第一章蛋白质
1 [提示]
思考题
1．简述常用的蛋白质分离纯化方法
2．简述谷胱甘肽的结构特点和功能？
2 [提示]
名词解释：
1．蛋白质的一级结构
2．蛋白质的三级结构
3．结构域
4．模体
3 [提示]
英汉互译
1．氨基酸
2．模体（模序）
3．结构域
4．一级结构
5．蛋白质
6．甘氨酸
7．多肽
8．丙氨酸
9．denaturation
10．allosteric effect
11．Tyrosine
12．globulin
13．tertiary structure
14．threonine
15．peptide bond
16．conformation
17．β-pleated sheet
18．subunit
19．prion
20．peptide unit
4 [提示]
选择题
1．某一溶液中蛋白质的百分含量为45％，此溶液的蛋白质氮的百分浓度为：A．8.3%
B．9.8%
C．6.7%
D．5.4%
E．7.2％
2．下列含有两个羧基的氨基酸是：
A．组氨酸
B．赖氨酸
C．甘氨酸
D．天冬氨酸
E．色氨酸
3．下列哪一种氨基酸是亚氨基酸：
A．脯氨酸
B．焦谷氨酸
C．亮氨酸
D．丝氨酸
E．酪氨酸
4．维持蛋白质一级结构的主要化学键是：
A．离子键
B．疏水键
C．肽键
D．氢键
E．二硫键
5．关于肽键特点的错误叙述是：
A．肽键中的C-N键较C-N单键短
B．肽键中的C-N键有部分双键性质
C．肽键的羰基氧和亚氨氢为反式构型
D．与C-N相连的六个原子处于同一平面上
E．肽键的旋转性，使蛋白质形成各种立体构象
6．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：
A．天然蛋白质分子均有这种结构
B．有三级结构的多肽链都具有生物学活性
C．三级结构的稳定性主要是次级键维系
D．亲水基团聚集在三级结构的表面
E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基
7．具有四级结构的蛋白质特征是：
A．依赖肽键维系四级结构的稳定性
B．在三级结构的基础上，由二硫键将各多肽链进一步折叠、盘曲形成C．每条多肽链都具有独立的生物学活性
D．分子中必定含有辅基
E．由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成
8．含有Ala，Asp，Lys，Cys的混合液，其pI依次分别为6.0，2.77，9.74，5.07，在pH9环境中电泳分离这四种氨基酸，自正极开始，电泳区带的顺序是：
A．Ala，Cys，Lys，Asp
B．Asp，Cys，Ala，Lys
C．Lys，Ala，Cys，Asp
D．Cys，Lys，Ala，Asp
E．Asp，Ala，Lys，Cys
9．变性蛋白质的主要特点是：
A．粘度下降
B．溶解度增加
C．不易被蛋白酶水解
D．生物学活性丧失
E．容易被盐析出现沉淀
10．蛋白质分子在280nm处的吸收峰主要是由哪种氨基酸引起的
A．谷氨酸
B．色氨酸
C．苯丙氨酸
D．组氨酸
E．赖氨酸
第2章核酸的结构与功能
1 [提示]
思考题
1．细胞内有哪几类主要的RNA？其主要功能。
2．tRNA的结构特点。
3．B型DNA的结构要点。
2 [提示]
名词解释
1．Tm值
2．DNA变性
3．核酸分子杂交
4．核酶
3 [提示]
英汉互译
1．超螺旋
2．转运RNA
3．核酶
4．核蛋白体
5．茎环
6．嘌呤
7．嘧啶
8．minor groove
9．heterogeneous nuclear RNA
10．major groove
11．melting temperature,Tm
12．hybridization
13．annealing
14．nucleosome
15．hyperchromic effect
4 [提示]
选择题
1．下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA：
A．尿嘧啶
B．腺嘌呤
C．胞嘧啶
D．鸟嘌呤
E．胸腺嘧啶
2．DNA变性是指：
A．分子中磷酸二酯键断裂
B．多核苷酸链解聚
C．DNA分子由超螺旋→双螺旋
D．互补碱基之间氢键断裂
E．DNA分子中碱基丢失
3．某DNA分子中腺嘌呤的含量为20%，则胞嘧啶的含量应为：A．20%
B．30%
C．40%
D．60%
E．80%
4．下列关于DNA结构的叙述，哪项是错误的
A．碱基配对发生在嘌呤碱和嘧啶碱之间
B．鸟嘌呤和胞嘧啶形成3个氢键
C．DNA两条多核苷酸链方向相反
D．二级结构为双螺旋
E．腺嘌呤与胸腺嘧啶之间形成3个氢键
5．核小体串珠状结构的珠状核心蛋白质是
A．H2A、H2B、H3、H4各一分子
B．H2A、H2B、H3、H4各二分子
C．H1组蛋白与H2A、H2B、H3、H4各二分子
D．非组蛋白
E．H2A、H2B、H3、H4各四分子
6．有关RNA的描写哪项是错误的：
A．mRNA分子中含有遗传密码
B．tRNA是分子量最小的一种RNA
C．胞浆中只有mRNA
D．mRNA、tRNA、rRNA是最常见的三种RNA
E．组成核糖体的主要是rRNA
7．DNA的Tm值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致：A．G+A
B．C+G
C．A+T
D．C+T
E．A+C
8．绝大多数真核生物mRNA5′ 端有
A．PolyA
B．终止密码
C．帽子结构
D．启动子
E．S-D序列
9．hnRNA是下列哪种RNA的前体？
A．tRNA
B．rRNA
C．mRNA
D．snRNA
E．snoRNA
10．核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近
A．280nm
B．260nm
C．200nm
D．340nm
E．220nm
第3章酶
1 [提示]
思考题
1．何谓酶的化学修饰？特点有哪些？2．酶的变构调节特点及特点。
3．比较三种可逆性抑制作用的特点。
2 [提示]
名词解释
1．化学修饰
2．K m
3．变构调节
4．酶的活性中心
5．同工酶
3 [提示]
英汉互译
1．酶
2．同工酶
3．底物
4．乳酸脱氢酶
5．全酶
6．辅酶
7．辅助因子
8．可逆抑制剂
9．竞争性抑制
10．变构作用
11．活性中心
12．必需基团
13．covalent modification 14．zymogen
