线粒体 3.人体细胞最外面的结构是 A.细胞壁 B.细胞膜 C.叶绿体 D.细胞核 4.临时装片出现了气泡，这主要是哪个操作步骤不符合要求 A.净片 B.滴水 C.盖片 D.染色 5.下面关于细胞有关知识叙述错误的是： A、细胞是生物体结构和功能的基本单位 B、只有植物细胞具有细胞壁 C、烟草中的尼古丁存在于细胞液中 D、遗传信息的载体-------DNA主要存在于细胞核中 6.组织是构成生物体的结构层次之一。下列哪种组织是人和动物体不具有的? A.上皮组织 B.输导组织 C.肌肉组织
2.2 动物细胞工程 一、知识与技能目标 1、掌握动物细胞培养的过程和条件、动物体细胞核移植的过程，并了解它们的前景及存在的问题。 2、知道动物细胞融合的概念、方法及单克隆抗体的制备与应用，并正确理解动物细胞融合的原理。 二、过程与方法目标 1、运用细胞的基础知识，深刻理解这两项技术的原理，并理解这些技术的新进展。 2、结合免疫原理、融合原理以及动物细胞培养，全面理解单克隆抗体的制备过程，利用动物细胞培养技术对杂交瘤细胞进行体外培养和体内培养可生产出专一性强，灵敏性高的抗体。 三、情感与价值观目标 1、收集相关报道，在同学中开展应用前景及存在问题的讨论，来加强对科技的认识，形成正确的价值观念。 2、通过对动物细胞培养技术发展史及单克隆抗体具体应用的学习，体验现代生物科技日新月异的发展及与现代医学的联系，坚定自己投入到自然科学发展中的信心。 四、教学过程 1．动物细胞培养 1）动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，将它分散成,然后放在中，让这些细胞。 2）动物细胞培养的过程可表示为_____ ________________________________________________ __ ___________________________ 。其中原代培养是指，传代培养是指。
3）动物细胞培养所需的条件有 a．无菌、无毒的环境：培养液应进行_____________处理。 b．营养：合成培养基成分有糖、_____________、促生长因子、无机盐、微量元素，通常需加入_____________、血浆等。 c．温度：适宜温度为_________±0.5℃；pH为_________～7．4。 d．气体环境：_____________95％，CO2 5％。 2．动物细胞核移植技术和克隆动物 (1)动物核移植 将动物的一个细胞的细胞核移人一个去核的_____________细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终成为动物个体。 (2)种类___________细胞核移植——易 ___________细胞核移植——难 (3)过程 卵母细胞必须选用_________细胞，原因是该时期__________ _________________。 （4）、动物核移植是将动物的一个细胞的移入一个卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的。这个新的最终发育为动物个体。核移植移到的动物称。 （5）、核移植动物的应用前景有。3.动物细胞融合（又叫：细胞杂交） 1）概念：指或动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。 2）结果：融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为细胞。3）动物细胞融合原理：细胞膜的。 4）诱导动物细胞融合的方法：物理方法、化学方法、生物方法。 5）过程：
第三节动物的克隆 1. 幼龄动物组织用胰蛋白酶处理 ――――――――→细胞悬浮液―→原代培养―→传代培养。 2．细胞株与细胞系 (1)细胞系：原代培养细胞首次传代时就成为细胞系。分为有限细胞系和连续细胞系两类。 (2)细胞株：从原代培养物中或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称细胞株。也分为有限细胞株与连续细胞株。 3．克隆培养法 把一个细胞培养为一个新的细胞群体的技术叫克隆培养法。这样培养获得的细胞群叫纯系。 4.培养 条件 ?? ? ??无菌、无毒的环境 营养需要：适宜的培养基、添加血清、激素胰岛素、 CO2气体环境、调节pH及滋养细胞等 条件 1．把动物组织块分散成单个细胞所用的胰蛋白酶能否换成胃蛋白酶？ 【提示】不能。因为胃蛋白酶的最适pH呈酸性，环境不适合。 2．为什么细胞系或细胞株中有些细胞可无限传代？这些细胞为癌细胞吗？ 【提示】这些细胞往往有异倍体核型，使其能够无限传代。能够无限传代的细胞有的仍保留接触抑制现象，一般不是癌细胞。
?????? ????B 淋巴细胞能产生抗体骨髓瘤细胞能无限增殖――――――→用灭活的病毒诱导细胞融合并筛选 多种杂种细胞――→细胞培养筛选 能产生专一抗体的且可无限增殖的细胞群。 2．单克隆抗体的获得????? 体外培养：从细胞培养液中提取抗体体内培养：从动物腹水中提取抗体 3．应用 在疾病诊断、治疗与预防方面与常规抗体相比具有特异性强、灵敏度高的特点。单抗可作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。 3．单克隆抗体生产中两次筛选的目的有何不同？ 【提示】 第一次筛选为了选出杂交瘤细胞，第二次筛选是从杂交瘤细胞中选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞。 1.过程 2．动物克隆成功证明了 (1)高度分化细胞经一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能。 (2)在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控细胞核(包括异源细胞核)发育的作用。 3．克隆的意义 (1)为遗传病的治疗、优良品种的培育等提供了重要途径。 (2)对物种的进化、濒危动物的保存及对转基因动物的扩群有重要意义。 (3)丰富了人们的物质生活。 (4)缩短育种年限，提高生产效率。 1．细胞株是具有特殊性质(如病毒敏感性、生化特性)的细胞系。(√) 2．有限细胞系易于克隆。(×) 【提示】 有限细胞系不易克隆。相反，无限细胞系易于克隆。 3．动物细胞杂交可利用物理、化学方法进行介导。(√) 4．制备单克隆抗体时使用的免疫细胞为T 淋巴细胞。(×) 【提示】 应为B 淋巴细胞。