15．allosteric enzyme 16．irreversible inhibition 17．optimum pH 18．metalloenzyme 19．conjugated enzyme 20．specificity of enzyme 21．activation energy
22．activator
23．Michaelis constant
24．kinetics of enzyme-catalyzed reaction
4 [提示]
选择题
1．酶的活性中心是指酶分子：
A．上的几个必需基团
B．与底物结合的部位
C．结合底物并发挥催化作用的部位
D．中心部位的一种特殊结构
E．催化底物变成产物的部位
2．米－曼氏方程中的K m为：
A．（K1+K2）/K3
B．（K2+K3）/K1
C．K2/K1
D．K3 [Et]
E．K2/K3
3．当酶促反应 v=80%Vmax时，[S] 为Km 的倍数是：A．4
B．5
C．10
D．40
E．80
4．酶的竞争性抑制剂的动力学特点是
A．V max和K m都不变
B．V max不变，K m↓
C．V max↑，K m不变
D．V max↓，K m不变
E．V max不变，K m↑
5．酶的磷酸化修饰主要发生在哪种氨基酸上？A．Thr
B．Cys
C．Glu
D．Trp
E．Lys
6．有机磷农药结合酶活性中心的基团是：
A．氨基
C．羧基
D．咪唑基
E．巯基
7．酶原激活的实质是：
A．酶原分子的某些基团被修饰
B．酶蛋白的变构效应
C．酶的活性中心形成或暴露的过程
D．酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变
E．激活剂与酶结合使酶激活
8．同工酶的特点是：
A．催化同一底物起不同反应的酶的总称
B．催化的反应及分子组成相同，但辅酶不同的一组酶
C．催化作用相同，但分子结构和理化性质不同的一组酶
D．多酶体系中酶组分的统称
E．催化作用、分子组成及理化性质均相同，但组织分布不同的一组酶
9．别构效应剂与酶的哪一部位结合：
A．活性中心以外的调节部位
B．酶的苏氨酸残基
C．酶活性中心的底物结合部位
D．任何部位
E．辅助因子的结合部位
10．唾液淀粉酶经透析后，水解淀粉能力显著降低，其主要原因是：A．酶蛋白变性
B．失去Cl-
C．失去辅酶
D．酶含量减少
E．失去Mg2+
第4章糖代谢
1 [提示]
思考题
1．简述磷酸戊糖途径的生理意义。
2．比较糖的有氧氧化与无氧酵解的特点。
3．简述6-磷酸葡萄糖的代谢途径及其在糖代谢中的作用。
2 [提示]
名词解释
2．糖异生
3．三羧酸循环
4．乳酸循环
3 [提示]
英汉互译
1．糖酵解
2．糖异生
3．磷酸戊糖途径
4．血糖
5．糖原磷酸化酶
6．糖原合酶
7．三羧酸循环
8．底物水平磷酸化
9．胰岛素
10．胰高血糖素
11．pyravate dehydrogenase complex
12．substrate cycle
13．Glucose-6-phosphate
14．citrate synthase
15．branching enzyme
4 [提示]
选择题
1．哺乳动物肝中，2分子乳酸转变成葡萄糖需要多少分子ATP? A．2
B．3
C．4
D．5
E．6
2．目前一般认为哪种酶是三羧酸循环速度的主要调节点? A．柠檬酸合酶
B．顺乌头酸酶
C．异柠檬酸脱氢酶
D．苹果酸脱氢酶
E．琥珀酸脱氢酶
3．丙酮酸氧化分解时，净生成ATP分子数是：
A．10ATP
B．15ATP
D．21ATP
E．24ATP
4．下述哪个产能过程不在线粒体?
A．三羧酸循环
B．脂肪酸β-氧化
C．电子传递
D．糖酵解
E．氧化磷酸化
5．下述有关糖原代谢叙述中，哪个是错误的?
A．cAMP激活的蛋白激酶促进糖原合成
B．磷酸化酶激酶由磷酸化作用被活化
C．磷酸化酶b由磷酸化作用被活化
D．肾上腺素和胰高血糖素活化腺苷环化酶从而使cAMP水平升高
E．磷蛋白磷酸酶抑制剂的活性受蛋白激酶A调控
6．下述哪步反应通过底物水平磷酸化方式生成一分子高能磷酸化合物? A．柠檬酸→α-酮戊二酸
B．α-酮戊二酸→琥珀酸
C．琥珀酸→延胡索酸
D．延胡索酸→苹果酸
E．苹果酸→草酰乙酸
7．在草酰乙酸+NTP→NDP+磷酸烯醇式丙酮酸+CO2反应中，NTP代表: A．ATP
B．CTP
C．GTP
D．TTP
E．UTP
8．磷酸戊糖途径的限速酶是:
A．6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
B．内酯酶
C．6-磷酸葡萄糖脱氢酶
D．己糖激酶
E．转酮醇酶
9．糖原的1个葡萄糖基经糖酵解可生成几个ATP?
A．1
B．2
C．3
D．4
E．5
10．6-磷酸果糖激酶-1的最强变构激活剂是
A．AMP
B．ADP
C．2,6-双磷酸果糖
D．ATP
E．1,6-双磷酸果糖
第5章脂类代谢
1 [提示]
思考题
1．血浆脂蛋白的分类、来源及主要功能。
2．1mol甘油彻底氧化分解产生多少mol ATP？请写出计算依据。3．乙酰CoA在脂质代谢中的作用。
2 [提示]
名词解释
1．必需脂肪酸
2．脂肪动员
3．激素敏感性脂肪酶
4．酮体
3 [提示]
英汉互译
1．Free fatty acid
2．酮体
3．HMG CoA
4．Citrate pyruvate cycle
5．酰基载体蛋白
6．Phospholipase
7．胆固醇
8．LCAT
9．脂蛋白
10．apo
11．CM
12．VLDL
13．低密度脂蛋白
14．高密度脂蛋白
15．甘油三酯
16．脂蛋白脂肪酶
4 [提示]
选择题
1．不能使甘油磷酸化的组织是
A．肝
B．脂肪组织
C．肾
D．小肠
E．心肌
2． 1摩尔软脂酸在体内彻底氧化分解净生成多少摩尔ATP？A．106
B．108
C．38
D．36
E．12
3．参与内源性甘油三酯转运的血浆脂蛋白是
A．HDL
B．IDL
C．LDL
D．VLDL
E．CM
4．脂肪酸在血中的运输形式是与哪种物质结合？
A．载脂蛋白
B．球蛋白
C．清蛋白
D．磷脂
E．血红蛋白
5．酮体
A．是不能为机体利用的代谢产物
B．是甘油在肝脏代谢的特有产物
C．只能在肝脏利用
D．在肝脏由乙酰CoA合成
E．在血中与清蛋白结合运输
6．乙酰CoA羧化酶含有的辅助因子是
A．SHCoA
B．FH4
C．FAD
D．TPP
E．生物素
7．在磷脂酰胆碱合成过程中不需要
A．甘油二酯
B．丝氨酸
C．ATP和CTP
D．NADPH＋H＋
E．S－腺苷蛋氨酸
8．在细胞内使胆固醇酯化的酶是
A．脂蛋白脂肪酶
B．卵磷脂胆固醇脂酰转移酶
C．脂酰CoA胆固醇脂酰转移酶
D．乙酰基转移酶
E．肝脂肪酶
9．催化磷脂水解生成溶血磷脂的酶是
A．磷脂酶A
B．磷脂酶B1
C．磷脂酶B2
D．磷脂酶C
E．磷脂酶D
10．胆固醇是下列哪种物质的前体
A．维生素A
B．维生素D
C．维生素E
D．维生素K
E．辅酶A
第6章生物氧化
1 [提示]
简答题
1．NADH呼吸链和琥珀酸呼吸链的电子传递顺序；如果加入异戊巴比妥结果将如何？2．简述胞液中的还原当量（2H）的两种穿梭途径？
2 [提示]
英汉互译
1．Electron transfer chain
2．Cytochrome
3．Oxidative phosphorylation
4．呼吸链
5．生物氧化
6．底物水平磷酸化
3 [提示]
名词解释
1．呼吸链
2．氧化磷酸化
3．P/O比值
4. 底物水平磷酸化
4 [提示]
选择题
1．细胞色素在电子传递链中的排列顺序是A．Cyt b→c1→c→aa3→O2
B．Cyt b→c→c1→aa3→O2
C．Cyt b→c1→aa3→c→O2
D．Cyt c1→c→b→aa3→O2
E．Cyt c →c1→b→aa3→O2
2．决定氧化磷酸化速率的最主要因素是：A．ADP浓度
B．AMP浓度
C．FMN
D．FAD
E．NADP+
3．苹果酸穿梭系统需有下列哪种氨基酸参与？A．Gln
B．Asp
C．Ala
D．Lys
E．Val
4．肌肉中能量的主要贮存形式是：
A．ATP
B．GTP
C．磷酸肌酸
D．CTP
E．UTP
5．关于电子传递链的叙述，下列哪项是正确的？
A．抗坏血酸通过电子传递链氧化时P/O比值为2
B．体内最普遍的电子传递链为线粒体NADH电子传递链
C．与氧化磷酸化偶联，电子传递链就会中断
D．氧化磷酸化可在胞液中进行
E．电子传递链中电子由高电势流向低电势位
6．线粒体内α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是：
A．FAD
B．FMN
C．NAD+
D．NADP+
E．HSCoA
7．胞液中的NADH经苹果酸穿梭进入线粒体进行氧化磷酸化，其P/O值为：A．1.5
B．2.5
C．3
D．4
E．0
8．氰化物引起的中毒是由于阻断了什么部位的电子传递？
A．Cyt aa3→O2
B．Cyt b→c1
C．Cyt c1→c
D．Cyt c→aa3
E．CoQ→Cyt b
第7章氨基酸代谢
1 [提示]
思考题
1．简述谷氨酸在体内转变成尿素、CO2与水的主要代谢途径。
2．概述体内氨的来源和去路。
3．鸟氨酸循环。
2 [提示]
名词解释
1．腐败作用
2．生糖兼生酮氨基酸
3．必需氨基酸
4．一碳单位
5．联合脱氨基作用
3 [提示]
英汉互译
1．PAPS
2．ALT
3．AST
4．Nitrogen balance 5．Putrefaction
6．丙氨酸-葡萄糖循环
7．转氨基作用
8. 一碳单位
9．SAM
10．鸟氨酸循环
4 [提示]
选择题
1．下列氨基酸中属于必需氨基酸的是A．甘氨酸
B．蛋氨酸
C．酪氨酸
D．精氨酸
E．组氨酸
2．生物体内氨基酸脱氨基的主要方式是A．转氨基作用
B．还原性脱氨基作用
C．联合脱氨基作用
D．直接脱氨基作用
E．氧化脱氨基作用
3．S-腺苷甲硫氨酸的主要作用是
A．生成腺嘌呤核苷
B．合成四氢叶酸
C．补充甲硫氨酸
D．合成同型半胱氨酸
E．提供甲基
4．体内转运一碳单位的载体是
A．维生素B12
B．叶酸
C．四氢叶酸
D．生物素
E．S-腺苷甲硫氨酸（S-腺苷蛋氨酸）
5．不能由酪氨酸合成的化合物是
A．甲状腺素
B．肾上腺素
C．黑色素
D．多巴胺
E．苯丙氨酸
6．鸟氨酸循环中，合成尿素的第二个氨基来源于A．游离氨
B．谷氨酰胺
C．氨基甲酰磷酸
D．天冬氨酸
E．天冬酰胺
7．体内活性硫酸根是指
A．GABA
B．GSH
C．GSSG
D．SAM
E．PAPS
8．哪一种物质是体内氨的储存及运输形式
A．天冬酰胺
B．谷胱甘肽
C．谷氨酰胺
D．酪氨酸
E．谷氨酸
9．转氨酶的辅酶所含的维生素是
A．维生素B1
B．维生素B6
C．维生素B12
D．维生素D
E．维生素C
10．体内氨的主要去路是
A．合成嘌呤
B．合成谷氨酰胺
C．扩散入血
D．合成氨基酸
E．合成尿素
第8章核苷酸代谢
1 [提示]
思考题：
1．简述PRPP在核苷酸合成中的重要作用。
2．比较氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ、Ⅱ的异同。
3．比较嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸从头合成的异同。
2 [提示]
名词解释
1．从头合成途径
2．补救合成途径
3 [提示]
英汉互译：
1．从头合成途径
2．补救合成途径
3．IMP
4．PRPP
5．6MP
6．5-FU
7．uric acid
8．Allopurinol
4 [提示]
选择题
1．嘌呤环上第7位氮(N-7)来源于：
A．天冬氨酸
B．天冬酰胺
C．谷氨酰胺
D．谷氨酸
E．甘氨酸
2．嘌呤核苷酸从头合成的过程中，首先合成的是：A．AMP
B．GMP
D．IMP
E．OMP
3．从头合成IMP与UMP的共同前体是：
A．谷氨酸
B．天冬酰胺
C．N5，N10-甲炔四氢叶酸
D．NAD+
E．磷酸核糖焦磷酸
4．从IMP合成AMP需要：
A．天冬氨酸
B．天冬酰胺
C．ATP
D．NAD+
E．Gln
5．从IMP合成GMP需要：
A．天冬氨酸
B．天冬酰胺
C．ATP
D．NAD+
E．谷氨酰胺
6．嘌呤核苷酸从头合成时GMP的C-2上的氨基来自：
A．谷氨酰胺
B．天冬酰胺
C．天冬氨酸
D．甘氨酸
E．丙氨酸
7．下列嘌呤核苷酸之间的转变中，哪一个是不能直接进行的：A．GMP→IMP
B．IMP→XMP
C．AMP→IMP
D．XMP→GMP
E．AMP→GMP
8．体内脱氧核苷酸是由下列哪种物质直接还原而成：
A．三磷酸核苷
B．二磷酸核苷
C．一磷酸核苷
D．核糖核苷
9．人体内嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是：
A．尿素
B．尿酸
C．肌酐
D．尿苷酸
E．肌酸
10．dTMP的生成是：
A．UMP→TMP→dTMP
B．UDP→TDP→dTMP
C．UTP→TTP→dTMP
D．UDP→dUDP→dUMP→dTMP
E．UTP→dUDP→dUMP→dTMP
第9章DNA的生物合成（复制）
1 [提示]
简答题
1．参与DNA复制的主要酶类有哪些?各有何功能？
2．比较真核细胞与原核细胞DNA复制的异同点。
3．何为分子生物学中心法则?