学习好资料欢迎下载 2.2动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和核移植技术（第二课时） 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 教学目标： 知识目标：简述通过体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用 能力目标：运用动物细胞的基础知识，分析核移植技术的理论基础，搜集有关动物细胞核移植研 究进展和应用方面的资料，进行整理、分析和交流 情感目标：讨论动物细胞核移植的社会意义，关注动物细胞核移植的发展和应用前景。 旧课复习： 我们已经学习了植物的组织培养，植物体细胞杂交，知道植物细胞可以培养成一棵植株，这说明植物细胞具有全能性，而动物的体细胞离开了母体，却不能培养成一只动物个体难道是动物细胞 没有全能性吗？不是。而是动物细胞高度分化，全能性比较低。 导入新课： 假如生活中我们碰到这样的问题，比如：（展示幻灯片，问题的提出） 1997年，美国威斯康星洲的一个奶牛场有一头高产奶牛叫“卢新达”，年产奶量为30.8吨,而我国奶牛年平均产奶量仅为3~4吨.用什么方法能得到更多的“卢新达”呢？学生回答克隆，其实克隆的研究从1938年就开始了。（幻灯片一一克隆的历史，多利之后还有许多的动物被克隆，今天，我们要先从多利讲起） 听说过克隆羊多利吧，可以请一位同学来说说来多利的诞生过程。（学生上台讲述多利的培育过程）我们一起来看看多利的培育过程，请问多利像谁呢？母羊A，因为多利的核基因全部来自母 羊A。100%象吗？，不，因为还有来自母羊B的细胞质基因。这里哪个细胞是供体细胞呢，乳 腺细胞，它是高度分化的体细胞。 学习好资料欢迎下载-------------------- ----- ----
A母绵羊E母绵羊卵细胞乳腺细胞多莉羊细胞核细胞质 的融合后的卵细胞细胞核移植培卵裂育胚胎移植早期胚胎细胞核过移植母绵羊子宫C 程分娩妊娠 多莉羊 来看课本中对克隆的定义：请大家阅读，并划线。1、概念教师板书：移入一个已经去掉细胞 核的卵克隆的定义：动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,.这个新的胚胎最终发育为动物个 体,使其重组并发育成一个新胚胎，母细胞中. 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物体细胞核移植和胚胎细胞核移植（根据提供细胞核的 供体不同而区分）分类：多利羊之所以轰动全世界，并非因为它是首只克隆动物，你知道为什么它能一夜成名（首先，它选用的细胞是高度分化的体细胞，其次，它是哺乳动物，呢？请一位同学回答：胚胎时期的细胞意味着人可以进行体细胞核移植。所以它的诞生标志着体细胞核移植成 功。所进行细胞核移植比体细胞核移植更容易成功，这是为什么呢？原来胚胎细胞分化程度低，70世纪，以全能性较高，而体细胞分化程度高所以全能性也就比较低了。其实我国早在20年代, 就在童第周教授的带领下，克隆岀了鱼，但是，多利一夜成名，中国的克隆鱼却默默年，这是为什么呢？（因为我们的闭塞，导致中国科学的进展不为世界所知。所以20无闻要与世界进行交 流，同享科技进步成果）oo不行，本身自己那么刚才那只卢新达奶牛能用胚胎细胞克隆吗？（请一位同学回答）所以那么已经加入了另一只公牛的基因。已经过了胚胎期，如果用它的下一代的 胚胎细胞，用体细胞核移植技术。因此，说体细胞核移植技术比较常用于优秀动物个体的克隆。
2019-2020年生物选修3 现代生物科技专题第三节动物的克隆浙科版课后练 习第七十三篇 第1题【单选题】 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，所用的B淋巴细胞是( )。 A、来自骨髓的B淋巴细胞 B、来自脾脏的能产生抗体的B淋巴细胞 C、来自胸腺的B淋巴细胞 D、来自脾脏经过筛选的，能产生单一抗体的B淋巴细胞 【答案】： 【解析】： 第2题【单选题】 下列技术或方法与原理相符的是( ) A、人参细胞培养和杂交瘤细胞的培养﹣﹣细胞全能性 B、植物组织培养和制备单克隆抗体﹣﹣细胞增殖 C、纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁﹣﹣酶的高效性 D、原生质体融合和动物细胞融合﹣﹣细胞膜的流动性 【答案】： 【解析】：
第3题【单选题】 用单克隆抗体制成“生物导弹”，用于癌症治疗．“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是“杀伤性弹头”，分析下列有关描述，其中不正确的是( ) A、“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成 B、“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成 C、“生物导弹”疗效高，但毒副作用大 D、“生物导弹”的制备应用了细胞工程[学 【答案】： 【解析】： 第4题【单选题】 下图表示抗人体胃癌细胞的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述错误的是( ) A、图中甲可能是人体胃癌细胞的特异性抗原