4．试比较DNA复制，DNA损伤修复及逆转录过程中DNA合成的异同。
2 [提示]
名词解释
1．半保留复制
2．逆转录
3．岡崎片断
4．端粒
5．端粒酶
6．cDNA
3 [提示]
英汉互译
1．基因
2．中心法则
3．端粒
4．点突变
生物化学各章节习题集锦 －－第一章蛋白质化学测试题－－ 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g，此样品约含蛋白质多少？ A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．00g E．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是： A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸 D．色氨酸 E．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是： A．盐键 B．疏水键 C．肽键D．氢键 E．二硫键 4．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是： A．天然蛋白质分子均有的这种结构B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系D．亲水基团聚集在三级结构的表面biooo E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是： A．分子中必定含有辅基B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成C．每条多肽链都具有独立的生物学活性D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6．蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定： A．溶液pH值大于pIB．溶液pH值小于pIC．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于：biooo A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是： A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解 D．生物学活性丧失 E．容易被盐析出现沉淀 9．若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时，该溶液的pH值应为： A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？ A．半胱氨酸 B．蛋氨酸 C．胱氨酸 D．丝氨酸 E．瓜氨酸 二、多项选择题 （在备选答案中有二个或二个以上是正确的，错选或未选全的均不给分） 1．含硫氨基酸包括： A．蛋氨酸 B．苏氨酸 C．组氨酸D．半胖氨酸 2．下列哪些是碱性氨基酸： A．组氨酸B．蛋氨酸C．精氨酸D．赖氨酸 3．芳香族氨基酸是： A．苯丙氨酸 B．酪氨酸 C．色氨酸 D．脯氨酸 4．关于α-螺旋正确的是： A．螺旋中每3．6个氨基酸残基为一周B．为右手螺旋结构 C．两螺旋之间借二硫键维持其稳定 D．氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5．蛋白质的二级结构包括： A．α-螺旋 B．β-片层C．β-转角 D．无规卷曲 6．下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的： A．是一种伸展的肽链结构 B．肽键平面折叠成锯齿状
生物化学实验思考题 Document number：BGCG-0857-BTDO-0089-2022
生物化学实验思考题 1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在？ 间苯二酚反应，在酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。 2.α—萘酚的反应原理是什么？ 糖在浓的无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及其糠醛的衍生物，后者能与α—萘酚生成紫红色物质。 3.菲林试剂和本尼迪凯特氏法检验糖的原理是什么？ O沉淀。它们都是含有Cu2+的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身还原成红色或者黄色的Cu 2 4.何谓纸层析法？ 用滤纸作为惰性支持物的的分层层析法。 5.何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？ 纸层析法形成的纸层析图谱上，原点到层析点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值；影响Rf值的因素有：物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。 6.怎样制备扩展剂？ 扩展剂是4份水饱和的和1份醋酸的混合物。将20ml和5ml冰醋酸放入中，与15ml水混合，充分振荡，静置后分层，放出下层水层，漏斗中的则为扩展剂。 7.层析缸中的平衡剂的作用是什么？ 平衡剂起到使纸上吸附的溶剂达到饱和。使物质在展开剂和纸层析上吸附的溶剂中溶解度不同而进行分离。 8.通过蛋白质及氨基酸的呈色反应实验你掌握了几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法？他们 的原理是什么？
四种：双缩脲反应；茚三酮反应；黄色反应；考马斯亮蓝反应。 （1）双缩脲在碱性环境中能与Cu2+ 生成紫红色化合物，蛋白质中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。（2）除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应产生蓝紫色物质。（3）含有苯环结构的氨基酸，如酪氨酸、和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黄色物质，该化合物在碱性溶液中进一步形成橙色的硝醌酸钠。（4）考马斯亮蓝G250有红色和蓝色两种色调。在酸性溶液中，其以游离态存在呈现棕红色；当它与蛋白质通过疏水作用结合后变为蓝色。 9.什么是酶的最适温度及其应用的意义？ 酶活性最高时的温度称为酶的最适温度。可以利用这一原理指导工农业生产，提高生产效益。 10.什么是酶反应的最适PH?对酶的活性有什么影响？ 酶催化活性最高时反应体系的 pH 称为酶促反应的最适 PH。PH过高、过低都会使酶促反应的速率下降。 11.什么是酶的活化剂？ 指能够与分子上的一些结合，使酶活力提高的物质。 12.什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？本实验结果如何证明酶的专一性？ 指与分子上的一些结合，使酶活力下降，甚至消失，但不使变性的物质。区别：酶的抑制剂不会使酶发生变性，而酶的变性剂会使酶的结构和性质发生改变。酶的专一性证明：实验结果表明通过在淀粉和蔗糖中分别加入有活性的淀粉酶和蔗糖酶后，两者均产生了还原性的糖，与本尼迪凯特试剂反应产生了砖红色沉淀，而其他的条件下均没有还原性糖的的产生，进而说明了酶的专一性。（答题时可以详尽的描述） 13.何谓碘值？有何意义？
生物化学实验理论考试题答案 1.醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端，为什么？ 答；电泳时点样端应靠近负极，因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么？ 答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？ 答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.何谓Rf值？影响Rf值的因素？ 答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关，对同一种物质来讲Rf是一个常量。 5.什么是盐析？盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性，因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析 6.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 7.影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系？ 答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶
《生物化学》思考题 蛋白质 一、名词： 氨基酸及蛋白质等电点；蛋白质一级、二级、三级及四级结构；电泳；蛋白质分子病；别构效应；蛋白质变性作用；肽与肽键；N-端与-端；AA殘基； 二、简答题 1、中性、酸性及碱性氨基酸有哪些？ 答：20种氨基酸中的精氨酸、赖氨酸和组氨酸为3种碱性氨基酸；酸性氨基酸为天冬氨酸和谷氨酸2种；其他15种为中性氨基酸。 2、稳定蛋白质空间结构的作用力有哪些？ 答：氢键、盐键、疏水作用、范德华引力等是稳定空间结构的作用力；一级结构中的化学键有肽键和二硫键。 3、蛋白质在非等电点时不易形成凝集沉淀的的原理； 答：一是水化层，蛋白质表面带有亲水基团，形成水化层，使蛋白质颗粒相互隔开，不易碰撞成大颗粒；二是蛋白质在非等电时带有同种电荷，使蛋白质之间相互排斥，保持一定距离，不致相互凝集沉淀 4、指出下面pH条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，还是保持原点？（1）胃蛋白酶（pI 1.0），在pH 5.0；（2）血清清蛋白（pI 4.9），在pH 6.0；（3）α-脂蛋白（pI 5.8），在pH 5.0和pH 9.0； 答：（1）胃蛋白酶pI 1.0＜环境pH 5.0，带负电荷，向正极移动； （2）血清清蛋白pI 4.9＜环境pH 6.0，带负电荷，向正极移动； （3）α-脂蛋白pI 5.8＞环境pH 5.0，带正电荷，向负极移动； α-脂蛋白pI 5.8＜环境pH 9.0，带负电荷，向正极移动。 三、何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区别？ 答：蛋白质变性的概念：天然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的生物活性，并伴随着物理化学性质的改变，这种作用称为蛋白质的变性。 变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态，一级结构不破坏。 蛋白质变性后的表现：①?生物学活性消失；②?理化性质改变：溶解度下降，黏度增加，紫外吸收增加，侧链反应增强，对酶的作用敏感，易被水解。 蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。 蛋白质的沉淀可以分为两类： （1）可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原来的溶剂中，并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白质。 （2）不可逆沉淀：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质变性而沉淀，不再能溶于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀，与重金属或某些酸类的反应都属于此类。
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、下列实验仪器中，常用来取用块状固体药品的仪器是（）。 A. 药匙 B. 试管夹 C. 镊子 D. 坩埚钳 2、托盘天平调零后，在左盘衬纸上置氧化铜粉末，右盘衬纸上置1个5g砝码，游码标尺示数如下，此时天平平衡。则被称量的氧化铜质量为（）。 A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000 g分析纯的NaOH固体，溶解后稀释到100.0 mL，所得NaOH溶液的浓度为（）。 A. 小于0.1000 mol/L B. 等于0.1000 mol/L C. 大于0.1000 mol/L D. 三种情况都有可能 4、已知邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）的摩尔质量为204.2 g/mol，用作为基准物质标定0.1 mol/L NaOH溶液时，如果要消耗NaOH溶液为25 mL左右，每份应称取邻苯二甲酸氢钾（）g左右。 A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为≥99.0%，下列测定结果哪个不符合标准要求？（）。 A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg，应选取（）的天平。 A. 千分之一 B. 万分之一 C. 十万分之一 D. 百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液，常用的基准物质是（）。 A. Na2CO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是（）。 A. EDTA B. K2Cr2O7 C. 草酸 D. 邻苯二甲酸氢钾 9、下列物质可以作为基准物质的是（）。 A. KMnO4 B. Na2B4O7·7H2O C. NaOH D. Na2S2O3 10、下列物质中，可以用直接法配制标准溶液的是（）。 A. 固体NaOH B. 浓HCl C. 固体K2Cr2O7 D. 固体Na2S2O3
实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么？ 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时，与值呈良好的线性关系？ 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中，为什么要加无水乙醇？ 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂，会产生什么现象？（至少写2点） 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时，正确的加法是什么？将产生什么现象？请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇，下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中，无水乙醇为什么要分两次加入？ 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么？ 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时，能用稀硫酸吗？为什么？ 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质，稀硫酸中含有水，会降低P-S-Fe试剂的浓度，从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。
实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖，用什么方法进行糖含量的测定？ 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应，是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色，谁的A值更大？为什么？ 产物的更大，因为产物生成棕红色，颜色越深，吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中，为什么要离心两次？ 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗？为什么？ 是的，因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量？ 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是？ 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中，碘液的作用是什么？ 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。