B、用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 C、丙、丁分别表示杂交瘤细胞和能分泌抗胃癌抗体的杂交瘤细胞 D、丁的大规模培养可以在培养基中进行，也可以在小鼠腹腔内进行 【答案】： 【解析】： 第5题【单选题】 关于现代生物技术应用的叙述，错误的是( ) A、蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B、体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C、植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D、动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 【答案】： 【解析】： 第6题【单选题】
动物体细胞核移植技术和克隆动物 教学目标： 1．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 2．培养理解分析、信息获取、归纳总结和交流合作能力。 3．体验科学发现、技术发明和社会发展之间的关系。 教学重点： 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 教学难点： 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 教学方法：讲解讲述、阅读指导、讨论引导、归纳总结等。 课时安排：1课时 教学过程： 【导入】 《西游记》中,孙悟空拔出身体上的毫毛,用嘴一吹,每根毫毛都能变成一个和自己一模一样的猴子来。这个克隆猴的古代神话如今正逐渐变成现实：2000年，科学家第一次成功地用猴的胚胎细胞克隆出了猴。2007年，又成功地用一只成年猴的体细胞克隆出了猴胚胎，离发育成猴只有一步之遥。你还知道哪些克隆动物？大家知道，将离体的植物组织或细胞在适当的条件下培养，可获得完整植株，我们称之为植物组织培养。克隆动物能采用类似的方法吗？（学生阅读P47第三段后回答）由此导入课题——动物体细胞核移植技术和克隆动物（红字作为板书，下同）。 【正课】 投影幻灯片1（什么是动物核移植和克隆动物），并讲述：用于核移植的核供体细胞既可以用分化程度较低的动物胚胎细胞，也可以用高度分化的成年动物的体细胞。胚胎细胞核移植和体细胞核移植的原理、方法基本相同，只是体细胞分化程度高，恢复其全能性比胚胎细胞困难得多。如何进行体细胞核移植呢？ （一）体细胞核移植技术过程 投影幻灯片2（体细胞核移植技术过程），以克隆高产奶牛为例，边讲解大致过程，边板书如下：
去核、移核、融合 取体细胞体外培养传至10代 核质重组细胞构建重组胚胎 取卵母细胞体外培养至MⅡ期 胚胎移植（至代孕母体假孕子宫）生出克隆动物 “听完了过程介绍，你有没有什么问题要问？”如果有，从中提炼出有价值的若干问题加以讨论；如果一时没有，投影幻灯片3（讨论题），组织学生讨论： 1.为什么通过核移植的方法能够克隆出完整的动物个体？ 2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞。这是为什么？ 3.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么要对卵母细胞去核？卵母细胞起什么作用？（为什么选择卵母细胞作为核移植的受体细胞?） 4.你认为应用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 5. 和动物的自然繁殖相比，用体细胞核移植技术克隆动物有什么特点？ 过渡：如果你掌握了这套体细胞核移植技术，你想应用它来解决什么问题？ （二）体细胞核移植技术的应用前景 如果学生提出了一些应用体细胞核移植技术的合理设想，就据此进行小结，并对其在构建生物反应器和器官移植两方面的应用借助课件加以适当点拨；如果有学生提出克隆人引起课堂纷争，那就告诉他们以后会有专题涉及，本节暂不讨论；如果学生一时提不出设想，那就让他们阅读P49两段正文和P50第1段，通过下列问题进行引导，再做总结。 【问题1】在畜牧生产中，怎样保持良种家畜产奶量大、生长快、瘦肉多等优良性状？濒危动物自然繁殖率低，怎样增加这些动物的存活数量？能无限制地推广你的解决办法吗？ 【总结1】利用体细胞核移植技术克隆动物（生殖性克隆），可以—— ●促进优良畜群繁育 ●扩大濒危动物种群