1 绪论 1．生物化学研究的对象和内容是什么？ 解答：生物化学主要研究: （1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能； （2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化； （3）生物遗传信息的储存、传递和表达； （4）生物体新陈代谢的调节与控制。 2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。 3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。 解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、 磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（—NH2）、羟基（—OH ）、羰基（C O ）、羧基（—COOH ）、巯基（—SH ）、磷酸基（—PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。 生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端→C 端）,蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖（或脱氧核糖）”重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。 2 蛋白质化学 1．用于测定蛋白质多肽链N 端、C 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？ 解答：（1） N-末端测定法：常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman 降解法、丹磺酰氯法。 ①2,4―二硝基氟苯(DNFB 或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4―二硝基氟苯（2,4―DNFB ）反应（Sanger 反应），生成DNP ―多肽或DNP ―蛋白质。由于DNFB 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP ―多肽经酸水解后，只有N ―末端氨基酸为黄色DNP ―氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。 ② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS ―Cl ）反应生成DNS ―多肽或DNS ―蛋白质。由于DNS 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNS ―多肽经酸水解后，只有N ―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS ―氨基酸，其余的都是游离氨基酸。 ③ 苯异硫氰酸脂（PITC 或Edman 降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯（PITC ）反应（Edman 反应），生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时，N ―末端的PTC ―氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，除去N ―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。 ④ 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N 端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的N 端残基序列。 （2）C ―末端测定法：常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。 肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除C 端氨基酸以游离形式存 在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。
生物化学实验习题及参 考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（）
生物化学（第三版）课后习题详细解答第三章氨基酸 提要α-氨基酸是蛋白质的构件分子，当用酸、碱或蛋白酶水解蛋白质时可获得它们。蛋白质中的氨基酸都是L型的。但碱水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。 参与蛋白质组成的基本氨基酸只有20种。此外还有若干种氨基酸在某些蛋白质中存在，但它们都是在蛋白质生物合成后由相应是基本氨基酸（残基）经化学修饰而成。除参与蛋白质组成的氨基酸外，还有很多种其他氨基酸存在与各种组织和细胞中，有的是β-、γ-或δ-氨基酸，有些是D型氨基酸。 氨基酸是两性电解质。当pH接近1时，氨基酸的可解离基团全部质子化，当pH在13左右时，在这中间的某一pH（因不同氨基酸而异），氨基酸以等电的兼性离子（HNCHRCOO）+-则全部去质子化。 pH称为该氨基酸的等电点，用3状态存在。某一氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质 pI表示。 所有的α-氨基酸都能与茚三酮发生颜色反应。α-NH与2,4-二硝基氟苯（DNFB）作用产生相应 DNP-氨基酸（Sanger反应）；α-NH与苯乙硫氰酸酯（PITC）作用形成相应氨基酸的苯胺基2的 硫甲2酰衍生物（ Edman反应）。胱氨酸中的二硫键可用氧化剂（如过甲酸）或还原剂（如巯基乙醇）断裂。半胱氨酸的SH基在空气中氧化则成二硫键。这几个反应在氨基酸荷蛋白质化学中 占有重要地位。 除甘氨酸外α-氨基酸的α-碳是一个手性碳原子，因此α-氨基酸具有光学活性。比旋是α-氨基酸的物理常数之一，它是鉴别各种氨基酸的一种根据。 参与蛋白质组成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外区有光吸收，这是紫外吸收法定量蛋白质的依据。核磁共振（NMR）波谱技术在氨基酸和蛋白质的化学表征方面起重要作用。 氨基酸分析分离方法主要是基于氨基酸的酸碱性质和极性大小。常用方法有离子交换柱层析、高效液相层析（HPLC）等。 习题 1.写出下列氨基酸的单字母和三字母的缩写符号：精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。[见表3-1] 表3-1 氨基酸的简写符号 三字单字母单字母三字母符母符名称名称符号符号号号L Leu Ala A (leucine) (alanine) 亮氨酸丙氨酸K Arg Lys R (lysine) 精氨酸(arginine) 赖氨酸M N Asn Met )(methionine) 蛋氨酸(asparagines) 甲硫氨酸(天冬酰氨F D Asp Phe (phenylalanine) 苯丙氨酸(aspartic acid) 天冬氨酸 B Asx Asp Asn或和/P C Pro Cys (praline) 脯氨酸半胱氨酸(cysteine) S Q Gln Ser (serine) 丝氨酸(glutamine) 谷氨酰氨T E Glu Thr (threonine) 谷氨酸(glutamic acid) 苏氨酸Z Gls Glu /和Gln或W G Gly Trp (tryptophan) (glycine)
生化-结构杂锦-SOLO 键 一级肽键，这个一般不会混地，二级氢键，H2，记得了吧，三叔众判亲离，这个不是偶创意，嘿嘿，对应疏水作用，范德华力，氢键，离子键，四级氢键，离子键，男人四十妻离子散，好惨，对不对，呵 10个aa组成肽链，10-39是多肽，51个以上是蛋白质 一个男人10岁就娶太太了，39岁就有很多太太，51得了老年痴呆，成了蛋白质，呵呵，貌似这两个口诀都和男人，太太有关，纯属巧合哈 二级有模序，motif，m是否两个n，记下了吧，三级是结构域，structure，三san也有s，四级是亚基，亚洲四小龙，哈哈，歪门邪道记知识点 tRNA分子量最小，third还不是老小，含稀有碱基最多，家里老小最招疼，爸妈把稀有的宝贝都给了它，rRNA含量最多，敢不多吗，造蛋白质的，含量最少的是mRNA，minimum，都有m，而且其5端有m7GpppN，都是有m地，tRNA三叶草，three，都是有t地 TPP VitB1硫一个丙给阿尔发，丙酮酸脱氢酶，而丙拼音bing，有B了吧，还是阿尔发酮戊二酸的辅酶，FAD FMN VitB2一个baby有两个Father，一个亲爹，一个干爹，幸福吧，NAD+ NADH VitPP，两个N两个P，捆绑记忆，泛酸，生物素，贩A粉赚钱，A粉是一种新型毒品，这个钱可赚不得哦，赚钱谐音转酰，生物素，羧化酶，都有s，甲钴胺素，VitB12，一个人变成两个人不就是家，家通甲 生化--一碳与八个--ruru114 一碳单位：有胆（sam）敢（甘）死（丝）就去阻（组）塞（色）一贪（碳）官！ 8个必需氨基酸：晾（亮）一晾（异亮）本（苯丙）色（色），原来（赖）是蟹（缬）蛋（甲硫）酥（苏）。 生化－碱性氨基酸－小猪
高中生物联赛辅导--历年试题选讲--生物化学 2010.11 注：1、为了方便大家查阅，仍然保留原试卷题号。2、每年试题各部分所占权重会有所变化，这里只是选讲典型试题。3、不要就题论题，翻书将相关知识点理解记忆到位。 2005年 9．关于生物大分子，以下哪一项叙述是不正确的？ A．不同生物体的有机大分子类型大体相同 B．组成细菌中蛋白质的氨基酸种类与高等生物的不同 C．碳原子的不同排列方式和长短是生物大分子多样性的基础 D．生物大分子均是由单体小分子脱水缩合而成 解析：B。所有生物体中组成蛋白质的氨基酸种类相同，共20种。还有100多种不参与蛋白质组成的氨基酸，在各种生物体内的种类有所差别。 11．以下哪种物质不属于糖酵解过程中的产物： A．磷酸烯醇式丙酮酸B．3--磷酸甘油酸C．2--磷酸甘油 醛D．果糖--6--磷酸 解析：C。糖酵解中出现的产物依次有：6-磷酸-葡萄糖、6-磷酸-果糖、1,6-二磷酸-果糖、3-磷酸甘油醛、二羟磷酸丙酮、1,3-二磷酸-甘油酸、3-磷酸-甘油酸、2-磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸、丙酮酸。 A．丙氨酸B．组氨酸C．甘氨酸D．谷氨酸 解析：C。只有甘氨酸的R集团为-H，a-碳原子上还连着另外一个H，所以甘氨酸不具有手性构象。 2006年 11．以下哪种物质具有高能键： A．磷酸烯醇式丙酮酸B．3一磷酸甘油酸c．2一磷酸甘油 醛D．果糖-6-磷酸 解析：A。简单的记忆方法就是能够生成ATP的物质具有高能键。在糖酵解中，两种物质能够生成ATP：1,3-二磷酸-甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸。 12．葡萄糖酵解的产物是 A．丙氨酸B．丙酮醛C．丙酮酸D．乳酸E．磷酸丙酮酸 解析：C。 13．氧化磷酸化过程中电子传递的主要作用是： A．形成质子梯度B．将电子传给氧分子C．转运磷酸根D．排出二氧化碳