第三节动物的克隆 1．简述动物细胞、组织培养。(重点) 2.描述细胞系及细胞株的含义。 3．简述动物的克隆培养法。 4.掌握动物细胞核移植的概念和核移植的程序。(难点) 一、动物细胞的培养和克隆形成 1．动物细胞培养 (1)将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或胰酶消化，使其分散成单个的细胞，然后，在人工控制的培养条件下，使这些细胞得以生存并保持生长、分裂乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。 (2)动物细胞培养的流程：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入特殊培养液中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2．动物组织培养 动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。由于细胞的运动、变化和培养物的组织成分发生变化，长期的培养结果最终成了简单的细胞培养。综合细胞培养和组织培养的含义和规律，两者在一定程度上可以看作是同义语，因此可将它们统称为组织培养(组培)。 3．细胞系与细胞株 细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系。 1．动物细胞培养中，出现遗传物质改变的细胞被称为什么？ 提示：细胞系。 4．克隆培养法 (1)概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。 (2)细胞克隆的最基本要求：必须肯定所建成的克隆来源于单个细胞。 (3)提高细胞克隆形成率的措施：选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生长、激素刺激、使用CO2培养箱、调节pH等。 二、细胞的融合技术及其应用 1．细胞融合与细胞杂交 (1)细胞融合
细胞工程 考点一植物细胞工程 1.细胞工程 (1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。 (2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。 2.植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。 3.植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程： 4.植物体细胞杂交技术 (1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 (3)过程 (4)意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。 5.植物细胞工程的实际应用 (1)植物繁殖的新途径 ①微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 ②作物脱毒技术：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。 ③人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 (2)作物新品种的培育 ①单倍体育种 a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。 b.流程：花药单倍体幼苗――――――――→ 秋水仙素诱导 染色体数目加倍 纯合子。 c.优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。 ②突变体的利用：筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。 (3)细胞产物的工厂化生产
1.植物组织培养的关键 (1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。 (2)培养基状态：固体培养基(需再分化生根培养基及生芽培养基) (3)体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。 (4)光照的应用 脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。 2.杂种植物遗传物质的变化 (1)遗传特性：杂种植株中含有两种植物的遗传物质，故杂种植株具备两种植物的遗传特性。 (2)染色体组数 ①染色体组数＝两种植物体细胞内染色体组数之和。 ②植物体细胞杂交形成的杂种植株，有几个染色体组就称为几倍体。 考点二动物细胞工程 1.动物细胞培养 (1)地位：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。 (2)培养过程 (3)培养条件 ①无菌、无毒环境 ?? ? ?? 培养液和培养用具进行无菌处理 培养过程加抗生素 定期更换培养液，清除代谢产物 ②营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。 ③适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃；适宜的pH：7.2～7.4。 ④气体环境 ?? ? ??95%的空气：其中O2为细胞代谢必需 5%的CO2：维持培养液的pH 2.动物体细胞克隆技术(核移植技术) (1)原理：动物细胞核具有全能性。 (2)核移植分类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 (3)核移植过程(以克隆高产奶牛为例) (4)应用：①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。②保护濒危物种。③生产医用蛋白。④作为异种移植的供体。⑤用于组织器官的移植。 3.动物细胞融合和单克隆抗体的制备 (1)动物细胞融合 ①原理：细胞膜的流动性。 ②融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。 ③意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。 (2)单克隆抗体 ①制备过程