生物化学实验 一、名词解释： 分配层析法电泳同工酶酶活性分光光度法层析技术比活力 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有，，和。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以来表示，当CAT与H2O2反应结束，再用测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备_____________胶，其自由基的引发剂是，催化剂是______________；光聚合法适于制备大孔径的_________________胶，催化剂是______________。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________，_______________和________________。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管__________且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈，Km愈大，表示E对S 的亲合力愈。 7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须_________（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：和。11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________和________________。 三、问答题： 1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。 2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。 3、试分析影响电泳的主要因素有哪些？ 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。
机体是如何维持血糖平衡的（说明血糖的来源、去路及调节过程）？ 血液中的葡萄糖称为血糖，机体血糖平衡是糖、脂肪、氨基酸代谢协调的结果，也是肝、肌、脂肪组织等器官代谢协调的结果（由于血糖的来源与去路保持动态平衡，血糖是组织、中枢神经、脑能量来源的主要保证）。 A.血糖来源（3分） 糖类消化吸收：食物中的糖类经消化吸收入血，这是血糖最主要的来源；肝糖原分解：短期饥饿后，肝中储存的糖原分解成葡萄糖进入血液；糖异生作用：在较长时间饥饿后，氨基酸、甘油等非糖物质在肝内异生合成葡萄糖；其他单糖转化成葡萄糖。 B.血糖去路（4分） 氧化供能：葡萄糖在组织细胞中通过有氧氧化和无氧酵解产生ATP，为细胞供给能量，此为血糖的主要去路。合成糖原：进食后，肝和肌肉等组织将葡萄糖合成糖原以储存。转化成非糖物质：可转化为甘油、脂肪酸以合成脂肪；可转化为氨基酸、合成蛋白质。转变成其他糖或糖衍生物（戊糖磷酸途径），如核糖、脱氧核糖、氨基多糖等。血糖浓度高于肾阈时可随尿排出一部分。 C.血糖的调节（2分） 胰岛素是体内唯一降低血糖的激素，但胰岛素分泌受机体血糖的控制（机体血糖升高胰岛素分泌减少）。胰岛素分泌增加，糖原合酶活性提高、糖原磷酸化酶活性降低，糖原分解降低、糖原合成提高，血糖降低。否则相反（胰岛素分泌减少，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高）。胰高血糖素、肾上腺素作用是升高机体血糖。胰高血糖素、肾上腺素分泌增加，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高。否则相反。 老师，丙酮酸被还原为乳酸后，乳酸的去路是什么 这个问题很重要。 肌组织产生的乳酸的去向包括：大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肝脏进行糖异生转变为葡萄糖。大量乳酸进入血液，在心肌中经LDH1催化生成丙酮酸氧化供能；部分乳酸在肌肉内脱氢生成丙酮酸而进入到有氧氧化供能。大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肾脏异生为糖或经尿排出体外。 下面问题你能回答出来不 1说明脂肪氧化供能的过程 （1）脂肪动员：脂肪组织中的甘油三酯在HSL的作用下水解释放脂酸和甘油。 （2）脂酸氧化：经脂肪酸活化、脂酰CoA进入线粒体、β-氧化、乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化成H2O 和CO2并释放能量。 （3）甘油氧化：经磷酸化、脱氢、异构转变成3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛循糖氧化分解途径彻底分解生成H2O 和CO2并释放能量。 1．丙氨酸异生形成葡萄糖的过程 答：（1）丙氨酸经GPT催化生成丙酮酸。（2）丙酮酸在线粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸，后者经苹果酸脱氢酶催化生成苹果酸出线粒体，在胞液中经苹果酸脱氢酶催化生成草酰乙酸，后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。（3）磷酸烯醇式丙酮酸循糖酵解途径至1，6-双磷酸果糖。1，6-双磷酸果糖经果糖双磷酸酶催化生成6-磷酸果糖，再异构成6-磷酸葡萄糖。6-磷酸葡萄糖在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。
生化实验讲义思考题参考答案 实验一淀粉的提取和水解 1、实验材料的选择依据是什么？ 答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。 2、材料的破碎方法有哪些？ 答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法； (2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等； (3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。 实验二总糖与还原糖的测定 1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？ 答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。 实验五粗脂肪的定量测定─索氏提取法 （1）本实验制备得到的是粗脂肪，若要制备单一组分的脂类成分，可用什么方法进一步处理？ 答：硅胶柱层析，高效液相色谱，气相色谱等。 （2）本实验样品制备时烘干为什么要避免过热? 答：防止脂质被氧化。 实验六蛋白质等电点测定 1、在等电点时蛋白质溶解度为什么最低？ 请结合你的实验结果和蛋白质的胶体性质加以说明。
蛋白质是两性电解质，在等电点时分子所带净电荷为零，分子间因碰撞而聚沉倾向增加，溶液的粘度、渗透压减到最低，溶解度最低。结果中pH约为4.9时，溶液最浑浊，达到等电点。 答： 2、在分离蛋白质的时候，等电点有何实际应用价值？ 答: 在等电点时，蛋白质分子与分子间因碰撞而引起聚沉的倾向增加，所以处于等电点的蛋白质最容易沉淀。在分离蛋白质的时候，可以根据待分离的蛋白质的等电点，有目的地调节溶液的pH使该蛋白质沉淀下来，从而与其他处于溶液状态的杂质蛋白质分离。 实验七氨基酸的分离鉴定－纸层析法 1、如何用纸层析对氨基酸进行定性和定量的测定？ 答: 将标准的已知氨基酸与待测的未知氨基酸在同一张层析纸上进行纸层析，显色后根据斑点的Rf值，就可以对氨基酸进行初步的定性，因为同一个物质在同一条件下有相同的Rf 值；将点样的未知氨基酸溶液和标准氨基酸溶液的体积恒定，根据显色后的氨基酸斑点的面积与点样的氨基酸质量成正比的原理，通过计算斑点的面积可以对氨基酸溶液进行定量测定。 3、纸层析、柱层析、薄层层析、高效液相层析各有什么特点？ 答:
生物化学复习思考题（2009年） 第二章蛋白质 1．什么是蛋白质？蛋白质有哪些生理功能？ 2．蛋白质有哪些分类方法？ 3．蛋白质中含氮量一般有多少？1克蛋白氮相当于多少蛋白质？ 4．氨基酸有哪些构型？组成蛋白质的氨基酸是什么构型的？ 5．组成蛋白质的氨基酸有哪些？熟记各种氨基酸的代号。 6．氨基酸有哪些分类方法？ 7．氨基酸在什么情况下带负电和正电？什么叫做氨基酸的等电点？ 8．氨基酸有哪三个重要的反应？ 9．哪些氨基酸可以吸收紫外光? 10．什么叫做构象？什么叫做构型？ 11．解释名词：肽、肽键、二肽、寡肽、多肽、氨基酸残基、氨基末端、羧基末端 12．什么叫做蛋白质的一级结构？ 13．什么叫做肽单位?肽单位有哪些性质? 14．什么叫做α-碳原子的二面角? 15．什么叫做蛋白质的二级结构?二级结构有哪些类型? 16．什么叫α-螺旋和β-折叠?平行和反平行β-折叠有何区别? 17．试述α-角蛋白的结构. 18．什么叫做超二级结构?超二级结构有哪些类型? 19．解释名词:结构域、三级结构、四级结构、亚基、亚单位、均一的亚基、不均一的亚基 20．维持蛋白质高级结构的力有哪些？ 21．什么是二硫键？二硫键是怎样形成的？ 22．蛋白质是生物大分子，为什么在水溶液中还很稳定？ 23．蛋白质在什么情况下带正电和负电？什么叫做蛋白质的等电点？ 24．解释名词：变性、复性、沉淀、可逆沉淀、不可逆沉淀、盐析 25.蛋白质变性的本质是什么？ 第三章酶化学 1．什么叫酶？与一般的催化剂比较，酶有哪些相同之处和不同点？ 2．酶的反应专一性有哪些种类？什么叫绝对专一性、相对专一性、基团专一性、键专一性、立体异构专一性？ 3．酶的惯用法命名有哪些方式？ 4．国际酶学委员会将酶分为哪几类？水解酶类与裂解酶类有何区别？ 5．什么叫做简单酶和结合酶？ 6．解释名词：酶蛋白、辅因子、辅酶、辅基、全酶、活性中心、结合部位、催化部位。 7．酶分子活性中心以外的必需基团有什么功能？ 8．解释名词：酶原、致活素、靠近、定向、底物形变、共价催化、亲核催化、亲核剂 9．什么叫酶促反应初速度？ 10. 影响酶促反应的因素有哪些？ 11.底物浓度怎样影响酶促反应？米氏方程表示了什么关系？ 12.米氏常数Km有什么意义？ 13.某一酶促反应的速度从最大速度的10％提高到90％时，底物浓度应是原来的多少倍？
生物化学解答题 (一档在手万考不愁) 整理:机密下载 有淀粉酶制剂1g，用水溶解成1000ml酶液，测定其蛋白质含量和粉酶活力。结果表明，该酶液的蛋白质浓度为0.1mg/ml；其1ml的酶液每5min分解0.25g淀粉，计算该酶制剂所含的淀粉酶总活力单位数和比酶活（淀粉酶活力单位规定为：在最适条件下，每小时分解1克淀粉的酶量为一个活力单位）。答案要点：①1ml的酶液的活力单位是60/5×0.25/1=3（2分）酶总活力单位数是3×1000=3000U（1分）②总蛋白是0.1×1000=100 mg（1分）,比活力是3000/100=30（1分）。 请列举细胞内乙酰CoA的代谢去向。（5分）答案要点：三羧酸循环；乙醛酸循环；从头合成脂肪酸；酮体代谢；合成胆固醇等。（各1分） 酿酒业是我国传统轻工业的重要产业之一，其生化机制是在酿酒酵母等微生物的作用下从葡萄糖代谢为乙醇的过程。请写出在细胞内葡萄糖转化为乙醇的代谢途径。答案要点：在某些酵母和某些微生物中，丙酮酸可以由丙酮酸脱羧酶催化脱羧变成乙醛，该酶需要硫胺素焦磷酸为辅酶。乙醛继而在乙醇脱氢酶的催化下被NADH 还原形成乙醇。葡萄糖+2Pi+2ADP+2H+ 生成2乙醇+2CO2+2ATP+2H2O（6分）脱氢反应的酶：3-磷酸甘油醛脱氢酶（NAD＋），醇脱氢酶（NADH+H+）（2分）底物水平磷酸化反应的酶：磷酸甘油酸激酶，丙酮酸激酶（Mg2+或K+）（2分） 试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。答案要点：①mRNA是遗传信息的传递者，是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。（3分）②.tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。(4分) ③. rRNA与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所（3分）。 物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。（3分）②.tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。(4分) ③. rRNA与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所（3分）。 为什么说三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同通路？哪些化合物可以被认为是联系糖、脂、蛋白质和核酸代谢的重要环节？为什么？答案要点：①三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同氧化分解途径（2分）；三羧酸循环为糖、脂、蛋白质三大物质合成代谢提供原料（1分），要举例（2分）。②列举出糖、脂、蛋白质、核酸代谢相互转化的一些化合物（3分），糖、脂、蛋白质、核酸代谢相互转化相互转化途径（2分） 写出天冬氨酸在体内彻底氧化成CO2和H20的反应历程，注明其中催化脱氢反应的酶及其辅助因子，并计算1mol天冬氨酸彻底氧化分解所净生成的ATP的摩尔数。答案及要点：天冬氨酸+α酮戊二酸--→（谷草转氨酶）草酰乙酸+谷氨酸谷氨酸+NAD+H2O→(L谷氨酸脱氢酶）α酮戊二酸+NH3+NADH 草酰乙酸+GTP→(Mg、PEP羧激酶）PEP+GDP+CO2 PEP+ADP→(丙酮酸激酶）丙酮酸+ATP 丙酮酸+NAD+COASH→(丙酮酸脱氢酶系）乙酰COA+NADH+H+CO2 乙酰COA+3NAD+FAD+GDP+Pi+2H2O→(TCA循环）2CO2+COASH+3NADH+3H+FADH2+GTP ①耗1ATP 生2ATP 5NADH+1FADH2+1GTP=1ATP净生成1+2+2.5×5+1.5×1=15ATP②耗1ATP生成2ATP+3NADH+1FADH+1NADPH净生成1+2+2.5×4+1?5×1=12.5ATP 脱氢反应的酶：L-谷氨酸脱氢酶（NAD+），丙酮酸脱氢酶系（CoA，TPP，硫辛酸，FAD，Mg2+），异柠檬酸脱氢酶（NAD+，Mg2+），a-酮戊二酸脱氢酶系（CoA，TPP，硫辛酸，NAD+，Mg2+），琥珀酸脱氢酶（FAD，Fe3+），苹果酸脱氢酶（NAD+）。（3分）共消耗1ATP，生成2ATP、5NADH和1FADH，则净生成：-1+2+3×5+2×1＝18ATP DNA双螺旋结构有什么基本特点？这些特点能解释哪些最重要的生命现象？答案要点：a. 两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成，螺旋表面有一条大沟和一条小沟。（2分）b. 磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧，作为可变成分的碱基位于内侧，链间碱基按A-T配对，之间形成2个氢键，G-C配对，之间形成3个氢键（碱基配对原则，Chargaff定律）。（2分）c. 螺旋直径2nm，相邻碱
生物化学 精品文档第一章糖的化学 1.糖的概念及生物学作用 概念：由碳、氢、氧三种元素组成，是多羟基醛或多羟基酮及其聚合物和衍生物的总称。 生物学作用： 1.是人和动物的主要能源物质。淀粉、糖原、葡萄糖等 2.具有结构功能。纤维素、壳聚糖、粘多糖等 3.具有多方面的生物活性及功能。戊糖、FDP、香菇多糖、猪苓多糖、肝素等 2.糖的分类（单糖，寡糖，多糖）**掌握几种二糖中单糖成分，多糖种类 糖的分类（根据含糖单位的数目） ?单糖（monosaccharide)：不能被水解成更小分子的糖。 ?寡糖（oligosaccharide): 由单糖缩合而成的短链结构（含2~6个单糖）。 ?多糖（polysaccharide）：由许多单糖分子缩合而成的长链结构，分子量很大，均无甜味 也无还原性。 二糖：两分子单糖以糖苷键连接而成。 蔗糖(sucrose) G+F 麦芽糖(maltose)G＋G 乳糖(lactose)G+Gal 多糖：复合糖。 3. 多糖分类（来源分类） 1.植物多糖：水溶性多糖：（如当归、枸杞、大黄、艾叶等）多糖。 水不溶性多糖：淀粉、纤维素等 2.动物多糖：多为水溶性粘多糖。肝素、硫酸软骨素、透明质酸、猪胎盘脂多糖等 3.微生物多糖：香菇、茯苓、银耳等的多糖 4.海洋生物多糖：甲壳素、螺旋藻多糖等。 6. 多糖提取方法分几类来进行？ 第一类难溶于水，可溶于稀碱液。主要是胶类，如木聚糖、半乳聚糖 第二类易溶于温水，难溶于冷水的多糖。 第三类黏多糖的提取（组织中黏多糖与蛋白质共价结合） (1)碱液抽提法：(据糖肽键对碱不稳定) 软骨中提取软骨素即用此法。 (2)蛋白水解酶消化法：组织中释出粘多糖的方法(蛋白水解酶：木瓜蛋白酶及链霉蛋 白酶) 。 **7. 多糖基本纯化方法有几种？原理？ 1.分级沉淀法：乙醇分级沉淀分离各种硫酸软骨素。 2.季铵盐络合法：表面活化剂与粘多糖聚阴离子形成络合物，水不溶(低离子强度）。 3.离子交换层析：利用pH及盐浓度梯度分离各种多糖。 4.制备性区带电泳：利用分子大小、形状、电荷区分。